CN114766433A - 一种培养无菌昆虫的方法 - Google Patents

一种培养无菌昆虫的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN114766433A
CN114766433A CN202210161237.2A CN202210161237A CN114766433A CN 114766433 A CN114766433 A CN 114766433A CN 202210161237 A CN202210161237 A CN 202210161237A CN 114766433 A CN114766433 A CN 114766433A
Authority
CN
China
Prior art keywords
insects
container
feed
sterile
sterilized
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202210161237.2A
Other languages
English (en)
Inventor
陈宝明
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN202210161237.2A priority Critical patent/CN114766433A/zh
Publication of CN114766433A publication Critical patent/CN114766433A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; CARE OF BIRDS, FISHES, INSECTS; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New breeds of animals
    • A01K67/033—Rearing or breeding invertebrates; New breeds of invertebrates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; CARE OF BIRDS, FISHES, INSECTS; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New breeds of animals
    • A01K67/033—Rearing or breeding invertebrates; New breeds of invertebrates
    • A01K67/04—Silkworms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L3/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
    • A23L3/26—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by irradiation without heating
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
    • A61L2/02—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor using physical phenomena
    • A61L2/08—Radiation
    • A61L2/081—Gamma radiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2202/00—Aspects relating to methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects
    • A61L2202/20—Targets to be treated
    • A61L2202/23—Containers, e.g. vials, bottles, syringes, mail

Abstract

本发明公开了一种培养无菌昆虫的方法，取足量的昆虫寄主或者饲料，将寄主或者饲料装入容器，将容器口用棉花或者封口膜封口，采用辐照灭菌对全容器及饲料进行灭菌，对昆虫卵进行消毒，将消毒后的昆虫卵通过无菌操作装入灭菌后的容器，正常培养即可。本发明方法简化了无菌昆虫的培养，节约人力，节约成本，提高了无菌昆虫的培养成功率。

