CN115286434B - 一种枇杷专用叶面肥 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种枇杷专用叶面肥及其制作方法。发明人通过多年枇杷种植的研究，发现分子量小于1000的鲢鱼骨低聚肽溶液作为叶面肥，单独喷施或在常规施肥的基础上，加用喷施，可以显著增加所收获枇杷的单个重量，体积，可溶性固形物，维生素C含量等指标。以鲢鱼骨低聚肽水溶液作为枇杷专用叶面肥，在增加了枇杷的经济价值的同时，又充分利用鲢鱼骨的残余价值。具有良好的商业应用前景。
Description
技术领域
本发明属于农业技术领域，具体涉及一种枇杷专用叶面肥及其制作方法。
背景技术
枇杷是蔷薇科中苹果亚科的一个属，中文古名芦橘，又名金丸、芦枝，为常绿果树，四季苍翠，树姿秀丽。枇杷起源于我国西南地区，是我国南方特有的亚热带常绿果树，在我国已有2000多年的栽培历史，主要产区有浙江、江苏、福建和安徽等。其果实柔软多汁、酸甜可口，富含人体所需的各种营养元素，是重要的营养果品和保健果品，而花和叶也具有一定的药用价值，可用于清肺止咳、肿瘤治疗等。
枇杷树终年常绿，是集果树、绿化、观赏为一体的树种，也是冬季蜜源的有效补充。近年来，随着枇杷在食品和日用化工方面的广泛应用，需求量逐年增加，国内一些有栽植条件的省份纷纷发展优质枇杷产业建设。
三潭枇杷产地位于安徽省黄山市歙县南部，从南源口到深渡的新安江两岸，毗邻新安江水库，这里群山环抱、百转千回，新安江在此形成三个大转弯，经过亿万年的流水冲刷和沉淀，逐渐形成三个大面积的深水潭，瀹潭、漳潭和绵潭就位于这三个江湾凸出处。此地属亚热带季风气候，年均气温16.4℃，降水量1477mm，平均海拔300m，无霜期近300天。西北面有黄山、东北面有天目山阻挡寒潮的侵袭。又由于新安江水系流经，水面开阔，江湾繁多，千岛湖水面延伸到南源口。因此冬天雾气较多，可有效降低极端寒冷天气的强度和减少天数，形成独特的冬暖夏凉小气候，为优质枇杷的生长提供了得天独厚的气候条件。
优越的地理气候条件孕育着丰富的物产，三潭枇杷果大、肉厚、味甜、汁多、清香爽口，是当地传统的名特优农产品，素有“天上王母蟠桃、人间三潭枇杷”的美誉，是安徽省独具特色的常绿水果品种，在国内外市场享有盛誉。安徽歙县与福建浦田、浙江塘栖、江苏吴县并称为全国“四大枇杷产区”。
三潭枇杷是我国枇杷中的优良品种。为常绿小乔木，树高可达10米，小枝密生锈色或灰棕色绒毛；叶片革质，披针形、长倒卵形或长椭圆形，长10～30cm、宽3～10cm，顶端急尖或渐尖，基部楔形或渐狭成叶柄，边缘有琉锯齿，表面皱，背面及叶柄密生锈色绒毛；圆锥花序，花多而紧密，花序梗、花柄、尊筒密生锈色绒毛；花白色，芳香，直径1.2～2cm，花瓣内面有绒毛，基部有爪；果实近球形或长圆形，黄色或桔黄色，外有锈色柔毛，后脱落，果实大小、形状因品种不同而异；花期10～12月，果期第2年5～6月；因其叶片像乐器琵琶而得名。枇杷对土壤和气候的适应性较强，土壤pH值在4.8～8.5的地区均可栽种；枇杷性喜温暖湿润气候，在年平均温度15℃以上、冬季不低于-6℃、年降水量1000mm 以上的地区均能正常结果。
三潭枇杷最出名的品种有“大红袍”和“光荣”。“大红袍”果皮黄色，但果肉透出红色；“光荣”则因在果蒂处有个明显的五角星而得名。三潭枇杷总种植面积约800公顷，是全国枇杷五大产区之一，被誉为“中国枇杷之乡”。三潭枇杷主要分布于新安江两岸海拔 120～220m的坡地范围内，绵延25km，并向棉溪和漳岭山两分支水系延伸。
