CN114949208A - 纳米光动力材料及其脉络膜新生血管的治疗的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种纳米光动力材料的制备方法,包括先制备负载光敏剂的金属有机框架、在外先后两次进行修饰、最后将功能纳米颗粒吸附在最外侧。本发明还公开了上述制备方法制得的纳米光动力材料及其应用。本发明所述方法仅需简单的混合搅拌、离心、洗涤步骤即可制得上述纳米材料,步骤简单,操作性强;得到的纳米光动力材料可以靶向结合到新生血管内皮细胞表面高表达的整合素受体,提高治疗的精准性,同时该纳米光动力材料可以实现对微环境中氧化应激产物双氧水的清除,还可以变废为宝促进氧气的产生,显著提高光动力治疗效果的同时通过抗炎、缓解缺氧、抗VEGF等多途径实现对脉络膜新生血管的多靶点治疗,并延缓反应性血管生成。
Description
技术领域
本发明涉及纳米医疗材料领域,具体涉及一种纳米光动力材料及其脉络膜新生血管的治疗的应用。
背景技术
年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)是一种与年龄相关的致盲性退行性眼底病变,全球约有3000万AMD患者,预计到2040年,AMD将影响2.88亿人。AMD被世界卫生组织(world health organization,WHO)确定为三大致盲疾病之一,因AMD失明的人数占全世界所有失明人数的8.7%。目前,我国约有AMD患者360万人,随着经济发展及人口老龄化的加剧,AMD在我国发病率呈逐年上升的趋势,现已跃居我国第三大致盲原因。AMD患者90%的严重视力丧失与脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)形成有关,因此对CNV的有效治疗十分迫切。
CNV的发生发展是一个相对复杂的过程,包含了氧化应激、炎症反应、缺氧以及新生血管相关信号通路的激活等。过度的血管生成会导致出血、水肿、视网膜脱离,最终导致视力丧失。目前临床上治疗CNV的常用方法是抗血管生成治疗和光动力封闭新生血管治疗,同时配合一定的抗炎治疗。
抗血管生成治疗主要是向玻璃体腔内注射抗血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF),包括雷珠单抗、贝伐单抗等,为临床治疗CNV的一线方法。然而目前研究发现,抗VEGF治疗效果欠佳,临床需求明显未得到满足比例高达50%;长期密集的VEGF阻断策略会阻碍VEGF的营养作用,加剧毛细血管变性,导致缺氧加重;单药抗VEGF单一靶点治疗易诱导耐药产生。此外,长期眼内注射治疗将增加不良事件的风险,包括视网膜脱离和眼内炎。有研究者制备了可静脉注射的混合细胞膜包裹的仿生纳米颗粒,通过同源靶向阻断VEGF无创治疗CNV,这种策略避免了玻璃体内注射的侵入性过程,然而忽略了单一靶点治疗的局限性及炎症在促进血管生成中的作用。将抗炎治疗与抗VEGF治疗联合使用,能够延缓抗VEGF药物生物疗效的降低,并提高患者的视力。然而抗炎治疗需要反复玻腔注射,这将极大提高眼内炎、高眼压、白内障等并发症和副作用的风险。有研究者使用一种可被炎症性CNV病变中丰富的基质金属蛋白酶裂解的肽链,将调节性T细胞来源的工程化外泌体与抗VEGF抗体结合,实现了对炎症和VEGF活性抑制的时空联合,达到了比抗炎及抗VEGF联合治疗更好的抑制CNV的效果,同时避免了高眼压等并发症的发生,然而上述方法仍然无法避免血管封闭后缺氧的问题。
光动力治疗(photodynamic therapy,PDT)是一种氧气依赖型的具有低副作用和高时空选择性的前景广阔的治疗方法。PDT利用光敏剂在特定波长的光与氧气参与下产生活性氧,实现对病变细胞的选择性光化学破坏和CNV血管的闭塞。由于眼球是人体唯一的光学器官,基于光学的成像和治疗的方法在眼病的诊断和治疗中显示出极大的吸引力和优势。PDT具有诸多优势:1)可减少抗VEGF干预次数;2)可使对抗VEGF单药耐药的晚期CNV长期封闭;3)对抗VEGF单药治疗失败的患者抢救治疗效果显著;4)PDT是多靶点治疗方法,不易导致患者耐药。但是,PDT是一种氧气依赖型治疗方式,其受限于CNV相对缺氧的微环境。此外,PDT后的缺氧和炎症反应可能会导致反应性血管的生成。
