CN114885943A - 一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物及其制备方法和应用 Download PDF

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张伟
舒刚
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黄塬婷
张心怡
邱咏柯
吴少强
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徐傅能
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Abstract

本发明提供了一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物及其制备方法和应用,该组合物包含以下质量份数的组分:11~60份抑菌药物、0.8~20份卡波姆、1~30份吐温、10~60份保湿剂、150~750份溶剂、0~50份pH调节剂,所述的抑菌药物是双乙酸钠和山梨酸钾的组合。该组合物具有刺激性低、渗透率好、起效快等优点,适用于清除砖火丝菌,除菌效果好,能长效除菌、持久渗透除菌,制备方法简单,具有广阔的应用前景。

Description

一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及一种复合除菌组合物,具体涉及一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物及其制备方法和应用。
背景技术
砖火丝菌(Pyronema domestica)属盘菌目,盘菌科真菌。砖火丝菌是一种存在于棉制品上的霉菌,对环氧乙烷有较强的抗力,棉制医疗用品曾因此而灭菌不彻底,有文章研究其对电离辐射的抗力,供灭菌时进行参考。砖火丝菌常见于洗手池、厨卫等区域的瓷砖附近,难以去除;砖火丝菌为孢子生殖,孢子漂浮在空气中,进入人体呼吸道后严重影响人类生命健康。
据市场调研及相关资料显示,现市售除真菌产品主要分为喷剂与啫喱两大类。喷剂常用于墙体与瓷砖等大面积区域,主要用于去除大面积的霉斑霉点。生产厂家有花王、膜太、平安大通等。花王的成分以有机酸、表面活性剂为主,半小时内即可有效清除瓷砖上的霉菌,然而对呼吸道刺激性大。膜太采用非离子表面活性剂作为主要成分,喷洒后5分钟内即可溶解霉菌,抑菌效果较好,然而同样味道刺鼻,且其含有漂白性成分不适用于彩色墙体、壁纸的除菌。平安大通的核心成分为氧化剂、分解剂并添加了溶菌酶,抑霉效果达99.9%,然而防霉效果差,数月后霉菌易复发。啫喱是近年来较为流行的一种除真菌产品,适合清理洗衣机胶条、瓷砖缝隙等易滋生顽固性真菌的地方,能有较好的除菌效果。生产厂家主要有雅采洁、老管家、润友等。雅采洁主要配方为次氯酸钠、氢氧化钠、增稠剂与去离子水,适用范围广,但起效慢,涂抹后需等待7~8h。老管家同样采用次氯酸盐作为主要成分并添加氢氧化钠、抑菌剂与凝胶剂,抑菌率达96.96%,然而涂抹后仍需等待3~5h才可除菌,且成分对皮肤刺激性大。润友以表面活性剂为主要配方,并添加增稠剂、螯合剂、活氧酵素等,气味及刺激性降低,但抑菌效率最慢,需等待12h才能除净真菌,渗透率也不如之前的厂家。
以上喷剂与啫喱的缺点均限制了除菌的应用,且针对生活中常见的砖火丝菌目前还没有有效长期的去除办法。
发明内容
本发明的目的是提供一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物及其制备方法和应用,该组合物能渗透到霉菌污染的深部,有效去除砖火丝菌,具有长效除霉、持久渗透除霉的功效,有效解决了砖火丝菌以及其他真菌带来的污染问题。
为了达到上述目的,本发明提供了一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物,该组合物包含以下质量份数的组分:11~60份抑菌药物,0.8~20份卡波姆,1~30份吐温,10~60份保湿剂,150~750份溶剂,0~50份pH调节剂。
