CN114796606A - 一种刚性脂肪移植复合材料及其制备方法与应用 - Google Patents

一种刚性脂肪移植复合材料及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种刚性脂肪移植复合材料及其制备方法与应用。本发明的刚性脂肪移植复合材料包括胶原和纤维蛋白骨架，以及粘附于胶原和纤维蛋白骨架表面的基质血管成分细胞和生长因子，组织刚度≥6kPa，总胶原含量高，细胞成分较少，具有稳定性强，保留率高的优点。而且，该刚性脂肪移植复合材料兼具促进组织再生和提高移植物的长期保留率的功能，为临床上自体脂肪来源的填充材料的开发、运用及推广提供了理论基础。

Description

一种刚性脂肪移植复合材料及其制备方法与应用
技术领域
本发明属于整容填充材料技术领域，具体涉及一种刚性脂肪移植复合材料及其制备方法与应用。
背景技术
面部组织凹陷或缺失是整形外科中面临的常见问题，相关技术中对该问题的解决方式主要以微创注射填充剂为主，常用的填充剂包括透明质酸Hyaluronic Acid(HA)，羟基磷灰石或自体脂肪。自体脂肪移植有着来源丰富、易获得、无免疫排斥反应等优点，是一种非常重要且有价值的扩容和组织重建方法，但在实际使用中也存在着很多的问题或缺陷，如以脂肪组织作为面部填充剂时质地较软(刚度约为2～4kPa)，在一些需要硬性支撑的部位如鼻基底和颏部等，往往不能获得良好的填充效果，因此限制了自体脂肪移植在此领域的推广和运用。
因此，亟待开发出一种能有效利用脂肪组织并克服上述缺陷的方法，以扩大自体脂肪移植在此领域的推广和运用。
发明内容
本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种刚性脂肪移植复合材料(AMC)及其制备方法，该刚性脂肪移植复合材料能够克服常规填充材料材质过软的缺点，而且具有稳定性强，保留率高的优点。此外，该AMC的总胶原含量高，I、II、III、IV型胶原含量均较高，细胞成分较少，组织刚度高(刚度≥6kPa)，对于远期治疗具有极佳的治疗效果。
本发明的第一个方面，提供一种移植材料，该移植材料包括胶原和纤维蛋白骨架，以及粘附于胶原和纤维蛋白骨架表面的基质血管成分细胞和生长因子。
正常脂肪的结构是由细胞外基质(extracellular matrix，ECM)及嵌入其中的脂肪细胞和SVF细胞构成。ECM由多种类型的胶原组成，包括I、II、III、IV胶原蛋白、纤维连接蛋白、弹性蛋白、层粘连蛋白和糖胺聚糖，其中I型胶原是ECM中最主要的成分，占脂肪结缔组织总数的90％。脂肪组织的刚度主要取决于ECM的比例，ECM比例越高，脂肪组织的刚度越高。但现有技术中并未公开过如何纯化和浓缩脂肪组织中的ECM，也未涉及如何利用ECM获得高组织刚度的脂肪移植材料。而发明人利用在高度浓缩的ECM上适量附着生长因子及SVF细胞，制备得到一种脂肪移植材料，使该脂肪移植材料在具备高组织刚度的基础上，兼具促进组织再生和提高移植物的长期保留率的功能，为临床上自体脂肪来源的填充材料的开发、运用及推广提供了理论基础。
根据本发明的一种具体的实施方式，至少具有以下有益效果：
本发明中的刚性脂肪移植复合材料(AMC)中，总胶原含量高，I、II、III、IV型胶原含量均较高，而细胞成分较少，组织刚度高，通过临床前及临床实验证明，该AMC在体内移植后组织保留率高，刚性状态维持较好，远期疗效甚佳。
根据本发明的第一个方面，在一些具体实施方式中，上述移植材料的刚度大于等于6kPa。
