CN114945381A

CN114945381A - 通过神经元转化的用于胶质瘤的化学疗法

Info

Publication number: CN114945381A
Application number: CN202080081779.8A
Authority: CN
Inventors: 陈功; I·索基尔尼
Original assignee: Penn State Research Foundation
Current assignee: Penn State Research Foundation
Priority date: 2019-11-25
Filing date: 2020-11-25
Publication date: 2022-08-26
Also published as: EP4065151A1; US20220409590A1; EP4065151A4; AU2020392116A1; CA3162888A1; WO2021108565A1; WO2021108565A9; JP2023502784A

Abstract

提供了用于治疗胶质瘤和将胶质瘤细胞转化为神经元的组合物和方法。所述组合物含有有效量的SKL2001，并且还可以含有SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT中的一种、两种、三种或四种。提供了含有SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT中的一种、两种、三种或四种的药物组合物。还提供了含有一个或多个密封容器的制品，所述密封容器含有SKL2001和SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT中的一种、两种、三种或四种。所述制品可以含有提供化合物用于治疗胶质瘤的指示的印刷材料。

Description

通过神经元转化的用于胶质瘤的化学疗法

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年11月25日提交的美国临时专利申请第62/940,000号的优先权，其全部公开内容通过引用并入本文。

技术领域

本公开总体上涉及用于治疗胶质瘤的组合物和方法。该组合物包含称为SKL2001的化合物，其单独或与一种或多种附加药剂SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT组合。将SKL2001与一种或多种附加药剂组合提高了胶质瘤细胞转化为神经元细胞的效率。

背景技术

鉴于癌症治疗的重大进展，多形性胶质母细胞瘤(GBM)的总体5年存活率停滞在略低于5％¹。目前治疗新诊断的GBM的护理标准包括切除、放射和用DNA烷化剂替莫唑胺治疗^2,3。此外，胶质瘤干细胞(GSC)与GBM化学抗性、异质性和复发有关^4,5。虽然替莫唑胺已被证明靶向GSC⁶，但它也可能使它们更致瘤⁷。因此，需要对抗GBM的治疗策略。本公开适用于这种需要。

发明内容

提供了用于将恶性神经胶质细胞(例如，胶质瘤)转化为神经元的组合物和方法。本公开证明本领域称为SKL2001的化合物提供胶质瘤细胞向神经元细胞的有效转化。将SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的一种或多种组合提高了胶质瘤细胞转化为神经元的效率。因此，该方法适用于单独使用SKL2001，或使用SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT中的任何一种或多种。

因此，在一个实施例中，本公开提供了一种用于将胶质瘤细胞转化为神经元的方法，该方法包括使胶质瘤细胞与有效量的SKL2001接触。

在一个实施例中，本公开提供了一种药物组合物，其包含SKL2001和SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少一种的组合。

在一个实施例中，本公开提供了一种包含药物组合物的制品，该药物组合物包含SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少一种，该制品进一步包含提供该药物组合物用于治疗胶质瘤的指示的印刷材料。

附图说明

图1.免疫组织化学图像，其显示SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT(SLCD+SKL2001)的组合显著增强了U251细胞中双皮质素(DCX)的表达。

图2.免疫组织化学图像，其显示SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT的组合在U251细胞中的剂量反应。

图3.SB431542的结构。

图4.LDN193189的结构。

图5.CHIR99021的结构

图6.DAPT的结构。

图7.SKL2001的结构。

具体实施方式

除非本文另有定义，否则本公开中使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。

当呈现一组替代方案时，具体地设想了构成所述组替代方案的成员的任何和所有组合。例如，如果一个项目选自由A、B、C和D组成的群组，则发明人具体设想每个提出的替代方案(例如，单独的A、单独的B等)，以及组合如A、B和D；A和C；B和C；等。术语“和/或”在两个或更多个项目的列表中使用时是指所列项目中的任何一个本身或与任何一个或多个其他所列项目的组合。例如，表达“A和/或B”旨在意指A和B中的一个或两者，即单独的A、单独的B或A和B的组合。表达“A、B和/或C”旨在意指单独的A、单独的B、单独的C、A和B的组合、A和C的组合、B和C的组合、或A、B和C的组合。

在整个本说明书中给出的每个数值范围都包括其上限值和下限值，以及落入其中的每个较窄的数值范围，就好像此类较窄的数值范围都明确地写在本文中一样。当本文提供数字范围时，该范围被理解为包括范围的边缘以及范围的定义边缘之间的任何数字。例如，“1与10之间”包含1与10之间的任何数字以及数字1和数字10。

当提及数字使用术语“约”时，应理解为是指加或减10％。例如，“约100”将包括从90至110。

单数术语“一(a)”、“一个(an)”和“该(the)”不旨在限制并且包括复数指代物，除非另有明确说明或上下文另有明确说明。

可以将使用本文所述的方法或组合物获得的任何结果与任何合适的参考值进行比较，如已知值或对照样品或对照值，鉴于本公开的益处，其合适的实例对于本领域技术人员来说是显而易见的。

本公开包含设计用于将胶质瘤细胞转化为神经元的组合物和方法。在这方面，本公开包括证明使U251细胞与SKL2001接触提供U251胶质母细胞瘤细胞向神经元细胞的有效转化的数据，如双皮质素表达所证明的。数据还证明，将SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT组合提高了U251胶质母细胞瘤细胞向神经元的转化效率。后四种化合物在本文中有时称为“SLCD”。包括后四种化合物和SKL2001的五种化合物组合在本文中有时称为“SLCDS”。这些SLCD化合物中的每一种都是本领域已知的并且是可商购的。这些化合物的代表性结构如图所示。本公开包括每种所述化合物的药学上可接受的盐。

U251细胞，在本领域中也称为U-251细胞，并且以前称为U-373细胞，是可商购的，如来自MILLIPORE-SIGMA的产品编号09063001。细胞来源于恶性胶质母细胞瘤肿瘤，并且特别是人类胶质母细胞瘤星形细胞瘤。因此，虽然本公开的某些实施例在体外得到证实，但预计数据可以扩展到体内应用，包括但不限于胶质瘤和相关脑癌的动物模型，并用于治疗人类。本公开包括使用所述化合物组合的预防和治疗方法。

SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT中的一种或多种的所有组合都涵盖在本公开中。在实施例中，SKL2001可能是用于接触胶质瘤细胞并将它们转化为神经元的唯一化合物。在实施例中，SKL2001化合物与SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT中的至少一种组合使用。在非限制性实施例中，本公开因此提供了组合物、方法和制品，其包括：