Description

一种培养无菌昆虫的方法
技术领域
本发明涉及实验动物学领域的培育无菌昆虫的方法。
背景技术
本发明是实验动物学的无菌动物(Germ Free,GF)、悉生动物 (notobioticAnimals)、无菌操作。
无菌动物是指不能检出任何活的微生物和寄生虫的动物。
悉生动物是指含单菌、双菌、三菌或多菌的动物。
无菌动物、悉生动物用做实验动物，实验的准确性很高，需求量很大。
无菌操作是指在无菌室或超净工作台中进行以防止微生物进入人体或者污染供试菌的操作技术。无菌操作是各种生物实验和生产实践中一项重要的基本操作。
目前对于无菌动物的培养，人们致力于借助无菌隔离系统进行无菌哺乳动物和无菌鸟类的培养，这些动物的个体大，生长周期长，成本高；而在昆虫方面，主要完成了无菌家蚕(学名：Bombyx mori Linnaeus)、无菌黑腹果蝇(学名：Drosophila melanogaster)及无菌蜂类等少数种类昆虫的培养。对于大量其它昆虫的无菌培养不够重视。
已有的无菌家蚕、无菌果蝇及无菌蜜蜂的培养，人工饲料配方还在不断改进，高温灭菌破坏维生素等营养成分，培养难度较大。
目前的无菌家蚕、无菌果蝇及无菌蜜蜂的培养，投喂饲料过程易造成杂菌污染而造成培养失败，且无菌维持及无菌操作饲喂劳动量大。
无菌昆虫培养的滞后，阻碍了人类探索生物与生物之间相互关系的相关研究。
无菌昆虫和悉生昆虫，可揭示微生物对昆虫的生命活动影响。
在饲养过程中，无菌昆虫不会得传染病，不会被寄生，不会被天敌捕食，因而培养无菌昆虫用于生产有优势。
发明内容
本发明的目的是提供一种培养无菌昆虫的方法，简化了培养过程，提高了成功率，适用于多种昆虫。
本发明的技术方案是，一种培养无菌昆虫的方法，其特征是取足量的昆虫寄主或者饲料，将寄主或者饲料装入容器，将容器口封口，采用辐照灭菌对全容器及饲料进行灭菌，对昆虫卵进行消毒，将消毒后的昆虫卵通过无菌操作装入灭菌后的容器，常规培养即可。
进一步地，一次性装够昆虫一生所需的饲料。
进一步地，所述寄主或者饲料是昆虫采食的寄主。
进一步地，所述容器由能够阻挡微生物的材料制成。
进一步地，容器及饲料用辐照灭菌。
进一步地，将消毒后的昆虫卵通过无菌操作装入灭菌后的容器。
进一步地，饲料用喷雾补充水、无机盐或维生素。
进一步地，容器底部垫有吸水垫料。
本发明具有以下有益效果：
1、将消毒后的昆虫卵通过无菌操作装入灭菌后的容器，后期为常规培养，不需饲喂也不需再进行无菌操作。
2、由于饲料充足且灭菌，容器密封，透气口有棉花或封口膜，昆虫在卵期消毒，因而可以不用饲喂可以培养无菌昆虫。
3、由于一次性装够昆虫一生所需饲料，避免后期投喂饲料的复杂无菌操作，不用为维持无菌状态而使用隔离培养设备，简化步骤，节省人工劳动。
4、采用辐照灭菌明显优于传统的高压蒸汽灭菌。
5、直接用昆虫寄主喂养，优点是营养物质均衡适口，水分含量适中，昆虫采食后生长健壮，不用研制配方饲料，且明显降低成本，明显优于用人工饲料喂养。
附图说明
图1是培养无菌昆虫的装置示意图。
附图标号：1—棉花或人造棉或封口膜、2—昆虫生活空间、3—饲料或昆虫寄主、4—无菌昆虫、5—容器、6—昆虫粪粒。
具体实施方式
下面结合附图具体说明本发明的实施方案。
如图1所示，本发明培养无菌昆虫的方法，采用玻璃、塑料、树脂等不透微生物的材料为容器5，实验证明，装矿泉水的塑料瓶质轻价廉，开口大小既满足透气又可保持水分不大量丢失，在长达数月的培养中不用补水，可实现傻瓜式免维护培养，例如，500毫升，瓶口开口直径30毫米的矿泉水瓶可以饲养一只长尾大蚕蛾(学名：Actias dubernardiOberthur)，可以满足一只长尾大蚕蛾从卵到蛹所需的空间2要求、保水要求和透气要求。
饲料3，可以是人工配方的饲料，也可以是新鲜的昆虫寄主材料，一次性装够昆虫一生所需饲料，避免后期投喂饲料的复杂无菌操作，不用为维持无菌状态而使用隔离培养设备，简化步骤，节省人工劳动，例如，培养一只长尾大蚕蛾需要装约60g的寄主雪松(学名：Cedrus deodara(Roxb.)G.Don)枝叶，为防止水分的少量蒸发导致培养后期缺水，可以给雪松枝叶雾化喷水，为防止水分过量，可给容器底部垫卫生纸等吸水垫料，为昆虫健康发育，可给饲料雾化喷水时添加维生素进行强化，实验发现，长尾大蚕蛾不用添加维生素即可发育形成蚕茧，装填饲料时，长尾大蚕蛾需要装攀爬所需的树枝以便蜕皮时攀附。
直接用寄主，优点是营养物质均衡适口，水分含量适中，昆虫采食后生长健壮，不用研制配方饲料，且明显降低成本，用昆虫寄主喂养明显优于用人工饲料喂养。
在容器5内寄主或饲料3的旁边放一小块棉花，用于后期接种昆虫卵，白色棉花既方便后期观察卵的孵化情况，又不会使卵掉落瓶底而沾水，长尾大蚕蛾卵沾湿水不利于卵的孵化。
实验发现棉花、人造棉或者组织培养用封口膜1都可以满足通气、保水和阻挡微生物的要求，实验还发现，棉花或人造棉要塞紧，水分的损失小，由于是无菌状态，容器5内没有微生物耗氧，只有无菌昆虫耗氧，棉花、人造棉1可以塞紧，瓶口可以开口相对较小，实验还发现，600ml容器开口直径为40mm，培养后期缺水，长尾大蚕蛾幼虫死于三龄，死后不腐烂，仍然保持无菌状态，并随时间推移虫体干燥缩短。
封入饲料3后，进行辐照灭菌，通常采用伽马射线辐照灭菌，灭菌效果好，对微生素破坏小，例如，长尾大蚕蛾的饲料3，雪松枝叶，用钴-60(60Co)进行25KGy剂量辐照就可取得很好的灭菌效果，在长达几个月的储存和培养中，几乎没有出现杂菌，无菌状态也不需要清理粪粒6，而高温灭菌易破坏维生素，如果等饲料3降温至70摄氏度以下加入维生素又易感染杂菌，辐照灭菌明显优于传统的高压蒸汽灭菌。
将昆虫卵消毒，在超净工作台上，采用无菌操作，将消毒后的昆虫卵装入灭菌后的容器5中，观察昆虫4的发育，
经过实验摸索，卵要多放，以防严格消毒导致的卵孵化率降低，多余孵化出的幼虫，可以用凸透镜聚光，从容器5外杀死，既防止杂菌污染又不会造成生长后期饲料3不够吃，例如，500毫升至600毫升的矿泉水瓶，可以装入三粒长尾大蚕蛾消毒卵，1500毫升矿泉水瓶，可以装入五粒长尾大蚕蛾消毒卵，最后500毫升至600毫升的矿泉水瓶留一只发育的健康幼虫4，1500毫升矿泉水瓶里可以留二至三只发育健康的幼虫4，处死多余的幼虫。
给容器5进行标记，标明昆虫4名称，数量，日期等信息。
根据昆虫生活习性，将容器5放在温度、光照适宜的环境培养。
培养过程中，早期尤其注意卵的孵化情况，幼虫期的早期，尤其注意通过容器底部的粪粒6来判断孵化率和生长情况，对于没有卵孵化的容器及时进行补种。
容器5内有杂菌污染的，培养无菌昆虫4即终止。
没有杂菌污染的，进行无菌检测和验证。
根据不同种的昆虫生长发育规律，采用不同的容器5，例如，长尾大蚕蛾的蛹需要羽化展翅，因而需要更大的容器5。
不同的昆虫，或者其它动物，无菌培养的方法，大同小异。
总之，培养无菌昆虫的方法，不用配饲料，不用高温灭菌，成本低，效率高，步骤简化，节约劳动力，培养周期比培养无菌哺乳动物和鸟类短，更适合生产和科学研究。

