CN114728997A - 高纯度2’-脱氧-2’,2’-二氟四氢尿苷及其制造方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及合成具有增加的纯度和均匀粒度分布的2'‑脱氧‑2',2'‑二氟四氢尿苷的方法。特别地，本发明的方法包括提供合成反应中间体的结晶和分离程序。本发明进一步包括包含高纯度形式的最终化合物的组合物，其包括较低数量的杂质和较低水平的单个和总杂质。

Description

高纯度2’-脱氧-2’,2’-二氟四氢尿苷及其制造方法

优先权声明

本申请要求于2019年10月8日提交的美国临时申请序列号62/912,317的权益，其全部内容通过援引并入本文。

技术领域

本发明涉及合成具有增加的纯度和均匀粒度分布的2'-脱氧-2',2'-二氟四氢尿苷的方法。特别地，本发明的方法包括提供合成反应中间体以及高纯度形式的最终化合物的结晶和分离程序。

背景技术

若干重要的化学治疗化合物是核苷酸胞苷的类似物，包括地西他滨、吉西他滨、5-氮杂胞苷、ara-C、替扎他滨、5-氟-2'-脱氧胞苷和cytchlor。作为胞苷的类似物，这些化合物受到酶胞苷脱氨酶(CDA)的降解，该酶将化合物降解为无活性的代谢物。CDA的存在限制了胞苷类似物的有效性，需要给药更高和/或更频繁的类似物剂量以实现治疗益处。

克服该问题的一种方法是将CDA抑制剂与胞苷类似物共同给药，从而阻断类似物的降解。一类CDA抑制剂是2'-脱氧-2',2'-二氟四氢尿苷化合物。美国专利号8,268,800(通过援引以其整体并入本文)公开了此类化合物，包括化合物1：

存在更有效的方法的需要，该方法用于生产用于治疗癌症和其他疾患的方法中的用途的CDA抑制剂，诸如2'-脱氧-2',2'-二氟四氢尿苷。

发明内容

本发明涉及开发一种更有效的用于合成2'-脱氧-2',2'-二氟四氢尿苷化合物和参与合成的中间体的方法。由于使用低效的转移氢化过程和使用制备型HPLC来分离最终化合物，本领域中以前的合成方法是不方便的。本发明的发明人开发了一种效率改善的合成方法，其实现了通过沉淀或结晶来纯化最终化合物的能力，例如结晶诱导的非对映选择性转化(CIDT)，其将差向异构体的混合物转化为所需的化合物，并且因此导致所需差向异构体的产率提高(参见WO 2015/066162)。本发明通过减少杂质、改善产率、缩短反应时间和/或以其他方式改善工业规模生产的条件来改善该方法。

本发明的另一方面涉及一种生产化合物1(命名为(4R)-1-[(2R,4R,5R)-3,3-二氟-4-羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基]-4-羟基四氢嘧啶-2(1H)-酮))或其盐的方法：

包括以下步骤：

(a)将式IV的起始化合物氢化：

其中R是羟基保护基团，

以产生式IIa的化合物：

(b)将所述式IIa的化合物还原，以产生式IIIa的化合物：

(c)将所述式IIIa的化合物去保护，以产生化合物2：

以及

(d)在催化剂存在下使化合物2沉淀或结晶，以产生化合物1：

或其盐；

其中所述方法包括以下中的一个或多个，以任何组合：

(i)其中氢化步骤(a)在氢气气氛下使用钯催化剂进行；

(ii)其中还原步骤(b)在约-12℃至约-5℃的温度下进行；

(iii)其中去保护步骤(c)在有机碱存在下进行；和/或

(iv)其中来自去保护步骤(c)的去保护的化合物的后处理在非水性条件下进行。在一些实施方式中，本发明进一步包括其中使最终产物重结晶的步骤，并且所述重结晶在约6.0至约7.4的pH下进行，并通过在约50℃至约55℃的温度下溶解最终产物以产生溶液以及然后将所述溶液冷却至约5℃来进行。

本发明的另外方面涉及高纯度化合物1(例如具有至少约80％，例如至少约85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％或99.9％的纯度的化合物1)：

或其盐。可以通过本发明的方法生产高纯度化合物1。本发明的其他方面涉及与通过现有方法生产的化合物1相比包括较低数量的杂质和/或较低水平的单个和总杂质的化合物1。

具体实施方式

现在将在下文中参考所附实例来描述本发明，其中示出了本发明的实施方式。然而，本发明可以以许多不同的形式来体现并且不应被解释为限于本文所阐述的实施方式。

除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的技术人员通常理解的相同含义。在本文的本发明的描述中使用的术语仅用于描述具体实施方式的目的，并不旨在限制本发明。

除非上下文另有说明，否则本文描述的本发明的各种特征特别旨在可以以任何组合使用。此外，本发明还考虑在本发明的一些实施方式中，可以排除或省略本文阐述的任何特征或特征组合。为了说明，如果说明书陈述组合物包括组分A、B和C，则特别旨在A、B或C中的任一种或其组合可以单独或以任何组合被省略和放弃。

出于本文的目的，如果在书面化学名称和绘制的化学结构之间存在任何歧义，则将限制绘制的化学结构。

定义

如本文所用，“一/多个/种(a)”、“一/多个/种(an)”或“该/所述(the)”可以意指一个/种或多于一个/种。例如，化合物可以意指单一化合物或多种化合物。

同样如本文所用，“和/或”是指并涵盖一个或多个相关列出的项目的任何和所有可能的组合，以及当解释为可替代方案(“或”)时缺少组合。

如本文所用，术语“约”在是指可测量值诸如剂量的量(例如，化合物的量)等时，意指涵盖指定量的±10％、±5％、±1％、±0.5％或甚至±0.1％的变化。

如本文所用，术语“包括(comprise)”、“包括(comprises)”和“包括(comprising)”指定存在陈述的特征、整数、步骤、操作、要素和/或组分，但不排除存在或添加一个或多个其他特征、整数、步骤、操作、要素、组分和/或其组。

如本文所用，过渡短语“基本上由……组成(consisting essentially of)”意指权利要求的范围应解释为涵盖权利要求中所述的指定材料或步骤以及不实质地影响所要求保护的发明的一种或多种基本且新颖的特征的那些。因此，当在权利要求或本发明的描述中使用时，术语“基本上由……组成”不旨在被解释为等同于“包括(comprising)”。

如本文所用，术语“增加(increase)”、“增加(increases)”、“增加(increased)”、“增加(increasing)”和类似术语表示至少约25％、50％、75％、100％、150％、200％、300％、400％、500％或更多的升高。

如本文所用，术语“减少(reduce)”、“减少(reduces)”、“减少(reduced)”、“减少(reduction)”和类似术语意指至少约5％、10％、15％、20％、25％、35％、50％、75％、80％、85％、90％、95％、97％或更多的降低。在具体实施方式中，减少导致没有或基本上没有(即，微不足道的量，例如，小于约10％或甚至5％)可检测的活性或量。

术语“其盐”包括药学上可接受的盐。术语“药学上可接受的盐”应意指本发明中使用的化合物的无毒盐，其通常通过游离酸与合适的有机或无机碱或游离碱与合适的有机或无机酸反应制备。这样的盐的实例包括但不限于乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、钙、依地酸钙、樟磺酸盐、碳酸盐、氯化物、克拉维酸盐、柠檬酸盐、二盐酸盐、依地酸盐(edetate)、乙二磺酸盐(edisylate)、依托酸盐(estolate)、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰基对氨基苯基胂酸盐(glycollylarsanilate)、己基间苯二酚盐(hexylresorcinate)、哈胺(hydrabamine)、氢溴酸盐、盐酸盐、羟基萘甲酸盐(hydroxynapthoate)、碘化物、异硫代硫酸盐(isothionate)、乳酸盐、乳糖醛酸盐(lactobionate)、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、粘酸盐(mucate)、萘磺酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐(pamoate)、棕榈酸盐、泛酸盐(panthothenate)、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、钾、水杨酸盐、钠、硬脂酸盐、次乙酸盐、琥珀酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐(teoclate)、甲苯磺酸盐、三乙基碘(triethiodide)和戊酸盐。

