CN114894767A - 用于pcr仪的荧光校准件及其制造方法 - Google Patents

用于pcr仪的荧光校准件及其制造方法 Download PDF

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Abstract

本公开的实施例提供了用于PCR仪的荧光校准件及其制造方法。该方法包括：根据所述PCR仪的待校准的荧光通道的光学特性选择相应的稀土元素荧光粉，所述光学特性包括与所述待校准的荧光通道对应的激发光和发射光的光谱；将具有可逆热凝胶特性的第一物质加热至预设温度，使所述第一物质转化为液态；将所述稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的所述第一物质中，形成第一混合物；多次定量提取所述第一混合物；以及对各次提取的所述第一混合物进行低温处理，以使各次提取的所述第一混合物分别转化为固态，从而形成针对所述待校准的荧光通道的多个荧光校准件。

Description

用于PCR仪的荧光校准件及其制造方法
技术领域
本申请涉及PCR仪技术领域，并且更具体地，涉及一种用于PCR仪的荧光校准件及其制造方法。
背景技术
聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。PCR仪（也可称为基因扩增仪）用于实现这样的反应。
PCR仪具有用于实现荧光检测功能的荧光检测模块。该荧光检测模块中集成有用于产生激发光的光源，常用的有激光器、卤素灯、氙灯、高/低压汞灯、LED等。激发光经由一组光学透镜引导后射入PCR仪的反应耗材中，使反应耗材内的荧光物质受激发后产生发射光。发射光经由另一组光学透镜被引导至荧光信号接收器，随后荧光信号接收器对接收到的发射光的光谱或发射光的信号强弱进行分析。
PCR仪的不同通道的光源、光学透镜、荧光信号接收器的设计和集成方式各不相同。即使是对于PCR仪的同一通道，光源、光学透镜及荧光信号接收器随使用时间的延长也会出现细微的变化，或者在两次荧光采集的间隔内，PCR仪的同一通道的运行环境或状态也会发生微弱变化（例如光源供电电压或电流变化，接收器中的信号处理单元的供电环境，甚至通道周围的电磁干扰等）。PCR仪的各个通道之间的区别以及同一通道中的变化往往会带来测量误差。由于荧光检测法的灵敏度极高，极小的测量误差可能会导致完全相反的结论。因此，制备荧光标准物质并应用荧光标准物质对带有荧光检测模块的PCR仪的各个通道进行校准就变得极为必要。
发明内容
本公开的目的是提供一种用于PCR仪的荧光校准件及其制造方法，以至少部分地解决上述问题。
在本公开的第一方面，提供了一种制造用于PCR仪的荧光校准件的方法，所述方法包括：根据所述PCR仪的待校准的荧光通道的光学特性选择相应的稀土元素荧光粉，所述光学特性包括与所述待校准的荧光通道对应的激发光和发射光的光谱；将具有可逆热凝胶特性的第一物质加热至预设温度，使所述第一物质转化为液态；将所述稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的所述第一物质中，形成第一混合物；多次定量提取所述第一混合物；以及对各次提取的所述第一混合物进行低温处理，以使各次提取的所述第一混合物分别转化为固态，从而形成针对所述待校准的荧光通道的多个荧光校准件。在这样的实施例中，由于稀土元素荧光粉的稳定性强，在长时间内的衰减率极低，因此利用稀土元素荧光粉和第一物质制成的荧光校准件也具有极高的稳定性，能够实现准确的校准，并且使用寿命长。
在一些实施例中，所述第一物质与所述稀土元素荧光粉的体积比在200:1至400:1的范围内。
在一些实施例中，将所述稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的所述第一物质中包括：将所述稀土元素荧光粉与吸光物质混合形成第二混合物；以及将所述第二混合物均匀混合至转化为液态的所述第一物质中，形成所述第一混合物。