因此,PDT/抗VEGF/抗炎/缓解缺氧联合治疗在降低抗VEGF治疗需求、降低并发症发生率、降低耐药概率、提高晚期疾病治疗效果等方面具有广阔的前景。维替泊芬是FDA批准的首个也是唯一一个用于CNV临床治疗的光敏剂。维替泊芬的选择性主要依赖于CNV内皮细胞膜上低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)受体的表达增加。然而,视网膜色素上皮(retina pigment epithelium,RPE)细胞上也有大量的LDL受体,因此维替泊芬可能会对RPE细胞造成严重损害。此外,使用维替泊芬对CNV进行光动力治疗存在上述光动力治疗的固有问题。
发明内容
因此,本发明要解决的技术问题在于现有脉络膜新生血管的治疗中存在的问题,从而提供一种纳米光动力材料及其脉络膜新生血管的治疗的应用。
为此,本发明采用如下技术方案:
本发明提供一种纳米光动力材料的制备方法,包括如下步骤:
S1:制备含有光敏剂药物的第一金属框架材料;
S2:对第一金属框架材料进行修饰,得到第二金属框架材料;
S3:使用含有伯胺的配体对第二金属框架材料进行修饰,得到第三金属框架材料;
S4:将功能纳米颗粒加入第三金属框架材料水溶液中混合,反应后取沉淀得到所述纳米光动力材料。
优选地,
步骤S1中,所述第一金属框架材料的制备方法为,将2-甲基咪唑溶于水后加入光敏剂药物,滴加锌盐溶液进行反应,取沉淀得到第一金属框架材料;
步骤S2中,所述对第一金属框架材料进行修饰为,将第一金属框架材料重悬于含有多巴胺的Tris缓冲液中,反应后取沉淀得到第二金属框架材料。
其中,步骤S1中的第一金属框架材料根据需求,也可以采用UiO-66(通过Zr和对苯二甲酸合成)、PCN-224(通过Zr离子和四羧酸苯基卟啉合成)、HKUST-1(通过铜离子和均苯三酸合成);步骤S2中多巴胺修饰可以换成别的修饰技术,例如通过酰胺反应、席夫碱反应、迈克尔加成进行修饰。
进一步地,步骤S1中,所述光敏剂药物为吲哚菁绿,同时根据需求,还可以使用其他近红外光光敏剂,如甲苯胺蓝;
2-甲基咪唑、锌盐和吲哚菁绿的摩尔比为70:1:0.01-0.5,反应时间为3-5小时。
步骤S2中,多巴胺的浓度为0.1-2mg/mL,反应时间为15-120min。
步骤S3中,含有伯胺的配体为cRGD和mPEG-NH2混合,cRGD和mPEG-NH2的摩尔比为5-10:1,反应时间为1-4小时;
优选地,cRGD(RGD)的浓度为0.4mg/mL,mPEG-NH2(PEG)的浓度为0.4mg/mL。
其中,cRGD可以替换为其余可以和新生血管表面高表达的受体能特异性结合的配体。
步骤S4中,步骤S4中所述功能纳米颗粒为Au纳米颗粒和Pt纳米颗粒混合;
其中,Au纳米颗粒可以换成具有抗VEGF或者抗炎作用的蛋白,例如雷珠单抗、激素;也可以换成其他金属纳米颗粒,例如Ag纳米颗粒;
Pt纳米颗粒可以换成过氧化氢酶,或者换成同样具有类过氧化氢酶催化功能的金属纳米材料,例如铱(Ir)纳米颗粒,氧化锰(MnO2)纳米颗粒。
优选地,
所述Au纳米颗粒为硫普罗宁包被的Au纳米颗粒;
所述Pt纳米颗粒为聚乙烯吡咯烷酮包被的Pt纳米颗粒;
所述Au纳米颗粒中的Au、Pt纳米颗粒的Pt和第三金属框架材料的质量比为:0.01-1:0.01-1:1;
所述反应时间为15-30min。
进一步地,各步骤中所述取沉淀为,在反应完成后在8000-12000rpm下离心8-12min,使用超纯水洗涤得到的沉淀。
本发明还提供一种纳米光动力材料,由上述制备方法制得。
本发明还提供上述纳米光动力材料的应用,其应用于脉络膜新生血管的治疗。
本发明技术方案,具有如下优点:
(1)本发明提供了一种纳米光动力材料,其制备包括先制备负载光敏剂的金属有机框架、在外包覆修饰涂层、最后将功能纳米颗粒吸附在最外侧。本发明得到的纳米光动力材料可以靶向结合到新生血管内皮细胞表面高表达的整合素受体,提高治疗的精准性,同时该纳米光动力材料可以实现对微环境中氧化应激产物双氧水的清除,还可以变废为宝促进氧气的产生,显著提高光动力治疗效果的同时通过抗炎、缓解缺氧、抗VEGF等多途径实现对脉络膜新生血管的多靶点治疗,并延缓反应性血管生成。