所述的抑菌药物是双乙酸钠和山梨酸钾的组合,所述的双乙酸钠和山梨酸钾的质量比是10~80:2.5~20;所述的溶剂选用醇与水;该组合物的pH值为6.5~7.5。
优选地,所述的双乙酸钠和山梨酸钾的质量比为1:0.25。
优选地,所述的卡波姆选自卡波姆-940、卡波姆-934、卡波姆-941、卡波姆-1342中任意一种或两种以上。所述的吐温选自吐温20、吐温40、吐温60、吐温61、吐温80、吐温81和吐温85中任意一种或两种以上。
优选地,所述的保湿剂是选自乙醇、丙二醇、丙三醇中任意一种或两种以上。
优选地,所述的醇选自无水乙醇或乙醇溶液。
优选地,所述的pH调节剂选自乙酸钠、乳酸钠、三乙醇胺、三乙胺、氨水、乙二胺、氢氧化铵中任意一种或两种以上。
优选地,所述的卡波姆为卡波姆-940;所述的吐温为吐温-80;所述的保湿剂为丙三醇;所述的溶剂为无水乙醇和水;所述的pH调节剂为三乙醇胺。
优选地,所述的组合物中双乙酸钠和山梨酸钾的总质量分数为5wt%~10wt%。
本发明还提供了一种所述的针对砖火丝菌的复合除菌组合物的制备方法,该方法包含:
(1)将卡波姆与保湿剂混合后,加入水,溶胀,放置,制得第一混合物;将双乙酸钠加入水中,加热完全溶解后得到第二混合物;将山梨酸钾加入水中,完全溶解后得到第三混合物;
(2)将步骤(1)中得到的第二混合物和第三混合物混合,加入醇,完全溶解,然后与步骤(1)中制得的第一混合物搅拌均匀,再加入吐温,用pH调节剂调节pH值至6.5~7.5,最后加水搅拌均匀,制得的组合物的凝胶剂。
本发明的另一目的是提供所述的针对砖火丝菌的复合除菌组合物在抑制或去除砖火丝菌中的应用。
本发明的又一目的是提供一种双乙酸钠和山梨酸钾的组合物在抑制或去除砖火丝菌中的应用。
本发明的一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物及其制备方法和应用,解决了砖火丝菌难以抑制的问题,具有以下优点:
1、该组合物以双乙酸钠与山梨酸钾为主要成分,双乙酸钠与山梨酸钾抑制砖火丝菌时具有协同作用,能够很好地抑制砖火丝菌。
2、该组合物以卡波姆940为凝胶基质,双乙酸钠与山梨酸钾4:1为主要成分,以吐温-80为润湿剂,无水乙醇与去离子水为溶剂的凝胶系统,外观半透明,质地黏稠,流动性好。
3、该组合物在-5℃的条件下存放24h,室温下存放24h,循环3次。结果表明其具有均一稳定性,外观均匀,并保持一定形态的弹性半固体体系。
4、该组合物的除菌成分能有效地渗透到真菌污染的深部,利用凝胶的黏附性能实现长效除菌、持久渗透除菌的多重功效,有效解决霉菌污染的问题,为临床提供了使用方便且有效防治生活霉菌的除霉剂。
5、该组合物和其他除霉防霉产品剂型相比,刺激性低,更加亲肤,渗透能力强,除霉效率高、效果好、有效时长。
6、该组合物除了能高效长期解决砖火丝菌带来的污染问题,还能融合多种除霉成分,对其他顽固霉菌均有更强的抑制效果,有更广泛的应用价值,易于实现生产。
附图说明
图1为砖火丝菌的分离纯化图。
图2为砖火丝菌的DNA测序的碱基序列一(A)与测序图一(B)。
图3为砖火丝菌的DNA测序的碱基序列二(A)与测序图二(B)。
图4为砖火丝菌的DNA测序。
图5为凝胶剂稳定性实验的效果图。
图6为抑菌药物含量不同的3种凝胶的效果图。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其组分包含:10.0份双乙酸钠、2.5份山梨酸钾、1.5份卡波姆、1.0份吐温、保湿剂(甘油)、溶剂(无水乙醇和纯化水)和三乙醇胺,通过加入适量三乙醇胺调节pH值至7.0,其中卡波姆-940与甘油的质量体积比为1.5g:11mL。
上述复合除菌组合物的制备方法包括:
(1)称取卡波姆-9401.5g,加入11mL甘油润湿并加入60mL纯化水,溶胀,放置过夜制得第一混合物;称取双乙酸钠10.0g于烧杯中,加入10mL纯化水,水浴加热完全溶解后得到第二混合物;称取山梨酸钾2.5g,加入10mL纯化水完全溶解后得到第三混合物。
