CN114885945A - 一种诱导烟草防治黑胫病的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种诱导烟草防治黑胫病的方法，利用β‑氨基丁酸(BABA)作为诱抗剂喷施烟草防治烟草黑胫病。本发明利用诱抗剂开发植物内在抗性机制来防治病害，烟草病害防治更加理想，β‑氨基丁酸作为一种高效广谱的诱抗剂，在植物病害方面有很大的发展潜能。
Description
技术领域
本发明涉及植物病害防治技术领域，特别涉及一种诱导烟草防治黑胫病的方法。
背景技术
烟草黑胫病又叫烟草黑根、黑杆疯，是由烟草黑胫病菌侵染所引起的、发生在烟草上重要土传真菌病害。主要侵染烟草的根和茎基部，在其上形成黑色凹陷的病斑，故称“黑胫病”。苗床期一般发生较少，主要为害大田期的烟株。症状因烟株生长阶段和气候条件的不同而有较大差异。烟草黑胫病遍布全世界，特别是温带、亚热带和热带地区发生较严重，有近40个国家和地区受到烟草黑胫病的危害。中国华南地区3月下旬至4月中旬，黄淮地区5月出现症状。降雨及田间土壤湿度是烟草黑胫病流行的关键性因素，在适温条件下，雨后相对湿度80％以上保持3-5天，病害即可流行。烟草黑胫病每年都给烟草生产造成巨大经济损失。近年来，由于受气候、连作和施肥条件等因素的影响，烟草黑胫病日趋严重。
生产上一般采用种植抗病品种、化学防治以及生物防治等措施控制该病害。1、种植抗病品种是防治烟草黑胫病经济而有效的措施，目前生产上广泛使用的品种有G28、G140、K326、云烟85、G80等。2、农业防治主要是通过合理轮作、适时播种和移栽、培育无病苗、进行科学田间管理等栽培措施来有效控制或减少初级侵染源，是控制烟草病害较为积极有效的方法。合理轮作可以减轻土壤中病原菌量，从而降低病害的危害程度。3、化学防治是黑胫病防治中一个的手段，目前登记防治烟草黑胫病的化学药剂主要有甲霜灵、乙磷铝、敌克松、杀毒矾及它们的复配制剂，以甲霜灵系列防效最佳。4、生物防治是从自然界中分离、筛选有益微生物并用于病原微生物的拮抗、抑制作用的防治方法，具有高效、无毒、无残留和低成本等特点。用非致病性的双核丝核菌控制烟草黑胫病的效果可达40％-70％。
虽然取得了一定防治效果，但传统的防治方法也存在抗病品种抗性减弱、农药残留和病原菌产生抗药性等弊端，以及由于田间环境条件的复杂多样，生物防治并没有取得突破性的进展，工作还大多局限于实验阶段。
发明内容
本发明的目的是提供一种诱导烟草防治黑胫病的方法，利用诱抗剂开发植物内在抗性机制来防治病害，烟草病害防治更加理想，β-氨基丁酸作为一种高效广谱的诱抗剂，在植物病害方面有很大的发展潜能。
本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：
一种诱导烟草防治黑胫病的方法，利用β-氨基丁酸(BABA)作为诱抗剂喷施烟草防治烟草黑胫病。
进一步优选的的，所述β-氨基丁酸(BABA)的浓度为1～20mmol/L。
进一步优选的的，所述β-氨基丁酸(BABA)的浓度为5mmol/L。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
β-氨基丁酸(BABA)通过调节烟草植株的新陈代谢，激活烟草植株的免疫系统和生长系统，诱导烟草植株自身产生系统性的抗病性，如同人注射疫苗，诱导因子是疫苗，激活烟草植株潜在的抗病能力，使其具有抵御病害的作用。此外，β-氨基丁酸(BABA)还有以下表现：①具有高效性；②诱导抗性具有整体性系统性和持续性；③有利于保护作物的有益微生物种群；④无污染，无公害。
附图说明
图1是寄生疫霉(Phytophthora parasitica)菌丝体径向生长受不同浓度的β-氨基丁酸(BABA)影响的对比图；
图2是蒸馏水及BABA处理对烟叶表型的影响的对比图。
图3是蒸馏水及BABA处理对黑胫病病斑的影响的对比图。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合实施例对本发明作进一步的详细描述。本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。
实施例1
一种诱导烟草防治黑胫病的方法,利用β-氨基丁酸(BABA)作为诱抗剂喷施烟草防治烟草黑胫病，本实施例使用的诱抗剂浓度为0mmol/L的β-氨基丁酸(BABA)。
实施例2
一种诱导烟草防治黑胫病的方法,利用β-氨基丁酸(BABA)作为诱抗剂喷施烟草防治烟草黑胫病，本实施例使用的诱抗剂是浓度为1mmol/L的β-氨基丁酸(BABA)。
实施例3
一种诱导烟草防治黑胫病的方法,利用β-氨基丁酸(BABA)作为诱抗剂喷施烟草防治烟草黑胫病，本实施例使用的诱抗剂是浓度为5mmol/L的β-氨基丁酸(BABA)。