SKL2001和SB431542；

SKL2001和LDN193189；

SKL2001和CHIR99021；

SKL2001和DAPT；

SKL2001与SB431542和LDN193189；

SKL2001与SB431542和CHIR99021；

SKL2001与SB431542和DAPT；

SKL2001与LDN193189、CHIR99021；

SKL2001与CHIR99021和DAPT；

SKL2001与SB431542、LDN193189和CHIR99021；

SKL2001与LDN193189、CHIR99021和DAPT；

SKL2001与SB431542、CHIR99021和DAPT；和

SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT。

本公开包括组合物和方法，其包含SKL2001或由SKL2001组成，或单独SKL2001的用途，以及包括SKL2001的任何前述化合物组合。

在实施例中，使胶质瘤细胞与所述化合物(例如SKL2001)或所述化合物的组合接触包含向有此需要的受试者施用所述化合物或所述化合物的组合。因此，在一个非限制性实施例中，本公开包括向有此需要的受试者单独施用SKL2001，或包括SKL2001的任何所述组合。

在实施例中，需要所述方法的受试者患有CNS恶性肿瘤(例如，癌症)，包括但不一定限于脑或脑干病症。在实施例中，癌症仅包含单一类型的胶质瘤。在实施例中，癌症包含多于一种类型的胶质瘤细胞，例如混合胶质瘤。在实施例中，胶质瘤是高级别胶质瘤或低级别胶质瘤。将胶质瘤分级在本领域中是众所周知的。一般来说，低级别胶质瘤被认为是I期或II期。I期胶质瘤的一个非限制性实施例是儿童毛细胞星形细胞瘤。I级胶质瘤可能具有人类BRAF基因中的突变。最常见的II级胶质瘤是星形细胞瘤和少突胶质细胞瘤。II级胶质瘤经常具有在人类IDH1或IDH2基因中的突变。高级别胶质瘤是III级或IV级肿瘤。III级胶质瘤包括间变性星形细胞瘤和间变性少突胶质细胞瘤。IV级胶质瘤被称为胶质母细胞瘤。在不意图受任何特定理论束缚的情况下，认为所述化合物和方法适用于治疗包含一种或多种所述类型的胶质瘤的任何癌症。在实施例中，癌症因此包含一种或多种星形细胞瘤，其包括但不一定限于星形细胞瘤、间变性星形细胞瘤和胶质母细胞瘤。在实施例中，癌症包含室管膜瘤，包括但不一定限于间变性室管膜瘤、粘液乳头状室管膜瘤和室管膜下瘤。在实施例中，癌症包含少突胶质细胞瘤，包括但不限于少突胶质细胞瘤、间变性少突胶质细胞瘤和间变性少突星形细胞瘤。在实施例中，癌症包含低级别少突胶质细胞瘤。在实施例中，癌症包含视神经胶质瘤。在实施例中，癌症包含室管膜下瘤。在实施例中，癌症包含脑干胶质瘤。在实施例中，所述方法减少或消除胶质瘤干细胞。在实施例中，所述方法对胶质母细胞瘤具有治疗性。在实施例中，所述方法对多形性胶质母细胞瘤具有治疗性。

使胶质瘤细胞与所述化合物(例如单独的SKL2001)或SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT中的一种或多种接触，预期会使受试者中的至少一些胶质瘤细胞转化为神经元。在实施例中，转化为神经元发生在大约7至14天的时段内。在实施例中，转化为神经元发生在7天至8天、7天至9天、7天至10天、8天至9天、8天至10天、8天至11天、9天至10天、9天至11天、9天至12天、10天至11天、10天至12天、10天至13天、11天至12天、11天至13天、11天至14天、12天至13天、12天至14天、或13天至14天。在实施例中，转化为神经元的时间不超过7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或21天。

除了将胶质瘤细胞转化为神经元之外，本公开进一步包含从内源性神经胶质细胞产生新的神经元，并且可以包括从因中枢或周围神经系统的损伤或疾病状况(如但不限于胶质瘤)而产生的神经胶质样细胞产生新的神经元。

使用所述组合物和方法产生的神经元通常是功能性神经元，并且因此能够具有以下非限制性实例功能中的至少一种：突触形成、轴突形成、树突形成或神经递质释放。通过所述方法和组合物制备的所产生的神经元的非限制性实例是单极、双极或多极神经元。神经元的非限制性实例包括任何类型的神经元，如篮细胞、Lugaro细胞、中型多棘神经元、浦肯野细胞或梭形细胞。在实施例中，神经元选自由胆碱能神经元、GABA能神经元、谷氨酸能神经元、多巴胺能神经元、肾上腺素能神经元、运动神经元、肽能神经元和血清素能神经元组成的群组。

功能性神经元可以表现出可以包含但不一定限于发射重复动作电位、发展多个树突分支和释放神经递质的特性，该神经递质包括但不一定限于谷氨酸(Glutamate/glutamic acid)、多巴胺、乙酰胆碱、血清素、去甲肾上腺素(Norepinephrine/noradrenaline)和γ-氨基丁酸(GABA)。因此，预期通过使用本文所述的方法本公开将促进新的皮质前脑神经元、或中脑神经元、或后脑神经元、或脊髓神经元、或外周神经元或其组合的发育，本领域技术人员可根据需要以鉴于本公开的益处显而易见的方式调整该方法。在实施例中，胶质瘤细胞被转化为表达神经元标志物NeuN(也称为NEUN)或微管相关蛋白2(MAP-2)中的一种或两种的神经元。在实施例中，产生的神经元表达双皮质素(DCX)。在实施例中，产生的神经元表达降低水平的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。在实施例中，产生的神经元不表达GFAP。在实施例中，神经元是有丝分裂后神经元。在实施例中，产生的神经元包含表达DCX的有丝分裂后神经元。在这方面，虽然以前曾尝试使用各种药物混合物靶向胶质瘤^8,9，但不意图受任何特定科学理论的束缚，认为以前的方法都没有靶向胶质母细胞瘤的胶质瘤干细胞(GSC)群体。与此相关，WNT/β-连环蛋白通路的激活已被特别证明与GBM细胞的GSC亚群的神经元分化有关¹⁰。化合物SKL2001通过破坏Axin//β-连环蛋白蛋白复合物的稳定性来拯救β-连环蛋白免于降解，并最终诱导间充质干细胞的分化¹²。本公开中提供的数据证明，将SKL2001与SLCD组合促进了U251胶质母细胞瘤细胞系中早期神经元标志物DCX的出现。DCX是本领域已知的，并且也称为神经元迁移蛋白双皮质素、doubling、lissencephalin-X。

如本文所用，术语“受试者”是指任何动物受试者。动物受试者的非限制性实例包括人类、实验动物(例如，非人灵长类动物、大鼠、小鼠)、家畜(例如，牛、绵羊、山羊、猪、火鸡、鸡)和家庭宠物(例如，狗、猫、啮齿动物等)。