在一些优选实施方式中，上述移植材料的刚度为6kPa。
本发明中的移植材料的组织刚度相比常规的脂肪移植物(Coleman脂肪)的组织刚度更高，从而导致本发明中的移植材料在体内填充后具有更强的支撑稳定性。
在一些具体实施方式中，上述移植材料中细胞外基质的体积比大于等于60％。
在一些优选实施方式中，上述移植材料中细胞外基质的体积比为70％。
在一些更优选实施方式中，上述细胞外基质中胶原的体积比大于等于40％。
在一些更优选实施方式中，上述细胞外基质中胶原的体积比为50％。
在一些具体实施方式中，上述移植材料中总细胞含量小于等于2.0×105个/mL。其中内皮细胞(CD31+)约占1％；脂肪干细胞(CD34+)约占25％；成纤维细胞(CD90+)约占10％；血细胞(CD45+)约占2％。
本发明的第二个方面，提供一种脂肪移植材料的制备方法，包括如下步骤：
(1)分离脂肪组织中的脂肪粗大纤维组织；
(2)去除脂肪粗大纤维组织中的水分和油脂，破碎处理，即得。
根据本发明的一种具体的实施方式，至少具有以下有益效果：
本发明中的脂肪移植材料制备方法利用过滤原理，提取脂肪抽吸物中的粗大纤维组织，同时用棉垫吸附等物理吸附方法，将破碎脂肪细胞产生的油滴汇集并去除，同时清除了残留的水分。整个制备过程均采用一系列机械化处理过程，完全依靠纯物理手段，不添加任何外源性物质，避免了污染及移植风险。本发明中的脂肪移植材料制备方法能高效去除脂肪组织中刚度较低的大体积脂肪细胞，获得刚度较高的纯化ECM，以提高制备得到的脂肪移植材料作为填充物在颜面部硬性支撑中的相关应用。
根据本发明的第二个方面，在一些具体实施方式中，步骤(1)中分离脂肪粗大纤维组织采用滤网过滤，其中，滤网的孔距为1.8-2.2mm。
在一些具体实施方式中，发明人采用自制的AMC收集器收集脂肪粗大纤维组织，该AMC收集器为一种内含叠加排列的三个单向开口可拆卸梳齿样滤网片的装置，每个滤片的网格间距为2mm，脂肪抽吸液中粗大的胶原纤维会被AMC收集器腔体内叠加排列的三个单向开口可拆卸梳齿样滤网片截流，而脂肪抽吸液中的小片段胶原、细胞成分及肿胀液不会被滤网片截流。在推注的过程中，脂肪抽吸液中的小片段胶原、细胞成分及肿胀液会顺利通过AMC收集器流入脂肪收集袋中，而粗大的胶原纤维会缠绕在AMC收集器中的三个梳齿样滤网片上，从而实现脂肪粗大纤维组织的分离。
当然，本领域技术人员可以根据实际使用需求，根据滤片的网格间距约为2mm的要求，采用其他过滤装置或手段，通过过滤获得脂肪抽吸液中粗大的胶原纤维。
在一些优选实施方式中，上述滤网的孔距为2mm。
在一些具体实施方式中，步骤(2)中将脂肪粗大纤维组织转移至筛网中，采用吸附性材料物理吸附脂肪粗大纤维组织中的水分和油脂；其中，筛网的孔距小于等于150μm。当然，也可以采用大于等于100目(mesh)/cm2表示筛网的孔距。
在一些优选实施方式中，上述筛网的孔距为100目(mesh)/cm2。
发明人发现，100目(mesh)/cm2的筛网孔距在不导致筛网中的脂肪粗大纤维组织流失的情况下，最大程度的将残余的肿胀液和油脂快速挤压滤除，从而获得纯化的脂肪粗大纤维组织。
本发明的第三个方面，提供本发明第一个方面所述的移植材料或第二个方面所述的制备方法制备得到的脂肪移植材料在面部隆阔或塑形中的应用。
根据本发明的一种具体的实施方式，至少具有以下有益效果：