实施例4
一种诱导烟草防治黑胫病的方法,利用β-氨基丁酸(BABA)作为诱抗剂喷施烟草防治烟草黑胫病，本实施例使用的诱抗剂是浓度为10mmol/L的β-氨基丁酸(BABA)。
实施例5
一种诱导烟草防治黑胫病的方法,利用β-氨基丁酸(BABA)作为诱抗剂喷施烟草防治烟草黑胫病，本实施例使用的诱抗剂是浓度为20mmol/L的β-氨基丁酸(BABA)。
设置实验1(BABA对P.parasitica生长的影响)
步骤1，从发黑胫病的烟株的病斑处分离烟草黑胫病菌。
步骤2，使用真菌通用引物ITS1、ITS4对病原菌的rDNA-ITS区进行PCR扩增，对扩增产物进行DNA序列测序，对测序结果进行BLAST序列对比和同源性分析，确定该病原菌为P.parasitica，并纯化。
步骤3，无菌操作条件下，将筛选出的β-氨基丁酸(BABA)混入融化的培养基，制成含0、1.0、5.0、10.0、20.0mmol/Lβ-氨基丁酸(BABA)(例1-5的诱抗剂)的带药培养基，每个浓度重复3次。将在PDA培养基培养6天的菌株，用直径6mm的打孔器于距菌落中心等距、菌丝生长均匀处打取P.parasitica的菌圆片。用镊子转移到混有药剂的培养基上，30℃培养，分别于第2、3、4、5、6、7天测量菌落直径，3次重复，取平均值。用十字交叉法测量菌落直径,计算抑菌率。
抑菌率＝(对照菌落直径一处理菌落直径)÷对照菌落直径×100
步骤4，培养6天后，观察五个培养基中P.parasitica菌丝的生长情况，参照图1，BABA对P.parasitica菌丝生长的抑制率见下表。
注：＊＊表示P<0.01水平下差异极显著(n＝3)
从上表及图1可以看出，β-氨基丁酸(BABA)能够有效抑制P.parasitica菌丝的生长，其中5mmol/L BABA对P.parasitica达到21.8％的抑制率，10mmol/L的β-氨基丁酸(BABA)抑制作用最强，达到了40.1％。
设置实验2(BABA处理对叶片表型的影响)
烟草采用漂浮育苗的方法育苗，待烟草长到成苗期时移栽到装有灭菌营养土的塑料钵中。正常浇水、施肥管理，烟草长到5-6叶期时在叶面分别喷施0(蒸馏水)、1、5、10、20mmol/LBABA，以喷施蒸馏水为对照。每个浓度3个重复。三天后，观察叶片表型。
在植株上喷施BABA，会在叶面形成坏死型枯斑，这是植物对外界胁迫的一种应激反应，促使植物进入防卫状态。参照图2，用浓度分别为0(蒸馏水)、1、5、10、20mmol/L BABA溶液喷施烟草叶片，三天后，喷施清水和1mmol/LBABA时烟草叶片无明显变化，BABA浓度为5mmol/L时烟草下部叶片出现少量枯斑，浓度为10mmol/L和20mmol/L时烟草下部叶片有大量的枯斑出现。说明枯斑的数量和大小与BABA的浓度呈正相关，BABA浓度高时会对烟草叶片产生较大的伤害。同时考虑有效性和安全性，确定5mmol/LBABA更适合用于防治烟草黑胫病。
设置实验3(5mmol/LBABA处理烟草叶片诱导抗病性)
选取品种及长势相同的烟草，分别用蒸馏水和5mmol/L的β-氨基丁酸(BABA)喷施烟草叶片，各3个重复。间隔3天喷一次，共喷施三次。最后一次喷施后间隔三天，在两株烟株茎部接种P.parasitica，接种方法为菌丝块创伤茎基部接种。后期观察烟株病害的发病情况。参照图3，A为喷施蒸馏水后接种P.parasitica的烟株，B为喷施5mmol/L的β-氨基丁酸(BABA)后接种P.parasitica的烟株。从图中可以看出，烟株接种P.parasitica三天后，蒸馏水处理的植株明显患黑胫病，病害严重度为3级；5mmol/LBABA处理的植株虽也患有黑胫病，但黑斑颜色和面积都没有喷施蒸馏水的植株明显，病害严重度为1级。可以看出，β-氨基丁酸(BABA)可以有效控制病斑的蔓延，减轻黑胫病对烟草造成的损害，并且没有将β-氨基丁酸(BABA)喷施在烟株的发病处，而是直接提前喷施叶片，说明β-氨基丁酸(BABA)能够诱导烟草植株自身产生系统性的抗病性。
本具体实施例仅仅是对本发明的解释，其并不是对本发明的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。
Claims (3)
1.一种诱导烟草防治黑胫病的方法，其特征在于：利用β-氨基丁酸(BABA)作为诱抗剂喷施烟草防治烟草黑胫病。
2.根据权利要求1所述的一种诱导烟草防治黑胫病的方法，其特征在于：所述β-氨基丁酸(BABA)的浓度为1～20mmol/L。
3.根据权利要求2所述的一种诱导烟草防治黑胫病的方法，其特征在于：所述β-氨基丁酸(BABA)的浓度为5mmol/L。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20220812 |