CN114886838A - 一种木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法 - Google Patents

一种木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN114886838A
CN114886838A CN202210333405.1A CN202210333405A CN114886838A CN 114886838 A CN114886838 A CN 114886838A CN 202210333405 A CN202210333405 A CN 202210333405A CN 114886838 A CN114886838 A CN 114886838A
Authority
CN
China
Prior art keywords
total flavone
cotton rose
microneedle
needle
micro
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202210333405.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114886838B (zh
Inventor
陈晓兰
万静
邓铋莉
董娜娜
谢树才
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guizhou University of Traditional Chinese Medicine
Original Assignee
Guizhou University of Traditional Chinese Medicine
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guizhou University of Traditional Chinese Medicine filed Critical Guizhou University of Traditional Chinese Medicine
Priority to CN202210333405.1A priority Critical patent/CN114886838B/zh
Publication of CN114886838A publication Critical patent/CN114886838A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114886838B publication Critical patent/CN114886838B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A61K9/0021—Intradermal administration, e.g. through microneedle arrays, needleless injectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/32—Macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. carbomers, poly(meth)acrylates, or polyvinyl pyrrolidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/55—Liquid-liquid separation; Phase separation
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明公开了一种木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，对其进行评价及体外透皮性能研究，本方法采用模具法制备木芙蓉总黄酮可溶性微针，对制备好的微针进行形态、机械性能、溶解性、载药量评价，采用Franz扩散池考察总黄酮不同剂型体外透皮性能，确定了木芙蓉总黄酮可溶性微针的最佳处方为S970.56g，PVA0.36g，50％乙醇4mL，微针溶解时间为302.83±5.23s，刺孔率为99.50±0.52％，微针表面平整，针体呈圆锥形，长度约为600μm，每片面积为2.79cm2，其总黄酮载药量6.4509±0.1066mg，制备的木芙蓉总黄酮微针机械强度好，针尖能快速溶解，实现了木芙蓉总黄酮的透皮递送，木芙蓉总黄酮微针在提高药物渗透率方面具有显著优越性。

Description

一种木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法