在实施例中，受试者需要神经元生成。在实施例中，需要神经元生成的受试者患有胶质瘤。

在实施例中，有此需要的受试者是男性。在实施例中，有此需要的受试者是女性。在实施例中，有此需要的受试者是不分性别的。在实施例中，有此需要的受试者是早产儿。在实施例中，早产儿在妊娠36周之前出生。在实施例中，有此需要的受试者是足月儿。在实施例中，足月儿是小于约2个月龄。在实施例中，有此需要的受试者是新生儿。在实施例中，新生儿小于约1个月龄。在实施例中，有此需要的受试者是婴儿。在实施例中，婴儿是2个月至24个月龄。在实施例中，婴儿是2个月至3个月龄、2个月至4个月龄、2个月至5个月龄、3个月至4个月龄、3个月至5个月龄、3个月至6个月龄、4个月至5个月龄、4个月至6个月龄、4个月至7个月龄、5个月至6个月龄、5个月至7个月龄、5个月至8个月龄、6个月至7个月龄、6个月至8个月龄、6个月至9个月龄、7个月至8个月龄、7个月至9个月龄、7个月至10个月龄、8个月至9个月龄、8个月至10个月龄、8个月至11个月龄、9个月至10个月龄、9个月至11个月龄、9个月至12个月龄、10个月至11个月龄、10个月至12个月龄、10个月至13个月龄、11个月至12个月龄、11个月至13个月龄、11个月至14个月龄、12个月至13个月龄、12个月至14个月龄、12个月至15个月龄、13个月至14个月龄、13个月至15个月龄、13个月至16个月龄、14个月至15个月龄、14个月至16个月龄、14个月至17个月龄、15个月至16个月龄、15个月至17个月龄、15个月至18个月龄、16个月至17个月龄、16个月至18个月龄、16个月至19个月龄、17个月至18个月龄、17个月至19个月龄、17个月至20个月龄、18个月至19个月龄、18个月至20个月龄、18个月至21个月龄、19个月至20个月龄、19个月至21个月龄、19个月至22个月龄、20个月至21个月龄、20个月至22个月龄、20个月至23个月龄、21个月至22个月龄、21个月至23个月龄、21个月至24个月龄、22个月至23个月龄、22个月至24个月龄和23个月至24个月龄。在实施例中，有此需要的受试者是幼儿。在实施例中，幼儿是1岁至4岁。在实施例中，幼儿是1岁至2岁、1岁至3岁、1岁至4岁、2岁至3岁、2岁至4岁和3岁至4岁。在实施例中，有此需要的受试者是小儿。在实施例中，小儿是2岁至5岁。在实施例中，小儿是2岁至3岁、2岁至4岁、2岁至5岁、3岁至4岁、3岁至5和4岁至5岁。在实施例中，有此需要的受试者是儿童。在实施例中，儿童是6岁至12岁。在实施例中，儿童是6岁至7岁、6岁至8岁、6

岁至9岁、7岁至8岁、7岁至9岁、7岁至10岁、8岁至9岁、8岁至10岁、8岁至11岁、9岁至10岁、9岁至11岁、9岁至12岁、10岁至11岁、10岁至12岁和11岁至12岁。在实施例中，有此需要的受试者是青少年。在实施例中，青少年是13岁至19岁。在实施例中，青少年是13岁至14岁、13岁至15岁、13岁至16岁、14岁至15岁、14岁至16岁、14岁至17岁、15岁至16岁、15岁至17岁、15岁至18岁、16岁至17岁、16岁至18岁、16岁至19岁、17岁至18岁、17岁至19岁和18岁至19岁。在实施例中，有此需要的受试者是儿科受试者。在实施例中，儿科受试者是1天龄至18岁。在实施例中，儿科受试者是1天龄至1岁、1天龄至2岁、1天龄至3岁、1岁至2岁、1岁至3岁、1岁至4岁、2岁至3岁、2岁至4岁、2岁至5岁、3岁至4岁、3岁至5岁、3岁至6岁、4岁至5岁、4岁至6岁、4岁至7岁、5岁至6岁、5岁至7岁、5岁至8岁、6岁至7岁、6岁至8岁、6岁至9岁、7岁至8岁、7岁至9岁、7岁至10岁、8岁至9岁、8岁至10岁、8岁至11岁、9岁至10岁、9岁至11岁、9岁至12岁、10岁至11岁、10岁至12岁、10岁至13岁、11岁至12岁、11岁至13岁、11岁至14岁、12岁至13岁、12岁至14岁、12岁至15岁、13岁至14岁、13岁至15岁、13岁至16岁、14岁至15岁、14岁至16岁、14岁至17岁、15岁至16岁、15岁至17岁、15岁至18岁、16岁至17岁、16岁至18岁和17岁至18岁。在实施例中，有此需要的受试者是老年受试者。在实施例中，老年受试者是65岁至95岁或更高。在实施例中，老年受试者是65岁至70岁、65岁至75岁、65岁至80岁、70岁至75岁、70岁至80岁、70岁至85岁、75岁至80岁、75岁至85岁、75岁至90岁、80岁至85岁、80岁至90岁、80岁至95岁、85岁至90岁和85岁至95岁。在实施例中，有此需要的受试者是成年人。在实施例中，成年受试者是20岁至95岁或更高。在实施例中，成年受试者是20岁至25岁、20岁至30岁、20岁至35岁、25岁至30岁、25岁至35岁、25岁至40岁、30岁至35岁、30岁至40岁、30岁至45岁、35岁至40岁、35岁至45岁、35岁至50岁、40岁至45岁、40岁至50岁、40岁至55岁、45岁至50岁、45岁至55岁、45岁至60岁、50岁至55岁、50岁至60岁、50岁至65岁、55岁至60岁、55岁至65岁、55岁至70岁、60岁至65岁、60岁至70岁、60岁至75岁、65岁至70岁、65岁至75岁、65岁至80岁、70岁至75岁、70岁至80岁、70岁至85岁、75岁至80岁、75岁至85岁、75岁至90岁、80岁至85岁、80岁至90岁、80岁至95岁、85岁至90岁和85岁至95岁。在实施例中，有此需要的受试者是1岁至5岁、2岁至10岁、3岁至18岁、21岁至50岁、21岁至40岁、21岁至30岁、50岁至90岁、60岁至90岁、70岁至90岁、60岁至80岁、或65岁至75岁。在实施例中，有此需要的受试者是年轻老年受试者(65至74岁)。在实施例中，有此需要的受试者是中年老年受试者(75至84岁)。在实施例中，有此需要的受试者是老年受试者(>85岁)。