(2)本发明采用2-甲基咪唑和锌盐制备金属框架材料,其合成简单、生物相容性好、载药量可调、载药率高;同时锌对人体是无毒无害的,是有利于人体健康的元素。
(3)本发明金属有机框架表面优选使用多巴胺进行修饰,多巴胺通过自聚合得到仿贻贝聚多巴胺涂层,其可以与末端含有伯胺的分子发生反应,通过二次修饰方法构建功能化的表面。因此,PDA可以作为“桥梁”,为带氨基的PEG和RGD进一步修饰在纳米颗粒表面提供可能。
(3)本发明功能纳米颗粒优选材料Au纳米颗粒和Pt纳米颗粒混合,Pt纳米颗粒通过分解微环境中的双氧水产生氧气,不仅可以实现缺氧缓解,在近红外光照射下还可以起到增强的光动力治疗效果;Au纳米颗粒可以通过降低炎症因子的表达和抑制VEGF通路从而实现抗炎和抗血管生成的作用。
(4)本发明优选采用cRGD和甲氧基聚乙二醇胺(mPEG-NH2)进行第二步修饰,mPEG-NH2可以提高材料的稳定性和生物相容性;cRGD提高新生血管靶向性。
(5)整合素是一种广泛参与血管生成的细胞粘附分子,整合素αvβ3被认为是血管生成中最关键的分子,在脉络膜新生血管内皮细胞中有选择性表达增高。RGD肽能够高效选择性结合在新生血管内皮细胞高表达的整合素受体上,利用本发明涂层中的RGD肽靶向修饰的策略能够提高光动力治疗的精准性。RGD肽提高了材料对新生血管内皮细胞的精准高效结合,随着Pt对微环境中双氧水的分解和氧气的产生,在给予808nm近红外光照射后,吲哚菁绿可以利用产生的氧气实现对局部新生血管的高效损伤和封闭,可以解决光动力治疗中活性氧易淬灭、扩撒距离短的难题,极大程度提高治疗效果。
(6)本发明制备方法,所述方法仅需简单的混合搅拌、离心、洗涤步骤即可制得上述纳米材料,步骤简单,操作性强。
(7)本发明制得的纳米光动力材料应用于脉络膜新生血管的治疗,以光动力封闭血管治疗为主体,辅以抗血管生成、缓解缺氧、抗炎治疗,从多角度多靶点治疗脉络膜新生血管,大大提高治疗效果,其在血管封闭后起到联合抗炎、高效缓解缺氧、抗血管生成的效果,有效改善微环境,从而解决了光动力治疗后反应性血管生成的问题,为脉络膜新生血管的有效多级治疗提供新的思路。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施方式,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例1中得到的纳米光动力材料的制备流程;
图2为本发明试验例1对PAZIRP材料的表征实验结果中PAZIRP的SEM图。
图3为本发明试验例1对PAZIRP材料的表征实验结果中PAZIRP的STEM-HAADF图像和相应EDS元素分布图;
图4为本发明试验例2体外靶向性实验结果;
图5为本发明试验例3生物相容性结果;
图6为本发明试验例4体外过氧化氢酶活性结果;
图7为本发明试验例5体外光动力治疗效果;
图8为本发明试验例6体外抗炎抗血管生成性能实验中,人脐静脉内皮细胞(HUVECs)与不同材料共培养6小时后成管实验的代表性图像;标尺:250μm;
图9为本发明试验例6体外抗炎抗血管生成性能实验中,不同纳米材料对LPS诱导的RAW巨噬细胞的(A)IL-1β(B)IL-6(C)TNF-α的mRNA表达水平的影响情况。
具体实施方式
提供下述实施例是为了更好地进一步理解本发明,并不局限于所述最佳实施方式,不对本发明的内容和保护范围构成限制,任何人在本发明的启示下或是将本发明与其他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本发明相同或相近似的产品,均落在本发明的保护范围之内。
实施例中未注明具体实验步骤或条件者,按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。
本发明具体实施方式使用的药剂中:
六水合硝酸锌购自西陇科学;2-甲基咪唑购自阿拉丁;吲哚菁绿为爱必信的abs816408;RGD购自南京肽业;mPEG-NH2为阿拉丁的A163267,MW=5000;HAuCl4·3H2O为阿拉丁的G141105;硫普罗宁为sigma的M6635;H2PtCl6·6H2O为阿拉丁的C110574;聚乙烯吡咯烷酮(PVP)购自阿拉丁。
实施例1
本实施例提供一种纳米光动力材料,制备流程如图1所示制备方法具体如下:
