CN115154580B - 一种治疗角膜血管翳的中药组合物、药物及药物制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种治疗角膜血管翳的中药组合物、药物及药物制备方法，属于中药领域。本发明治疗角膜血管翳的中药组合物包括按照重量份的如下组分：密蒙花10‑60份、黄连6‑15份、木贼草10‑30份、蔓荆子10‑20份、车前子10‑30份、瞿麦10‑60份、细辛3‑10份、干姜3‑15份、仙灵脾10‑30份，本发明还提供一种采用所述中药组合物制备的药物及药物制备方法。本发明的有益效果为：疏风清热，明目退翳。
Description
技术领域
本发明涉及中药领域，具体涉及一种治疗角膜血管翳的中药组合物，还涉及一种采用所述治疗角膜血管翳的中药组合物制备的药物及药物制备方法。
背景技术
角膜血管翳是因为角膜缺氧，外伤，炎症，对角膜基质层留下的创伤，由于基质层是不可自我修复的，所以一般浑浊区域都是无法消退的，角膜上本无血管，但因为缺氧(如佩戴隐形眼镜)等原因，角膜无法与空气直接接触，获得的氧气减少，于是结膜上的血管偏会长入角膜为其供氧以保证角膜的正常活动，血管一般会长入角膜5层中的第3层基质层，外来的血管异物会导致角膜产生损伤，角膜翳也就产生了，此时如果让角膜与空气接触，角膜血管就会停止生长，但不会消退，由于血管的进入和角膜翳的产生，角膜的屈光度发生了变化，从而视力会受到损害，如果此时角膜仍然缺氧，血管会长向瞳孔，将整个角膜包裹，从而导致失明，角膜上虽然没有血管，但是布满了丰富的神经末梢，异物的入侵会导致角膜神经处在兴奋状态，于是眼睛就容易疲劳，同时也会造成视力下降，角膜血管翳其实是人体组织自身修复系统的漏洞，角膜血管翳的手术难度较大，因为血管的切割会导致出血，从而降低手术成功率，因此，通常采用药物保守治疗。
现有医院针对角膜血管翳，通常采用西药治疗方案，比如典必殊眼药水，其是由妥布霉素跟地塞米松组合成的一种眼药水，用于眼部的炎症性病变，但是，由于地塞米松为激素类药物，长期使用对身体有一定的副作用。
发明内容
为解决现有技术中的问题，本发明提供一种治疗角膜血管翳的中药组合物，还提供一种采用所述治疗角膜血管翳的中药组合物制备的药物及药物制备方法。
本发明治疗角膜血管翳的中药组合物，包括按照重量份的如下组分：密蒙花10-60份、黄连6-15份、木贼草10-30份、蔓荆子10-20份、车前子10-30份、瞿麦10-60份、细辛3-10份、干姜3-15份、仙灵脾10-30份。
本发明作进一步改进，所述治疗角膜血管翳的中药组合物包括按照重量份的如下组分：
密蒙花20-50份、黄连9-12份、木贼草15-25份、蔓荆子13-18份、车前子15-25份、瞿麦20-50份、细辛5-8份、干姜5-12份、仙灵脾15-25份。
本发明作进一步改进，所述治疗角膜血管翳的中药组合物包括按照重量份的如下组分：
密蒙花35份、黄连10份、木贼草20份、蔓荆子15份、车前子20份、瞿麦35份、细辛6份、干姜10份、仙灵脾20份。
本发明还提供一种药物，采用所述的治疗角膜血管翳的中药组合物制备而成，所述药物的剂型包括口服制剂或外用制剂。
本发明作进一步改进，所述药物的外用剂型包括中药熏蒸剂或眼膏剂，所述口服剂型包括汤剂、颗粒剂或丸剂。
本发明还提供一种中药熏蒸剂药物制备方法，所述药物为，所述中药熏蒸剂的制备方法为：
A1：将所述中药组合物粉碎；
A2：加适量水煎煮1次以上，并滤过，得到各次煎煮的滤液，每次煎煮时间为0.5-2小时；
A3：合并各次煎煮的滤液，高压灭菌，获取中药熏蒸剂，所述中药熏蒸剂的浓度为2.5-3.1g/mL。
本发明作进一步改进，步骤A1中，将所述中药组合物粉碎成粗粉；步骤A2中，所述煎煮次数为3次，每次煎煮时间为1.5小时，所述中药熏蒸剂的浓度为2.83g/mL。