本发明第一个方面所述的移植材料或第二个方面所述的制备方法制备得到的脂肪移植材料在实际使用中具有极高的保留率，在移植一年后AMC的有效保留率可以达到65.85％。移植物的刚性支撑保持良好，不会造成疼痛或其他任何不适，外观轮廓佳。
本发明的第四个方面，提供本发明第一个方面所述的移植材料或第二个方面所述的制备方法制备得到的脂肪移植材料在面部年轻化及软组织损伤修复的应用。
附图说明
图1为本发明实施例中的步骤(2)的操作示意图；
图2为本发明实施例中的步骤(3)的操作示意图；
图3为本发明实施例中的步骤(3)的操作示意图；
图4为本发明实施例中的步骤(4)的操作示意图；
图5为本发明实施例中制备得到的AMC；
图6为本发明实施例中的清堵操作示意图；
图7为本发明实施例中的剪碎处理操作示意图；
图8为本发明实施例中AMC(A)和Coleman脂肪(B)的形态照片；
图9为本发明实施例中AMC和Coleman脂肪的刚度数据比较(A)和夹取测试照片(B)；
图10为本发明实施例中AMC和Coleman脂肪的注射推注照片；
图11为本发明实施例中AMC(A)和Coleman脂肪(B)的电镜扫描结构图；
图12为本发明实施例中AMC的HE染色(A，10×倍镜)及Masson染色(C，20×倍镜)图片，以及Coleman脂肪(Control)的HE染色(B，10×倍镜)及Masson染色(D，20×倍镜)图片；
图13为本发明实施例中AMC和Coleman脂肪(Control)的细胞总数比对图(A)和AMC和Coleman脂肪(Control)所含的各类不同细胞(CD31+对应内皮细胞、CD34+对应脂肪来源干细胞、CD90+对应成纤维细胞、CD45+对应血源性细胞)的含量对比图(B)；
图14为本发明实施例中AMC和Coleman脂肪(Control)的电泳图；
图15为本发明实施例中AMC和Coleman脂肪(Control)的胶原蛋白总量比对图(A)和AMC和Coleman脂肪(Control)所含的各类不同胶原蛋白(I、II、III、IV胶原蛋白)的含量对比图(B)；
图16为本发明实施例中AMC和Coleman脂肪(Control)移植体的对比照片；
图17为本发明实施例中AMC和Coleman脂肪(Control)移植体体积保留率(A)和组织刚度(B)对比图；
图18为本发明实施例中AMC(A)和Coleman脂肪(Control)(B)裸鼠体内移植3个月后的移植物HE染色图；
图19为本发明实施例中AMC和Coleman脂肪(Control)裸鼠体内移植3个月后的移植物围脂滴蛋白免疫荧光染色，其中，蓝色染料为DAPI染剂，绿色染料为围脂滴蛋白染剂；
图20为本发明实施例中AMC(A)和Coleman脂肪(Control)(B)裸鼠体内移植3个月后的移植物Masson染色图(10×倍镜)；
图21为本发明实施例中AMC和Coleman脂肪(Control)裸鼠体内移植3个月后的移植物免疫组织化学染色图(20×倍镜)，其中，红线为I型胶原宽度。
图22为本发明实施例中AMC和Coleman脂肪(Control)裸鼠体内移植后的硬度变化(A)、胶原含量变化(B)以及I型胶原含量变化(C)；
图23为本发明实施例中使用AMC进行注射填充前后的患者体位像对比图，其中，A为注射AMC前的体位像，B为AMC注射后1年的体位像。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本发明的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本发明保护的范围。