(1)将0.146g六水合硝酸锌和2.838g 2-甲基咪唑(2-Methylimdazole)分别溶于1mL和10mL超纯水中。其次在2-甲基咪唑溶液中加入50mg吲哚菁绿(ICG),磁力搅拌均匀。然后小心滴加硝酸锌溶液到上述系统中,室温下500rpm搅拌4h,10000rpm离心10min收集产品,用超纯水洗涤3次,获得负载光敏剂吲哚菁绿的金属有机框架主体材料:ZIF-8-ICG(简称ZI);
(2)将ZIF-8-ICG重悬于多巴胺(PDA)(0.2mg/mL)的Tris(pH=8.5)缓冲液中,室温下500rpm搅拌1h,10000rpm离心10min收集产品,用超纯水洗涤3次,获得ZIF-8-ICG-PDA(简称ZI-PDA)。将ZI-PDA重悬于含Cyclo(Arg-Gly-Asp-d-Phe-Lys)(RGD)(0.4mg/mL)和mPEG-NH2(PEG)(0.4mg/mL)的Tris(pH=8.5)缓冲液中,室温下500rpm搅拌2h,10000rpm离心10min收集产品,用超纯水洗涤3次,获得ZIF-8-ICG-RGD-PEG(简称ZIRP),4℃保存备用。
(3)将HAuCl4·3H2O(0.15g,0.4mmol)和硫普罗宁(Tiopronin)(0.19g,1.2mmol)溶于20mL甲醇/乙酸(6:1)中,搅拌20min,生成宝石红色溶液。快速搅拌下,一滴一滴滴加7.5mL硼氢化钠水溶液(0.30g,8.0mmol)。连续搅拌2h后,获得黑色悬液,真空40℃除去溶剂。残留物溶解在20毫升的水,然后溶液用Milli-Q水透析(透析膜、Solarbio MWCO=8000-14000)72h,冻干,获得Au@tiopronin(简称Au)纳米颗粒(Au NPs),用ICP定量Au元素浓度。
(4)将50.75mg H2PtCl6·6H2O溶于20mL聚乙烯吡咯烷酮(PVP)-乙二醇溶液(222mg,Mw=58000),充分超声后,转移至50mL双颈圆底烧瓶,180℃反应10min。冷却到室温,将得到的深棕色溶液加入180mL丙酮中,9000rpm离心10min,得到胶体分散的pvp-Pt(简称Pt)纳米颗粒(Pt NPs)。沉淀用丙酮-正己烷(v/v=1:1)洗两次去除多余的PVP,然后分散在10mL的DMF中4℃保存,用ICP定量Pt元素浓度。
(5)含0.2mgAu元素的上述Au纳米颗粒加入3mL的ZIRP(1mg/mL)水溶液中,室温下500rpm搅拌15分钟,再加入含0.1mgPt元素的上述Pt纳米颗粒,室温下500rpm再搅拌15分钟,10000rpm离心10min收集产品,用超纯水洗涤2次,获得Pt&Au@ZIF-8-ICG-RGD-PEG(简称为PAZIRP),即纳米光动力材料,4℃保存备用。
对比例1
本对比例提供一种金属有机框架材料,和实施例的区别在于,将步骤(2)得到的ZI-PDA重悬于mPEG-NH2(0.4mg/mL)的Tris(pH=8.5)缓冲液中,室温下500rpm搅拌2h,10000rpm离心10min收集产品,用超纯水洗涤3次,获得ZIF-8-ICG-PEG(简称ZI-PEG),4℃保存备用。
对比例2
本对比例提供一种纳米光动力材料,和实施例1的区别在于,没有制备Pt纳米颗粒,将含0.2mgAu元素的Au纳米颗粒加入3mL的ZIRP(1mg/mL)水溶液中,室温下500rpm搅拌15分钟,10000rpm离心10min收集产品,用超纯水洗涤2次,获得Au@ZIF-8-ICG-RGD-PEG(称为Au@ZIRP),4℃保存备用。
对比例3
本对比例提供一种纳米光动力材料,和实施例1的区别在于,没有制备Au纳米颗粒,将含0.1mg Pt元素的Pt纳米颗粒加入3mL的ZIRP(1mg/mL)水溶液中,室温下500rpm搅拌15分钟,10000rpm离心10min收集产品,用超纯水洗涤2次,获得Pt@ZIF-8-ICG-RGD-PEG(称为Pt@ZIRP),4℃保存备用。
试验例1
本试验例为对实施例1中各步骤得到的产品的表征试验,如图2和图3所示。图2为使用透射电子显微镜获得PAZIRP纳米颗粒的SEM图像,从图中可以看出PAZIRP纳米颗粒为分布均匀的多面体近球形结构的。图3通过STEM-HAADF对PAZIRP元素分布进行测试,从图中可以看出PAZIRP为80-100nm左右的颗粒,表面有小颗粒附着,整个纳米颗粒含有Zn、S、Pt、Au元素。