本发明还提供一种眼膏剂的药物制备方法，所述眼膏剂的制备方法为：
B1：将所述中药组合物粉碎；
B2：加水煎煮1次以上，并滤过，得到各次煎煮的滤液，每次煎煮时间为0.5-2小时；
B3：合并各次煎煮的滤液，然后将所述滤液于60℃以下减压浓缩至室温条件下，相对密度为1.10～1.20的清膏；
B4：冷却后，加入4倍量乙醇，搅匀；
B5：静置设定时间，滤过，然后将滤液减压回收乙醇，得到浓缩液；
B6：干燥浓缩液，获得中药粉末；
B7：将中药粉末加入眼膏用凝胶，制得含有0.5％-0.75％中药粉剂的眼膏剂。
本发明作进一步改进，步骤B1中，将所述中药组合物粉碎成粗粉；步骤B2中，所述煎煮次数为3次，每次煎煮时间为1.5小时。
本发明还提供一种颗粒剂的药物制备方法，所述颗粒剂的制备方法为：
C1：将中药组合物的单味中药，按照传统标准准炮制后经提取浓缩制成的、供中药配方用的颗粒，所述颗粒与中药重量存在一一对应关系；
C2：取中药组合物的重量份对应的定量的单味中药颗粒，组合，制得所述中药组合物的颗粒剂。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：主要用于治疗风湿或风热上扰，浸淫血脉，内不得疏泄，外不得透达所致目翳外障，视物不清，隐痛流泪，能够有效抑制角膜新生血管生长，减少血管内皮生长因子VEGF表达。
附图说明
为了更清楚地说明本申请或现有技术中的方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一个简单介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为密蒙花抑制碱烧伤小鼠角膜新生血管生长示意图；
图2为图1各组小鼠角膜H&E染色像(×400)图；
图3为本发明通过western blot检测小鼠角膜组织中PI3K、ERK、P38和AKT蛋白表达对照图；
图4-图7为不同倍数的人角膜上皮细胞图，其中，图4为4倍，图5为10倍，图6为20倍，图7为放大40倍。
具体实施方式
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本申请技术领域的技术人员通常理解的含义相同；本文中在申请的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本申请；本申请的说明书和权利要求书及上述附图说明中的术语“包括”和“具有”以及它们的任何变形，意图在于覆盖不排他的包含。本申请的说明书和权利要求书或上述附图中的术语“第一”、“第二”等是用于区别不同对象，而不是用于描述特定顺序。
在本文中提及“实施例”意味着，结合实施例描述的特定特征、结构或特性可以包含在本申请的至少一个实施例中。在说明书中的各个位置出现该短语并不一定均是指相同的实施例，也不是与其它实施例互斥的独立的或备选的实施例。本领域技术人员显式地和隐式地理解的是，本文所描述的实施例可以与其它实施例相结合。
为了使本技术领域的人员更好地理解本申请方案，下面将结合附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。
如图1所示，本例为小鼠裂隙灯下角膜照片，采用NaOH建立的小鼠碱烧伤角膜新生血管(CNV)动物模型，然后分别采用典必殊眼药水(C组)、单味中药低剂量密蒙花灌胃给药(D组)、单味中药高剂量密蒙花灌胃给药(E组)，其中，A组为正常小鼠角膜未见CNV(角膜新生血管)；B组第14天模型组小鼠角膜可见大量CNV(角膜新生血管)，CNV达角膜中央区，相互吻合；C组为典必殊眼药水治疗组和D、E组密蒙花治疗组CNV血管面积较模型组缩小。因此，可知，单味中药密蒙花灌胃给药，可以有效抑制CNV生长，减少VEGF(刺激新生血管产生的生物因子)表达，上调CNV小鼠角膜组织中Fas/FasL表达。
