CN115073772B - 一种乳铁蛋白阳离子淀粉球及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于医药研究技术领域，涉及一种乳铁蛋白阳离子淀粉球及其制备方法。乳铁蛋白阳离子淀粉球的制备方法包括以下步骤：(1)制备丙酸酯直链淀粉；(2)制备丙酸酯醛基直链淀粉；(3)制备乳铁蛋白接枝的丙酸酯直链淀粉；(4)制备乳铁蛋白阳离子淀粉球。本发明使用阳离子淀粉和乳铁蛋白丙酸酯淀粉混合交联形成乳铁蛋白阳离子淀粉球，孔隙静电吸附γ‑羟丁酸钠，内部淀粉条带负载丙泊酚，载体借助靶头结合受体停泊于血脑屏障表面。通过“一靶、二触、三缓释”策略缓释亲疏水γ‑氨基丁酸双药，实现长时程微量提高GABA神经传导，以达到改善1型糖尿病认知功能障碍认知的作用。

Description

一种乳铁蛋白阳离子淀粉球及其制备方法
技术领域
本发明属于医药研究技术领域，涉及一种乳铁蛋白阳离子淀粉球及其制备方法，具体涉及一种乳铁蛋白阳离子淀粉球及利用该乳铁蛋白阳离子淀粉球制备得到的乳铁蛋白-纳米螺旋簇-丙泊酚/γ-羟丁酸钠及其制备方法、用途。
背景技术
1型糖尿病是由胰岛素绝对缺乏引起，以高血糖为特征的代谢紊乱，多通过自身免疫机制介导，仅占糖尿病人群5-10％，所受关注度显著低于2型糖尿病，但1型糖尿病认知功能障碍(Type 1 Diabetes Associated Cognitive Impairment，T1DACI)发病年龄早且程度重，30-40岁即可进展为认知功能障碍(Diabetes Associated Cognitive Impairment，DACI)，表现为智力、精神运动效率和认知灵活性等下降，比2型糖尿病患者痴呆风险高28％，是非糖尿病患者死亡风险的3倍。既往1型糖尿病患者60％寿命小于60岁，随着血糖监测、胰岛素制剂、非胰岛素降糖药物、胰腺移植、免疫治疗、干细胞替代等血糖管理技术的进步，1型糖尿病患者预期寿命逐年提高，但T1DACI发生率逐年上升。因此，在现有血糖管理技术基础上，探求T1DACI中枢神经保护新策略成为亟待解决的重要临床问题。
T1DACI发病机制复杂，尚未完全阐明，但中枢抑制性γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyrate，GABA)神经递质降低，兴奋性谷氨酸(Glutamate，Glu)神经递质相对增高是其重要特征之一。1型糖尿病慢性高血糖和反复发作性低血糖使体内产生氧化应激、炎症反应，诱发线粒体凋亡自噬，ATP生成减少，导致神经元细胞坏死、血脑屏障(Blood BrainBarrier，BBB)受损；影响Glu细胞膜质子泵功能，Glu回收障碍，堆积引起兴奋性毒性；GABA神经元细胞坏死、凋亡，GABA生成减少，同时多数1型糖尿病患者谷氨酸脱羧酶抗体(Anti-Glutamic Acid Decarboxylase，Anti-GAD)阳性，抑制Glu转化为GABA，进一步降低GABA生成。因此，T1DACI的谷氨酰胺-谷氨酸/γ-氨基丁酸(Gln-Glu/GABA)循环失衡，表现为GABA神经递质减少的认知障碍，增强中枢GABA神经功能有望减轻T1DACI。