如本文所用，术语“布朗斯特-劳里碱(Bronsted-Lowry base)”是指具有接受质子能力的物质。

如本文所用，术语“羟基保护基团”可以是任何合适的羟基保护基团，即本领域已知的在合成程序期间保护羟基基团免受不希望的反应的不稳定化学部分。在一个或多个所述合成程序之后，可以选择性地除去如本文所述的保护基团(blocking group)。参见，例如A.Isidro-Llobet et al.,Amino Acid-Protecting Groups,Chem.Rev.109:2455–2504(2009)和T.Greene and P.Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis(3dEd.1999)。在一些实施方式中，羟基保护基团是酸稳定的羟基保护基团。羟基保护基团的实例包括但不限于烷基、环烷基、芳基烷基、芳基、醚、酯、环状醚、环状酯、缩醛、环状缩醛、缩酮和环状缩酮基团等，它们可以在酸性或碱性条件下除去，从而除去保护基团并用氢原子替代。特定的羟基保护基团包括但不限于甲基、乙基、乙酸酯、乙酸乙酯、丙酸酯、乙二醇、丙二醇、4-甲氧基苄基、苄基、三苯甲基、三甲基硅烷基、四氢吡喃基和苯甲酰基。其他羟基保护基团包括但不限于甲氧基甲基(MOM)、甲基硫代甲基(MTM)、叔丁基硫代甲基、(苯基二甲基硅烷基)甲氧基甲基(SMOM)、苄氧基甲基(BOM)、对甲氧基苄氧基甲基(PMBM)、(4-甲氧基苯氧基)甲基(p-AOM)、愈创木酚甲基(GUM)、叔丁氧基甲基、4-戊烯氧基甲基(POM)、硅烷氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基(MEM)、2,2,2-三氯乙氧基甲基、双(2-氯乙氧基)甲基、2-(三甲基硅烷基)乙氧基甲基(SEMOR)、四氢吡喃基(THP)、3-溴四氢吡喃基、四氢噻喃基、1-甲氧基环己基、4-甲氧基四氢吡喃基(MTHP)、4-甲氧基四氢噻喃基、4-甲氧基四氢噻喃基S,S-二氧化物、1-[(2-氯-4-甲基)苯基]-4-甲氧基哌啶-4-基(CTMP)、1,4-二噁烷-2-基、四氢呋喃基、四氢硫代呋喃基(tetrahydrothiofuranyl)、2,3,3a,4,5,6,7,7a-八氢-7,8,8-三甲基-4,7-桥亚甲基苯并呋喃-2-基、1-乙氧基乙基、1-(2-氯乙氧基)乙基、1-甲基-1-甲氧基乙基、1-甲基-1-苄氧基乙基、1-甲基-1-苄氧基-2-氟乙基、2,2,2-三氯乙基、2-三甲基硅烷基乙基、2-(苯基硒基)乙基、叔丁基、烯丙基、对氯苯基、对甲氧基苯基、2,4-二硝基苯基、苄基、对甲氧基苄基、3,4-二甲氧基苄基、邻硝基苄基、对硝基苄基、对卤代苄基、2,6-二氯苄基、对氰基苄基、对苯基苄基、2-吡啶甲基、4-吡啶甲基、N-氧化3-甲基-2-吡啶甲基(3-methyl-2-picolyl N-oxido)、二苯基甲基、p,p'-二硝基二苯甲基、5-二苯并环庚基(5-dibenzosuberyl)、三苯基甲基、α-萘基二苯基甲基、对甲氧基苯基二苯基甲基、二(对甲氧基苯基)苯基甲基、三(对甲氧基苯基)甲基、4-(4'-溴苯甲酰甲基氧基苯基)二苯基甲基、4,4',4”-三(4,5-二氯邻苯二甲酰亚氨基苯基)甲基、4,4',4”-三(乙酰丙酰基氧基苯基)甲基、4,4',4”-三(苯甲酰基氧基苯基)甲基、3-(咪唑-1-基)双(4',4”-二甲氧基苯基)甲基、1,1-双(4-甲氧基苯基)-1'-芘基甲基、9-蒽基、9-(9-苯基)呫吨基、9-(9-苯基-10-氧亚基))蒽基、1,3-苯并二硫杂环戊烷-2-基、S,S-二氧化苯并异噻唑基、三甲基硅烷基(TMS)、三乙基硅烷基(TES)、三异丙基硅烷基(TIPS)、二甲基异丙基硅烷基(IPDMS)、二乙基异丙基硅烷基(DEIPS)、二甲基乙基硅烷基、叔丁基二甲基硅烷基(TBDMS)、叔丁基二苯基硅烷基(TBDPS)、三苄基硅烷基、三对二甲苯基硅烷基、三苯基硅烷基、二苯基甲基硅烷基(DPMS)、叔丁基甲氧基苯基硅烷基(TBMPS)、甲酸酯、苯甲酰基甲酸酯、乙酸酯、氯乙酸酯、二氯乙酸酯、三氯乙酸酯、三氟乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、苯氧基乙酸酯、对氯苯氧基乙酸酯、3-苯基丙酸酯、4-氧亚基戊酸酯(乙酰丙酸酯)、4,4-(亚乙基二硫代)戊酸酯(乙酰丙酰基二硫缩醛)、新戊酸酯、金刚烷酸酯(adamantoate)、巴豆酸酯、4-甲氧基巴豆酸酯、苯甲酸酯、对苯基苯甲酸酯、2,4,6-三甲基苯甲酸酯(mesitoate)、碳酸烷基甲酯、碳酸9-芴基甲酯(Fmoc)、碳酸烷基乙酯、碳酸烷基2,2,2-三氯乙酯(Troc)、碳酸2-(三甲基硅烷基)乙酯(TMSEC)、碳酸2-(苯基磺酰基)乙酯(Psec)；碳酸2-(三苯基膦)乙酯(Peoc)、碳酸烷基异丁酯、碳酸烷基乙烯酯、碳酸烷基烯丙酯、碳酸烷基对硝基苯酯、碳酸烷基苄酯、碳酸烷基对甲氧基苄酯、碳酸烷基3,4-二甲氧基苄酯、碳酸烷基邻硝基苄酯、碳酸烷基对硝基苄酯、硫代碳酸烷基S-苄酯、碳酸4-乙氧基-1-萘酯、二硫代碳酸甲酯、2-碘苯甲酸酯、4-叠氮基丁酸酯、4-硝基-4-甲基戊酸酯、邻-(二溴甲基)苯甲酸酯、2-甲酰基苯磺酸酯、2-(甲基硫代甲氧基)乙基、4-(甲基硫代甲氧基)丁酸酯、2-(甲基硫代甲氧基甲基)苯甲酸酯、2,6-二氯-4-甲基苯氧基乙酸酯、2,6-二氯-4-(1,1,3,3-四甲基丁基)苯氧基乙酸酯、2,4-双(1,1-二甲基丙基)苯氧基乙酸酯、氯代二苯基乙酸酯、异丁酸酯、单琥珀酸酯、(E)-2-甲基-2-丁烯酸酯、邻-(甲氧基羰基)苯甲酸酯、α-萘甲酸酯、硝酸酯、烷基N,N,N',N'-四甲基膦酰基二酰胺化物、N-苯基氨基甲酸烷基酯、硼酸酯、二甲基硫代膦酰、2,4-二硝基苯基次磺酸烷基酯、硫酸酯、甲烷磺酸酯(甲磺酸酯)、苄基磺酸酯和甲苯磺酸酯(Ts)。保护和去保护羟基基团的方法是众所周知的，并且例如，可以在Protective Groups in Organic Synthesis(T.Green and P.Wuts；3rd Edition；John Wiley and Sons,1999)中找到。