枇杷幼树要薄肥勤施，每隔60～90天将全年的肥料分4～6次施用，撒施于根系附近，以速氮肥为主，辅施有机肥。成年结果树1年施肥4次，分为春梢幼果肥、壮果肥、采后肥和花穗肥。春梢幼果肥1月中旬施入，目的是促进春梢萌芽和幼果发育，以氮、磷、钾肥并重，可施生物有机肥750kg/公顷，配施尿素150kg/公顷、过磷酸钙75kg/公顷、硫酸钾225kg/公顷；壮果肥在2月下旬至3月中旬施入，以速效钾、速效磷为主；在采果后7 天内施入采后肥，目的是恢复树势、促使枝梢抽发和花芽分化；在9～10月施入花穗肥，目的是促进开花、提高树体抗寒力。
结合施肥，对树盘周围进行中耕除草，保持土壤松软通气。枇杷较耐旱，却怕积水，需注意灌水和排涝。土壤含水量在10％～14％的范围内最有利于根系的生长。夏秋高温多雨季节，根系易受旱害或涝害，高温干旱时要浇水抗旱，或在树盘下覆草；降雨过多时，则应及时排除积水，否则果熟期间易发生裂果，秋季积水则影响花芽的正常分化。秋季适当干旱有利于花芽分化。
植物吸收养分的最主要途径是依靠根系，同时叶片也能够把营养元素、气体、农药等吸收到植物体内，叶片是植物最重要的根外营养器官，因此叶面施肥技术是现代农业生产中一项必要的辅助施肥措施。植物叶片吸收养分的途径有三条：一是叶片表面的气孔，二是叶片表面角质层的亲水小孔，三是叶片细胞的质外连丝。
叶面肥是一种新型的液体肥料，它由一定量的表面活性剂或雾化剂与植物营养液配置而成。叶面肥施用后能够快速提供营养与调节植物生长发育，需求量与根施相比少很多，能够针对不同的植物需求进行喷施，操作简单，劳动成本低，能够实现农药化肥混用，喷施更加节省原料。
不同种类的植物吸收途径不同，叶片背面气孔一般比正面多，而且极性通道比正面多，因此导致了叶片背面吸收营养物质能力比正面高。影响叶面肥被吸收利用效果的因素有很多，包括叶片类型、叶片状况、叶片形态、植物营养状况、温度、光照、湿度、风速、叶面肥种类、叶面肥形态、叶面肥浓度等。
叶面肥最早是1884年在法国开始有研究，Griss将FeSO4溶液涂抹在葡萄叶片上有效地矫正了葡萄叶片的黄叶病，从此以后，叶面肥开始了研究与发展，进行了大量的应用技术研究，阿夫多宁等在1995年以莴苣为试材，发现莴苣叶片能将水滴中的营养物质吸收利用，并能有效促进植物光合作用，此后有更多的学者就叶面肥进行了研究，在多种植物增加营养、提高品质、改善缺素等方面取得了很多的成果。
我国叶面肥的研究开始于上世纪80年代，经过多年的研究与实践，取得了很多的研究成果，研发出了很多适应我国农作物营养需求的叶面肥种类，从最初的单一元素，到后来的具有多样化功能的叶面肥，在各种经济作物中取得很好的效果。但目前与国外相比，产品开发和机理研究等方面相对落后，差距较大。
经过几十年的研究和开发，目前已有叶面肥产品数百种，不同种类的叶面肥效果不同，同一种叶面肥对不同的植物效果也不同。
鱼骨是鱼类加工过程中常见的下脚料，其与内脏、鱼头等一同构成数量巨大的副产物，在水产品总量中的占比大约在40％～60％。长久以来，由于加工技术不够完善，许多下脚料被直接丢弃，造成了资源浪费及环境污染，产业加工链条短且经济效益不佳。如何有效利用“废弃物”，高效率地获取高附加值产品，满足多样化消费需求并推动鱼类加工产业绿色可持续发展，是现代鱼类加工的重要研究课题。近年来，不少学者已就鱼骨的综合利用取得不少研究成果。
鱼骨富含矿物质、胶原蛋白、软骨素、油脂等，对其进行合理开发利用，不仅有利于提高鱼类资源的加工利用率、为社会供给丰富的廉价优质产品，还有助于无害化处理加工废弃物、实现鱼类加工产业的绿色升级发展。
除了常见的食品生产，鱼骨在材料化工领域亦有得到应用尝试，具有不错开发前景，但是从未有任何报道，鱼骨在农业领域，尤其是肥料领域的任何应用。
鲢鱼(Hypophthalmichthys molitrix)俗称为白鲢、水鲢等,具有生长迅速、产量高、营养价值高等特点,在2017年我国淡水养殖鱼类产量中位居第二,达到385.28万吨。在鲢鱼的加工过程中,产生大量的鱼骨、鱼皮、鱼鳞等副产物。其中,鱼骨中含有丰富的蛋白、不饱和脂肪酸、钙、磷等营养成分,是一种优良的营养食物资源。开发其综合利用技术，是目前亟待解决的难题。
20世纪70年代，氨基酸叶面肥料的问世，推动了我国植物营养学的发展，研究人员从氨基酸是植物必需的营养物质这一实际出发，成功地开发了氨基酸鳌合叶面肥料。将人发、猪骨、畜禽羽毛等角蛋白物质经过水解后，制成氨基酸用于作物的叶面喷施，该类肥料在提高产量、改善品质等方面取得了令人满意的效果。
发明内容
申请人长期致力于枇杷的种植研究，对于枇杷生长所需肥料做了深入的研究。
首先，本发明提供一种枇杷专用叶面肥，用于枇杷成年结果树的页面施肥，促进枇杷果实生长。
所述枇杷专用叶面肥以鲢鱼骨低聚肽为主要成分，为鲢鱼骨低聚肽的水溶液。
所述鲢鱼骨低聚肽为鲢鱼骨经水解得到的水溶性小肽，分子量小于1000道尔顿。
所述鲢鱼骨低聚肽中每1000个氨基酸残基，含有甘氨酸残基和亮氨酸残基数量均大于 160，精氨酸残基含量大于120，丙氨酸残基含量大于90，缬氨酸残基和苏氨酸残基含量均大于60。
所述鲢鱼骨低聚肽的制备工艺如下：
步骤1.将鲢鱼骨洗净，除去泥沙及其他杂物；
步骤2.将步骤1所得鲢鱼骨，粉碎，得鲢鱼骨粉；
步骤3.将步骤2所得鲢鱼骨粉，以氢氧化钠溶液和依地酸钠溶液依次清洗，脱除杂蛋白，色素和矿物质成分；
步骤4.将步骤3所得鲢鱼骨粉，加入乙酸溶液提取，离心，取上清液，残渣重复用乙酸溶液提取，提取三次，合并上清液，即为粗胶原蛋白；
步骤5.取步骤4所得粗胶原蛋白加入氯化钠溶液，盐析，离心，所得沉淀物为鲢鱼骨胶原蛋白；
步骤6.取步骤5所得鲢鱼骨胶原蛋白，加入甘氨酸-盐酸缓冲液，胃蛋白酶，水解，调节pH值，加入胰蛋白酶，水解，酶灭活后，离心取上清液，经大孔树脂脱盐，真空干燥，得鲢鱼骨胶原蛋白酶解物；
步骤7.取步骤6所得酶解物，纯化水溶解，以超滤膜进行分级，得到分子量小于1000 道尔顿的部分，即为鲢鱼骨低聚肽溶液；
步骤8.取步骤7所得溶液，真空干燥后，即得鲢鱼骨低聚肽。
所述鲢鱼骨低聚肽以一定浓度溶于水中即为本申请所述枇杷专用叶面肥。
所述枇杷专用叶面肥的溶度为200倍液，400倍液，600倍液以及其他有效的浓度，优选400倍液。
所述枇杷专用叶面肥在枇杷树开始结果后，作为春梢幼果肥、壮果肥、采后肥和花穗肥单独喷施，或者和其他叶面肥联合喷施，或者和其他土壤肥料联合施予。
所述枇杷专用叶面肥溶解在水中的浓度为0.01％-0.5％。
所述枇杷专用叶面肥的喷施需避开烈日和降雨。
所述枇杷专用叶面肥的促进枇杷果实生长的作用在于增加果实重量，果实体积，果实整齐度，果实可食率，增加可溶性固形物含量，可溶性糖含量，增加维生素C含量，降低总酸含量。
本发明的有益效果为：以鲢鱼骨低聚肽水溶液作为枇杷专用叶面肥，在常规施肥的基础上，联合应用，亦可以单独应用，可以显著增加所得枇杷果实重量，果实体积，果实整齐度，果实可食率，增加可溶性固形物含量，可溶性糖含量，增加维生素C含量，降低总酸含量，对于红砂类枇杷品种，光荣，大红袍等尤其适用。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步的详细说明，以下实施例是对本发明的解释，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
实施例1：鲢鱼骨低聚肽的制备
鲢鱼鱼骨粉末依次用0.1mol/L的NaOH溶液和0.5mol/L的EDTA-Na2(pH7.4)溶液浸泡脱除杂蛋白、色素和矿物质等成分，然后按料液比1∶20(W/V)加入0.5mol/L的乙酸溶液搅拌提取24h，4500r/min离心15min，取上清液，残渣重复上述过程，合并3次提取液，即为粗胶原蛋白。
取适量粗胶原蛋白加入NaCl至溶液终浓度为2.5mol/L，同时析出絮状沉淀，4℃、12000rpm 离心15min得沉淀物，即为盐析后的酸溶性胶原蛋白(acid-solubilisedcollagen，ASC)。
按料液比1∶2(W/V)将鲢鱼鱼骨胶原蛋白加入到甘氨酸-盐酸缓冲液(pH2.0，0.05mol/L)，按照酶/底物比(E/S)为2％加入胃蛋白酶，在37℃条件下，酶解3h后，酶解液用1mol/L NaOH调pH至8.0，于37℃按照酶/底物比(E/S)为2％加入胰蛋白酶，酶解3h，酶解液加热至95℃恒温保持10min灭酶，离心取上清液，经D101大孔树脂脱盐、真空干燥，得鲢鱼鱼骨胶原蛋白酶解物，-20℃条件下冷冻保存。
将所得鲢鱼鱼骨胶原蛋白酶解物粉末配成25.0mg/mL的溶液用截留分子量为1ku的超滤膜进行分级，得到分子量小于1ku的分级部分。真空干燥，得到白色固体，即为本申请所述的鲢鱼骨低聚肽。以一定浓度溶解于水中，即为本申请所述枇杷专用叶面肥。
未通过超滤膜的部分可以重复酶解后，再以超滤法分离。
实施例2所得鲢鱼骨低聚肽中氨基酸残基含量测定(参照文献施行：陆剑锋等，中华鳖裙边胶原蛋白的提取及其特征[J]。水产学报，2010，34(6):801-808.)
按实施例1方法，重复制备三批鲢鱼骨低聚肽，批号依次为01，02，03，用于氨基酸残基含量测定。称取1mg真空干燥的鲢鱼骨低聚肽放入安瓿瓶中，加入2mL HCl(6mol/L)(色氨酸测定采用KOH水解)，并充入少量N2，在酒精喷灯下迅速封管，110℃条件下，水解24h。水解结束后，冷却水解物，移至坩埚，在70℃水浴锅中挥发剩余盐酸，再加入少量双蒸水蒸干，重复3次。用适量pH2.2的缓冲液溶解后，定容，并用0.22μm微孔滤膜除杂，滤液用HITACHL8800氨基酸全自动分析仪进行测定。
所得三批鲢鱼骨低聚肽的氨基酸残基含量(个数/1000个残基)如下：
实施例3鲢鱼骨低聚肽水溶液叶面肥对三潭枇杷果实的影响(参照文献：陈绍彬，储春荣，海藻酸叶面肥对冠玉枇杷品质的影响，现代农业科技2011年第24期，130-131)
1试验材料
试验地设在歙县漳潭村枇杷园内。试验品种为大红袍和光荣，十年生盛产树，株行距4m ×4m。
2试验设计
在使用常规肥料的同时加施叶面肥，试验共设4个处理，即鲢鱼骨低聚肽600倍液(处理 A)、400倍液(处理B)、200倍液(处理C)，以清水作对照(处理CK)。每个处理4株枇杷树。分别于枇杷盛花期(花穗肥)、第2年春生理落果期结束(春梢幼果肥)及4月中旬果实膨大期(壮果肥)，用喷雾器对枇杷树全株喷施鲢鱼骨低聚肽溶液。每个时期喷2次，间隔 5天。