为提高中枢GABA含量，国内外研制了多种GABA制剂，但却难以提高脑内GABA含量：①直接口服富含GABA的食物、药物，可以降低神经炎症、凋亡、自噬，从而减轻毒素或损伤引起的神经变性性疾病，延缓神经退行性疾病发展，改善记忆和大脑认知功能的表现，但该效应依赖于调整肠神经系统、迷走神经，不增加脑内GABA水平。②将GABA结合胞质转导肽，静脉注射可提高BBB通透率，显著提高小鼠脑组织中的GABA水平，但免疫原性高易被肝脏清除，分子量小易被肾脏滤过，无脑靶向功能，在BBB更完善的大鼠模型中GABA脑浓度提升却不显著。③与GABA溶液相比，腹腔注射聚合物GABA纳米载体也未显著提高皮层GABA浓度。GABA是一种亲水小分子两性离子，外源性给予GABA难以通过BBB进入大脑，并且在BBB处GABA外流率比内流率高16倍，使得脑内GABA含量和血浆GABA水平之间难以实现剂量-反应关系。因此，即使采用修饰、载体的方式，GABA制剂BBB通透率仍然低，需采用GABA前体及受体激动剂方式，提高脑内GABA含量。
GABA前体及受体激动剂为镇静麻醉药物，具有镇静麻醉和神经保护双重作用，但也具有呼吸、循环抑制的副作用，以γ-羟丁酸钠(γ-sodium hydroxybutyrate，GHB)、丙泊酚(Propofol，Pro)为例。①GHB：为GABA前体及GABAB受体激动剂，可通过γ-转氨酶转化为GABA，通过GHB、GABA两种形态与GABAB受体结合，诱导突触后膜去极化，改善记忆，抗焦虑，神经保护等。然而，GHB为带负电的亲水小分子药物，与脂溶性Pro相比，GHB的BBB通透率相对低，全麻诱导静注量极大，为Pro的30-40倍，需要20-30min才充分起效，60-90min后苏醒，个别患者需要4-5h才苏醒，无法适应快节奏的临床麻醉需求，同时具有心动过缓、呼吸抑制等副作用。②Pro：为GABAA受体激动剂，可降低脑代谢、抗氧化，增强GABAA受体介导的突触传递，也可抑制Na+通道依赖的Glu释放，提高Glu摄取，降低细胞外Glu水平，改善Gln-Glu/GABA平衡，从而实现保护神经，但Pro也具有呼吸循环抑制的副作用，如直接静脉注射疏水Pro原药，无法均匀分散于亲水性的血液系统中，如液体直径大于5μm时，易引起血管栓塞；同时大量使用其脂肪乳制剂也可引起高血脂症、代谢性酸中毒、横纹肌溶解、肌红蛋白尿症、肝肿大、急性肾衰、高钾血症等Pro注射综合症症状。但是，由于GHB与Pro呼吸、循环抑制作用强，无脑靶向微量缓释功能，限制其用于减轻T1DACI，需要通过药剂改良，实现药物释放方式的减毒增效，突破镇静麻醉药用于T1DACI慢病神经保护、非麻醉神经保护的技术瓶颈。疏水性中枢神经系统(Central Nervous System，CNS)药物经亲水改性后，又会引起BBB通过率低、包材代谢不良等新的问题，如磷丙泊酚钠并不直接发挥药效，而是被碱性磷酸酶酶解成Pro后才能发挥药效，因而起效时间、清除时间延长；环糊精Pro制剂可引起注射痛、肾毒性、溶血症、致癌效应等。现有研究发现，通过超声诱导微泡瞬时物理打开BBB的方法，可提高Pro通透效率，但需要借助超声设备，且缺少药剂的脑靶向，半衰期较长，约为30min。
基于以上研究现况，实现GHB与Pro治疗T1DACI的技术瓶颈为：①需要GHB与Pro基本同时作用于脑实质，以实现亲疏水双药协同的减毒增效；②需脑靶向给药，提高BBB通过率，以实现减毒增效，降低呼吸、循环抑制等剂量相关并发症，③需要微量长时缓慢释放。
发明内容