由

标识的键存在或不存在。

由

标识的键是包括立体化学混合物的键。

如本文所用，术语“g/g”是指每克底物的克数。底物在每个步骤中定义为1个当量，并且该步骤中的所有其他方面都相对于底物进行定义。

术语“对映异构体”是指化合物的立体异构体，它们是彼此的镜像并且是不可重叠的。在本申请中，除非另外提及或指出，否则化合物的化学指定表示所有可能的立体化学异构形式的混合物。

术语“非对映异构体”是指在一个或多个立体中心具有不同构型但彼此不是镜像的化合物的立体异构体(并且因此不是对映异构体)。

术语“差向异构体”是指仅在一个立体中心处彼此不同的两种非对映异构体。

术语“烷基”表示包含1-12个碳原子，例如1-6或1-4个碳原子的直链或支链烃链。烷基基团的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基等。

术语“芳基”是指芳族5-8元单环或8-12元双环体系。该术语还包括芳族双环体系，其中氢原子已添加到一个环中的一个、两个或三个环碳上(例如，部分饱和的环)。芳基基团的实例包括苯基、萘基等。

术语“酰基”表示与羰基基团连接的烷基或芳基基团。酰基基团的实例包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、丙烯酰基、苯甲酰基等。

如本文所用，术语“苯甲酰基”是指苯甲酸的酰基(通过羰基碳连接)并且具有以下结构。

化合物

本发明的一个方面涉及通过本发明的方法产生的化合物1(或其盐)，特别是具有高纯度(例如差向异构体纯度或低量杂质、溶剂、反应副产物和/或降解产物)的游离碱形式的化合物1。本发明的另一方面涉及具有按重量计至少约80％，例如至少约85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％或99.9％或更高纯度的化合物1。在一些实施方式中，化合物1包含按重量计少于约20％，例如少于约15％、10％、5％、4％、3％、2％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％或0.1％的杂质、溶剂、反应副产物和/或降解产物，例如下表1和表4中所示的杂质。在一些实施方式中，化合物1包含按重量计少于约20％，例如少于约15％、10％、5％、4％、3％、2％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％或0.1％的化合物1的其相应的对映异构体和/或差向异构体。本发明的另外方面涉及化合物1，具有的所需差向异构体(化合物1)与另一种差向异构体(化合物6)的摩尔比为按重量计至少约60:40，例如至少约70:30、80:20、90:10、95:5、96:4、97:3、98:2、99:1或更高，例如差向异构体纯度为至少约60％、例如至少约70％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或更多，例如99.5％或99.9％。

在一些实施方式中，通过本发明的方法产生的化合物1(或其盐)包含少于20种不同的可测量杂质，例如少于15种杂质，例如少于15、14、13、12、11、10、9、8、7或6种杂质，例如5种或更少的杂质。如本文所用，可测量的杂质是指可以通过本领域中常规用于测试化学纯度的方法(例如，HPLC或质谱法)检测的杂质。可测量的杂质是以大于0.03wt％的量存在的杂质。

在一些实施方式中，通过本发明的方法产生的化合物1(或其盐)包含按重量计少于约4.0％的差向异构体化合物6，例如少于约3.5％、3.0％、2.5％、2.0％、1.9％、1.8％、1.7％、1.6％、1.5％、1.4％、1.3％、1.2％、1.1％或1.0％。

在一些实施方式中，通过本发明的方法产生的化合物1(或其盐)包含按重量计少于约2.5％的不包括差向异构体化合物6的总杂质，例如少于约2.0％、1.9％、1.8％、1.7％、1.6％、1.5％、1.4％、1.3％、1.2％、1.1％、1.0％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％或0.5％。

在一些实施方式中，通过本发明的方法产生的化合物1(或其盐)包含按重量计少于约1.0％的任何单个杂质，包括差向异构体化合物6或不包括差向异构体化合物6，例如，少于约1.0％、0.95％、0.9％、0.85％、0.8％、0.75％、0.7％、0.65％、0.6％、0.55％、0.5％、0.45％、0.4％、0.35％、0.3％、0.25％、0.2％、0.15％或0.1％。

本文所述的某些化合物包含一个或多个手性中心，或者可能另外能够作为多种立体异构体存在。本发明的范围包括纯立体异构体以及立体异构体的混合物，诸如纯化的对映异构体/非对映异构体/差向异构体、对映异构体/非对映异构体/差向异构体富集的混合物、或外消旋体。在一些实施方式中，化合物具有至少约80％，例如至少约85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的立体化学纯度。

在某些情况下，本发明的化合物还可以作为互变异构体存在，例如酰胺/亚氨醇(iminol)互变异构体。尽管可能仅描述了一种离域共振结构，但所有这样的形式都被考虑在本发明的范围内。

如上所述，本文公开的化合物可以制备成它们的药学上可接受的盐的形式。药学上可接受的盐是保留母体化合物的所需生物活性且不赋予不希望的毒理学作用的盐。这样的盐的实例是(a)与无机酸形成的酸加成盐，这些无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸等；和与有机酸形成的盐，这些有机酸诸如例如乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、葡萄糖酸、柠檬酸、苹果酸、抗坏血酸、苯甲酸、鞣酸、棕榈酸、海藻酸、聚谷氨酸、萘磺酸、甲烷磺酸、对甲苯磺酸、萘二磺酸、聚半乳糖醛酸等；(b)由元素阴离子诸如氯、溴和碘形成的盐，和(c)由碱衍生的盐，诸如铵盐、碱金属盐诸如钠盐和钾盐、碱土金属盐诸如钙盐和镁盐，以及与有机碱诸如二环己胺和N-甲基-D-葡糖胺的盐。在一种实施方式中，本文公开的化合物以游离碱的形式制备。

还应理解，本文的组合物包括化合物以及与化学计量或非化学计量的量的水(如在水合物中)或其他组分(如在溶剂化物中)的组合。

合成方法

本发明的另外方面涉及一种生产化合物1或其盐的方法：

包括在催化剂存在下，使化合物1从化合物2的溶液中沉淀或结晶：

。在一种实施方式中，该方法产生化合物1。

该方法利用结晶诱导的非对映选择性转化(CIDT)来提供所需差向异构体(化合物1)的产生的提高。在该方法中可以使用任何合适的催化剂。如本文所用的关于沉淀或结晶步骤的术语“催化剂”是指当相对于化合物2以亚化学计量的量存在时促进化合物6和化合物1之间的平衡的化合物。不受机制限制，认为化合物1和其差向异构体化合物6与作为中间体的化合物的打开的醛结构处于平衡。该催化剂被认为通过促进化合物6打开为醛形式而起作用，从而增加一种差向异构体向另一种的转化并平衡溶液中化合物1和化合物6的量，因为在使用适当的溶剂时，化合物1优先从溶液中沉淀或结晶出来。催化剂以催化有效量存在。在一些实施方式中，催化剂可以是酸，例如无机酸，例如有机酸，例如乙酸或三氟乙酸。在其他实施方式中，催化剂可以是碱，例如布朗斯特-劳里碱，例如弱碱(在水性溶液中不完全电离的碱)。在其他实施方式中，催化剂可以是二异丙基乙胺或氢氧化铵。在一些实施方式中，碱在溶剂中具有10或更高的碱度。在一些实施方式中，碱在溶剂例如DMSO中具有10或更大的pKa，例如在以下中报道的：Bordwell,Acc.Chem.Res.21:456 1988)；Crampton,J.Chem.Res.(S)22(1997)；Kaliurand et al.,J.Org.Chem.65(19):6202(2000)；Kaljurand et al,J.Org.Chem.70(3):1019(2005)。在一些实施方式中，催化剂是强碱。在一些实施方式中，催化剂是强碱，诸如空间位阻强碱，例如弱亲核试剂的强碱。在一些实施方式中，催化剂是1,8-二氮杂双环(5.4.0)十一碳-7-烯(DBU)。DBU可以以任何有效的量存在，例如约1mol％至约20mol％，例如约2mol％至约15mol％，例如约5mol％至10mol％，例如约5mol％，或例如约10mol％，例如约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20mol％。在一些实施例中，DBU可以以1mol％至20mol％，例如2mol％至15mol％，例如5mol％至10mol％，例如5mol％，或例如10mol％，例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20mol％存在。