通常，本公开的方法包含向受试者施用有效量的本文所述的化合物，使得受试者中神经元的数量增加。该化合物的施用量与已经获得FDA批准的那些相同或相似。每种FDA批准的药物的剂量可以在例如www.accessdata.fda.gov/scripts/cder/drugsatfda/中找到，与所述化合物有关的公开通过引用并入本文，它存在于本申请或专利的有效提交日期之前。因此，鉴于本公开的益处，可以结合本领域技术人员的知识来确定一种或多种化合物的适当剂量。在实施例中，当确定活性成分有效量和给药方案时，可以考虑受试者的体重和年龄、神经元损伤或疾病的个人史和经历相同神经元损伤的风险，或胶质瘢痕或反应性胶质增生的存在。在实施例中，所述化合物中的一种或组合以一天约0.01nmol至约500nmol的量施用(包括端点)，并且包括其间的所有整数和范围，这取决于所使用的递送方法。在实施例中，化合物以一天约0.01nmol至约25nmol、约0.01nmol至约50nmol、约0.01nmol至约75nmol、约25nmol至约50nmol、约25nmol至约75nmol、约25nmol至约100nmol,about、约50nmol至约75nmol、约50nmol至约100nmol、约50nmol至约125nmol、约75nmol至约100nmol、至约75nmol至约125nmol、至约75nmol至约150nmol、至约100nmol至约125nmol至约100nmol至约150nmol、至约100nmol至约175nmol,125nmol至约150nmol、约125nmol至约175nmol、约125nmol至约200nmol、约150nmol至约175nmol、约150nmol至约200nmol、约150nmol至约225nmol、约175nmol至约200nmol、至约175nmol至约225nmol、至约175nmol至约250nmol、至约200nmol至约225nmol至约200nmol至约250nmol、至约200nmol至约275nmol,225nmol至约250nmol、约225nmol至约275nmol、约225nmol至约300nmol、约250nmol至约275nmol、约250nmol至约300nmol、约250nmol至约325nmol、约275nmol至约300nmol、至约275nmol至约325nmol、至约275nmol至约350nmol、至约300nmol至约325nmol至约300nmol至约350nmol、至约300nmol至约375nmol,325nmol至约350nmol、约325nmol至约375nmol、约325nmol至约400nmol、约350nmol至约375nmol、约350nmol至约400nmol、约350nmol至约425nmol、约375nmol至约400nmol、至约375nmol至约425nmol、至约375nmol至约450nmol、至约400nmol至约325nmol至约400nmol至约450nmol、至约400nmol至约475nmol、至约425nmol至约450nmol、至约425nmol至约475nmol、至约425nmol至约500nmol、至约450nmol至约475nmol或至约450nmol至约500nmol的量施用。在实施例中，一种或多于一种化合物以单次、多次或控释剂量方案提供。在实施例中，如在施用多于一种化合物的情况下，可以同时施用化合物的组合。在实施例中，顺序施用多于一种化合物。在实施例中，一种或多种化合物作为相同药物制剂的组分施用。在实施例中，用于接触胶质瘤细胞并且可以在药物制剂中的仅有的一种或多种活性成分包含SKL2001或由SKL2001组成。在实施例中，组合中仅有的活性成分是SKL2001和SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少一种。在实施例中，使用有效量的一种或多种化合物。在实施例中，有效量(其可以包括治疗上可接受的量)是可以实现期望效果的量，如减少胶质瘤细胞和/或胶质瘤细胞和/或胶质瘤肿瘤生长速率，抑制胶质瘤肿瘤形成，根除胶质瘤细胞，防止胶质瘤复发，和/或抑制沿白质束延伸和/或浸润到相邻脑组织中。在实施例中，抑制了胶质瘤的神经外转移。在实施例中，化合物的有效量是至少部分基于以下实例中描述的化合物的浓度而调整的值，实施例中的所述值反映了所述化合物在胶质瘤细胞环境中的局部浓度。

“活性成分”是指作用于胶质瘤细胞以将所述细胞转化为神经元的化合物。因此，“活性成分”不包括添加到例如药物制剂中以含有活性成分或以其他方式促进将活性成分递送至神经胶质细胞的试剂，此类试剂包括但不一定限于缓冲剂、盐、药学上合适的赋形剂、载体等。因此，在实施例中，本公开包括药物制剂和使用所述制剂的方法，其中药物制剂中的仅有的活性成分由SKL2001组成，或由SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的一种或多种组成作为如上文或本文中其他方面所述的化合物组合。

在实施例中，术语“治疗有效剂量”、“治疗有效量”、“有效量”或“药物活性剂量”是指将胶质瘤细胞转化为神经元的单独的或组合的SB431542、LDN193189、CHIR99021、DAPT和SKL2001的量。在实施例中，治疗有效剂量治疗胶质瘤。在实施例中，有效量提供5μM至80μM的所述化合物的浓度(包括端点)，并且包括其间的所有整数和整数范围。在实施例中，治疗有效剂量作为细胞培养物的细胞培养基中的浓度提供。在实施例中，治疗有效剂量作为施用后给予受试者的浓度提供。在实施例中，治疗有效剂量作为施用后受试者血液中的浓度提供。在实施例中，治疗有效剂量作为施用后受试者脑中的浓度提供。在实施例中，治疗有效剂量作为施用后受试者脊髓中的浓度提供。

在实施例中，SB431542的治疗有效剂量为1μM至20μM。在实施例中，SB431542的治疗有效剂量为1μM至5μM、1μM至10μM、1μM至15μM、5μM至10μM、5μM至15μM、5μM至20μM、10μM至15μM、10μM至20μM或15μM至20μM。在一个实施例中，有效量提供5μM至80μM的所述化合物的浓度(包括端点)，并且包括其间的所有整数和整数范围。

在实施例中，LDN193189的治疗有效剂量为0.1μM至1.0μM。在实施例中，LDN193189的治疗有效剂量为0.1μM至0.15μM、0.1μM至0.2μM、0.1μM至0.25μM、0.15μM至0.2μM、0.15μM至0.25μM、0.15μM至0.3μM、0.2μM至0.25μM、0.2μM至0.3μM、0.2μM至0.35μM、0.25μM至0.3μM、0.25μM至0.35μM、0.25μM至0.4μM、0.3μM至0.35μM、0.3μM至0.4μM、0.3μM至0.45μM、0.35μM至0.4μM、0.35μM至0.45μM、0.35μM至0.5μM、0.4μM至0.45μM、0.4μM至0.5μM、0.4μM至0.55μM、0.45μM至0.5μM、0.45μM至0.55μM、0.45μM至0.6μM、0.5μM至0.55μM、0.5μM至0.6μM、0.5μM至0.65μM、0.55μM至0.6μM、0.55μM至0.65μM、0.55μM至0.7μM、0.6μM至0.65μM、0.6μM至0.7μM、0.6μM至0.75μM、0.65μM至0.7μM、0.65μM至0.75μM、0.65μM至0.8μM、0.7μM至0.75μM、0.7μM至0.8μM、0.7μM至0.85μM、0.75μM至0.8μM、0.75μM至0.85μM、0.75μM至0.9μM、0.8μM至0.85μM、0.8μM至0.9μM、0.8μM至0.95μM、0.85μM至0.9μM、0.85μM至0.95μM、0.85μM至1μM、0.9μM至0.95μM、0.9μM至1μM或0.95μM至1μM

在实施例中，CHIR99021的治疗有效剂量为1μM至20μM。在实施例中，CHIR99021的治疗有效剂量为1μM至5μM、1μM至10μM、1μM至15μM、5μM至10μM、5μM至15μM、5μM至20μM、10μM至15μM、10μM至20μM或15μM至20μM。

在实施例中，DAPT的治疗有效剂量为1μM至20μM。在实施例中，DAPT的治疗有效剂量为1μM至5μM、1μM至10μM、1μM至15μM、5μM至10μM、5μM至15μM、5μM至20μM、10μM至15μM、10μM至20μM或15μM至20μM。

