CN115372486A - 糖化血红蛋白检测试剂盒及其应用 - Google Patents

糖化血红蛋白检测试剂盒及其应用 Download PDF

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Abstract

本申请涉及生物技术领域，具体公开了一种糖化血红蛋白检测试剂盒及其应用，该糖化血红蛋白检测试剂盒，包括：第一洗脱液，包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液；第二洗脱液，包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液、氯化钠、氯化钾；第三洗脱液，包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液、氯化钠、氯化钾；溶血剂，包括：磷酸盐缓冲液、氯化钠、表面活性剂。通过上述方式，本申请对糖化血红蛋白的检测结果更加精细、快速、准确。

Description

糖化血红蛋白检测试剂盒及其应用
技术领域
本申请涉及生物技术领域，尤其涉及一种糖化血红蛋白检测试剂盒及其应用。
背景技术
美国国家糖化血红蛋白标准化计划(NGSP)使用离子交换高效液相色谱法(HPLC)为参考方法，通过使用不同离子浓度的液相洗脱液，将不同的糖化血红蛋白组分进行分离。而现有技术中，洗脱液的缓冲盐组成过于单一，溶血剂溶血效率不够高，出峰时间较长，且针对HbA1组分亚型分离效果不佳，难以清晰区分HbA1a、HbA1b、HbF以及HbLA1c，峰型不显著，HbA1c的计算结果受到影响。
发明内容
本申请旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。
在本申请的第一个方面，本申请提出了一种糖化血红蛋白检测试剂盒，包括：第一洗脱液，包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液；第二洗脱液，包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、氯化钠、氯化钾；第三洗脱液，包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、氯化钠、氯化钾；溶血剂，包括：磷酸盐缓冲液、氯化钠、表面活性剂。
在本申请的第二个方面，本申请提出了一种前述的糖化血红蛋白检测试剂盒在HPLC法检测糖化血红蛋白中的应用。
在本申请的第三个方面，本申请提出了一种前述的糖化血红蛋白检测试剂盒在HPLC法检测HbA1a、HbA1b、HbF、HbLA1c中的应用。
本申请实施例提供的技术方案可以带来如下有益效果：
相较于现有技术，本申请试剂盒包括：第一洗脱液、第二洗脱液、第三洗脱液以及溶血剂，通过使用分离效果更佳的洗脱液以及溶血效果更优的溶血剂，与适配的糖化血红蛋白分析仪配套使用，对糖化血红蛋白的检测结果更加精细、快速、准确，可以实现对进口糖化血红蛋白分析系统的替代，降低医院检测及维修成本，同时还能减少病人的治疗费用，降低负担。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。其中：
图1示出了使用本申请实施例1的糖化血红蛋白校准品校准的糖化血红蛋白检测系统(考核系统)，与Bio-Rad D-100糖化血红蛋白分析系统(参比系统)测试不同浓度的糖化血红蛋白样本时相关性测试结果；
图2示出了使用本申请实施例2的糖化血红蛋白校准品校准的糖化血红蛋白检测系统(考核系统)，与Bio-Rad D-100糖化血红蛋白分析系统(参比系统)测试不同浓度的糖化血红蛋白样本时相关性测试结果；
图3示出了使用本申请实施例3的糖化血红蛋白校准品校准的糖化血红蛋白检测系统(考核系统)，与Bio-Rad D-100糖化血红蛋白分析系统(参比系统)测试不同浓度的糖化血红蛋白样本时相关性测试结果。
具体实施方式
下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性的劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
本申请提供一种糖化血红蛋白检测试剂盒，该试剂盒包含独立包装的第一洗脱液、第二洗脱液、第三洗脱液以及溶血剂。
第一洗脱液用于洗脱糖化血红蛋白亚组份HbA1a、HbA1b、HbF、HbLA1c，以实现上述各亚组分的分离，并且对阳离子交换柱起到清洗及平衡的作用。其中，HbA1c是糖化血红蛋白的主要组成成分，占总糖化血红蛋白的60％以上。HbA1c主要是由人体血液中葡萄糖与血红蛋白β链N末端缬氨酸残基以共价键结合的稳定的化合物，它的形成过程是缓慢且不可逆的非酶促反应，其含量取决于血糖浓度及血糖与血红蛋白的接触时间，可以反应患者测定前120d体内血糖的平均水平，而且HbA1c的检测不受抽血时间，患者状态(空腹及是否使用胰岛素)的影响。HbA1c是目前被公认的糖尿病患者血糖控制检测的重要指标，它对糖尿病的筛查及诊断，治疗效果评价等方面均具有非常重要的意义。
