CN114982787B - 一种防治芦笋茎枯病的组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种防治芦笋茎枯病的组合物及其制备方法，属于农业生物防治技术领域。本发明所述组合物由植物提取液30～60份、表面活性剂0.5～2份组成；所述植物提取液由金钟藤提取液：茵陈提取液：鱼腥草提取液按照体积比4～8:2～5:2～5混合得到。本发明还提供了所述组合物的制备方法以及在防治芦笋茎枯病中的使用方法。本发明提供的组合物原料简单廉价，绿色环保，对农业生长环境无任何二次污染，并且可以有效防治芦笋茎枯病，显著提高芦笋产量和品质。
Description
技术领域
本发明属于农业生物防治技术领域，尤其涉及一种防治芦笋茎枯病的组合物及其制备方法。
背景技术
芦笋(拉丁学名：Asparagus officinalisL.)是天门冬科天门冬属多年生草本植物石刁柏的幼苗，可供蔬食。芦笋营养价值极高，含有丰富的维生素B、维生素A以及叶酸、硒、铁、锰、锌等微量元素，具有人体所必需的各种氨基酸。芦笋含硒量高于一般蔬菜，与含硒丰富的蘑菇接近，甚至可与海鱼、海虾等的含硒量媲美，并且能润肺、镇咳、祛痰，具有抑制肿瘤生长等功能，深受人们的喜爱，享有“蔬菜之王”的美称。
近年来，随着芦笋栽培面积扩大，病害发生逐年加重，尤其是茎枯病的发生和危害严重影响了芦笋的产量与质量。芦笋茎枯病是由真菌致病，病原菌为天门冬拟茎点霉。芦笋茎枯病在多雨有风的条件下传染迅速，雨水溅沾也可传染。空气传染是大面积发病的主要原因，田间蔓延的方向和发病迅速常受风的影响。同时，地势低洼，土质黏重，氮肥过多等，均易加重该病发作。芦笋茎枯病会导致芦笋生长发育不良，降低产量与品质，甚至提前枯死，全田毁灭。而目前，芦笋茎枯病的防治主要以化学防治为主，但由于多年来大量使用化学药剂防治导致该病菌在不少地区出现了较强的抗药性而使农药的效果大打折扣，并且大量的化学药剂使用也会造成环境污染、农药残留等多种问题。因此，寻找绿色环保并且可有效防治芦笋茎枯病的药剂成为本领域要解决的关键问题之一。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种防治芦笋茎枯病的组合物，可以有效防治芦笋茎枯病，提高芦笋产量和品质。
为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：
本发明提供了一种防治芦笋茎枯病的组合物，所述组合物以重量份计，由植物提取液30～60份、表面活性剂0.5～2份组成；所述植物提取液由金钟藤提取液：茵陈提取液：鱼腥草提取液按照体积比4～8:2～5:2～5混合得到。
优选的，所述组合物以重量份计，由植物提取液41～54份、表面活性剂0.9～1.4份组成。
优选的，所述植物提取液由金钟藤提取液：茵陈提取液：鱼腥草提取液按照体积比5.2～6.7:3.1～4.4:3.4～4.2混合得到。
优选的，所述金钟藤提取液的制备方法包括：金钟藤粉碎后，按照料液比1:8～20g/mL加入80％的乙醇溶液回流提取，提取液过滤，滤液即为金钟藤提取液。
优选的，所述茵陈提取液的制备方法包括：茵陈粉碎后，按照料液比1:12～24g/mL加水，大火煮沸后转文火煎煮2～6h，过滤去除残渣，滤液即为茵陈提取液。
优选的，所述鱼腥草提取液的制备方法包括：鱼腥草粉碎后，按照料液比1:10～18g/mL加水，再加入纤维素酶和木聚糖酶，在超声波辅助作用条件下酶解10～13h，酶解后进行过滤，滤液即为鱼腥草提取液。