技术领域
本发明涉及中药微针的制备方法，具体涉及木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法及总黄酮体外经皮渗透性的研究。
背景技术
木芙蓉为锦葵科植物木芙蓉HibiscusmutabilisL.。又名芙蓉花、拒霜花、木莲、地芙蓉、华木，原产中国。其喜温暖、湿润环境，不耐寒，忌干旱，耐水湿。对土壤要求不高，瘠薄土地亦可生长。性辛，平；归肺、肝经。具有凉血，解毒，消肿，止痛的功效。治疗痈疽域肿，缠身蛇丹，烫伤，目赤肿痛，跌打损伤。故木芙蓉常作为外用中药使用，而木芙蓉花中含黄酮甙和花色甙(Anthocyanin)。其中黄酮甙有异槲皮甙(Isoquercitrin)、金丝桃甙(Hyperin，Hyperoside)、芸香甙(Rutin)、槲皮素-4-葡萄糖甙(Quercitin-4-glucoside，即绣线菊甙Spiraeoside)和槲皮黄甙(Quercimeritrin)。黄酮具有调节身体机能，增强机体对疾病的抵抗力，清除心血管中垃圾和的自由基能力，黄酮在去除细菌，寄生虫，修复呼吸道组织和皮肤受损组织,诱导肿瘤细胞凋亡也具有显著疗效，高含量黄酮类化合物能修护机体组织，促进新陈代谢，保持年轻给身体提供14种微量元素和17种氨基酸，平衡体内营养，同时黄酮能强效清除因加班熬夜已经剧烈运动产生的自由基，从而消除身体疲劳。
微针，又称小针，针具名。意指细小的针具，泛指九针，与砭石相对而言。在中医传统中也有具体的记载，《灵枢·九针十二原》：“余欲勿使被毒药，无用砭石，欲以微针通其经脉，调其血气……”《黄帝内经太素》卷二十一杨上善注：“可九种微针，通经调气。”《类经》卷十九张介宾注：“小针，即上文微针之谓。”九针之中则以毫针为最细小。现在微针疗法又称微针疗法美容，主要原理是利用天然方法刺激骨胶原增生，而不破坏皮肤表皮层，从而唤醒及提升肌肤的再生功能。微针疗法有助淡化皱纹及色斑，改善皮肤质感，调匀肤色及色斑，改善皮肤质感，调匀肤色及增加皮肤弹性。微针疗法刺激真皮层的伤口自愈能力，从而刺激皮肤，促进骨胶原增生，使表皮层的厚度得到显著增生。
木芙蓉叶为锦葵科植物木芙蓉HibiscusmutabilisL.的干燥叶。木芙蓉又名芙蓉花、拒霜花、木莲、地芙蓉、华木，原产中国。其喜温暖、湿润环境，不耐寒，忌干旱，耐水湿。对土壤要求不高，瘠薄土地亦可生长。性辛，平；归肺、肝经。具有凉血，解毒，消肿，止痛的功效。在临床上，木芙蓉叶常作为外用中药使用，治疗痈疽域肿，缠身蛇丹，烫伤，目赤肿痛，跌打损伤。木芙蓉叶中主要活性成分为总黄酮类成分，研究表明木芙蓉叶总黄酮具有良好的抗炎、镇痛作用。
微针(Microneedles,MN)是一种新型的经皮给药制剂，它是长度为几十微米至几毫米的包含多个微型针头的阵列结构。微针制剂与传统经皮给药制剂一样，具有减轻胃肠道刺激、避免肝脏首过效应及药物“峰谷”现象的优势。但传统经皮制剂在药物透皮过程中，由于皮肤的天然保护屏障，大多数药物的透皮速率不理想，而微针制剂在使用时，通过刺破皮肤角质层，形成实质上的释药通道，使得药物透皮速率大大增加，药物可以在短时间内被大量吸收。由于微针制剂能极大提高药物的经皮吸收效率，微针已成为目前中药经皮释药系统研究的焦点。可溶性微针是由能够生物溶解或降解的高分子材料为基质制备而成，可溶性微针刺入皮肤后，能够打破经皮给药皮肤角质层的屏障作用，从而极大提高药物的渗透速率，提高药物生物利用度，而且其基质能被体液溶解，具有良好的生物相容性。
本发明采用模具法制备木芙蓉总黄酮可溶性微针，并以其成型性、溶解性和穿刺性能作为考察指标，单因素考察制备可溶性微针的溶剂、基质、离心时间及干燥方法等，并用Box-Behnken响应面法对基质处方量进行优化；对制备好的微针进行评价，包括形态、机械性能、溶解性、载药量；最后采用Franz扩散池考察总黄酮不同剂型体外透皮性能。实验确定了木芙蓉总黄酮可溶性微针的最佳处方为S970.56g，PVA0.36g，50％乙醇4mL，微针溶解时间为(302.83±5.23)s，刺孔率为(99.50±0.52)％，微针表面平整，针体呈圆锥形，长度约为600μm，每片面积为2.79cm2，其总黄酮载药量6.4509±0.1066mg。离体皮肤渗透结果显示，总黄酮微针制剂的药物累积渗透率最高。本发明制备的木芙蓉总黄酮微针机械强度好，针尖能快速溶解，实现了木芙蓉总黄酮的透皮递送，木芙蓉总黄酮微针在提高药物渗透率方面具有显著优越性。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供一种木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，对其进行评价及体外透皮性能研究。为实现上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的。