如图2所示，针对图1各组的小鼠角膜H&E染色像(×400)可知，①为正常角膜结构完整，基质层无CNV；②为模型组角膜基质层可见大量CNV；③为对照组(典必殊眼药水)、④为密蒙花低剂量组、⑤为密蒙花高剂量组，通过密蒙花灌胃给药后，CNV数量较模型组均减少，管腔亦缩小。
本实验中，密蒙花缩小小鼠角膜CNV面积的效果见下表1，可见，与模型组相比，★P＜0.01；与对照组(典必殊眼药水)相比△P＞0.05。本例单味中药密蒙花治疗效果与对照组(典必殊眼药水)无统计学差异。
表1密蒙花缩小小鼠角膜CNV面积
本发明在前期通过大量实验证实密蒙花可以有效治疗NaOH所致的小鼠碱烧伤角膜新生血管(CNV)的基础上，在中医理论指导下，形成本发明的中药配方。
具体的，本发明治疗角膜血管翳的中药组合物，包括按照重量份的如下组分：密蒙花10-60份、黄连6-15份、木贼草10-30份、蔓荆子10-20份、车前子10-30份、瞿麦10-60份、细辛3-10份、干姜3-15份、仙灵脾10-30份。
本发明主治：风湿或风热上扰，浸淫血脉，内不得疏泄，外不得透达所致目翳外障，视物不清，隐痛流泪。
治法：疏风清热，明目退翳。
方解：《本草经疏》：“密蒙花为厥阴肝家正药，所主无非肝虚有热所致。盖肝开窍于目，目得血而能视，肝血虚则为青盲肤翳，肝热甚则为赤肿眵泪，赤脉，及小儿痘疮余毒，疳气攻眼。此药甘以补血，寒以除热，肝血足而诸证无不愈矣。”
方中，中药组分密蒙花清热泻火，养肝明目，退翳，为眼科专用药，故为君药。肝郁化火，配伍酒黄连，清热燥湿，泻火解毒，尤善清上焦头面部火热；木贼草疏散风热、明目退翳，蔓荆子疏散风热，清利头目，且有一定的止痛作用，助君药外散内清，明目退翳，共为臣药。肝郁气滞血瘀，水湿内停，车前子利尿通淋，清肝明目，凉血解毒，瞿麦利尿通淋，活血通经，给湿热之邪以出路；细辛辛散，祛风止痛，助君药疏散外风、止痛，同时制约清热药的寒凉之性，与干姜助阳通脉，仙灵脾补肾阳，祛风湿，既祛邪通脉，又无冰伏留瘀之弊，共为佐药。诸药合用，共达疏风清热祛湿，明目退翳的作用，祛邪兼顾扶正，外散内清，寒热并用，血脉调和，则翳去目明。
本发明可以制成口服和外用剂型，比如可以制成中药汤剂、颗粒剂、丸剂、片剂、中药饮片、胶囊剂等各种传统的口服剂型。
本配方是根据《开宝本草》记载：“密蒙花主青盲肤翳，赤涩多眵泪，消目中赤脉，小儿麸豆及疳气攻眼。”，申请人前期通过动物实验，证实密蒙花口服给药可以抑制碱烧伤角膜新生血管，据此，申请人多次进行修改及实验验证，最后确定以上述配方。在实验过程中发现，以密蒙花提取物制成眼膏剂，发现给药后，较口服给药效果更佳。
以下结合实施例和实验数据对本申请的治疗效果进行验证。
一、实施例
实施例1：口服汤药
分别取密蒙花35g、黄连10g、木贼草20g、蔓荆子15g、车前子20g、瞿麦35g、细辛6g、干姜10g、仙灵脾20g，然后，将其置于煎药壶中，加水没过各种药材，浸泡半个小时，然后煎煮半个小时，滤过，再加水煎煮两次，每次半个小时，滤过，合并滤液，最后将滤液分为三份，一天分三次服用。
本发明也可以采用传统的制剂制备方法将上述重量份的中药组合物，制备成能够一天剂量的其他传统剂型。
本发明的口服制剂除了直接取用上述各重量份的组合物，直接煎药口服外，还可以采用目前的颗粒给药方式。
实施例2：颗粒剂
所述颗粒剂的制备方法为：
C1：将中药组合物的单味中药，按照传统标准准炮制后经提取浓缩制成的、供中药配方用的颗粒，所述颗粒与中药重量存在一一对应关系；
C2：取中药组合物的重量份对应的定量的单味中药颗粒，组合，制得所述中药组合物的颗粒剂。
比如，可以直接采购中药颗粒密蒙花50g、黄连10g、木贼草25g、蔓荆子15g、车前子25g、瞿麦50g、细辛8g、干姜12g、仙灵脾25g，服用时，直接选取对应重量的中药颗粒，按照重量混合，然后通过开水冲服。