可以使用导致化合物1相对于化合物6优先沉淀或结晶的任何溶剂或溶剂组合。在一种实施方式中，溶剂是其中化合物6比化合物1具有更大溶解度的溶剂。在一些实施方式中，用于形成化合物2的溶液的溶液包括有机溶剂、基本上由有机溶剂组成或由有机溶剂组成。在一些实施方式中，溶液包括水或水性溶剂、基本上由水或水性溶剂组成或由水或水性溶剂组成。在一些实施例中，溶剂是质子溶剂。在一些实施方式中，溶剂是与水混溶的溶剂。在具体实施方式中，溶液是乙腈、丙酮、四氢呋喃、二甲亚砜或甲醇。在具体实施方式中，溶液是乙腈水溶液、丙酮水溶液、四氢呋喃水溶液、二甲亚砜水溶液或甲醇水溶液。在具体实施方式中，溶液是乙腈水溶液。

沉淀或结晶可以进行足够长的时间以形成合适量的化合物1，例如约0.5天至14天，例如约1-4天，例如约2-3天，例如约3-10天，例如约4-6天。沉淀或结晶可以在任何合适的温度下进行，例如在约室温下，任选地随后在约0℃至约10℃的温度下进行。在沉淀或结晶完成后，可以例如通过过滤收集沉淀物，并例如用乙腈水溶液和/或乙腈洗涤，任选地冷却至约0℃至约10℃的温度。然后可以将沉淀物干燥，例如在真空下，例如在低于约45℃的温度下。可以监测反应进程，例如，通过对反应混合物的上清液取样并确定化合物1与化合物6的比率。反应完成由上清液中化合物1和化合物6的50:50混合物的存在指示。如果没有达到这个比率，可以添加额外的催化剂并继续反应直到完成。

在沉淀或结晶之后，化合物1任选地通过重结晶或浆化进一步纯化，例如从乙腈水溶液中，任选地添加酸，例如三氟乙酸。例如，可以将沉淀物重悬在比率为约1:2至约1:10(v/v)的水:乙腈中，加热至约35-45℃，然后冷却至约0℃。所得沉淀物可以在比率为约1:2至约1:10(v/v)的水:乙腈中洗涤，以及然后在乙腈中洗涤，任选地冷却至约0℃至约10℃的温度。在某些实施方式中，化合物1任选地通过本领域已知的其他方法诸如HPLC进一步纯化。

在一些实施方式中，化合物1通过在丙酮和水中重结晶进一步纯化，pH被调节至约6.0至约7.4(例如，约6、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7、7.1、7.2、7.3或7.4或其中的任何值或范围)，例如单独使用甲酸水溶液或与DBU水溶液组合使用。在一些实施方式中，将混合物进一步加热，例如加热至约50℃至约55℃的温度，例如以0.5至1.5℃/min的速率，直到观察到完全溶解，过滤，用丙酮和水的混合物洗涤，以及然后冷却，例如冷却至约33℃至约43℃的温度，例如以0.1至0.5℃/min的速率，然后加晶种并且进一步冷却，例如冷却至约-10℃至约0℃的温度，例如以0.1至0.5℃/min的速率，并静置，然后进行如本领域已知的进一步制备(例如，过滤、洗涤和干燥)。在一些实施方式中，将重结晶混合物进一步加热至约53℃，澄清过滤，以及然后冷却至约35℃的温度，加晶种，冷却至约-5℃的温度，并静置(例如，老化)约12至约16小时(例如，约12、13、14、15或16小时或其中的任何值或范围)。本发明的发明人已经发现，如本文公开的具体重结晶参数，例如更高的温度和/或具体的pH范围，产生更高纯度的产物，改善粒度分布，并避免二聚杂质。在一些实施方式中，本方法产生具有更均匀的粒度分布的化合物，例如单峰粒度分布，例如以约100-200μm(例如约130μm)为中心的粒度分布。在一些实施方式中，至少50％的颗粒具有20μm至300μm的尺寸，例如，至少60％、70％、80％或90％。

在沉淀或结晶之后化合物1(即，所需差向异构体)与化合物1的差向异构体(例如，化合物6)的摩尔比可以是至少约60:40，例如至少约70:30、80:20、90:10、95:5或98:2或更高。在第二纯化步骤(例如，重结晶或浆化)之后，所需差向异构体(化合物1)与另一种差向异构体(化合物6)的摩尔比可以是至少约80:20，例如至少约90:10、95:5或98:2或更高。

本发明的另一方面涉及一种生产化合物1或其盐的方法：

包括以下步骤：

(a)将式IV的起始化合物氢化：

其中R是羟基保护基团，

以产生式IIa的化合物：

(b)将所述式IIa的化合物还原，以产生式IIIa的化合物：

(c)将所述式IIIa的化合物去保护，以产生化合物2：

以及

(d)在催化剂存在下使化合物2沉淀或结晶，以产生化合物1：

或其盐；

其中所述方法包括以下中的一个或多个，以任何组合：

(i)其中氢化步骤(a)在氢气气氛下使用钯催化剂进行；

(ii)其中还原步骤(b)在约-12℃至约-5℃的温度下进行；

(iii)其中去保护步骤(c)在有机碱存在下进行；和/或

(iv)其中来自去保护步骤(c)的去保护的化合物的后处理在非水性条件下进行。在一些实施方式中，本发明进一步包括其中使最终产物重结晶的步骤，并且所述重结晶在约6.0至约7.4的pH下进行，并通过在约50℃至约55℃的温度下溶解最终产物以产生溶液以及然后将所述溶液冷却至约5℃来进行。

式IV的起始化合物可以例如从Aurora Fine Chemicals(圣地亚哥，加利福尼亚州(San Diego,CA))商业上获得，或通过已知方法合成，例如如Wheeler et al.,J.LabeledCompounds Radiopharm.29:583(1991)和Chou et al.,Synthesis 6:565(1992)中公开的，通过援引以其整体并入本文。

在步骤(a)中以产生式IIa的化合物的式IV的化合物的氢化可以通过本领域已知的方法进行，例如，如美国专利号8,268,800和/或专利公开WO 2015/066162中公开的，其公开内容通过援引以其整体并入本文。例如，该步骤可以在催化转移氢化条件下进行，例如在钯炭(Pd/C)存在下，例如在约5％Pd/C存在下进行。在氢化步骤(a)中使用的催化剂例如Pd/C的量可以是任何催化有效量，例如每1重量份式IV的化合物不超过0.1重量份的催化量。在一些实施方式中，在氢化步骤(a)中使用的Pd/C的量可以是例如每1重量份式IV的化合物约0.025至约0.05份Pd/C。氢化可通过将式IV的化合物加热至回流，例如与甲酸和盐酸或与氢气(例如，在约2至约4巴氢气压力下)和任选地与乙酸)在溶剂例如乙酸乙酯水溶液中进行。氢化可在约0℃至约100℃，例如约50℃至约80℃，例如约63℃至约77℃，例如约68℃的温度下进行约0.5-48小时，例如约5至约24小时，约10至约20小时，约15至约20小时，或其中的任何值或范围，例如约24小时。用于影响氢化的试剂(例如钯和炭)可以在使反应混合物达到升高的温度(例如，约50℃至约80℃，或约68℃)后添加。完成后，可以例如通过在例如约60℃至约70℃下过滤除去催化剂，并例如用乙酸乙酯洗涤。有机层分离后，可用例如碳酸钾水溶液、碳酸氢钠水溶液和/或NaCl水溶液洗涤它。可以减少有机层的体积(例如，通过蒸馏)，并将残余物加热(例如，在约70℃下)直至溶解并冷却(例如，至约45℃至约55℃)，用产物作晶种并且搅拌例如约1h，例如在约45℃至约55℃。可以减少反应混合物的体积(例如，通过蒸馏)，并在约40℃至约50℃的温度下缓慢添加甲基叔丁基醚，然后将反应混合物缓慢冷却至约0℃至约10℃。可以将所得悬浮液搅拌例如约2至约16h，以及然后过滤。滤液可用例如甲基叔丁基醚洗涤，任选地冷却至约0℃至约10℃。

