CN115024452A - 一株植物乳杆菌及其在发酵沙棘汁中的应用 - Google Patents

一株植物乳杆菌及其在发酵沙棘汁中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)YHG1‑155及其在发酵沙棘汁中的应用。所述植物乳杆菌筛选自宁夏银川贺兰饭店的浆水中,于2022年4月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC NO.24780。本发明菌株高产β‑葡萄糖苷酶,且可耐受pH 2.0的高强度酸环境。将该菌接种到发酵沙棘汁中,最佳发酵工艺为:发酵时间10 d、料水比1:4,发酵温度30.0℃,接种量3.0%,白糖添加量6.0%。该发酵工艺下,菌株YHG1‑155始终能够保持较高的活力;相较于发酵前,发酵后的沙棘汁口感柔和细腻,酸甜适中,更易被大众所接受;与未发酵沙棘汁相比,发酵沙棘汁具有更高的总酚含量即较高的抗氧化活性,抗氧化能力TEAC值最高达到1036.28μmol/L,在作为发酵沙棘汁制作方面具有潜在的应用价值。

Description

一株植物乳杆菌及其在发酵沙棘汁中的应用
技术领域
本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一株植物乳杆菌及其在发酵沙棘汁中的应用。
背景技术
研究证明沙棘中含有190多种化合物,其中沙棘浆果是沙棘中最为重要的部分,各项研究均表明沙棘浆果的药用及营养价值极高且具有潜在健康价值,其健康益处主要包括:抗炎、抗菌、止痛、促进组织再生、增强免疫系统、预防癌症及心血管疾病,这些都与沙棘本身很高的抗氧化能力有关。沙棘多酚对沙棘抗氧化能力的贡献巨大,但沙棘多酚多以糖苷的形式存在,无法被人体直接吸收,需要进入体内后被肠道菌群转化为苷元形式,这就大大限制了沙棘多酚的吸收。研究报道β-葡萄糖苷酶可以做到将多酚化合物去糖基化转化为苷元形式,从而提高机体的生物利用度。此外,目前沙棘果主要以沙棘饮料的形式进行加工。沙棘果中高有机酸的含量,影响了消费者对沙棘汁口感的接受度。
乳酸菌本身可作为人体肠道中的益生菌,同时具备产β-葡萄糖苷酶的作用。本技术通过筛选高产β-葡萄糖苷酶乳酸菌并应用于沙棘发酵,将沙棘多酚去糖基化,从而达到提高机体的生物利用度的目的。同时沙棘经乳酸菌发酵产生乳酸的同时可降低有机酸种类及含量,进而达到提高沙棘产品口感的目的。
发明内容
本发明针对以上问题,提供了一株植物乳杆菌及其在发酵沙棘汁中的应用。将从宁夏银川贺兰浆水中筛选出来的能够高产β-葡萄糖苷酶且耐酸性较强的植物乳杆菌应用于发酵沙棘汁中,通过单因素实验、Plackett-Burman试验设计,响应面优化实验确定了沙棘汁最佳发酵工艺方案,并对该菌种、该工艺下的沙棘汁发酵过程的生化特性变化进行了研究。
本发明的目的是通过以下技术方案实现:
本发明的第一个目的是提供一株植物乳杆菌YHG1-155,分类命名为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum,已于2022年4月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC NO.24780。该菌株从宁夏银川市贺兰县饭店采集的浆水中分离得到。菌株YHG1-155主要生物学特性为:革兰氏阳性杆菌,厌氧,菌落呈圆形,光滑且凸起,边缘整齐,呈乳白色。
在本发明的一种实施方式中,所述植物乳杆菌YHG1-155高产β-葡萄糖苷酶,能够耐高酸度。
本发明的第二个目的是提供一种前述植物乳杆菌YHG1-155发酵沙棘汁的制备方法。
本发明的第三个目的是提供一种前述植物乳杆菌YHG1-155发酵沙棘汁在发酵过程中生化特性的变化规律。
有益效果:与现有技术相比较,本发明具有以下优点:
(1)菌株YHG1-155极其适合沙棘严苛的酸环境,对酸耐受性强,在pH 2时24 h、0 h的OD差值达0.302,而且高产β-葡萄糖苷酶。
(2)菌株YHG1-155在发酵沙棘汁中的应用效果良好。通过该菌株在沙棘汁中的使用,能够保持较高的菌活力,可使其活菌数在8.10-8.36 log(cfu/mL)范围内。