(2)将步骤(1)中得到的第二混合物、第三混合物混合,加入20mL无水乙醇完全溶解,然后与步骤(1)中制得的第一混合物搅拌均匀,再缓慢加入吐温-801.0g,加适量三乙醇胺调节pH值至7.0,最后加纯化水至180g,搅拌均匀,制得组合物的凝胶剂。
实施例2
一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其组分包含:10.0份双乙酸钠、2.5份山梨酸钾、1.0份卡波姆、1.0份吐温、保湿剂(甘油)、溶剂(无水乙醇和纯化水)和三乙醇胺,通过加入适量三乙醇胺调节pH值至7.0,其中卡波姆-940与甘油的质量体积比为1.0g:11mL。
上述复合除菌组合物的制备方法与实施例1的过程基本相同,区别在于:
在步骤(1)中称取卡波姆-9401.0g。
实施例3
一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其组分包含:10.0份双乙酸钠、2.5份山梨酸钾、2.0份卡波姆、1.0份吐温、保湿剂(甘油)、溶剂(无水乙醇和纯化水)和三乙醇胺,通过加入适量三乙醇胺调节pH值至7.0,其中卡波姆-940与甘油的质量体积比为2.0g:11mL。
上述复合除菌组合物的制备方法制备方法与实施例1的过程基本相同,区别在于:
在步骤(1)中称取卡波姆-9402.0g。
实施例4
一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其组分包含:12.0份双乙酸钠、3.0份山梨酸钾、1.5份卡波姆、1.0份吐温、保湿剂(甘油)、溶剂(无水乙醇和纯化水)和三乙醇胺,通过加入适量三乙醇胺调节pH值至7.0,其中卡波姆-940与甘油的质量体积比为1.5g:11mL。
上述复合除菌组合物的制备方法与实施例1的过程基本相同,区别在于:
在步骤(1)中称取双乙酸钠12.0g和山梨酸钾3.0g。
实施例5
一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其组分包含:16.0份双乙酸钠、4.0份山梨酸钾、1.5份卡波姆、1.0份吐温、保湿剂(甘油)、溶剂(无水乙醇和纯化水)和三乙醇胺,通过加入适量三乙醇胺调节pH值至7.0,其中卡波姆-940与甘油的质量体积比为1.5g:11mL。
上述复合除菌组合物的制备方法与实施例1的过程基本相同,区别在于:
在步骤(1)中称取双乙酸钠16.0g和山梨酸钾4.0g。
实施例6
一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其组分包含:12.0份双乙酸钠、3.0份山梨酸钾、1.0份卡波姆、1.0份吐温、保湿剂(甘油)、溶剂(无水乙醇和纯化水)和三乙醇胺,通过加入适量三乙醇胺调节pH值至7.0,其中卡波姆-940与甘油的质量体积比为1.0g:11mL。
上述复合除菌组合物的制备方法与实施例1的过程基本相同,区别在于:
在步骤(1)中称取卡波姆-9401.0g、双乙酸钠12.0g和山梨酸钾3.0g。
实施例7
一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其组分包含:12.0份双乙酸钠、3.0份山梨酸钾、0.8份卡波姆、1.0份吐温、保湿剂(甘油)、溶剂(无水乙醇和纯化水)和三乙醇胺,通过加入适量三乙醇胺调节pH值至7.0,其中卡波姆-940与甘油的质量体积比为0.8g:11mL。
上述复合除菌组合物的制备方法与实施例1的过程基本相同,区别在于:
在步骤(1)中称取卡波姆-9400.8g、双乙酸钠12.0g和山梨酸钾3.0g。
实施例8
一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其组分包含:10.0份双乙酸钠、2.5份山梨酸钾、1.5份卡波姆、3.0份吐温、保湿剂(甘油)、溶剂(无水乙醇和纯化水)和三乙醇胺,通过加入适量三乙醇胺调节pH值至7.0,其中卡波姆-940与甘油的质量体积比为1.5g:11mL。