替代地，来自氢化反应的滤液可以被洗涤(例如，用乙酸)、加热(例如，至约80℃)以溶解并添加水(例如，预热至约80℃)。冷却后，可将沉淀物通过过滤收集，洗涤(例如用水和乙醇)并干燥。

本文中用于氢化步骤(a)的溶剂可以是在反应中不引起不利影响的任何常规溶剂。这样的用于氢化的溶剂的非限制性实例包括水、醇(例如甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、三氟乙醇、乙二醇)、醚(例如四氢呋喃、二噁烷、二乙醚、二甘醇二甲醚)、酯(例如乙酸甲酯、乙酸乙酯)、其他有机溶剂和/或如本文公开的两种或更多种溶剂的混合溶剂。反应可以优选在有机酸诸如甲酸、乙酸、草酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸和/或苯甲酸存在下进行。在一些实施方式中，氢化可在包括乙酸乙酯、乙酸和水的混合溶剂中进行。

在一些实施方式中，氢化可在增加的压力(相对于环境压力)下进行，例如约0.1至约1兆帕(MPa)的增加的压力，例如约0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、0.95、0.96、0.97、0.98、0.99或1MPa或其中的任何值或范围。在一些实施方式中，氢化步骤(a)可在环境压力(例如，常压，例如，正常压力)下进行。在一些实施方式中，氢化步骤(a)可以在约0.1至约0.85MPa，或约0.15至约0.73MPa，或约0.1至约0.5MPa的增加的压力下进行。

步骤(b)中式IIa的化合物还原为式IIIa的化合物可以通过本领域已知的方法进行，例如，如美国专利号8,268,800和/或专利公开WO 2015/066162中公开的。例如，可以在有机溶剂例如二氯甲烷和乙醇的混合物中用还原剂诸如硼氢化钠进行还原。还原可以在任何合适的温度例如约-5℃至约10℃，例如约0℃至约5℃下进行约0.5至3小时，例如约1.5小时。

在一些实施方式中，还原可以在约-12℃至约-3℃，例如约-12、-11、-10、-9、-8、-7、-6、-5、-4或-3℃或其中的任何值或范围的温度下进行。在一些实施方式中，还原可在约-11℃至约-3℃、约-12℃至约-5℃、约-11℃至约-5℃或约-10至约-6℃的温度，或在约-8℃的温度下进行。本发明部分基于以下出人意料的发现：异常冷的条件(例如，约-11℃至约-5℃的温度)使在化合物1的生产中不能很好地进一步清除的杂质诸如但不限于DPU和DCU以及间接CYU(其在后续步骤中通过DCU的转化产生)的形成最小化。示例性杂质的结构在表1中示出。

表1：减少杂质实例(Bz＝苯甲酰基)

还原可以任选地在三氯化铈存在下进行。在一种实施方式中，氯化铈的量为约50mol％(例如，50mol％)。在另一种实施方式中，氯化铈的量为约20mol％或约10mol％(例如20mol％或10mol％)。在添加氯化铈(III)之后，可以在冷却之前将反应加热(例如，至约15℃至约25℃)例如约20分钟。

在还原之后，可以例如用丙酮淬灭反应，并且用酸例如柠檬酸中和溶液。可以分离和洗涤包含式IIIa的化合物的有机层，例如用水洗涤。可以将有机层加热(例如，至约20℃至约30℃)并用酸(例如柠檬酸)调节pH，如此重复步骤直到pH稳定。可以将有机相例如在约20℃至约35℃的温度下洗涤(例如用碳酸氢钠)，以及然后在约0℃至约10℃的温度下用水洗涤。可以减少有机相的体积(例如，通过蒸馏)，可以添加甲基叔丁基醚，并将所得沉淀物收集，用冷却至约0℃至约10℃的甲基叔丁基醚洗涤，并干燥。

可以通过本领域已知的方法，例如如美国专利号8,268,800和/或专利公开WO2015/066162中公开的方法，在步骤(c)中对式IIIA的化合物进行去保护以产生化合物2。例如，去保护可以在弱碱例如氢氧化铵存在下，在溶剂例如甲醇中进行。在一些实施方式中，可以在有机碱存在下进行去保护，例如选自由DBU、三甲胺、N,N-二甲基-4-氨基吡啶(DMAP)和1,3-二氮杂双环[2.2.2]辛烷(DABCO)组成的组中的一种或多种碱。在一些实施方式中，去保护可以在氨存在下，在溶剂例如甲醇中，例如在约20℃至约30℃的温度下进行。用于去保护的有机碱的量不应受到限制，只要它是必需的量并且不引起任何不利影响，例如，不引起副反应。在一些实施方式中，用于去保护的有机碱的量可以为每摩尔式IIIa的化合物约0.01至约2.2摩尔(例如，每摩尔式IIIa的化合物约0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.15、2.16、2.17、2.18、2.19或2.2摩尔，或其中的任何值或范围)。例如，在一些实施方式中，去保护步骤(c)可以在每摩尔式IIIa的化合物约0.01至约2.2摩尔有机碱，或每摩尔式IIIa的化合物约0.05至约2.0摩尔有机碱，或每摩尔式IIIa的化合物约1.0至约1.9摩尔有机碱存在下进行。去保护可以进行约12-48小时，例如约24小时。去保护后，可将混合物浓缩，溶解在水性溶剂例如水中，并用有机溶剂例如乙酸乙酯洗涤。

在一些实施方式中，在去保护之后，后处理可以在非水性条件下例如使用蒸发溶剂交换过程进行。本发明的发明人发现，使用非水性蒸发溶剂交换过程形成非粘性固体并且避免水解不稳定性和二聚体形成。在一些实施方式中，去保护可进一步接着是额外的研磨以除去杂质，例如遗传毒性杂质，诸如但不限于苯甲酰胺。在一些实施方式中，可以用异丙醇和/或乙腈进行非水性后处理中的去保护。

在一些实施方式中，可通过减少反应混合物的体积(例如，通过在减压下蒸馏)、添加甲醇并继续减少体积、添加异丙醇和乙腈并继续减少体积、然后添加乙腈并继续减少体积来进行非水性后处理。然后可以将反应冷却，例如至约0℃至约10℃，例如经过1-2小时，并保持例如1-6小时。可以将固体产物收集并用乙腈洗涤。

步骤(d)中以产生化合物1的化合物2的沉淀或结晶可以如上所述进行。

在一些实施方式中，步骤(d)中以产生化合物1的化合物2的沉淀或结晶可通过在DBU、乙酸、三氟乙酸、二异丙基乙胺和/或氢氧化铵存在下，任选地在冷却下使化合物悬浮来进行。