在实施例中，SKL2001的治疗有效剂量为10μM至60μM。在实施例中，SKL2001的治疗有效剂量为10μM至20μM、10μM至30μM、10μM至40μM、20μM至30μM、20μM至40μM、20μM至50μM、30μM至40μM、30μM至50μM、30μM至60μM、40μM至50μM、40μM至60μM或50μM至60μM。

在实施例中，至少每天一次或至少每周一次将治疗有效剂量递送至有需要的受试者，持续至少两个连续日或周。在实施例中，至少每天一次或至少每周一次将治疗有效剂量递送至有此需要的受试者，持续至少3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15个连续日或周。在实施例中，至少每天一次或至少每周一次将治疗有效剂量递送至有此需要的受试者，持续至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个连续周。在实施例中，至少每天一次或至少每周一次将治疗有效剂量递送至有此需要的受试者，持续至多4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个连续日或周。在实施例中，至少每天一次或至少每周一次将治疗有效剂量递送至有此需要的受试者，持续至多1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个连续周或月。在实施例中，将治疗有效剂量递送至有此需要的受试者，至少施用一次，持续至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个连续月或年，长期地持续受试者的整个生命周期，或无限期的时间段。在实施例中，每年一次将治疗有效剂量递送至有此需要的受试者，持续连续2年、连续3年或连续5年。在实施例中，每年一次将治疗有效剂量递送至有此需要的受试者，持续连续2年。在实施例中，每年一次将治疗有效剂量递送至有此需要的受试者，持续连续3年。在实施例中，每年一次将治疗有效剂量递送至有此需要的受试者，持续连续5年。

在实施例中，本文的组合物基本上由SKL2001组成。在实施例中，本文的组合物基本上由SKL2001和选自由SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT或其组合组成的群组的第二化合物组成。

可以在药物制剂中提供包含一种或多种所述化合物的组合物。药物制剂的形式没有特别限制，但通常包含所述活性成分和至少一种非活性成分。在实施例中，合适的药物组合物可以通过将化合物中的任何一种或组合与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂混合来制备，并且合适的此类组分是本领域公知的。此类载体、稀释剂和赋形剂的一些实例可见于：《雷明顿：药学科学与实践(Remington:The Science and Practice of Pharmacy)》(2005)第21版,Philadelphia,PA.Lippincott Williams&Wilkins。在实施例中，药物制剂适用于将活性成分递送穿过血脑屏障，和/或递送至脊髓或中枢神经系统的其他组分。此类组合物可包含例如脂质制剂或其他基于纳米颗粒的递送系统。在实施例中，药物制剂适合口服施用，并且因此可以以雾化、液体或固体剂型提供。固体剂型包括但不一定限于用于吞咽或口服溶解的片剂、胶囊、囊片和条，并且可以提供用于快速或延长释放，或在一段时间内以期望的系列释放不同的化合物。也可以使用包含化合物中的一种或任何组合的单独的药物组合物。在实施例中，将一种或多种所述化合物直接注射到肿瘤如胶质瘤中，或直接施用于脑和/或CAN。因此，关于药物制剂的施用，施用途径可以是任何合适的途径。在实施例中，包含化合物的组合物是口服递送的。在其他非限制性实施例中，静脉内、肠胃外、皮下、腹膜内、经皮、通过鼻内滴注、通过植入、动脉内或通过鞘内施用来施用组合物。在实施例中，可以使用可植入医疗装置，如泵，包括但不限于渗透泵。在实施例中，包含化合物的组合物通过颅内途径递送。

在实施例中，本公开的治疗有效剂量实现至少约50％的胶质瘤的缓解、治愈、响应率或消退率。在实施例中，治疗有效剂量消除、减少、减缓或延迟一种或多种胶质瘤症状。胶质瘤症状的非限制性实例包括头痛、癫痫、恶心和呕吐、意识模糊、虚弱、麻木和失衡。在实施例中，胶质瘤症状是精神症状。精神症状的非限制性实例包括抑郁、易怒、悲伤或冷漠、社交退缩、失眠、疲劳、缺乏精力、强迫症、躁狂症、躁郁症和体重减轻。

在实施例中，治疗有效剂量实现约10％至约100％或更多的治疗有效剂量的缓解、治愈、响应率或消退率。在实施例中，治疗有效剂量实现10％至100％的胶质瘤症状的缓解、治愈、响应率或消退率，例如10％至15％、10％至20％、10％至25％、15％至20％、15％至25％、15％至30％、20％至25％、20％至30％、20％至35％、25％至30％、25％至35％、25％至40％、30％至35％、30％至40％、35％至45％、35％至50％、40％至45％、40％至50％、40％至55％、45％至50％、45％至55％、45％至60％、50％至55％、50％至60％、50％至65％、55％至60％、55％至65％、55％至70％、60％至65％、60％至70％、60％至75％、65％至70％、65％至75％、65％至80％、70％至75％、70％至80％、70％至85％、75％至80％、75％至85％、75％至90％、80％至85％、80％至90％、80％至95％、85％至90％、85％至95％、85％至100％、90％至95％、90％至100％或95％至100％。

在实施例中，治疗有效剂量消除、减少、减缓或延迟10％至100％的一种或多种胶质瘤症状，例如10％至约15％、10％至20％、10％至25％、15％至20％、15％至25％、15％至30％、20％至25％、20％至30％、20％至35％、25至30％、25％至35％、25％至40％、30％至35％、30％至40％、35％至45％、35％至50％、40％至45％、40％至50％、40％至55％、45％至50％、45％至55％、45％至60％、50％至55％、50％至60％、50％至65％、55％至60％、55％至65％、55％至70％、60％至65％、60％至70％、60％至75％、65％至70％、65％至75％、65％至80％、70％至75％、70％至80％、70％至85％、75％至80％、75％至85％、75％至90％、80％至85％、80％至90％、80％至95％、85％至90％、85％至95％、85％至100％、90％至95％、90％至100％或95％至100％。