上述复合除菌组合物的制备方法制备方法与实施例1的过程基本相同,区别在于:
在步骤(2)中称取吐温-803.0g。
实施例9
一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其组分包含:16.0份双乙酸钠、4.0份山梨酸钾、1.0份卡波姆、1.0份吐温、保湿剂(甘油)、溶剂(无水乙醇和纯化水)和三乙醇胺,通过加入适量三乙醇胺调节pH值至7.0,其中卡波姆-940与甘油的质量体积比为1.5g:11mL。
上述复合除菌组合物的制备方法制备方法与实施例1的过程基本相同,区别在于:
在步骤(1)中称取卡波姆-9401.0g、双乙酸钠16.0g和山梨酸钾4.0g。
实验例1稳定性
将实施例1制备的针对砖火丝菌的复合除菌组合物在-5℃的条件下存放24h,然后在室温下存放24h,在-5℃和室温条件下循环3次。
如图5所示,为本发明实施例1的针对砖火丝菌的复合除菌组合物稳定性实验的效果图,结果表明凝胶剂具有均一稳定性,外观半透明,质地均匀,涂展性好,并呈现凝胶状态。
研究发现影响凝胶剂稳定性的主要因素有卡波姆的量、抑菌药物含量、制备溶液pH值等,在本发明实验设计中,采用单因素实验方法考察抑菌药物含量对对凝胶的影响。其余条件不变,将实施例1中的抑菌药物含量分别设置为A组双乙酸钠7.2g、山梨酸钾1.8g与B组双乙酸钠10g、山梨酸钾2.5g与C组双乙酸钠14.4g、山梨酸钾3.6g,观察凝胶的形态特征。
如图6所示,A组凝胶非常粘稠,均匀度、流动性较低,但成型性好,有一定的硬度及柔软性。B组凝胶均匀成型,流动性较好,基质均匀细腻,易于涂抹。C组成型性最差,并且有轻度水化的现象。因此得出结论,本发明中的抑菌药物含量应控制在5wt%~10wt%。
实验例2对砖火丝菌抑菌实验
1、砖火丝菌的分离纯化
从实验室墙角、洗手间等潮湿角落用棉签刮取少许真菌,在无菌条件下,将棉签放入装有50mL灭菌肉汤的EP试管中充分浸润,在恒温水浴振荡器上振荡4h,之后取0.5mL稀释样品,转移到PDA培养基上,用无菌涂布棒涂匀后,放入恒温培养箱中,32℃条件下培养3d~5d。待长出菌落后,用接种针挑取疑似真菌菌落,在PDA培养基上做划线分离,继续培养3~4d。待真菌在培养基上生长进入旺盛期时,用无菌接种环挑取少量孢子作平板划线,经3次平板划线后该菌已得到初步纯化。
砖火丝菌菌落外观为绒毛状,菌落较大,质地疏松,不透明,菌丝无色或淡色,菌落成熟后外边缘为深绿色,中间部位为白色并有凹痕。分离纯化效果见图1。
将分离纯化的该菌落送至生工生物工程(上海)股份有限公司进行鉴定,以ITS1、ITS4为引物进行DNA测序,得到正反两段DNA的碱基序列与对应的测序图(见图2,图3),以及最终的拼接结果(见图4)。将拼接结果输入NCBI网址,鉴定为砖火丝菌。
2、四种抗真菌药的抑制效果
将各抗菌药物用PDB液体培养基倍比稀释,采用二倍逐级稀释法,设128、64、32、16、8、4、2、1mg/mL 8个浓度梯度。向无菌的96孔平板中竖排第1~8个试管中加入100μL液体培养基,其他试管均加入100μL供试菌液(106cfu/mL),每梯度设3个重复和1个菌液空白对照。32℃下培养24h后观察结果。
如表1所示,四种抗真菌药的MIC结果,得到肉桂醛MIC为128mg/mL;双乙酸钠MIC为4mg/mL;山梨酸钾MIC为1mg/mL;苯扎氯铵为4μg/mL。
表1为四种抗真菌药的MIC结果
Figure BDA0003573787230000081
参照CLSI M27-A(酵母菌液体培养基稀释法抗真菌药物敏感实验)方案将药液用PDB培养基稀释为2倍倍比质量浓度(药物中质量浓度范围为双乙酸钠16~1/16mg/mL,山梨酸钾4~1/64mg/mL,苯扎氯铵为4~1/64μg/mL)。按照如下方法进行操作;由高浓度到低浓度的顺序,取50μL倍比稀释的双乙酸钠药液,依次由低浓度到高浓度加入96孔板的第2-11列;取50μL倍比稀释的盐山梨酸钾药液,依次加入96孔板的第B-H行。除A12孔之外,向其他各孔加入100μL菌悬液,并设置空白对照与纯菌液对照,32℃恒温恒湿培养24h。FICI法则是最为常用的解释抗真菌药物相互作用的模型,当FICI≤0.5时提示协同效应,0.5<FICI<1为部分协同效应,FICI=1为相加效应,1<FICI<4为无关效应,FICI≥4为拮抗效应。用该标准对实验结果进行判定。
