CN114755347A - 一种中链甘油三酯的快速检测方法及其自动化前处理设备 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及中链甘油三酯检测技术领域,尤其是涉及一种中链甘油三酯的快速检测方法及其自动化前处理设备,包括以下步骤:S1:配制A、B、C、D四种溶液分别为:A溶液:正庚烷;B溶液:纯水;C溶液:亚铁氰化钾溶液;D溶液:硫酸锌溶液;S2:准备好所需的离心管、移液枪和移液枪枪头;S3:称取固定样品,使用B溶液溶解定容至形成稀释液,将稀释液取出放进容器中,加入A溶液,充分振荡,使其成为乳浊液,取上述乳浊液于离心管中,加入C溶液和D溶液,混合均匀,依次进行旋涡处理和离心处理,取上清液过0.45μm有机相滤膜至进样小瓶,供气相色谱‑质谱联用仪分析。本发明还提供一种实现中链甘油三酯的快速检测方法的自动化前处理设备。
Description
技术领域
本发明涉及中链甘油三酯检测技术领域,尤其是涉及一种中链甘油三酯的快速检测方法及其自动化前处理设备。
背景技术
国内医学领域对血液中甘油的检测方法通常为酶检测法或者化学检测法,仅仅在甘油检测中标准品校准时会采用气相色谱法作为部分机构的内部标准使用。而甘油的酶检测方法以及化学方法,相对落后,定性定量不准确,重现性差,检测灵敏度低,无法检测微量甘油。更重要的是即便检测了甘油,但无法区分中链与长链。医学领域检测甘油的方法不能应用于医学食品中链甘油的检测。国内现行有效食品检测中没有“中链甘油三酯”的检测方法,甚至缺少甘油三酯的检测方法,仅有脂肪酸的检测方法。利用脂肪酸的方法检测甘油三酯不符合检测标准要求。虽然脂肪酸是甘油三酯重要的组成成分,在长链甘油中,长链脂肪酸的分子量巨大,长链脂肪酸与长链甘油三酯含量差异在10%以下。但在中链甘油三酯中,因为中链脂肪酸的分子量相对较小,直接使用中链脂肪酸的含量作为中链甘油三酯的含量误差在15%之上,不适用于中链脂肪酸的检测。在医学食品中,凡是添加有MCT的产品,均将MCT作为功能成分,对产品功能起到非常大的作用。但是缺少现行有效的检测标准,导致产品中标注的所谓“高MCT”含量,难以界定。医用食品基质复杂,油脂成份复杂,MCT难以直接提取,首先需要提取出总油脂,然后分析总油脂中的MCT,步骤繁琐,检测周期长,如何优化步骤,简化流程,同时保证检测精度是本研究需要克服的难点之一。提取MCT后,必须经过水解成脂肪酸与甘油,脂肪酸再经甲酯化后使用气质色谱检测,多步反应的选择与条件控制,直接影响检测的精确度与重现性,是本研究难点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种中链甘油三酯的快速检测方法,不但能够保留时间定性,更增加了核质比定性,定性更加准确。本发明还提供一种中链甘油三酯的快速检测方法的自动化前处理设备。
本发明提供一种中链甘油三酯的快速检测方法,包括以下步骤:
S1:配制A、B、C、D四种溶液分别为:
A溶液:正庚烷;
B溶液:纯水;
C溶液:亚铁氰化钾溶液;
D溶液:硫酸锌溶液;
S2:准备好所需的离心管、移液枪和移液枪枪头;
S3:称取固定样品,使用B溶液溶解定容至形成稀释液,将稀释液取出放进容器中,加入A溶液,充分振荡,使其成为乳浊液,取上述乳浊液于离心管中,加入C溶液和D溶液,混合均匀,依次进行旋涡处理和离心处理,取上清液过0.45μm有机相滤膜至进样小瓶,供气相色谱-质谱联用仪分析。
优选地,步骤S3具体的过程如下:称取固定样品,使用B溶液溶解定容至50ml形成稀释液,将稀释液取出放进容器中,加入A溶液50ml,充分振荡,使其成为乳浊液,取20ml上述乳浊液于离心管中,加入2ml的C溶液和2ml的D溶液,混合均匀,依次进行旋涡处理和离心处理,取上清液过0.45μm有机相滤膜至进样小瓶,供气相色谱-质谱联用仪分析。
优选地,所述旋涡处理的时间为3-5分钟,所述;所述离心处理的时间为15-20分钟。