优选的，本例还可以做为外用药，直接作用与眼部，效果更佳，比如，本例可以制备成中药熏蒸剂或眼膏剂。通过熏蒸给药或直接滴入眼睛给药。
实施例3中药熏蒸剂1
中药熏蒸剂制备方法：
取中药组合物各重量份的药物，粉碎成粗粉，加1000mL水煎煮三次，每次0.5-2小时，滤过，合并滤液，高压灭菌，获取中药熏蒸剂，所述中药熏蒸剂的浓度为2.5-3.1g/mL。然后将所述中药熏蒸剂加入雾化器中，雾化至眼部。
所述中药组合物各重量份为：
密蒙花10g、黄连6g、木贼草10g、蔓荆子10g、车前子10g、瞿麦10g、细辛3g、干姜3g、仙灵脾10g，最终制备成浓度为2.50g/mL的中药熏蒸剂。
实施例3中药熏蒸剂2
取密蒙花22g、黄连8g、木贼草15g、蔓荆子12g、车前子15g、瞿麦22g、细辛5g、干姜6g、仙灵脾15g，采用实施例2制备方法制备成浓度为2.67g/mL的中药熏蒸剂。
实施例4中药熏蒸剂3
取密蒙花35g、黄连10g、木贼草20g、蔓荆子15g、车前子20g、瞿麦35g、细辛6g、干姜9g、仙灵脾20g，采用实施例2制备方法制备成浓度为2.83g/mL的中药熏蒸剂。
实施例5中药熏蒸剂4
取密蒙花47g、黄连13g、木贼草25g、蔓荆子18g、车前子25g、瞿麦47g、细辛8g、干姜12g、仙灵脾25g，采用实施例2制备方法制备成浓度为2.96g/mL的中药熏蒸剂。
实施例6中药熏蒸剂5
取密蒙花60g、黄连15g、木贼草30g、蔓荆子20g、车前子30g、瞿麦60g、细辛10g、干姜15g、仙灵脾30g，采用实施例2制备方法制备成浓度为3.1g/mL的中药熏蒸剂。
实施例3-6为了实验的一致性，加水量及加水煎煮次数、煎煮时间均在一定误差范围内。可以认为的是，本例的加水量及加水煎煮次数、煎煮时间不局限于上述实施例，可以根据自身需求调整。
实施例7眼膏剂1
所述眼膏剂的制备方法为：
B1：将重量份的中药组合物粉碎成粗粉；
B2：加1000mL水煎煮多次，并滤过，得到各次煎煮的滤液，每次煎煮时间为0.5-2小时；
B3：合并各次煎煮的滤液，然后将所述滤液于60℃以下减压浓缩至室温条件下，相对密度为1.10～1.20的清膏；
B4：冷却后，加入4倍量乙醇，搅匀；
B5：静置设定时间，滤过，然后将滤液减压回收乙醇，得到浓缩液；
B6：干燥浓缩液，获得中药粉末；
B7：将中药粉末加入眼膏用凝胶，制得含有0.5％-0.75％中药粉剂的眼膏剂。
本例的煎煮次数为3次，每次煎煮时间为1.5小时。步骤B7中，眼膏用凝胶采用的为卡波姆凝胶。
本例所述中药组合物各重量份为：
密蒙花10g、黄连6g、木贼草10g、蔓荆子10g、车前子10g、瞿麦10g、细辛3g、干姜3g、仙灵脾10g，最终制备成含有0.5％-0.75％中药粉剂的眼膏剂。
实施例8眼膏剂2
取密蒙花60g、黄连15g、木贼草30g、蔓荆子20g、车前子30g、瞿麦60g、细辛10g、干姜15g、仙灵脾30g，采用实施例7制备方法制备成含有0.5％-0.75％中药粉剂的眼膏剂。
实施例7-8为了实验验证的一致性，加水量及加水煎煮次数、煎煮时间均在一定误差范围内。可以认为的是，本例的加水量及加水煎煮次数、煎煮时间不局限于上述实施例，可以根据自身需求调整。
二、实验数据
采用NaOH所致的小鼠碱烧伤角膜新生血管(CNV)，采用实施例1的配方(以下称密蒙花方)，制备口服药物浓度分别为0.83g·kg-1和1.67g·kg-1的药物，然后，根据小鼠的体重选择适应的药量对小鼠灌胃给药方式，连续给药15天，结果显示，中医复方“密蒙花方”可以有效抑制CNV生长。相关结果如下：
(1)密蒙花方下调碱烧伤小鼠外周血中CXCL12和CXCR4表达
表2密蒙花方对碱烧伤小鼠外周血中CXCL12和CXCR4表达的影响