(3)发酵后的沙棘汁有机酸的变化使得风味得到了有效的改善。呈现苦涩感的奎宁酸和呈现酸涩感的苹果酸下降,呈现柔酸感的乳酸和酒石酸上升。发酵后的沙棘汁口感柔和细腻,酸甜适中,更易被大众所接受。
(4)与未发酵沙棘汁相比,发酵沙棘汁具有更高的总酚含量即较高的抗氧化活性,抗氧化能力TEAC值最高达到1036.28 μmol/L。
附图说明
图1示本发明的植物乳杆菌YHG1-155在光学显微镜下的菌体形态。
图2示本发明的植物乳杆菌YHG1-155的生长曲线。
图3示植物乳杆菌YHG1-155发酵沙棘汁单因素实验结果。
图4示发酵温度与接种量(A)、发酵温度与白糖添加量(B)、白糖添加量与接种量(C)对发酵沙棘汁感官评价的影响。
图5示不同发酵阶段沙棘汁活菌数。
图6示不同发酵阶段沙棘汁pH值。
图7示不同发酵阶段沙棘汁重要有机酸的变化。
图8示Trolox标准曲线。
图9示不同发酵阶段沙棘汁抗氧化指标的变化
图10示总酚标准曲线。
图11示不同发酵阶段沙棘汁总酚含量的变化。
具体实施方式
以下结合附图和实施例对本发明做进一步说明。
实施例中各项指标检测方法:乳酸菌数检测参照《GB4789.35-2016》方法进行测定;pH值参照《GB5009.237-2016》方法进行测定;抗氧化活性测定参照学者梁莎的文献《梁莎."媚丽"葡萄酒抗氧化性的研究[D].西北农林科技大学, 2012.》方法进行测定;总酚含量的测定参照学者古小露等的文献《古小露, 马嫄, 耿福能, 等. 发酵剂复配对全石榴发酵汁品质的影响[J].食品工业科技, 2017, 38(17):105-110.》方法进行测定。
其中,在发酵沙棘汁中的应用中,鲜果筛选后榨汁,过滤,加入白糖,混匀,巴氏杀菌(80℃,10min),即冷,加入一定比例的高温灭菌蒸馏水,加入活化三代的YHG1-155菌株,混匀,发酵培养。
实施例1 植物乳杆菌YHG1-155特性
该菌株从宁夏银川贺兰采集的浆水中分离得到。植物乳杆菌YHG1-155主要生物学特性为:革兰氏染色制片后显微镜观察显示菌株为革兰氏阳性菌,且菌体形态均为杆菌(图1),厌氧,菌落呈圆形,光滑且凸起,边缘整齐,呈乳白色。该菌株高产β-葡萄糖苷酶且耐酸性强,在pH 2时24 h、0 h的OD差值高达0.302。
通过16S rDNA的扩增产物进行测序,测序结果如下:
ACCGTGCCGGGGCTATCTGGCAGTCGACGAACTCTGGCATTGATTGGAGCTTGCATCATGATTTACATTTGAGTGAGTGGCGAACTGGTGAGTAACACGAGGGAAACCTGCCCACAAGCGGGGGATAACACCTGGAAACAGATGCTAATACCGCATAACAACTTGGACCGCATGGTCCGAGCTTGAAAGATGGCTTTGGCTATCACTTTTGGATGGTCCCGATGCGTATTAGCTAGATGGTGGGGTAACGGCTCACCATGGCAATGATACGTAGCCGACCTGAGAGGGTAATCGGACACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGAAGGGAATCTTCCACAATGGACGAAAGGCTGATGGAGCAACGCCACGTGAGTGAAGAAGGGTTTCAGCTCGTAAAACTCTGTTGTTAAAGAAGAACATATCTAACAGTAACTGTTCAGGTATTGACGGTATTTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCATCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGACGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCCTTCAAATCCTCCGAATAAGTGCATCAAAAACTGGGAAACTTGAGTGCTAAAAGGACAATGAAACTCCATGAGTTCCGTGTGAAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAATGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGTATGGGTAGCATACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATACCGTACACGATGAATGCTAAGAGTGGGAGGGGTTCCACCCTTCCCTGCTGCCGCTGACGCATTAAGCATTCCGCCTGGTCAGTACGGCCACTACGCTGACACTCATAGAGACTCGACGGGGTCCACCGCAGCCGGCGCAGCATGTGGATCATGTCGAAGCTACCCGAACAACCTTACCAAGCTCTTAGACATACTATGACATCTCTAACAGATTAGACGATACCCTTC
登录NCBI网站,进行Blast序列比对,结果显示菌株YHG1-155与植物乳杆菌的16SrDNA同源性达98.99%,可以鉴定该菌为植物乳杆菌。
以2.0%的接种量加入到MRS肉汤培养液中,37℃培养48 h。每隔2 h 取一次发酵液,以未接菌的MRS液体培养基作为对照,在600 nm波长处测定其吸光值,平行测定3次,得到的生长曲线图如图2所示。结果表明,植物乳杆菌YHG1-155在0-2 h处于迟滞期;6-10 h处于对数生长期,OD600迅速上升;10 h后进入稳定期,OD600生长缓慢,整体趋于平稳状态;24 h后OD600开始缓慢下降,逐渐进入衰退期。
实施例2 乳酸菌发酵沙棘汁的制备
鉴于乳酸菌在沙棘汁中发酵的案例较少,探究植物乳杆菌YHG1-155在沙棘汁发酵中的作用是非常重要的。
购买的沙棘鲜果筛选后榨汁,过滤,加入白糖,混匀,灭菌,即冷,加入一定比例的高温灭菌蒸馏水,得到沙棘汁。
由10名专业评定人员组成评定小组,分别考核发酵沙棘汁的色泽、香气、口感三个因素,分设四个等级,建立发酵沙棘汁的感官评价标准,见表1。总得分=色泽得分×0.2+香气得分×0.4+口感得分×0.4。
表1 发酵沙棘汁感官评价标准
色泽 香气 口感 分数
色泽亮丽,自然明亮,呈橙黄色 独特乳酸发酵清香,浓郁沙棘果香味 酸甜味协调,柔和适中,细腻顺滑 90-100分
色泽、光泽感一般,呈淡黄色 乳酸发酵清香味淡,沙棘果香味淡 酸甜味适宜,口感较顺滑 80-90分
色泽、光泽感不强,呈土黄色 无乳酸发酵清香味,沙棘果香味极淡 酸甜不协调,口感略粗糙 70-80分
色寡,暗淡,呈黄褐色 无乳酸发酵清香味及沙棘果香味,且刺激味严重 尖酸,口感粗糙 60-70分
(1)单因素实验
最佳料水比的确定:发酵温度30.0℃,发酵时间4 d,接种量10.0%,白糖添加量6.0%,考察不同料水比(1:1、1:2、1:3、1:4、1:5)对发酵沙棘汁品质的影响。
最佳发酵温度的确定:发酵时间4 d,料水比1:4,接种量10.0%,白糖添加量6.0%,考察不同发酵温度(26.0℃、30.0℃、34.0℃、38.0℃)对发酵沙棘汁品质的影响。
最佳接种量的确定:发酵温度30℃,发酵时间4 d、料水比1:4,白糖添加量6.0%,考察不同接种量(6.0%、8.0%、10.0%、12.0%、14.0%)对发酵沙棘汁品质的影响。
最佳发酵时间的确定:发酵温度30.0℃,料水比1:4,接种量10.0%,白糖添加量6.0%,考察不同发酵时间(4 d、6 d、8 d、10 d、12 d)对发酵沙棘汁品质的影响。
最佳白糖添加量的确定:发酵温度30.0℃,发酵时间4 d、料水比1:4,接种量10.0%,考察不同白糖添加量(2.0%、4.0%、6.0%、8.0%)对发酵沙棘汁品质的影响。
由图3可知料水比应选择在1:3-1:5为宜,最适发酵温度范围在28.0℃-32.0℃,接种量应控制在8.0%-12.0%为宜,发酵时间最适范围在8 d-12 d,白糖添加量控制在4.0%-8.0%。
(2)Plackett-Burman试验设计
在单因素实验的基础上,以发酵沙棘汁感官评价为响应值,对料水比、发酵温度、接种量、发酵时间及白糖添加量5个影响因素进行评价,筛选出主效应因子,每个因素取最低(-1)和最高(+1)两个水平,共12组实验。试验因素水平及编码见表2。
表2 Plackett-Burman 试验设计的因素水平表和编码
