CN114983926B - 一种促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针及其制备方法 - Google Patents
一种促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开一种促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法，包括以下步骤：提取自体血浆制品并进行冻干处理；将冻干自体血浆制品沉积在模具中并离心处理；采用可溶性聚合物水溶液填充微腔，进行恒温培养形成浓缩的可溶性聚合物；将基底聚合物水溶液沉积到模具上，制得可溶可拆卸性微针。本发明通过微针与自体血浆制品冻干技术结合使自体血浆制品良好地封装在可溶性微针内部。在贴入皮肤后，可溶性针体留在体内，基底贴片脱落。微针表层的自体血浆制品从聚合物孔隙中快速释放，达到有效浓度。同时，聚合物结构逐步降解，释放出内部自体血浆制品，达到持续缓释的效果，从而起到促进皮肤年轻化，激活毛囊再生等一系列生长因子作用。
Description
技术领域
本发明涉及医药材料技术领域，具体涉及一种促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法以及采用该制备方法制得的促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针。
背景技术
自体血浆制品，包括富含血小板血浆(Platelet-Rich Plasma，PRP)、富含血小板纤维蛋白(Platelet-Rich Fibrin，PRF)，浓缩细胞生长因子(Concentrate GrowthFactors，CGF)，和血小板裂解物(Platelet lysate，PL)，指含有4-5倍正常人体血小板浓度的自体血浆制品。其中，血小板内的α颗粒中含有多种生长因子，包括血小板源性生长因子(PDGF)、表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、转换生长因子(TGF-β)等。由于这些生长因子在愈合过程中，分别负责着细胞的增殖、分化、趋化和组织形态的形成等。因此，已被广泛应用于促进创面愈合、提高移植物成活率及组织工程等诸多领域。近年来的研究表明：血小板内的生长因子可以相互协同不仅能够促进毛囊由休止期进入生长期进而促进毛发生长，也具有增加皮肤内弹性纤维和胶原蛋白的含量及沉积进而达到提高皮肤弹性及老化皮肤重构的效果。
在促进毛发生长和皮肤年轻化的临床应用中，主要是通过注射器或其他注射装置将自体血浆制品注射至皮肤真皮层内或真皮下层。因此，自体血浆制品的注射过程必须在专业医师的操作下完成，且具有侵入性、疼痛性、出血性、注射深浅不一等特点，因此也就增加了自体血浆制品在促进毛发生长和皮肤再生方面操作的复杂性，限制了其广泛应用。此外，更为重要的是，目前制备出的自体血浆制品缺乏有效的保存手段，因此需现配现用，这一缺点也限制了自体血浆制品的临床应用。
微针是用于药物输送的微米级针头，长度通常在100-2000μm之间，已应用于无创透皮给药、疫苗接种、患者监测和疾病诊断，具有无痛、微创、易于操作和易于控制统一给药深度的优点。穿刺入皮肤后，针体到达真皮位置，进行靶向药物的局部缓释。目前尚未见到关于自体血浆制品微针的报道或发明。现有皮肤毛发微针发明存在药物作用的单一，成分来源异体，微针基质与皮肤成分相容性不足，部分不可拆卸等，是微针在皮肤毛发领域应用亟待完善的问题。另外，自体血浆制品来源于自体，且能多方面促进皮肤及毛囊再生。但因其液态且不易储存的局限性，暂无结合微针的应用。临床应用需要能与自体血浆制品结合，有效缓释其生长因子且与皮肤真皮成分相似的微针基质。
发明内容
本发明的目的之一在于提供一种促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法，可以将自体血浆制品良好地封装在可溶可拆卸性微针内。
本发明的目的之二在于提供一种促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针，可起到促进皮肤年轻化，激活毛囊再生等一系列生长因子作用。
一方面，本发明提供一种促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法，包括以下步骤：
S10、提取自体血浆制品并加入冻干缓冲液进行冻干处理；
S20、将冻干的自体血浆制品沉积在具有多个锥形微腔的模具中并离心处理；
S30、采用可溶性聚合物水溶液填充微腔，然后进行恒温培养形成浓缩的可溶性聚合物；