第二洗脱液洗用于洗脱糖化血红蛋白亚组份HbA1c，糖化血红蛋白亚组份HbA1c是反应患者平均血糖水平的主要指标。
第三洗脱液用于洗脱非糖化血红蛋白HbA0，非糖化血红蛋白HbA0占比血红蛋白A(HbA)的90％以上。
溶血剂用于快速溶解红细胞的细胞膜，释放糖化血红蛋白，并具有一定的离散功能，能够稳定糖化血红蛋白。
其中，第一洗脱液包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。
第二洗脱液包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、氯化钠、氯化钾。
第三洗脱液包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、氯化钠、氯化钾。
溶血剂包括：磷酸盐缓冲液、氯化钠、表面活性剂。
具体而言，磷酸盐缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液用于调节溶液的pH值。氯化钠、氯化钾用于调节溶液的离子强度，避免引起细胞渗透压的改变。
表面活性剂可以为非离子表面活性剂，在其它实施例中，表活性剂也可以为其它类型的表面活性剂。其中，非离子表面活性剂既可以参与红细胞膜的溶解，又可以加速血红蛋白复合物的形成，增强血红蛋白复合物的稳定性。非离子表面活性剂可以为聚氧乙烯醚类，具体为聚乙二醇辛基苯基醚Triton X-100。
相较于现有技术，本申请试剂盒包括：第一洗脱液、第二洗脱液、第三洗脱液以及溶血剂，通过使用分离效果更佳的洗脱液以及溶血效果更优的溶血剂，与适配的糖化血红蛋白分析仪配套使用，对糖化血红蛋白的检测结果更加精细、快速、准确，可以实现对进口糖化血红蛋白分析系统的替代，降低医院检测及维修成本，同时还能减少病人的治疗费用，降低负担。
在一实施例中，糖化液、细胞储存液、溶血剂、冻干保护剂中的至少一种还包括：防腐剂。
可选地，防腐剂为苯甲酸钠、叠氮钠、山梨酸钾、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、Proclin-300中的至少一种。
在一实施例中，表面活性剂至少包括：曲拉通X-100、十二烷基聚乙二醇醚(又名：卞泽35，Brj-35)。
在一实施例中，第一洗脱液包括：磷酸氢二钠30～50mmol/L、磷酸二氢钠30～50mmol/L、柠檬酸钠10～30mmol/L、柠檬酸10～30mmol/L、Proclin-300 0.03～0.05％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，第一洗脱液的pH值为5.0～5.4。
可选地，第一洗脱液包括：磷酸氢二钠30mmol/L、磷酸二氢钠30mmol/L、柠檬酸钠10mmol/L、柠檬酸10mmol/L、Proclin-300 0.03％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，第一洗脱液的pH值为5.0。
可选地，第一洗脱液包括：磷酸氢二钠40mmol/L、磷酸二氢钠40mmol/L、柠檬酸钠20mmol/L、柠檬酸20mmol/L、Proclin-300 0.04％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，第一洗脱液的pH值为5.2。
可选地，第一洗脱液包括：磷酸氢二钠50mmol/L、磷酸二氢钠50mmol/L、柠檬酸钠30mmol/L、柠檬酸30mmol/L、Proclin-300 0.05％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，第一洗脱液的pH值为5.4。
在一实施例中，第二洗脱液包括：磷酸氢二钠60～80mmol/L、磷酸二氢钠60～80mmol/L、柠檬酸钠40～60mmol/L、柠檬酸40～60mmol/L、氯化钠0.1～0.5％(质量百分比浓度)、氯化钾0.01～0.05％(质量百分比浓度)、Proclin-300 0.03～0.05％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，第二洗脱液的pH值为5.5～5.9。
可选地，第二洗脱液包括：磷酸氢二钠60mmol/L、磷酸二氢钠60mmol/L、柠檬酸钠40mmol/L、柠檬酸40mmol/L、氯化钠0.1％(质量百分比浓度)、氯化钾0.01％(质量百分比浓度)、Proclin-300 0.03％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，第二洗脱液的pH值为5.5。
可选地，第二洗脱液包括：磷酸氢二钠70mmol/L、磷酸二氢钠70mmol/L、柠檬酸钠50mmol/L、柠檬酸50mmol/L、氯化钠0.25％(质量百分比浓度)、氯化钾0.025％(质量百分比浓度)、Proclin-300 0.04％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，第二洗脱液的pH值为5.7。
可选地，第二洗脱液包括：磷酸氢二钠80mmol/L、磷酸二氢钠80mmol/L、柠檬酸钠60mmol/L、柠檬酸60mmol/L、氯化钠0.5％(质量百分比浓度)、氯化钾0.05％(质量百分比浓度)、Proclin-300 0.05％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，第二洗脱液的pH值为5.9。
在一实施例中，第三洗脱液包括：磷酸氢二钠90～110mmol/L、磷酸二氢钠90～110mmol/L、柠檬酸钠70～90mmol/L、柠檬酸70～90mmol/L、氯化钠0.5～1％(质量百分比浓度)、氯化钾0.05～0.1％(质量百分比浓度)、Proclin-300 0.03～0.05％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，第三洗脱液的pH值为6.0～6.4。
可选地，第三洗脱液包括：磷酸氢二钠90mmol/L、磷酸二氢钠90mmol/L、柠檬酸钠70mmol/L、柠檬酸70mmol/L、氯化钠0.5％(质量百分比浓度)、氯化钾0.05％(质量百分比浓度)、Proclin-300 0.03％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，第三洗脱液的pH值为6.0。
可选地，第三洗脱液包括：磷酸氢二钠100mmol/L、磷酸二氢钠100mmol/L、柠檬酸钠80mmol/L、柠檬酸80mmol/L、氯化钠0.75％(质量百分比浓度)、氯化钾0.075％(质量百分比浓度)、Proclin-300 0.04％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，第三洗脱液的pH值为6.2。
可选地，第三洗脱液包括：磷酸氢二钠110mmol/L、磷酸二氢钠110mmol/L、柠檬酸钠90mmol/L、柠檬酸90mmol/L、氯化钠1％(质量百分比浓度)、氯化钾0.1％(质量百分比浓度)、Proclin-300 0.05％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，第三洗脱液的pH值为6.4。
在一实施例中，溶血剂包括：磷酸氢二钠30～50mmol/L、磷酸二氢钠30～50mmol/L、氯化钠0.01～0.05％(质量百分比浓度)、Proclin-3000.03～0.05％(质量百分比浓度)、曲拉通X-100 0.05～0.1％(质量百分比浓度)、Brj-35 0.05～0.1％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，溶血剂的pH值为7.2～7.4。
可选地，溶血剂包括：磷酸氢二钠30mmol/L、磷酸二氢钠30mmol/L、氯化钠0.01％(质量百分比浓度)、Proclin-300 0.03％(质量百分比浓度)、曲拉通X-100 0.05％(质量百分比浓度)、Brj-35 0.05％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，溶血剂的pH值为7.2。
可选地，溶血剂包括：磷酸氢二钠40mmol/L、磷酸二氢钠40mmol/L、氯化钠0.25％(质量百分比浓度)、Proclin-300 0.04％(质量百分比浓度)、曲拉通X-100 0.075％(质量百分比浓度)、Brj-35 0.075％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，溶血剂的pH值为7.3。
可选地，溶血剂包括：磷酸氢二钠50mmol/L、磷酸二氢钠50mmol/L、氯化钠0.05％(质量百分比浓度)、Proclin-300 0.05％(质量百分比浓度)、曲拉通X-100 0.1％(质量百分比浓度)、Brj-35 0.1％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，溶血剂的pH值为7.4。
本申请还提出一种上述实施例的糖化血红蛋白检测试剂盒在HPLC法检测糖化血红蛋白中的应用。
本申请还提出一种上述实施例的糖化血红蛋白检测试剂盒在HPLC法检测HbA1a、HbA1b、HbF、HbLA1c中的应用。
HPLC法检测糖化血红蛋白的主要原理：根据糖化血红蛋白各组分和非糖化血红蛋白等电点不同，因此在弱酸性条件下，所带正电荷数量不同，与阳离子交换柱的结合能力有差异，在适当的压力和不同离子浓度及pH洗脱液作用下，可按照结合能力依次被洗脱下来。电荷较少的糖化血红蛋白各组份首先被洗脱下来，其次电荷较多的非糖化血红蛋白被洗脱下来，糖化血红蛋白亚组份的分离还受到色谱柱压力，分辨率，洗脱液浓度等多种因素的影响。被洗脱的蛋白依次通过信号检测器，自动记录在415nm光吸收情况，得到色谱图，再对色谱图进行分析，计算各个色谱峰的峰面积，得到HbA1a、HbA1b、HbF、HbLA1c的浓度。
下面结合具体实施例对本申请进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本申请，但不以任何形式限制本申请。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本申请的保护范围。
实验例1
糖化血红蛋白检测试剂盒1，具体组成如表1所示。
表1糖化血红蛋白检测试剂盒1中第一洗脱液、第二洗脱液、第三洗脱液以及溶血剂的成分及浓度
Figure BDA0003071526730000071
需要说明的是，表1中“/”表示不含此成分。
实施例2
糖化血红蛋白检测试剂盒2，具体组成如表2所示。
表2糖化血红蛋白检测试剂盒2中第一洗脱液、第二洗脱液、第三洗脱液以及溶血剂的成分及浓度
Figure BDA0003071526730000072
Figure BDA0003071526730000081
需要说明的是，表2中“/”表示不含此成分。
实施例3
糖化血红蛋白检测试剂盒3，具体组成如表2所示。
表3糖化血红蛋白检测试剂盒3中第一洗脱液、第二洗脱液、第三洗脱液以及溶血剂的成分及浓度
Figure BDA0003071526730000082
需要说明的是，表3中“/”表示不含此成分。
实施例4
实验例1～3的糖化血红蛋白检测试剂盒的性能参数测试
1.准确度
分别用正常值参考物质(HbA1c：4.0-6.0％)、异常值参考物质(HbA1c：＞8.0％)测试，重复测定3次，计算3次的平均值，按公式(1)(2)计算相对偏差，结果应符合测定结果的相对偏差应在±6.0％区间内。准确度的测试结果如表4所示。
Figure BDA0003071526730000083
Figure BDA0003071526730000091
式中：
Figure BDA0003071526730000092
——测试结果的平均值；xi——每次的实测值；n——测试的次数；i——测试的序号；B——相对偏差；T——参考物质标示值。
表4准确度测试结果
Figure BDA0003071526730000093
由表4结果可知，实验例1～3的糖化血红蛋白检测试剂盒均满足准确度的要求。
2.重复性
在分析仪上检测样本浓度为4.0％-6.5％的样本，连续测定20次，计算其算术平均值
Figure BDA0003071526730000094
和标准差(SD)，按照公式(1)(3)(4)计算变异系数，结果应符合：检测浓度为4.0％-6.5％的样本，检测结果的变异系数CV≤1.5％。重复性的测试结果如表5所示。
Figure BDA0003071526730000095
Figure BDA0003071526730000096
Figure BDA0003071526730000097
式中：
Figure BDA0003071526730000098
——测试结果的平均值；xi——每次的实测值；n——测试的次数；i——测试的序号；SD——标准差；CV——变异系数。
表5重复性的测试结果
Figure BDA0003071526730000099
Figure BDA0003071526730000101
由表5结果可知，实验例1～3的糖化血红蛋白检测试剂盒均满足重复性的要求。
3.线性范围
在HbA1c检测试剂盒的线性范围内，使用6个浓度的检测样本(6个浓度点均匀分布，低浓度样本浓度不高于线性下限的10％，高浓度样本浓度不低于线性上限的10％)，每个浓度的样本各测定3次，计算3次测试结果的平均值。以样本理论值(xi)为自变量，以样本实际测定结果平均值(yi)为因变量做线性回归。并按公式(5)计算线性回归相关系数r，结果应符合在糖化血红蛋白试剂盒检测范围内，检测结果的线性相关系数r≥0.9900％。
Figure BDA0003071526730000102
实验例1的糖化血红蛋白检测试剂盒1的线性范围测试结果如表6所示，实验例2的糖化血红蛋白检测试剂盒2的线性范围测试结果如表7所示，实验例3的糖化血红蛋白检测试剂盒3的线性范围测试结果如表8所示。
表6实验例1的糖化血红蛋白检测试剂盒1的线性范围测试结果
Figure BDA0003071526730000111
表7实验例2的糖化血红蛋白检测试剂盒2的线性范围测试结果
Figure BDA0003071526730000112
Figure BDA0003071526730000121
表8实验例3的糖化血红蛋白检测试剂盒3的线性范围测试结果
Figure BDA0003071526730000122
由表6～8结果可知，实验例1～3的糖化血红蛋白检测试剂盒均满足线性范围的要求。
4.相关性
本申请的HbA1c检测试剂盒与适配的糖化血红蛋白分析仪配套使用，与Bio-RadD-100糖化血红蛋白分析系统测试不同浓度的HbA1c样本时，测试结果使用SPSS分析软件或excel表格进行处理，测试结果应保持一致，即斜率k＝1.00±0.10，相关系数r≥0.975。相关性的测试结果如表9以及附图1～3所示。
表9相关性的测试结果
Figure BDA0003071526730000131
Figure BDA0003071526730000141
由表9结果及附图1～3可知，，实验例1～3的糖化血红蛋白检测试剂盒均满足相关性的要求。