在实施例中，在治疗当天、治疗后1天、治疗后3个月、治疗后6个月、治疗后1年和治疗后每年评估胶质瘤症状。

在实施例中，在治疗后1天至治疗后7天评估胶质瘤症状。在实施例中，可以在治疗后1天至治疗后2天、治疗后1天至治疗后3天、治疗后1天至治疗后4天、治疗后2天至治疗后3天、治疗后2天至治疗后4天、治疗后2天至治疗后5天、治疗后3天至治疗后4天、治疗后3天至治疗后5天、治疗后3天和治疗后6天、治疗后4天至治疗后5天、治疗后4天至治疗后6天、治疗后4天至治疗后7天、治疗后5天至治疗后6天、治疗后5天至治疗后7天或治疗后6天至治疗后7天评估症状。在实施例中，可以在治疗后1周至治疗后4周评估症状。在实施例中，可以在治疗后1周至治疗后2周、治疗后1周至治疗后3周、治疗后1周至治疗后4周、治疗后2周至治疗后3周、治疗后2周至治疗后4周或治疗后3周至治疗后4周评估症状。在实施例中，可以在治疗后1个月至治疗后12个月评估症状。在实施例中，可以在治疗后1个月至治疗后2个月、治疗后1个月至治疗后3个月、治疗后1个月至治疗后4个月、治疗后2个月至治疗后3个月、治疗后2个月至治疗后4个月、治疗后2个月至治疗后5个月、治疗后3个月至治疗后4个月、治疗后3个月至治疗后5个月、治疗后3个月至治疗后6个月、治疗后4个月至治疗后5个月、治疗后4个月至治疗后6个月、治疗后4个月至治疗后7个月、治疗后5个月至治疗后6个月、治疗后5个月至治疗后7个月、治疗后5个月至治疗后8个月、治疗后6个月至治疗后7个月、治疗后6个月至治疗后8个月、治疗后6个月至治疗后9个月、治疗后7个月至治疗后8个月、治疗后7个月至治疗后9个月、治疗后7个月至治疗后10个月、治疗后8个月至治疗后9个月、治疗后8个月至治疗后10个月、治疗后8个月至治疗后11个月、治疗后9个月至治疗后10个月、治疗后9个月至治疗后11个月、治疗后9个月至治疗后12个月、治疗后10个月至治疗后11个月、治疗后10个月至治疗后12个月或治疗后11个月至治疗后12个月评估症状。在实施例中，可以在治疗后1年至治疗后约20年评估症状。在实施例中，可以在治疗后1年至治疗后5年、治疗后1年至治疗后10年、治疗后1年至治疗后15年、治疗后5年至治疗后10年、治疗后5年至治疗后15年、治疗后5年至治疗后20年、治疗后10年至治疗后15年、治疗后10年至治疗后20年或治疗后15年至治疗后20年评估症状。

如本文所用，术语“存活率”是指治疗组中的受试者队列在诊断胶质瘤后在给定时间段后仍然存活。

在实施例中，治疗有效剂量实现了约10％至100％或更大的存活率增加。在实施例中，治疗有效剂量实现了10％至100％的存活率增加，例如10％至15％、10％至20％、10％至25％、15％至20％、15％至25％、15％至30％、20％至25％、20％至30％、20％至35％、25％至30％、25％至35％、25％至40％、30％至35％、30％至40％、35％至45％、35％至50％、40％至45％、40％至50％、40％至55％、45％至50％、45％至55％、45％至60％、50％至55％、50％至60％、50％至65％、55％至60％、55％至65％、55％至70％、60％至65％、60％至70％、60％至75％、65％至70％、65％至75％、65％至80％、70％至75％、70％至80％、70％至85％、75％至80％、75％至85％、75％至90％、80％至85％、80％至90％、80％至95％、85％至90％、85％至95％、85％至100％、90％至95％、90％至100％或95％至100％。

如本文所用，术语“预期寿命”是指预期受试者存活的时间段。在实施例中，预期寿命由性别决定。在实施例中，预期寿命由遗传学决定。在实施例中，预期寿命由疾病决定。在实施例中，预期寿命由教育决定。在实施例中，预期寿命由心理健康决定。在实施例中，预期寿命由国家人口决定。

在实施例中，治疗有效剂量使预期寿命增加约10％至100％或更多。在实施例中，治疗有效剂量使预期寿命增加10％至100％，例如10％至15％、10％至20％、10％至25％、15％至20％、15％至25％、15％至30％、20％至25％、20％至30％、20％至35％、25％至30％、25％至35％、25％至40％、30％至35％、30％至40％、35％至45％、35％至50％、40％至45％、40％至50％、40％至55％、45％至50％、45％至55％、45％至60％、50％至55％、50％至60％、50％至65％、55％至60％、55％至65％、55％至70％、60％至65％、60％至70％、60％至75％、65％至70％、65％至75％、65％至80％、70％至75％、70％至80％、70％至85％、75％至80％、75％至85％、75％至90％、80％至85％、80％至90％、80％至95％、85％至90％、85％至95％、85％至100％、90％至95％、90％至100％或95％至100％。

在实施例中，治疗有效剂量使有此需要的受试者脑内的萎缩量减少约10％至100％或更多。在实施例中，治疗有效剂量使有此需要的受试者脑内的萎缩量减少10％至100％，例如10％至15％、10％至20％、10％至25％、15％至20％、15％至25％、15％至30％、20％至25％、20％至30％、20％至35％、25％至30％、25％至35％、25％至40％、30％至35％、30％至40％、35％至45％、35％至50％、40％至45％、40％至50％、40％至55％、45％至50％、45％至55％、45％至60％、50％至55％、50％至60％、50％至65％、55％至60％、55％至65％、55％至70％、60％至65％、60％至70％、60％至75％、65％至70％、65％至75％、65％至80％、70％至75％、70％至80％、70％至85％、75％至80％、75％至85％、75％至90％、80％至85％、80％至90％、80％至95％、85％至90％、85％至95％、85％至100％、90％至95％、90％至100％或95％至100％。

在实施例中，在治疗当天、治疗后1天、治疗后3个月、治疗后6个月、治疗后1年和治疗后每年评估有需要的受试者脑内的萎缩量。

在实施例中，在治疗后1天至治疗后7天评估有需要的受试者脑内的萎缩量。在实施例中，可以在治疗后1天至治疗后2天、治疗后1天至治疗后3天、治疗后1天至治疗后4天、治疗后2天至治疗后3天、治疗后2天至治疗后4天、治疗后2天至治疗后5天、治疗后3天至治疗后4天、治疗后3天至治疗后5天、治疗后3天和治疗后6天、治疗后4天至治疗后5天、治疗后4天至治疗后6天、治疗后4天至治疗后7天、治疗后5天至治疗后6天、治疗后5天至治疗后7天或治疗后6天至治疗后7天评估症状。在实施例中，可以在治疗后1周至治疗后4周评估症状。在实施例中，可以在治疗后1周至治疗后2周、治疗后1周至治疗后3周、治疗后1周至治疗后4周、治疗后2周至治疗后3周、治疗后2周至治疗后4周或治疗后3周至治疗后4周评估症状。在实施例中，可以在治疗后1个月至治疗后12个月评估症状。在实施例中，可以在治疗后1个月至治疗后2个月、治疗后1个月至治疗后3个月、治疗后1个月至治疗后4个月、治疗后2个月至治疗后3个月、治疗后2个月至治疗后4个月、治疗后2个月至治疗后5个月、治疗后3个月至治疗后4个月、治疗后3个月至治疗后5个月、治疗后3个月至治疗后6个月、治疗后4个月至治疗后5个月、治疗后4个月至治疗后6个月、治疗后4个月至治疗后7个月、治疗后5个月至治疗后6个月、治疗后5个月至治疗后7个月、治疗后5个月至治疗后8个月、治疗后6个月至治疗后7个月、治疗后6个月至治疗后8个月、治疗后6个月至治疗后9个月、治疗后7个月至治疗后8个月、治疗后7个月至治疗后9个月、治疗后7个月至治疗后10个月、治疗后8个月至治疗后9个月、治疗后8个月至治疗后10个月、治疗后8个月至治疗后11个月、治疗后9个月至治疗后10个月、治疗后9个月至治疗后11个月、治疗后9个月至治疗后12个月、治疗后10个月至治疗后11个月、治疗后10个月至治疗后12个月或治疗后11个月至治疗后12个月评估症状。在实施例中，可以在治疗后1年至治疗后约20年评估症状。在实施例中，可以在治疗后1年至治疗后5年、治疗后1年至治疗后10年、治疗后1年至治疗后15年、治疗后5年至治疗后10年、治疗后5年至治疗后15年、治疗后5年至治疗后20年、治疗后10年至治疗后15年、治疗后10年至治疗后20年或治疗后15年至治疗后20年评估症状。

