CN115011512B - 一株同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于环境微生物技术领域，具体涉及一株同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌及其应用。本发明提供的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4，保藏号为CCTCC NO：M2022414。该菌在温度30℃，转速200rpm能够高效降解S2O3 2‑和NH4 +，培养16h，S2O3 2‑的降解率接近100％，NH4 +降解率达到81.2％。用本发明的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4制备的微生物菌剂，将其均匀喷洒在垃圾表面，然后置于密封桶内。24h后抽取桶内气体，检测气体中氨气和硫化氢的浓度。与对照相比，同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4处理组抽取的气体中H2S减少了100％，NH3减少了70％左右。

Description

一株同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌及其应用
技术领域
本发明属于环境微生物技术领域，具体涉及一株同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌及其应用。
背景技术
随着中国经济社会的快速发展，人们对于环境污染问题的关注度越来越高，尤其是臭气污染，近年来受到的投诉越来越多，所以急需有效的处理技术解决臭气污染问题，从而改善生态环境。
针对臭气污染问题，已经从防止气味产生、控制气体排放、去除臭气成份等角度开发了各种各样的技术。在恶臭成份去除方面，燃烧法、吸附法和膜分离法等物理化学法结合恶臭物质的特性实现臭气成份的有效去除，具有应用范围广、效率高、稳定性好等优点，但物理化学法加工运行成本一般较高，产生二次污染物，吸附剂再生问题等缺点需要克服。
生物法是利用微生物在相对温和的条件下降解H2S、NH3等恶臭污染物。相比之下，它对环境的影响更小，比物理化学技术更具成本效益。生物法除臭成功的关键在于能够降解恶臭污染物并将其转化为无异味产品的功能性微生物。同时该功能性微生物还具有良好的环境适应性，能够在不同的条件下存活，并发挥恶臭污染物降解的功能。因此，为了解决恶臭污染的问题，首先需要找到能够降解H2S、NH3的功能微生物，同时微生物的环境适应性也需要优良，如在不同温度或者不同含氧浓度的条件下能否存活以及发挥降氨除硫等功能。
发明内容
鉴于以上问题，本发明的目的在于提供一株同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌及其在生活垃圾中降氨除硫的应用。本发明中“同步”是指菌株同时去除硫和氨，相对于先降氨然后再降硫，或者是先降硫再降氨的菌株而言，同时去除，缩短时间。
为实现上述目的及其他相关目的，本发明第一方面提供一株同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4，该菌株于2022年4月21日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路武汉大学，保藏号：CCTCCNO：M2022414。
所述的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4的特征包括以下特征的一项或多项：
(1)同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4生长条件为：温度20～37℃，转速100～250rpm。
(2)同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4用于降解S2O3 2-和NH4 +的条件为：温度20～37℃，转速100～250rpm。
所述的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在温度30℃、转速200rpm的条件下，针对初始浓度为50mmol/L Na2S2O3和30mmol/L NH4Cl，培养16h，S2O3 2-的降解率接近100％，NH4 +降解率达到81.2％。降解率通过下述方法检测：
(1)在250mL的三角烧瓶中加入50mL验证培养基，按照1％的接种量(验证培养基体积的1％)接种同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4。
(2)验证培养基中加入50mmol/L Na2S2O3和30mmol/L NH4Cl，用于验证同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4降解S2O3 2-和NH4 +的能力。
(3)将接种同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4的验证培养基放入恒温培养振荡器中培养，微生物在生长过程降解S2O3 2-和NH4 +。培养16h后取出一定量的样品检测S2O3 2-和NH4 +的浓度。
(4)分别测定初始时和16h时三角烧瓶中S2O3 2-和(离子色谱法)和NH4 +的浓度(分光光度法)。根据公式①和②分别计算，得到S2O3 2-的降解率接近100％，NH4 +降解率达到81.2％。
S2O3 2-的降解率根据公式①计算得到。
[c(S0)–c(S16)]/c(S0)×100％①
其中，c(S0)为三角烧瓶中初始S2O3 2-浓度；c(S16)为16h时三角烧瓶中S2O3 2-浓度。
NH4 +的降解率根据公式②计算得到。
[c(N0)–c(N16)]/c(N0)×100％②
其中，c(N0)为三角烧瓶中初始NH4 +浓度；c(N16)为16h时三角烧瓶中NH4 +浓度。本发明第二方面提供一种同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在垃圾中同步降氨除硫的应用。
本发明提供应用步骤，至少包括如下步骤：
(1)培养同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4制得微生物菌剂；
(2)取一定量的微生物菌剂喷洒在垃圾表面，降解垃圾中的H2S和NH3。
优选地，所述微生物菌剂中同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4含量不少于2.0×108CFU/mL。
优选地，所用的微生物菌剂的喷洒量为垃圾质量的5％。
本发明同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4制备的微生物菌剂喷洒在垃圾表面，能够减少垃圾释放H2S和NH3，从而降低气体中H2S和NH3的浓度。
附图说明
图1为本发明提供的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4培养16h的菌落形态；
图2为本发明提供的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4在不同温度的生长情况；
图3为本发明提供的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4在不同温度降解S2O3 2-情况；
图4为本发明提供的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4在不同温度降解NH4 +情况；
图5为本发明提供的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4在不同转速的生长情况；
图6为本发明提供的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4在不同转速降解S2O3 2-情况；
图7为本发明提供的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4在不同转速降解NH4 +情况。
具体实施方式
为使本发明的目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述具体细节以便于充分理解本发明，本领域技术人员可以在不违背本发明构思的情况下做类似改进，因此本发明的保护范围不受下面公开的具体实施例的限制。
当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。
除非另外说明，本发明中所公开的实验方法、检测方法、制备方法均采用本技术领域常规的分子生物学、生物化学、分析化学、重组DNA技术及相关领域的常规技术。
为实现上述目的及其他相关目的，本发明第一方面提供一株同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4。
本发明提供的菌株是本单位筛选的，并于2022年4月21日在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)保藏，地址：湖北省武汉市武昌区八一路武汉大学，保藏号：CCTCC NO：M2022414。
所述的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4，生长温度范围20～37℃，转速100～250rpm。
所述的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4，降解降解S2O3 2-和NH4 +的温度范围20～37℃，转速100～250rpm。
所述的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在温度30℃、转速200rpm条件下培养16h时，根据公式①计算得到S2O3 2-的降解率接近100％；根据公式②计算得到NH4 +降解率达到81.2％。
[c(S0)–c(S16)]/c(S0)×100％①
其中，c(S0)为三角烧瓶中初始S2O3 2-浓度；c(S16)为16h时三角烧瓶中S2O3 2-浓度。
[c(N0)–c(N16)]/c(N0)×100％②
其中，c(N0)为三角烧瓶中初始NH4 +浓度；c(N16)为16h时三角烧瓶中NH4 +浓度。
本发明第二方面提供了所述的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4在生活垃圾中同步降氨除硫的应用。
所述同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在垃圾中同步降氨除硫的应用，至少包括如下步骤：
(1)使用糖蜜培养基培养同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4，制得微生物菌剂；
(3)取一定量的微生物菌剂均匀喷洒在垃圾表面，进行降氨除硫的应用。
进一步的，所述糖蜜培养基组成为：糖蜜20.0g/L，酵母提取物2.0g/L，KH2PO40.25g/L，K2HPO4 1.0g/L，MgCl2 0.2g/L；调节pH值为6.8。
进一步的，所述同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4的保藏号为CCTCC NO：M2022414。
进一步的，所述微生物菌剂中同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4的含量不少于2.0×108CFU/mL。
优选地，所用的微生物菌剂的喷洒量为垃圾质量的5％。
实施例一 降氨除硫的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4的筛选及鉴定
本发明所述的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4，筛选样品采集于某小区生活垃圾中。
(1)富集培养
取5g采集的样品，加到装有100mL富集培养基的三角烧瓶中，置于恒温培养振荡器上培养。
富集培养基组成：LB培养基(酵母提取物5.0g/L，胰蛋白胨10.0g/L，氯化钠10.0g/L)添加20.0mmol/L Na2S2O3和10.0mmol/L NH4Cl，调节pH值为6.8。
培养条件为30℃、转速200rpm，培养36h后结束。结束后取出5mL培养物接种于新鲜的富集培养基中传代培养，传代条件与上述培养条件一致，传代2～3次结束培养。最终的培养物用于分离目标微生物。
(2)分离纯化
将经过富集培养的培养物梯度稀释，均匀涂布在LB固体培养基上。
固体LB培养基组成：琼脂粉15.0g/L，胰蛋白5.0g/L，酵母粉10.0g/L，氯化钠10.0g/L；调节pH值为6.8。
涂布完成后，平板倒置在30℃的恒温培养箱中，培养36h结束。根据平板上长出的单菌落，依据菌落的形态差异，挑选到6株不同形态的微生物，分别编号为1、2、3、4、5、6，验证菌株降解S2O3 2-和NH4 +的能力。
(3)验证降解S2O3 2-和NH4 +的能力：
验证培养基组成：LB培养基(酵母提取物5.0g/L，胰蛋白胨10.0g/L，氯化钠10.0g/L)添加50mmol/L Na2S2O3和30mmol/L NH4Cl。
将挑选的6株微生物分别用LB培养基培养12h，然后按照1％的接种量接种于装有50mL验证培养基的三角烧瓶中，接种后分别取出2mL培养基，即0h样品，用于检测初始S2O3 2-和NH4 +的浓度。然后将装有剩余验证培养基的三角烧瓶置于恒温培养振荡器中培养，控制温度30℃，转速200rpm。培养16h结束后，分别取出2mL的培养物，即16h的样品，用于检测培养16h后培养基中残留的S2O3 2-和NH4 +浓度。
将0h和16h取出的培养液，控制12000g的条件离心10min，离心后的上清液用于测定S2O3 2-和NH4 +的浓度。S2O3 2-的浓度用离子色谱测定，色谱柱为岛津公司生产的IC-A3型号离子色谱柱，流动相为8mmol/L对羟基苯甲酸、3.2mmol/L Bis-Tris，50mmol/L的硼酸，流速1.0mL/min。NH4+的浓度是利用哈希的纳氏试剂盒，然后通过分光光度法检测。
S2O3 2-的降解率根据公式①计算得到。
[c(S0)–c(S16)]/c(S0)×100％①
其中，c(S0)为三角烧瓶中初始S2O3 2-浓度；c(S16)为16h时三角烧瓶中S2O3 2-浓度。
NH4 +的降解率根据公式②计算得到。
[c(N0)–c(N16)]/c(N0)×100％②
其中，c(N0)为三角烧瓶中初始NH4 +浓度；c(N16)为16h时三角烧瓶中NH4 +浓度。
反应16h后6株菌对S2O3 2-和NH4 +的降解率如表1。其中编号为p4的菌株降解S2O3 2-和NH4 +能力最为突出，S2O3 2-的降解率达到了100％，NH4 +的降解率达到了82.3％。
表1菌株对S2O3 2-和NH4 +的降解能力
(5)同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4的鉴定
使用AXYGEN公司的细菌基因组DNA提取试剂盒，提取编号P4菌株的基因组，并以此为模板扩增16S rDNA。
扩增引物分别为27F(上游引物)：AGAGTTTGATCCTGGCTCA；
1492R(下游引物)：GGTTACCTTGTTACGACTT
PCR反应体系(50μL)：模板DNA 1.0μL，KOD mix 25.0μL，上、下游引物各1.0μL，ddH2O 12.0μL。
PCR程序：98℃5min，98℃30s，55℃30s，68℃90s，循环30次，68℃10min，16℃10min。
PCR产物的纯化和测序由生工生物工程(上海)股份有限公司完成。测序得到编号P4菌株的16S rDNA序列，长度1395bp，核酸序列如SEQID NO.1所示。该序列经过NucleotideBLAST分析，与NCBI数据库中瓜里科假单胞菌MK318649.1(NCBI序列号：MK318649.1)碱基相似性达到99％。同时结合细菌的形态特征、生长特性确定筛选的编号P4菌株为瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis，将其命名为瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4。
同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4的生物学特征如下：革兰氏阴性，短杆状，菌体大小为(0.4～1.0)×(1.0～3.5)μm，菌落直径2.0～4.0mm，菌落圆形、表面光滑、边缘整齐。
将筛选到的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4进行保藏，保藏单位：中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)，地址：湖北省武汉市武昌区八一路武汉大学，保藏日期：2022年4月21日，保藏号：CCTCC NO：M2022414。
实施例二 同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在不同温度的性能
通过检测同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在不同温度菌株的生长情况以及降解S2O3 2-和NH4 +的能力，优化同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4最适温度。具体如下：
将同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4接种在上述验证培养基中，分别控制温度为20℃、25℃、30℃、37℃、42℃，验证菌株的生长情况以及降解S2O3 2-和NH4 +的能力。培养过程，每隔一定时间取出1mL的培养基，利用分光光度计测定菌体的生长情况(OD600)，离心后的上清液利用离子色谱测定S2O3 2-的浓度，利用分光光度计测定NH4 +的浓度。培养16h结束。
同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在不同温度生长情况如图2所示。同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌在25～30℃的范围内生长良好，培养16h后OD600达到6.0以上；当温度较高或者较低时，菌株的生长受到不同程度的抑制，尤其是当培养温度为42℃时，同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4几乎不生长。
同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在不同温度降解S2O3 2-情况如图3所示。从图中可知，当培养温度为20～37℃，培养基中S2O3 2-的浓度逐渐降低，培养16h后，S2O3 2-的残留量基本为0mM；其中，当培养温度为30℃时，S2O3 2-的降解速率最快，在12h左右，培养基中残留的S2O3 2-的浓度已经接近零。此外，当培养温度为42℃时，培养基中S2O3 2-的浓度不变，这主要是因为高温抑制了同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4的生长。
同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在不同温度降解NH4 +情况如图4所示。从图中可知，当培养温度为20～37℃，培养基中NH4 +的浓度逐渐降低。其中当培养温度为30℃，同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensisP4对NH4 +的降解效果最好，NH4 +的降解率达到了81.2％。而当温度为42℃时，培养基中NH4 +的浓度不变。
实施例三 同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在不同转速的性能
通过检测同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在不同转速下菌株的生长情况以及降解S2O3 2-和NH4 +的能力，优化同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4最适转速。具体如下：
将同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4接种在上述验证培养基中，分别控制转速为100rpm、150rpm、200rpm、250rpm，验证菌株的生长情况以及降解S2O3 2-和NH4 +的能力。培养过程，每隔一定时间取出1mL的培养基，利用分光光度计测定菌体的生长情况(OD600)，离心后的上清液利用离子色谱测定S2O3 2-的浓度，利用分光光度计测定NH4 +的浓度。培养16h结束。
同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在不同转速生长情况如图5所示。从图中可发现，转速越高，菌株的生长速率越快，达到最大OD600时所需时间越短；而且在转速100～250rpm范围内，培养16h后，同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4的OD600值达到了3.053～6.247。
同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在不同转速降解S2O3 2-情况如图6所示。从图中可知，不同转速S2O3 2-的降解规律与其不同转速生长规律相似。转速越大，S2O3 2-的降解速率越快；同时培养12h后，不同转速条件培养基中残留的S2O3 2-均接近0，降解率接近100％。
同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在不同转速降解NH4 +情况如图7所示。从图中可知，转速越大，同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4对NH4 +的降解效果越好。转速大于200rpm对NH4 +的降解效果较好，培养16h后，NH4 +的降解率达到了81.2％。
实施例四 同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在生活垃圾中降氨除硫的应用
微生物菌剂的制备：将同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4用LB培养基培养12h，然后按照1％的接种量接种于装有50mL糖蜜培养基的三角烧瓶中，置于恒温培养振荡器中培养，控制温度30℃，转速200rpm，培养36h结束，所得培养物即为制备的微生物菌剂，所得微生物菌剂中同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4的含量大于2.0×108CFU/mL。
糖蜜培养基组成：糖蜜20.0g/L，酵母提取物2.0g/L，KH2PO4 0.25g/L，K2HPO41.0g/L，MgCl2 0.2g/L；调节初始pH值6.8。
在生活垃圾中降氨除硫的应用：取2个大小约100L的密封塑料桶，在桶内壁伸入气体取样器的进气管，为后续抽取桶内气体检测H2S和NH3的浓度。收集10kg的生活垃圾，平均分成两份，其中一份做对照放入1号桶内，密封。另外一份垃圾用制备的微生物菌剂均匀喷洒在垃圾表面，微生物菌剂的使用量占垃圾重量的5％，即5kg生活垃圾喷洒250g微生物菌剂，然后置于2号桶内密封。经过24h的静置，用气体取样器分别从1号和2号桶内抽取30min的气体，然后检测所取气体中含有的H2S和NH3的浓度(北京市北斗星科技有限公司，Pair2000-EFF)。经过检测，1号桶(对照组)H2S浓度为0.025mg/m3、NH3的浓度为0.199mg/m3；2号桶(实验组)H2S浓度为0mg/m3、NH3的浓度为0.061mg/m3。
通过以上数据可知，利用制备的微生物菌剂能够减少垃圾释放到气体中的H2S和NH3，从而降低气体中H2S和NH3的浓度。与对照组相比，同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4制备的微生物菌剂处理的垃圾，静置24h后抽取的气体中H2S减少了100％，NH3减少了70％左右。
序列表
<110> 上田环境修复有限公司
<120> 一株同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌及其应用
<141> 2022-06-07
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1395
<212> DNA
<213> Pseudomonas guariconensis P4
<400> 1
tcgagcggat gacgggagct tgctccttga ttcagcggcg gacgggtgag taatgcctag 60
gaatctgcct ggtagtgggg gacaacgttc cgaaaggggc gctaataccg catacgtcct 120
acgggagaaa gtgggggatc ttcggacctc acgctatcag atgagcctag gtcggattag 180
ctagttggtg aggtaatggc tcaccaaggc gacgatccgt aactggtctg agaggatgat 240
cagtcacact ggaactgaga cacggtccag actcctacgg gaggcagcag tggggaatat 300
tggacaatgg gcgaaagcct gatccagcca tgccgcgtgt gtgaagaagg tcttcggatt 360
gtaaagcact ttaagttggg aggaagggca gtaagttaat accttgctgt tttgacgtta 420
ccgacagaat aagcaccggc taactctgtg ccagcagccg cggtaataca gagggtgcaa 480
gcgttaatcg gaattactgg gcgtaaagcg cgcgtaggtg gttcgttaag ttggatgtga 540
aagccccggg ctcaacctgg gaactgcatc caaaactggc gagctagagt atggtagagg 600
gtggtggaat ttcctgtgta gcggtgaaat gcgtagatat aggaaggaac accagtggcg 660
aaggcgacca cctggactga tactgacact gaggtgcgaa agcgtgggga gcaaacagga 720
ttagataccc tggtagtcca cgccgtaaac gatgtcaact agccgttgga atccttgaga 780
ttttagtggc gcagctaacg cattaagttg accgcctggg gagtacggcc gcaaggttaa 840
aactcaaatg aattgacggg ggcccgcaca agcggtggag catgtggttt aattcgaagc 900
aacgcgaaga accttaccag gccttgacat gcagagaact ttccagagat ggatcggtgc 960
cttcgggaac tctgacacag gtgctgcatg gctgtcgtca gctcgtgtcg tgagatgttg 1020
ggttaagtcc cgtaacgagc gcaacccttg tccttagtta ccagcacgtt atggtgggca 1080
ctctaaggag actgccggtg acaaaccgga ggaaggtggg gatgacgtca agtcatcatg 1140
gcccttacgg cctgggctac acacgtgcta caatggtcgg tacagagggt tgccaagccg 1200
cgaggtggag ctaatctcac aaaaccgatc gtagtccgga tcgcagtctg caactcgact 1260
gcgtgaagtc ggaatcgcta gtaatcgcga atcagaatgt cgcggtgaat acgttcccgg 1320
gccttgtaca caccgcccgt cacaccatgg gagtgggttg caccagaagt agctagtcta 1380
accttcggga ggacg 1395

Claims (5)

1.一株同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4，其特征在于，所述同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4的保藏号为CCTCC NO：M2022414。
2.根据权利要求1所述的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonasguariconensis P4 的应用，其特征在于，所述的同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4在生活垃圾中同步降氨除硫的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：
① 将同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4接种于糖蜜培养基中，控制培养温度37 ℃、恒温培养振荡器转速200 rpm，培养24 h获得微生物菌剂；
② 将培养的微生物菌剂均匀喷洒在垃圾表面，能够有效减少垃圾释放到空气中H2S和NH3的浓度。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述微生物菌剂中同步降氨除硫的瓜里科假单胞菌Pseudomonas guariconensis P4浓度不少于2.0×108 CFU/mL。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述的微生物菌剂的喷洒量为垃圾质量的5%。
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周雪媚 ; 李玉光 ; 陈霜玲 ; 付慧群 ; 姜思朋 ; 王永阔 ; .一株高效甲醛降解菌的分离筛选与降解特性研究.生态环境学报.2015,(12),全文. *

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