在一些实施方式中，本发明的方法可以包括(a)至(d)的步骤，其中还原步骤(b)在约-12℃至约-3℃的温度下进行，从而使DCU和DPU以及间接CYU的形成最小化。CYU不能很好地从其余的合成中清除。在一些实施方式中，本发明的方法可以进一步包括在非水性条件(例如蒸发溶剂交换)下对来自去保护步骤(c)的去保护的化合物进行后处理，从而产生非粘性固体和/或避免水解不稳定性和/或二聚体形成。在一些实施方式中，本发明的方法可以进一步包括，其中去保护步骤(c)进一步包括研磨步骤，从而除去遗传毒性杂质例如苯甲酰胺。在一些实施方式中，本发明的方法可进一步包括最终产物的重结晶，其中重结晶在约6.0至约7.4的pH和约50℃至约55℃的温度下进行。

在一些实施方式中，本发明的方法可以包括(a)至(d)的步骤，其中氢化步骤(a)在氢气气氛下使用钯催化剂进行，和/或其中去保护步骤(c)在有机碱存在下进行。特别地，关于步骤(a)，WO 2015/066162作为美国专利号8,268,800公开的改善方法，通过保护羟基基团，以及然后通过在相当大的Pd/C存在下用大量甲酸进行氢化步骤，成功地进行了高产率氢化，但从工业生产的角度来看，WO 2015/066162的改善步骤仍然具有其他缺点，例如大量使用昂贵的Pd/C，以及大量使用不适合作为工业生产试剂的甲酸。本发明通过在催化量的钯催化剂存在下在氢气气氛下进行氢化步骤(a)，使得能够以高产率和高纯度进行氢化步骤。此外，WO 2015/066162中的去保护反应需要用氨进行长时间，氨对于工业规模生产来说是麻烦的并且产生难以除去的杂质。与美国专利号8,268,800相比，在未保护的羟基基团下在大量昂贵的铑催化剂存在下进行氢化步骤，导致例如高制造成本、低产品纯度和难以通过色谱法纯化。上述WO 2015/066162和美国专利号8,268,800的问题被如本文公开的发明克服。

用途

通过本发明产生的化合物1或其药学上可接受的盐可用于抑制CDA活性。化合物1或其药学上可接受的盐可以是药物组合物的形式，例如与药学上可接受的赋形剂一起。在一些实施方式中，化合物1或其药学上可接受的盐可与CDA底物药物，例如可用于治疗癌症的CDA底物药物联合用于治疗有此需要的受试者的癌症的方法中。CDA底物药物的实例包括但不限于地西他滨、5-氮杂胞苷、吉西他滨、ara-C、替扎他滨、5-氟-2'-脱氧胞苷和cytochlor。在一些实施方式中，癌症可以选自由血液癌和实体癌组成的组。在某些实施方式中，血液癌可以是骨髓增生异常综合征或白血病，例如急性髓性白血病或慢性髓性白血病。在某些实施方式中，实体癌可以是胰腺癌、卵巢癌、腹膜癌、非小细胞肺癌、转移性乳腺癌、膀胱癌、鳞状细胞癌、移行细胞癌、腺癌、妇科癌、输卵管癌、肝癌、肝细胞癌、肺癌、宫颈癌、泌尿生殖道癌或胃肠道癌。在一些实施方式中，化合物1或其药学上可接受的盐可以与CDA底物药物基本上同时、在CDA底物药物之前或在CDA底物药物之后给药，任选地以单一单位剂型或以多个分开的单位剂型。以下在非限制性实施例中描述了根据本发明的实施方式。

实施例

实施例1.氢化步骤(a)

步骤(a)中以产生式IIa的化合物的式IV的化合物(1当量)的氢化在水(1.98g/g)中的Pd/C(5％，0.05g/g)存在下在63℃至77℃的温度下用2至4巴氢气压力下的氢气和乙酸(80％，2.62g/g)在乙酸乙酯(8.97g/g)中进行至少12小时。完成后，通过过滤除去催化剂，并且将滤饼用乙酸乙酯(6.73g/g)洗涤。冷却后，滤液用碳酸钾水溶液洗涤。有机相用碳酸氢钠水溶液(7％w/w，5.38g/g)洗涤，并用NaCl水溶液(10％w/w，3g/g)洗涤。将有机层蒸馏至约8体积的残余体积，并且将残余物加热至70℃直至溶解并冷却至45℃至55℃。反应用式IIa的化合物作晶种，并将反应混合物蒸馏至约2体积的残余体积，并在40℃至50℃的温度下缓慢添加甲基叔丁基醚(4.44g/g)。冷却混合物后，将沉淀的晶体在过滤器上收集，用冷却至0℃至10℃的甲基叔丁基醚(1.48g/g)洗涤，并且将产物干燥得到式IIa。产率：86％。化学纯度：98.9％。

实施例2.还原步骤(b)期间减少杂质

将式IIa的化合物(1当量)溶解在二氯甲烷(14.6g/g)中并搅拌。添加乙醇(5.83g/g)，并将反应混合物冷却至-5℃至5℃。添加氯化铈(III)七水合物(0.08g/g)，并将反应加热至15℃至25℃。然后添加水(0.68g/g)，并将反应搅拌至少20min，然后冷却至0℃至-11℃。保持温度在0℃至-11℃，分批添加硼氢化钠(0.11g/g)，并搅拌反应直至完成。保持温度在0℃至-11℃，添加丙酮(0.73g/g)。缓慢添加柠檬酸的水性溶液(3.7至4.4％w/w)直至达到6.5至7.5的pH。使各相沉降并分离水相。有机相用碳酸氢钠的水性溶液洗涤，以及然后进一步用水洗涤。分离各相并将有机相进一步用水洗涤。有机相在≤35℃下真空蒸馏，直到体积为约2体积，然后添加甲基叔丁基醚(7.38g/g)，并在≤35℃下真空蒸馏直到体积为4.8体积。添加第二份甲基叔丁基醚(3.7g/g)并在≤30℃下真空蒸馏直到体积为4.8体积。添加另外的甲基叔丁基醚(2.67g/g)，并将反应混合物在≥4h内冷却至0℃至10℃。添加另外的甲基叔丁基醚(0.89g/g)，并将反应混合物在此温度下搅拌，以及然后将固体产物分离并用预冷至0℃至10℃的甲基叔丁基醚(1.46g/g)洗涤，并且将产物干燥得到式IIIa。产率：76％。化学纯度：93％。

条目1-5的过程以与上述类似的方式进行，例外是分别将还原温度更改为0℃、-3℃、-5℃、-8℃和-11℃。如表2所示，较低的温度使DCU、DPU和CYU的形成最小化。杂质的结构在表1中示出。

表2

实施例3.去保护步骤(c)期间的改善

在氨(0.87g/g)在甲醇(4.95g/g)中的溶液中进行去保护。添加式IIIa的化合物(1当量)和另外的甲醇(1.58kg/kg)。将反应混合物调节至20℃至30℃并在该温度下搅拌直至完成。后处理通过在减压下蒸馏反应混合物直到残余体积为约3体积进行。添加甲醇(1.58g/g)并在减压下继续蒸馏直到残余体积为约3体积。添加异丙醇(1.92g/g)，然后乙腈(3.93g/g)，并继续在减压下蒸馏直至残余体积为约3体积。添加乙腈(5.51g/g)并在减压下蒸馏直至达到5体积的残余体积。添加另外的乙腈(1.58g/g)并在减压下蒸馏直到达到约5体积的残余体积。冷却混合物后，将固体产物分离并用预冷至0℃至10℃的乙腈(1.56g/g)洗涤。将湿产物与乙腈(2.37g/g)混合。冷却混合物后，然后将湿产物干燥得到化合物2。产率：87％。化学纯度：97％。

参考例4.原始去保护步骤(c)