本发明实施例中的刚性脂肪移植复合材料在下述实施例中被统一命名为脂肪基质复合体(Adipose Matrix Complex，AMC)，下文统称“AMC”。
刚性脂肪移植复合材料(AMC)的制备
(1)取脂肪组织。
其中，步骤(1)中的脂肪组织包括采用湿性吸脂技术，使用普通吸脂针或“水滴口”吸脂针，从患者腹部，大/小腿或上臂抽吸脂肪组织，或采用其他商用或本领域常规方法获得的脂肪样品或材料。本方法不限制脂肪样品或材料的量，但优选为≥300mL。
(2)将步骤(1)中得到的脂肪抽吸液或脂肪组织转移至20ml鲁尔接头注射器中，将注射器与AMC收集器通过鲁尔接头连接，将AMC收集器的另外一端通过防脱接口与脂肪收集袋连接。确认密封对接后，推动含有脂肪组织的20mL注射器活塞轴，将脂肪抽吸液通过AMC收集器推注至对侧脂肪收集袋中(如图1所示)，推注速度为5-10mL/s。
其中，AMC收集器为一种内含叠加排列的三个单向开口可拆卸梳齿样滤网片的装置，每个滤片的网格间距为2mm，脂肪抽吸液中粗大的胶原纤维会被AMC收集器腔体内叠加排列的三个单向开口可拆卸梳齿样滤网片截流，而脂肪抽吸液中的小片段胶原、细胞成分及肿胀液不会被滤网片截流。在推注的过程中，脂肪抽吸液中的小片段胶原、细胞成分及肿胀液会顺利通过AMC收集器流入脂肪收集袋中，而粗大的胶原纤维会缠绕在AMC收集器中的三个梳齿样滤网片上，从而实现脂肪粗大纤维组织的分离。
当然，本领域技术人员可以根据实际使用需求，根据滤片的网格间距为2mm的要求，采用其他过滤装置或手段，通过过滤获得脂肪抽吸液中粗大的胶原纤维。
(3)重复步骤(2)，逐次将全部脂肪抽吸液通过20ml注射器通过AMC收集器推注入脂肪收集袋中。取下AMC收集器，拧开鲁尔接口端螺旋盖，将腔体内叠加排列的三个单向开口可拆卸梳齿样滤网片倒入医用无菌304不锈钢药液量杯中(如图2所示)。用11号空刀柄将缠绕在AMC三个梳齿样滤网片上的脂肪粗大纤维组织刮下，转移至100目/cm2的尼龙筛网袋中，用封口夹密封尼龙网袋(如图3所示)。
(4)将装有脂肪粗大纤维的密封尼龙网袋放置于多层无菌棉纱垫上(长×宽＝40cm×60cm)表面再覆盖多层同规格无菌棉纱垫，形成“夹心”结构(如图4所示)，平铺于无菌手术推车上。不断于棉垫上方加压，通过吸附原理，将尼龙网袋表面多余的肿胀液及油脂吸入无菌棉纱垫中。
当然，此处也可以采用其他本领域常规的吸附或过滤方法，其目的仅在于除去脂肪粗大纤维中残留的肿胀液及油脂。
(5)打开脱脂脱水处理后的尼龙筛网袋封口夹，用11号空刀柄将脱水脱油处理的脂肪粗大纤维组织转移到医用无菌304不锈钢药液量杯中，即得AMC(如图5所示)。
需要注意的是，如上述方法中，若在步骤(2)中，注射器活塞轴推注过程中出现堵塞的现象，可通过下述两种方式解决：
①加压推注注射器活塞柄；或
②取下注射器，用眼科镊或血管钳清理注射器乳头的堵塞组织(如图6所示)，待重新检查推注通畅后，将注射器与AMC收集器重新连接。
上述实施例制备得到的AMC的使用方法为：将AMC置于医用无菌304不锈钢药液量杯中，用10cm医用眼科剪刀进行剪碎处理(如图7所示)，分装入5mL鲁尔接头注射器中，再转移入1mL注射器，排出空气后，即可通过18G钝针进行皮下注射。
物理性质检测
取上述实施例制备得到的刚性脂肪移植复合材料(AMC)，检测AMC的大体观及物理性质。
Coleman脂肪(科尔曼脂肪)是目前脂肪移植中最为主流且常规的脂肪移植材料，因此，本实施例均以Coleman脂肪作为对比例。