一种木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，所述木芙蓉总黄酮可溶性微针采用模具法制备一体微针。
前述木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法按照以下步骤进行：
(1)用聚酰胺和大孔树脂联用技术对木芙蓉叶总黄酮进行纯化，得到木芙蓉总黄酮纯化物，取木芙蓉总黄酮纯化物溶于40-60％乙醇中，得到A品；
(2)称取适量基质材料GantrezS-97与PVA溶于A品中，充分混匀溶胀后，浇铸于微针模具内，得到B品；
(3)将B品离心10-30min，放入干燥器中室温干燥8-16h，脱模，即得木芙蓉总黄酮可溶性微针。
更具体的，前述木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，步骤(1)中，用聚酰胺和大孔树脂联用技术对木芙蓉叶总黄酮进行纯化，得到木芙蓉总黄酮纯化物，取木芙蓉总黄酮纯化物溶于50％乙醇中，得到A品。
更具体的，前述木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，步骤(2)中，Gantrez S-97、PVA和A品的比列为0.56g:0.36g:4mL。
更具体的，前述木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，步骤(2)中，Gantrez S-97、PVA和A品的溶解时间为302.83±5.23s。
更具体的，前述木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，步骤(3)中，将B品离心20min。
更具体的，前述木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，步骤(3)中，室温干燥12h。
本发明有益效果是：
木芙蓉总黄酮微针机械强度好，针尖能快速溶解，实现了木芙蓉总黄酮的透皮递送，木芙蓉总黄酮微针在提高药物渗透率方面具有显著优越性。
附图说明
图1不同干燥条件下微针外形；
图2自变量因素与针尖溶解时间、刺孔率的变化关系图；
图3自变量因素与针尖溶解时间、刺孔率的变化关系图；
图4木芙蓉总黄酮可溶性微针形貌图；
图5微针的穿刺效果图；
图6体视显微镜3.2倍下观察微针给药后针尖溶解情况；
图7不同剂型药物释放曲线。
为了使本领域技术人员更好地理解本发明的技术方案能予以实施，下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但所举实施例不作为对本发明的限定。
具体实施方式
实施例1：
(1)用聚酰胺和大孔树脂联用技术对木芙蓉叶总黄酮进行纯化，得到木芙蓉总黄酮纯化物，取木芙蓉总黄酮纯化物溶于50％乙醇中，得到A品；
(2)称取适量基质材料GantrezS-97与PVA溶于A品中，GantrezS-97、PVA和A品的比列为0.56g:0.36g:4mL，充分混匀溶胀302.83±5.23s后，浇铸于微针模具内，得到B品；
(3)将B品离心20min，放入干燥器中室温干燥12h，脱模，即得木芙蓉总黄酮可溶性微针。
使用方法：将木芙蓉总黄酮微针贴敷于炎症患处，每次贴敷一片，一天一次。
发明人进行了大量的实验，以下是本发明所述制备方法的研究：
1仪器与材料
1.1仪器
PDMS阴模(针长600μm，浙江台州微芯医药科技有限公司)；TDL-5A大容量离心机(上海程捷仪器设备有限公司)；FA1004电子天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司)；UV-9000S型紫外可见分光光度计(北京元析通用仪器有限公司)；AUY220型电子天平(日本岛津)；DKZ-2型电热恒温振荡水槽(上海精宏实验设备有限公司)；RQJ-12B型药物透皮扩散试验仪(上海黄海药检仪器有限公司)；szx7型摄影体视显微镜(日本奥林巴斯有限公司)；数显推拉力计(SH-50N,乐清艾德堡仪器有限公司)。
1.2药品与试剂
木芙蓉叶总黄酮纯化物(实验室自制，木芙蓉总黄酮制备方法：用聚酰胺和大孔树脂联用技术对木芙蓉叶总黄酮进行纯化，得到木芙蓉总黄酮纯化物)；芦丁对照品(批号分别为L00102003024，纯度＞98％，成都瑞芬思生物科技有限公司)；聚乙烯吡咯烷酮(PVPK30)(批号：P110611，阿拉丁试剂)；聚乙烯吡咯烷酮(PVPK90)(批号：S31099，上海源叶生物)；硫酸软骨素(CS)(批号：201903251，西安超邦生物科技有限公司)；聚乙烯醇(PVA)(批号：P875084，上海麦克林公司)；羟丙基甲基纤维素(HPMC)(批号：H108824，阿拉丁试剂)；甲基乙烯基醚-马来酸酐共聚物(GantrezS-97)(批号：828387，上海举微国际贸易有限公司)；羧甲基纤维素钠(CMC-Na)(批号：624R021，北京索莱宝生物科技有限公司)；实验用水为去离子水，其他试剂均为分析纯。