因素 编码 低水平(-1) 高水平(+1)
料液比 x<sub>1</sub> 1∶3 1∶5
发酵温度(℃) x<sub>2</sub> 26.0 34.0
接种量(%) x<sub>3</sub> 8.0 12.0
发酵时间(d) x<sub>4</sub> 8 12
白糖添加量(%) x<sub>5</sub> 4.0 8.0
Plackett-Burman试验设计及响应值见表3,各因素效应及显著性分析见表4。x5(白糖添加量)对发酵沙棘感官评价极显著(P<0.01);x2(发酵时间)、x3(接种量)影响显著(P<0.05),因此选择x2、x3、x5进行响应面优化试验。而x1、x4影响不显著,因此设置料水比为1:4、发酵时间为10 d。
表3 Plackett-Burman试验设计及响应值
Figure 94937DEST_PATH_IMAGE002
表4 Plackett-Burman 试验设计各因素效应评价
效应 自由度 T值 P值 显著性
A 0.150 1 0.57 0.589
B -0.737 1 -2.80 0.031 *
C -0.823 1 -3.13 0.020 *
D -0.366 1 -1.38 0.216
E 2.26 1 8.60 0.000 **
注:*表示差异显著(P<0.05),**表示差异极显著(P<0.01)。A、B、C、D、E项分别表示料水比、发酵温度、接种量、发酵时间、白糖添加量。
(3)响应面优化实验
根据Plackett-Burman试验设计结果,选取发酵温度、接种量及白糖添加量3个因素,进行三因素三水平的Box-Behnken实验设计(表5)。采用Design-Expert 10.0.1对Box-Behnken 试验设计结果进行多项拟合回归建立数学回归模型。
表5 响应面实验因素水平表
Figure 949760DEST_PATH_IMAGE004
Box-Behnken试验设计及结果见表6。
表6 Box-Behnken 试验设计及结果
Figure 729497DEST_PATH_IMAGE006
采用Design-Expert 10.0.1对表6中的试验数据进行多项拟合回归,得到两因素间对沙棘感官评价得分的3D响应面图(图4),并获得沙棘感官评价得分(Y)对发酵温度(A)、接种量(B)、白糖添加量(C)的二次多项回归方程:Y=92.14+0.27A-0.42B-0.17C+1.09AB+1.30AC-0.18BC-4.33A2-4.62B2-4.81C2
对回归模型进行方差分析,结果见表7。
表7 回归模型方差分析
方差来源 平方和 自由度 均方 F值 P值 显著性
A 0.57 1 0.57 6.26 0.0409 *
B 0.95 1 0.95 10.41 0.0145 *
C 0.15 1 0.15 1.64 0.2416
AB 4.73 1 4.73 51.73 0.0002 *
AC 6.73 1 6.73 73.64 < 0.0001 **
BC 0.067 1 0.067 0.73 0.4216
A<sup>2</sup> 64.42 1 64.42 704.43 < 0.0001 **
B<sup>2</sup> 73.33 1 73.33 801.84 < 0.0001 **
C<sup>2</sup> 79.31 1 79.31 867.27 < 0.0001 **
模型 339.16 9 37.68 412.09 < 0.0001 **
残差 0.64 7 0.091
失拟项 0.19 2 0.093 1.03 0.4235
纯误差 0.45 5 0.091
总和 339.8 16
注R2=0.9981,RAdj 2=0.9957,CV=0.35。*表示差异显著(P<0.05),**表示差异极显著(P<0.01)。A、B、C分别表示发酵温度、接种量、白糖添加量。
由表7可知,该回归模型达到极显著水平(P<0.01),失拟项不显著(P>0.05),模型总决定系数R2=0.9981,校正决定系数Radj=0.9957,变异系数为0.35,说明该回归模型可靠,拟合程度良好,且预测值与实际值具有高度的相关性,可用于发酵沙棘汁的工艺优化。一次项A、B及交互项AB对发酵沙棘汁的影响达到显著水平(P<0.05),AC与二次项A2、B2、C2对其影响达到极显著水平(P<0.01),而C与交互项BC无显著水平。
由Design-Expert 10.0.1软件对回归模型进行优化分析得到发酵沙棘汁感官评价最佳条件为:发酵温度为30.094(30)℃,接种量为2.957(3)%,白糖添加量为5.973(6)%。在此条件下,预测所得到的发酵沙棘汁感官评价最大理论值为92.15。
为检验响应面分析结果的可靠性,根据所得出的最佳条件进行3组平行实验,得到感官评价分值的平均值为91.97,这与预测值92.15的相对误差仅为0.18,差异不显著,表明该模型准确可靠。
实施例3 沙棘汁生化特性的变化
(1)不同发酵阶段沙棘汁活菌数变化
本发明参照国家标准《食品安全国家标准 食品微生物学检验 乳酸菌检验》(GB4789.35-2016)测定不同发酵阶段发酵沙棘汁中活性乳酸菌含量。结果表明该菌株活菌数达到9.66 log(cfu/mL),表明发酵前该菌株已处于高水平活力,适合应用于后续发酵研究。对发酵0 d-10 d的沙棘汁活菌数进行测定,结果如图5所示,发酵后(10 d,8.36 log(cfu/mL))相较于发酵前(0 d,8.11 log(cfu/mL))的活菌数数量有所增加。
(2)不同发酵阶段发酵沙棘汁pH值变化
按照国家标准《食品安全国家标准 食品pH的测定》(GB5009.237-2016)检测不同发酵阶段沙棘汁的pH值。如图6所示,发酵后的沙棘汁酸性仍然较强,pH值整体变化范围较小(2.76-2.90)。
(3)不同发酵阶段沙棘汁有机酸的变化
本发明选取沙棘汁中常见及可能存在的5种有机酸,并通过LC-MS测定发酵过程中沙棘汁有机酸变化情况,结果见表8。
标准曲线溶液配置:以0.1%磷酸为溶液,配置浓度为1、5、10、50、100、500、1000、5000 ng/mL的标准曲线梯度。
流动相包括有机相及无机相。有机相:取色谱纯甲醇900 mL加入1 L容量瓶,再加入1 mL甲酸,以甲醇定容至1 L,颠倒混匀。无机相:取超纯水900 mL加入 1 L容量瓶,加入1mL甲酸,以超纯定容至1 L,颠倒混匀。
有机酸提取:取不同发酵阶段的1 mL 样品,加偏磷酸溶液,过0.22 μm水相滤膜,待上机检测。
液相条件:色谱柱为Waters BEH C18 2.1×100 mm×1.7μm;柱温为30℃;流动相为A:B=(甲醇):(水/0.1%甲酸);流速为0.3 mL/min;洗脱梯度见表9,进样体积1 μL。
质谱参数:电离方式为ESI-;扫描类型为MRM;气帘气为15 psi;喷雾电压为-4000V;雾化气压力为65 psi;辅助气压力为70 psi;雾化温度为400℃。
表8 沙棘汁发酵过程中有机酸含量变化
Figure DEST_PATH_IMAGE007
注:同行不同字母表示差异显著(P<0.05),相同字母表示差异不显著(P>0.05)。
表9 液相梯度参数
时间(min) A(%)
0 20
1 20
3 50
9 80
10.5 80
10.6 20
13.5 stop
不同种类有机酸变化有较大差异,其中含量较高的有机酸主要包括奎宁酸(66.96-1086.90 mg/L)、苹果酸(125.07-339.16 mg/L)和乳酸(123.49-607.61 mg/L),其次为莽草酸(3.87-25.71 mg/L)、酒石酸(0.92-2.09 mg/L)。其中奎宁酸只有在发酵4 d、6d时呈显著差异(P<0.001);苹果酸在发酵2 d时差异显著;乳酸在发酵2 d、4 d、8 d差异显著;酒石酸在6 d、8 d、10 d差异显著;莽草酸在测得的6个发酵时间点均存在显著差异。由图7左可知,随着发酵时间的增加,奎宁酸含量整体呈下降趋势,发酵前后含量相差1.6倍。苹果酸含量整体呈现下降趋势,发酵前后其含量相差2.7倍。乳酸含量整体呈现上升趋势,发酵前后其含量相差近5倍。与前三种有机酸相比,虽然酒石酸和莽草酸含量很低,但酒石酸能够调节产品酸味,同时具有抗氧化的增效作用,莽草酸是合成手性药物的关键原料,具有较高的药用价值。本发明中莽草酸含量呈明显的上升趋势,发酵前后含量相差6.64倍。由图7右可知,随着发酵时间的增加,酒石酸含量呈现缓慢上升趋势,发酵前后含量相差1.9倍。
本发明中各有机酸动态变化的结果表明:相较于发酵前,发酵后的沙棘汁风味得到了有效的改善,其中奎宁酸呈现苦涩感,苹果酸呈现酸涩感,乳酸、酒石酸具有柔酸感。因此发酵后的沙棘汁会减少原有的苦涩感及粗糙感,口感柔和细腻,酸甜适中,更易被大众所接受。
(4)不同发酵阶段沙棘汁抗氧化活性变化
本发明分别采用ABTS+及DPPH.自由基清除法分析不同发酵阶段沙棘汁的抗氧化性能。如图8左所示,ABTS+自由基清除法中标准曲线回归方程为Y=-0.0006X+0.6703,R2=0.997。如图8右所示,DPPH.自由基清除法标准曲线回归方程为Y=-0.0005X+0.5366,R2=0.998。
由图9可知,两个抗氧化指标变化趋势基本一致。相比于发酵前的抗氧化能力(Trolox Equivalent Antioxidant Capacity,TEAC)值整体增加,表明发酵后的沙棘汁抗氧化性能有所提升。
(5)不同发酵阶段沙棘汁总酚含量的变化
总酚含量在一定程度上能够反应沙棘多酚整体的变化情况,因此本发明对不同发酵阶段沙棘汁中总酚含量进行测定。标准曲线见图10,回归方程:Y=0.1109X+0.036,R2=0.9991。
由图11可知,随着发酵时间延长,沙棘汁的总酚含量呈现先下降(0 d-2 d,96.02-92.13 mg/100 g),后急剧上升(2 d-4 d,92.13-128.79 mg/100 mg),最后缓慢上升(4 d-10 d,128.79-129.00 mg/100 g)的变化趋势,该变化趋势与抗氧化的指标基本保持一致。
综上所述,本发明提供的植物乳杆菌YHG1-155分离筛选自宁夏银川贺兰饭店的浆水,具有较高安全性。发酵沙棘汁后,既能改善沙棘汁口感,提高其活菌数数量,又能为多酚类化合物的生成提供一定作用,并且最终提升其抗氧化性能,具有较高的商业应用价值。
最后应说明的是:上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点,其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施,并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰,都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)YHG1-155,其特征在于,所述植物乳杆菌于2022年4月26日保藏于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC NO.24780,分类命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。
2.根据权利要求1所述的植物乳杆菌,其特征在于,所述植物乳杆菌高产β-葡萄糖苷酶且耐酸性强。
3.一种如权利要求1~2任一项所述的植物乳杆菌在发酵沙棘汁中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述沙棘汁按照如下方法制备:鲜果筛选后榨汁,过滤,加入白糖,混匀,灭菌,即冷,加入一定比例的高温灭菌蒸馏水,得到沙棘汁。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述灭菌温度为80.0℃,所述的灭菌时间为10 min。
6.一种发酵沙棘汁的方法,包括如下步骤:
1)将沙棘汁、白糖混匀,灭菌后即冷,加入一定比例的高温灭菌蒸馏水,得到沙棘汁。
2)将权利要求1所述的植物乳杆菌接入所述的沙棘汁中,发酵,得到发酵后的沙棘汁。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:
所述沙棘汁最佳发酵工艺为:发酵时间10 d、料水比1:4,发酵温度30.0℃,接种量3.0%,白糖添加量6.0%。
8.权利要求1所述的植物乳杆菌对发酵沙棘汁生化特性的影响
所述植物乳杆菌发酵沙棘汁中乳酸菌数、pH值、有机酸、抗氧化活性及总酚含量的变化。
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