3调查内容
2018年，开始试验，并于第二年果实成熟时(5月28日)采收，在处理的每颗果树，前、后，左，右，上，下六个方位均采收等量果实作为样品检测。采收后立即进行果实整齐度、单果重、体积，可溶性固形物、可溶性糖、总酸、维生素C等果实品质测定。
4各处理果实整齐度测定
果实整齐度参考景士西的CR法(景士西，张耀良等，果实大小整齐度方法的研究，北方果树，1992，4(3)：6-10)果实成熟后，采摘所有处理的所有果实，用目测法选出最大果和最小果各30个，分别称重。
CR：样品整齐度系数；
Xmin：样品中某个最小果重；
Xmax：样品中某个最大果重。
结果数据如下：
说明：CR值越小，果实整齐度越低；CR值越接近1，果实整齐度越高；CR值等于1，果实无差异。
如上表数据可见，鲢鱼骨低聚肽水溶液作为叶面肥对于大红袍和光荣枇杷果实整齐度有显著影响。所有喷施鲢鱼骨低聚肽水溶液叶面肥的果实整齐度都显著高于对照(清水)，尤其以400倍液喷施果实整齐度最佳。
5.各处理果实单果重、体积、可食率测定
每个处理随机选择30个果实样本：用天平称30个果实样本总重量，算出平均值；大烧杯中装一定量的水，将果实样本放入烧杯中，得出烧杯中水的上升量，即为果实总体积，按如下公式算出果实平均体积。
重复4次，取平均值。
取30个果实样本去掉种子和果皮后，用天平称量果肉总重量，算出可食率处理重复4次，取平均值。
所得数据如下：
如上表所示，鲢鱼骨低聚肽水溶液作为叶面肥喷施，对大红袍和光荣枇杷果实平均单果重、平均体积、可食率有显著影响。尤其以鲢鱼骨低聚肽400倍液喷施，效果最佳。可以显著提高大红袍和光荣枇杷果实单果重、体积、可食率。按照安徽省地方标准《地理标志产品三潭枇杷》DB 34/T 1479—2017，规定光荣大于40g，大红袍大于45g即为特级产品，藉此判断，通过施用鲢鱼骨低聚肽枇杷专用叶面肥，使得枇杷果实平均单重显著增加，特级出产率显著增加。
6可溶性固形物测定：
按NYT2637-2014标准，折射仪法测定。
每个处理中，随机选择30个果实样本剥皮去核后，分别捣碎混匀备用。
取捣碎后的果浆20ml，用干净干燥的纱布过滤，将过滤后的果浆滴2-3滴在折光仪上，读取折光仪数据，重复4次，取平均值，测得可溶性固形物。
所得数据如下：
| 品种 | 处理A(％) | 处理B(％) | 处理C(％) | 处理CK(％) |
| 大红袍 | 11.71 | 13.04 | 12.13 | 10.61 |
| 光荣 | 11.20 | 13.34 | 12.26 | 10.79 |
按照安徽省地方标准《地理标志产品三潭枇杷》DB 34/T 1479—2017，规定红(黄)砂类(大红袍和光荣即为此类)可溶性固形物需大于9％。按此标准，即使未使用本申请所述鲢鱼骨低聚肽枇杷专用叶面肥的果实所结果实即达到此标准。通过使用本申请所述叶面肥，所得枇杷果实的可溶性固形物显著增加，尤其以400倍液尤甚。
7可溶性糖测定：
每个处理中，随机选择30个果实样本剥皮去核后，分别捣碎混匀备用。
准确称取捣碎后的果肉1.000g于研钵中，加石英砂研磨至匀浆，静置1h后过滤，用蒸馏水定容至100mL的容量瓶中，吸取溶液5mL，用蒸馏水稀释，定容至100mL容量瓶，然后取稀释后的溶液于试管中，先后加入蒽酮试剂和浓硫酸，盖上试管口，快速摇动后沸水浴1min，取出放入冷水中冷，20min后，在620nm波长下，试剂空白调零，测定吸光值(A620，重复4次)。