(1)形态观测：
对上述实施例制备得到的AMC和Coleman脂肪进行形态观测，结果如图8所示。
与Coleman脂肪相比，上述实施例制备得到的AMC肉眼色觉偏白。
(2)物理刚度测试：
对上述实施例制备得到的AMC和Coleman脂肪进行物理刚度测试，结果如图9所示。
与Coleman脂肪相比，上述实施例制备得到的AMC物理刚度比Coleman脂肪的物理刚度高约4倍(图9A)。使用镊子对上述实施例制备得到的AMC和Coleman脂肪进行夹取测试，上述实施例制备得到的AMC可以被镊子整个轻松夹起(图9B)，说明其结构刚度更强。
(3)注射效果：
将上述实施例制备得到的AMC和Coleman脂肪分别转移至1mL注射器中，排出空气后，使用18G钝针推注测试，结果如图10所示。
Coleman脂肪和上述实施例制备得到的AMC均可以顺利通过18G针头注射，可以用于实际使用。
电镜结构扫描
取上述实施例制备得到的刚性脂肪移植复合材料(AMC)，对AMC进行扫描电镜检测。以Coleman脂肪作为对照。
检测结果如图11所示，通过扫描电镜观察，与Coleman脂肪相比，上述实施例制备得到的AMC中以大量粗大的纤维结缔组织为主，而Coleman脂肪中还是以个体较大的成熟脂肪细胞为主。
这样的结构差异优势在于：使用AMC进行体内移植后，不会像Coleman脂肪一样出现大量的脂肪细胞破裂，释放油滴并加重炎症反应，故AMC在移植后体积保留率比Coleman脂肪更高。
胶原含量检测
以Coleman脂肪作为对照，对上述实施例制备得到的AMC进行HE染色及Masson染色，以观察Coleman脂肪和上述实施例制备得到的AMC中的细胞及胶原含量的差异。
结果如图12所示，从HE染色及Masson染色结果中可以看出，AMC中可见大量胶原组织，而成熟脂肪细胞较少；对照组Coleman脂肪中可见大量成熟的脂肪细胞，胶原成分比例较少。
流式细胞术检测亚群细胞数量
以Coleman脂肪作为对照，对上述实施例制备得到的AMC使用胶原酶消化以获得单个细胞，用细胞计数仪对两种脂肪组织的细胞总数进行计数。用CD31、CD34、CD90、CD45抗体进行标记处理(CD31抗体用于标记内皮细胞、CD34抗体用于标记脂肪来源干细胞、CD90抗体用于标记成纤维细胞、CD45抗体用于标记血源性细胞)，使用流式细胞术进行检测，分析Coleman脂肪和上述实施例制备得到的AMC中各亚群细胞数量。
结果如图13所示。
从图13A可以看出上述实施例制备得到的AMC中细胞总数比对照组Coleman脂肪少。而且，上述实施例制备得到的AMC中的脂肪来源干细胞ASCs(CD34+)、内皮细胞ECs(CD31+)、成纤维细胞(CD90+)、血源性细胞(CD45+)的数量均小于对照组Coleman脂肪(图13B)。上述结果说明上述实施例制备得到的AMC相较Coleman脂肪，属于细胞比例少的脂肪来源填充材料。
胶原种类及比例测定
对上述实施例制备得到的AMC和Coleman脂肪(Control)进行蛋白质印迹法Western Blot(WB)分析，对比两种脂肪来源组织中胶原蛋白总量的差别，并分析AMC中各型胶原的比例。
蛋白质印迹法Western Blot采用本领域的常规操作。