鉴于以上技术问题，本发明提供以下技术方案：
本发明提供一种乳铁蛋白阳离子淀粉球的制备方法，包括以下步骤：
以直链淀粉与丙酸酐为原料进行酯化反应，得到丙酸酯直链淀粉；
将所述丙酸酯直链淀粉溶解后，在氧化剂的作用下进行氧化反应，得到丙酸酯醛基直链淀粉；
以所述丙酸酯醛基直链淀粉与乳铁蛋白为原料进行缩合反应，得到乳铁蛋白接枝的丙酸酯直链淀粉；
将阳离子淀粉与所述乳铁蛋白接枝的丙酸酯直链淀粉混合，采用反相乳液法、以环氧氯丙烷交联，得到所述乳铁蛋白阳离子淀粉球。
优选地，所述直链淀粉与丙酸酐的质量比为10000∶1～10；
所述丙酸酯醛基直链淀粉与所述乳铁蛋白的质量比为10～30∶1；
所述阳离子淀粉与所述乳铁蛋白接枝的丙酸酯直链淀粉的质量比为10～30∶1
所述环氧氯丙烷的用量为15μL～3mL。
优选地，所述酯化反应是在催化剂、80℃下充分反应4h；
所述氧化反应是以NaIO4为氧化剂，在40℃避光条件下反应2～4h；
所述缩合反应是在4℃孵育3～5h；
所述反相乳化法的具体操作过程为：将所述阳离子淀粉与所述乳铁蛋白接枝的丙酸酯直链淀粉混合，溶解，按照水油体积比1∶4～10滴入至乳化剂中，搅拌后加入所述环氧氯丙烷，在50℃反应6h，反应物分离纯化，即得。
优选地，所述阳离子淀粉是按照以下方法制备得到：将直链淀粉碱化处理后，与2,3-环氧丙基三甲基氯化铵(GTAC)混合进行开环反应，在60℃反应2～4h，得到阳离子淀粉；
其中，所述直链淀粉与所述2,3-环氧丙基三甲基氯化铵的质量比为1∶0.8。
本发明还提供一种根据上述方法制备得到的乳铁蛋白阳离子淀粉球。
本发明还提供一种乳铁蛋白-纳米螺旋簇-丙泊酚/γ-羟丁酸钠的制备方法，是向所述乳铁蛋白阳离子淀粉球的水溶液中加入丙泊酚与γ-羟丁酸钠，搅拌24h，即得。
优选地，所述乳铁蛋白阳离子淀粉球、所述丙泊酚与所述γ-羟丁酸钠的用量比为5mg∶2uL∶10mg。
本发明还提供一种根据上述方法制备得到的乳铁蛋白-纳米螺旋簇-丙泊酚/γ-羟丁酸钠。
本发明还提供了所述乳铁蛋白-纳米螺旋簇-丙泊酚/γ-羟丁酸钠在制备治疗和/或改善1型糖尿病认知功能障碍的药物中的用途。
对比现有技术，本发明的有益效果为：
1、本发明以交联阳离子淀粉球为骨架，交联乳铁蛋白，得到中间载体乳铁蛋白阳离子淀粉球，该载体是具有孔隙的结构，可静电吸附亲水GHB，在淀粉羟基与疏水Pro间范德华力，及淀粉内部O﹣H…O氢键共同作用下，淀粉条带可形成螺旋状结构，负载Pro于螺旋内部管状疏水区，并使得淀粉球内部孔隙更加紧实，实现同时稳定负载、释放GHB和Pro亲疏水双药，以满足GHB与Pro基本同时作用于脑实质；该乳铁蛋白阳离子淀粉球连接脑靶向靶头乳铁蛋白，乳铁蛋白与BBB表面受体结合，将载体停泊于BBB表面，以满足脑靶向功能。
2、乳铁蛋白阳离子淀粉球孔隙可静电吸附GHB，其内淀粉条带可负载Pro缩为螺旋状，随之淀粉球紧缩为脑靶向纳米螺旋球簇载体；静注后，其由靶头结合受体乳铁蛋白停泊于BBB表面，脑磷脂触发淀粉螺旋松散，缓释螺旋内Pro、孔隙内GHB，两药依赖BBB通透性和局部浓度梯度入脑，同时作用于GABA，实现亲疏水GABA双药协同的减毒增效，长时间微剂量提高脑内GABA含量并激活GABA能神经元，发挥中枢神经保护核心作用，辅助现有外周血糖控制策略，减轻T1DACI，降低毒副作用，为麻醉药用于治疗T1DACI提供了理论依据。