一种实现中链甘油三酯的快速检测方法的自动化前处理设备,包括设备主体,所述设备主体的一侧为工具放置区域,另一侧为处理区域,所述处理区域包括离心涡旋一体机,所述离心涡旋一体机包括样品工作台、涡旋平台和马达,所述样品工作台的底部设有工作台主轴,所述工作台主轴套设在所述涡旋平台的边缘处,所述涡旋平台的底部设有支撑其转动的涡旋主轴,所述马达的传动轴上套设有与传动轴同轴转动的转盘,所述转盘的上表面与所述工作台主轴通过曲柄连接,所述曲柄的一端套设于所述工作台主轴上并与其转动连接,所述曲柄的另一端与所述转盘的上表面可拆卸固定连接;所述离心涡旋一体机还包括传动装置,所述传动装置用于将马达传动轴的动力传递给工作台主轴,使得样品工作台做高速轴运动,完成离心功能。
优选地,所述曲柄靠近转盘的一端设有与所述转盘相接触的电磁滑动锁定装置,电磁滑动锁定装置包括电磁铁滑块,电磁铁滑块与所述曲柄转动连接;
旋涡处理阶段时,所述电磁铁滑块使得曲柄与转盘锁死,完成传动;
离心处理阶段时,所述电磁铁滑块结束固定连接,打开所述转盘与所述曲柄的连接,确保离心阶段时,所述曲柄不传动。
优选地,所述传动装置设在所述转盘的下方并可上下垂直移动。
优选地,所述传动装置包括第一圆柱齿轮、第二圆柱齿轮、第一端面齿轮和第二端面齿轮,所述第一圆柱齿轮套设在所述马达传动轴上,所述第二圆柱齿轮设在所述马达传动轴与所述工作台主轴之间并与所述第一圆柱齿轮啮合,所述第一端面齿轮设在所述工作台主轴的底部,所述第二端面齿轮设在所述第一端面齿轮下方并与所述第一端面齿轮啮合连接,所述第二圆柱齿轮与所述第二端面齿轮通过连杆连接,所述连杆的两端分别与所述第二圆柱齿轮的底部和所述第二端面齿轮的底部转动连接,当第二圆柱齿轮转动时通过连杆的传递使得第二端面齿轮一同转动。
优选地,所述样品工作台内设有管架用于放置离心管。
优选地,所述管架与所述样品工作台可拆卸连接,可以完成拆卸替换,适用不同大小的离心管。
优选地,所述工具放置区域内设有试剂瓶、移液枪、离心管存放箱和消耗品存放箱,所述消耗品存放箱用于存放移液枪枪头。
有益效果:
本发明提供了快速、简便的检测中链甘油三酯的前处理方法,利用气相色谱对中链甘油三酯的含量进行了测定,样品无需进行甲酯化等多步反应,可以方便、快速的完成“无需衍生化的中链甘油三酯的气质联用仪检测方法”前处理过程,迅速、高效的完成前处理步骤。不但能够保留时间定性,更增加了核质比定性,定性更加准确。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施方式,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明设备主体的整体示意图;
图2为本发明中离心涡旋一体机内部结构示意图;
图3为本发明中涡旋平台与转盘连接关系示意图;
图4为本发明中传动装置示意图;
图5为本发明中第一端面齿轮与第二端面齿轮位置关系示意图。
附图标记说明:1-设备主体、2-离心涡旋一体机、3-样品工作台、4-涡旋平台、5-马达、6-工作台主轴、7-涡旋主轴、8-转盘、9-传动装置、901-第一圆柱齿轮、902-第二圆柱齿轮、903-第一端面齿轮、904-第二端面齿轮、10-曲柄、11-电磁滑动锁定装置、12-管架、13-试剂瓶、14-移液枪、15-离心管存放箱、16-消耗品存放箱、17-调平装置、18-马达传动轴、19-连杆。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
在本发明的描述中,需要理解的是,术语“中心”、“纵向”、“横向”、“长度”、“宽度”、“厚度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”、“顺时针”、“逆时针”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。
此外,术语“第一”、“第二”仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个所述特征。在本发明的描述中,“多个”的含义是两个或两个以上,除非另有明确具体的限定。此外,术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解,例如,可以是固定连接,也可以是可拆卸连接,或一体地连接;可以是机械连接,也可以是电连接;可以是直接相连,也可以通过中间媒介间接相连,可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言,可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