评价有需要的受试者脑内的萎缩量的测试的非限制性实例包括Nissle染色、MRI、功能性磁共振fMRI和PET扫描。

在实施例中，本公开包括制品。在某些方面，制品包括封闭的或密封的包装，其含有本文所述的化合物中的一种或组合。化合物的组合和/或单独的剂量可以包括在单独的片剂、胶囊等中。包装可以包含一个或多个容器，如封闭或密封的小瓶、瓶子、泡罩(气泡)包装，或用于销售、分配或使用药剂的任何其他合适的包装。因此，包装可以含有药物组合物，其包含SKL2001和SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT中的一种。对于化合物的组合，可以在相同或不同的剂量制剂中分别提供每种化合物，使得它们可以同时或顺序递送。

除了药物组合物，包装还可以含有印刷信息。印刷信息可以提供在标签上，或纸质插页上，或印刷在包装材料本身上。印刷信息可以包括用于以下的信息：标识包装中的活性剂、非活性成分的量和类型、一种或多种药物组合物意图治疗何种病况的指示以及服用药物组合物的说明，如在给定时间段内服用的剂数、服用组合物的顺序等。因此，在各种实施例中，本公开包括包装在包装材料中并标识在印刷、包装材料上或包装材料中的本发明的药物组合物，该组合物用于治疗任何类型的胶质瘤。在实施例中，印刷材料提供关于使用药物组合物改善胶质瘤症状的信息。胶质瘤症状的非限制性实例包括头痛、癫痫、恶心和呕吐、意识模糊、虚弱、麻木和失衡。

提供以下实例以说明本发明，但不旨在以任何方式进行限制。

实例

为了产生图1和图2中描绘的数据，使用以下材料和方法。

方法

U251细胞维持在补充有2mM谷氨酰胺、1％非必需氨基酸、1mM丙酮酸钠和10％胎牛血清的最低必需培养基(MEM)中。将五万个细胞接种到24孔板中的盖玻片上。在MEM中4天后，将细胞在补充有N2、B27和胰岛素的Ham的F-12(F-12)培养基中用化合物混合物或二甲亚砜再处理4天。如上文所述称为SLCDS的五种化合物混合物含有5μM SB431542、0.25μMLDN193189、5μM CHIR99021、5μM DAPT和40μM SKL2001。SLCDS处理后，F-12培养基每4天更换一次，持续12天。所用培养基的概况如表1所示。然后使细胞与4％多聚甲醛交联12分钟并用Tris缓冲盐水(TBS)洗涤。在三次5分钟洗涤后，用含有0.1％TritonX-100(TBSTx)的在Tris缓冲盐水(TBS)中的2.5％牛血清白蛋白封闭细胞1小时。使一抗(山羊双皮质素，1:500稀释，sc-8066，Santa Cruz)与固定细胞一起在4℃下孵育过夜。三次5分钟洗涤后，将二抗(抗山羊Cy5，1:1000)与固定细胞一起在4℃下孵育过夜。三次5分钟洗涤后，使用固定基质固定盖玻片。使用ECHO Revolve显微镜检测荧光信号。

表1.用于重编程U251细胞的培养基的总结。

结果

在使U251细胞生长至几乎完全汇合后，用SLCDS治疗以SKL2001依赖性方式诱导双皮质素的表达(图1)。图2中用SKL2001建立了剂量反应关系。

以下参考文献列表并不表明任何参考文献对可专利性具有重要意义。

1Cantrell,J.N.等人，胶质母细胞瘤长期幸存者的进展(Progress Toward Long-Term Survivors of Glioblastoma)，《梅奥诊所学报(Mayo Clinic Proceedings)》94,1278-1286,doi:10.1016/j.mayocp.2018.11.031(2019)。

2Stupp,R.等人，用于胶质母细胞瘤的放射疗法加伴随和辅助替莫唑胺治疗(Radiotherapy plus Concomitant and Adjuvant Temozolomide for Glioblastoma)，《新英格兰医学杂志(New England Journal of Medicine)》352,987-996,doi:10.1056/NEJMoa043330(2005)。

3Perry,J.R.等人，老年胶质母细胞瘤患者的短期放射加替莫唑胺(Short-CourseRadiation plus Temozolomide in Elderly Patients with Glioblastoma)，《新英格兰医学杂志(New England Journal of Medicine)》376,1027-1037,doi:10.1056/NEJMoa1611977(2017)。

4Jackson,M.,Hassiotou,F.&Nowak,A.胶质母细胞瘤干细胞样细胞：肿瘤复发的根源和治疗靶点(Glioblastoma stem-like cells:at the root of tumor recurrenceand a therapeutic target)，《致癌作用(Carcinogenesis)》36,177-185,doi:10.1093/carcin/bgu243(2014)。

5Hombach-Klonisch,S.等人，胶质母细胞瘤和对烷化剂的化学抗性：参与细胞凋亡、自噬和未折叠蛋白反应(Glioblastoma and chemoresistance to alkylatingagents:Involvement of apoptosis,autophagy,and unfolded protein response)，《药理学与治疗学(Pharmacology&Therapeutics)》184,13-41,doi://doi.org/10.1016/j.pharmthera.2017.10.017(2018)。

6Beier,D.等人，替莫唑胺优先消耗胶质母细胞瘤中的癌症干细胞(TemozolomidePreferentially Depletes Cancer Stem Cells in Glioblastoma)，《癌症研究(CancerResearch)》68,5706,doi:10.1158/0008-5472.CAN-07-6878(2008)。

7William,D.,Walther,M.,Schneider,B.,Linnebacher,M.&Classen,C.F.在患者个体胶质母细胞瘤的体外模型中，通过靶向线粒体可以减少替莫唑胺诱导的致瘤性增加(Temozolomide-induced increase of tumorigenicity can be diminished bytargeting of mitochondria in in vitro models ofpatient individualglioblastoma)，《公共科学图书馆·综合(PLOS ONE)》13,e0191511,doi:10.1371/journal.pone.0191511(2018)。

8Gao,L.等人，通过将肿瘤细胞重编程为神经元样细胞的药物混合物来抑制胶质母细胞瘤(Suppression of glioblastoma by a drug cocktail reprogramming tumorcells into neuronal like cells)，《科学报告(Scientific Reports)》9,3462,doi:10.1038/s41598-019-39852-5(2019)。