Claims (8)

1.一种培养无菌昆虫的方法，其特征是取足量的昆虫寄主或者饲料，将寄主或者饲料装入容器，将容器口封口，采用辐照灭菌对全容器及饲料进行灭菌，对昆虫卵进行消毒，将消毒后的昆虫卵通过无菌操作装入灭菌后的容器，常规培养即可。
2.如权利要求1所述的培养无菌昆虫的方法，其特征是一次性装够昆虫一生所需的饲料。
3.如权利要求1所述的培养无菌昆虫的方法，其特征是所述寄主或者饲料是昆虫采食的寄主。
4.如权利要求1所述的培养无菌昆虫的方法，其特征是所述容器由能够阻挡微生物的材料制成。
5.如权利要求1所述的培养无菌昆虫的方法，其特征是容器及饲料用辐照灭菌。
6.如权利要求1所述的培养无菌昆虫的方法，其特征是将消毒后的昆虫卵通过无菌操作装入灭菌后的容器。
7.如权利要求1所述的培养无菌昆虫的方法，其特征是饲料用喷雾补充水、无机盐或维生素。
8.如权利要求1所述的培养无菌昆虫的方法，其特征是容器底部垫有吸水垫料。
CN202210161237.2A 2022-02-22 2022-02-22 一种培养无菌昆虫的方法 Pending CN114766433A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210161237.2A CN114766433A (zh) 2022-02-22 2022-02-22 一种培养无菌昆虫的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210161237.2A CN114766433A (zh) 2022-02-22 2022-02-22 一种培养无菌昆虫的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114766433A true CN114766433A (zh) 2022-07-22