1.3实验动物
KM小鼠，由长沙市天勤生物技术有限公司提供，合格证号SCXK(湘)2020-0026。
2方法与结果
2.1微针的制备
采用模具法制备一体微针，称取适量基质材料GantrezS-97与PVA溶于一定量药物溶液中，充分混匀溶胀后，浇铸于微针模具，4000r·min-1离心20min，放入干燥器中干燥12h，脱模，即得木芙蓉总黄酮微针。
2.2单因素考察木芙蓉总黄酮可溶性微针制备工艺
采用单因素试验，以微针成型性、针尖溶解时间、铝箔刺孔率为评价指标,分别对溶剂种类、基质的种类、离心时间、基质消泡方式、微针干燥条件等进行筛选，确定微针的制备工艺参数。
2.2.1溶剂的筛选
木芙蓉总黄酮水溶性较差，而少部分高分子材料能溶于乙醇水溶液中，兼顾药物及基质的溶解性能，我们选择将水与一定比例乙醇混溶，作为微针制备的溶剂。我们考察了不同体积分数的乙醇水溶液对药物及基质的溶解溶胀情况，结果发现随着乙醇质量分数的降低，药物容易从基质溶液中析出，随着乙醇质量分数的增高，基质材料则难以溶解溶胀，综合考虑微针的载药量以及基质溶解溶胀情况，选择体积分数50％乙醇-水溶液作为微针制备溶剂。
2.2.2基质的种类筛选
采用CS、PVPK30、PVA等能够在50％乙醇水溶液中溶解溶胀的材料为基质，按“2.1”项下制备微针，以微针成型性、微针针尖溶解时间、铝箔穿刺刺孔率为指标，筛选最佳基质材料种类。结果见表1。结果显示，5组处方微针成型性均较好，综合刺孔率及溶解性能，选择处方3，PVA与S-97混合作为制备木芙蓉总黄酮微针的基质材料。
表1复合材料可溶性微针制备处方及所得微针性能评价(n＝3)
Figure BDA0003573750130000061
注：成型性以差、中等、良好、好评价。
2.2.3基质消泡方式筛选
基质材料大多为大分子聚合物，将其配制成基质溶液时往往黏度较大，溶液中的气泡较多，含气泡较多的基质溶液会影响可溶性微针的外观形态和微观结构，因此，配制好的基质溶液需要先消除气泡再用于制备微针。分别考察静置24h、超声30min、4000r/min，10min离心三种方式对基质溶液中气泡的消除效果，结果离心法耗时短、效果好，能快速且完全地消除基质溶液中的气泡，且不会因除气泡操作而导致溶剂挥发。因此，本实验采用离心法消除基质气泡。
2.2.4微针入模离心时间的筛选
分别考察4000r/min条件下离心10、20、30min，对微针外观形态、针尖饱满度的影响，筛选微针最佳离心时间。结果发现，制备的微针十分相似，无法从直观上辨别出优劣。考虑到为了使基质充分填充于模具针体部位，确定离心时间为20min。
2.2.5干燥条件的筛选
在制备微针贴片的过程中，干燥温度和干燥方式均会影响微针的成形性。本试验对干燥器室温干燥、烘箱37、50℃干燥进行考察，观察微针在不同干燥条件下的成形性，结果见图1(A为干燥器室温干燥24h；B为烘箱37℃12h；C为烘箱50℃6h)。烘箱干燥时，水分蒸发导致微针表面的部分变干而针头部分还未干，微针边缘易卷曲翘起而中间部分凹陷，微针边缘卷曲面积随着温度升高而增大，且制备的微针贴片易碎；干燥器室温干燥的微针外形美观，针体饱满。故干燥条件为在干燥器室温下干燥。
2.3 Box-Behnken实验设计优化制备工艺
由预试验和单因素考察结果可知，在微针的制备中，基质GantrezS-97、PVA及溶剂的用量对微针制备成型影响较大，所以选用基质GantrezS-97、PVA及溶剂的用量作为考察因素，以微针针尖溶解时间、小鼠鼠皮穿刺刺孔率为综合指标来优化微针的制备工艺。利用Design-Expert8.0.6软件进行Box-Behnken设计及效应面优化研究其对微针制备的影响。
2.3.1微针制备工艺的影响因素与水平及实验结果
各影响因素的实验水平分别用代码-1、0、1表示，代码值所代表的物理量见表2；Box-Behnken设计对微针制备工艺的试验结果见表3。
表2 Box-Behnken设计对微针制备工艺的因素水平表
Figure BDA0003573750130000071
表3 Box-Behnken设计对微针制备工艺的试验结果(n＝3)
Figure BDA0003573750130000072
Figure BDA0003573750130000081
2.3.2 Box-Behnken响应面实验数据分析
以基质S97、PVA及溶剂的用量为自变量，以针尖溶解时间、小鼠鼠皮穿刺率为因变量，利用DesignExpert8.0.6软件进行模型方程拟合,得到关于刺孔率、针尖溶解时间的二次多项式的方程，所得二次多项式为方程(1)、(2)。刺孔率＝98.40+3.71A+2.85B+2.49C-4.70AB+3.58AC+10.30BC-31.34A2-24.56B2-20.69C2(1)；针尖溶解时＝299.60+14.12A+109.88B-7.75C-36.25AB+127.00AC+9.50BC+49.33A2-50.17B2-21.93C2(2)。由方程(1)可知，S97的量(A)、PVA的量(B)、溶剂的量(C)对刺孔率为正相关作用，其数值越大刺孔率越大；AB对刺孔率为负相关，AC、BC间的相互作用对刺孔率为正性作用，说明S97、PVA、溶剂的量三者相互影响。A2、B2、C2系数对刺孔率为负相关。由方程(2)可知，溶剂(C)对针尖溶解时间为负相关作用，其数值越大，针尖溶解时间越短，S97(A)、PVA(B)对针尖溶解时间为正相关作用，其数值越大，针尖溶解时间越长。AB相互作用对针尖溶解时间为负性作用，A2、AC与BC对针尖溶解时间为正性作用，说明S97、PVA的量越多，溶解时间越长。B2、C2系数对针尖溶解时间为负相关。
2.3.3 Box-Behnken响应面实验等高图与三维图谱
固定3个自变量中任1个，取中间值，可得到另两个因素分别对针尖溶解时间、刺孔率的等高图、三维图谱，见图2和图3。DesignEtpert8.0.6软件预测的最佳数值为:A:0.56g，B:0.36g，C:4mL。软件预测最佳工艺的溶解时间为299.60s，刺孔率为98.40％。
2.4最优工艺验证试验
采用最佳处方(S970.56g，PVA0.36g，50％乙醇4mL)平行制备3批微针，经验证溶解时间为(302.83±5.23)s，刺孔率为(99.50±0.52)％，该结果与模型预测值较为接近，说明所建立的数学模型可准确预测试验结果。
2.5微针的质量评价
2.5.1微针形态特征
肉眼观察药微针外观形貌，利用观察数码相机拍照，体式显微镜观察针体饱满度、阵列情况。结果如图4(A为数码相机拍照上表面，B为数码相机拍照下表面，C为3.2倍体视显微镜下针体形貌)所示，木芙蓉总黄酮可溶性微针为正方形贴片(长×宽：16.7×16.7mm),黄棕色到棕色，表面光滑，阵列完整，共有400颗针头(20×20)，微针针体呈圆锥形，长度约为600μm，底部直径约为300μm，间距约为400μm。
2.5.2微针穿刺性能
将铝箔平整铺于桌面上，将制备好的微针用大拇指按压30s后移走，铝箔表面留下微针完整阵列，且铝箔被针刺穿；将剃毛后的离体小鼠鼠皮擦干水分，角质层向上平铺在桌面上，微针针尖向下放置于鼠皮表面，使用20N的力对微针进行垂直施重，停留20s后，揭掉微针贴片，立即在原位置滴加1％台盼蓝染液，静置30s后使用棉签将多余染液蹭除，皮肤被刺穿并留下蓝色孔洞。为了进一步说明在体皮肤刺入效果，将小鼠断颈处死后，立即用充电式修剪器将小鼠腹部毛剃干净，用硫化钠涂抹脱毛，然后用生理盐水擦拭干净。脱毛完全后立即剪取背部皮肤，将取下的皮肤平铺于干净的桌面上，角质层朝下，用沾有生理盐水的棉球擦除皮下脂肪层和结缔组织，经生理盐水反复冲洗干净，搽干后，将制备好微针用大拇指按压30s后移走，迅速对皮肤进行石蜡切片，H&E染色，在显微镜下观察其组织学形态。结果如图5(A为微针刺入铝箔上表面；B为DMNs刺入铝箔下表面；C为微针刺入小鼠皮肤上表面(数码相机拍照)；D为微针的皮肤穿刺H&E染色图(皮肤角质层被穿透，穿刺深度为171.18μm))所示。结果发现，微针能穿透小鼠的皮肤，具有良好的机械性能。
2.5.3溶解性能评估
将木芙蓉可溶性微针在离体小鼠皮肤上贴敷给药，每隔5min揭下贴片，经由体式显微镜学观察微针溶解情况，结果见图6(A 5min；B 10min；C 20min；D 30min)。微针作用于皮肤5min时，针尖尖端部分溶解变钝，30min时，微针针尖全部溶解消失，且裱褙开始溶解变软，表明该微针溶解速率良好。
2.5.4微针含药量测定
取一片微针，按料液比1:400加入50％乙醇，40℃超声提取30min后，立即以12000r/min，离心10min，取出上清液紫外测定其含药量，所得每片木芙蓉总黄酮微针总黄酮载药量为6.4509±0.1066mg。
2.6木芙蓉总黄酮水溶液、凝胶、含促渗剂凝胶及微针制剂的体外皮肤渗透实验
小鼠经断颈椎处死后，除去其腹部鼠毛，分离其腹部皮肤，确保皮肤的角质层完好无损，用脱脂棉擦去多余的脂肪组织和结缔组织，生理盐水冲洗干净，备用。将鼠皮随机分为4组，分别为载药微针组、含促渗剂凝胶组、不含促渗剂凝胶组及木芙蓉总黄酮纯化物水溶液组，每组平行3份。微针组处理方法：将备用鼠皮取出，用干净的滤纸轻轻擦拭表面多余水分，角质面向上，平铺于洁净的泡沫板上，用相同的压力(20N)按压微针滞留于皮肤上，用医用胶带将微针粘于皮肤上防止微针脱落；凝胶组处理方法：搽除备用鼠皮多余水分，角质层向上铺于扩散池上方，并于皮肤上涂抹与微针制剂药物含量相同的凝胶；水溶液组处理方法：搽除备用鼠皮多余水分，角质层向上铺于扩散池上方，并于皮肤上涂抹与微针制剂药物含量相同的药物水溶液。