9Yuan,J.等人，通过蛋白激酶抑制剂将多形性胶质母细胞瘤细胞重编程为神经元(Reprogramming glioblastoma multiforme cells into neurons by protein kinaseinhibitors)，《实验与临床癌症研究杂志(Journal of Experimental&Clinical CancerResearch)》37,181,doi:10.1186/s13046-018-0857-5(2018)。

10Rampazzo,E.等人，Wnt激活促进胶质母细胞瘤的神经元分化(Wnt activationpromotes neuronal differentiation of Glioblastoma)，《细胞死亡与疾病(CellDeath&Disease)》4,e500-e500,doi:10.1038/cddis.2013.32(2013)。

11Yin,J.-C.等人，通过调节多种信号传导通路将人类胎儿星形胶质细胞化学转化为神经元(Chemical Conversion of Human Fetal Astrocytes into Neurons throughModulation of Multiple Signaling Pathways)，《干细胞报告(Stem Cell Reports)》12,488-501,doi://doi.org/10.1016/j.stemcr.2019.01.003(2019)。

12Gwak,J.等人，基于小分子的Axin/β-连环蛋白复合物破坏调节间充质干细胞分化(Small molecule-based disruption of the Axin/β-catenin protein complexregulates mesenchymal stem cell differentiation)，《细胞研究(Cell Research)》22,237-247,doi:10.1038/cr.2011.127(2012)。

在一个实施例中，本公开提供：

一种将胶质瘤细胞转化为神经元的方法，所述方法包含使所述胶质瘤细胞与有效量的SKL2001接触。在一个实施例中，所述方法进一步包含使所述胶质瘤细胞与有效量的SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少一种接触。在一个实施例中，使所述胶质瘤细胞与SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少两种的组合接触。在一个实施例中，使所述胶质瘤细胞与SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少三种的组合接触。在一个实施例中，使所述胶质瘤细胞与SKL2001、SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT的组合接触。在任何前述实施例中，所述神经元表达双皮质素(DCX)。在任何前述实施例中，所述胶质瘤细胞包含胶质母细胞瘤细胞。在一个实施例中，所述胶质瘤细胞在已被诊断患有胶质瘤的受试者中。在一个实施例中，所述受试者是人。在一个实施例中，所述胶质瘤的阶段选自由I期、II期、II期和IV期组成的群组。在一个实施例中，所述胶质瘤细胞在已被诊断患有星形细胞瘤的受试者中。在一个实施例中，胶质瘤细胞在已被诊断患有胶质母细胞瘤的受试者中。在任何前述实施例中，所述SKL2001与所述SB431542、所述LDN193189、所述CHIR99021或所述DAPT中的至少一种是与所述胶质瘤细胞接触的一种或多种药物制剂的仅有的活性成分。在一个实施例中，本公开提供了一种药物组合物，其包含SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少一种的组合。在一个实施例中，所述药物组合物包含所述SKL2001与所述SB431542、所述LDN193189、所述CHIR99021或所述DAPT中的至少两种。在一个实施例中，所述药物组合物包含所述SKL2001与所述SB431542、所述LDN193189、所述CHIR99021或所述DAPT中的至少三种。在一个实施例中，所述药物组合物包含所述SKL2001、所述SB431542、所述LDN193189、所述CHIR99021和所述DAPT。在一个实施例中，所述药物组合物包含所述SKL2001与所述SB431542、所述LDN193189、所述CHIR99021或所述DAPT中的至少一种，它们是所述药物制剂中仅有的活性成分。在一个实施例中，本公开提供了一种包含药物组合物的制品，所述药物组合物包含SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少一种，所述制品进一步包含提供所述药物组合物用于治疗胶质瘤的指示的印刷材料。在一个实施例中，所述制品包含药物制剂，其中所述SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少一种是所述药物制剂中仅有的活性成分。在一个实施例中，所述制品包含。在一个实施例中，所述制品包含药物制剂，其中所述SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少两种存在于所述药物制剂中。在一个实施例中，所述制品包含药物制剂，其中所述SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少三种存在于所述药物制剂中。在一个实施例中，所述制品包含药物制剂，其中所述SKL2001、SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT存在于所述药物制剂中。

虽然已经通过特定实施例描述了本发明，但是常规修改对于本领域技术人员来说将是显而易见的，并且此类修改旨在落入本发明的范围内。

Claims

1.一种将胶质瘤细胞转化为神经元的方法，所述方法包含使所述胶质瘤细胞与有效量的SKL2001接触。

2.根据权利要求1所述的方法，其进一步包含使所述胶质瘤细胞与有效量的SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少一种接触。

3.根据权利要求2所述的方法，其中使所述胶质瘤细胞与SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少两种的组合接触。

4.根据权利要求2所述的方法，其中使所述胶质瘤细胞与SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少三种的组合接触。

5.根据权利要求2所述的方法，其中使所述胶质瘤细胞与SKL2001、SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT的组合接触。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述神经元表达双皮质素(DCX)。

7.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述胶质瘤细胞包含胶质母细胞瘤细胞。

8.根据权利要求6所述的方法，其中所述胶质瘤细胞在已被诊断患有胶质瘤的受试者中。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述受试者是人。

10.根据权利要求8所述的方法，其中所述胶质瘤的阶段选自由I期、II期、II期和IV期组成的群组。

11.根据权利要求8所述的方法，其中所述胶质瘤细胞在已被诊断患有星形细胞瘤的受试者中。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述胶质瘤细胞在已被诊断患有胶质母细胞瘤的受试者中。

13.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述SKL2001与所述SB431542、所述LDN193189、所述CHIR99021或所述DAPT中的至少一种是与所述胶质瘤细胞接触的一种或多种药物制剂的仅有的活性成分。

14.一种药物组合物，其包含SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少一种的组合。

15.根据权利要求14所述的药物组合物，其包含所述SKL2001与所述SB431542、所述LDN193189、所述CHIR99021或所述DAPT中的至少两种。

16.根据权利要求14所述的药物组合物，其包含所述SKL2001与所述SB431542、所述LDN193189、所述CHIR99021或所述DAPT中的至少三种。

17.根据权利要求14所述的药物组合物，其包含所述SKL2001、所述SB431542、所述LDN193189、所述CHIR99021和所述DAPT。

18.根据权利要求14所述的药物组合物，其中所述SKL2001与所述SB431542、所述LDN193189、所述CHIR99021或所述DAPT中的至少一种是所述药物制剂中仅有的活性成分。

19.一种包含药物组合物的制品，所述药物组合物包含SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少一种，所述制品进一步包含提供所述药物组合物用于治疗胶质瘤的指示的印刷材料。

20.根据权利要求19所述的制品，其中所述SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少一种是所述药物制剂中仅有的活性成分。

21.根据权利要求20所述的制品，其中所述SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少两种存在于所述药物制剂中。

22.根据权利要求21所述的制品，其中所述SKL2001与SB431542、LDN193189、CHIR99021或DAPT中的至少三种存在于所述药物制剂中。

23.根据权利要求21所述的制品，其中所述SKL2001、SB431542、LDN193189、CHIR99021和DAPT存在于所述药物制剂中。