Family

ID=82423699

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210161237.2A Pending CN114766433A (zh) 2022-02-22 2022-02-22 一种培养无菌昆虫的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114766433A (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104322451A (zh) * 2014-08-20 2015-02-04 广东省昆虫研究所 一种冬虫夏草寄主昆虫蝙蝠蛾的人工低海拔饲养方法
CN105843031A (zh) * 2016-03-22 2016-08-10 陈宝明 耳道内语音报时表
CN111248154A (zh) * 2020-02-06 2020-06-09 安徽农业大学 一种利用组培技术制备肠道无菌昆虫幼虫模型的方法
CN113455468A (zh) * 2021-06-23 2021-10-01 重庆欣时达生物技术有限公司 一种无菌冬虫夏草寄主幼虫的产业化饲养方法
CN214546651U (zh) * 2021-04-02 2021-11-02 宁夏盈德黄花研究院有限公司 一种用于带状种植林果园育蜂灭害装置

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104322451A (zh) * 2014-08-20 2015-02-04 广东省昆虫研究所 一种冬虫夏草寄主昆虫蝙蝠蛾的人工低海拔饲养方法
JP2017504353A (ja) * 2014-08-20 2017-02-09 広東省昆虫研究所 冬虫夏草の宿主昆虫であるコウモリガ科蛾の人工低海抜培養方法
CN105843031A (zh) * 2016-03-22 2016-08-10 陈宝明 耳道内语音报时表
CN111248154A (zh) * 2020-02-06 2020-06-09 安徽农业大学 一种利用组培技术制备肠道无菌昆虫幼虫模型的方法
CN214546651U (zh) * 2021-04-02 2021-11-02 宁夏盈德黄花研究院有限公司 一种用于带状种植林果园育蜂灭害装置
CN113455468A (zh) * 2021-06-23 2021-10-01 重庆欣时达生物技术有限公司 一种无菌冬虫夏草寄主幼虫的产业化饲养方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
胡建华, 上海科学技术出版社 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Luckey Germfree life and gnotobiology
CN102388843B (zh) 一种室内饲养鳞翅目昆虫幼虫的方法
RU2420063C2 (ru) Способ инкубации и выведения яиц
CN102812923A (zh) 一种林下围网放养优质肉鸡的方法
CN104798737B (zh) 一种桑蚕养殖方法
CN106437222A (zh) 一种促进生态平衡的种养殖无缝链接循环模式
CN101015290B (zh) 野桑蚕的室内饲养方法
KR100524413B1 (ko) 파리성충 사육장치, 이를 포함하는 파리기생천적의 대량사육 시스템, 상기 파리기생천적을 포함하는 파리기생천적방사용기 및 이를 이용한 파리 방제방법
KR20070100565A (ko) 거저리과를 대체기주로 이용한 솔수염하늘소기생천적의대량사육시스템, 솔수염하늘소기생천적의 대량사육방법 및상기 솔수염하늘소기생천적을 포함하는 방사용기
Williams In ovo vaccination and chick quality
CN110447605A (zh) 一种螟黄赤眼蜂的高效繁殖方法
CN109122602A (zh) 一种桑蚕的饲养方法
KR100786021B1 (ko) 파리포식천적 대량사육장치
CN107509687A (zh) 产蛋鸡饲养管理方法
CN110506704A (zh) 一种生态放养鸡的养殖技术
CN112753658B (zh) 利用樟蚕卵室内繁殖松毛虫赤眼蜂的方法
CN110050732A (zh) 一种实验鱼类的水族箱养殖方法
CN202232599U (zh) 一种室内饲养鳞翅目昆虫幼虫的装置
Dozier et al. Bobwhite quail production and management guide
CN114766433A (zh) 一种培养无菌昆虫的方法
WO2023103304A1 (zh) 一种二化螟室内稻苗精准规模化饲养方法
CN112868607B (zh) 白蛾周氏啮小蜂繁育坏蛹病控制方法
KR20070106838A (ko) 반날개과 대량사육방법 및 반날개과 상품용기
CN108077161A (zh) 一种蛋鸡的室内养殖方法
JP2005192550A (ja) 動植物の飼育施設及びそれを用いて飼育された動植物、活性化ガス発生装置、並びに、動植物の飼育方法及びその方法により飼育された動植物

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination