CN114903006A - 一种非人灵长类动物物质成瘾模型的构建方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种非人灵长类动物物质成瘾模型的构建方法与应用，使用所述方法可以在较少的时间内获得物质成瘾的灵长类动物模型。

Description

一种非人灵长类动物物质成瘾模型的构建方法与应用

技术领域

本发明属于动物学领域，更具体地，本发明涉及非人灵长类动物物质成瘾模型的构建方法和应用。

背景技术

物质成瘾是一种慢性复发性脑疾病，以强迫性、失去控制地用药行为和反复发生的复吸行为为主要特征。个体反复使用成瘾性物质将产生躯体和(或)精神依赖。物质成瘾已成为困扰人类健康和社会发展的重大公共卫生和社会问题。

物质成瘾研究需要合适的动物模型。目前研究物质成瘾最有效的模型是自身给药模型，常用的模式动物是大、小鼠。由于啮齿类动物在物质成瘾相关脑区的解剖结构、投射环路、神经递质及受体系统等与灵长类存在明显差异，导致啮齿类动物模型在成瘾研究成果的推广和转化方面存在明显的局限性。非人灵长类动物在解剖结构、发育及功能上与人类神经系统高度相似。因此，非人灵长类动物自身给药模型是物质成瘾研究的最佳模型，但目前国内外尚缺乏标准的、被广泛接受的灵长类物质成瘾模型的构建方法。

发明内容

在本发明的一方面，提供一种构建用于评估动物对待测物质的成瘾性、耐受性、自身给药行为和/或觅药行为的非人灵长类动物物质成瘾模型的方法，所述方法包含以下步骤：

(1)利用多种非成瘾性刺激建立非人灵长类动物对非成瘾性刺激的操作性条件反射，所述非成瘾性刺激是非成瘾性物质和感官刺激，

优选地，步骤(1)包括：向所述非人灵长类动物提供与多种操作关联的所述多种非成瘾性刺激，允许所述非人灵长类动物通过所述操作在所述非成瘾性物质之间自由选择，直至每种非成瘾性物质的日选择比例稳定；

任选的(2)建立待测物质的单次选择剂量，

优选地，步骤(2)包括：将(1)中所述非成瘾性物质之一替换为不同剂量待测物质，允许所述非人灵长类动物通过所述操作在所述待测物质和非成瘾性物质之间自由选择，记录不同剂量待测物质的操作频率，操作频率最高的剂量为单次选择剂量；

更优选地，所述单次选择剂量为满足以下条件时操作频率最高的剂量：(a)直至非成瘾性物质和/或待测物质的日选择比例和操作次数稳定，和/或(b)当动物对不同剂量待测物质的选择比例存在差异，且任意剂量待测物质的选择比例的最大值超过50％，

(3)将(1)中所述非成瘾性物质中的一种或多种替代为单次选择剂量的待测物质，允许所述非人灵长类动物通过所述操作在所述待测物质和非成瘾性物质之间自由选择，

其中，所述非人灵长类动物物质成瘾模型满足以下条件：(a)所述待测物质的日选择比例大于或等于70％，优选大于或等于90％，更优选大于或等于90％，且至少连续3天稳定，和(b)待测物质的单日摄入量逐渐增加，且至少连续2天或3天稳定。

在一个或多个实施方案中，日选择比例稳定、操作次数稳定、单日摄入量稳定是指各参数的变化在均值的40％、30％或20％范围内。

在一个或多个实施方案中，所述多种操作与所述多种非成瘾性刺激一一对应。

在一个或多个实施方案中，所述一种或多种操作是按压交互面板上的不同压杆，例如位于动物不同侧的压杆。

在一个或多个实施方案中，所述非成瘾性物质是固体或液体非成瘾性物质，包括非成瘾性食物，例如固体食物和/或果汁。所述固体成瘾性食物的外形与待测物质的外型相似。

在一个或多个实施方案中，所述感官刺激是声音和/或光刺激。

在一个或多个实施方案中，所述声音刺激是断续声音，例如断续的蜂鸣声。

在一个或多个实施方案中，所述光刺激包括光闪烁。

在一个或多个实施方案中，与不同操作关联的非成瘾性刺激是不同的，例如非成瘾性物质不同，声音的种类不同、声音断或续的时间长度不同、光颜色不同、光闪烁时间不同。

在一个或多个实施方案中，每1-40次操作获取与所述操作关联的物质，优选为10、20或30次。

在一个或多个实施方案中，步骤(1)中，记录每种非成瘾性物质的选择百分比与每种操作的次数，直至每种非成瘾性物质的日选择比例稳定。

在一个或多个实施方案中，所述稳定为数据变化小于或等于40％，小于或等于30％，小于或等于20％。

在一个或多个实施方案中，步骤(2)中，以递增的剂量设置待测物质。

在一个或多个实施方案中，步骤(2)中，每种剂量的待测物质的最大选择次数为8-15，例如10。

在一个或多个实施方案中，步骤(2)中，操作频率指在一定时间内的操作次数。所述一定时间是每种剂量的待测物质的训练时间。

在一个或多个实施方案中，步骤(2)中，每种剂量的待测物质的训练时间为10-30分钟，例如20分钟。

在一个或多个实施方案中，步骤(2)中，每种剂量的待测物质的训练间隔时间为2-10分钟，例如5分钟。

在一个或多个实施方案中，待测物质是液体，其通过胃肠外途径给予，例如静脉注射。

在一个或多个实施方案中，待测物质以与固体非成瘾性物质相似外形的剂型给予，例如固体药丸、药片。

在一个或多个实施方案中，步骤(3)持续至多6周，至多5周，至多4周。

在一个或多个实施方案中，步骤(3)每日进行。

在一个或多个实施方案中，步骤(3)每日时长至多240分钟、至多180分钟、至多120分钟。

在一个或多个实施方案中，每次获取与某操作关联的物质所需的该操作的次数为1-40次，优选为10、20或30次。优选地，每日根据前一日某操作的总次数和获取该操作关联物质的总次数之比来校正每次获取该物质所需的该操作的次数。

在一个或多个实施方案中，所述待测物质的单次选择剂量为步骤(2)中获得的操作频率最高的剂量。

在一个或多个实施方案中，所述待测物质的每日剂量不超过其每日安全剂量。

在一个或多个实施方案中，所述待测物质是成瘾性物质，例如吗啡、海洛因、可卡因、甲基苯丙胺。

在一个或多个实施方案中，所述待测物质是甲基苯丙胺。优选地，甲基苯丙胺的单次选择剂量为0.01-0.1mg/kg/inj，优选0.032mg/kg/inj。优选地，甲基苯丙胺的每日摄入量至多为4mg/kg、3mg/kg或2mg/kg。

在一个或多个实施方案中，所述待测物质是抗生素、治疗药物、镇静药物、催眠药物、固体食物、液体食物。

在一个或多个实施方案中，所述治疗药物是心血管系统疾病、神经/精神类疾病、免疫系统疾病、泌尿系统疾病、呼吸系统疾病、消化系统疾病、血液系统疾病、生殖系统疾病、肿瘤疾病等的治疗药物。

在一个或多个实施方案中，所述待测物质处于临床在用阶段或临床前转化阶段。

在一个或多个实施方案中，非人灵长类动物是食蟹猴、狨猴或猕猴。

在一个或多个实施方案中，所述方法还包括步骤(4)，评估所述非人灵长类动物物质成瘾模型的成瘾程度，该步骤包括：

(4.1)根据以下关系获取选自以下的一种或多种分值：奖赏效应分值，失控效应分值，渴求程度分值，复吸行为分值，有害性分值，

(a)奖赏效应分值：根据所述动物模型对成瘾性物质的选择比例评估奖赏效应分值，其中，

对成瘾性物质的选择比例大于或等于0％且小于或等于25％，奖赏效应分值为0分，

对成瘾性物质的选择比例为大于25％且小于或等于50％，奖赏效应分值为1分，

对成瘾性物质的选择比例大于50％且小于或等于75％，奖赏效应分值为2分，

对成瘾性物质的选择比例大于75％且小于或等于100％，奖赏效应分值为3分，

(b)失控效应分值：根据所述动物模型的单日成瘾性物质剂量与步骤(3)起始至少1天(例如1、2、3、4、5天)的剂量的日平均值之间的比较评估失控效应分值，其中，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于或等于1倍且小于或等于1.25倍，失控效应分值为0分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于1.25倍且小于或等于2倍，失控效应分值为1分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于2倍且小于或等于3倍，失控效应分值为2分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于3倍，失控效应分值为3分，

(c)渴求程度分值：通过所述动物模型在戒断期对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的渴求程度分值，其中，

所述比值小于或等于1倍，渴求程度分值为0分，

所述比值大于1倍且小于或等于1.5倍，渴求程度分值为1分，

所述比值大于1.5倍且小于或等于2倍，渴求程度分值为2分，

所述比值大于2倍，渴求程度分值为3分，

(d)复吸行为分值：根据所述动物模型在复吸检测阶段对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的复吸行为分值，其中，

所述比值大于或等于0且小于或等于0.25倍，复吸行为分值为0分，

所述比值大于0.25倍且小于或等于0.5倍，复吸行为分值为1分，

所述比值大于0.5倍且小于或等于0.75倍，复吸行为分值为2分，

所述比值大于0.75倍，复吸行为分值为3分，

(e)有害性分值：

所述动物模型的体重相对于未建模时的降低大于或等于0％且小于10％，有害性分值为0分，

所述动物模型的体重相对于未建模时降低大于或等于10％且小于15％，有害性分值为1分，

所述动物模型的体重相对于未建模时降低大于或等于15％且小于20％，有害性分值为2分，

所述动物模型的体重相对于未建模时降低大于或等于20％，有害性分值为3分，

(4.2)将所述一种或多种分值求和计算得到成瘾指数，

(4.3)根据以下关系计算成瘾程度：

成瘾指数0，成瘾程度为未瘾性，

成瘾指数1-5，成瘾程度为轻度瘾性，

成瘾指数6-10，成瘾程度为中度成瘾，

成瘾指数11-15，成瘾程度为重度成瘾。

在一个或多个实施方案中，戒断期对成瘾性物质关联操作的次数是成瘾性物质停药后所述物质4-7个半衰期时(优选地5-6个半衰期时，更优选第2天)和30-50个半衰期时(优选地30-40个半衰期时，更优选第15天)对成瘾性物质关联操作的次数的平均值。

在一个或多个实施方案中，戒断期检测方法与步骤(3)相同，区别仅在于所述多种操作没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质和感官刺激。

在一个或多个实施方案中，在复吸检测阶段中，在对所述动物提供低剂量成瘾性物质和/或线索(cue)来诱发复吸行为后，动物的所述多种操作没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质和感官刺激。所述低剂量是建模用剂量(例如所述单次选择剂量)的20％-60％，优选30％-50％。

