CN115282281B - 铁死亡抑制剂在制备防治胆道疾病的药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本申请涉及生物医药技术领域，提供了一种铁死亡抑制剂在制备防治胆道疾病的药物中的应用，其中胆道疾病为胆道炎症、胆结石、胆道寄生虫病、胆道先天性畸形、黄疸中的任意一种或多种，铁死亡抑制剂选自铁过载抑制剂、铁转运蛋白调节剂、罗格列酮、吡格列酮、曲格列酮、环格列酮、Ferrostatin‑1、Ferrostatin‑1二炔、SRS11‑92、SRS16‑86、生育酚、维生素K、维生素K对苯二酚、β‑巯基乙醇、利普罗他汀、褪黑素中的任意一种或多种。铁死亡抑制剂可以降低胆道闭锁小鼠的黄疸率，改善黄疸清除率并减少细菌性胆管炎发病率，证明铁死亡抑制剂对病理性黄疸、胆管炎、胆道闭锁等胆道疾病有治疗效果。

Description

铁死亡抑制剂在制备防治胆道疾病的药物中的应用
技术领域
本申请涉及生物医药技术领域，具体涉及一种铁死亡抑制剂在制备防治胆道疾病的药物中的应用。
背景技术
胆道疾病或胆道相关疾病，指发生于胆道系统的疾病，包含在胆囊或胆管或胰腺或胰管中发生的消化系统疾病。胆道系统起始于肝内的毛细胆管，逐步汇合为各级肝内胆管分支，至肝门部成为左、右肝管，最后在肝外汇总为肝总管。胆囊经胆囊管与肝总管相连，自胆囊管与肝总管连接处以下即称为胆总管，其终末端有奥迪（Oddi）括约肌，胆总管与胰管汇合后，开口于十二指肠乳头。目前，针对胆道疾病的治疗通常采用手术治疗、止痛、抗感染治疗为主。
胆道闭锁（Biliary atresia ，以下有时简称为“BA”）是胆道疾病中较为罕见和病情严重的一种，其是一种肝内外胆管出现阻塞并可导致淤胆性肝硬化先天性胆道闭锁而最终发生肝功能衰竭，是小儿外科领域中最重要的消化外科疾病之一，也是小儿肝移植中最常见的适应证，其也是引起婴幼儿阻塞性黄疸的疾病之一，约占新生儿长期阻塞性黄疸的半数病例。在病因方面有诸多学说，如先天性发育不良学说、血运障碍学说、病毒学说炎症学说、胰胆管连接畸形学说、胆汁酸代谢异常学说免疫学说等等。胆道闭锁的预后差，病死率高，其肝纤维化的发展比一般的急慢性肝纤维化（如酒精性脂肪肝纤维化、对乙酰氨基酚等肝毒性药物导致的肝纤维化）更快且更具有侵袭性，虽然肝外胆道梗阻通过Kasai手术能部分缓解症状，延缓病情进展，但大多数患儿仍因术后肝内胆管炎症呈进行性发展，使得其肝损伤迅速向肝衰竭方向发展，严重危及患儿生命。因此，如何早期有效预防/治疗胆道闭锁或者干预/延缓其进展，对于患者尤为重要。
发明内容
本申请提供了一种铁死亡抑制剂在制备预防和/或治疗胆道疾病的药物中的应用，以提供一种新的胆道疾病的预防和/或治疗途径。
本申请的第一方面提供了一种铁死亡抑制剂在制备预防和/或治疗胆道疾病的药物中的应用，胆道疾病为胆道炎症、胆结石、胆道寄生虫病、胆道先天性畸形、黄疸中的任意一种或多种，上述铁死亡抑制剂选自铁过载抑制剂、铁转运蛋白调节剂、罗格列酮、吡格列酮、曲格列酮、环格列酮、Ferrostatin-1、Ferrostatin-1 二炔、SRS11-92、SRS16-86、生育酚、维生素K、维生素 K 对苯二酚、β-巯基乙醇、利普罗他汀（Liproxstatin-1 ）、褪黑素（Melatonin）中的任意一种或多种。
进一步地，上述铁转运蛋白调节剂选自SLC11A2抑制剂、SLC40A1激动剂中的一种或两种。
进一步地，上述铁过载抑制剂包括铁螯合剂。
进一步地，上述铁螯合剂选自去铁胺及其盐、去铁酮及其盐、地拉罗司、右丙亚胺(Dexrazoxane,DXZ)、环吡唑胺、羟胺-铁离子螯合剂、异烟酰、4-[3,5-二(2-羟基苯基)-1,2,4-三唑-1-基]苯甲酸、环吡酮胺中的任意一种或多种。
进一步地，上述去铁胺盐包括甲磺酸去铁胺。
进一步地，上述铁死亡剂为Ferrostatin-1、Ferrostatin-1 二炔、去铁胺、甲磺酸去铁胺中的一种或多种。
更进一步地，上述铁死亡剂为Ferrostatin-1或去铁胺。
更进一步地，上述铁死亡剂为Ferrostatin-1和去铁胺的组合。
更进一步地，上述铁死亡剂为Ferrostatin-1和甲磺酸去铁胺的组合。
更进一步地，上述铁死亡剂为Ferrostatin-1 二炔和去铁胺的组合。
更进一步地，上述铁死亡剂为Ferrostatin-1 二炔和甲磺酸去铁胺的组合。
更进一步地，上述铁死亡剂为Ferrostatin-1 、去铁胺和甲磺酸去铁胺的组合。
更进一步地，上述铁死亡剂为Ferrostatin-1 二炔、去铁胺和甲磺酸去铁胺的组合。
更进一步地，上述铁死亡剂为Ferrostatin-1 、Ferrostatin-1 二炔和去铁胺的组合。
更进一步地，上述铁死亡剂为Ferrostatin-1 、Ferrostatin-1 二炔和甲磺酸去铁胺的组合。
更进一步地，上述铁死亡剂为Ferrostatin-1、Ferrostatin-1 二炔、去铁胺和甲磺酸去铁胺的组合。
进一步地，上述胆道疾病为以下任意一种或多种因素导致的胆道疾病：
（1）铁死亡伴随或导致的胆道疾病；
（2）铁过载伴随或导致的胆道疾病；
（3）铁离子吸收和/或转运异常伴随或导致的胆道疾病；
（4）病毒感染伴随或导致的胆道疾病；
（5）I型干扰素-铁离子信号通路异常伴随或导致的胆道疾病。
进一步地，上述胆道疾病为：
（1）铁过载引起的铁死亡伴随或导致的胆道疾病；
（2）病毒感染和/或I型干扰素-铁离子信号通路异常和/或铁离子吸收和/或转运异常引起的铁死亡伴随或导致的胆道疾病；
（3）病毒感染和/或I型干扰素-铁离子信号通路异常和/或铁离子吸收和/或转运异常引起的铁过载伴随或导致的胆道疾病；
（4）病毒感染引起I型干扰素-铁离子信号通路异常和/或铁离子吸收和/或转运异常从而使铁死亡伴随或导致的胆道疾病；
（5）病毒感染引起I型干扰素-铁离子信号通路异常和/或铁离子吸收和/或转运异常从而使铁过载，并由此引起铁死亡伴随或导致的胆道疾病。
进一步地，上述胆道疾病为新生儿期、婴幼儿期或儿童期发生的胆道疾病。
进一步地，上述铁离子吸收和/或转运异常伴随或导致的胆道疾病为SLC40A1降低和/或SLC11A2升高伴随或导致的胆道疾病。
进一步地，上述病毒为轮状病毒和/或诺如病毒。
进一步地，上述铁过载包括血液铁过载和/或组织铁过载。
进一步地，上述铁死亡包括细胞铁死亡。
进一步地，上述黄疸包括病理性黄疸。
进一步地，上述胆道炎症包括胆管炎、胆囊炎。
进一步地，上述胆道先天性畸形包括胆道闭锁。
进一步地，上述病理性黄疸为病毒感染导致的黄疸。
进一步地，上述胆管炎包括细菌性胆管炎或病毒性胆管炎。
进一步地，上述铁死亡抑制剂在药物中的含量为1-20%。
进一步地，上述药物的剂型为儿童适用的剂型或成人适用的剂型；儿童为出生28天内的新生儿、1岁以内的婴儿、1-6岁的幼儿、或6岁以上18岁以下的儿童；成人为妊娠期的女性成年人、围产期的女性成年人或哺乳期的女性成年人。
进一步地，上述剂型选自经胃肠道给药剂型、或非经胃肠道给药剂型。
进一步地，上述经胃肠道给药剂型包括散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、缓释剂、溶液剂、干混悬剂、泡腾片、乳剂、混悬剂等。
进一步地，非经胃肠道给药剂型包括注射给药剂型（例如注射剂，包括静脉注射剂、肌内注射剂、皮下注射剂、皮内注射剂及腔内注射剂等多种注射剂）；呼吸道给药剂型（如喷雾剂、气雾剂、粉雾剂等）；皮肤给药剂型（如外用溶液剂、洗剂、搽剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、贴剂等；粘膜给药剂型（如滴眼剂、滴鼻剂、眼用软膏剂、含漱剂、舌下片剂、粘贴片剂、贴膜剂等）；腔道给药剂型（如栓剂、气雾剂、泡腾片、滴剂、滴丸剂等，用于在直肠、阴道、尿道、鼻腔、耳道等）。
进一步地，上述药物为口服药物或注射剂。
进一步地，上述口服药物或注射剂还包括药学上可接受的载体，和/或任意一种或多种第二活性成分。
进一步地，上述第二活性成分包括以下物质中的一种或多种：抗生素、熊去氧胆酸、苯巴比妥、考来烯胺、PDE抑制剂。
进一步地，上述铁死亡抑制剂在药物中的单位剂量为0.1mg～1g。
进一步地，上述铁死亡抑制剂在药物中的单位剂量为0.2mg、0.4mg、0.8mg或1.0mg。
经过实验证明，铁死亡抑制剂可以降低胆道闭锁小鼠的黄疸率，改善黄疸清除率并减少胆道闭锁婴儿的细菌性胆管炎发病率，证明铁死亡抑制剂对病理性黄疸、胆管炎、胆道闭锁等胆道疾病的有效治疗效果。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对本申请实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例1中提供胆道闭锁（BA组） 存在组织铁过载和细胞铁死亡的结果。其中图1中的A图示出了 BA患者血浆铁离子浓度；图1中的B图示出了BA患者肝脏组织铁离子浓度。
图2为本发明实施例2中BA 肠道上皮细胞铁转运蛋白表达和分布的结果。其中，图2中的A图示出了BA患者肠道组织单细胞测序数据分析，鉴别出 12 群肠道上皮细胞；图2中的B图示出了BA患者肠道组织免疫荧光 SLC40A1 和 SLC11A2 在肠道上皮细胞的定位和表达；图2中的C图示出了BA患者肠道SLC11A2和 SLC40A1 的平均荧光强度进行统计分析；图2中的D图示出了BA患者肠道组织铁浓度检测；图2中的E图示出了BA患者粪便中铁离子浓度的检测。
图3示出了本发明实施例3中抑制 IFN-I 信号途径与BA 小鼠模型铁过载之间关联的测试结果。其中，图3中的A图示出了I-IFN通路抑制剂（IFNAR中和抗体anti-IFNAR）使用后BA小鼠黄疸率的统计；图3中的B图示出了 I-IFN通路抑制剂使用后BA小鼠肝脏组织铁离子浓度检测；图3中的C图示出了I-IFN通路抑制剂使用后BA小鼠肠道组织铁离子浓度检测；图3中的D图示出了I-IFN通路抑制剂使用后BA小鼠粪便中铁离子浓度的检测。
图4示出了本发明实施例4中的去铁胺挽救 BA 模型结果。其中，图4中的A图示出了去铁胺 DFO 降低 BA 小鼠模型的黄疸率；图4中的B图示出了使用去铁胺后BA 小鼠体重的变化。
图5示出了本发明实施例5中的铁抑素（Ferrostatin-1, Fer-1）挽救 BA 模型的测试结果示出了铁抑素（Ferrostatin-1, Fer-1）降低 BA 小鼠模型的黄疸率。
具体实施方式
现将详细地提供本申请实施方式的参考，其一个或多个实例描述于下文。提供每一实例作为解释而非限制本申请。实际上，对本领域技术人员而言，显而易见的是，可以对本发明进行多种修改和变化而不背离本发明的范围或精神。例如，作为一个实施方式的部分而说明或描述的特征可以用于另一实施方式中，来产生更进一步的实施方式。
因此，旨在本申请覆盖落入所附权利要求的范围及其等同范围中的此类修改和变化。本发明的其它对象、特征和方面公开于以下详细描述中或从中是显而易见的。本领域普通技术人员应理解本讨论仅是示例性实施方式的描述，而非意在限制本申请更广阔的方面。
以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。对于本领域技术人员来说，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
术语“预防”包括抑制和延迟疾病的发作，并且不仅包括在发展疾病之前的预防，还包括在治疗后预防疾病的复发。
术语“治疗”意指逆转、减轻或清除这样的术语所应用的病症或病况或者这样的病症或病况的其中一种或多种指标或者一种或多种症状的进展。
除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
除非另有说明，本发明采用的免疫学、生物化学、化学、分子生物学、微生物学、细胞生物学、基因组学和重组DNA等是本领域的常规技能。参见萨姆布鲁克（ Sambrook ）、弗里奇（ Fritsch ）和马尼亚蒂斯（ Maniatis ），《分子克隆：实验室手册》（ MOLECULARCLONING:A LABORATORY MANUAL ），第2次编辑（ 1989 ）；《当代分子生物学实验手册》（CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY ）（ F .M .奥苏贝尔（ F .M . Ausubel ）等人编辑，（ 1987 ））；《酶学方法》（ METHODS IN ENZYMOLOGY ）系列（学术出版公司）：《PCR2:实用方法》（ PCR 2:A PRACTICAL APPROACH ）（ M .J .麦克弗森（ M .J .MacPherson ）、B.D .黑姆斯（ B .D .Hames ）和G .R .泰勒（ G .R .Taylor ）编辑（ 1995 ））、哈洛（Harlow ）和拉内（ Lane ）编辑（ 1988 ）《抗体：实验室手册》（ ANTIBODIES, A LABORATORYMANUAL ），以及《动物细胞培养》（ ANIMAL CELL CULTURE ）（R .I .弗雷谢尼（R .I.Freshney ）编辑（1987 ））。
发明人通过实验发现，铁死亡抑制剂在治疗胆道闭锁、胆管囊肿为例的胆道疾病中有显著效果，可以抑制患有上述疾病的患者的血浆和组织中铁过载、细胞铁死亡、铁离子吸收和/或转运异常，铁离子吸收/转运相关蛋白SLC11A2升高和 SLC40A1 蛋白表达下降，并且发现了病毒感染导致I型干扰素途径的激活，而阻止I型干扰素通路可以抑制铁过载，治疗胆道闭锁，降低黄疸率，发明人经过分析和验证认为，这些实验发现表明：
（1）包括铁过载抑制剂的铁死亡抑制剂可以用于胆道闭锁患者的治疗，并且该铁死亡抑制剂对于铁过载、铁死亡导致的胆道闭锁具有针对性治疗作用。
（2）铁转运蛋白调节剂例如，SLC11A2抑制剂、SLC40A1激动剂对于胆道闭锁患者，特别是铁过载导致的胆道闭锁患者具有针对性治疗作用，并且铁死亡抑制剂对于胆道闭锁患者，特别是铁离子吸收/转运相关蛋白SLC11A2升高和 SLC40A1 蛋白表达下降导致的胆道闭锁患者具有针对性治疗作用。
（3）铁死亡抑制剂可以用于胆道闭锁和黄疸的治疗，特别是对I型干扰素-铁离子信号通路异常导致的胆道疾病（胆道闭锁/黄疸）具有针对性治疗作用。
基于上述实验发现，发明人进一步对铁离子螯合剂甲磺酸去铁胺和铁死亡抑制剂Ferrostatin-1作为两种铁死亡抑制剂的典型物质对胆道闭锁的作用效果进行研究发现，通过膳食铁方式会加重胆道闭锁和铁过载，采用铁离子螯合剂甲磺酸去铁胺有效降低黄疸，并且胆道闭锁小鼠中的炎症细胞减少；采用铁死亡抑制剂Ferrostatin-1（Fer-1）可以有效降低胆道闭锁小鼠的黄疸，延缓黄疸发生时间，炎症细胞浸润水平降低。该研究结果也证明了铁死亡抑制剂对I型干扰素-铁离子信号通路异常导致的胆道疾病（胆道闭锁/黄疸）具有针对性治疗作用。
进一步地，发明人在其他胆道疾病例如胆管炎、病理性黄疸中发现了基本相同或相似的结果或结论，由此得到本发明。
本发明的第一方面，基于本申请实验的发现，本申请的一种实施方式提供了一种铁死亡抑制剂在制备预防和/或治疗的胆道疾病药物中的应用，胆道疾病为胆道炎症、胆结石、胆道寄生虫病、胆道先天性畸形、黄疸中的任意一种或多种，上述铁死亡抑制剂选自铁过载抑制剂、铁转运蛋白调节剂、罗格列酮、吡格列酮、曲格列酮、环格列酮、Ferrostatin-1、Ferrostatin-1 二炔、SRS11-92、SRS16-86、生育酚、维生素K、维生素 K 对苯二酚、β-巯基乙醇、利普罗他汀（Liproxstatin-1）、褪黑素（Melatonin）中的任意一种或多种。
上述胆道炎症、胆结石、胆道寄生虫病、胆道先天性畸形、黄疸中的任意一种是从胆道疾病的类型进行分类的相应疾病。
铁死亡是铁离子依赖性的细胞死亡方式，由过多的脂质过氧化介导的细胞膜的损伤引起。铁过载是促发铁死亡的核心环节。
组织中铁稳态一旦失衡就会引起脂质过氧化堆积触发细胞铁死亡最后导致铁死亡相关疾病。作为一种新的铁依赖的死亡方式，铁死亡在各种疾病中得到越来越多的关注。然而，铁死亡与胆道疾病的关系目前尚没有人关注或提及。而铁死亡抑制剂可以有效抑制铁死亡的发生或加剧。
铁过载（iron overload）又称铁负荷过多，是指由于铁的供给超过铁的需要，或者由于铁在体内的过度聚集、沉积或无法正常排除而导致的体内铁含量超标。铁过载抑制剂为通过螯合、促进代谢等方式抑制铁的过载，从而使铁含量处于稳态或者平衡状态的物质。
本发明中所述的铁死亡抑制剂包括化合物本身及具有与其基本相同或相似作用的衍生物等。
一些实施方式中，上述铁过载抑制剂包括铁螯合剂。铁螯合剂是治疗铁过载的主要方法之一，能选择性地结合多余的铁并促进铁的排泄，从而降低患者铁负荷。
一些实施方式中，上述铁螯合剂选自去铁胺及其盐、去铁酮及其盐、地拉罗司、右丙亚胺(Dexrazoxane,DXZ)、环吡唑胺、羟胺-铁离子螯合剂、异烟酰、4-[3,5-二(2-羟基苯基)-1,2,4-三唑-1-基]苯甲酸、环吡酮胺中的任意一种或多种。
