CN115259938B - 一种海藻硒肥及其制备方法、使用方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种海藻硒肥及其制备方法、使用方法和应用。该海藻硒肥的制备方法，包括如下步骤：S1.利用微生物对海藻进行发酵，得海藻提取物；S2.将海藻提取物与亚硒酸盐混合，得混合液A，备用；将海藻提取物与还原剂混合，得混合液B，备用；S3.将混合液A和混合液B混合，在反应温度为30～80℃、pH值为4～8的条件下反应10～120min，即得所述海藻硒肥。当海藻硒肥的平均粒径为30nm≤D＜70nm时，对作物进行叶面喷施处理；当海藻硒肥的平均粒径为70nm≤D≤120nm时，对作物进行土施处理。该海藻硒肥可以明显提高作物的种子的硒含量，尤其是有机硒的含量，还可以提高作物的种子的醇溶蛋白含量。

Description

一种海藻硒肥及其制备方法、使用方法和应用
技术领域
本发明涉及肥料技术领域，更具体地，涉及一种海藻硒肥及其制备方法、使用方法和应用。
背景技术
硒是人体必需的微量元素，被成为“长寿元素”。适当补充硒元素可以提高人体免疫力，在预防癌症和心脑血管疾病、缓解糖尿病、保护肝脏等方面均具有特殊功效。
名称为一种富硒水稻复混肥的中国专利提供了一种富硒水稻复混肥，其通过无机硒盐与其他的肥料组分的简单混合来提高大米的硒含量，但无机硒盐对提高大米中硒含量的效果较为有限。
对此，需解决现有硒肥料对提高稻米中硒含量的效果不佳的问题。
发明内容
本发明的首要目的是克服上述现有技术中硒肥料对提高稻米中硒含量的效果不佳的问题，提供一种海藻硒肥的制备方法。该海藻硒肥可以明显提高作物的种子的硒含量，尤其是有机硒的含量，还可以提高作物的种子的醇溶蛋白含量。
本发明的进一步目的是提供一种海藻硒肥。
本发明的进一步目的是提供上述海藻硒肥的使用方法。
本发明的进一步目的是提供上述海藻硒肥在制备微量元素肥料中的应用。
本发明的上述目的通过以下技术方案实现：
一种海藻硒肥的制备方法，包括如下步骤：
S1.利用微生物对海藻进行发酵，得海藻提取物；
S2.将海藻提取物与亚硒酸盐混合，得混合液A，备用；将海藻提取物与还原剂混合，得混合液B，备用；
S3.将混合液A和混合液B混合，在反应温度为30～80℃、pH值为4～8的条件下反应10～120min，即得所述海藻硒肥。
本发明的发明人通过多次研究发现，通过特定的混合方式将海藻提取物、亚硒酸盐和还原剂三者混合和在特定反应条件(反应温度、pH值和反应时间)下进行反应，得到的海藻硒肥可以提高作物的种子(如：稻米)的硒含量和醇溶蛋白的含量。其原理是：通过的特定的混合方式，亚硒酸盐被还原剂还原成为纳米硒，而在特定反应条件下，海藻提取物可以很好地交联并包裹纳米硒，形成海藻提取物--纳米硒颗粒，一方面，海藻提取物--纳米硒颗粒对纳米硒有很好地稳定作用，进而使得硒元素能很好地被作物吸收，明显提高作物的种子中硒的含量，尤其是有机硒的含量；另一方面，形成的海藻提取物--纳米硒颗粒使得硒元素不容易被土壤中的团粒结构吸附固定，海藻硒肥在土壤中的转化率更高，从而可提高作物的种子的硒含量和醇溶蛋白含量。此外，由于海藻提取物中的小分子物质 (比如，小分子海藻寡糖)属小分子的碳源，其容易被叶片吸收转化，故该海藻硒肥喷施时也可以提高作物的种子的醇溶蛋白含量。
即本发明的海藻硒肥可以明显提高作物的种子的硒含量，尤其是有机硒的含量，还可以提高作物的种子的醇溶蛋白含量。
优选地，所述步骤S1具体包括：
S11.将海藻制备成pH＝7.5～8.5的菌解底物；
S12.将微生物接种到菌解底物中，在28～32℃，180～240rpm的条件下发酵 9～24h，得发酵液，离心，收集上清液，得海藻提取物。
更为优选地，所述步骤S11的具体过程为：清洗海藻，然后按海藻:水＝1:(3～6)g/mL的量混合，再进行破碎匀浆，得匀浆液；在匀浆液中加入无机盐，然后将匀浆液的pH值调整为7.5～8.5，再高温灭菌，得菌解底物。