在一些实施例中，所述方法还包括：在将所述稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的所述第一物质中之前或之后，将吸光物质均匀混合至转化为液态的所述第一物质中。
在一些实施例中，所述吸光物质包括石墨粉。
在一些实施例中，将所述稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的所述第一物质中包括：将不溶解所述稀土元素荧光粉的第二物质与所述稀土元素荧光粉混合，使得所述第二物质包裹住所述稀土元素荧光粉形成包裹物；以及将所述包裹物均匀混合至转化为液态的所述第一物质中，形成所述第一混合物。
在一些实施例中，将所述稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的所述第一物质中包括：以30r/s~50r/s的转速对混合后的所述稀土元素荧光粉和所述第一物质进行匀速搅拌，从而形成所述第一混合物。
在本公开的第二方面，提供了一种制造用于PCR仪的荧光校准件的方法，所述方法包括：根据所述PCR仪的待校准的荧光通道的光学特性选择相应的稀土元素荧光粉，所述光学特性包括与所述待校准的荧光通道对应的激发光和发射光的光谱；将所述稀土元素荧光粉均匀混合至两液混合硬化胶中的第一胶水中，形成第三混合物；将所述第三混合物与所述两液混合硬化胶中的第二胶水均匀混合，形成第四混合物；以及多次定量提取所述第四混合物，并分别置入模具中凝固成型，从而形成针对所述待校准的荧光通道的多个荧光校准件。在这样的实施例中，由于稀土元素荧光粉的稳定性强，在长时间内的衰减率极低，因此利用稀土元素荧光粉和两液混合硬化胶制成的荧光校准件也具有极高的稳定性，能够实现准确的校准，并且使用寿命长。
在一些实施例中，所述第一胶水的粘稠度低于所述第二胶水的粘稠度。
在一些实施例中，所述两液混合硬化胶与所述稀土元素荧光粉的体积比在200:1至400:1的范围内。
在一些实施例中，将所述稀土元素荧光粉均匀混合至两液混合硬化胶中的第一胶水中包括：将所述稀土元素荧光粉与吸光物质混合形成第二混合物；以及将所述第二混合物均匀混合至所述第一胶水中，形成所述第三混合物。
在一些实施例中，所述方法还包括：在将所述稀土元素荧光粉均匀混合至所述第一胶水中之前或之后，将吸光物质均匀混合至所述第一胶水中。
在一些实施例中，所述方法还包括：在将所述第三混合物与所述第二胶水均匀混合之前，将吸光物质均匀混合至所述第二胶水中。
在一些实施例中，所述吸光物质包括石墨粉。
在一些实施例中，将所述稀土元素荧光粉均匀混合至两液混合硬化胶中的第一胶水中包括：将不溶解所述稀土元素荧光粉的第二物质与所述稀土元素荧光粉混合，使得所述第二物质包裹住所述稀土元素荧光粉形成包裹物；以及将所述包裹物均匀混合至所述第一胶水中，形成所述第三混合物。
在一些实施例中，将所述稀土元素荧光粉均匀混合至两液混合硬化胶中的第一胶水中包括：以30r/s~50r/s的转速对混合后的所述稀土元素荧光粉和所述第一胶水进行匀速搅拌，从而形成所述第三混合物。
在本公开的第三方面，提供了一种用于PCR仪的荧光校准件，所述荧光校准件包括：胶体；以及均匀混合在所述胶体中的稀土元素荧光粉。根据本公开的实施例的荧光校准件能够实现准确的校准，并且使用寿命长。
在一些实施例中，所述胶体与所述稀土元素荧光粉的体积比在200:1至400:1的范围内。
在一些实施例中，所述荧光校准件还包括均匀混合在所述胶体中的吸光物质。
在一些实施例中，所述吸光物质包括石墨粉。
应当理解，该部分中所描述的内容并非旨在限定本公开的实施例的关键特征或重要特征，也不用于限制本公开的范围。本公开的其它特征将通过以下的描述而变得容易理解。
附图说明
结合附图并参考以下详细说明，本公开各实施例的上述和其他特征、优点及方面将变得更加明显。在附图中，相同或相似的附图标记表示相同或相似的元素，其中：
图1示出了根据本公开的一个实施例的制造用于PCR仪的荧光校准件的方法的流程图；
图2示出了Ce:Lu-YAG的激发光和发射光的光谱图；
图3示出了Y3Al5O12:Ce3+的激发光和发射光的光谱图；
图4示出了根据本公开的另一实施例的制造用于PCR仪的荧光校准件的方法的流程图。
具体实施方式
下面将参照附图更详细地描述本公开的优选实施例。虽然附图中显示了本公开的优选实施例，然而应该理解，可以以各种形式实现本公开而不应被这里阐述的实施例所限制。相反，提供这些实施例是为了使本公开更加透彻和完整，并且能够将本公开的范围完整地传达给本领域的技术人员。
在本文中使用的术语“包括”及其变形表示开放性包括，即“包括但不限于”。除非特别申明，术语“或”表示“和/或”。术语“基于”表示“至少部分地基于”。术语“一个示例实施例”和“一个实施例”表示“至少一个示例实施例”。术语“另一实施例”表示“至少一个另外的实施例”。术语“第一”、“第二”等等可以指代不同的或相同的对象。
如在上文中所描述的，对于PCR仪而言，由于荧光检测法的灵敏度极高，极小的测量误差可能会导致完全相反的结论，因此制备荧光标准物质并应用荧光标准物质对带有荧光检测模块的PCR仪的各个通道进行校准就变得极为必要。在对PCR仪的各个通道进行校准的常规解决方案中，通常在PCR仪的反应耗材中加入溶解有荧光染料的液体来制得荧光校准物，并利用这样的校准物对PCR仪进行荧光校准。然而，由于荧光物质不稳定，随着使用时间以及其受光照的时间推移，其荧光性能会衰减。本公开的实施例提供了一种用于PCR仪的荧光校准件及其制造方法，以提升荧光校准的准确性以及校准件的使用寿命。在下文中，将结合图1至图4对本公开的原理进行描述。
图1示出了根据本公开的一个实施例的制造用于PCR仪的荧光校准件的方法100的流程图。
如图1所示，在步骤110，根据PCR仪的待校准的荧光通道的光学特性选择相应的稀土元素荧光粉，该光学特性包括与待校准的荧光通道对应的激发光和发射光的光谱。PCR仪通常包括多个检测通道（也称为荧光通道），以用于检测不同的样本。以包括FAM（5/6-羧基荧光素）通道、VIC（绿色荧光蛋白）通道、ROX（羧基-X-罗丹明）通道和Cy5（花菁染料）通道的四通道的PCR仪为例，各个检测通道的波长分布如下表1所示。
表1 四通道的PCR仪的荧光通道的波长分布
Figure 217083DEST_PATH_IMAGE001
如果需要对FAM通道进行校准，则可以根据其激发光和发射光的光谱特性选择相应的稀土元素荧光粉。如表1所示，FAM通道的激发光波长为470nm，发射光波长为520nm。据此，可以选择与这样的激发光和发射光的波长相近的稀土元素荧光粉。通过实验发现，稀土元素荧光粉Ce:Lu-YAG的激发光波长为455nm，如图2中的曲线210的第二个波峰所示；发射光波长约为537nm，如图2中的曲线220的波峰所示。因此，稀土元素荧光粉Ce:Lu-YAG的激发光和发射光的波长与FAM通道的激发光和发射光的波长相近。因此，可以选择Ce:Lu-YAG作为针对FAM通道进行荧光校准的稀土元素荧光粉。
在其他实施例中，可以采用其他稀土元素荧光粉或者多种稀土元素荧光粉的组合作为对FAM通道进行校准的基体，本公开的实施例对此不做严格限制。
类似地，如果需要对VIC通道进行校准，也可以根据其激发光和发射光的光谱特性选择相应的稀土元素荧光粉。如表1所示，VIC通道的激发光波长为530nm，发射光波长为565nm。据此，可以选择与这样的激发光和发射光的波长相近的稀土元素荧光粉。通过实验发现，稀土元素荧光粉Y3Al5O12:Ce3+的激发光波长为455nm，如图3中的曲线310的第二个波峰所示；发射光波长约为550nm，如图3中的曲线320的波峰所示。因此，稀土元素荧光粉Y3Al5O12:Ce3+的激发光和发射光的波长与VIC通道的激发光和发射光的波长相近。因此，可以选择Y3Al5O12:Ce3+作为针对VIC通道进行荧光校准的稀土元素荧光粉。
在其他实施例中，可以采用其他稀土元素荧光粉或者多种稀土元素荧光粉的组合作为对VIC通道进行校准的基体，本公开的实施例对此不做严格限制。
类似地，针对ROX通道和Cy5通道，可以根据其激发光和发射光的光谱特性选择相应的稀土元素荧光粉，所选择的稀土元素荧光粉可以是一种或多种稀土元素荧光粉的组合。