优选的，所述纤维素酶的添加量为鱼腥草质量的3～5％，所述木聚糖酶的添加量为鱼腥草质量的2～4％。
本发明还提供了上述组合物的制备方法，包括以下步骤：金钟藤提取液、茵陈提取液和鱼腥草提取液按比例混合，再加入表面活性剂，搅拌混合均匀。
本发明还提供了一种防治芦笋茎枯病的方法，包括：将上述组合物稀释成50～200倍稀释液进行喷雾。
优选的，所述稀释液每次使用量为300～1000mL/hm2。
本发明的有益效果：
本发明通过对金钟藤提取液、茵陈提取液、鱼腥草提取液进行合理配比，使三者的活性成分共同作用，可以发挥快速抑制芦笋茎枯病的功效，并且可以长时间内抑制茎枯病的再次发病，达到有效提高芦笋产量和质量的作用。
本发明利用植物提取液的抑菌作用防治芦笋茎枯病，不需要使用大量的化学试剂，产品绿色环保，对环境无任何二次污染，同时降低了芦笋种植过程中的农药残留，显著提高了芦笋的食品安全和种植效益。
具体实施方式
本发明提供了一种防治芦笋茎枯病的组合物，所述组合物以重量份计，由植物提取液30～60份、表面活性剂0.5～2份组成；所述植物提取液由金钟藤提取液：茵陈提取液：鱼腥草提取液按照体积比4～8:2～5:2～5混合得到。
本发明所述组合物中仅含有植物提取液和表面活性剂，通过对金钟藤提取液、茵陈提取液、鱼腥草提取液中的活性成分进行合理配比，达到有效防治芦笋茎枯病的功效，并且避免了芦笋中农药残留。
在本发明中，所述组合物的质量份数优选为由植物提取液41～54份、表面活性剂0.9～1.4份组成，更优选为植物提取液47～51份，表面活性剂1.1～1.2份。
本发明对具体的表面活性剂的选择不作限定。本发明添加表面活性剂可以有效提高植物提取液在芦笋茎表面的附着，提高植物提取液中活性成分对芦笋茎枯病病原菌的抑制/杀灭效果。
在本发明中，所述植物提取液的配比优选为金钟藤提取液：茵陈提取液：鱼腥草提取液按照体积比5.2～6.7:3.1～4.4:3.4～4.2混合得到，更优选为金钟藤提取液：茵陈提取液：鱼腥草提取液按照体积比5.8～6.2:3.5～3.8:3.8～4.0混合得到。
在本发明中，所述金钟藤提取液、茵陈提取液、鱼腥草提取液分别是由金钟藤全草、茵陈全草、鱼腥草全草提取得到。
金钟藤(Merremia boisiana(Gagn.)v.Ooststr.)是旋花科，鱼黄草属大型缠绕草本或亚灌木。金钟藤中含有大量的萜类、醇类、酯类、酮类等多种次生代谢物，对多种植物具有明显的化感作用。
本发明所述金钟藤提取液的制备方法包括：金钟藤粉碎后，按照料液比1:8～20g/mL加入80％的乙醇溶液回流提取，提取液过滤，滤液即为金钟藤提取液。所述金钟藤粉碎后优选为过5～10目筛；所述料液比优选为1:12～15g/mL，更优选为1:13～13.5g/mL。本发明所述回流提取温度为75～85℃，优选为79～82℃；所述回流提取时间为30～50min，优选为39～43min。
本发明发现，上述方法制备得到的金钟藤全草提取液可以有效抑制芦笋茎枯病的病原菌生长，喷施于芦笋茎表面可以达到长效抑菌作用，并且对芦笋的生长不产生影响。
茵陈(ArtemisiacapillarisThunb.)是管状花目、菊科、牛至属植物，别名牛至、白毫、耗子爪、田耐里等。茵陈全草可入药，具有清热利湿、解热抗炎、驱虫抑菌的作用，可有效抑制多种细菌或真菌的生长。
本发明所述茵陈提取液的制备方法包括：茵陈粉碎后，按照料液比1:12～24g/mL加水，大火煮沸后转文火煎煮2～6h，过滤去除残渣，滤液即为茵陈提取液。所述茵陈粉碎后优选为过5～10目筛；所述料液比优选为1:14～21g/mL，更优选为1:17～18g/mL；所述文火煎煮时间优选为3.5～4.5h。
本发明发现，上述方法制备得到的茵陈提取液，可以有效杀灭芦笋茎枯病病原菌，并抑制病原菌的再生，进而有效抑制茎枯病的再次发病。
鱼腥草(Houttuynia cordata Thunb.)是三白草科、蕺菜属植物，别名岑草、蕺、菹菜、紫背鱼腥草。鱼腥草主含挥发油，癸酰乙醛鱼腥草素等多种成份，对多种病原菌具有明显的抑制作用。
本发明所述鱼腥草提取液的制备方法包括：鱼腥草粉碎后，按照料液比1:10～18g/mL加水，再加入纤维素酶和木聚糖酶，在超声波辅助作用条件下酶解10～13h，酶解后进行过滤，滤液即为鱼腥草提取液。所述鱼腥草粉碎后优选为过5～10目筛；所述料液比优选为1:13～17g/mL，更优选为1:15～16g/mL；所述纤维素酶的添加量为鱼腥草质量的3～5％，优选为3.6～4.1％；所述木聚糖酶的添加量为鱼腥草质量的2～4％，优选为2.8～3.2％；所述酶解时间优选为11.5～12h。本发明所述酶解温度为55～62℃，优选为57～59℃。本发明对具体的超声波设备不作限定。
本发明发现，上述方法制备得到的鱼腥草提取液，与金钟藤提取液和茵陈提取液中的活性成分相互作用，可以发挥快速抑制芦笋茎枯病的功效，并且可以长时间内抑制茎枯病的再次发病，达到有效提高芦笋产量和质量的作用。
本发明还提供了上述组合物的制备方法，包括以下步骤：金钟藤提取液、茵陈提取液和鱼腥草提取液按比例混合，再加入表面活性剂，搅拌混合均匀。本发明对具体的搅拌方式和搅拌参数不作限定。
本发明还提供了一种防治芦笋茎枯病的方法，将上述组合物稀释成50～200倍稀释液进行喷雾，所述稀释倍数优选为80～120倍。
本发明可以在芦笋茎枯病的发病高峰期提前喷洒一次药液，达到预防芦笋茎枯病的作用。本发明也可以在芦笋茎枯病发病期喷洒上述药液，每隔5～7天喷洒一次，可达到有效治疗芦笋茎枯病的作用。
本发明所述稀释液每次使用量为300～1000mL/hm2，优选为每次使用量为400～600mL/hm2。
本发明上述组合物药液在使用时，也可以根据芦笋茎枯病的严重性适当增加或减少使用量和喷洒次数。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
本实施例提供了防治芦笋茎枯病的组合物：
(1)制备金钟藤提取液：金钟藤粉碎，过5目筛，按照料液比1:13g/mL加入80％的乙醇溶液，在80℃条件下进行回流提取40min，所得提取液过滤，滤液备用；
(2)制备茵陈提取液：茵陈粉碎后，过5目筛，按照料液比1:18g/mL加水，大火煮沸后转文火煎煮4h，过滤去除残渣，滤液备用；
(3)制备鱼腥草提取液：鱼腥草粉碎后，按照料液比1:16g/mL加水，再加入鱼腥草质量4％的纤维素酶和3％的木聚糖酶，在超声波辅助作用条件下于58℃酶解12h，酶解后进行过滤，滤液备用；
(4)分别取60mL金钟藤提取液、35mL茵陈提取液、40mL鱼腥草提取液混合，然后加入2.7g甘油，搅拌混合均匀即可。
实施例2
本实施例与实施例1的区别仅在于：分别取70mL金钟藤提取液、38mL茵陈提取液、42mL鱼腥草提取液混合，然后加入4g甘油，搅拌混合均匀即可。
实施例3
本实施例与实施例1的区别仅在于：所述甘油替换为十二烷基苯磺酸钙。
对比例1
与实施例1的区别仅在于：分别取81mL金钟藤提取液、54mL鱼腥草提取液混合，然后加入2.7g甘油，搅拌混合均匀即可，其余均同实施例1。
对比例2
与实施例1的区别仅在于：分别取63mL茵陈提取液、72mL鱼腥草提取液混合，然后加入2.7g甘油，搅拌混合均匀即可，其余均同实施例1。
对比例3
与实施例1的区别仅在于：分别取85mL金钟藤提取液、50mL茵陈提取液混合，然后加入2.7g甘油，搅拌混合均匀即可，其余均同实施例1。
对比例4
与实施例1的区别仅在于：采用紫苏提取液替换鱼腥草提取液，其余均同实施例1。其中制备紫苏提取液的方法为：紫苏粉碎，过5目筛，按照料液比1:16g/mL加水，再加入紫苏质量4％的纤维素酶和3％的木聚糖酶，在超声波辅助作用条件下于58℃酶解12h，酶解后进行过滤，滤液备用。
对比例5
与实施例1的区别仅在于：采用前胡提取液替换金钟藤提取液，其余均同实施例1。其中制备前胡提取液的方法为：前胡粉碎，过5目筛，按照料液比1:16g/mL加水，再加入前胡质量4％的纤维素酶和3％的木聚糖酶，在超声波辅助作用条件下于58℃酶解12h，酶解后进行过滤，滤液备用。
对比例6
与实施例1的区别仅在于：分别取60mL金钟藤提取液、35mL茵陈提取液、40mL鱼腥草提取液混合，搅拌均匀即可。
对比例7
与实施例1的区别仅在于：分别取60mL金钟藤提取液、35mL茵陈提取液、40mL鱼腥草提取液混合，然后加入2.7g甘油、30g多菌灵(可湿性粉剂)和25g壳寡糖(1600Da)，搅拌混合均匀即可。
实施例4
本实施例采用杨迎青、兰波等《6种杀菌剂对芦笋茎枯病的防治效果》文中记载的实验方法探究了实施例1～3和对比例1～7中制备得到的药液对芦笋茎枯病防治效果以及增产指标的影响。
1、试验设计
每试验小区面积30m2，每种药剂均稀释成100倍液，用量为600g/hm2；以清水处理为对照。共设11个处理，3次重复，随机区组排列。
2、病害调查
每小区采用对角线五点取样，每点取相连5丛芦笋，每丛芦笋随机调查3根芦笋，共调查25丛芦笋75根芦笋，记录健株数和各级病株数。病情分级标准为：0级：无发病；1级：发病面积占总面积的6％以下；2级：发病面积占总面积的6％～10％；3级：发病面积占总面积的11％～20％；4级：发病面积占总面积的21％～30％；5级：发病面积占总面积的30％以上。
3、数据处理计算方法
病情指数＝∑(各级病株数×相对级数值)/调查总株数×5×100；
防治效果＝(对照区病情指数-处理区病情指数)/对照区病情指数×100％；
增产率＝(处理区产量-空白对照区产量)/空白对照区产量×100％。
4、实验结果
对3次重复实验的平均值进行统计，结果见表1。
表1不同组合物对茎枯病防治及增产指标的影响
由表1可以看出，实施例1～3制备得到的组合物药液对芦笋茎枯病的防效均在94％以上，且均可以使芦笋增产20％以上。表明本发明制备得到的组合物对芦笋茎枯病具有良好的防治效果。
而对比例1～3中分别舍弃了茵陈提取液、金钟藤提取液和鱼腥草提取液的添加，但总的植物提取液含量不减，所得组合物对芦笋茎枯病的防治效果均有所下降，且芦笋增产率仅在6～7％。表明本发明是通过对茵陈提取液、金钟藤提取液和鱼腥草提取液中的有效成分进行合理配比，三者协同增效达到了对芦笋茎枯病良好的防治效果和增产效果。
对比例4～5中分别采用紫苏提取液和前胡提取液替换鱼腥草提取液和金钟藤提取液，与其他两种提取液进行配比，所得组合物对芦笋茎枯病的防治效果均有所下降，并且对比例4所得组合物对芦笋茎枯病的防治效果下降显著，几乎不具有防治效果。表明并非所有具有抑菌功效的植物提取液都可以配比得到有效防治芦笋茎枯病的组合物药液，本发明对茵陈提取液、金钟藤提取液和鱼腥草提取液进行合理配比，使三者具有协同增效作用，而不会互相影响，达到了对芦笋茎枯病良好的防治效果和增产效果。
对比例6中省略表面活性剂的添加，所得组合物对芦笋茎枯病的防治效果有所下降，表明表面活性剂通过增加植物提取液在芦笋表面的停留时间和附着能力，提高了对芦笋茎枯病的防治效果。
对比例7中除植物提取液和表面活性剂外，还添加了对多种细菌和真菌具有杀灭作用的壳寡糖和多菌灵，所得组合物对芦笋茎枯病的防治效果与实施例1～3的效果相差不大，较实施例1～3的功效略有降低。表明本发明通过茵陈提取液、金钟藤提取液、鱼腥草提取液和表面活性剂的合理配比，对芦笋茎枯病的防治效果和增产效果具有显著提升，无需添加其他额外杀菌原料。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (3)
1.一种防治芦笋茎枯病的组合物，其特征在于，所述组合物由如下制备方法制备得到：
(1)制备金钟藤提取液：金钟藤粉碎，过5目筛，按照料液比1:13g/mL加入80％的乙醇溶液，在80℃条件下进行回流提取40min，所得提取液过滤，滤液备用；
(2)制备茵陈提取液：茵陈粉碎后，过5目筛，按照料液比1:18g/mL加水，大火煮沸后转文火煎煮4h，过滤去除残渣，滤液备用；
(3)制备鱼腥草提取液：鱼腥草粉碎后，按照料液比1:16g/mL加水，再加入鱼腥草质量4％的纤维素酶和3％的木聚糖酶，在超声波辅助作用条件下于58℃酶解12h，酶解后进行过滤，滤液备用；
(4)分别取60mL金钟藤提取液、35mL茵陈提取液、40mL鱼腥草提取液混合，然后加入2.7g甘油，搅拌混合均匀即可。
2.一种防治芦笋茎枯病的组合物，其特征在于，所述组合物由如下制备方法制备得到：
(1)制备金钟藤提取液：金钟藤粉碎，过5目筛，按照料液比1:13g/mL加入80％的乙醇溶液，在80℃条件下进行回流提取40min，所得提取液过滤，滤液备用；
(2)制备茵陈提取液：茵陈粉碎后，过5目筛，按照料液比1:18g/mL加水，大火煮沸后转文火煎煮4h，过滤去除残渣，滤液备用；
(3)制备鱼腥草提取液：鱼腥草粉碎后，按照料液比1:16g/mL加水，再加入鱼腥草质量4％的纤维素酶和3％的木聚糖酶，在超声波辅助作用条件下于58℃酶解12h，酶解后进行过滤，滤液备用；
(4)分别取70mL金钟藤提取液、38mL茵陈提取液、42mL鱼腥草提取液混合，然后加入4g甘油，搅拌混合均匀即可。
3.一种防治芦笋茎枯病的组合物，其特征在于，所述组合物由如下制备方法制备得到：
(1)制备金钟藤提取液：金钟藤粉碎，过5目筛，按照料液比1:13g/mL加入80％的乙醇溶液，在80℃条件下进行回流提取40min，所得提取液过滤，滤液备用；
(2)制备茵陈提取液：茵陈粉碎后，过5目筛，按照料液比1:18g/mL加水，大火煮沸后转文火煎煮4h，过滤去除残渣，滤液备用；
(3)制备鱼腥草提取液：鱼腥草粉碎后，按照料液比1:16g/mL加水，再加入鱼腥草质量4％的纤维素酶和3％的木聚糖酶，在超声波辅助作用条件下于58℃酶解12h，酶解后进行过滤，滤液备用；
(4)分别取60mL金钟藤提取液、35mL茵陈提取液、40mL鱼腥草提取液混合，然后加入2.7g十二烷基苯磺酸钙，搅拌混合均匀即可。
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