3、本发明率先将纳米技术用于麻醉围术期领域，针对脑灌注供氧不足、疏水和亲水药物脑靶向快速通过BBB、缺血脑区快速功能修复等重要临床问题，开展了疏水小分子药物丙泊酚(Pro)、亲水小分子药物γ-羟丁酸钠(GHB)、纳米线粒体脑靶向运载研究。区别于以往受体介导低效脑靶向给药，本发明提出脑靶向解螺旋通透新策略，实现了高BBB渗透性和特异性、低给药量、快速起效和恢复。
附图说明
图1是Lf-NHC-Pro/GHB透射电镜图；
图2是Lf-NHC-Pro/GHB马尔文粒度和电位表征图；
图3是Lf-NHC-IR780/Cy5载体缓慢释放亲水Cy5的变化曲线
图4是Lf-NHC-IR780/Cy5载体脑磷脂触发释放疏水IR780的变化曲线；
图5是Lf-NHC-IR780/Cy5近红外荧光小动物成像脑靶向。
具体实施方式
下面通过结合具体实施案例进一步对本发明进行进一步详细说明。各实施例及试验例中所用的设备和试剂如无特殊说明，均可从商业途径得到。这些实施案例所描述的具体实施例仅用以解释本发明而用于限定本发明。
为了更好地理解本发明而不是限制本发明的范围，在本发明中所用的表示用量、时间、百分比的所有数字、以及其他数值，在所有情况下都应理解为以词语“大约”所修饰。因此，除非特别说明，否则在说明书和所附权利要求书中所列出的数字参数都是近似值，其可能会根据试图获得的理想效果的不同而加以改变。
本发明提供一种乳铁蛋白阳离子淀粉球的制备方法，其是以阳离子淀粉、乳铁蛋白接枝的丙酸酯直链淀粉为原料，采用反相乳液法、以环氧氯丙烷交联得到。
该乳铁蛋白阳离子淀粉球可以与GHB、Pro混合，乳铁蛋白阳离子淀粉球通过孔隙静电吸附GHB，其内淀粉条带负载Pro缩为螺旋状，随之淀粉球紧缩为脑靶向纳米螺旋球簇载体。该静注后，由靶头结合受体停泊于BBB表面，脑磷脂触发螺旋松散，缓释螺旋内、孔隙内的药物，使GHB、Pro可以同时作用于脑实质，实现脑靶向给药，提高BBB通过率，并依赖BBB通透性和局部浓度梯度入脑，长时程微量提高GABA神经传导，降低T1DACI。
利用该乳铁蛋白阳离子淀粉球，本发明进一步制备得到一种乳铁蛋白-纳米螺旋簇-丙泊酚/γ-羟丁酸钠，其是向乳铁蛋白阳离子淀粉球的水溶液中加入丙泊酚与γ-羟丁酸钠，搅拌后得到。
下面结合具体实施例进行说明。
实施例1
一种乳铁蛋白阳离子淀粉球，其是按照以下方法制备得到：
阳离子淀粉制备：100mL锥形瓶中加入1g直链淀粉和30mL ddH2O溶解，加入0.5g氢氧化钠，常温碱化30min，加入0.75mL 2,3-环氧丙基三甲基氯化铵(GTAC)后置于水浴锅中60℃反应4h，反应结束后加入适量冰醋酸调节溶液pH至7，加入大量无水乙醇沉降过夜，次日弃上清取下层沉降液置于50mL离心管中，4000rpm/min离心10min，取下层沉淀加入适量无水乙醇洗涤三次，烘干研成粉末，得到阳离子淀粉；
丙酸酯直链淀粉制备：将3g直链淀粉溶解于80℃的DMSO溶液中，充分搅拌后，添加0.3ml丙酸酐和0.2ml 1-甲基咪唑，80℃下充分反应4h，使直链淀粉与丙酸酐酯化生成丙酸酯直链淀粉。反应结束后，冷却至室温，用无水乙醇、丙酮析出丙酸酯直链淀粉沉淀。去除上清，将沉淀真空抽滤，用丙酮清洗抽滤，真空烘干，研磨成粉状；
丙酸酯醛基直链淀粉制备：将丙酸酯直链淀粉溶解于醋酸钠缓冲液中2h，吸出后放入锥形瓶内，加入0.1mol/LNaIO4100 mL，丙酸酯醛直链淀粉与高碘酸钠质量比为1.5：1.0，0℃避光磁力搅拌2h；吸出溶液放入透析袋中，在大体积0.15mol/LNaCl中透析3h，再放入20mmol/LNaHCO3中透析3h；
乳铁蛋白丙酸酯直链淀粉制备：将1g丙酸酯醛基直链淀粉溶于100mL水中，加入100mg乳铁蛋白(Lf)，4℃孵育5h，置于PBS溶液中透析除去小分子杂质，冻干研磨制备乳铁蛋白丙酸酯直链淀粉；
乳铁蛋白阳离子淀粉球制备：采用反相乳液法(W/O)制备，具体包括：
油相(O)：称取0.15g Span 60加入含有30mL液体石蜡的圆形烧瓶中，置于水浴锅中60℃搅拌至溶液澄清；
水相(W)：以质量比10∶1将阳离子淀粉和乳铁蛋白-丙酸酯直链淀粉(即乳铁蛋白接枝的丙酸酯直链淀粉)溶于10mL ddH2O中。
按照体积比1∶3比例(v/v)将W相缓慢滴入O相中，高速搅拌30min，再加入15μL环氧氯丙烷交联，50℃下反应6h，反应结束后收集反应物置于50mL离心管中，4000rpm/min离心10min，取下层沉淀加入适量无水乙醇洗涤三次除去反应物，烘干除去无水乙醇，加入10mLddH2O，置于1.5mL离心管中，14000rpm/min离心取下清，反复进行两次除去剩余Span 60，收集下清液体冻干并研磨成粉末，得到乳铁蛋白阳离子淀粉球(Lf-CSN)。
实施例2
一种乳铁蛋白阳离子淀粉球，其制备方法与实施例1的不同在于丙酸酯直链淀粉的制备过程不同，具体为：将0.3g直链淀粉溶解于80℃的DMSO溶液中，充分搅拌后，添加0.3ml丙酸酐和0.2ml 1-甲基咪唑，80℃下充分反应4h，使直链淀粉与丙酸酐酯化生成丙酸酯直链淀粉。反应结束后，冷却至室温，用无水乙醇、丙酮析出丙酸酯直链淀粉沉淀。去除上清，将沉淀真空抽滤，用丙酮清洗抽滤，真空烘干，研磨成粉状。
实施例3
一种乳铁蛋白阳离子淀粉球，其制备方法与实施例1的不同在于乳铁蛋白丙酸酯直链淀粉的制备过程不同，具体为：将3g丙酸酯醛基直链淀粉溶于100mL水中，加入100mg乳铁蛋白(Lf)，4℃孵育5h，置于PBS溶液中透析除去小分子杂质，冻干研磨制备乳铁蛋白丙酸酯直链淀粉。
实施例4
一种乳铁蛋白阳离子淀粉球，其制备方法与实施例1的不同在于乳铁蛋白丙酸酯直链淀粉的制备过程不同，具体为：将1g丙酸酯醛基直链淀粉溶于100mL水中，加入100mg乳铁蛋白(Lf)，4℃孵育3h，置于PBS溶液中透析除去小分子杂质，冻干研磨制备乳铁蛋白丙酸酯直链淀粉。
实施例5
一种乳铁蛋白阳离子淀粉球，其制备方法与实施例1的不同在于乳铁蛋白阳离子淀粉球的制备过程不同，具体是：以质量比30∶1将阳离子淀粉和乳铁蛋白-丙酸酯直链淀粉(即乳铁蛋白接枝的丙酸酯直链淀粉)溶于10mL ddH2O中。
实施例1～5制备得到的乳铁蛋白阳离子淀粉球的性能基本相同，故以下仅以实施例1制备得到的乳铁蛋白阳离子淀粉球为例进行下一步试验。
实施例6
乳铁蛋白-纳米螺旋簇-丙泊酚/γ-羟丁酸钠的制备
取实施例1制备的50mg Lf-CSN溶于10mL水中，加入20μL丙泊酚(Pro)和100mgγ-羟丁酸钠(GHB)，常温搅拌24h，静电吸附使GHB负载于淀粉球空隙内，在淀粉羟基与疏水Pro间范德华力，及淀粉内部O﹣H…O氢键共同作用下，淀粉条带形成螺旋状结构，负载Pro于螺旋内部管状疏水区，并使得淀粉球内部孔隙更加紧实，进一步稳定负载GHB与Pro，制备成脑靶向纳米螺旋球簇载体乳铁蛋白-纳米螺旋簇-丙泊酚/γ-羟丁酸钠(Lf-NHC-Pro/GHB)。
采用TEM观察形貌和粒径，马尔文粒度仪测量水合粒径和表面电位。
TEM可见(图1)其呈球形的壳-核结构，平均粒径(330.6±22.6)nm，中心的黑色核心为NHC-Pro/GHB，外层的灰色部分为Lf，壳厚度约为88nm。
马尔文粒径仪显示(图2)其水合粒径为(427.0±6.0)nm，平均电位(-23.4±0.5)mV。
实验例
Lf-NHC-亲疏水近红外外染料或荧光染料脑靶向作用
1、Lf-NHC-亲疏水近红外染料的制备与表征：
取40μL 4mg/mL Cy5溶液及50μL 10mmol/L IR780溶液滴入4mL 5mg/mL Lf-CSN溶液中，持续搅拌过夜，得到Lf-NHC-IR780/Cy5样品。按照同样的方法，用4mL ddH2O替代Lf-CSN溶液制备相同浓度的IR780/Cy5组样品。
释放曲线：分别取3mL相同染料浓度的IR780/Cy5、Lf-NHC-IR780/Cy5加入3.5kDa透析袋中，37℃、生理pH下在8h内不同时间点(0min、5min、10min、15min、20min、25min、30min、1h、2h、4h、6h、8h)提取3mL透析外液并补入3mL生理盐水，通过UV-Vis在波长647nm处建立标准曲线并测定两组Cy5亲水染料释放情况，采用荧光光谱仪在激发波长763nm，发射波长799nm处建立标准曲线并检验两组IR780疏水染料释放情况。
POPE触发释放：将Lf-NHC-IR780/Cy5样品及IR780/Cy5样品分别溶解在含20％DMSO的ddH2O中，滴入100μL包含33％POPE(磷脂酰乙醇胺)的DMSO溶液，记为Lf-NHC-IR780/Cy5+POPE组及IR780/Cy5+POPE组，并分别置于3.5kDa透析袋中，在100倍体系的生理盐水中常温搅拌透析，其余方法与上述方法一致，分别检验Lf-NHC-IR780/Cy5+POPE组、IR780/Cy5+POPE组中IR780疏水染料释放情况。评价纳米粒脑靶向缓释、控释药学性质。
如图3所示，Lf-NHC-IR780/Cy5在生理盐水中2h内快速释放约70％Cy5染料，后缓慢释放8h，表明其进入机体后有一定稳定性，不会一次性完全泄露，生理环境的离子使载体中的Cy5静电结合力逐渐变弱，表现为先速释、后缓释的过程，可持续8h。
如图4所示，Lf-NHC-IR780/Cy5在生理盐水下2h仅释放15％IR780染料，表明离子对Lf-NHC-IR780/Cy5中的IR780疏水作用力影响很小，而滴入BBB内皮细胞富含成分POPE后2h内触发快速释放75％IR780染料，后缓慢释放8h，说明IR780可通过BBB富含成分触发快速释放，原因可能是淀粉螺旋结构可与POPE反应形成氢键，螺旋自身的稳定性降低，可快速释放IR780。
以上结果表明，Lf-NHC-IR780/Cy5载体缓慢释放亲水Cy5，及脑磷脂触发释放疏水IR780，2h释放75％药物，释放可持续8h。
2、Lf-NHC-亲疏水近红外染料在体脑靶向作用：
裸鼠随机分为2组，每组6只，禁食12h，给药前称重，按照0.2mL/20g通过尾静脉分别注射上述相同染料浓度的IR780/Cy5、Lf-NHC-IR780/Cy5制剂(40μL 4mg/mL Cy5溶液及50μL 10mmol/L IR780溶液滴入4mL Lf-CSN或ddH2O后制得)，应用近红外小动物活体成像系统观察给药后30s、3min、15min、30min时亲疏水两种染料在裸鼠体内的动态分布情况，评价其脑靶向效果。
如图5所示，静脉注射等剂量IR780/Cy5、Lf-NHC-IR780/Cy5，与IR780/Cy5相比，Lf-NHC-IR780/Cy5组给药30s即出现脑内Cy5、IR780荧光分布，3min时达到峰值，持续30min，体现了脑靶向长时间低浓度的脑内递送。
以上公开的仅为本发明的具体实施例，但是，本发明实施例并非局限于此，任何本领域的技术人员能思之的变化都应落入本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种乳铁蛋白阳离子淀粉球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
以直链淀粉与丙酸酐为原料进行酯化反应，得到丙酸酯直链淀粉；
将所述丙酸酯直链淀粉溶解后，在氧化剂的作用下进行氧化反应，得到丙酸酯醛基直链淀粉；
以所述丙酸酯醛基直链淀粉与乳铁蛋白为原料进行缩合反应，得到乳铁蛋白接枝的丙酸酯直链淀粉；
将阳离子淀粉与所述乳铁蛋白接枝的丙酸酯直链淀粉混合，采用反相乳液法、以环氧氯丙烷交联，得到所述乳铁蛋白阳离子淀粉球；
所述直链淀粉与丙酸酐的质量比为10000∶1～10；
所述丙酸酯醛基直链淀粉与所述乳铁蛋白的质量比为10～30∶1；
所述阳离子淀粉与所述乳铁蛋白接枝的丙酸酯直链淀粉的质量比为10～30∶1；
所述环氧氯丙烷的用量为15μL～3ml；
所述阳离子淀粉是按照以下方法制备得到：将直链淀粉碱化处理后，与2,3-环氧丙基三甲基氯化铵混合进行开环反应，在60℃反应2～4h，得到阳离子淀粉；其中，所述直链淀粉与所述2,3-环氧丙基三甲基氯化铵的质量比为1∶0.8。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，
所述酯化反应是在催化剂、80℃下充分反应4h；
所述氧化反应是以NaIO4为氧化剂，在40℃避光条件下反应2～4h；
所述缩合反应是在4℃孵育3～5h；
所述反相乳化法的具体操作过程为：将所述阳离子淀粉与所述乳铁蛋白接枝的丙酸酯直链淀粉混合，溶解，按照水油体积比1：4～10滴入至乳化剂中，搅拌后加入所述环氧氯丙烷，在50℃反应6h，反应物分离纯化，即得乳铁蛋白阳离子淀粉球。
3.一种根据权利要求1～2任一项所述的方法制备得到的乳铁蛋白阳离子淀粉球。
4.一种乳铁蛋白-纳米螺旋簇-丙泊酚/γ-羟丁酸钠的制备方法，其特征在于，是向权利要求3所述乳铁蛋白阳离子淀粉球的水溶液中加入丙泊酚与γ-羟丁酸钠，搅拌24h，即得。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述乳铁蛋白阳离子淀粉球、所述丙泊酚与所述γ-羟丁酸钠的用量比为5mg∶2uL∶10mg。
6.一种根据权利要求4或5所述的方法制备得到的乳铁蛋白-纳米螺旋簇-丙泊酚/γ-羟丁酸钠。
7.权利要求6所述乳铁蛋白-纳米螺旋簇-丙泊酚/γ-羟丁酸钠在制备治疗和/或改善1型糖尿病认知功能障碍的药物中的用途。
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