在一些实施例中，稀土元素荧光粉可以选自Y3Al5O12:Ce3+、(Sr,Ba)2SiO4:Eu2+、Ce:Lu-YAG、(Sr,Ca)AlSiN3:Eu中的一种或多种的组合。由于稀土元素荧光粉的稳定性强，在长时间内的衰减率极低，因此稀土元素荧光粉适用于制作校准件。
应当理解，对于包括更多或更少通道的PCR仪中的每个通道，可以采用类似的方式来选择稀土元素荧光粉，在此将不再赘述。
继续参考图1，在步骤120，将具有可逆热凝胶特性的第一物质加热至预设温度，使第一物质转化为液态。在该预设温度下，第一物质的物理状态将会由固态转化为液态，并且其物理通光性不会发生变化。而当第一物质的温度在预设温度以下时，第一物质能够再次从液态转变为固态。
在一些实施例中，第一物质可以包括明胶、卡拉胶和结冷胶中的至少一项。在另一些实施例中，第一物质可以包括单组分或多组分的透光环氧树脂。应当理解，凡是具有在高温时为液态、低温时为固态的透光性物质都可以用作第一物质，本公开的实施例对此不做限制。
在步骤130，将在步骤110中所选择的稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的第一物质中，形成第一混合物。在混合过程中，可以对混合物进行匀速搅拌。在一些实施例中，可以以30r/s（转每秒）~50r/s的转速对混合后的稀土元素荧光粉和第一物质进行匀速搅拌，从而形成第一混合物。对于稀土元素荧光粉，利用这样的转速能够使稀土元素荧光粉均匀地分布在第一物质中。当然，更大或更小的转速也是可行的，本公开的实施例对此不做严格限制。
在步骤140，多次定量提取第一混合物。各次提取的第一混合物可以分别放置到不同的模具中。应注意的是，不同的模具可以指的是形状以及容量完全一致的多个模具。当然，不同的模具也可以指的是根据制作需求选择的不同形状、不同容量的模具。当选择不同形状、不同容量的模具时，可以推知最终制得的多个荧光校准件只是在形状上不同，浓度以及体积上仍然保持一致。
在步骤150，对各次提取的第一混合物进行低温处理，以使各次提取的第一混合物分别转化为固态，从而形成针对待校准的荧光通道的多个荧光校准件。利用这种方式获得的多个荧光校准件中的稀土元素荧光粉的浓度固定且一致。
由于稀土元素荧光粉的稳定性强，在长时间内的衰减率极低，因此利用稀土元素荧光粉和第一物质制成的荧光校准件也具有极高的稳定性，能够实现准确的校准，并且使用寿命长。
在根据本公开的实施例中，取决于在步骤140中所使用的模具的形状，在步骤150中得到的荧光校准件可以为各种形状，诸如板状、柱状等，本公开的实施例对此不做限制。
通过实验发现，稀土元素荧光粉的量不适合太高。较低的稀土元素荧光粉含量一方面可以使最终制得的荧光校准件中稀土元素荧光粉能够更加均匀地散布在胶体中，均匀散布相较于不均匀散布的有益效果在于可以使最终制得的多个荧光校准件的浓度保持一致。另一方面，因为稀土元素荧光粉本身具有强荧光特性，即便是很少量的稀土元素荧光粉也会造成最终制得的荧光校准件在使用时被检测到的荧光值过强，过强的荧光值会使PCR仪的待检测通道的荧光检测器饱和，无法达到校准的目的。因此，在一些实施例中，第一物质与稀土元素荧光粉的体积比在200:1至400:1的范围内，例如为200:1、300:1或400:1等。
在一些实施例中，在步骤130中，可以首先将稀土元素荧光粉与吸光物质混合形成第二混合物，然后再将第二混合物均匀混合至转化为液态的第一物质中，从而形成第一混合物。通过加入吸光物质，可以进一步防止荧光校准件在使用时被检测到的荧光值过强，避免荧光检测器饱和，确保实现对PCR仪的各个通道的准确校准。
在其他实施例中，可以在将稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的第一物质中之前或之后，将吸光物质均匀混合至转化为液态的第一物质中。例如，可以在步骤130之前先将吸光物质均匀混合至转化为液态的第一物质中，然后再在步骤130中将稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的第一物质中。也可以在步骤130中将稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的第一物质中之后，再将吸光物质均匀混合至转化为液态的第一物质中。利用这样的方式，同样可以进一步防止荧光校准件在使用时被检测到的荧光值过强，避免荧光检测器饱和，确保实现对PCR仪的各个通道的准确校准。
在一些实施例中，吸光物质包括石墨粉。在其他实施例中，吸光物质可以为其他类型，本公开的实施例对此不做严格限制。
在一些实施例中，在步骤130中，首先将不溶解稀土元素荧光粉的第二物质与稀土元素荧光粉混合，使得第二物质包裹住稀土元素荧光粉形成包裹物；然后再将包裹物均匀混合至转化为液态的第一物质中，形成第一混合物。第二物质可以为不与稀土元素荧光粉发生化学反应的有机物或无机物，例如聚丙烯酰胺。通过使第二物质包裹住稀土元素荧光粉形成包裹物，随后将包裹物混合至具有可逆热凝胶特性的第一物质中，可以使得包裹物均匀分布在第一物质中。第二物质可以均匀地与荧光粉单颗粒或基团结合，且可以均匀地散布于第一物质中。以此方式，可以间接地将稀土元素荧光粉散布于第一物质中，使稀土元素荧光粉在混合物中的浓度可控。
根据本公开的实施例还提供了另一种制造用于PCR仪的荧光校准件的方法400，如图4所示。在这样的实施例中，将具有可逆热凝胶特性的第一物质替换成了两液混合硬化胶（也称为AB胶）。下面将结合图4来描述方法400的示例性流程。
在步骤410，根据PCR仪的待校准的荧光通道的光学特性选择相应的稀土元素荧光粉，光学特性包括与待校准的荧光通道对应的激发光和发射光的光谱。在步骤410中，可以采用与步骤110类似的方式来特性选择稀土元素荧光粉，在上文中针对步骤110描述的内容可以结合于此，在此将不再赘述。
在步骤420，将稀土元素荧光粉均匀混合至两液混合硬化胶中的第一胶水中，形成第三混合物。在混合过程中，可以对混合物进行匀速搅拌。在一些实施例中，可以以30r/s~50r/s的转速对混合后的稀土元素荧光粉和第一胶水进行匀速搅拌，从而形成第三混合物。对于稀土元素荧光粉，利用这样的转速能够使稀土元素荧光粉均匀地分布在第一胶水中。当然，更大或更小的转速也是可行的，本公开的实施例对此不做严格限制。
在步骤430，将第三混合物与两液混合硬化胶中的第二胶水均匀混合，形成第四混合物。第二胶水在遇到第一胶水时，能够缓慢地凝固成固体。
在步骤440，多次定量提取第四混合物，并分别置入模具中凝固成型，从而形成针对待校准的荧光通道的多个荧光校准件。
由于稀土元素荧光粉的稳定性强，在长时间内的衰减率极低，因此利用稀土元素荧光粉和两液混合硬化胶制成的荧光校准件也具有极高的稳定性，能够实现准确的校准，并且使用寿命长。
在一些实施例中，第一胶水的粘稠度低于第二胶水的粘稠度。在这样的实施例中，相比于第二胶水，稀土元素荧光粉能够更容易地均匀散布到粘稠度较低的第一胶水中。应当理解，第一胶水的粘稠度等于或高于第二胶水的粘稠度也是可行的，本公开的实施例对此不做严格限制。
如在上文中所述，稀土元素荧光粉的量不适合太高。较低的稀土元素荧光粉含量一方面可以使最终制得的荧光校准件中稀土元素荧光粉能够更加均匀地散布在胶体中，均匀散布相较于不均匀散布的有益效果在于可以使最终制得的多个荧光校准件的浓度保持一致。另一方面，因为稀土元素荧光粉本身具有强荧光特性，即便是很少量的稀土元素荧光粉也会造成最终制得的荧光校准件在使用时被检测到的荧光值过强，过强的荧光值会使PCR仪的待检测通道的荧光检测器饱和，无法达到校准的目的。因此，在一些实施例中，两液混合硬化胶与稀土元素荧光粉的体积比在200:1至400:1的范围内，例如为200:1、300:1或400:1等。
在一些实施例中，在步骤420中，可以首先将稀土元素荧光粉与吸光物质混合形成第二混合物，然后再将第二混合物均匀混合至第一胶水中，形成第三混合物。通过加入吸光物质，可以进一步防止荧光校准件在使用时被检测到的荧光值过强，避免荧光检测器饱和，确保实现对PCR仪的各个通道的准确校准。