试验例2
本试验例为靶向性试验,采用细胞荧光实验对PAZIRP、ZIRP、ZI-PEG的靶向性进行测定。将预先接种于24孔板的HUVECs与80μg/mL FITC标记的ZI-PEG、ZIRP或PAZIRP孵育4h,然后与亲脂性细胞膜染料DiD共孵育。最后用DAPI对细胞进行染色,在荧光显微镜(LeicaDMI8)上观察荧光,结果如图4所示。可以看出,ZI-PEG干预组绿色荧光(FITC)与PBS组一致,几乎看不见;而ZIRP和PAZIRP组的绿色荧光明显强于ZI-PEG组。说明未经RGD靶向修饰的纳米颗粒ZI-PEG在细胞上的富集明显少于经RGD靶向修饰的纳米颗粒ZIRP和PAZIRP。提示RGD靶向修饰可以提高材料在HUVEC细胞上的富集。
试验例3
本试验例为生物相容性试验,将预接种于96孔板的HUVECs与不同浓度的ZI-PEG、ZIRP和PAZIRP孵育24小时,然后根据CCK-8试剂盒的协议测定细胞活活力,其结果如图5所示,从图中可见经三种材料(80μg/mL以内)干预后的HUVECs细胞活力均达到85%以上,证明80μg/mL以内的三种材料均具有良好的生物相容性。
试验例4
本试验为过氧化氢酶活性测定。
使用溶氧仪对PAZIRP进行产业性能测试。双氧水浓度为10mM,ICG、ZI(80μg/mL)、ZIRP、Au@ZIRP、PAZIRP(ICG、ZIRP、Au@ZIRP、PAZIRP中的ICG量与ZI中相等。其结果如图6所示,除PAZIRP外,其余溶液的溶解氧改变量(△DO)几乎为0,证明仅PAZIRP具有催化过氧化氢产氧性能,其性能来源于材料中的Pt纳米颗粒。
试验例5
本试验例为体外光动力治疗效果:
将预接种于96孔板的HUVECs和RPE(人视网膜色素上皮细胞)与不同浓度的ZI-PEG、ZIRP、PAZIRP孵育4小时,然后用808nm激光(800mW,3min)照射。根据CCK-8试剂盒的协议测定细胞活力。结果如图7所示。(ZI-PEG、ZIRP、PAZIRP中的ICG浓度与80μg/mL的ZI相同;H2O2=100μM)。在常氧(normoxia)条件下,ZI-PEG、ZIRP、PAZIRP干预后RPE活力均达到85%以上,证明材料对RPE细胞无光毒性。而HUVECs在接受ZIRP、PAZIRP光动力治疗后活性下降到15%以下,证明该材料具有良好的PDT效果。而在缺氧(Hypoxia)的环境中,经ZI-PEG、ZIRP、PAZIRP干预及PDT后,HUVECs活力达到70%以上,证明在缺氧的环境中ZI-PEG、ZIRP、PAZIRP无法达到良好的PDT效果。当给予H2O2后,经PAZIRP光动力干预后的HUVECs细胞活性下降到25%以下,而ZIRP干预后的细胞存活率仍有70%,证明PAZIRP能催化双氧水产生氧气从而实现缺氧环境中增强的PDT效果。
试验例6
本试验例为体外抗炎抗血管生成性能。
(1)使用康宁公司的基质胶matrigel(8-12μg/mL,50μL/孔)加入到96孔板汇总,37℃中孵育40min进行聚合。然后,将HUVECs(20000/孔)接种至孔中预先与ZI-PEG、ZIRP、Au@ZIRP、Pt@ZIRP、PAZIRP或PBS(均含20ng/mL VEGF)混合,种入孔板中(100μL/孔),在37℃条件下处理6h。最后,用显微镜摄影系统捕捉管的形成图像,结果如图8所示。可见Au@ZIRP、PAZIRP组血管管腔数量较少,管腔较少成形。血管分支明显较少,血管长度明显较短。(调整ZI-PEG、ZIRP、Au@ZIRP、Pt@ZIRP、PAZIRP浓度使得与80μg/mL的ZI含等浓度量的ICG)
(2)使用qRT-PCR技术对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞的IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达水平进行定量。将预先接种在96孔板上的RAW264.7细胞与含500ng/mL的LPS和ZI-PEG、ZIRP、Au@ZIRP、Pt@ZIRP、PAZIRP或PBS(均含500ng/mL的LPS)孵育48小时。以PBS孵育的细胞作为对照(不受LPS刺激)。(调整ZI-PEG、ZIRP、Au@ZIRP、Pt@ZIRP、PAZIRP浓度使得与80μg/mL的ZI含等浓度量的ICG)。使用qRT-PCR技术对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞的IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达水平进行定量,结果分别如图9中的(A)、(B)、(C)所示。与PBS组相比,LPS组的IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达明显增多,证明LPS诱导后可以提高促炎因子的表达。与LPS组和PAZIRP组相比,PAZIRP组的IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达明显降低,证明PAZIRP可以降低LPS诱导后RAW促炎因子的表达的提高。由此证明PAZIRP具有很好的抑制炎症因子表达的效果,其主要来自与Au纳米颗粒。
显然,上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例,而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (10)
1.一种纳米光动力材料的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1:制备含有光敏剂药物的第一金属框架材料;
S2:对第一金属框架材料进行修饰,得到第二金属框架材料;
S3:使用含有伯胺的配体对第二金属框架材料进行修饰,得到第三金属框架材料;
S4:将功能纳米颗粒加入第三金属框架材料水溶液中混合,反应后取沉淀得到所述纳米光动力材料。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,
步骤S1中,所述第一金属框架材料的制备方法为,将2-甲基咪唑溶于水后加入光敏剂药物,滴加锌盐溶液进行反应,取沉淀得到第一金属框架材料;
步骤S2中,所述对第一金属框架材料进行修饰为,将第一金属框架材料重悬于含有多巴胺的Tris缓冲液中,反应后取沉淀得到第二金属框架材料。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤S1中,所述光敏剂药物为吲哚菁绿;
2-甲基咪唑、锌盐和吲哚菁绿的摩尔比为70:1:0.01-0.5,反应时间为3-5小时。
4.根据权利要求2或3所述的制备方法,其特征在于,步骤S2中,多巴胺的浓度为0.1-2mg/mL,反应时间为15-120min。
5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法,其特征在于,步骤S3中,含有伯胺的配体为cRGD和mPEG-NH2,cRGD和mPEG-NH2的摩尔比为5-10:1,反应时间为1-4小时;
优选地,cRGD的浓度为0.4mg/mL,mPEG-NH2的浓度为0.4mg/mL。
6.根据权利要求1-5任一项所述的制备方法,其特征在于,步骤S4中,步骤S4中所述功能纳米颗粒为Au纳米颗粒和Pt纳米颗粒混合。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,
所述Au纳米颗粒为硫普罗宁包被的Au纳米颗粒;
所述Pt纳米颗粒为聚乙烯吡咯烷酮包被的Pt纳米颗粒;
所述Au纳米颗粒中的Au、Pt纳米颗粒的Pt和第三金属框架材料的质量比为:0.01-1:0.01-1:1;
所述反应时间为15-60min。
8.根据权利要求1-7任一项所述的制备方法,其特征在于,各步骤中所述取沉淀为,在反应完成后在8000-12000rpm下离心8-12min,使用超纯水洗涤得到的沉淀。
9.一种纳米光动力材料,其特征在于,由权利要求1-8任一项所述的制备方法制得。
10.权利要求1-8任一项所述的制备方法制得纳米光动力材料或权利要求9所述的纳米光动力材料的应用,其特征在于,应用于脉络膜新生血管的治疗。
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