通过用氨(7.0M，在甲醇中，25当量)处理进行去保护。将混合物在25℃下搅拌27h，以及然后在减压下浓缩。将残余物溶解在水(6.3体积)中并用乙酸乙酯洗涤两次(每次5.7体积)。在低于35℃的温度下在减压下浓缩水层，得到化合物2(95％产率)。

当使用典型的工艺条件继续前进时，从原始去保护条件产生的化合物2通常提供通常总体纯度较低且杂质数量显著较高的化合物1。参见表3，条目1和2。

实施例5.高温下高度特定的结晶条件

测试了用于改善的纯度的化合物1的结晶条件。发现高度特定的结晶条件产生非常纯的材料，将粒度分布控制改善到最佳(单峰)范围内，乙腈水平较低，并避免了二聚杂质。特定条件包括使用更高的温度和调整至pH。

用于化合物1重结晶的优选步骤通过混合化合物2(1当量)、1,8-二氮杂双环[5,4,0]十一碳-7-烯(DBU，0.028g/g)、乙腈(5.02g/g)和水(0.73g/g)并在15℃至25℃下搅拌2h来进行。将混合物在≥1h内冷却至0℃至10℃，并在该温度下保持1至8h。将固体产物通过过滤收集并用冷却至0℃至10℃的乙腈:水(0.21g/g:0.033g/g)洗涤。将湿产物和乙腈(2.36g/g)在0℃至10℃搅拌30min至8h。将固体产物收集并用冷却至0℃至10℃的乙腈(0.78g/g)洗涤。将湿产物干燥得到粗化合物1。产率：80％。化学纯度：94％。

在20℃至30℃的温度下混合粗化合物1(1当量)、丙酮(6.26g/g)和水(2g/g)。用甲酸的水性溶液(0.0076g/g甲酸在1.25g/g水中)将反应混合物的pH调节至6.0至7.5。如果需要，可以使用1,8-二氮杂双环[5,4,0]十一碳-7-烯DBU的水性溶液(0.041g/g DBU在0.78g/g水中)将pH调节至目标范围。将反应混合物加热至50℃至55℃直至观察到完全溶解并过滤到设置为40℃至50℃的反应器中并用水(0.1g/g)和丙酮(0.31g/g)的混合物洗涤。将溶液冷却至33℃至43℃并用0.005g/g的化合物1作晶种。反应保持在该温度，然后冷却至-10℃至0℃。将悬浮液在-10℃至0℃下保持12至16h并通过过滤分离。将产物用丙酮(0.78g/g)洗涤并干燥得到化合物1。产率：61％。不包括差向异构体的化学纯度：99.6％。作为化合物1的差向异构体的下式的化合物6按以下比率产生。化合物1:化合物6＝99.6:0.4。(PSD:D(0.9)＝252μm，D(0.5)＝125μm，D(0.1)＝21μm)。

实施例6.与原始纯化过程的比较

将粗化合物1(1当量)悬浮在丙酮(2.5ml/g)和水(2.5ml/g)的混合物中并在25±2℃下搅拌2小时。将混合物冷却至5±2℃并搅拌2小时，以及然后过滤。将滤饼用丙酮(2x0.55ml/g)冲洗，以及然后在55℃下真空干燥。以67％的产率提供化合物1。不包括差向异构体的化学纯度：99.4％。作为化合物1的差向异构体的下式的化合物6按以下比率产生。化合物1:化合物6＝98.7:1.3。

与更新的纯化过程相比，原始过程中化合物1的总体纯度以及与化合物6的比率较低。杂质分布在表3中示出。监测的杂质的结构在表4中示出。

表3

ND＝未检出。

表4

实施例7.步骤(a)和(c)的替代方法

步骤(a)：

将化合物(2-1)(20.0g,42.4mmol)、乙酸乙酯(200mL)、乙酸(80mL)和水(50mL)的混合物在50至60℃在氮气气氛下在搅拌下溶解，以及然后向其中添加0.2g的Pd/C(按重量计10％，按干基计5wt％，50％水湿的，NEs-5DR型)并将反应容器中的气氛置换为氮气。随后，将气氛置换为氢气，并将反应混合物在增加的氢气压力(0.5MPa)下在50至60℃搅拌18小时。过滤反应混合物并用20mL的80％乙酸洗涤过滤器上的残余物。真空除去滤液中的乙酸乙酯(100托，50℃)。将残余溶液加热至80℃使溶解，并且向其中添加400mL预先加热至80℃的水。冷却混合物后，将沉淀的晶体在过滤器上收集，用水和乙醇洗涤，并且干燥，得到19.24g化合物(3-1)(产率：95.6％，化学纯度：98.4％)。

步骤(b)和(c)

化合物(4-1)的合成：在搅拌下将化合物(3-1)(19.0g，40.0mmol)溶解在二氯甲烷(228mL)中。向溶液中添加乙醇(152mL)和氯化铈(III)七水合物(1.49g，4.0mmol)，并将混合物冷却至低于6℃的温度。将硼氢化钠(3.77g，100mmol)在水(19mL)中的溶液滴加到冷却的混合物中，同时保持其温度低于6℃。添加后，将反应混合物在低于6℃的温度下反应2小时。保持反应混合物的温度低于6℃，搅拌下的反应混合物用9.5mL丙酮淬灭，并且然后向其中添加114mL的0.5M盐酸水溶液，同时保持其温度低于6℃，以将淬灭的混合物调节至pH 7。将混合物升温至30至40℃后，将114mL饱和碳酸氢钠水溶液添加到混合物中。用分液漏斗分离混合物，将有机层用114mL水洗涤，并且真空除去溶剂(50托，40℃)。得到的化合物(4-1)不经纯化用于下一步骤。

化合物5的合成：向在步骤(b)中获得的化合物(4-1)中添加甲醇(190mL)和1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)(0.30mL，2.0mmol)，并将反应混合物升温至40℃并在40℃搅拌3小时。反应后，在真空(50托，40℃)中除去甲醇，并且向残余溶液中添加95mL乙腈。冷却后，将沉淀的晶体在过滤器上收集，用冷却的乙腈洗涤，并且干燥，得到8.96g化合物5(产率：83.4％，化学纯度：97.1％)。

步骤(d)

粗化合物(1)的合成：将化合物(5)(0.9g，3.35mmol)、乙腈(5.8mL)、水(0.65mL)和1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)(0.025mL，0.17mmol)的混合物悬浮，并将悬浮液在20至30℃继续搅拌48小时。冷却后，将沉淀的晶体在过滤器上收集，用冷却的90％乙腈和乙腈洗涤，并且干燥，得到0.66g化合物1(产率：73.0％，化学纯度：98.3％)。化合物5:化合物6(化合物5的差向异构体)＝98.9:1.1。

粗化合物1的纯化：将化合物1(0.3g，1.11mmol)悬浮在乙腈(0.96mL)和水(0.24mL)的混合物中，并且将悬浮液在40至50℃温热下搅拌两小时。然后，将悬浮液在低于5℃的温度下搅拌两小时。将所得沉淀物在过滤器上收集，用冷却的90％乙腈和乙腈洗涤，并且干燥，得到0.66g化合物1(产率：73.5％，化学纯度：99.6％)。作为化合物1的差向异构体的下式的化合物6按以下比率产生。化合物1:化合物6＝99.7:0.3。

纯化的化合物1中包含的杂质的总量为0.46％(按面积百分比计)。分开地，通过专利文献2(WO 2015/066162)中公开的方法，由相同的材料制备并纯化化合物1，但其中的杂质总量(2.46％)高于上述方法的杂质总量，这意指本发明的方法可以提供以更高产率制备化合物1的方法。