实施例1
一种中链甘油三酯的快速检测方法,包括以下步骤:
S1:配制A、B、C、D四种溶液分别为:
A溶液:正庚烷;
B溶液:纯水;
C溶液:亚铁氰化钾溶液;
D溶液:硫酸锌溶液;
S2:准备好所需的离心管、移液枪和移液枪枪头;
S3:称取固定样品,使用B溶液溶解定容至50ml形成稀释液,将稀释液取出放进容器中,加入A溶液50ml,充分振荡,使其成为乳浊液,取20ml上述乳浊液于离心管中,加入2ml的C溶液和2ml的D溶液,混合均匀,依次进行旋涡处理和离心处理,旋涡处理的时间为3分钟,离心处理的时间为15分钟,取上清液过0.45μm有机相滤膜至进样小瓶,供气相色谱-质谱联用仪分析。
一种用于实现上述中链甘油三酯的快速检测方法的自动化前处理设备,包括设备主体1,如图1所示,设备主体1的一侧为工具放置区域,另一侧为处理区域。工具放置区域内分别设有试剂瓶13、离心管存放箱15和消耗品存放箱16,试剂瓶13设有四个,分别盛放A、B、C和D四种溶液,配有1把10ml移液枪14可以完成前处理操作的全部移液需求,消耗品存放箱16用于存放移液枪枪头,离心管存放箱15可以存放50ml离心管。
如图2-3所示,处理区域包括离心涡旋一体机2,离心涡旋一体机2包括样品工作台3、涡旋平台4和马达5,样品工作台3内设有管架12用于放置离心管,管架12与样品工作台3可拆卸连接,可以完成拆卸替换,适用不同大小的离心管。设备主体1的底部还设有调平装置17,保证样品工作台3离心转动时的稳定性。样品工作台3的底部设有工作台主轴6,工作台主轴6套设在涡旋平台4的边缘处,涡旋平台4的底部设有支撑其转动的涡旋主轴7,马达传动轴18上套设有与其同轴转动的转盘8,转盘8的上表面与工作台主轴6通过曲柄10连接,曲柄10的一端套设于工作台主轴6上并与其转动连接,曲柄10的另一端与转盘8的上表面可拆卸固定连接;离心涡旋一体机2还包括传动装置9,传动装置9设在转盘8的下方并可上下垂直移动。传动装置9用于将马达传动轴18的动力传递给工作台主轴6,使得样品工作台3做高速轴运动,完成离心功能。曲柄10靠近转盘8的一端设有与转盘8相接触的电磁滑动锁定装置11,电磁滑动锁定装置11包括电磁铁滑块;旋涡处理阶段时,电磁铁滑块使得曲柄10与转盘8锁死,完成传动;离心阶段时,电磁铁滑块滑动,打开转盘8与曲柄10的连接,确保离心阶段时,曲柄10不传动。
如图4-5所示,传动装置9包括第一圆柱齿轮901、第二圆柱齿轮902、第一端面齿轮903和第二端面齿轮904,第一圆柱齿轮901套设在马达传动轴18上,第二圆柱齿轮902设在马达传动轴18与工作台主轴6之间并与第一圆柱齿轮901啮合,第一端面齿轮903设在工作台主轴6的底部,第二端面齿轮904设在第一端面齿轮903下方并与第一端面齿轮903啮合连接,第二圆柱齿轮902与第二端面齿轮904通过连杆19连接,连杆19的两端分别与第二圆柱齿轮902的底部和第二端面齿轮904的底部转动连接,当第二圆柱齿轮902转动时通过连杆19的传递使得第二端面齿轮904一同转动。
工作和使用过程:
利用工具放置区域内的各种工具来配制需要进行前处理的溶液并盛放在离心管中,将离心管放置在管架12上备用,打开盖子将管架12放置于样品工作台3内部。首先进行旋涡处理:旋涡处理阶段时,电磁滑动锁定装置11通电,电磁铁滑块使得曲柄10与转盘8锁死,完成传动,启动马达5,马达传动轴18带动转盘8进行转动,通过曲柄10的传动作用,将力传导到工作台主轴6,因为工作台主轴6套设在涡旋平台4上,进而带动涡旋平台4绕着涡旋主轴7进行转动,此时设在工作台主轴6上的样品工作台3进行旋涡运动,完成整个旋涡处理过程。
旋涡处理过程结束之后,电磁滑动锁定装置11断电,电磁铁滑块结束固定连接,打开所述转盘8与曲柄10的连接,确保离心阶段时,曲柄10不传动。传动装置9向上移动,第二圆柱齿轮902与第一圆柱齿轮901完成啮合,第二端面齿轮904与第一端面齿轮903完成啮合,随后启动马达5,马达传动轴18转动带动第一圆柱齿轮901旋转,与之啮合的第二圆柱齿轮902同时进行转动,通过连杆19的传动,第二端面齿轮904也进行旋转,进而与第二端面齿轮904啮合的第一端面齿轮903进行旋转,最终设在第一端面齿轮903上部的工作台主轴6带动样品工作台3完成离心旋转运动。