蛋白质印迹法检测结果如图14所示。从电泳图可以看出，AMC和Coleman脂肪中的胶原种类相似。进一步对两种脂肪来源组织中胶原蛋白总量进行分析，可以发现，AMC中总胶原比例比Coleman脂肪高出约3倍(图15A)，其中如图15B所示，AMC中I、II、III、IV胶原蛋白(Col I，Col II，Col III，Col IV，其中，选择GAPDH作为参考)的比例均明显高于Coleman脂肪，说明上述实施例制备得到的AMC中成熟细胞几乎完全被破碎，ECM(细胞外基质)中各型胶原蛋白均得到了高度浓缩，说明AMC是一种胶原含量高且细胞少的脂肪来源填充材料。
移植可行性分析
(1)AMC体内移植的移植物保存率和刚度检测：
以Coleman脂肪为对照，取上述实施例制备得到的AMC进行裸鼠体内移植，3个月后观察移植物的大体观，并对比两组移植物保存率及组织刚度。
结果如图16和17所示。
如图16所示，与Coleman脂肪相比，上述实施例制备得到的AMC在小鼠体内移植后3个月，移植物表面油脂更少，触感感觉更坚韧。
而且，进一步分析两者的移植物体积保留率，发现与Coleman脂肪相比，上述实施例制备得到的AMC在小鼠体内移植后3个月后的移植物体积保留率更高(P＜0.01，图17A)，移植物的组织刚度也更高(P＜0.01，图17B)，说明在体内填充中，上述实施例制备得到的AMC的支撑性更稳定。
(2)AMC体内移植的细胞保存及成脂情况检测：
以Coleman脂肪为对照，取上述实施例制备得到的AMC进行裸鼠体内移植，3个月后对移植物进行HE染色和围脂滴蛋白免疫荧光染色，观察移植物中组织保存及脂肪细胞新生情况。
结果如图18和19所示。
与Coleman脂肪相比，上述实施例制备得到的AMC在裸鼠体内移植3个月后，移植物中仅存在少量小体积成熟脂肪细胞；而Coleman脂肪中则以正常的脂肪组织结构为主，即大量成熟脂肪细胞被ECM均匀包裹。而且，移植进裸鼠体内的AMC上并未观察到大片的成脂情况，新生脂肪细胞较少，而移植进裸鼠体内的Coleman脂肪移植物上则可观察到大量成熟脂肪细胞新生。从而可以说明，上述实施例制备得到的AMC在体内移植中的远期保存并不依赖于体内成脂。
(3)AMC体内移植的ECM保存情况、胶原蛋白再生及组织刚度检测：
以Coleman脂肪为对照，取上述实施例制备得到的AMC进行裸鼠体内移植，3个月后对移植物进行Masson染色和免疫组化染色，观察移植物中ECM保存情况、胶原蛋白再生情况及组织刚度检测。
结果如图20、21和22所示。
由Masson染色结果显示(图20)，与Coleman脂肪相比，上述实施例制备得到的AMC在裸鼠体内移植3个月后保存了更多的ECM。而根据免疫组织化学染色图(图21)，与Coleman脂肪相比，上述实施例制备得到的AMC在裸鼠体内移植后7～90d内，I型胶原由移植体从外向内逐渐增多(红线部分)，而移植了Coleman脂肪的裸鼠体内移植物中的I型胶原增长缓慢，在移植90d后，AMC组的I型胶原含量明显高于Coleman脂肪组(图22B和图22C)。
而在移植后两组移植物的硬度比较中(图22A)，上述实施例制备得到的AMC在裸鼠体内移植后，组织刚度始终高于Coleman脂肪组。此外，AMC在移植后始终保持较高的硬度，与移植前的AMC相似。
上述结果说明，上述实施例制备得到的AMC在体内移植中，远期主要是以ECM的保存模式为主。AMC移植后，受体(裸鼠)来源的I型胶原由外向内逐渐替代供体(AMC)的胶原，移植后，AMC中I型胶原含量(>60％)将始终高于Coleman脂肪组。而且，由于I型胶原是提供ECM主要刚性支撑的胶原类型，故可以说明移植后AMC的组织刚度始终高于Coleman脂肪组。
临床应用验证