标准曲线的制作：将每支试管编号，按照表2分别加入试剂，测定吸光值(A620)，并以吸光值为纵坐标，以葡萄糖含量为横坐标拟合标准曲线。
所得数据如下：
测定样品溶液糖含量并按下式计算果实可溶性糖含量：
上式中：
W；待测样品鲜重(mg)；
m：从标准曲线上查的糖含量(ug)；
V：样品总体积(ml)；
V1；测定时取样体积(ml)；
D：稀释倍数；
1000：样品重量由mg换算为ug的倍数。
所得数据如下：
| 品种 | 处理A(％) | 处理B(％) | 处理C(％) | 处理CK(％) |
| 大红袍 | 7.35 | 8.91 | 8.14 | 6.84 |
| 光荣 | 7.42 | 9.03 | 8.30 | 6.95 |
如上表数据可以看出，加用本申请所述鲢鱼骨低聚肽枇杷专用叶面肥后，所得大红袍和光荣果实中可溶性糖的含量与对照组相比，明显增加，尤其以施用400倍液的叶面肥最为显著。
8总酸测定：
按国标GB12456—2021，食品中总酸量的测定的酸碱指示剂滴定法测定样品中总酸含量。
每个处理中，随机选择30个果实样本剥皮去核后，分别捣碎混匀备用。
准确称取捣碎混匀后的果肉20.0g，加入石英砂研磨至匀浆，然后用去CO2蒸馏水洗入 250mL容量瓶，定容后摇匀，过滤后吸取50mL滤液于锥形瓶中，加入1％酚酞溶液1滴，用己标定的NaOH标准溶液(0.1mol/L)滴定至溶液有微红色出现，振摇30S内红色未消失，记录所消耗的氢氧化钠溶液体积，重复4次。按如下公式计算总酸的含量：
上式中：
C：NaOH标准溶液浓度(mol/L)；
V1；滴定时用掉的NaOH标准溶液体积(ml)；
V0；滴定时消耗的样晶溶液体积(ml)；
Mv：称取的样品重量(g)；
250；样品定容后的体积(ml)；
0.067：换算成苹果酸克数的系数。
所得数据如下：
| 品种 | 处理A(％) | 处理B(％) | 处理C(％) | 处理CK(％) |
| 大红袍 | 0.63 | 0.56 | 0.59 | 0.66 |
| 光荣 | 0.58 | 0.54 | 0.63 | 0.68 |
按照安徽省地方标准《地理标志产品三潭枇杷》DB 34/T 1479—2017，规定红(黄)砂类(大红袍和光荣即为此类)总酸量不大于0.7g/100mL果汁，即不大于0.7％。按此标准，即使未使用本申请所述鲢鱼骨低聚肽枇杷专用叶面肥的果实所结果实即达到此标准。通过使用本申请所述叶面肥，所得枇杷果实的总酸量进一步降低，尤其以400倍液尤甚。
9维生素C测定：
随机选择30个果实样本剥皮去核后，分别捣碎混匀备用。
准确称取捣碎混匀后的果肉30.0g左右，加入50ml浓度2％的草酸，加适量石英砂研磨至匀浆，称匀浆总重量，再称取20.00g左右的样品匀浆至100ml容量瓶中，加入2％的草酸溶液定容后过滤，用移液管吸取定容后的样品溶液至50ml的三角瓶中，用称定后的2，6-二氯靛酚滴定，溶液变成粉红色且15s不褪色，记录消耗的2，6-二氯靛酚溶液体积。按下式计算维生素C的含量：
上式中：
V：为滴定时消耗的2，6-二氯靛酚溶液体积(ml)；
W：为样品鲜重(g)；
A1：为滴定时吸取的样品溶液体积(ml)；
A：为样品溶液定容体积(ml)；
G1：为样品定容时称取的样品匀浆重量(g)；
T：为1ml2，6-二氯靛酚溶液所氧化的抗坏血酸mg数(mg/ml)。
所得数据如下：
| 品种 | 处理A(ug/g) | 处理B(ug/g) | 处理C(ug/g) | 处理CK(ug/g) |
| 大红袍 | 3.99 | 4.16 | 3.85 | 3.65 |
| 光荣 | 4.02 | 4.23 | 3.83 | 3.57 |
如上表数据可以看出，施用本申请所述鲢鱼骨低聚肽枇杷专用叶面肥后，所得大红袍和光荣枇杷果实维生素C含量明显增加，尤其以400倍液叶面肥为最佳。
以上发明内容和实施例描述了本发明专利申请的基本原理和主要特征及本发明专利申请优点，本领域的技术人员应该了解，本发明专利申请不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是本发明专利申请的最优的技术方案，在不脱离本发明专利申请精神和范围的前提下，本发明专利申请还会有各种变化和改进，即以鲢鱼骨低聚肽或其盐或其他衍生物水溶液作为枇杷专用叶面肥，单独或与其他肥料联合施用，都落入要求保护的本发明专利申请范围内，本发明专利申请要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (7)
1.一种枇杷专用叶面肥，以鲢鱼骨低聚肽为主要成分，所述鲢鱼骨低聚肽的制备工艺如下：
步骤1.将鲢鱼骨洗净，除去泥沙及其他杂物；
步骤2.将步骤1所得鲢鱼骨，粉碎，得鲢鱼骨粉；
步骤3.将步骤2所得鲢鱼骨粉，以氢氧化钠溶液和依地酸钠溶液依次清洗，脱除杂蛋白，色素和矿物质成分；
步骤4.将步骤3所得鲢鱼骨粉，加入乙酸溶液提取，离心，取上清液，残渣重复用乙酸溶液提取，提取三次，合并上清液，即为粗胶原蛋白；
步骤5.取步骤4所得粗胶原蛋白加入氯化钠溶液，盐析，离心，所得沉淀物为鲢鱼骨胶原蛋白；
步骤6.取步骤5所得鲢鱼骨胶原蛋白，加入甘氨酸-盐酸缓冲液，胃蛋白酶，水解，调节pH值，加入胰蛋白酶，水解，酶灭活后，离心取上清液，经大孔树脂脱盐，真空干燥，得鲢鱼骨胶原蛋白酶解物；
步骤7.取步骤6所得酶解物，纯化水溶解，以超滤膜进行分级，得到分子量小于1000道尔顿的部分，即为鲢鱼骨低聚肽溶液；
步骤8.取步骤7所得溶液，真空干燥后，即得鲢鱼骨低聚肽；
所得鲢鱼骨低聚肽分子量小于1000道尔顿，并且每1000个氨基酸残基，含有甘氨酸残基和亮氨酸残基数量均大于160，精氨酸残基含量大于120，丙氨酸残基含量大于90，缬氨酸残基和苏氨酸残基含量均大于60。
2.如权利要求1所述的叶面肥，其特征在于，所述枇杷专用叶面肥的制备方法为将鲢鱼骨低聚肽以一定浓度溶于水中。
3.如权利要求2所述枇杷专用叶面肥，其特征在于，所述枇杷专用叶面肥的溶度为200倍液，400倍液，600倍液以及其他有效的浓度。
4.如权利要求2所述枇杷专用叶面肥，其特征在于，所述枇杷专用叶面肥的溶度为400倍液。
5.如权利要求2-4所述的任一枇杷专用叶面肥，其特征在于，所述枇杷专用叶面肥在枇杷树开始结果后，作为春梢幼果肥、壮果肥、采后肥和花穗肥单独喷施，或者和其他叶面肥联合喷施，或者和其他土壤肥料联合施予。
6.如权利要求5所述枇杷专用叶面肥，其特征在于，所述鲢鱼骨低聚肽溶解在水中的浓度为0.01％-0.5％。
7.如权利要求2-4所述任一叶面肥，用于促进枇杷增加果实重量，果实体积，果实整齐度，果实可食率，增加可溶性固形物含量，可溶性糖含量，增加维生素C含量，降低总酸含量的用途。
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