通过表2可知，与模型组相比，★P＜0.05；与阴性对照组相比△P＜0.05；与阳性对照组相比，#P＜0.05；密蒙花组间相比P＞0.05。与正常组相比，模型组和阴性对照组CXCL12和CXCR4表达明显升高，P＜0.01，有显著性差异。其中，P为统计结果，当P<0.05，说明统计有差异，治疗有效。本实验数据可以证明，经密蒙花方治疗后，CXCL12和CXCR4表达明显下降，比阳性对照组和与阳性对照效果无统计学差异的单味密蒙花相比，本配方效果显著。
(2)密蒙花方下调碱烧伤小鼠角膜组织中VEGFA mRNA表达
表3密蒙花方对碱烧伤小鼠角膜组织中VEGFA mRNA表达的影响
通过表3可知，与模型组相比，★P＜0.05；与阴性对照组相比△P＜0.05；与正常组相比，模型组和阴性对照组VEGFA mRNA表达明显升高，P＜0.01，有显著性差异。经密蒙花治疗后，VEGFA mRNA表达明显下降，且密蒙花方各治疗组和阳性对照组间差异均不明显，能够达到现有治疗方案阳性对照组的治疗效果。
(3)密蒙花方下调碱烧伤小鼠角膜组织中CXCL12和CXCR4 mRNA表达
表4密蒙花对碱烧伤小鼠角膜组织中CXCL12和CXCR4 mRNA表达的影响
通过表4可知，与模型组相比，★P＜0.05；与阴性对照组相比△P＜0.05；与阳性对照组相比，#＜0.05；密蒙花组间相比◇P＜0.05。与正常组相比，模型组和阴性对照组CXCL12和CXCR4表达明显升高，P＜0.01，有显著性差异。经密蒙花治疗后，CXCL12和CXCR4表达明显下降，且这种抑制作用呈浓度正相关。对于CXCL12表达，密蒙花治疗效果与阳性对照组更优，而对于CXCR4表达，密蒙花高剂量组与阳性对照组治疗效果相比，阳性对照组为6.04±0.23，而本发明是3.04±0.25，抑制效果成倍增加，因此，本发明针对该方面的抑制效果，表现更佳。
(4)密蒙花方下调碱烧伤小鼠角膜组织中PI3K、ERK、P38和AKT蛋白表达
表5密蒙花方对碱烧伤小鼠角膜组织中PI3K、ERK、P38和AKT蛋白表达的影响
通过表5可知，与模型组相比，★P＜0.05；与阴性对照组相比△P＜0.05；与正常组相比，模型组和阴性对照组PI3K、ERK、P38和AKT蛋白表达明显升高，P＜0.05，有显著性差异。经密蒙花方治疗后，PI3K、ERK、P38和AKT蛋白表达明显下降，与模型组和阴性对照组相比P＜0.05有显著性差异。然而，和阳性对照组相比，密蒙花方治疗组及组间差异均不明显，说明本发明与阳性对照组治疗效果相当。
通过western blot检测小鼠角膜组织中PI3K、ERK、P38和AKT蛋白表达，如图3所示，其中，1表示模型组，2表示阴性对照组，3和4表示密蒙花方治疗组(浓度分别为0.83、1.67g·kg-1)，5表示阳性对照组，6表示正常组。
如图4-7所示，为了验证对人眼角膜血管翳的治疗效果，本例通过培养人角膜上皮细胞，采用实施例1的中药配方制备的含药血清，制得五组不同剂量的密蒙花方药物组，验证本发明的有效性。本例含药血清的制备方法为：选取适当体重和周龄的大鼠或者小鼠，根据人和大鼠小鼠的体表面积给药等效比例换算进行给药，可以分为高中低剂量组，空白对照组给与等体积的蒸馏水。每日一次，按照自己所需的时间连续给药，末次给药1h后，麻醉，腹主动脉或者股动脉取血。室温条件下放置2h，离心(离心时间为4℃，3000r/min，20min)分离血清，收集同组血清并且进行灭活。当体外实验需要含药血清时，按照自己设置的浓度将含药血清融入培养基加入到板孔中进行作用。
具体实验数据如下：
(1)建立CXCL12转染人角膜上皮细胞模型
表6CXCL12转染浓度对人角膜上皮细胞分泌VEGF表达的影响
注:与空白对照组相比，★P＜0.05；★★P＜0.01。
三、实验结论