需要注意的是，本实施例中的临床研究方案得到南方医科大学南方医院人体实验评审委员会的批准。所有患者都在被充分告知利弊的情况下，签署了书面知情同意书。
纳入标注：
2019年3月至2020年3月期间就诊于南方医科大学南方医院整形外科的诊断为重度下颌后缩的患者。
共选取24名符合纳入标准的女性患者，使用上述实施例制备得到的AMC进行颏部填充。每个患者在手术前后均拍照对比，采用三维激光扫描仪和三维医学虚拟仿真系统评估手术后的体积变化，并用CASZM软件生成三维模型，测量精度约为0.05mm。记录治疗前后的图像，叠加成单一图像，计算出精确的体积变化。
随机抽取一名患者作为代表进行效果展示。
随机抽取的患者为30岁女性，对颏部长度和前突度均非常不满意，从图23A术前体位像中可以显示，该患者颏部严重后缩，颏后位距零子午线＞2cm，为III度颏后缩。
对该患者采用AMC颏部注射，注射量为13mL。
图23B为术后1年后的体位像，在AMC颏部注射术后1年，颏部AMC仍然有稳定的保留，该患者颏部长度和前突度均有明显改善，3D激光扫描仪评价AMC的保留率为65.85％。移植物的刚性支撑保持良好，患者主观感受无疼痛或其他任何不适。该患者对AMC注射隆颏术效果满意。
综上所述，上述实施例制备得到的AMC在脂肪移植或脂肪填充中具有极高的应用前景，其作用效果要优于现有的常规Coleman脂肪填充物。
上面结合附图对本发明实施例作了详细说明，但是本发明不限于上述实施例，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

Claims (10)

1.一种移植材料，其特征在于，所述移植材料包括胶原和纤维蛋白骨架，以及粘附于胶原和纤维蛋白骨架表面的基质血管成分细胞和生长因子。
2.根据权利要求1所述的移植材料，其特征在于，所述移植材料的刚度大于等于6kPa；所述移植材料的刚度优选为6kPa。
3.根据权利要求1所述的移植材料，其特征在于，所述移植材料中细胞外基质的体积比大于等于60％；所述移植材料中细胞外基质的体积比优选为70％。
4.根据权利要求1所述的移植材料，其特征在于，所述细胞外基质中胶原的体积比大于等于40％；所述细胞外基质中胶原的体积比优选为50％。
5.根据权利要求1所述的移植材料，其特征在于，所述移植材料中总细胞含量小于等于2.0×105个/mL，其中，内皮细胞约占1％；脂肪干细胞约占25％；成纤维细胞约占10％；血细胞约占2％。
6.一种脂肪移植材料的制备方法，包括如下步骤：
(1)分离脂肪组织中的脂肪粗大纤维组织；
(2)去除脂肪粗大纤维组织中的水分和油脂，破碎处理，即得。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中分离脂肪粗大纤维组织采用滤网过滤，其中，所述滤网的孔距为1.8-2.2mm。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中将脂肪粗大纤维组织转移至筛网中，采用吸附性材料物理吸附脂肪粗大纤维组织中的水分和油脂；其中，所述筛网的孔距小于等于150μm。
9.权利要求1-5任一项所述移植材料或权利要求6-8任一项所述的制备方法制备得到的脂肪移植材料在面部隆阔或塑形中的应用。
10.权利要求1-5任一项所述移植材料或权利要求6-8任一项所述的制备方法制备得到的脂肪移植材料在面部年轻化及软组织损伤修复中的应用。
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