此外，本申请通过使用实施例1～3的糖化血红蛋白检测试剂盒对糖化血红蛋白各亚组分进行分离，均实现了分离时间≤65s，且所得峰图清晰稳定、分辨率高。上述实施例1～3的糖化血红蛋白检测试剂盒在糖化血红蛋白检测试中的结果准确可靠，可以满足临床对于糖化血红蛋白的测定需要。
相较于现有技术，本申请试剂盒包括：第一洗脱液、第二洗脱液、第三洗脱液以及溶血剂，通过使用分离效果更佳的洗脱液以及溶血效果更优的溶血剂，与适配的糖化血红蛋白分析仪配套使用，对糖化血红蛋白的检测结果更加精细、快速、准确，可以实现对进口糖化血红蛋白分析系统的替代，降低医院检测及维修成本，同时还能减少病人的治疗费用，降低负担。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本申请的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本申请的保护范围。因此，本申请专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.一种糖化血红蛋白检测试剂盒，其特征在于，包括：
第一洗脱液，包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液；
第二洗脱液，包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、氯化钠、氯化钾；
第三洗脱液，包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、氯化钠、氯化钾；
溶血剂，包括：磷酸盐缓冲液、氯化钠、表面活性剂。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一洗脱液、所述第二洗脱液、所述第三洗脱液、所述溶血剂中的至少一种还包括：防腐剂。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，
所述防腐剂为苯甲酸钠、叠氮钠、山梨酸钾、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、Proclin-300中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，
所述表面活性剂至少包括：曲拉通X-100、十二烷基聚乙二醇醚。
5.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，
所述第一洗脱液包括：磷酸氢二钠30～50mmol/L、磷酸二氢钠30～50mmol/L、柠檬酸钠10～30mmol/L、柠檬酸10～30mmol/L、Proclin-300 0.03～0.05％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，所述第一洗脱液的pH值为5.0～5.4。
6.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，
所述第二洗脱液包括：磷酸氢二钠60～80mmol/L、磷酸二氢钠60～80mmol/L、柠檬酸钠40～60mmol/L、柠檬酸40～60mmol/L、氯化钠0.1～0.5％(质量百分比浓度)、氯化钾0.01～0.05％(质量百分比浓度)、Proclin-300 0.03～0.05％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，所述第二洗脱液的pH值为5.5～5.9。
7.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，
所述第三洗脱液包括：磷酸氢二钠90～110mmol/L、磷酸二氢钠90～110mmol/L、柠檬酸钠70～90mmol/L、柠檬酸70～90mmol/L、氯化钠0.5～1％(质量百分比浓度)、氯化钾0.05～0.1％(质量百分比浓度)、Proclin-300 0.03～0.05％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，所述第三洗脱液的pH值为6.0～6.4。
8.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，
所述溶血剂包括：磷酸氢二钠30～50mmol/L、磷酸二氢钠30～50mmol/L、氯化钠0.01～0.05％(质量百分比浓度)、Proclin-3000.03～0.05％(质量百分比浓度)、曲拉通X-1000.05～0.1％(质量百分比浓度)、Brj-35 0.05～0.1％(质量百分比浓度)、余量为纯化水，其中，所述溶血剂的pH值为7.2～7.4。
9.一种如权利要求1～8任一项所述的糖化血红蛋白检测试剂盒在HPLC法检测糖化血红蛋白中的应用。
10.一种如权利要求1～8任一项所述的糖化血红蛋白检测试剂盒在HPLC法检测HbA1a、HbA1b、HbF、HbLA1c中的应用。
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