通过实验数据可知，本发明不仅能够有效抑制新生血管化HCEC细胞(人角膜上皮细胞)分泌VEGF、CXCR4蛋白、VEGFAmRNA、CXCR4 mRNA的表达，还能够有效降低CXCL12转染人角膜上皮细胞VEGFA蛋白表达，从而能够有效抑制角膜新生血管生长，减少血管内皮生长因子VEGF表达，有效的抑制角膜血管翳的生成，并且，综合治疗效果优于现有的西药治疗方案。
以上所述之具体实施方式为本发明的较佳实施方式，并非以此限定本发明的具体实施范围，本发明的范围包括并不限于本具体实施方式，凡依照本发明所作的等效变化均在本发明的保护范围内。
Claims (10)
1.一种治疗角膜血管翳的中药组合物，其特征在于：所述治疗角膜血管翳的中药组合物由如下重量份的组分组成：
密蒙花10-60份、黄连6-15份、木贼草10-30份、蔓荆子10-20份、车前子10-30份、瞿麦10-60份、细辛3-10份、干姜3-15份、仙灵脾10-30份。
2.根据权利要求1所述的治疗角膜血管翳的中药组合物，其特征在于：所述治疗角膜血管翳的中药组合物由如下重量份的组分组成：
密蒙花20-50份、黄连9-12份、木贼草15-25份、蔓荆子13-18份、车前子15-25份、瞿麦20-50份、细辛5-8份、干姜5-12份、仙灵脾15-25份。
3.根据权利要求1所述的治疗角膜血管翳的中药组合物，其特征在于：所述治疗角膜血管翳的中药组合物由如下重量份的组分组成：
密蒙花35份、黄连10份、木贼草20份、蔓荆子15份、车前子20份、瞿麦35份、细辛6份、干姜10份、仙灵脾20份。
4.一种药物，其特征在于：采用权利要求1-3任一项所述的治疗角膜血管翳的中药组合物制备而成，所述药物的剂型包括口服制剂或外用制剂。
5.根据权利要求4所述的药物，其特征在于：所述药物的外用剂型包括中药熏蒸剂或眼膏剂，所述口服剂型包括汤剂、颗粒剂或丸剂。
6.一种药物制备方法，所述药物为权利要求5所述的中药熏蒸剂，其特征在于：所述中药熏蒸剂的制备方法为：
A1：将所述中药组合物粉碎；
A2：加适量水煎煮1次以上，并滤过，得到各次煎煮的滤液，每次煎煮时间为0.5-2小时；
A3：合并各次煎煮的滤液，高压灭菌，获取中药熏蒸剂，所述中药熏蒸剂的浓度为2.5-3.1g/mL。
7.根据权利要求6所述的药物制备方法，其特征在于：步骤A1中，将所述中药组合物粉碎成粗粉；步骤A2中，所述煎煮次数为3次，每次煎煮时间为1.5小时，所述中药熏蒸剂的浓度为2.83g/mL。
8.一种药物制备方法，所述药物为权利要求5所述的眼膏剂，其特征在于：所述眼膏剂的制备方法为：
B1：将所述中药组合物粉碎；
B2：加适量水煎煮1次以上，并滤过，得到各次煎煮的滤液，每次煎煮时间为0.5-2小时；
B3：合并各次煎煮的滤液，然后将所述滤液于60℃以下减压浓缩至室温条件下，相对密度为1.10～1.20的清膏；
B4：冷却后，加入4倍量乙醇，搅匀；
B5：静置设定时间，滤过，然后将滤液减压回收乙醇，得到浓缩液；
B6：干燥浓缩液，获得中药粉末；
B7：将中药粉末加入眼膏用凝胶，制得含有0.5%-0.75%中药粉剂的眼膏剂。
9.根据权利要求8所述的药物制备方法，其特征在于：步骤B1中，将所述中药组合物粉碎成粗粉；步骤B2中，所述煎煮次数为3次，每次煎煮时间为1.5小时。
10.一种药物制备方法，所述药物为权利要求5所述的颗粒剂，其特征在于：所述颗粒剂的制备方法为：
C1：将中药组合物的单味中药，按照传统标准准炮制后经提取浓缩制成的、供中药配方用的颗粒，所述颗粒与中药重量存在一一对应关系；
C2：取中药组合物的重量份对应的定量的单味中药颗粒，组合，制得所述中药组合物的颗粒剂。
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| 密蒙花对小鼠碱烧伤角膜新生血管内皮生长因子表达的影响;沈志华 等;中国中医眼科杂志;26(03);161-165 * |
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