S40、将基底聚合物水溶液沉积到模具上，培养、干燥、分离，制得可溶可拆卸性微针。
本发明载自体血浆制品可溶可拆卸性微针为皮肤美容与毛发再生提供了无痛、微创且具有持续性的选择。本发明自体血浆制品冻干与微针技术的结合，使得自体血浆制品未来在其他领域的应用更为便捷。其可常温储存，体积小，制造廉价和易于家中操作的优势，使得求医者无需依赖专业人士操作，即可安全有效地享受自体血浆制品带来的好处，从而提高依从性。
作为促皮肤及毛发再生的可溶性微针的制备方法的一种优选方案，所述自体血浆制品选自PRP、PRP衍生物、PRF、PRF衍生物、CGF、CGF衍生物、PL、PL衍生物中的任一种或至少两种的组合。
作为促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法的一种优选方案，所述冻干缓冲液选自Hepes、NaCl、NaHCO3、NaH2PO4、KCl、MgCl2、海藻糖、葡萄糖、人血清白蛋白、阿米洛利、腺苷、硝普钠、二甲基亚砜、聚乙烯吡咯烷酮、甘露醇中的任一种或至少两种的组合。
作为促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法的一种优选方案，所述可溶性聚合物选自GelMA、透明质酸、明胶、丝素蛋白、糊精、羧甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、软骨硫磺素、葡聚糖、海藻酸钠、支链淀粉、麦芽糖、聚γ-谷氨酸、聚乙烯吡咯烷酮中的任一种或至少两种，或其共聚物或衍生物。
优选地，所述可溶性聚合物选自GelMA。通过微针与自体血浆制品冻干技术结合使得自体血浆制品良好地封装在可溶性微针GelMA内部。在贴入皮肤后，可溶解针体留在体内。微针表层的再水化自体血浆制品从交联的GelMA孔隙中快速释放，达到有效浓度。同时，GelMA结构逐步降解，释放出内部自体血浆制品，达到持续缓释的效果。
作为促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法的一种优选方案，所述基底聚合物选自聚乙烯醇、甲基丙烯酸化的透明质酸、葡糖胺聚糖、多糖、聚(氨基酸)、聚乙烯吡咯烷酮、聚(亚烷基二醇)、聚(氧化烯)、聚(羟基烷基甲基丙烯酰胺)、多羟基酸中的任一种或至少两种的组合。
作为促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法的一种优选方案，所述可溶可拆卸性微针呈棱锥、圆锥形或类圆锥形，所述可溶可拆卸性微针的长度为100-2000μm，相邻所述可溶可拆卸性微针的针尖间距为100-5000μm，所述可溶可拆卸性微针的底部最大尺寸为50-800μm。具体地，对于圆锥形的可溶可拆卸性微针，底径为50-800μm。
作为促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法的一种优选方案，步骤S10具体包括以下步骤：
S10A、采集静脉血，在100-300g、离心5-15分钟；
S10B、将离心后的血浆转移至新试管中在1400-1600g、5-15分钟；
S10C、保留部分血浆用于血小板再悬浮，制得自体血浆制品；
S10D、将自体血浆制品在加入冻干缓冲液后，-80℃下预冻12-24小时，然后使用真空冷冻干燥机冷冻干燥24-48小时，并储存在-20℃下备用。
作为促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法的一种优选方案，步骤S20具体为：
将冻干的自体血浆制品沉积在具有多个锥形微腔的PDMS模具中并以4000rpm离心10min。
作为促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法的一种优选方案，步骤S30具体为：
使用500μL-2ml可溶性聚合物水溶液填充微腔，然后将填充微腔后的模具放置在30-35℃恒温培养箱中保持2-4小时，形成浓缩的可溶性聚合物。
作为促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法的一种优选方案，步骤S40中，基底聚合物水溶液的用量为500μL-2ml。
另一方面，提供一种促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针，采用上述的制备方法制得，其中，所述冻干自体血浆制品在所述可溶可拆卸性微针的微针阵列中的量为1μg-25mg/cm2微针阵列。本发明的可溶可拆卸性微针的适应症包括皮肤年轻化、皮肤疾病治疗、各类型脱发、毛发稀疏、口腔医学、各类型创面修复。