在一个或多个实施方案中，所述线索是所述感官刺激；包括声音和/或光刺激。例如给予所述待测物质(成瘾性物质)时伴随的声、光等刺激。

在一个或多个实施方案中，复吸检测阶段对成瘾性物质关联操作的次数是诱发复吸行为当天对成瘾性物质关联操作的次数。

在一个或多个实施方案中，复吸检测阶段的检测方法与步骤(3)相同，区别仅在于所述多种操作没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质和感官刺激。

在一个或多个实施方案中，步骤(3)还包括每次训练前的渴求检测。渴求检测持续5-20分钟，例如10分钟。渴求检测中，所述非人灵长类动物的操作不产生刺激反馈，但操作仍被记录。

本发明还提供一种非人灵长类动物物质成瘾模型，其由本文所述构建非人灵长类动物物质成瘾模型的方法构建，其中，所述动物模型的成瘾性物质的选择比例大于或等于70％，优选大于或等于90％，更优选大于或等于90％，且至少连续2天或3天稳定，和(b)成瘾性物质的单日摄入量逐渐增加，且至少连续2天或3天稳定。

在一个或多个实施方案中，所述稳定是指各参数的变化在均值的40％、30％、20％或10％范围内。

在一个或多个实施方案中，所述成瘾性物质是甲基苯丙胺，其单次选择剂量为其单次选择剂量为0.01-0.1mg/kg/inj，优选0.032mg/kg/inj。

在一个或多个实施方案中，所述成瘾性物质是甲基苯丙胺，其每日摄入量至多为3mg/kg。

本发明还提供本发明任一实施方案所述动物模型或任一实施方案所述方法构建的动物模型在自身给药强化训练、物质奖赏效应评估、物质行为失控效应评估、物质渴求程度评估、物质耐受效应评估、有害性使用程度评估、成瘾性戒断训练、观察急和/或慢性戒断症状、成瘾消退训练、物质复吸、筛选疾病治疗药物中的应用。

在一个或多个实施方案中，成瘾消退包括自然消退，药物和/或物理干预的加速或减慢消退。

在一个或多个实施方案中，物质复吸包括药物诱发、线索诱发、环境诱发的物质复吸。

在一个或多个实施方案中，所述耐受效应评估包括：在构建模型时记录单日待测物质摄入量，根据所述摄入量随时间的变化评估非人灵长类对待测物质的耐受效应。

在一个或多个实施方案中，所述有害性使用程度评估包括：在构建模型时记录单日待测物质摄入量、体重和进食量，根据其随时间的变化回归分析体重和/或进食量与累计待测物质摄入量的关系，从而评估所述动物模型对待测物质的有害性使用程度。

本发明还提供一种评估非人灵长类动物物质奖赏效应的方法，所述方法包含以下步骤：

(1)利用多种非成瘾性刺激建立非人灵长类动物对非成瘾性刺激的操作性条件反射，所述非成瘾性刺激是非成瘾性物质和感官刺激，

优选地，步骤(1)包括：向所述非人灵长类动物提供与多种操作关联的所述多种非成瘾性刺激，允许所述非人灵长类动物通过所述操作在所述非成瘾性物质之间自由选择，直至每种非成瘾性物质的日选择比例稳定；

任选的(2)建立成瘾性物质的单次选择剂量，

优选地，步骤(2)包括：将(1)中所述非成瘾性物质之一替换为不同剂量待测物质，允许所述非人灵长类动物通过所述操作在所述待测物质和非成瘾性物质之间自由选择，记录不同剂量待测物质的操作频率，直至(a)物质的日选择比例和操作次数稳定，(b)动物对不同剂量待测物质的选择比例有差异，且选择比例的最大值超过50％。

本发明还提供一种评估非人灵长类动物对物质的成瘾程度的方法，包括：

(1)根据以下关系获取选自以下的一种或多种分值：奖赏效应分值，失控效应分值，渴求程度分值，复吸行为分值，有害性分值，

(a)奖赏效应分值：根据所述非人灵长类动物对成瘾性物质的选择比例评估奖赏效应分值，其中，

对成瘾性物质的选择比例大于或等于0％且小于或等于25％，奖赏效应分值为0分，

对成瘾性物质的选择比例为大于25％且小于或等于50％，奖赏效应分值为1分，

对成瘾性物质的选择比例大于50％且小于或等于75％，奖赏效应分值为2分，

对成瘾性物质的选择比例大于75％且小于或等于100％，奖赏效应分值为3分，

(b)失控效应分值：根据所述动物的单日成瘾性物质剂量与成瘾性物质起始至少1天(例如1、2、3、4、5天)的剂量的日平均值之间的比较评估失控效应分值，其中，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于或等于1倍且小于或等于1.25倍，失控效应分值为0分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于1.25倍且小于或等于2倍，失控效应分值为1分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于2倍且小于或等于3倍，失控效应分值为2分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于3倍，失控效应分值为3分，

(c)渴求程度分值：通过所述动物在戒断期对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的渴求程度分值，其中，

所述比值小于或等于1倍，渴求程度分值为0分，

所述比值大于1倍且小于或等于1.5倍，渴求程度分值为1分，

所述比值大于1.5倍且小于或等于2倍，渴求程度分值为2分，

所述比值大于2倍，渴求程度分值为3分，

(d)复吸行为分值：根据所述动物在复吸检测阶段对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的复吸行为分值，其中，

所述比值大于或等于0且小于或等于0.25倍，复吸行为分值为0分，

所述比值大于0.25倍且小于或等于0.5倍，复吸行为分值为1分，

所述比值大于0.5倍且小于或等于0.75倍，复吸行为分值为2分，

所述比值大于0.75倍，复吸行为分值为3分，

(e)有害性分值：

所述动物的体重的降低大于或等于0％且小于10％，有害性分值为0分，

所述动物的体重的降低大于或等于10％且小于15％，有害性分值为1分，

所述动物的体重的降低大于或等于15％且小于20％，有害性分值为2分，

所述动物的体重的降低大于或等于20％，有害性分值为3分，

(2)将所述一种或多种分值求和计算得到成瘾指数，和

(3)根据以下关系计算成瘾程度：

成瘾指数0，成瘾程度为未瘾性，

成瘾指数1-5，成瘾程度为轻度瘾性，

成瘾指数6-10，成瘾程度为中度成瘾，

成瘾指数11-15，成瘾程度为重度成瘾。

在一个或多个实施方案中，步骤(1)的(b)中，成瘾性物质起始是指所述动物首次接触成瘾性物质的时间，优选为本发明第一方面所述方法的步骤(3)开始的时间。

在一个或多个实施方案中，戒断期对成瘾性物质关联操作的次数是成瘾性物质停药后所述物质4-7个半衰期时(优选地5-6个半衰期时，更优选第2天)和30-50个半衰期时(优选地30-40个半衰期时，更优选第15天)对成瘾性物质关联操作的次数的平均值。

在一个或多个实施方案中，戒断期检测方法与步骤(3)相同，区别仅在于所述多种操作没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质和感官刺激。

在一个或多个实施方案中，在复吸检测阶段中，在对所述动物提供低剂量成瘾性物质和/或线索(cue)来诱发复吸行为后，动物的所述多种操作没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质和感官刺激。所述低剂量是建模用剂量(例如所述单次选择剂量)的20％-60％，优选30％-50％。

在一个或多个实施方案中，所述线索是所述感官刺激；包括声音和/或光刺激。例如给予所述待测物质(成瘾性物质)时伴随的声、光等刺激。

在一个或多个实施方案中，复吸检测阶段对成瘾性物质关联操作的次数是诱发复吸行为当天对成瘾性物质关联操作的次数。

在一个或多个实施方案中，复吸检测阶段的检测方法与步骤(3)相同，区别仅在于所述多种操作没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质和感官刺激。例如，没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质是指使用不含所述成瘾性物质的对照物质替代所述成瘾性物质。在一个或多个实施方案中，所述对照物质是所述成瘾性物质的溶剂或载剂或媒介物。

本发明还提供一种用于评估非人灵长类动物对物质的成瘾程度的介质，所述介质用于通过成瘾指数获得非人灵长类动物对物质的成瘾程度，其中，成瘾程度与成瘾指数满足如下关系：

成瘾指数0，成瘾程度为未瘾性，

成瘾指数1-5，成瘾程度为轻度瘾性，

成瘾指数6-10，成瘾程度为中度成瘾，

成瘾指数11-15，成瘾程度为重度成瘾。

在一个或多个实施方案中，成瘾指数是选自以下的一种或多种分值之和：奖赏效应分值，失控效应分值，渴求程度分值，复吸行为分值，有害性分值，其中，如下计算各分值，

(a)奖赏效应分值：根据所述非人灵长类动物对成瘾性物质的选择比例评估奖赏效应分值，其中，

对成瘾性物质的选择比例大于或等于0％且小于或等于25％，奖赏效应分值为0分，

对成瘾性物质的选择比例为大于25％且小于或等于50％，奖赏效应分值为1分，

对成瘾性物质的选择比例大于50％且小于或等于75％，奖赏效应分值为2分，

对成瘾性物质的选择比例大于75％且小于或等于100％，奖赏效应分值为3分，

(b)失控效应分值：根据所述动物的单日成瘾性物质剂量与成瘾性物质起始至少1天(例如1、2、3、4、5天)的剂量的日平均值之间的比较评估失控效应分值，其中，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于或等于1倍且小于或等于1.25倍，失控效应分值为0分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于1.25倍且小于或等于2倍，失控效应分值为1分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于2倍且小于或等于3倍，失控效应分值为2分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于3倍，失控效应分值为3分，

(c)渴求程度分值：通过所述动物在戒断期对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的渴求程度分值，其中，

所述比值小于或等于1倍，渴求程度分值为0分，

所述比值大于1倍且小于或等于1.5倍，渴求程度分值为1分，

所述比值大于1.5倍且小于或等于2倍，渴求程度分值为2分，

所述比值大于2倍，渴求程度分值为3分，

(d)复吸行为分值：根据所述动物在复吸检测阶段对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的复吸行为分值，其中，

所述比值大于或等于0且小于或等于0.25倍，复吸行为分值为0分，

所述比值大于0.25倍且小于或等于0.5倍，复吸行为分值为1分，

所述比值大于0.5倍且小于或等于0.75倍，复吸行为分值为2分，

所述比值大于0.75倍，复吸行为分值为3分，

(e)有害性分值：

所述动物的体重的降低大于或等于0％且小于10％，有害性分值为0分，

所述动物的体重的降低大于或等于10％且小于15％，有害性分值为1分，

所述动物的体重的降低大于或等于15％且小于20％，有害性分值为2分，

所述动物的体重的降低大于或等于20％，有害性分值为3分。

在一个或多个实施方案中，所述介质是一个或多个印刷品，如卡片、使用手册。

在一个或多个实施方案中，所述一个或多个印刷品(例如以文字或图表的形式)提供如下任意一种或多种或全部信息/包括以下任意一种或多种或全部内容：

成瘾指数0，成瘾程度为未瘾性，

成瘾指数1-5，成瘾程度为轻度瘾性，

成瘾指数6-10，成瘾程度为中度成瘾，

成瘾指数11-15，成瘾程度为重度成瘾。

在一个或多个实施方案中，所述一个或多个印刷品还提供以下任意一种或多种或全部信息/包括以下任意一种或多种或全部内容：

(a)奖赏效应分值：根据所述非人灵长类动物对成瘾性物质的选择比例评估奖赏效应分值，其中，

对成瘾性物质的选择比例大于或等于0％且小于或等于25％，奖赏效应分值为0分，

对成瘾性物质的选择比例为大于25％且小于或等于50％，奖赏效应分值为1分，

对成瘾性物质的选择比例大于50％且小于或等于75％，奖赏效应分值为2分，

对成瘾性物质的选择比例大于75％且小于或等于100％，奖赏效应分值为3分，

(b)失控效应分值：根据所述动物的单日成瘾性物质剂量与成瘾性物质起始至少1天(例如1、2、3、4、5天)的剂量的日平均值之间的比较评估失控效应分值，其中，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于或等于1倍且小于或等于1.25倍，失控效应分值为0分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于1.25倍且小于或等于2倍，失控效应分值为1分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于2倍且小于或等于3倍，失控效应分值为2分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于3倍，失控效应分值为3分，

(c)渴求程度分值：通过所述动物在戒断期对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的渴求程度分值，其中，

所述比值小于或等于1倍，渴求程度分值为0分，

所述比值大于1倍且小于或等于1.5倍，渴求程度分值为1分，

所述比值大于1.5倍且小于或等于2倍，渴求程度分值为2分，

所述比值大于2倍，渴求程度分值为3分，

(d)复吸行为分值：根据所述动物在复吸检测阶段对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的复吸行为分值，其中，

所述比值大于或等于0且小于或等于0.25倍，复吸行为分值为0分，

所述比值大于0.25倍且小于或等于0.5倍，复吸行为分值为1分，

所述比值大于0.5倍且小于或等于0.75倍，复吸行为分值为2分，

所述比值大于0.75倍，复吸行为分值为3分，

(e)有害性分值：

所述动物的体重的降低大于或等于0％且小于10％，有害性分值为0分，

所述动物的体重的降低大于或等于10％且小于15％，有害性分值为1分，

所述动物的体重的降低大于或等于15％且小于20％，有害性分值为2分，

所述动物的体重的降低大于或等于20％，有害性分值为3分。

在一个或多个实施方案中，所述介质是装置，所述装置包括存储器、处理器以及存储在存储器上并可在处理器上运行的计算机程序，其特征在于，所述处理器执行所述程序时实现以下步骤：

(1)根据以下关系获取选自以下的一种或多种分值：奖赏效应分值，失控效应分值，渴求程度分值，复吸行为分值，有害性分值，

(a)奖赏效应分值：根据所述非人灵长类动物对成瘾性物质的选择比例评估奖赏效应分值，其中，

对成瘾性物质的选择比例大于或等于0％且小于或等于25％，奖赏效应分值为0分，

对成瘾性物质的选择比例为大于25％且小于或等于50％，奖赏效应分值为1分，

对成瘾性物质的选择比例大于50％且小于或等于75％，奖赏效应分值为2分，

对成瘾性物质的选择比例大于75％且小于或等于100％，奖赏效应分值为3分，

(b)失控效应分值：根据所述动物的单日成瘾性物质剂量与成瘾性物质起始至少1天(例如1、2、3、4、5天)的剂量的日平均值之间的比较评估失控效应分值，其中，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于或等于1倍且小于或等于1.25倍，失控效应分值为0分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于1.25倍且小于或等于2倍，失控效应分值为1分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于2倍且小于或等于3倍，失控效应分值为2分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于3倍，失控效应分值为3分，

(c)渴求程度分值：通过所述动物在戒断期对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的渴求程度分值，其中，

所述比值小于或等于1倍，渴求程度分值为0分，

所述比值大于1倍且小于或等于1.5倍，渴求程度分值为1分，

所述比值大于1.5倍且小于或等于2倍，渴求程度分值为2分，

所述比值大于2倍，渴求程度分值为3分，

(d)复吸行为分值：根据所述动物在复吸检测阶段对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的复吸行为分值，其中，

所述比值大于或等于0且小于或等于0.25倍，复吸行为分值为0分，

所述比值大于0.25倍且小于或等于0.5倍，复吸行为分值为1分，

所述比值大于0.5倍且小于或等于0.75倍，复吸行为分值为2分，

所述比值大于0.75倍，复吸行为分值为3分，

(e)有害性分值：

所述动物的体重的降低大于或等于0％且小于10％，有害性分值为0分，

所述动物的体重的降低大于或等于10％且小于15％，有害性分值为1分，

所述动物的体重的降低大于或等于15％且小于20％，有害性分值为2分，

所述动物的体重的降低大于或等于20％，有害性分值为3分，

(2)将所述一种或多种分值求和计算得到成瘾指数，

(3)根据以下关系计算成瘾程度：

成瘾指数0，成瘾程度为未瘾性，

成瘾指数1-5，成瘾程度为轻度瘾性，

成瘾指数6-10，成瘾程度为中度成瘾，

成瘾指数11-15，成瘾程度为重度成瘾，和

(4)输出所述成瘾程度。

附图说明

图1为本发明实施例1食蟹猴甲基苯丙胺成瘾模型的构建结果，其中

a为五种甲基苯丙胺(Meth)剂量条件下食蟹猴对甲基苯丙胺和果汁的选择百分比图。inj：注射；

b为五种甲基苯丙胺剂量条件下食蟹猴对甲基苯丙胺关联侧压杆的按压频率图；

c为食蟹猴对甲基苯丙胺和果汁选择百分比随时间的变化图；

d为食蟹猴单日甲基苯丙胺摄入量随时间的变化图；

e为戒断期食蟹猴对甲基苯丙胺的渴求程度图；

f为食蟹猴对甲基苯丙胺的复吸数据图；

g食蟹猴体重随甲基苯丙胺摄入时长的变化图。

图2为本发明实施例2恒河猴甲基苯丙胺成瘾模型的构建结果，其中

a为五种甲基苯丙胺剂量条件下恒河猴对甲基苯丙胺和果汁的选择百分比图；

b为五种甲基苯丙胺剂量条件下恒河猴对甲基苯丙胺关联侧压杆的按压频率图；

c为恒河猴对甲基苯丙胺和果汁选择百分比随时间的变化图；

d为恒河猴单日甲基苯丙胺摄入量随时间的变化图；

e为戒断期恒河猴对甲基苯丙胺的渴求程度图；

f为恒河猴对甲基苯丙胺的复吸数据图；

g恒河猴体重随甲基苯丙胺摄入时长的变化图。

具体实施方式

针对本领域中没有公认的构建非人灵长类动物物质成瘾模型的技术缺陷，本发明提供了一种构建非人灵长类动物物质成瘾模型的方法，使用所述方法可以在较少的时间内获得物质成瘾的非人灵长类动物模型。

本文首先提供一种构建用于评估动物对待测物质的成瘾性、耐受性、自身给药行为和/或觅药行为的非人灵长类动物物质成瘾模型的方法，所述方法包含以下步骤：(1)利用多种非成瘾性刺激建立非人灵长类动物对非成瘾性刺激的操作性条件反射，所述非成瘾性刺激是非成瘾性物质和感官刺激，任选的(2)建立成瘾性物质的单次选择剂量，和(3)构建动物成瘾模型。

如本文所用，非人灵长类指灵长目下任何非人的动物；较佳地，所述灵长类动物包括：猴、长臂猿、猩猩；更佳地，所述的猴包括选自下组的猴：恒河猴、食蟹猴、日本猕猴、绿猴、绒猴、松鼠猴。

如本文所用，待测物质包括成瘾性物质、抗生素、治疗药物、镇静药物、催眠药物、固体食物、液体食物等。成瘾性物质例如吗啡、海洛因、可卡因、甲基苯丙胺。本文所述治疗药物是心血管系统疾病、神经/精神类疾病、免疫系统疾病、泌尿系统疾病、呼吸系统疾病、消化系统疾病、血液系统疾病、生殖系统疾病、肿瘤疾病等的治疗药物。抗生素、治疗药物、镇静药物、催眠药物优选处于临床在用阶段和/或临床前转化阶段。待测物质可以是液体，其通过例如胃肠外途径给予，例如静脉注射。或者，待测物质是固体，其通常以与固体非成瘾性物质相似外形的剂型给予，例如固体药丸、药片。

本文中，非成瘾性物质指用于训练非人灵长类动物对操作的条件反射的物质，通常是非成瘾性食物，例如固体食物和/或果汁。

感官刺激是任何形式的感觉刺激，优选声音和/或光刺激。例如，所述声音刺激是断续声音，例如断续的蜂鸣声；所述光刺激包括光闪烁。

本文中，与不同操作关联的非成瘾性刺激是不同的，例如非成瘾性物质不同，声音的种类不同、声音断或续的时间长度不同、光颜色不同、光闪烁时间不同。

以下详述非人灵长类动物物质成瘾模型的构建方法。

步骤(1)，利用多种非成瘾性刺激建立非人灵长类动物对非成瘾性刺激的操作性条件反射

在一个实施方案中，步骤(1)包括：向所述非人灵长类动物提供与多种操作关联的所述多种非成瘾性刺激，允许所述非人灵长类动物通过所述操作在所述非成瘾性物质之间自由选择，记录每种非成瘾性物质的选择百分比与每种操作的次数，直至每种非成瘾性物质的日选择比例稳定。

本文中，“稳定”表示数据相对均值的变化幅度小于或等于40％，小于或等于30％，小于或等于20％，小于或等于10％。

本文中，固定比率或FR值指给予某一物质(包括非成瘾性物质或待测物质)所需的某一操作的次数。例如，可设置为每10、20、30、或40次操作获取与所述操作关联的物质。所述一种或多种操作是按压交互面板上的不同压杆，例如位于动物不同侧的压杆或按钮。或者，每日根据前一日某操作的总次数和获取该操作关联物质的总次数之比来校正固定比率(每次获取该物质所需的该操作的次数)。

步骤(2)，建立待测物质的单次选择剂量

在一个实施方案中，步骤(2)包括：将(1)中所述非成瘾性物质之一替换为不同剂量待测物质，允许所述非人灵长类动物通过所述操作在所述待测物质和非成瘾性物质之间自由选择，记录不同剂量待测物质的操作频率，直至(a)物质的日选择比例和操作次数稳定，和/或(b)当动物对不同剂量待测物质的选择比例有差异，且选择比例的最大值超过50％。本文所述待测物质的“单次选择剂量”为操作频率最高的剂量。

本文中，操作频率指在一定时间内获得相应物质所需的对应操作的次数。即所述非人灵长类动物愿意为该剂量付出更多的操作。步骤(2)中通常以递增的剂量设置待测物质。每种剂量的待测物质的最大选择次数为8-15，例如10；每种剂量的待测物质的训练时间为10-30分钟，例如20分钟；每种剂量的待测物质的训练间隔时间为2-10分钟，例如5分钟。

步骤(3)，构建动物成瘾模型

在一个实施方案中，步骤(3)包括：将(1)中所述非成瘾性物质中的一种或多种替代为单次选择剂量的待测物质，允许所述非人灵长类动物通过所述操作在所述待测物质和非成瘾性物质之间自由选择。

对于大多数待测物质，步骤(3)持续至多6周，至多5周，至多4周；步骤(3)每日时长至多240分钟、至多180分钟、至多120分钟。本文所述待测物质的“单次选择剂量”为步骤(2)中获得的操作频率最高的剂量。优选地，所述待测物质是甲基苯丙胺，其单次选择剂量为0.01-0.1mg/kg/inj，优选0.032mg/kg/inj，其每日选择次数至多为65或75或85次。需要注意的是，所述待测物质的每日剂量不超过其每日安全剂量。在甲基苯丙胺的情况中，所述待测物质的每日剂量不超过4mg/kg、3mg/kg或2mg/kg。

本文中，构建完成的非人灵长类动物物质成瘾模型满足以下条件：(a)所述待测物质的选择比例大于或等于70％，优选大于或等于90％，更优选大于或等于90％，且至少连续2天或3天稳定，和(b)待测物质的单日摄入量逐渐增加，且至少连续2天或3天稳定。

本发明还提供评估非人灵长类动物对物质的成瘾程度的方法，该方法可独立实施，或者作为本发明的非人灵长类动物物质成瘾模型构建方法的步骤(4)实施，用于评估所述非人灵长类动物物质成瘾模型的成瘾程度。该评估方法或步骤包括：(1)根据以下关系获取选自奖赏效应分值、失控效应分值、渴求程度分值、复吸行为分值、有害性分值的一种或多种分值：(a)奖赏效应分值：根据所述动物模型对成瘾性物质的选择比例评估奖赏效应分值，其中，对成瘾性物质的选择比例大于或等于0％且小于或等于25％，奖赏效应分值为0分；对成瘾性物质的选择比例为大于25％且小于或等于50％，奖赏效应分值为1分；对成瘾性物质的选择比例大于50％且小于或等于75％，奖赏效应分值为2分；对成瘾性物质的选择比例大于75％且小于或等于100％，奖赏效应分值为3分；(b)失控效应分值：根据所述动物模型的单日成瘾性物质剂量与成瘾性物质起始(例如步骤(3)起始)至少1天(例如1、2、3、4、5天)的剂量的日平均值之间的比较评估失控效应分值，其中，单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于或等于1倍且小于或等于1.25倍，失控效应分值为0分；单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于1.25倍且小于或等于2倍，失控效应分值为1分；单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于2倍且小于或等于3倍，失控效应分值为2分；单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于3倍，失控效应分值为3分；(c)渴求程度分值：通过所述动物模型在戒断期对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的渴求程度分值，其中，所述比值小于或等于1倍，渴求程度分值为0分；所述比值大于1倍且小于或等于1.5倍，渴求程度分值为1分；所述比值大于1.5倍且小于或等于2倍，渴求程度分值为2分；所述比值大于2倍，渴求程度分值为3分；(d)复吸行为分值：根据所述动物模型在复吸检测阶段对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的复吸行为分值，其中，所述比值大于或等于0且小于或等于0.25倍，复吸行为分值为0分；所述比值大于0.25倍且小于或等于0.5倍，复吸行为分值为1分；所述比值大于0.5倍且小于或等于0.75倍，复吸行为分值为2分；所述比值大于0.75倍，复吸行为分值为3分；(e)有害性分值，其中所述动物模型的体重的降低(相对于建模前)大于或等于0％且小于10％，有害性分值为0分；所述动物模型的体重的降低大于或等于10％且小于15％，有害性分值为1分；所述动物模型的体重的降低大于或等于15％且小于20％，有害性分值为2分；所述动物模型的体重的降低大于或等于20％，有害性分值为3分，(2)将所述一种或多种分值求和计算得到成瘾指数，(3)根据以下关系计算成瘾程度：成瘾指数0，成瘾程度为未瘾性；成瘾指数1-5，成瘾程度为轻度瘾性；成瘾指数6-10，成瘾程度为中度成瘾；成瘾指数11-15，成瘾程度为重度成瘾。

本文中，戒断期是指成瘾性物质停药后至少2天。在计算渴求程度分值中，戒断期对成瘾性物质关联操作的次数是成瘾性物质停药后时间A和时间B对成瘾性物质关联操作的次数的平均值。停药后的检测时间根据成瘾性物质半衰期确定，例如“时间A”对应于所述物质4-7个半衰期(优选地5-6个半衰期时，在甲基苯丙胺的示例中为2天)，“时间B”对应于所述物质30-50个半衰期(优选地30-40个半衰期时，在甲基苯丙胺的示例中为15天)。在一个或多个实施方案中，戒断期的动物训练方法与步骤(3)相同，区别仅在于所述多种操作没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质和感官刺激。本文中，“没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质”包括各种形式的取消成瘾性物质或非成瘾性物质的供给，例如使用不含所述成瘾性物质的对照物质替代所述成瘾性物质。所述对照物质可以是所述成瘾性物质的溶剂、载剂或媒介物，例如水。

本文中，复吸检测指向动物(例如已成瘾的动物)提供诱发复吸行为的方式，例如小剂量(例如建模用剂量的20％-60％，优选30％-50％)成瘾性物质的摄入和/或线索(cue，例如感官刺激)，以评估是否能引起动物重新进行(例如按压)成瘾性物质关联操作(例如按压侧压杆)及操作次数。在一个或多个实施方案中，复吸检测阶段的检测方法与步骤(3)相同，区别仅在于所述多种操作没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质和感官刺激。即，在复吸检测阶段，在对所述动物提供低剂量成瘾性物质和/或线索来诱发复吸行为后，动物的操作没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质和感官刺激。在一个或多个实施方案中，复吸检测阶段对成瘾性物质关联操作的次数是诱发复吸行为当天对成瘾性物质关联操作的次数。

本发明还提供一种上述模型构建方法所构建的非人灵长类动物物质成瘾模型，其中，所述动物模型的成瘾性物质的选择比例大于或等于70％，优选大于或等于90％，更优选大于或等于90％，且至少连续2天或3天稳定，和(b)成瘾性物质的单日摄入量逐渐增加，且至少连续2天或3天稳定。“逐渐增加”表示参数在每次(例如每日)测量时增加。在具体实施方案中，所述成瘾性物质是甲基苯丙胺，其单次选择剂量为0.01-0.1mg/kg/inj，优选0.032mg/kg/inj(建模用剂量)。

本发明还提供本发明任一实施方案所述动物模型或任一实施方案所述方法构建的动物模型在自身给药强化训练、物质奖赏效应评估、物质行为失控效应评估、物质渴求程度评估、物质耐受效应评估、有害性使用程度评估、成瘾性戒断训练、观察急和/或慢性戒断症状、成瘾消退训练、物质复吸、筛选疾病治疗药物中的应用。成瘾消退包括自然消退，药物和/或物理干预的加速或减慢消退。物质复吸包括药物诱发、线索诱发、环境诱发的物质复吸。在某些实施方式中，耐受效应评估包括：在构建模型时记录单日待测物质摄入量，根据所述摄入量随时间的变化评估非人灵长类对待测物质的耐受效应。在某些实施方式中，有害性使用程度评估包括：在构建模型时记录单日待测物质摄入量、体重和进食量，根据其随时间的变化回归分析体重和/或进食量与累计待测物质摄入量的关系，从而评估所述动物模型对待测物质的有害性使用程度。

本文所述的评估非人灵长类动物对物质的成瘾程度的方法或其参数可以记载在介质上，所述介质用于通过成瘾指数获得非人灵长类动物对物质的成瘾程度，其中，成瘾程度与成瘾指数满足如下关系：成瘾指数0，成瘾程度为未瘾性；成瘾指数1-5，成瘾程度为轻度瘾性；成瘾指数6-10，成瘾程度为中度成瘾；成瘾指数11-15，成瘾程度为重度成瘾。

在示例性实施方案中，所述介质是装置，例如便携式床边检测装置，所述装置包括存储器、处理器以及存储在存储器上并可在处理器上运行的计算机程序，其特征在于，所述处理器执行所述程序时实现以下步骤：(1)-(3)上述评估非人灵长类动物对物质的成瘾程度的方法的步骤(1)-步骤(3)，和(4)输出所述成瘾程度。

在具体实施方案中，提供一种构建非人灵长类动物物质成瘾模型的方法，所述方法包含以下述步骤：

(1)建立非人灵长类动物对自然奖赏物的操作性条件反射：非人灵长类动物置于非人灵长类动物座椅组件并置于所述非人灵长类动物自身给药系统组件内，训练其按压交互面板上的左、右侧压杆，当按压左侧压杆时给予一次食物奖励(固体颗粒，外形与药丸类似)，同时呈现声音和红/绿灯光的刺激；当按压右侧压杆时给予一次果汁奖励，同时呈现声音和绿/红灯光的刺激。记录每种奖励的选择百分比与双侧压杆的按压次数。当出现日选择比例稳定后(判断标准后述)，进入下一步。

(2)确定建模用物质浓度：a.设置成瘾性物质的剂量梯度(一般选择5个梯度，第一个剂量为零，第三个剂量为该药品在临床或动物研究中的最佳使用剂量，第二个为第三个的三分之一，第四个为第三个的三倍，第五个为第四个的三倍)；b.将成瘾性物质替代原先固体或液体奖励(若待测物质为固体药丸，选择右侧压杆关联，即按压右侧压杆特定次数(即FR值，一般选择20或30)时，将给予药丸而非原先的果汁作为奖赏物；同理若物质为液体，则选择左侧压杆与之关联，若物质需静脉给药，则随机选择左或右侧压杆与之关联)；c.每只非人灵长类动物每天的最大测试时长为120分钟，包括五个时长均为20分钟的测试组(block)(测试组数量等于物质的剂量梯度数目)，每个测试组内最大奖励次数为10，当达到最大奖励时，该测试组将被提前结束，测试组之间间隔5分钟。五个测试组之间的区别仅在于单次给予待测物质的剂量不同，测试组1到测试组5物质剂量递增，单个测试组内剂量不变；d.允许非人灵长类动物在待测物质和自然奖赏物之间自由选择，并统计各自的选择百分比及压杆次数；e.当满足连续三天选择百分比和压杆次数的数据变化在20％范围里时，该步骤结束。

(3)构建成瘾模型：a)当所述步骤2中不同剂量待测物质的选择百分比有差异，且最大值超过50％的情况下，进入步骤3，且选择压杆频率最高的剂量(即所述非人灵长类动物愿意为该剂量付出更多的压杆操作)作为建模用剂量；b)继续让非人灵长类动物在待测物质和自然奖赏物之间自由选择；c)建模参数：建模阶段最大时长为4周，最大单日训练时长为120分钟，单次给药剂量为所述建模用剂量，单日最大奖励次数为85(根据物质的安全剂量上线来定)，达到该值时当日训练提前结束。建模阶段每次训练(trial)之间的间隔设为1分钟，FR值为固定值，常用值为10、20、30；d)每日训练前增加一个10分钟的渴求检测任务，此10分钟内，所述非人灵长类动物压杆操作不会产生任何奖励和声、光刺激等输出，但压杆行为仍被记录。e)同时满足以下两个条件时建模提前终止：1)非人灵长类动物对成瘾性物质选择百分比超过90％，且连续3天稳定；2)成瘾性物质的单日摄入量逐步增加，且连续3天稳定时建模结束。

(4)量化成瘾程度：a)量化奖赏效应：根据建模结束时非人灵长类动物对成瘾性物质的选择百分比评估奖赏效应。奖赏效应分值根据建模用剂量对应的选择百分比数值来计算，0-25％记为0分，25％-50％记为1分，50％-75％记为2分，75％-100％记为3分；b)量化行为失控效应，该分值根据单日用药量增加幅度计算，检测结束时单日用药剂量为步骤3起始3天剂量平均值的1-1.25倍记为0分，1.25-2倍记为1分，2-3倍记为2分，3倍以上记为3分；c)量化戒断反应(渴求程度)：戒断期检测时间点为强制停药第2天(根据物质半衰期确定)和第15天，计算两天的平均值。检测任务范式与步骤3相似，区别仅在于：FR值恒定与无任何奖励和声、光等输出。通过非人灵长类动物对成瘾性物质关联侧压杆的按压次数来量化其对成瘾性物质的渴求程度。渴求程度分值根据戒断期压杆次数与最后一次用药当日的压杆次数比值来计算，1倍以下记为0分，1-1.5倍记为1分，1.5-2倍记为2分，2倍以上记为3分。d)评估复吸行为：检测小剂量成瘾性物质的摄入与线索(cue)的呈现是否能引起非人灵长类动物重新按压成瘾性物质关联侧压杆及按压量。复吸行为分值根据复吸行为检测期间压杆次数与最后一次用药当日的压杆次数比值来计算，0-0.25倍记为0分，0.25-0.5倍记为1分，0.5-0.75倍记为2分，0.75倍以上记为3分；e)评估有害性使用：通过记录所述非人灵长类动物体重的变化，来反映待成瘾性物质的有害性使用。有害性使用方面，体重不降低或降低10％以内记为0分，10-15％记为1分，15-20％记为2分，20％以上记为3分。上述指标总分15分(0为未瘾性，1-5分为轻度瘾性，6-10分为中度成瘾，11-15为重度成瘾)。

本发明另一目的是提供上述非人灵长类动物物质成瘾模型的用途。在具体实施按方案中，所述用途包括：

(1)用于非人灵长类动物自身给药强化训练

非人灵长类动物坐在所述非人灵长类动物座椅组件上完成自身给药任务，非人灵长类动物按压左、右侧压杆中一侧压杆特定次数即可获得一次奖赏物(奖赏物可以是固体食物、液体果汁与水等自然奖赏物，也可以是成瘾性物质如海洛因、冰毒)，按压另外一侧压杆则不能获取奖赏物，给予奖赏物的同时呈现声、光刺激。开始时非人灵长类动物随机压杆，经过一段时间的训练，非人灵长类动物奖赏物关联侧压杆的按压有效率和频率都大大提升，由此反映奖赏物的强化效应。训练期间，需要设置单次给予奖赏物的剂量梯度以便全面评估该奖赏物的强化效应，同时须限定单日最大奖赏物获取次数以防止物质的过量摄入。训练成功的标准为：非人灵长类动物的单日奖赏物获取次数和压杆量在连续3天内变化在±20％范围内。当日训练任务终止条件：a.达训练任务最大时长，如120分钟；b.提前达到最大奖赏次数；c.连续30分钟无任何压杆操作；d.非人灵长类动物面部出现恐惧等情绪；e.非人灵长类动物体温超出正常范围。

(2)用于评估非人灵长类动物物质奖赏效应

首先，建立非人灵长类动物对自然奖赏物的操作性条件反射：非人灵长类动物置于所述非人灵长类动物座椅组件并置于所述非人灵长类动物自身给药系统组件内，训练其按压所述交互面板上的左、右侧压杆，当按压左侧压杆时给予一次食物奖励(固体颗粒，外形与药丸类似)，同时呈现声音和红/绿灯光的刺激；当按压右侧压杆时给予一次果汁奖励，同时呈现声音和绿/红灯光的刺激。记录每种奖励的选择百分比与双侧压杆的按压次数。其次，当出现日选择比例稳定后(判断标准后述)，进行以下步骤：a.设置待测药品的剂量梯度(一般选择5个梯度，第一个剂量为零，第三个剂量为该药品在临床或动物研究中的最佳使用剂量，第二个为第三个的三分之一，第四个为第三个的三倍，第五个为第四个的三倍)；b.将待测物质替代原先固体或液体奖励(若待测物质为固体药丸，选择右侧压杆关联，即按压右侧压杆固定次数(即固定比率(FR)值)时，将给予一次药丸而非原先的果汁作为奖赏物；同理若物质为液体，则选择左侧压杆与之关联，若物质需静脉给药，则随机选择左或右侧压杆与之关联)；c.每只非人灵长类动物每天的最大测试时长为120分钟，包括五个时长均为20分钟的测试组(测试组数量等于物质的剂量梯度数目)，每个测试组内最大奖励次数为10次，当达到最大奖励时，该测试组将被提前结束，两个测试组之间间隔5分钟。五个测试组之间的区别仅在于单次给予待测物质的剂量不同，测试组1到测试组5物质剂量递增，单个测试组内剂量不变；d.允许非人灵长类动物在待测物质和自然奖赏物之间自由选择，并统计各自的选择百分比，及压杆次数；e.当满足连续三天选择百分比和压杆次数的数据变化在20％范围里时，评估结束。

(3)用于评估非人灵长类动物物质行为失控效应

a.绘制待测物质的剂量反应曲线，选择压杆频率最高的剂量(即所述非人灵长类动物愿意为该剂量付出更多的压杆操作)作为评估其行为失控效应的使用剂量；b.让非人灵长类动物在待测物质和自然奖赏物之间自由选择，此时单日最大训练时长为120分钟，最大奖励次数根据物质的安全剂量上线来定，达到最大值时当日训练结束；c.该阶段trial之间的间隔设为1分钟；d.FR值根据前一日某侧压杆按压次数与获得相应奖励次数比值来计算，FR初始值可根据实际情况人为设定，当日FR不变；e.每日120分钟的检测前增加一个10分钟的渴求检测任务，此10分钟内，所述非人灵长类动物压杆操作不会产生任何奖励和声、光刺激等输出，但压杆行为仍被记录。

(4)用于评估非人灵长类动物物质渴求程度

重复摄入待测物质一段时期后，停止给药，进行非人灵长类动物对待测物质渴求程度的评估。评估任务与所述评估非人灵长类动物物质行为失控效应的方法类似，区别仅在于：FR值恒定且压杆操作不会获得任何奖赏物与物质、及呈现声、光等输出。通过非人灵长类动物对待测物质关联侧压杆的按压量来量化其对待测物质的渴求程度。

(5)用于评估非人灵长类动物的物质耐受效应

在所述非人灵长类动物自身给药强化训练、评估非人灵长类动物物质奖赏效应或评估非人灵长类动物物质行为失控效应的过程中记录单日待测物质摄入量，并分析其随时间的变化规律，以评估非人灵长类对待测物质的耐受效应。

(6)用于评估非人灵长类动物的物质有害性使用程度

在所述非人灵长类动物自身给药强化训练、评估非人灵长类动物物质奖赏效应或评估非人灵长类动物物质行为失控效应的过程中记录单日待测物质摄入量及当日体重与进食量，并分析其随时间的变化规律，回归分析体重/进食量与累计待测物质摄入量之间的联系，以评估非人灵长类对待测物质的有害性使用程度。

本发明方法和模型还可用于成瘾相关的非人灵长类动物训练方案，例如针对各类成瘾类药物，如吗啡、海洛因、可卡因、甲基苯丙胺的(1)成瘾模型的训练，包括自身给药、觅药行为的强弱等；(2)成瘾模型的戒断训练，观察急/慢性戒断症状等；(3)成瘾模型的消退训练，包括自然消退、药物/物理干预等手段的加速/减慢消退等；(4)成瘾模型的复吸，包括药物诱发、线索诱发、环境诱发等。

本发明方法和模型还可用于临床在用物相关药物或临床转化前相关药的非人灵长类动物训练方案，例如对能够口服(固体药丸、药片等、液体药液)或静脉给药的抗生素类药物，镇静催眠类药物，治疗药物(用于治疗心血管系统疾病、神经/精神类疾病、免疫系统疾病、泌尿系统疾病、呼吸系统疾病、消化系统疾病、血液系统疾病、生殖系统疾病、肿瘤疾病等)，评估其在非人灵长类的成瘾性、耐受性等。

本发明方法和模型还可用于食品相关的动物训练方案，例如用于评估非人灵长类对固体、液体食物的成瘾性、耐受性等。

本发明优点：

本文所述非人灵长类动物物质成瘾模型的构建方法，通过在建模过程中创造性地向非人灵长类动物同时呈现成瘾性物质和自然奖赏物(非成瘾物质)，并允许其自由选择，模拟了人类毒品的使用情境，解决了当前对非人灵长类成瘾研究迫切的动物模型需求；具有操作简单、结果可靠的优点，同时具有良好的通用性，可用于不同类型(如固体物质、液体物质)和不同给药方式(如口服、静脉注射)物质的成瘾动物模型构建，该模型可用于物质成瘾机制与干预方法的研究。

本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。

实施例1

(1)建立食蟹猴对自然奖赏物的操作性条件反射

利用食蟹猴对环境探索的本能、对果汁的喜爱与压杆操作后立即得到一次自然奖赏物的程序设定，建立食蟹猴的压杆操作与自然奖赏物之间的关联即操作性条件反射(operant conditioning)。食蟹猴坐在非人非人灵长类动物座椅组件上完成任务训练，两侧前肢有同等机会按压杠杆，但所述非人非人灵长类动物座椅组件的特殊结构决定了食蟹猴某侧前肢只能按压同侧压杆，而无法按压对侧压杆。当食蟹猴按压左侧压杆时给予一次食物奖励(固体颗粒，外形与药丸类似)，当按压右侧压杆时给予一次果汁奖励。记录每种奖励的选择百分比与双侧压杆的按压次数。

该阶段的行为训练使用固定比率(FR)强化程序。训练过程中我们逐步把FR值增加至某一固定值，此处以30为例(递增序列：1，3，5，8，13，20，30)。每周训练5天，每天训练2小时，提前终止训练任务的条件：自然奖赏物给予次数达最大值(85次)与连续30min无压杆操作。单个trial的流程与参数设定如下：trial开始时白色室灯亮起，若食蟹猴左侧压杆的次数达规定值，立即给予一次固体奖励，奖励给予期间室灯灭，左侧压杆正上方红色LED灯闪烁(开与关各500ms)和蜂鸣器断续发声(开与关各500ms)，奖励给完trial结束。若食蟹猴右侧压杆的次数达规定值，立即给予一次果汁奖励(2ml)，果汁给予期间室灯灭，右侧压杆正上方绿色LED灯闪烁(开与关各500ms)和蜂鸣器断续发声(开与关各500ms)，果汁给完trial结束。接着进入60s Time-out阶段，该阶段和奖励给予期间食蟹猴的压杆操作不计作获取果汁的有效压杆次数，但仍被软件记录。满足以下两个条件时方开始后续实验：1)在FR30时，奖励给予量连续3天稳定(数据变化在均值的10％范围内)；2)奖励给予和Time-out阶段无压杆。

(2)确定建模用甲基苯丙胺的浓度

a)食蟹猴静脉插管手术实验

根据人类使用待测物质的方式，确定食蟹猴的摄入方式。此处以静脉给药为例进行阐述，若为口服或其他摄药方式可略过此步。在动物股或颈静脉长期埋置滞留管并将注射端头引至背部皮下，以便长期给药。该手术由经验丰富的兽医完成。手术过程简要描述如下：全身麻醉状态下，于股静脉或颈静脉上方切开皮肤2cm，分离静脉血管，穿刺针插入血管，然后将植入式静脉插管沿穿刺针导入静脉血管约8-10cm，固定血管和静脉插管。将静脉插管另一端沿皮下穿行至背部，切开3cm皮肤，连接静脉导管和注射腔体，缝合两处切口。术中实时监测实验动物生理指标。术后护理：手术后将有专业动物技术人员进行日常护理，术后前三天，每天都会注射一次到两次的镇痛药以及抗生素，第七天进行第一次大清创，对手术部位及周围进行清理，并拆除缝合线，七天以后保证2天一次频率的清创工作。待术后完全恢复后，方可继续。

b)绘制食蟹猴甲基苯丙胺的剂量-反应曲线

根据已有的文献报道，将甲基苯丙胺的单次注射剂量设为0、3.2、10、32、100μg/kg共5个剂量梯度，并将甲基苯丙胺替代原先固体奖励即与左侧压杆关联。每只食蟹猴每天的最大测试时长为120分钟，包括五个时长均为20分钟的测试组，每个测试组内最大奖励次数为10，当达到最大奖励时，该测试组将被提前结束，测试组之间间隔5分钟。五个测试组之间的区别仅在于单次给予待测物质的剂量不同，测试组1到测试组5物质剂量递增，单个测试组内剂量不变。单个trial的流程与参数设定如下：trial开始时白色室灯亮起，若食蟹猴左侧压杆的次数达规定值，立即给予一次甲基苯丙胺，给予期间室灯灭，左侧压杆正上方红色LED灯闪烁(不同甲基苯丙胺剂量对应的灯闪烁频率不同，当剂量为“0μg/kg”时开与关各500ms，当剂量为“3.2μg/kg”时开与关各400ms，当剂量为“10μg/kg”时开与关各300ms，当剂量为“32μg/kg”时开与关各200ms，当剂量为“100μg/kg”时开与关各100ms)和蜂鸣器断续发声(不同甲基苯丙胺剂量对应的发声频率不同，当剂量为“0μg/kg”时开与关各500ms，当剂量为“3.2μg/kg”时开与关各400ms，当剂量为“10μg/kg”时开与关各300ms，当剂量为“32μg/kg”时开与关各200ms，当剂量为“100μg/kg”时开与关各100ms)，奖励给完trial结束。若食蟹猴右侧压杆的次数达规定值，立即给予一次果汁奖励(2ml)，果汁给予期间室灯灭，右侧压杆正上方绿色LED灯闪烁(开与关各500ms)和蜂鸣器断续发声(开与关各500ms)，果汁给完trial结束。允许非人非人灵长类动物在待测物质和自然奖赏物之间自由选择，并统计各自的选择百分比，及压杆次数；e.当满足连续三天选择百分比和压杆次数的数据变化在20％范围里时，该步骤结束。根据食蟹猴对不同剂量梯度的压杆行为及单日摄药量，绘制剂量-反应曲线。并根据该曲线，选择相应最大的剂量作为后续建模用剂量。

(3)构建食蟹猴甲基苯丙胺成瘾模型

a)选择建模用物质浓度

当所述步骤2中不同剂量甲基苯丙胺的选择百分比有差异，且最大值超过50％的情况下，进入步骤3，且选择压杆频率最高的剂量作为建模用剂量；

b)建模过程

A.让食蟹猴在甲基苯丙胺和果汁之间自由选择，

建模参数：该阶段最大时长为4周，单日测试时间为最长120分钟，单次给药剂量恒定，最大奖励次数为根据物质的安全剂量上线来定，达到该值时当日训练结束，trial之间的间隔设为1分钟；FR值为固定值30；

B.每日训练前增加一个10分钟的渴求检测任务，此10分钟内，食蟹猴压杆操作不会产生任何奖励和声、光刺激等输出，但压杆行为仍被记录。

C.建模提前结束条件：同时满足以下条件时建模提前终止：1)非人非人灵长类动物对成瘾性物质选择百分比超过90％，且连续3天稳定；2)成瘾性物质的单日摄入量逐步增加，且连续3天稳定。

(5)量化食蟹猴对甲基苯丙胺的成瘾程度

a)奖赏效应

奖赏效应分值根据甲基苯丙胺的最高响应剂量对应的选择百分比数值来计算，具体为0-25％记为0分，25％-50％记为1分，50％-75％记为2分，75％-100％记为3分)。本实施例中该项分值为3分。

b)行为失控效应

行为失控分值根据单日用药量增加幅度计算，检测结束时单日用药剂量为步骤3起始三天剂量平均值的1-1.25倍记为0分，1.25-2倍记为1分，2-3倍记为2分，3倍以上记为3分。据此标准，本实施例中该项分值为3分。

c)渴求程度

渴求程度分值根据戒断期压杆次数与最后一次用药当日的压杆次数比值来计算，1倍以下记为0分，1-1.5倍记为1分，1.5-2倍记为2分，2倍以上记为3分。本实施例中该项分值为2分。

d)复吸行为

复吸分值根据复吸行为检测期间压杆次数与最后一次用药当日的压杆次数比值来计算，0-0.25倍记为0分，0.25-0.5倍记为1分，0.5-0.75倍记为2分，0.75倍以上记为3分。本实施例中该项分值为3分。

e)有害性使用

有害性使用方面，体重不降低或降低10％以内记为0分，10-15％记为1分，15-20％记为2分，20％以上记为3分。本实施例中该项分值为2分。

上述指标总分15分(0为未瘾性，1-5分为轻度瘾性，6-10分为中度成瘾，11-15为重度成瘾)。本实施例中上述指标分值为13分，属重度成瘾。

结果如图1，a-g所示。结果显示，利用本发明的方法，能够全面、客观和准确地：评估出甲基苯丙胺相对于果汁对食蟹猴的奖赏效应值(图1，a)；评估出甲基苯丙胺的剂量效应，并获得最大响应剂量(图1，b)；食蟹猴能够在平均3～8天内达到客观、稳定的甲基苯丙胺选择百分比(图1，c)；评估食蟹猴对甲基苯丙胺使用量的失控效应(图1，d)；评估出食蟹猴对甲基苯丙胺的渴求程度(图1，e)；评估出食蟹猴对甲基苯丙胺的复吸行为(图1，f)；评估食蟹猴对甲基苯丙胺的有害性使用效应(图1，g)。

实施例2

(1)建立恒河猴对自然奖赏物的操作性条件反射

利用恒河猴对环境探索的本能、对果汁的喜爱与压杆操作后立即得到一次自然奖赏物的程序设定，建立恒河猴的压杆操作与自然奖赏物之间的关联即操作性条件反射(operant conditioning)。恒河猴坐在非人非人灵长类动物座椅组件上完成任务训练，两侧前肢有同等机会按压杠杆，但所述非人非人灵长类动物座椅组件的特殊结构决定了恒河猴某侧前肢只能按压同侧压杆，而无法按压对侧压杆。当恒河猴按压左侧压杆时给予一次食物奖励(固体颗粒，外形与药丸类似)，当按压右侧压杆时给予一次果汁奖励。记录每种奖励的选择百分比与双侧压杆的按压次数。

该阶段的行为训练使用固定比率(FR)强化程序。训练过程中我们逐步把FR值增加至某一固定值，此处以30为例(递增序列：1，3，5，8，13，20，30)。每周训练5天，每天训练2小时，提前终止训练任务的条件：自然奖赏物给予次数达最大值(85次)与连续30min无压杆操作。单个trial的流程与参数设定如下：trial开始时白色室灯亮起，若恒河猴左侧压杆的次数达规定值，立即给予一次固体奖励，奖励给予期间室灯灭，左侧压杆正上方红色LED灯闪烁(开与关各500ms)和蜂鸣器断续发声(开与关各500ms)，奖励给完trial结束。若恒河猴右侧压杆的次数达规定值，立即给予一次果汁奖励(2ml)，果汁给予期间室灯灭，右侧压杆正上方绿色LED灯闪烁(开与关各500ms)和蜂鸣器断续发声(开与关各500ms)，果汁给完trial结束。接着进入60s Time-out阶段，该阶段和奖励给予期间恒河猴的压杆操作不计作获取果汁的有效压杆次数，但仍被软件记录。满足以下两个条件时方开始后续实验：1)在FR30时，奖励给予量连续3天稳定(数据变化在均值的10％范围内)；2)奖励给予和Time-out阶段无压杆。

(2)确定建模用甲基苯丙胺的浓度

a)恒河猴静脉插管手术实验

根据人类使用待测物质的方式，确定恒河猴的摄入方式。此处以静脉给药为例进行阐述，若为口服或其他摄药方式可略过此步。在动物股或颈静脉长期埋置滞留管并将注射端头引至背部皮下，以便长期给药。该手术由经验丰富的兽医完成。手术过程简要描述如下：全身麻醉状态下，于股静脉或颈静脉上方切开皮肤2cm，分离静脉血管，穿刺针插入血管，然后将植入式静脉插管沿穿刺针导入静脉血管约8-10cm，固定血管和静脉插管。将静脉插管另一端沿皮下穿行至背部，切开3cm皮肤，连接静脉导管和注射腔体，缝合两处切口。术中实时监测实验动物生理指标。术后护理：手术后将有专业动物技术人员进行日常护理，术后前三天，每天都会注射一次到两次的镇痛药以及抗生素，第七天进行第一次大清创，对手术部位及周围进行清理，并拆除缝合线，七天以后保证2天一次频率的清创工作。待术后完全恢复后，方可继续。

b)绘制恒河猴甲基苯丙胺的剂量-反应曲线

根据已有的文献报道，将甲基苯丙胺的单次注射剂量设为0、3.2、10、32、100μg/kg共5个剂量梯度，并将甲基苯丙胺替代原先固体奖励即与左侧压杆关联。每只恒河猴每天的最大测试时长为120分钟，包括五个时长均为20分钟的测试组，每个测试组内最大奖励次数为10，当达到最大奖励时，该测试组将被提前结束，测试组之间间隔5分钟。五个测试组之间的区别仅在于单次给予待测物质的剂量不同，测试组1到测试组5物质剂量递增，单个测试组内剂量不变。单个trial的流程与参数设定如下：trial开始时白色室灯亮起，若恒河猴左侧压杆的次数达规定值，立即给予一次甲基苯丙胺，给予期间室灯灭，左侧压杆正上方红色LED灯闪烁(不同甲基苯丙胺剂量对应的灯闪烁频率不同，当剂量为“0μg/kg”时开与关各500ms，当剂量为“3.2μg/kg”时开与关各400ms，当剂量为“10μg/kg”时开与关各300ms，当剂量为“32μg/kg”时开与关各200ms，当剂量为“100μg/kg”时开与关各100ms)和蜂鸣器断续发声(不同甲基苯丙胺剂量对应的发声频率不同，当剂量为“0μg/kg”时开与关各500ms，当剂量为“3.2μg/kg”时开与关各400ms，当剂量为“10μg/kg”时开与关各300ms，当剂量为“32μg/kg”时开与关各200ms，当剂量为“100μg/kg”时开与关各100ms)，奖励给完trial结束。若恒河猴右侧压杆的次数达规定值，立即给予一次果汁奖励(2ml)，果汁给予期间室灯灭，右侧压杆正上方绿色LED灯闪烁(开与关各500ms)和蜂鸣器断续发声(开与关各500ms)，果汁给完trial结束。允许非人非人灵长类动物在待测物质和自然奖赏物之间自由选择，并统计各自的选择百分比，及压杆次数；e.当满足连续三天选择百分比和压杆次数的数据变化在20％范围里时，该步骤结束。根据恒河猴对不同剂量梯度的压杆行为及单日摄药量，绘制剂量-反应曲线。并根据该曲线，选择相应最大的剂量作为后续建模用剂量。

(3)构建恒河猴甲基苯丙胺成瘾模型

a)选择建模用物质浓度

当所述步骤2中不同剂量甲基苯丙胺的选择百分比有差异，且最大值超过50％的情况下，进入步骤3，且选择压杆频率最高的剂量作为建模用剂量；

b)建模过程

A.让恒河猴在甲基苯丙胺和果汁之间自由选择；

B.建模参数：该阶段最大时长为4周，单日测试时间为最长120分钟，单次给药剂量恒定，最大奖励次数为根据物质的安全剂量上线来定，达到该值时当日训练结束，trial之间的间隔设为1分钟；FR值为固定值30；

C.每日训练前增加一个10分钟的渴求检测任务，此10分钟内，恒河猴压杆操作不会产生任何奖励和声、光刺激等输出，但压杆行为仍被记录。

D.建模提前结束条件：同时满足以下条件时建模提前终止：1)非人非人灵长类动物对成瘾性物质选择百分比超过90％，且连续3天稳定；2)成瘾性物质的单日摄入量逐步增加，且连续3天稳定。

(4)量化恒河猴对甲基苯丙胺的成瘾程度

a)奖赏效应

奖赏效应分值根据甲基苯丙胺的最高响应剂量对应的选择百分比数值来计算，具体为0-25％记为0分，25％-50％记为1分，50％-75％记为2分，75％-100％记为3分)。本实施例中该项分值为3分。

b)行为失控效应

行为失控分值根据单日用药量增加幅度计算，检测结束时单日用药剂量为步骤3起始三天剂量平均值的1-1.25倍记为0分，1.25-2倍记为1分，2-3倍记为2分，3倍以上记为3分。据此标准，本实施例中该项分值为3分。

c)渴求程度

渴求程度分值根据戒断期压杆次数与最后一次用药当日的压杆次数比值来计算，1倍以下记为0分，1-1.5倍记为1分，1.5-2倍记为2分，2倍以上记为3分。本实施例中该项分值为2分。

d)复吸行为

复吸分值根据复吸行为检测期间压杆次数与最后一次用药当日的压杆次数比值来计算，0-0.25倍记为0分，0.25-0.5倍记为1分，0.5-0.75倍记为2分，0.75倍以上记为3分。本实施例中该项分值为3分。

e)有害性使用

有害性使用方面，体重不降低或降低10％以内记为0分，10-15％记为1分，15-20％记为2分，20％以上记为3分。本实施例中该项分值为2分。

上述指标总分15分(0为未瘾性，1-5分为轻度瘾性，6-10分为中度成瘾，11-15为重度成瘾)。本实施例中上述指标分值为13分，属重度成瘾。

结果如图2，a-g所示。结果显示，利用本发明的方法，能够全面、客观和准确地：评估出甲基苯丙胺相对于果汁对恒河猴的奖赏效应值(图2，a)；客观、准确地评估出甲基苯丙胺的剂量效应，并获得最大响应剂量(图2，b)；恒河猴能够在平均3～8天内达到客观、稳定的甲基苯丙胺选择百分比(图2，c)；评估恒河猴对甲基苯丙胺使用量的失控效应(图2，d)；评估出恒河猴对甲基苯丙胺的渴求程度(图2，e)；评估出恒河猴对甲基苯丙胺的复吸行为(图2，f)；评估恒河猴对甲基苯丙胺的有害性使用效应(图2，g)。

Claims (10)

1.一种构建用于评估动物对待测物质的成瘾性、耐受性、自身给药行为和/或觅药行为的非人灵长类动物物质成瘾模型的方法，所述方法包含以下步骤：

(1)利用多种非成瘾性刺激建立非人灵长类动物对非成瘾性刺激的操作性条件反射，所述非成瘾性刺激是非成瘾性物质和感官刺激，

任选的(2)建立待测物质的单次选择剂量，

(3)将(1)中所述非成瘾性物质中的一种或多种替代为单次选择剂量的待测物质，并允许所述非人灵长类动物通过所述操作在所述待测物质和非成瘾性物质之间自由选择。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，

步骤(1)包括：向所述非人灵长类动物提供与多种操作关联的所述多种非成瘾性刺激，并允许所述非人灵长类动物通过所述操作在所述非成瘾性物质之间自由选择，直至每种非成瘾性物质的日选择比例稳定；优选地，步骤(1)包括：记录每种非成瘾性物质的选择百分比与每种操作的次数，直至每种非成瘾性物质的日选择比例稳定，和/或

步骤(2)包括：将(1)中所述非成瘾性物质之一替换为不同剂量待测物质，允许所述非人灵长类动物通过所述操作在所述待测物质和非成瘾性物质之间自由选择，记录不同剂量待测物质的操作频率，操作频率最高的剂量为单次选择剂量；优选地，所述单次选择剂量为满足以下条件时操作频率最高的剂量：(a)直至非成瘾性物质和/或待测物质的日选择比例和操作次数稳定，和/或(b)当动物对不同剂量待测物质的选择比例存在差异，且任意剂量待测物质的选择比例的最大值超过50％，和/或

所述非人灵长类动物物质成瘾模型满足以下条件：(a)所述待测物质的日选择比例大于或等于70％，优选大于或等于90％，更优选大于或等于90％，且至少连续3天稳定，和(b)待测物质的单日摄入量增加，且至少连续3天稳定，和/或

所述一种或多种操作是按压交互面板上的不同压杆，和/或

所述非成瘾性物质是固体或液体非成瘾性物质，和/或

所述感官刺激是声音和/或光刺激，和/或

每进行1-40次操作获取与所述操作关联的物质；优选地，每日根据前一日某操作的总次数和获取该操作关联物质的总次数之比来校正每次获取该物质所需的该操作的次数，和/或

所述待测物质是成瘾性物质，和/或

所述待测物质是抗生素、治疗药物、镇静药物、催眠药物、固体食物、液体食物，和/或

所述稳定是指各参数的变化在均值的40％、30％或20％范围内，和/或

非人灵长类动物包括：猴、长臂猿、猩猩。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：步骤(4)，评估所述非人灵长类动物物质成瘾模型的成瘾程度，优选地，步骤(4)包括：

(4.1)根据以下关系获取选自以下的一种或多种分值：奖赏效应分值，失控效应分值，渴求程度分值，复吸行为分值，有害性分值，

(a)奖赏效应分值：根据所述动物模型对成瘾性物质的选择比例评估奖赏效应分值，其中，

对成瘾性物质的选择比例大于或等于0％且小于或等于25％，奖赏效应分值为0分，

对成瘾性物质的选择比例为大于25％且小于或等于50％，奖赏效应分值为1分，

对成瘾性物质的选择比例大于50％且小于或等于75％，奖赏效应分值为2分，

对成瘾性物质的选择比例大于75％且小于或等于100％，奖赏效应分值为3分，

(b)失控效应分值：根据所述动物模型的单日成瘾性物质剂量与步骤(3)起始至少1天(例如1、2、3、4、5天)的剂量的日平均值之间的比较评估失控效应分值，其中，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于或等于1倍且小于或等于1.25倍，失控效应分值为0分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于1.25倍且小于或等于2倍，失控效应分值为1分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于2倍且小于或等于3倍，失控效应分值为2分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于3倍，失控效应分值为3分，

(c)渴求程度分值：通过所述动物模型在戒断期对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的渴求程度分值，其中，

所述比值小于或等于1倍，渴求程度分值为0分，

所述比值大于1倍且小于或等于1.5倍，渴求程度分值为1分，

所述比值大于1.5倍且小于或等于2倍，渴求程度分值为2分，

所述比值大于2倍，渴求程度分值为3分，

(d)复吸行为分值：根据所述动物模型在复吸检测阶段对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的复吸行为分值，其中，

所述比值大于或等于0且小于或等于0.25倍，复吸行为分值为0分，

所述比值大于0.25倍且小于或等于0.5倍，复吸行为分值为1分，

所述比值大于0.5倍且小于或等于0.75倍，复吸行为分值为2分，

所述比值大于0.75倍，复吸行为分值为3分，

(e)有害性分值：

所述动物模型的体重相对于未建模时的降低大于或等于0％且小于10％，有害性分值为0分，

所述动物模型的体重相对于未建模时降低大于或等于10％且小于15％，有害性分值为1分，

所述动物模型的体重相对于未建模时降低大于或等于15％且小于20％，有害性分值为2分，

所述动物模型的体重相对于未建模时降低大于或等于20％，有害性分值为3分，

(4.2)将所述一种或多种分值求和计算得到成瘾指数，

(4.3)根据以下关系计算成瘾程度：

成瘾指数0，成瘾程度为未瘾性，

成瘾指数1-5，成瘾程度为轻度瘾性，

成瘾指数6-10，成瘾程度为中度成瘾，

成瘾指数11-15，成瘾程度为重度成瘾。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，

戒断期对成瘾性物质关联操作的次数是成瘾性物质停药后所述物质4-7个半衰期时和30-50个半衰期时对成瘾性物质关联操作的次数的平均值，和/或

戒断期渴求程度检测方法与步骤(3)相同，但所述多种操作没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质和感官刺激，和/或

复吸检测阶段的检测方法与步骤(3)相同，但所述多种操作没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质和感官刺激。

5.一种非人灵长类动物物质成瘾模型，其中，所述动物模型的成瘾性物质的选择比例大于或等于70％，且至少连续2天或3天稳定，和(b)成瘾性物质的单日摄入量增加，且至少连续2天或3天稳定，

优选地，

非人灵长类动物包括：猴、长臂猿、猩猩，和/或

所述稳定是指各参数的变化在均值的40％、30％或20％范围内，和/或

所述成瘾性物质是甲基苯丙胺，和/或

所述模型由权利要求1-4中任一项所述方法构建。

6.权利要求5所述动物模型在自身给药强化训练、物质奖赏效应评估、物质行为失控效应评估、物质渴求程度评估、物质耐受效应评估、有害性使用程度评估、成瘾性戒断训练、观察急和/或慢性戒断症状、成瘾消退训练、物质复吸、筛选疾病治疗药物中的应用，

优选地，

成瘾消退包括自然消退，药物和/或物理干预的加速或减慢消退；和/或

物质复吸包括药物诱发、线索诱发、环境诱发的物质复吸；和/或

所述耐受效应评估包括：在构建模型时记录单日待测物质摄入量，根据所述摄入量随时间的变化评估非人灵长类对待测物质的耐受效应；和/或

所述有害性使用程度评估包括：在构建模型时记录单日待测物质摄入量、体重和进食量，根据其随时间的变化回归分析体重和/或进食量与累计待测物质摄入量的关系，从而评估所述动物模型对待测物质的有害性使用程度。

7.一种评估非人灵长类动物对物质的成瘾程度的方法，包括：

(I)根据以下关系获取选自以下的一种或多种分值：奖赏效应分值，失控效应分值，渴求程度分值，复吸行为分值，有害性分值，

(a)奖赏效应分值：根据所述非人灵长类动物对成瘾性物质的选择比例评估奖赏效应分值，其中，

对成瘾性物质的选择比例大于或等于0％且小于或等于25％，奖赏效应分值为0分，

对成瘾性物质的选择比例为大于25％且小于或等于50％，奖赏效应分值为1分，

对成瘾性物质的选择比例大于50％且小于或等于75％，奖赏效应分值为2分，

对成瘾性物质的选择比例大于75％且小于或等于100％，奖赏效应分值为3分，

(b)失控效应分值：根据所述动物的单日成瘾性物质剂量与成瘾性物质起始至少1天(例如1、2、3、4、5天)的剂量的日平均值之间的比较评估失控效应分值，其中，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于或等于1倍且小于或等于1.25倍，失控效应分值为0分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于1.25倍且小于或等于2倍，失控效应分值为1分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于2倍且小于或等于3倍，失控效应分值为2分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于3倍，失控效应分值为3分，

(c)渴求程度分值：通过所述动物在戒断期对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的渴求程度分值，其中，

所述比值小于或等于1倍，渴求程度分值为0分，

所述比值大于1倍且小于或等于1.5倍，渴求程度分值为1分，

所述比值大于1.5倍且小于或等于2倍，渴求程度分值为2分，

所述比值大于2倍，渴求程度分值为3分，

(d)复吸行为分值：根据所述动物在复吸检测阶段对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的复吸行为分值，其中，

所述比值大于或等于0且小于或等于0.25倍，复吸行为分值为0分，

所述比值大于0.25倍且小于或等于0.5倍，复吸行为分值为1分，

所述比值大于0.5倍且小于或等于0.75倍，复吸行为分值为2分，

所述比值大于0.75倍，复吸行为分值为3分，

(e)有害性分值：

所述动物的体重的降低大于或等于0％且小于10％，有害性分值为0分，

所述动物的体重的降低大于或等于10％且小于15％，有害性分值为1分，

所述动物的体重的降低大于或等于15％且小于20％，有害性分值为2分，

所述动物的体重的降低大于或等于20％，有害性分值为3分，

(II)将所述一种或多种分值求和计算得到成瘾指数，和

(III)根据以下关系计算成瘾程度：

成瘾指数0，成瘾程度为未瘾性，

成瘾指数1-5，成瘾程度为轻度瘾性，

成瘾指数6-10，成瘾程度为中度成瘾，

成瘾指数11-15，成瘾程度为重度成瘾。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，

戒断期对成瘾性物质关联操作的次数是成瘾性物质停药后所述物质4-7个半衰期时和30-50个半衰期时对成瘾性物质关联操作的次数的平均值，和/或

戒断期检测方法与权利要求1或2中的步骤(3)相同，但所述多种操作没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质和感官刺激，和/或

复吸检测阶段的检测方法与权利要求1或2中的步骤(3)相同，但所述多种操作没有对应的成瘾性物质或非成瘾性物质和感官刺激。

9.一种用于评估非人灵长类动物对物质的成瘾程度的介质，所述介质用于通过成瘾指数获得非人灵长类动物对物质的成瘾程度，其中，成瘾程度与成瘾指数满足如下关系：

成瘾指数0，成瘾程度为未瘾性，

成瘾指数1-5，成瘾程度为轻度瘾性，

成瘾指数6-10，成瘾程度为中度成瘾，

成瘾指数11-15，成瘾程度为重度成瘾，

优选地，成瘾指数是选自以下的一种或多种分值之和：奖赏效应分值，失控效应分值，渴求程度分值，复吸行为分值，有害性分值，其中，如下计算各分值，

(a)奖赏效应分值：根据所述非人灵长类动物对成瘾性物质的选择比例评估奖赏效应分值，其中，

对成瘾性物质的选择比例大于或等于0％且小于或等于25％，奖赏效应分值为0分，

对成瘾性物质的选择比例为大于25％且小于或等于50％，奖赏效应分值为1分，

对成瘾性物质的选择比例大于50％且小于或等于75％，奖赏效应分值为2分，

对成瘾性物质的选择比例大于75％且小于或等于100％，奖赏效应分值为3分，

(b)失控效应分值：根据所述动物的单日成瘾性物质剂量与成瘾性物质起始至少1天(例如1、2、3、4、5天)的剂量的日平均值之间的比较评估失控效应分值，其中，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于或等于1倍且小于或等于1.25倍，失控效应分值为0分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于1.25倍且小于或等于2倍，失控效应分值为1分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于2倍且小于或等于3倍，失控效应分值为2分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于3倍，失控效应分值为3分，

(c)渴求程度分值：通过所述动物在戒断期对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的渴求程度分值，其中，

所述比值小于或等于1倍，渴求程度分值为0分，

所述比值大于1倍且小于或等于1.5倍，渴求程度分值为1分，

所述比值大于1.5倍且小于或等于2倍，渴求程度分值为2分，

所述比值大于2倍，渴求程度分值为3分，

(d)复吸行为分值：根据所述动物在复吸检测阶段对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的复吸行为分值，其中，

所述比值大于或等于0且小于或等于0.25倍，复吸行为分值为0分，

所述比值大于0.25倍且小于或等于0.5倍，复吸行为分值为1分，

所述比值大于0.5倍且小于或等于0.75倍，复吸行为分值为2分，

所述比值大于0.75倍，复吸行为分值为3分，

(e)有害性分值：

所述动物的体重的降低大于或等于0％且小于10％，有害性分值为0分，

所述动物的体重的降低大于或等于10％且小于15％，有害性分值为1分，

所述动物的体重的降低大于或等于15％且小于20％，有害性分值为2分，

所述动物的体重的降低大于或等于20％，有害性分值为3分。

10.如权利要求9所述的介质，其特征在于，

所述介质是一个或多个印刷品，其提供如下任意一种或多种或全部信息/包括以下任意一种或多种或全部内容：

成瘾指数0，成瘾程度为未瘾性，

成瘾指数1-5，成瘾程度为轻度瘾性，

成瘾指数6-10，成瘾程度为中度成瘾，

成瘾指数11-15，成瘾程度为重度成瘾，

或者，

所述介质是装置，所述装置包括存储器、处理器以及存储在存储器上并可在处理器上运行的计算机程序，其特征在于，所述处理器执行所述程序时实现以下步骤：

(1)根据以下关系获取选自以下的一种或多种分值：奖赏效应分值，失控效应分值，渴求程度分值，复吸行为分值，有害性分值，

(a)奖赏效应分值：根据所述非人灵长类动物对成瘾性物质的选择比例评估奖赏效应分值，其中，

对成瘾性物质的选择比例大于或等于0％且小于或等于25％，奖赏效应分值为0分，

对成瘾性物质的选择比例为大于25％且小于或等于50％，奖赏效应分值为1分，

对成瘾性物质的选择比例大于50％且小于或等于75％，奖赏效应分值为2分，

对成瘾性物质的选择比例大于75％且小于或等于100％，奖赏效应分值为3分，

(b)失控效应分值：根据所述动物的单日成瘾性物质剂量与成瘾性物质起始至少1天(例如1、2、3、4、5天)的剂量的日平均值之间的比较评估失控效应分值，其中，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于或等于1倍且小于或等于1.25倍，失控效应分值为0分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于1.25倍且小于或等于2倍，失控效应分值为1分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于2倍且小于或等于3倍，失控效应分值为2分，

单日成瘾性物质剂量为所述日平均值的大于3倍，失控效应分值为3分，

(c)渴求程度分值：通过所述动物在戒断期对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的渴求程度分值，其中，

所述比值小于或等于1倍，渴求程度分值为0分，

所述比值大于1倍且小于或等于1.5倍，渴求程度分值为1分，

所述比值大于1.5倍且小于或等于2倍，渴求程度分值为2分，

所述比值大于2倍，渴求程度分值为3分，

(d)复吸行为分值：根据所述动物在复吸检测阶段对成瘾性物质关联操作的次数与最后一次成瘾性物质用药当日的操作次数的比值来评估所述动物对成瘾性物质的复吸行为分值，其中，

所述比值大于或等于0且小于或等于0.25倍，复吸行为分值为0分，

所述比值大于0.25倍且小于或等于0.5倍，复吸行为分值为1分，

所述比值大于0.5倍且小于或等于0.75倍，复吸行为分值为2分，

所述比值大于0.75倍，复吸行为分值为3分，

(e)有害性分值：

所述动物的体重的降低大于或等于0％且小于10％，有害性分值为0分，

所述动物的体重的降低大于或等于10％且小于15％，有害性分值为1分，

所述动物的体重的降低大于或等于15％且小于20％，有害性分值为2分，

所述动物的体重的降低大于或等于20％，有害性分值为3分，

(2)将所述一种或多种分值求和计算得到成瘾指数，

(3)根据以下关系计算成瘾程度：

成瘾指数0，成瘾程度为未瘾性，

成瘾指数1-5，成瘾程度为轻度瘾性，

成瘾指数6-10，成瘾程度为中度成瘾，

成瘾指数11-15，成瘾程度为重度成瘾，和

(4)输出所述成瘾程度。

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