最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (10)
1.一种中链甘油三酯的快速检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:配制A、B、C、D四种溶液分别为:
A溶液:正庚烷;
B溶液:纯水;
C溶液:亚铁氰化钾溶液;
D溶液:硫酸锌溶液;
S2:准备好所需的离心管、移液枪和移液枪枪头;
S3:称取固定样品,使用B溶液溶解定容至形成稀释液,将稀释液取出放进容器中,加入A溶液,充分振荡,使其成为乳浊液,取上述乳浊液于离心管中,加入C溶液和D溶液,混合均匀,依次进行旋涡处理和离心处理,取上清液过0.45μm有机相滤膜至进样小瓶,供气相色谱-质谱联用仪分析。
2.根据权利要求1所述的中链甘油三酯的快速检测方法,其特征在于,步骤S3具体的过程如下:称取固定样品,使用B溶液溶解定容至50ml形成稀释液,将稀释液取出放进容器中,加入A溶液50ml,充分振荡,使其成为乳浊液,取20ml上述乳浊液于离心管中,加入2ml的C溶液和2ml的D溶液,混合均匀,依次进行旋涡处理和离心处理,取上清液过0.45μm有机相滤膜至进样小瓶,供气相色谱-质谱联用仪分析。
3.根据权利要求1所述的中链甘油三酯的快速检测方法,其特征在于,所述旋涡处理的时间为3-5分钟,所述;所述离心处理的时间为15-20分钟。
4.一种用于实现权利要求1-3任一所述中链甘油三酯的快速检测方法的自动化前处理设备,其特征在于,包括设备主体,所述设备主体的一侧为工具放置区域,另一侧为处理区域,所述处理区域包括离心涡旋一体机,所述离心涡旋一体机包括样品工作台、涡旋平台和马达,所述样品工作台的底部设有工作台主轴,所述工作台主轴套设在所述涡旋平台的边缘处,所述涡旋平台的底部设有支撑其转动的涡旋主轴,所述马达的传动轴上套设有与传动轴同轴转动的转盘,所述转盘的上表面与所述工作台主轴通过曲柄连接,所述曲柄的一端套设于所述工作台主轴上并与其转动连接,所述曲柄的另一端与所述转盘的上表面可拆卸固定连接;所述离心涡旋一体机还包括传动装置,所述传动装置用于将马达传动轴的动力传递给工作台主轴,使得样品工作台做高速轴运动,完成离心功能。
5.根据权利要求4所述的自动化前处理设备,其特征在于,所述曲柄靠近转盘的一端设有与所述转盘相接触的电磁滑动锁定装置,电磁滑动锁定装置包括电磁铁滑块,电磁铁滑块与所述曲柄转动连接;
旋涡处理阶段时,所述电磁铁滑块使得曲柄与转盘锁死,完成传动;
离心处理阶段时,所述电磁铁滑块结束固定连接,打开所述转盘与所述曲柄的连接,确保离心阶段时,所述曲柄不传动。
6.根据权利要求4所述的自动化前处理设备,其特征在于,所述传动装置设在所述转盘的下方并可上下垂直移动。
7.根据权利要求6所述的自动化前处理设备,其特征在于,所述传动装置包括第一圆柱齿轮、第二圆柱齿轮、第一端面齿轮和第二端面齿轮,所述第一圆柱齿轮套设在所述马达传动轴上,所述第二圆柱齿轮设在所述马达传动轴与所述工作台主轴之间并与所述第一圆柱齿轮啮合,所述第一端面齿轮设在所述工作台主轴的底部,所述第二端面齿轮设在所述第一端面齿轮下方并与所述第一端面齿轮啮合连接,所述第二圆柱齿轮与所述第二端面齿轮通过连杆连接,所述连杆的两端分别与所述第二圆柱齿轮的底部和所述第二端面齿轮的底部转动连接,当第二圆柱齿轮转动时通过连杆的传递使得第二端面齿轮一同转动。
8.根据权利要求4所述的自动化前处理设备,其特征在于,所述样品工作台内设有管架用于放置离心管。
9.根据权利要求8所述的自动化前处理设备,其特征在于,所述管架与所述样品工作台可拆卸连接,可以完成拆卸替换,适用不同大小的离心管。
10.根据权利要求4所述的自动化前处理设备,其特征在于,所述工具放置区域内设有试剂瓶、移液枪、离心管存放箱和消耗品存放箱,所述消耗品存放箱用于存放移液枪枪头。
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