本发明微针用法为将所述促进皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针扎于患处，按压一定时间至微针针尖溶解留在体内，基底分离后可取下。
本发明的有益效果：本发明通过微针与自体血浆制品冻干技术结合使自体血浆制品良好地封装在可溶性微针内部。在贴入皮肤后，可溶性针体留在体内，微针表层的自体血浆制品快速释放，达到有效浓度。同时，聚合物结构逐步降解，释放出内部自体血浆制品，达到持续缓释的效果，从而起到促进皮肤年轻化，激活毛囊再生等一系列生长因子作用。
本发明自体血浆制品冻干与微针技术的结合，使得自体血浆制品未来在其他领域的应用更为便捷。其可常温储存，体积小，制造廉价和易于家中操作的优势，使得求医者无需依赖专业人士操作，即可安全有效地享受自体血浆制品带来的好处，从而提高依从性。
附图说明
图1为本发明实施例1可溶可拆卸性微针的制备方法的流程示意图；
图2为本发明实施例1可溶可拆卸性微针的制备方法的制作流程图；
图3为本发明实施例1的可溶可拆卸性微针的照片；
图4为本发明实施例1的可溶可拆卸性微针在显微镜下的照片；
图5为本发明实施例1的可溶可拆卸性微针中的生长因子随时间累积释放量的曲线图；
图6为采用微针处理小鼠背部皮肤10-15天后与空白组的HE染色对照图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。
如无具体说明，本发明的各种原料均可市售购得，或根据本技术领域的常规方法制备得到。
实施例1
本实施例中，可溶性聚合物为GelMA，自体血浆制品为PRP，可溶可拆卸性微针的制备方法如图1和图2所示，具体如下：
1)PRP提取：静脉血在含有ACD-A和凝血酶抗凝条件下从健康成年人采集。PRP是在两步离心过程后获得：在100-300g、离心5-15分钟，然后将血浆转移到新试管中在1400-1600g离心5-15分钟。随后，在底部保留适量血浆用于血小板再悬浮，制得PRP。
2)PRP冻干：PRP加入冻干缓冲液(9.5mM Hepes、142.5mM NaCl、4.8mM KCl、1mMMgCl2、3 0mM海藻糖、1％人血清白蛋白)后，在-80℃下预冻12-24小时，然后使用真空冷冻干燥机冷冻24小时。冷冻干燥的PRP储存在-20℃下供进一步使用。
3)将1-25mg冻干PRP沉积在有多个四棱锥微腔的PDMS模具，具有约100至2000微米的深度，并以4000rpm离心10min。然后，使用500μL含有0.1-0.5wt％酰基膦酸锂盐(LAP)的5-15wt％GelMA溶液填充微腔。将该模具放置在恒温培养箱(35℃)中保持2-4小时，以形成浓缩的GelMA水凝胶，并暴露于350mW/cm2紫外光(405nm)下。随后，将1mLPVA(聚乙烯醇)溶液(5-15wt％水溶液)沉积到模具上，并在培养箱中干燥过夜。完全干燥后，将可溶可拆卸性微针从模具中分离出来，以供进一步使用。
制得的可溶性微针参考图3和图4。
实施例2
本实施例中，可溶性聚合物为透明质酸，自体血浆制品为PRF，可溶可拆卸性微针的制备方法如下：
1)PRF提取：静脉血置于无抗凝血酶的无菌试管中下从健康成年人采集。立即将试管以3000r/min离心10min。常温静置后，试管样本可分为3层，在位于底层的红细胞碎片和位于顶层的淡黄色澄清液体血小板血浆之间。弃上清，去除凝胶状物底部的红细胞部分，取出中间层的淡黄色凝胶，即为PRF。
2)PRF冻干：PRF加入冻干缓冲液(9.5mM Hepes、142.5mM NaCl、4.8mM KCl、1mMMgCl2、3 0mM海藻糖、1％人血清白蛋白)后，在-80℃下预冻12-24小时，然后使用真空冷冻干燥机冷冻24小时。冷冻干燥的PRF储存在-20℃下供进一步使用。
3)将1-25mg冻干PRF沉积在有多个四棱锥微腔的PDMS模具，具有约100至2000微米的深度，并以4000rpm离心10min。然后，使用500μL的5-15wt％透明质酸溶液填充微腔。将该模具放置在恒温培养箱(35℃)中保持2-4小时，以形成浓缩的透明质酸水凝胶。随后，将1mLPVA(聚乙烯醇)溶液(5-15wt％水溶液)沉积到模具上，并在培养箱中干燥过夜。完全干燥后，将可溶可拆卸性微针从模具中分离出来，以供进一步使用。
实施例3
本实施例中，可溶性聚合物为明胶，自体血浆制品为PL，可溶可拆卸性微针的制备方法如下：
1)PL提取：静脉血在含有ACD-A和凝血酶抗凝条件下从健康成年人采集。先制得PRP，在两步离心过程后获得：在100-300g、离心5-15分钟，然后将血浆转移到新试管中在1400-1600g离心5-15分钟。随后，在底部保留适量血浆用于血小板再悬浮，制得PRP。将离心管中的PRP超声处理35个循环(每个循环5秒开启和5秒关闭),即为PL。
2)PL冻干：PL加入冻干缓冲液(9.5mM Hepes、142.5mM NaCl、4.8mM KCl、1mMMgCl2、3 0mM海藻糖、1％人血清白蛋白)后，在-80℃下预冻12-24小时，然后使用真空冷冻干燥机冷冻24小时。冷冻干燥的PL储存在-20℃下供进一步使用。
3)将1-25mg冻干PL沉积在有多个四棱锥微腔的PDMS模具，具有约100至2000微米的深度，并以4000rpm离心10min。然后，使用500μL的5-15wt％明胶溶液填充微腔。将该模具放置在恒温培养箱(35℃)中保持2-4小时，以形成浓缩的明胶水凝胶。随后，将1mL PVA(聚乙烯醇)溶液(5-15wt％水溶液)沉积到模具上，并在培养箱中干燥过夜。完全干燥后，将可溶可拆卸性微针从模具中分离出来，以供进一步使用。
实施例4
本实施例中，可溶性聚合物为丝素蛋白，自体血浆制品为CGF，可溶可拆卸性微针的制备方法如下：
1)CGF提取：静脉血置于无抗凝血酶的无菌试管中下从健康成年人采集。立即置入Medifuge离心机(SILFRADENT，意大利)；设定CGF制备程序(加速30s，速度达到2700r/min；旋转2min后，降到2400r/min；旋转4min，加速到2700r/min；旋转4min，加速到3300r/min；旋转3min，减速至36s停止)，离心后可见试管中血液分为3层。在位于底层的红细胞碎片和位于顶层的淡黄色澄清液体血小板血浆之间。弃上清，去除凝胶状物底部的红细胞部分，取出中间层的淡黄色凝胶，即为CGF。
2)CGF冻干：PL加入冻干缓冲液(9.5mM Hepes、142.5mM NaCl、4.8mM KCl、1mMMgCl2、3 0mM海藻糖、1％人血清白蛋白)后，在-80℃下预冻12-24小时，然后使用真空冷冻干燥机冷冻24小时。冷冻干燥的CGF储存在-20℃下供进一步使用。
3)将1-25mg冻干CGF沉积在有多个四棱锥微腔的PDMS模具，具有约100至2000微米的深度，并以4000rpm离心10min。然后，使用500μL的5-15wt％丝素蛋白溶液填充微腔。将该模具放置在恒温培养箱(35℃)中保持2-4小时，以形成浓缩的丝素蛋白水凝胶。随后，将1mLPVA(聚乙烯醇)溶液(5-15wt％水溶液)沉积到模具上，并在培养箱中干燥过夜。完全干燥后，将可溶可拆卸性微针从模具中分离出来，以供进一步使用。
对比例1
本实施例中，可溶性聚合物为GelMA，可溶可拆卸性微针的制备方法如下：
1)将500μL含有0.1-0.5wt％酰基膦酸锂盐(LAP)的5-15wt％GelMA溶液填充有多个四棱锥微腔的PDMS模具，具有约500至1000微米的深度，并以4000rpm离心10min。然后将该模具放置在恒温培养箱(35℃)中保持2-4小时，以形成浓缩的GelMA水凝胶，并暴露于350mW/cm2紫外光(405nm)下。
2)将1mL PVA(聚乙烯醇)溶液(5-15wt％水溶液)沉积到模具上，并在培养箱中干燥过夜。完全干燥后，将可溶可拆卸性微针从模具中分离出来，以供进一步使用。
对比例2
本实施例中，自体血浆制品为PRP，制备方法如下：
1)PRP提取：静脉血在含有ACD-A和凝血酶抗凝条件下从健康成年人采集。PRP是在两步离心过程后获得：在100-300g、离心5-15分钟，然后将血浆转移到新试管中在1400-1600g离心5-15分钟。随后，在底部保留适量血浆用于血小板再悬浮，制得PRP。
2)PRP冻干：PRP加入冻干缓冲液(9.5mM Hepes、142.5mM NaCl、4.8mM KCl、1mMMgCl2、3 0mM海藻糖、1％人血清白蛋白)后，在-80℃下预冻12-24小时，然后使用真空冷冻干燥机冷冻24小时。冷冻干燥的PRP储存在-20℃下供进一步使用。
负载PRP的可溶可拆卸性微针的体外生长因子释放实验
通过ELISA蛋白质定量测定了3种来自实施例1的PRP微针的生长因子体外释放曲线(VEGF,TGF-β1和PDGF-BB)。如图5所示，微针表面的复水PRP迅速从GelMA孔隙释放，在24小时内达到一定浓度。4-6天后，生长因子从逐渐降解的微针中完全释放。PRP微针的缓释效应是由于离子相互作用，使生长因子能够固定在GelMA水凝胶中(参见Kurita,J.et al.,Ann.Thorac.Surg.2011,92(3),837–844.)。结果表明，PRP微针系统实现了PRP生长因子的缓释和缓释。
负载PRP的可溶可拆卸性微针的促进皮肤与毛囊再生效果
实验动物：8周龄C57BL/6小鼠
分组：1.PRP微针组(实施例1)、2.GelMA微针组(对比例1)、3.单纯PRP组(对比例2)、4.空白对照组
处理方式：小鼠在休止期脱毛，一天后给予PRP微针或GelMA微针扎入，空白组不做处理。微针牢牢扎入皮肤并保持5-15分钟，使微针针体吸收足够的体液。PRP微针基底在2小时内自动脱落或手动拔除，使PRP微针针体停留在皮肤内，以进一步持续释放PRP。PRP组给予等量冻干PRP溶于生理盐水后皮下注射。皮肤标本于实验处理后10-15天取得，并将苏木精-伊红(HE)用于皮肤切片染色，结果如图6所示。
实验结果：显示微针处理小鼠背部皮肤10-15天后，PRP微针组HE染色显示出比空白组更厚的真皮层、更成熟、更密集的毛囊与脂肪(比例尺，50微米)。提示皮肤弹性纤维和胶原蛋白的含量增加，毛囊进入生长期。说明负载PRP的可溶可拆卸性微针具有良好地促进皮肤及毛发再生的治疗效果。
以上实施例仅用来说明本发明的详细方法，本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明白，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (9)
1.一种促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S10、提取自体血浆制品并加入冻干缓冲液进行冻干处理，所述自体血浆制品选自PRP、CGF、PL的任一种；
S20、将冻干的自体血浆制品沉积在具有多个锥形微腔的模具中并离心处理；
S30、采用可溶性聚合物水溶液填充微腔，然后进行恒温培养形成浓缩的可溶性聚合物，所述可溶性聚合物选自GelMA或透明质酸；
S40、将基底聚合物水溶液沉积到模具上，培养、干燥、分离，制得可溶可拆卸性微针。
2.根据权利要求1所述的促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法，其特征在于，所述冻干缓冲液选自Hepes、NaCl、NaHCO3、NaH2PO4、KCl、MgCl2、海藻糖、葡萄糖、人血清白蛋白、二甲基亚砜、聚乙烯吡咯烷酮、甘露醇中的任一种或至少两种的组合。
3.根据权利要求1所述的促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法，其特征在于，所述基底聚合物选自聚乙烯醇、甲基丙烯酸化的透明质酸、葡糖胺聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、聚(亚烷基二醇)、聚(氧化烯)、聚(羟基烷基甲基丙烯酰胺)中的任一种或至少两种的组合。
4.根据权利要求1所述的促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法，其特征在于，所述可溶可拆卸性微针的长度为100-2000μm，相邻所述可溶性可拆卸性微针的针尖间距为100-5000μm，所述可溶可拆卸性微针的底部最大尺寸为50-800μm。
5.根据权利要求1所述的促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法，其特征在于，步骤S10具体包括以下步骤：
S10A、采集静脉血，在100-300g、离心5-15分钟；
S10B、将离心后的血浆转移至新试管中在1400-1600g、5-15分钟；
S10C、保留部分血浆用于血小板再悬浮，制得自体血浆制品；
S10D、将自体血浆制品在加入冻干缓冲液后，-80℃下预冻12-24小时，然后使用真空冷冻干燥机冷冻干燥24-48小时，并储存在-20℃下备用。
6.根据权利要求1所述的促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法，其特征在于，步骤S20具体为：
将冻干的自体血浆制品沉积在具有多个锥形微腔的PDMS模具中并以4000rpm离心10min。
7.根据权利要求1所述的促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法，其特征在于，步骤S30具体为：
使用500μL-2ml可溶性聚合物水溶液填充微腔，然后将填充微腔后的模具放置在30-35℃恒温培养箱中保持2-4小时，形成浓缩的可溶性聚合物。
8.根据权利要求1所述的促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针的制备方法，其特征在于，步骤S40中，基底聚合物水溶液的用量为500μL-2ml。
9.一种促皮肤及毛发再生的可溶可拆卸性微针，其特征在于，采用权利要求1至8任一项所述的制备方法制得，所述冻干自体血浆制品在所述可溶可拆卸性微针的微针阵列中的量为1μg-25mg/cm2微针阵列。
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Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106029102A (zh) * | 2015-01-15 | 2016-10-12 | 小威廉·K·博斯 | 使用富血小板血浆进行组织的修复和复壮 |
| CN106692196A (zh) * | 2017-02-09 | 2017-05-24 | 深圳市合康生物科技股份有限公司 | 一种自体美容微针制剂的制备方法及其应用 |
| CN107376427A (zh) * | 2017-07-06 | 2017-11-24 | 南方医科大学南方医院 | 一种不含外源性添加剂的富血小板血浆制备方法 |
| CN107550841A (zh) * | 2017-10-10 | 2018-01-09 | 英科博雅集团有限公司 | 胎盘生物活性因子制备的私人定制美容护肤产品及其制法 |
| CN107580498A (zh) * | 2015-01-21 | 2018-01-12 | E·特尔科夫 | 用于增强细胞再生和细胞生长的血小板浓缩物 |
| RU2751214C1 (ru) * | 2020-09-22 | 2021-07-12 | Государственное бюджетное учреждение здравоохранения города Москвы "Московский научно-практический Центр дерматовенерологии и косметологии города Москвы" | Способ лечения андрогенетической алопеции |
| CN214105569U (zh) * | 2020-11-19 | 2021-09-03 | 清华大学深圳国际研究生院 | 一种用于毛发再生的装置 |
-
2022
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Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106029102A (zh) * | 2015-01-15 | 2016-10-12 | 小威廉·K·博斯 | 使用富血小板血浆进行组织的修复和复壮 |
| CN107580498A (zh) * | 2015-01-21 | 2018-01-12 | E·特尔科夫 | 用于增强细胞再生和细胞生长的血小板浓缩物 |
| CN106692196A (zh) * | 2017-02-09 | 2017-05-24 | 深圳市合康生物科技股份有限公司 | 一种自体美容微针制剂的制备方法及其应用 |
| CN107376427A (zh) * | 2017-07-06 | 2017-11-24 | 南方医科大学南方医院 | 一种不含外源性添加剂的富血小板血浆制备方法 |
| CN107550841A (zh) * | 2017-10-10 | 2018-01-09 | 英科博雅集团有限公司 | 胎盘生物活性因子制备的私人定制美容护肤产品及其制法 |
| RU2751214C1 (ru) * | 2020-09-22 | 2021-07-12 | Государственное бюджетное учреждение здравоохранения города Москвы "Московский научно-практический Центр дерматовенерологии и косметологии города Москвы" | Способ лечения андрогенетической алопеции |
| CN214105569U (zh) * | 2020-11-19 | 2021-09-03 | 清华大学深圳国际研究生院 | 一种用于毛发再生的装置 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 富血小板血浆对毛发生长影响的研究进展;苗勇等;《中华整形外科杂志》;第38卷(第4期);第469-473页 * |
| 富血小板血浆裂解液复合透明质酸微针的制备及其应用于大鼠伤口愈合的观察;索正新等;《中国输血杂志》;第35卷(第5期);第508-514页 * |
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