如表2所示,为双乙酸钠与山梨酸钾的联合FIC结果,如表3所示,为双乙酸钠与苯扎氯铵联合FIC结果,如表4所示,为山梨酸钾与苯扎氯铵联合FIC结果。经研究表明只有双乙酸钠和山梨酸钾联合才具有协同抑制砖火丝菌的作用。
表2为双乙酸钠与山梨酸钾的联合FIC结果
Figure BDA0003573787230000082
表3为双乙酸钠与苯扎氯铵联合FIC结果
Figure BDA0003573787230000083
表4为山梨酸钾与苯扎氯铵联合FIC结果
Figure BDA0003573787230000091
尽管本发明的内容已经通过上述优选实施例作了详细介绍,但应当认识到上述的描述不应被认为是对本发明的限制。在本领域技术人员阅读了上述内容后,对于本发明的多种修改和替代都将是显而易见的。因此,本发明的保护范围应由所附的权利要求来限定。

Claims (10)

1.一种针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其特征在于,该组合物包含以下质量份数的组分:
Figure FDA0003573787220000011
所述的抑菌药物是双乙酸钠和山梨酸钾的组合,所述的双乙酸钠和山梨酸钾的质量比是10~80:2.5~20;
所述的溶剂选用醇和水;
该组合物的pH值为6.5~7.5。
2.根据权利要求1所述的针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其特征在于,所述的双乙酸钠和山梨酸钾的质量比为1:0.25。
3.根据权利要求1所述的针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其特征在于,所述的卡波姆选自卡波姆-940、卡波姆-934、卡波姆-941、卡波姆-1342中任意一种或两种以上;所述的吐温选自吐温20、吐温40、吐温60、吐温61、吐温80、吐温81和吐温85中任意一种或两种以上。
4.根据权利要求1所述的针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其特征在于,所述的保湿剂是选自丙二醇、丙三醇、聚乙二醇中任意一种或两种以上。
5.根据权利要求1所述的针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其特征在于,所述的醇选自无水乙醇或乙醇溶液。
6.根据权利要求1所述的针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其特征在于,所述的pH调节剂选自三乙醇胺、三乙胺、氨水、乙二胺、氢氧化铵中任意一种或两种以上。
7.根据权利要求1所述的针对砖火丝菌的复合除菌组合物,其特征在于,所述的组合物中双乙酸钠和山梨酸钾的总质量分数为5wt%~10wt%。
8.一种如权利要求1-7中任意一项所述的针对砖火丝菌的复合除菌组合物的制备方法,其特征在于,该方法包含:
(1)将卡波姆与保湿剂混合后,加入水,溶胀,放置,制得第一混合物;将双乙酸钠加入水中,加热完全溶解后得到第二混合物;将山梨酸钾加入水中,完全溶解后得到第三混合物;
(2)将步骤(1)中得到的第二混合物和第三混合物混合,加入醇,完全溶解,然后与步骤(1)中制得的第一混合物搅拌均匀,再加入吐温,用pH调节剂调节pH值至6.5~7.5,最后加水搅拌均匀,制得的组合物的凝胶剂。
9.如权利要求1-7中任意一项所述的针对砖火丝菌的复合除菌组合物在抑制或去除砖火丝菌中的应用。
10.一种双乙酸钠和山梨酸钾的组合物在抑制或去除砖火丝菌中的应用。
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