在另一些实施例中，可以在将稀土元素荧光粉均匀混合至第一胶水中之前或之后，将吸光物质均匀混合至第一胶水中。例如，可以在步骤420中将稀土元素荧光粉均匀混合至第一胶水中之前，将吸光物质均匀混合至第一胶水中。也可以在步骤420中将稀土元素荧光粉均匀混合至第一胶水中之后，再将吸光物质均匀混合至第一胶水中。
在另一些实施例中，还可以在将第三混合物与第二胶水均匀混合之前，将吸光物质均匀混合至第二胶水中。
在一些实施例中，吸光物质包括石墨粉。在其他实施例中，吸光物质可以为其他类型，本公开的实施例对此不做严格限制。
在一些实施例中，在步骤420中，首先将不溶解稀土元素荧光粉的第二物质与稀土元素荧光粉混合，使得第二物质包裹住稀土元素荧光粉形成包裹物；然后再将包裹物均匀混合至第一胶水中，形成第三混合物。第二物质可以为不与稀土元素荧光粉发生化学反应的有机物或无机物。通过使第二物质包裹住稀土元素荧光粉形成包裹物，随后将包裹物混合至第一胶水中，可以使得包裹物均匀分布在第一胶水中。第二物质可以均匀地与荧光粉单颗粒或基团结合，且可以均匀地散布于第一胶水中。以此方式，可以间接地将稀土元素荧光粉散布于第一胶水中，使稀土元素荧光粉在混合物中的浓度可控。
根据本公开的实施例还提供了一种用于PCR仪的荧光校准件，该荧光校准件可以采用在上文中所描述的方法100或400制造。该荧光校准件包括：胶体；以及均匀混合在胶体中的稀土元素荧光粉。根据本公开的实施例的荧光校准件能够实现准确的校准，并且使用寿命长。
在一些实施例中，胶体与稀土元素荧光粉的体积比在200:1至400:1的范围内。
在一些实施例中，荧光校准件还包括均匀混合在胶体中的吸光物质。
在一些实施例中，吸光物质包括石墨粉。
以上已经描述了本公开的各实施例，上述说明是示例性的，并非穷尽性的，并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下，对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。本文中所用术语的选择，旨在最好地解释各实施例的原理、实际应用或对市场中的技术改进，或者使本技术领域的其他普通技术人员能理解本文披露的各实施例。

Claims (20)

1.一种制造用于PCR仪的荧光校准件的方法，其特征在于，所述方法包括：
根据所述PCR仪的待校准的荧光通道的光学特性选择相应的稀土元素荧光粉，所述光学特性包括与所述待校准的荧光通道对应的激发光和发射光的光谱；
将具有可逆热凝胶特性的第一物质加热至预设温度，使所述第一物质转化为液态；
将所述稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的所述第一物质中，形成第一混合物；
多次定量提取所述第一混合物；以及
对各次提取的所述第一混合物进行低温处理，以使各次提取的所述第一混合物分别转化为固态，从而形成针对所述待校准的荧光通道的多个荧光校准件。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一物质与所述稀土元素荧光粉的体积比在200:1至400:1的范围内。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将所述稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的所述第一物质中包括：
将所述稀土元素荧光粉与吸光物质混合形成第二混合物；以及
将所述第二混合物均匀混合至转化为液态的所述第一物质中，形成所述第一混合物。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：
在将所述稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的所述第一物质中之前或之后，将吸光物质均匀混合至转化为液态的所述第一物质中。
5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于，所述吸光物质包括石墨粉。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将所述稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的所述第一物质中包括：
将不溶解所述稀土元素荧光粉的第二物质与所述稀土元素荧光粉混合，使得所述第二物质包裹住所述稀土元素荧光粉形成包裹物；以及
将所述包裹物均匀混合至转化为液态的所述第一物质中，形成所述第一混合物。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将所述稀土元素荧光粉均匀混合至转化为液态的所述第一物质中包括：
以30r/s~50r/s的转速对混合后的所述稀土元素荧光粉和所述第一物质进行匀速搅拌，从而形成所述第一混合物。
8.一种制造用于PCR仪的荧光校准件的方法，其特征在于，所述方法包括：
根据所述PCR仪的待校准的荧光通道的光学特性选择相应的稀土元素荧光粉，所述光学特性包括与所述待校准的荧光通道对应的激发光和发射光的光谱；
将所述稀土元素荧光粉均匀混合至两液混合硬化胶中的第一胶水中，形成第三混合物；
将所述第三混合物与所述两液混合硬化胶中的第二胶水均匀混合，形成第四混合物；以及
多次定量提取所述第四混合物，并分别置入模具中凝固成型，从而形成针对所述待校准的荧光通道的多个荧光校准件。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述第一胶水的粘稠度低于所述第二胶水的粘稠度。
10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述两液混合硬化胶与所述稀土元素荧光粉的体积比在200:1至400:1的范围内。
11.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，将所述稀土元素荧光粉均匀混合至两液混合硬化胶中的第一胶水中包括：
将所述稀土元素荧光粉与吸光物质混合形成第二混合物；以及
将所述第二混合物均匀混合至所述第一胶水中，形成所述第三混合物。
12.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：
在将所述稀土元素荧光粉均匀混合至所述第一胶水中之前或之后，将吸光物质均匀混合至所述第一胶水中。
13.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：
在将所述第三混合物与所述第二胶水均匀混合之前，将吸光物质均匀混合至所述第二胶水中。
14.根据权利要求11至13中任一项所述的方法，其特征在于，所述吸光物质包括石墨粉。
15.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，将所述稀土元素荧光粉均匀混合至两液混合硬化胶中的第一胶水中包括：
将不溶解所述稀土元素荧光粉的第二物质与所述稀土元素荧光粉混合，使得所述第二物质包裹住所述稀土元素荧光粉形成包裹物；以及
将所述包裹物均匀混合至所述第一胶水中，形成所述第三混合物。
16.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，将所述稀土元素荧光粉均匀混合至两液混合硬化胶中的第一胶水中包括：
以30r/s~50r/s的转速对混合后的所述稀土元素荧光粉和所述第一胶水进行匀速搅拌，从而形成所述第三混合物。
17.一种用于PCR仪的荧光校准件，其特征在于，所述荧光校准件包括：
胶体；以及
均匀混合在所述胶体中的稀土元素荧光粉。
18.根据权利要求17所述的荧光校准件，其特征在于，所述胶体与所述稀土元素荧光粉的体积比在200:1至400:1的范围内。
19.根据权利要求17所述的荧光校准件，其特征在于，所述荧光校准件还包括均匀混合在所述胶体中的吸光物质。
20.根据权利要求19所述的荧光校准件，其特征在于，所述吸光物质包括石墨粉。
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