进一步优选地，所述无机盐在匀浆液中的浓度为：氯化钠15～30g/L，硫酸铵5～10g/L，硫酸镁0.2～0.8g/L，磷酸氢二钾1～2g/L，硫酸亚铁0.01～0.02g/L。
更为优选地，所述离心的转速为10000～12000rpm，离心时间为15～20min。
优选地，所述微生物为菌株Microbulbifer sp.SH-1。
菌株Microbulbifer sp.SH-1的保藏编号为CGMCC No.16906，其保藏、活化和培养可参照专利CN 110218667A。
优选地，所述海藻为海带或羊栖菜中的至少一种。
优选地，所述亚硒酸盐为亚硒酸钠或亚硒酸钾中的至少一种。
优选地，所述还原剂为抗坏血酸、谷胱甘肽、四氢硼酸钠、水合肼或十二烷基硫酸钠中的至少一种。
优选地，步骤S1中所述海藻提取物中海藻酸的浓度为3～10g/L，还原糖的浓度为1～6g/L。
优选地，步骤S2中所述混合液A中亚硒酸盐的浓度为25～200mmol/L。
更为优选地，步骤S2中所述混合液A中亚硒酸盐的浓度为25～100mmol/L。
优选地，步骤S2中所述混合液B中还原剂的浓度为100～300mmol/L。
更为优选地，步骤S2中所述混合液B中还原剂的浓度为150～300mmol/L。
优选地，步骤S3中所述混合液A和混合液B的体积比为1:(1～3)。
优选地，步骤S3中所述反应在反应温度为30～60℃、pH值为5～7的条件下反应20～120min。
一种海藻硒肥，通过上述制备方法制备得到。
优选地，所述海藻硒肥的平均粒径为30～120nm。
上述海藻硒肥的使用方法，当海藻硒肥的平均粒径为30nm≤D＜70nm时，对作物进行叶面喷施处理；当海藻硒肥的平均粒径为70nm≤D≤120nm时，对作物进行土施处理。
当海藻硒肥的平均粒径为30nm≤D＜70nm时，对作物进行叶面喷施处理，海藻提取物中的小分子物质(比如，小分子海藻寡糖)属小分子的碳源，其容易被叶片吸收转化，更有利于作物的种子中硒含量和醇溶蛋白含量的提高；当海藻硒肥的平均粒径为70nm≤D≤120nm时，对作物进行土施处理，硒元素不容易被土壤中的团粒结构吸附固定，海藻硒肥在土壤中的转化率更高，从而可提高作物的种子的硒含量和醇溶蛋白含量。
优选地，当海藻硒肥的平均粒径为30nm≤D≤50nm时，对作物进行叶面喷施处理；当海藻硒肥的平均粒径为80nm≤D≤120nm时，对作物进行土施处理。
优选地，所述作物为水稻、小麦或大豆中的至少一种。
上述海藻硒肥在制备微量元素肥料中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明的海藻硒肥可以明显提高作物的种子的硒含量，尤其是有机硒的含量，还可以提高作物的种子的醇溶蛋白含量。
附图说明
图1为实施例2的海藻不同发酵时间的薄层色谱分析结果图。
图2为实施例2的海藻不同发酵时间得到的海藻提取物的还原糖和海藻酸的含量变化图。
图3为实施例2混合液A不同的亚硒酸钠浓度与海藻硒肥平均粒径和Zeta 电位的关系图。
图4为实施例2混合液B不同的抗坏血酸浓度与海藻硒肥平均粒径和Zeta 电位的关系图。
图5为实施例2不同反应温度与海藻硒肥平均粒径和Zeta电位的关系图。
图6为实施例2不同搅拌反应时间与海藻硒肥平均粒径和Zeta电位的关系图。
图7为实施例2不同pH值与海藻硒肥平均粒径和Zeta电位的关系图。
图8为实施例3的海藻硒肥的傅里叶-红外光谱表征的红外光谱图。
图9为实施例3的海藻硒肥的透射电子显微镜表征的SEM图。
图10为实施例4的海藻硒肥的透射电子显微镜表征的SEM图。
图11为性能测试中施海藻硒肥的盆栽试验的实验图。
图12为性能测试中施海藻硒肥的大田试验的实验图。
具体实施方式
为了更清楚、完整的描述本发明的技术方案，以下通过具体实施例进一步详细说明本发明，应当理解，此处所描述的具体实施例仅用于解释本发明，并不用于限定本发明，可以在本发明权利限定的范围内进行各种改变。