将鼠皮直接固定在药物透皮扩散试验仪的扩散池与接收槽之间，皮肤角质层一面朝向扩散池，真皮层面朝向接收槽。本实验以50％乙醇生理盐水为透皮接收介质，在接收槽中加入接收介质6.5mL，排出剩余气泡，使接收液面与皮肤完全接触，并以300r/min磁力搅拌，37℃恒温水浴循环。给药后开始计时，分别于0.5，1，2，4，6，8，10，12，24，48h取出接收液6.5mL，同时将等温等体积的空白接收介质补加进去。测定接收液中总黄酮的量。所得数据用SPSS17.0处理，绘制药物的累积释放曲线，如图7所示，木芙蓉总黄酮不同剂型的体外释药对比，木芙蓉总黄酮药物累积渗透率大小为：微针＞含促渗剂凝胶＞不含促渗剂凝胶＞水溶液，木芙蓉总黄酮微针剂型药物渗透率最好，木芙蓉总黄酮微针在提高药物渗透率方面具有显著优越性。

Claims (7)

1.一种木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，其特征在于：所述木芙蓉总黄酮可溶性微针采用模具法制备一体微针。
2.如权利要求1所述木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，其特征在于：所述木芙蓉总黄酮可溶性微针按照以下步骤进行：
(1)用聚酰胺和大孔树脂联用技术对木芙蓉叶总黄酮进行纯化，得到木芙蓉总黄酮纯化物，取木芙蓉总黄酮纯化物溶于40-60％乙醇中，得到A品；
(2)称取适量基质材料Gantrez S-97与PVA溶于A品中，充分混匀溶胀后，浇铸于微针模具内，得到B品；
(3)将B品离心10-30min，放入干燥器中室温干燥8-16h，脱模，即得木芙蓉总黄酮可溶性微针。
3.如权利要求2所述木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，用聚酰胺和大孔树脂联用技术对木芙蓉叶总黄酮进行纯化，得到木芙蓉总黄酮纯化物，取木芙蓉总黄酮纯化物溶于50％乙醇中，得到A品。
4.如权利要求2所述木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，Gantrez S-97、PVA和A品的比列为0.56g:0.36g:4mL。
5.如权利要求2所述木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，Gantrez S-97、PVA在A品中需要充分溶胀。
6.如权利要求2所述木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中，将B品离心20min。
7.如权利要求2所述木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中，室温干燥12h。
CN202210333405.1A 2022-03-30 2022-03-30 一种木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法 Active CN114886838B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210333405.1A CN114886838B (zh) 2022-03-30 2022-03-30 一种木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210333405.1A CN114886838B (zh) 2022-03-30 2022-03-30 一种木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114886838A true CN114886838A (zh) 2022-08-12
CN114886838B CN114886838B (zh) 2023-09-05

Family

ID=82714790

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210333405.1A Active CN114886838B (zh) 2022-03-30 2022-03-30 一种木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114886838B (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110623988A (zh) * 2019-07-31 2019-12-31 湖州耕香生物科技有限公司 一种木芙蓉叶总黄酮的提取制备方法
CN110638848A (zh) * 2019-08-16 2020-01-03 湖州耕香生物科技有限公司 一种基于透皮吸收技术提取木芙蓉叶有效成分的方法