在本发明的一些实施方式中，上述盐为可药用盐。例如，当活性成分包含酸性官能团时，其实例包括无机盐，例如，碱金属盐(例如，钠盐、钾盐，等等)、碱土金属盐(例如，钙盐、镁盐，等等)等等、铵盐等等，当化合物包含碱性官能团时，其实例包括与无机酸形成的盐，例如，盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸等等，以及与有机酸形成的盐，例如，乙酸、苯二酸、富马酸、草酸、酒石酸、马来酸、枸橼酸、琥珀酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸，等等。
一些实施方式中，上述去铁胺有机酸盐例如甲磺酸去铁胺（DFO），例如注射用甲磺酸去铁胺。
一些实施方式中，上述铁转运蛋白调节剂选自SLC11A2抑制剂、SLC40A1激动剂中的一种或两种。
上述Ferrostatin-1是一种有效的、选择性的 ferroptosis 抑制剂，抑制Erastin 诱导的 HT-1080 细胞铁死亡，其CAS 号为347174-05-4，结构式为
Figure 442990DEST_PATH_IMAGE001
。
Ferrostatin-1类似物 SRS11-92、SRS16-86的结构式分别为：
Figure 297813DEST_PATH_IMAGE002
、
Figure 267431DEST_PATH_IMAGE003
SRS11-92 SRS16-86。
去铁胺的CAS号为70-51-9，结构式为
Figure 600323DEST_PATH_IMAGE004
。
利普罗他汀（Liproxstatin-1）的结构式为：
Figure 414695DEST_PATH_IMAGE005
。
褪黑素（Melatonin），别名：N-乙酰-5-甲氧基色胺、松果体素、褪色素，其CAS号：73-31-4，结构式为：
Figure 424108DEST_PATH_IMAGE006
。
如上所述，本发明所述的铁死亡剂在胆道炎症、胆结石、胆道寄生虫病、胆道先天性畸形、黄疸中等中的应用，不仅包括单独的铁死亡剂，还包括铁死亡剂的组合。
作为一个示例，本发明中的铁死亡剂的组合包括Ferrostatin-1、Ferrostatin-1二炔、去铁胺、甲磺酸去铁胺中的一种或多种。
在一些实施方式中，铁死亡剂为Ferrostatin-1或去铁胺。
在一些实施方式中，铁死亡剂为Ferrostatin-1和去铁胺的组合。
在一些实施方式中，铁死亡剂为Ferrostatin-1和甲磺酸去铁胺的组合。
在一些实施方式中，铁死亡剂为Ferrostatin-1 二炔和去铁胺的组合。
在一些实施方式中，铁死亡剂为Ferrostatin-1 二炔和甲磺酸去铁胺的组合。
在一些实施方式中，铁死亡剂为Ferrostatin-1 、去铁胺和甲磺酸去铁胺的组合。
在一些实施方式中，铁死亡剂为Ferrostatin-1 二炔、去铁胺和甲磺酸去铁胺的组合。
在一些实施方式中，铁死亡剂为Ferrostatin-1 、Ferrostatin-1 二炔和去铁胺的组合。
在一些实施方式中，铁死亡剂为Ferrostatin-1 、Ferrostatin-1 二炔和甲磺酸去铁胺的组合。
在一些实施方式中，铁死亡剂为Ferrostatin-1、Ferrostatin-1 二炔、去铁胺和甲磺酸去铁胺的组合。
一方面，从胆道疾病的伴随症状/现象/或导致原因来说，本发明一些实施方式中的胆道疾病可以分为：
胆道疾病为铁死亡伴随或导致的胆道疾病。
胆道疾病为铁过载伴随或导致的胆道疾病。
胆道疾病为铁离子吸收和/或转运异常伴随或导致的胆道疾病，例如所述胆道疾病为SLC40A1降低和/或SLC11A2升高伴随或导致的胆道疾病。
机体对铁的吸收和转运进入血液循环主要发生在十二指肠和回肠上部。二价金属转运蛋白 1（DMT，SLC11A2）不参与母婴之间铁离子的转运，但是对出生后的新生儿期肠道对非血红蛋白铁的吸收是必要的，表达于肠上皮细胞的肠腔侧参与铁离子从肠绒毛上皮吸收转运。膜转铁蛋白（FPN，SLC40A1）在膜铁转运辅助蛋白的协助下转运铁离子穿过肠道上皮细胞基底侧进入血液循环，SLC40A1 是唯一将非血红蛋白铁离子转出细胞的铁转运蛋白，主要表达在胎盘合胞滋养层细胞，十二指肠成熟的肠上皮细胞，巨噬细胞以及肝细胞。SLC40A1 同时受转录和转录后调控。在转录水平上 NRF2（Erythroid-like nuclearfactor 2）促进 SLC40A1 的表达，肠道上皮细胞铁转运蛋白通过肠上皮细胞的肠腔侧和基底侧的空间分布以及表达水平调控铁离子的转运，继而对机体铁离子的稳态起重要作用。
胆道疾病为病毒感染伴随或导致的胆道疾病。
胆道疾病为I型干扰素-铁离子信号通路异常伴随或导致的胆道疾病。
胆道疾病为铁过载引起的铁死亡伴随或导致的胆道疾病。
胆道疾病为病毒感染和/或I型干扰素-铁离子信号通路异常和/或铁离子吸收和/或转运异常引起的铁死亡伴随或导致的胆道疾病。
胆道疾病为病毒感染和/或I型干扰素-铁离子信号通路异常和/或铁离子吸收和/或转运异常引起的铁过载伴随或导致的胆道疾病。
胆道疾病为病毒感染引起I型干扰素-铁离子信号通路异常和/或铁离子吸收和/或转运异常从而使铁死亡伴随或导致的胆道疾病。
胆道疾病为病毒感染引起I型干扰素-铁离子信号通路异常和/或铁离子吸收和/或转运异常从而使铁死亡伴随或导致的胆道疾病。
胆道疾病为病毒感染引起I型干扰素-铁离子信号通路异常和/或SLC40A1降低和/或SLC11A2升高从而使铁过载伴随或导致的胆道疾病。
胆道疾病为病毒感染引起I型干扰素-铁离子信号通路异常和/或铁离子吸收和/或转运异常从而使铁过载，并由此引起铁死亡伴随或导致的胆道疾病。
所述新生儿期/婴幼儿期/儿童期伴有病毒感染（明确诊断或没有明确诊断），机体血浆铁离子水平升高，出生后黄疸不退或退而复现，后经手术探查发现胆道梗阻则诊断为所述疾病；所述血浆铁离子的参考水平代表来自未患有所述疾病的同年龄段受试者的铁离子的水平。
本发明中一些实施方式中的病毒为轮状病毒和/或诺如病毒。
一些实施方式中，上述胆道疾病为新生儿期、婴幼儿期或儿童期发生的胆道疾病。
例如，新生儿期、婴幼儿期或儿童期病毒感染所致机体铁离子过载参与导致的胆道疾病和/或I型干扰素-铁离子信号通路异常导致的胆道疾病。
一些实施方式中，铁过载包括血液铁过载和/或组织铁过载。
一些实施方式中，铁过载还包括原发性铁过载或者继发性铁过载，例如膳食性铁过载，所述膳食包括乳铁蛋白。
一些实施方式中，黄疸包括病理性黄疸，例如病毒感染导致的黄疸。
病理性黄疸是一种多因素疾病，涉及受损红细胞的过度分解或清除失败。胆道闭锁（BA）是一种病理性黄疸病，以胆管梗阻和快速进展的肝功能衰竭为特征。病毒感染是 BA的重要诱因，每 5000-18000 名新生儿中就有一名受到病毒感染 。
一些实施方式中，胆道炎症包括胆管炎、胆囊炎。
上述胆管炎包括细菌性胆管炎或病毒性胆管炎。细菌性胆管炎可能是由于肠道菌群失调和致病菌积累促进了细菌性胆管炎的发生。
一些实施方式中，胆道先天性畸形包括胆道闭锁。
胆道闭锁为常规医学意义上的胆道闭锁，尤其是胆道闭锁为新生儿期、婴幼儿期或儿童期病毒感染所致机体铁离子过载参与导致的胆道闭锁和/或I型干扰素-铁离子信号通路异常导致的胆道闭锁。
胆道闭锁是以肝内外胆管闭锁和梗阻性黄疸为特点的小儿外科常见畸形，其发病率为1/5000-1/8000。
在本发明中，上述两方面分类的胆道疾病，并不是相互抵触或者必须为相互独立的关系，而是既可以为来自于某一种分类的独立的胆道疾病，也可以是两种分类相互任意叠加或者组合的关系。
例如，在一个实施方式中，本发明中所述的胆道疾病为铁死亡伴随或导致的胆道闭锁。
在另一个实施方式中，本发明中所述的胆道疾病为铁离子吸收和/或转运异常伴随或导致的胆道闭锁。
在另一个实施方式中，本发明中所述的胆道疾病为病毒感染所致机体铁离子过载参与导致的胆道闭锁和/或I型干扰素-铁离子信号通路异常导致的胆道闭锁。
在另一个实施方式中，本发明中所述的胆道疾病为新生儿期、婴幼儿期或儿童期病毒感染所致机体铁离子过载参与导致的胆道闭锁和/或I型干扰素-铁离子信号通路异常导致的胆道闭锁。
在一些实施方式中，本发明中的预防和/或治疗疾病，包括降低黄疸率、降低促炎因子水平、延缓疾病进程等。
在一些实施方式中，本发明中的铁死亡抑制剂作为制备的药物的有效成分，铁死亡抑制剂在药物中的质量含量为1-20%，优选为1%-10%，例如1%、3%、5%、8%、10%。
由于与胆道疾病例如胆道闭锁直接相关人员为儿童或者女性成年人，因此用于本申请一些实施方式的药物的剂型为儿童适用的剂型或成人适用的剂型；在一些实施例中，儿童为出生28天内的新生儿、1岁以内的婴儿、1-3岁的幼儿、3-6岁的幼儿、或6岁以上18岁以下的儿童；成人为妊娠期的女性成年人、围产期的女性成年人或哺乳期的女性成年人。
本发明申请的药物剂型可以选自经胃肠道给药剂型、或非经胃肠道给药剂型，例如在一些实施方式中，经胃肠道给药剂型是指药物制剂经口服用后进入胃肠道，起局部或经吸收而发挥全身作用的剂型，例如散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、缓释剂、溶液剂、干混悬剂、泡腾片、乳剂、混悬剂等。该药物包括药学上可接受的赋形剂、载体、缓冲质和稳定剂中的至少一种。
在另一些实施方式中，非经胃肠道给药剂型，是指除口服给药途径以外的所有剂型，这些剂型，可在给药部位起局部作用或者被吸收后发挥全身作用，包括注射给药剂型（例如注射剂，包括静脉注射剂、肌内注射剂、皮下注射剂、皮内注射剂及腔内注射剂等多种注射剂）；呼吸道给药剂型（如喷雾剂、气雾剂、粉雾剂等）；皮肤给药剂型（如外用溶液剂、洗剂、搽剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、贴剂等；粘膜给药剂型（如滴眼剂、滴鼻剂、眼用软膏剂、含漱剂、舌下片剂、粘贴片剂、贴膜剂等）；腔道给药剂型（如栓剂、气雾剂、泡腾片、滴剂、滴丸剂等，用于在直肠、阴道、尿道、鼻腔、耳道等）。
作为一种优选方式，本发明一些实施方式中的药物为口服药物，例如胶囊剂、片剂、软胶囊剂、微囊制剂、丸剂、颗粒剂、缓控释制剂、口服液体制剂、干混悬剂等各种形式的口服药物。
在一些实施方式中，制备为口服的药物还包括任意一种或多种第二活性成分。
在一些实施方式中，制备为口服的药物还包括药学上可接受的载体。
在一些实施方式中，制备为口服的药物还包括药学上可接受的载体以及任意一种或多种第二活性成分。
作为一种优选方式，本发明的一些实施方式中的药物为注射剂药物，例如静脉注射剂、肌内注射剂、皮下注射剂、皮内注射剂及腔内注射剂等多种形式的注射剂药物。
在一些实施方式中，注射剂药物还包括任意一种或多种第二活性成分。
在一些实施方式中，注射剂药物还包括药学上可接受的载体。
在一些实施方式中，注射剂药物还包括药学上可接受的载体以及任意一种或多种第二活性成分。
本发明中所述的第二活性成分和铁死亡抑制剂用于分开地、连续地、同时地、并行地或时间上交错地用于治疗，所述铁死亡抑制剂是至少一种本发明的化合物，所述第二活性成分是至少一种本领域已知的胆道疾病治疗制剂或化合物，例如抗生素、熊去氧胆酸、苯巴比妥、考来烯胺、PDE抑制剂（例如双嘧达莫）。
在一些实施方式中，上述铁死亡抑制剂在药物中的单位剂量为0.1mg～1g ，优选为0.2mg、0.4mg、0.8mg或1.0mg。以便于服用。
本发明的第二方面，本发明还提供了一种预防和/或治疗胆道闭锁的药物，包括治疗有效量的铁死亡抑制剂。
在一些实施方式中，本发明中的铁死亡抑制剂作为制备的药物的有效成分，铁死亡抑制剂在药物中的质量含量为1-20%，优选为1%-10%，例如1%、3%、5%、8%、10%。
本发明还涉及包含任选存在的第二活性成分及药学可接受的载体的药物，用于分开地、连续地、同时地、并行地或时间上交错地用于治疗，所铁死亡抑制剂是至少一种本发明的化合物，所述第二活性成分是至少一种本领域已知的胆道疾病治疗制剂或化合物，例如抗生素、熊去氧胆酸、苯巴比妥、考来烯胺、PDE抑制剂（例如双嘧达莫）。
本发明的第三方面，本申请还提供了一种利用铁死亡抑制剂预防和/或治疗胆道疾病的方法。
在一些实施方式中，本发明中的铁死亡抑制剂作为制备的药物的有效成分，铁死亡抑制剂在药物中的质量含量为1-20%，优选为1%-10%，例如1%、3%、5%、8%、10%。
在一些实施例中，上述方法在实施时，铁死亡抑制剂施用的单位剂量为0.1mg～1g，优选为0.2mg、0.4mg、0.8mg或1.0mg。
本发明还包括施用第二活性成分用于预防和/或治疗胆道疾病，至少一种铁死亡抑制剂作为第一活性成分，和第二活性成分可以作为分开的制剂(即彼此独立)提供，其后将它们一起同时地、并行地、连续地、分开地或时间上交错地用于联合治疗；或者作为组合包装的分开组分一起被包装和提供以同时地、并行地、连续地、分开地或时间上交错地用于联合治疗。
本发明的第一和第二活性成分的药学制剂类型可以相同，即所述二种成分均被配制成分开的片剂或胶囊剂，或者可不同，即适合于不同的给药方式，例如一种活性成分被配制成片剂或胶囊剂，而另一种被配制用于例如静脉内给药。
在本发明提供的药物、预防和/或治疗胆道疾病的方法中，即本发明的第二方面和第三方面中，对于胆道疾病、铁死亡抑制剂的理解和描述，内涵和外延所包括的范围参照上述第一方面的应用，在此不再赘述。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以下进一步结合实施例来说明铁死亡抑制剂在制备预防和/或治疗胆道疾病的药物中的应用效果。
实施例1 胆道闭锁存在铁过载、铁死亡
1、实验过程：
本实施例共募集胆道闭锁（BA）患者>50名，健康人群作为对照组。
（1）血清标本取得：
在入院、术中以及术后分别获取患者外周血0.5-1mL，用EDTA抗凝管收集，首先留取0.3mL全血直接冻存-80°C冰箱，剩余的血液离心（1800rpm*5min）后收集血清，并冻存。剩余的血细胞加入外周血淋巴细胞分离液（2mL）或者直接加入红细胞裂解液（4mL）进行分离或者裂解得到无红细胞的单个核细胞（PBMC），进行细胞计数，冻存。
（2）肝脏标本取得：
对术中获取的肝脏标本，送病理固定切片后剩余部分放入组织保存液，将标本分成两份处理，一部分在去除组织表面血液后直接冻存在-80°C冰箱；剩余部分进行研磨，离心（1800rpm*5min），获取并冻存上清。
（3）比色法检测铁离子浓度：
设置反应孔，在每个标准孔中加入 5 µL减铁剂（ Iron Reducer），对于铁 (II)测定：向每个样品中加入 5 µL 分析缓冲液（Assay Buffer）；而对于总铁 (II+III) 测定：向每个样品中加入 5 µL Iron Reducer，然后混合并在 37°C 下孵育标准品和样品 30 分钟，将 100 µL 铁探针（Iron Probe） 添加到每个含有铁标准和测试样品的孔中，混合并在37°C 避光孵育 60 分钟，立即在比色酶标仪上测量输出， (OD593 nm)。
2、实验结果：
对胆道闭锁（BA）患者，血浆、肝脏标本进行铁离子的检测，发现 BA 血浆、肝脏组织铁离子浓度升高（图 1中的A-图1中的B），提示 BA 患者的血浆和组织中存在铁过载，并且发明人还在细胞中发现铁死亡。
这说明，胆道闭锁患者存在血浆、肝脏组织铁过载和细胞铁死亡。这表明，铁过载抑制剂、铁死亡抑制剂可以用于胆道闭锁患者的治疗，并且铁过载抑制剂、铁死亡抑制剂对于铁过载、铁死亡导致的胆道闭锁具有针对性治疗作用。
实施例2 胆道闭锁患者存铁过载，存在铁离子吸收和/或转运异常
发明人还对胆道闭锁肠道上皮细胞铁转运蛋白表达和分布异常进行了如下实验：
1、实验过程：
（1）获取肝脏以及肠道单个细胞悬液
收集胆道闭锁（BA）患者（>50例）的肝脏以及对应的肠道标本，健康人群作为对照组。
肝脏：肝脏组织（~2g）在用小剪刀剪碎，并转移至消化液中（消化液的配制：胶原酶A加入10%FBS的高糖培养基DMEM），37度摇床200转/分，消化20分钟，完成以后过70μm的滤网，1800转/分离心，弃上清，红细胞裂解液裂解5分钟，用3倍体积的含2%FBS的PBS终止反应，离心，利用美天旎的死细胞清除试剂盒去除死细胞，检测细胞活率，超过90%以上上机进行接下来的建库和分析。
肠道：肠道组织用在用小剪刀剪碎，并转移至消化液中（消化液的配制：胶原酶IV加入10%FBS的RPMI1640培养基+DNaseI），37度摇床200转/分，消化17分钟，完成以后过70μm的滤网，1800转/分离心，弃上清，红细胞裂解液裂解5分钟，用3倍体积的含2%FBS的PBS终止反应，离心，利用美天旎的死细胞清除试剂盒去除死细胞，检测细胞活率，超过90%以上上机进行接下来的建库和分析。
（2）Genomic 10*单细胞测序方法的建立
进行Genomic 10*测序，结果进行生物信息学分析。所用的试剂盒为ChromiumNext GEM Single Cell 5' Reagent Kits v2 (Dual Index)（10x Genomics，CG000331）。按照试剂盒所提供的操作步骤进行操作。
（3）生物信息学分析
生物信息学分析参考Wang et al., 2020, Cell 183, 1–17进行分析。首先单细胞数据的质量分析，其次进行细胞分群。
2．实验结果：
通过转录组基因表达分析，我们鉴别出 14 群肠道上皮细胞（图 2中的A），其中参与铁离子代谢和转运的肠道上皮细胞定义为肠上皮细胞-SLC11A2 和 肠上皮细胞-SLC40A1。通过肠道上皮细胞免疫荧光染色，我们确认了 SLC11A2 和 SLC40A1 的空间分布位置。SLC40A1 倾向分布于肠道上皮细胞的肠腔侧，并且在 BA 显著降低；SLC11A2 在肠道上皮细胞的双侧分布，但在 BA 肠道上皮细胞倾向分布于肠腔侧，并且荧光强度显著增加（图 2中的B、图2中的C）。这些结果表明，在新生儿期肠道上皮细胞通过 SLC11A2 和SLC40A1 蛋白表达以及空间位置的变化调控铁吸收和排泄，维持铁离子稳态。SLC40A1 不仅可以转运铁离子进入机体血液循环，还表达在肠道上皮细胞的肠腔侧促进铁离子排入肠腔。BA 肠道SLC40A1 表达降低，铁离子排出减少，而 SLC11A2 在肠腔侧表达增加，铁离子吸收增多。
如图2中的D所示，通过检测肠道组织的铁离子水平，发现 BA 肠道组织铁离子也存在过载的现象。
如图2中的E所示，代表肠腔内铁离子水平的粪便铁离子的水平显著降低，为 BA肠道上皮细胞铁离子吸收转运缺陷导致机体铁过载提供了依据。
通过本实施例说明，胆道闭锁患者存在肠道组织铁过载，存在铁离子吸收和/或转运异常，铁离子吸收/转运相关蛋白SLC11A2升高和 SLC40A1 蛋白表达下降。这表明，铁代谢/吸收/转运蛋白调节剂例如，SLC11A2抑制剂、SLC40A1激动剂对于胆道闭锁患者，特别是铁过载导致的胆道闭锁患者具有针对性治疗作用，并且铁过载抑制剂对于胆道闭锁患者，特别是铁离子吸收/转运相关蛋白SLC11A2升高和 SLC40A1 蛋白表达下降导致的胆道闭锁患者具有针对性治疗作用。
实施例3 阻止I型干扰素通路可以抑制铁过载、治疗胆道闭锁
本申请对IFN-I信号途径和BA的铁过载之间的关联进行了如下实验：
1.胆道闭锁动物模型的建立：
(1)动物：成年BALB/c孕鼠，无特定病原体级（SPF级）。待孕鼠产下新生小鼠（每只孕鼠平均产8只新生鼠），平均体重1.5 g，根据实验分组随机选取新生小鼠进行实验。本实验动物处置方法符合动物伦理学标准。
(2)造模方法：将新生的BALB/c小鼠，于出生24小时内腹腔注射猴MMU18006 轮状病毒(下称“RRV”)20 μL（滴度1.0×106 PFU），建立急性胆道闭锁小鼠动物模型。
(3)观察小鼠的生存状况：包括小鼠生存率、生长体重、皮肤黄疸和肝功能的变化等。
2. 给与药物抑制BA小鼠模型I型干扰素通路的激活
在已建立的上述急性胆道闭锁小鼠动物模型上，根据实验要求进行配对实验，将BA模型分为不同实验组别：1）对照组（腹腔给与同等体积的PBS）；2）RRV诱导BA小鼠模型组(简称RRV组)；3）硫酸亚铁组，在RRV诱导BA小鼠模型基础上给与硫酸亚铁(简称RRV+FeSO4组)；4）抑制I型干扰素激活组，在RRV诱导BA小鼠模型基础上给与I型干扰素受体中和抗体（anti-IFNAR）治疗(简称RRV+ Anti-IFNAR组)，其中，anti-IFNAR（Clone: MARI-5A3,mouse IgG1κ）给药剂量为50mg/kg, 腹腔注射，病毒感染后16-18小时给药，每隔2天给药一次，实验在第13天终止。在实验的整个过程中观察和记录上述各组小鼠的体重、肝胆表观、黄疸特征及生存率的同时，流式细胞学检测肝脏和脾脏免疫细胞亚型，比色法检测组织和粪便铁离子的浓度。
结果如下：
病毒感染伴有 I 型干扰素途径（IFN-I）的激活，在 BA 小鼠中利用抗 IFNAR1 抗体阻断 IFN-I 通路，发现小鼠黄疸的发生率降低（图 3中的A），肝脏和肠道铁离子水平降低（图 3中的B-图3中的C），同时粪便铁离子水平增加（图 3中的D）。这些结果提示阻断IFN-I 通路，可以促进肠道上皮铁离子的排泄增加而吸收减少，进而可以抑制铁过载的发生。说明含有铁过载抑制剂和/铁死亡抑制剂的药物对于I型干扰素-铁离子信号通路异常导致的疾病具有治疗作用。
由此，这也说明，病毒感染导致I型干扰素途径的激活，阻止I型干扰素通路可以抑制铁过载，治疗胆道闭锁，降低黄疸率。这说明，铁过载抑制剂可以用于胆道闭锁和黄疸的治疗，特别是对I型干扰素-铁离子信号通路异常导致的胆道疾病（胆道闭锁/黄疸）具有针对性治疗作用。
实施例4 铁离子螯合剂DFO有效治疗胆道闭锁
1. 实验过程：
在出生24小时内感染恒河猴轮状病毒（RRV）建立BA小鼠模型（即建立道闭锁小鼠模型），在已建立的急性胆道闭锁小鼠模型上，根据实验要求进行配对实验，将BA模型分为不同实验组别： 1）对照组（腹腔给与同等体积的PBS）；2）RRV诱导BA小鼠模型组(简称RRV组)；3）去铁胺组(简称RRV+DFO组)，在RRV诱导BA小鼠模型基础上给与去铁胺治疗，其中，去铁胺（Deferoxamine mesylate，DFO）给药剂量为100mg/kg, 腹腔注射，病毒感染后16-18小时给药，每天给药一次，实验在第13天终止。在实验的整个过程中观察和记录上述各组小鼠的体重、黄疸特征及生存率。
2、实验结果：
在恒河猴轮状病毒（RRV）诱导的 BA 模型鼠喂养过量的铁则加重小鼠的黄疸（图4中的A）以及还观察到喂养过量的铁加重组织铁过载，当使用螯合铁离子作用的去铁胺（DFO）可以降低 BA 小鼠黄疸率（图 4中的A），增加体重（图 4中的B）。
上述数据表明，去掉过载的铁可以挽救 BA 疾病进展，为 BA 的治疗提供思路。
本实验说明，膳食铁加重RRV病毒诱导的胆道闭锁和铁过载，铁离子螯合剂DFO有效降低黄疸，炎症细胞减少。
实施例5 铁死亡抑制剂Fer-1治疗胆道闭锁
1、实验过程：
在出生24小时内感染恒河猴轮状病毒（RRV）建立BA小鼠模型（即建立道闭锁小鼠模型），在已建立的急性胆道闭锁小鼠模型上，根据实验要求进行配对实验，将BA模型分为不同实验组别： 1）对照组（腹腔给与同等体积的PBS）；2）RRV诱导BA小鼠模型组（RRV组）；3）铁抑素组(RRV+Fer-1组)，在RRV诱导BA小鼠模型基础上给与铁抑素Fer-1治疗，其中，铁抑素（Ferrostatin-1, Fer-1）给药剂量为5mg/kg/day, 腹腔注射，病毒感染后16-18小时给药，每天给药一次，实验在第13天终止。在实验的整个过程中观察和记录肝胆表观、黄疸特征率。
2、实验结果：
从图5可以看出，在恒河猴轮状病毒（RRV）诱导的 BA 模型鼠使用铁抑素（Ferrostatin-1, Fer-1）可以降低 BA 小鼠黄疸率，延缓黄疸发生的时间，提示铁抑素Fer-1通过抑制铁死亡改善了BA的表型。
本实验说明，铁死亡抑制剂Fer-1有效降低RRV诱导的BA小鼠的黄疸，延缓黄疸发生时间，炎症细胞浸润水平降低。
在实施例1-实施例5的研究基础上，发明人进一步将疾病拓展到了胆管炎、病理性黄疸，现了基本相同或相似的结果或结论，并且将包括实施例4和实施例5在内的铁死亡抑制剂用于胆管炎、病理性黄疸等疾病，同样取得了控制胆管炎发展进程、降低黄疸率等显著的治疗效果。此外，对一些其他类型的铁死亡抑制剂在治疗胆道闭锁的作用效果进行了验证，比如生育酚、维生素K、利普罗他汀、褪黑素、地拉罗司、罗格列酮，其均可以起到有效降低RRV诱导的BA小鼠的黄疸，延缓黄疸发生时间，炎症细胞浸润水平降低的效果。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (22)

1.铁死亡抑制剂在制备治疗胆道闭锁的药物中的应用，所述铁死亡抑制剂为Ferrostatin-1、Ferrostatin-1 二炔、去铁胺、甲磺酸去铁胺中的任意一种或多种。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述铁死亡抑制剂为Ferrostatin-1和去铁胺；或Ferrostatin-1和甲磺酸去铁胺；或Ferrostatin-1 二炔和去铁胺；或Ferrostatin-1 二炔和甲磺酸去铁胺。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述胆道闭锁为新生儿期、婴幼儿期或儿童期发生的胆道闭锁。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述胆道闭锁为病毒感染引起的胆道闭锁。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述胆道闭锁为轮状病毒感染引起的胆道闭锁。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述胆道闭锁为新生儿期、婴幼儿期或儿童期病毒感染导致的胆道闭锁。
7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述胆道闭锁还表现为胆道闭锁引起的胆管炎。
8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述胆道闭锁还表现为胆道闭锁引起的黄疸。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述胆道闭锁引起的胆管炎包括细菌性胆管炎或病毒性胆管炎。
10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述胆道闭锁引起的胆管炎包括新生儿期、婴幼儿期或儿童期的细菌性胆管炎，或新生儿期、婴幼儿期或儿童期的病毒性胆管炎。
11.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述铁死亡抑制剂在药物中的质量含量为1-20%。
12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于，所述铁死亡抑制剂在药物中的质量含量为1%-10%。
13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述铁死亡抑制剂在药物中的质量含量为1%、或3%、或5%、或8%、或10%。
14.根据权利要求1至13中任一所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型为儿童适用的剂型或成人适用的剂型。
15.根据权利要求14所述的应用，其特征在于，所述儿童为出生28天内的新生儿、1岁以内的婴儿、1-3岁的幼儿、3-6岁的幼儿、或6岁以上18岁以下的儿童。
16.根据权利要求14所述的应用，其特征在于，所述成人为妊娠期的女性成年人、围产期的女性成年人或哺乳期的女性成年人。
17.根据权利要求1至13中任一项所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型选自经胃肠道给药剂型、或非经胃肠道给药剂型。
18.根据权利要求1至13中任一项所述的应用，其特征在于，所述药物为口服药物或注射剂。
19.根据权利要求18所述的应用，其特征在于，所述口服药物或注射剂还包括药学上可接受的载体，和/或任意一种或多种第二活性成分。
20.根据权利要求19所述的应用，其特征在于，所述第二活性成分包括以下物质中的一种或多种：抗生素、熊去氧胆酸、苯巴比妥、考来烯胺、PDE抑制剂。
21.根据权利要求1至13中任一所述的应用，其特征在于，所述铁死亡抑制剂在所述药物中的单位剂量为0.1mg～1g。
22.根据权利要求21所述的应用，其特征在于，所述铁死亡抑制剂在所述药物中的单位剂量为0.2mg、0.4mg、0.8mg或1.0mg。
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