实施例1
本实施例提供一种海藻硒肥的制备方法，包括如下步骤：
1、将海带浸泡、洗净后剪成小块，按照海带:水＝1:5(g/mL)的比例混合，使用匀浆机进行破碎匀浆。在匀浆液中加入NaCl、(NH4)2SO4、FeSO4、MgSO4和 K2HPO4，匀浆液中各无机盐的浓度如下：20g/L NaCl，10g/L(NH4)2SO4，0.6g/L MgSO4，2g/L K2HPO4，0.02g/L FeSO4；再将匀浆液的pH调整为7.5；对匀浆液进行高温灭菌后，得菌解底物；将体积分数为2％的菌株Microbulbifer sp.SH-1 接种到菌解底物中，在28℃，180rpm条件下发酵24h，得到发酵液。将发酵液在10000rpm下离心15min，去除未降解的残渣，收集上清液，即得到海藻提取物。
2、取第1步制备得到的海藻提取物，然后与亚硒酸钠混合，制备得到含有 50mmol/L亚硒酸钠的混合液A，备用；取第1步制备得到的海藻提取物，然后与抗坏血酸混合，制备得到含有200mmol/L抗坏血酸的混合液B，备用。
3、采用盐酸和氢氧化钠分别将混合液A和混合液B的pH值都调成6，然后将混合液A和混合液B按照1:1的体积比混合，在反应温度为40℃，pH值＝6 的条件下进行搅拌反应，搅拌反应时间为40min，搅拌反应结束后，即得海藻硒肥。使用激光粒度分析仪测得本实施例的海藻硒肥的平均粒径为70.59nm；Zeta 电位为-48.61mV，Zeta电位的绝对值位于40～60之间，表明该海藻硒肥具有较好的体系稳定性。
实施例2海藻硒肥制备条件与所得海藻硒肥的特性的关系探讨
调整实施例1的第1步的发酵时间，得到不同的海藻提取物，并对不同的海藻提取物分别进行薄层色谱分析(TLC)并分别测试海藻酸和还原糖的含量，结果如图1和图2所示。图1是不同发酵时间得到的海藻提取物的薄层色谱分析结果图，从图1可知，随着发酵时间的增加，条带颜色逐渐加深，高聚合度的多糖逐渐被降解为小分子的寡糖，当发酵时间为24h时，海藻提取物中的高聚合度海藻多糖较多地被降解至五糖以下的小分子寡糖。图2是不同发酵时间与得到的海藻提取物的海藻酸和还原糖的含量的关系图，从图2可知，随着发酵时间的增加，海藻提取物中海藻酸的含量逐渐下降，而还原糖的含量逐渐增加，这也说明大分子的海藻酸随着发酵时间的增加被降解为具有还原性的小分子海藻寡糖。
分别对实施例1的第2步中的混合液A的亚硒酸钠浓度、第2步中的混合液B的抗坏血酸浓度、第3步骤中的反应温度、第3步骤中的搅拌反应时间、第3步骤中的pH值进行调整，并探讨不同的条件的改变与最后得到的海藻硒肥的平均粒径的关系。其中，在其他条件相同的情况下，分别将混合液A的亚硒酸钠浓度调整为25mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、150mmol/L和200mmol/L，制备得到不同平均粒径的海藻硒肥；在其他条件相同的情况下，分别将混合液B 的抗坏血酸浓度调整为100mmol/L、150mmol/L、200mmol/L、250mmol/L和300mmol/L，制备得到不同平均粒径的海藻硒肥；在其他条件相同的情况下，分别将反应温度调整为30℃、40℃、60℃、80℃和90℃，制备得到不同平均粒径的海藻硒肥；在其他条件相同的情况下，分别将搅拌反应时间调整为5min、10min、20min、40min、80min和120min，制备得到不同平均粒径的海藻硒肥；在其他条件相同的情况下，分别将pH值调整为4、5、6、7和8，制备得到不同平均粒径的海藻硒肥。
混合液A的亚硒酸钠浓度、混合液B的抗坏血酸浓度、反应温度、搅拌反应时间和pH值与最后得到的海藻硒肥的平均粒径的关系如图3～7所示。其中，图3是混合液A的亚硒酸钠浓度与海藻硒肥的平均粒径的关系图，图4是混合液B的抗坏血酸浓度与海藻硒肥的平均粒径的关系图，图5是反应温度与海藻硒肥的平均粒径的关系图，图6是搅拌反应时间与海藻硒肥的平均粒径的关系图，图7是pH值与海藻硒肥的平均粒径的关系图。从图3～7可知，当其他条件不变时，当混合液A的亚硒酸钠浓度在25～100mmol/L时、或当混合液B的抗坏血酸浓度在150～300mmol/L时、或当反应温度在30～60℃时、或当反应时间在 20～120min时、或当pH值在5～7时，制得的海藻硒肥具有较小的平均粒径和较好的体系稳定性。
实施例3
本实施例提供一种海藻硒肥的制备方法，其与实施例1的不同之处在于：混合液A的亚硒酸钠浓度为70mmol/L，混合液B的抗坏血酸浓度为270mmol/L，第3步的pH值为5，第3步的反应温度为32℃，第三步的搅拌反应时间为20min，其余制备步骤及制备条件与实施例1相同。采用傅里叶-红外光谱(FI-IR)和透射电镜(TEM)对本实施例得到的海藻硒肥进行表征，结果如图8和图9所示。图8是海藻硒肥的红外谱图，从图8可知，海藻提取物与海藻硒肥的吸收峰高度相似，在谱图中，波数为3436.98cm-1的吸收峰属于O-H伸缩振动产生的强吸收峰，波数为1637.48cm-1的吸收峰属于C＝O不对称伸缩振动产生的吸收峰，波数为676.98cm-1的吸收峰属于C-H弯曲振动产生的吸收峰。但海藻提取物与海藻硒肥的吸收峰也有区别，海藻硒肥在1415.68cm-1处出现了新的吸收峰，以上结果表明海藻硒肥成功合成。图9是海藻硒肥的SEM图，从图9可知，海藻硒肥的颗粒分布均匀，其粒径基本在50nm左右。使用激光粒度分析仪测得本实施例的海藻硒肥的平均粒径为48.94nm；Zeta电位为-52.17mV，表明制备得到的海藻硒肥具有较好的体系稳定性。
实施例4
本实施例提供一种海藻硒肥的制备方法，其与实施例1的不同之处在于：第1步的发酵时间为12h，其余制备步骤及制备条件与实施例1相同。采用透射电镜(TEM)对本实施例得到的海藻硒肥进行表征，其结果如图10所示，海藻硒肥的颗粒分布均匀，其粒径基本在100nm左右。使用激光粒度分析仪测得本实施例的海藻硒肥的平均粒径为96.67nm；Zeta电位为-43.83mV，表明制备得到的海藻硒肥具有较好的体系稳定性。
对比例1
本对比例提供一种对比海藻硒肥的制备方法，包括如下步骤：
取实施例1第1步制备得到的海藻提取物，将其pH值调成6，然后同时往海藻提取物加入亚硒酸钠和抗坏血酸，得含有25mmol/L亚硒酸钠和100mmol/L 抗坏血酸的混合反应液；混合反应液在反应温度为40℃，pH值＝6的条件下进行搅拌反应，搅拌反应时间为40min，搅拌反应结束后，即得对比海藻硒肥。该对比例制备得到的对比海藻硒肥的平均粒径为178.35nm；对比海藻硒肥的Zeta电位为-21.84mV，Zeta电位的绝对值远超出40～60的范围，表明对比海藻硒肥的体系稳定性较差。
性能测试
1、土施海藻硒肥的盆栽试验验证
挑选大小一致的水稻(天优998)种子，先用体积浓度为30％的H2O2消毒 15min，用去离子水冲洗3次后，于培养皿中催芽，催芽室温条件为25℃/14h 光照和20℃/10h黑暗，发芽7天后，将水稻幼苗移栽至1/2Kimura营养液中培养，用2mmol/L的MES缓冲液保持营养液pH值在5.5～6.0，营养液每3天更换一次。水稻幼苗长至三叶一心时将水稻秧苗移栽至装有7kg供试土壤的塑料盆中，其土壤风干并过2mm的筛子，其碱解氮含量100.56mg/kg，速效磷含量 45.82mg/kg，速效钾含量105.38mg/kg，有机质含量18.67g/kg，全硒0.038mg/kg， pH＝6.45。在移栽前，将海藻硒肥/亚硒酸钠喷洒在土壤上，并搅拌均匀，以确保海藻硒肥/亚硒酸钠在土壤中均匀分布。每盆移栽3株，移栽后每盆浇水500mL，之后每盆隔天浇水200mL。设置以下空白组、实验组和对照组：
A：空白组，喷施清水；
A＇：对照组，土施实施例1第1步得到的海藻提取物，海藻提取物的用量为2mL/kg；
B：实验组，土施实施例3的海藻硒肥，海藻硒肥的用量为0.5mg/kg；
C：实验组，土施实施例3的海藻硒肥，海藻硒肥的用量为2mg/kg；
D：实验组，土施实施例4的海藻硒肥，海藻硒肥的用量为0.5mg/kg；
E：实验组，土施实施例4的海藻硒肥，海藻硒肥的用量为2mg/kg；
F：对照组，土施亚硒酸钠，亚硒酸钠的用量为0.5mg/kg；
G：对照组，土施亚硒酸钠，亚硒酸钠的用量为2mg/kg。
各空白组、实验组和对照组的实验图如图11所示。
在成熟期收获水稻，并按照国家标准GB5009.93-2017采用氢化物发生-原子荧光光度法测定水稻籽粒(稻米)总硒含量，有机硒含量测定根据Wang等 (Generation ofselenium-enriched rice with enhanced grain yield,selenium content andbioavailability through fertilization with selenite,Wang YD,Wang X,Wong YS,Food Chemistry,2013,141(3):2385-2393.)的方法，采用考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量，结果如表1所示。
表1土施的空白组、实验组和对照组的水稻籽粒中的硒含量和蛋白质含量
注：表1中，同一列的检测结果中的不同小写字母代表不同处理间数值的显著差异， P<0.05。
从表1可知，水稻籽粒中的硒含量均随着施硒浓度的增加而增加，且与同一浓度的亚硒酸钠处理相比(如，B和D分别与F相比、C和E分别与G相比)，海藻硒肥处理的水稻籽粒总硒含量都有明显提高(比如，B相对F提高了0.28 倍、D相对F提高了0.50倍、C相对G提高了1.75倍、E相对G提高了2.23倍)，有机硒含量也都有明显提高(比如，B相对F提高了0.31倍、D相对F提高了 0.56倍、C相对G提高了1.75倍、E相对G提高了2.42倍)。此外，在同一浓度下，采用本发明实施例的海藻硒肥处理得到的水稻籽粒中的醇溶蛋白含量相对亚硒酸钠处理的也有提高，其中，在同一浓度下，采用实施例4的平均粒径较大的海藻硒肥进行处理，得到的水稻籽粒中的醇溶蛋白含量提高更为明显。
2、叶面喷施海藻硒肥的大田效果验证
在广州市增城区某实验基地进行了水稻种植试验，试验土壤的基本理化性质为：碱解氮121.97mg/kg，速效磷30.61mg/kg，速效钾83.21mg/g，有机质18.64g/kg，总硒0.059mg/kg，pH＝6.25，种植水稻品种为“野丰占”。设置以下空白组、实验组和对照组：
A1：空白组，喷施清水；
A2：对照组，喷施实施例1第1步得到的海藻提取物，海藻提取物的用量为5mL/L；
B1：实验组，喷施实施例3的海藻硒肥，海藻硒肥的浓度为5mg/L；
C1：实验组，喷施实施例3的海藻硒肥，海藻硒肥的浓度为25mg/L；
D1：实验组，喷施实施例4的海藻硒肥，海藻硒肥的浓度为5mg/L；
E1：实验组，喷施实施例4的海藻硒肥，海藻硒肥的浓度为25mg/L；
F1：对照组，喷施亚硒酸钠，亚硒酸钠的浓度为5mg/L；
G1：对照组，喷施亚硒酸钠，亚硒酸钠的浓度为25mg/L。
各空白组、实验组和对照组的实验图如图12所示。
A2、B1～G1喷施的方法如下：在水稻灌浆期间进行喷施处理一次，每公顷用量3000L。空白组、实验组和对照组的基肥、追肥、病虫害等均按照当地常规方式统一管理。收获后按国家标准GB5009.93-2017采用氢化物发生-原子荧光光度法测定样品总硒含量，有机硒含量测定根据Wang等(Generation of selenium-enriched rice with enhancedgrain yield,selenium content and bioavailability through fertilization withselenite,Wang YD,Wang X,Wong YS,Food Chemistry,2013,141(3):2385-2393.)的方法，采用考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量，结果如表2所示。
表2喷施的空白组、实验组和对照组的水稻籽粒中的硒含量和蛋白质含量
注：表2中，同一列的检测结果中的不同小写字母代表不同处理间数值的显著差异， P<0.05。
从表2可知，水稻籽粒中的硒含量均随着施硒浓度的增加而增加，且25mg/L 的海藻硒肥(C1、E1)处理的硒含量已远远超过富硒标准。与同一浓度的亚硒酸钠处理相比，海藻硒肥处理的水稻籽粒的总硒含量都有所提高(比如，B1相对F1提高了0.44倍、D1相对F1提高了0.22倍、C1相对G1提高了2.26倍、 E1相对G1提高了1.77倍)，有机硒含量也都有所提高(比如，B1相对F1提高了0.56倍、D1相对F1提高了0.19倍、C1相对G1提高了2.56倍、E1相对G1提高了1.79倍)。此外，在同一浓度下，采用实施例3制备的平均粒径较小的海藻硒肥对水稻进行喷施处理时，得到的水稻籽粒中的醇溶蛋白含量高于实施例4的海藻硒肥及亚硒酸钠的处理的水稻得到的水稻籽粒的醇溶蛋白含量。
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种海藻硒肥的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1. 利用微生物对海藻进行发酵，得海藻提取物；
S2. 将海藻提取物与亚硒酸盐混合，得混合液A，备用；将海藻提取物与还原剂混合，得混合液B，备用；
S3. 将混合液A和混合液B混合，在反应温度为30~60℃、pH值为4~8的条件下反应20~120min，即得所述海藻硒肥。
2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述步骤S1具体包括：
S11. 将海藻制备成pH=7.5~8.5的菌解底物；
S12. 将微生物接种到菌解底物中，在28~32℃，180~240rpm的条件下发酵9~24小时，得发酵液，离心，收集上清液，得海藻提取物。
3. 根据权利要求1或2所述制备方法，其特征在于，所述微生物为菌株Microbulbifersp.SH-1，所述菌株Microbulbifer sp .SH-1的保藏编号为CGMCC No.16906。
4.根据权利要求1或2所述制备方法，其特征在于，所述海藻为海带或羊栖菜中的至少一种。
5.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述亚硒酸盐为亚硒酸钠或亚硒酸钾中的至少一种；所述还原剂为抗坏血酸、谷胱甘肽、四氢硼酸钠、水合肼或十二烷基硫酸钠中的至少一种。
6.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤S2中所述混合液A中亚硒酸盐的浓度为25~200mmol/L。
7.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤S2中所述混合液B中还原剂的浓度为100~300mmol/L。
8.一种海藻硒肥，其特征在于，通过权利要求1~7任一所述制备方法制备得到。
9.权利要求8所述海藻硒肥的使用方法，其特征在于，当海藻硒肥的平均粒径为30nm≤D＜70nm时，对作物进行叶面喷施处理；当海藻硒肥的平均粒径为70nm≤D≤120nm时，对作物进行土施处理。
10.权利要求8所述海藻硒肥在制备微量元素肥料中的应用。
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