实施方式

本发明的实施方式包括但不限于以下。

1.一种生产化合物1或其盐的方法：

包括以下步骤：

(a)将式IV的化合物氢化：

其中R是羟基保护基团，

以产生式IIa的化合物：

(b)将所述式IIa的化合物还原，以产生式IIIa的化合物：

(c)将所述式IIIa的化合物去保护，以产生化合物2：

以及

(d)在催化剂存在下使化合物2沉淀或结晶，以产生化合物1：

或其盐；

其中所述方法包括以下中的一个或多个，以任何组合：

(i)其中氢化步骤(a)在氢气气氛下使用钯催化剂进行；

(ii)其中还原步骤(b)在约-12℃至约-5℃的温度下进行；

(iii)其中去保护步骤(c)在有机碱存在下进行；和/或

(iv)其中去保护步骤(c)在非水性条件下进行。

2.根据实施方式1所述的方法，其中所述催化剂为约1mol％至约20mol％的DBU。

3.根据实施方式2所述的方法，其中所述催化剂为约5mol％至约10mol％的DBU。

4.根据实施方式3所述的方法，其中所述催化剂为约5mol％的DBU。

5.根据实施方式1所述的方法，其中所述催化剂是乙酸、三氟乙酸、二异丙基乙胺或氢氧化铵。

6.根据实施方式1-5所述的方法，其中所述去保护步骤(c)进一步包括研磨步骤。

7.根据实施方式1-6所述的方法，进一步包括使化合物1重结晶或浆化。

8.根据实施方式7所述的方法，其中所述重结晶在约6.0至约7.4的pH和约50℃至约55℃的温度下进行。

9.根据实施方式1-8所述的方法，其中步骤(d)在包括乙腈的溶液存在下进行。

10.根据实施方式1-8所述的方法，其中步骤(d)在包括丙酮或四氢呋喃的溶液存在下进行。

11.根据实施方式1-10所述的方法，其中步骤(b)在CeCl₃存在下进行。

12.根据实施方式1-11所述的方法，其中所述R是苯甲酰基基团。

13.根据实施方式1-12所述的方法，其中步骤(i)中使用的所述钯催化剂是钯炭(Pd/C)。

14.根据实施方式13所述的方法，其中步骤(i)中使用的所述Pd/C的量为每1重量份所述式IV的化合物不超过0.1重量份的催化量。

15.根据实施方式13所述的方法，其中步骤(i)中使用的所述Pd/C的量为每1重量份所述式IV的化合物0.025至0.05重量份。

16.根据实施方式1-15所述的方法，其中步骤(i)在包括乙酸乙酯、乙酸和水的混合溶剂中进行。

17.根据实施方式1-16所述的方法，其中步骤(i)在环境压力或增加的压力下进行。

18.根据实施方式1-17所述的方法，其中步骤(i)在0.1至0.5MPa的增加的压力下进行。

19.根据实施方式1-18所述的方法，其中步骤(iii)中使用的所述有机碱是选自由DBU、三乙胺、DMAP和DABCO组成的组中的一种或多种碱。

20.根据实施方式1-19所述的方法，其中步骤(iii)中使用的所述有机碱的量为每摩尔所述式IIIa的化合物0.01至2.2摩尔。

21.根据实施方式1-20所述的方法，其中步骤(iii)中使用的所述有机碱是DBU。

22.一种化合物1或其盐的组合物：

包括少于10、9、8、7、6或5种可测量的杂质。

23.根据权利要求24所述的组合物，其中不存在水平大于0.5wt％、0.25wt％、0.2wt％、0.15wt％、0.1wt％、0.05wt％或0.01wt％的杂质。

24.一种化合物1或其盐的组合物：

其中不存在水平大于0.5wt％、0.25wt％、0.2wt％、0.15wt％、0.1wt％、0.05wt％或0.01wt％的杂质。

25.根据权利要求26所述的组合物，包括少于10、9、8、7、6或5种可测量的杂质。

前述内容是对本发明的说明，并且不被解释为对其的限制。本发明由以下权利要求限定，其中包括权利要求的等同物。

本文引用的所有出版物、专利申请、专利和其他参考文献通过援引以其整体并入，以用于与在其中呈现参考文献的句子和/或段落相关的教导。

Claims (27)

1.一种生产化合物1或其盐的方法：

包括以下步骤：

(a)将式IV的化合物氢化：

其中R是羟基保护基团，

以产生式IIa的化合物：

(b)将所述式IIa的化合物还原，以产生式IIIa的化合物：

(c)将所述式IIIa的化合物去保护，以产生化合物2：

以及

(d)在催化剂存在下使化合物2沉淀或结晶，以产生化合物1：

或其盐；

其中所述方法包括以下中的一个或多个，以任何组合：

(i)其中氢化步骤(a)在氢气气氛下使用钯催化剂进行；

(ii)其中还原步骤(b)在约-12℃至约-5℃的温度下进行；

(iii)其中去保护步骤(c)在有机碱存在下进行；和/或

(iv)其中来自去保护步骤(c)的去保护的化合物的后处理在非水性条件下进行。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述催化剂为约1mol％至约20mol％的1,8-二氮杂双环(5.4.0)十一碳-7-烯(DBU)。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述催化剂为约5mol％至约10mol％的DBU。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述催化剂为约5mol％的DBU。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述催化剂是乙酸、三氟乙酸、二异丙基乙胺或氢氧化铵。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述去保护步骤(c)进一步包括研磨步骤。

7.根据权利要求1所述的方法，进一步包括使化合物1重结晶或浆化。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述重结晶在约6.0至约7.4的pH下进行，并通过在约50℃至约55℃的温度下溶解化合物1以产生溶液以及然后将所述溶液冷却至约5℃来进行。

9.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(d)在包括乙腈的溶液存在下进行。

10.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(d)在包括丙酮或四氢呋喃的溶液存在下进行。

11.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(b)在CeCl₃存在下进行。

12.根据权利要求1所述的方法，其中所述R是苯甲酰基基团。

13.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(i)中使用的所述钯催化剂是钯炭(Pd/C)。

14.根据权利要求13所述的方法，其中步骤(i)中使用的所述Pd/C的量为每1重量份所述式IV的化合物不超过0.1重量份的催化量。

15.根据权利要求13所述的方法，其中步骤(i)中使用的所述Pd/C的量为每1重量份所述式IV的化合物0.025至0.05重量份。

16.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括步骤(i)并且步骤(i)在包括乙酸乙酯、乙酸和水的混合溶剂中进行。

17.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括步骤(i)并且步骤(i)在环境压力或增加的压力下进行。

18.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括步骤(i)并且步骤(i)在0.1至0.5MPa的增加的压力下进行。

19.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括步骤(iii)并且步骤(iii)中使用的所述有机碱是选自由DBU、三乙胺、DMAP和DABCO组成的组中的一种或多种碱。

20.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括步骤(iii)并且步骤(iii)中使用的所述有机碱的量为每摩尔所述式IIIa的化合物0.01至2.2摩尔。

21.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括步骤(iii)并且步骤(iii)中使用的所述有机碱是DBU。

22.一种组合物，包括化合物1或其盐：

其中所述组合物包括少于10、9、8、7、6或5种可测量的杂质。

23.根据权利要求22所述的组合物，其中不存在水平大于所述组合物的1.0wt％、0.5wt％、0.25wt％、0.2wt％、0.15wt％或0.1wt％的杂质。

24.根据权利要求22或23所述的组合物，其中化合物1具有所述组合物的按重量计至少约90％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％或99.9％的纯度。

25.一种组合物，包括化合物1或其盐：

其中在所述组合物中不存在水平大于所述组合物的1.0wt％、0.5wt％、0.25wt％、0.2wt％、0.15wt％或0.1wt％的杂质。

26.根据权利要求25所述的组合物，其中所述组合物包括少于10、9、8、7、6或5种可测量的杂质。

27.根据权利要求25或26所述的组合物，其中化合物1具有所述组合物的按重量计至少约90％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％或99.9％的纯度。