CN110812688A (zh) * 2019-11-20 2020-02-21 广州中医药大学(广州中医药研究院) 一种透皮给药的微针及其制备方法
CN111568887A (zh) * 2020-06-23 2020-08-25 云南省药物研究所 一种草乌甲素可溶解微针贴片及其制备方法
CN113350263A (zh) * 2021-06-04 2021-09-07 贵州中医药大学 一种雷公藤甲素自溶性微针

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110623988A (zh) * 2019-07-31 2019-12-31 湖州耕香生物科技有限公司 一种木芙蓉叶总黄酮的提取制备方法
CN110638848A (zh) * 2019-08-16 2020-01-03 湖州耕香生物科技有限公司 一种基于透皮吸收技术提取木芙蓉叶有效成分的方法
CN110812688A (zh) * 2019-11-20 2020-02-21 广州中医药大学(广州中医药研究院) 一种透皮给药的微针及其制备方法
CN111568887A (zh) * 2020-06-23 2020-08-25 云南省药物研究所 一种草乌甲素可溶解微针贴片及其制备方法
CN113350263A (zh) * 2021-06-04 2021-09-07 贵州中医药大学 一种雷公藤甲素自溶性微针

Also Published As

Publication number Publication date
CN114886838B (zh) 2023-09-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Yao et al. Flexible two-layer dissolving and safing microneedle transdermal of neurotoxin: A biocomfortable attempt to treat Rheumatoid Arthritis
CN105025976B (zh) 微型针、微型针的制造模具和制造方法
CN107073251A (zh) 用于减少皱纹的微针片及形成方法
CN107375008A (zh) 用于美白的可溶性微针贴片及其制备方法
CN107184417A (zh) 可溶性微针贴片及其制备方法
CN104826228B (zh) 用于皮肤修复与保养的生物贴
CN110115707B (zh) 一种基于相分离技术制备多孔聚合物微针的方法及其应用
CN104815398B (zh) 结合微针贴的光子嫩肤系统
CN109045460A (zh) 一种微针贴片及其制备方法
CN104921961B (zh) 一种多效修复的可降解生物微针贴
Liu et al. Fabrication of rapidly separable microneedles for transdermal delivery of metformin on diabetic rats
Lv et al. Collagen‐based dissolving microneedles with flexible pedestals: A transdermal delivery system for both anti‐aging and skin diseases
CN110025567A (zh) 一种自溶性透明质酸微针的制备方法
Ren et al. Customized flexible hollow microneedles for psoriasis treatment with reduced‐dose drug
CN105997530A (zh) 一种用于除皱祛黑眼圈的组合式微针面膜
CN113599530B (zh) 一种空载相转化水凝胶微针、中华眼镜蛇神经毒素相转化水凝胶微针及其制备方法和应用
CN110947088A (zh) 护眼组合贴片及其制备方法
CN105617526A (zh) 一种溶胀型丝素蛋白微针给药系统及其制备方法
CN115006712A (zh) 一种米诺地尔的脂质纳米粒微针及其制备方法和应用
CN112274447B (zh) 铁皮石斛多糖-透明质酸可溶性微针及其制备方法
CN105498081A (zh) 一种无菌微结构体及其制备方法
CN114886838A (zh) 一种木芙蓉总黄酮可溶性微针的制备方法
CN110840823B (zh) 一种传递体复合自溶微针及其制备方法
CN115430031B (zh) 一种多功能美容微针贴片及其批量化制备方法
KR101605711B1 (ko) 한방 조성물이 코팅된 미세침 및 이의 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant