CN114728088A

CN114728088A - 稳定的浓缩的放射性药物组合物

Info

Publication number: CN114728088A
Application number: CN202080079709.9A
Authority: CN
Inventors: M·F·马里亚尼; F·奥兰迪; L·富加扎; L·萨切蒂; M·特德斯科; D·巴巴托
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 2019-09-16
Filing date: 2020-09-15
Publication date: 2022-07-08
Also published as: CA3154302A1; AR119974A1; EP4031193A1; AU2020349002B2; TW202123976A; JP2022548875A; KR20220063218A; AU2020349002A1; WO2021052960A1; IL291315A; US20220401593A1

Abstract

本披露涉及具有高浓度以及高化学稳定性的放射性核素络合物溶液，所述高浓度以及高化学稳定性允许所述放射性核素络合物溶液作为药物产品用于诊断目的和/或治疗目的。通过至少一种抗放射性分解降解的稳定剂实现所述药物产品的稳定性。发现在制造方法期间在不同阶段引入的两种稳定剂的使用是特别有利的。

Description

稳定的浓缩的放射性药物组合物

技术领域

本披露涉及具有经放射性标记的GRPR拮抗剂化合物的药物组合物，该化合物具有高浓度以及高化学和放射化学稳定性，使得它们能够作为商业药物产品用于诊断和/或治疗目的。

背景技术

铃蟾肽(Bombesin)最早分离自欧洲蛙普通火腹蟾蜍(Bombina bombina)，并被证明可模拟哺乳动物的胃泌素释放肽(GRP)和神经介肽B(NMB)[Scopinaro F等人,Eur JNucl Med Mol Imaging[欧洲核医学和分子影像杂志]2003,30(10):1378-1382]。

胃泌素释放肽(GRP)是一种铃蟾肽样肽生长因子，可调节胃肠道和中枢神经系统的多种功能，包括胃肠激素释放、平滑肌细胞收缩和上皮细胞增殖。它是生理和肿瘤组织的强效丝裂原，并且其可能参与生长失调和癌变。

GRP的作用主要通过与其受体(GRP受体(GRPR)，一种最初分离自小细胞肺癌细胞系的G蛋白偶联受体)结合来介导。在多种癌症，包括乳腺癌、前列腺癌、子宫癌、卵巢癌、结肠癌、胰腺癌、胃癌、肺癌(小细胞肺癌和非小细胞肺癌)、头颈部鳞状细胞癌以及各种脑肿瘤和神经肿瘤中已经报告了GRP/GRPR通路的上调。

在乳腺癌中，根据肿瘤类型，GRPR过表达可以达到非常高的密度(例如，在乳腺导管癌标本中70％-90％表达)[Van de Wiele C等人,J Nucl Med[核医学杂志]2001,42(11):1722-1727]。

GRPR在前列腺癌中高度过表达，其中在人前列腺癌细胞系和异种移植模型中的研究显示了高亲和性(nM水平)和高肿瘤摄取(％ID/g)，但在疾病从早期发展至晚期的情景中GRPR的相对表达尚未得到充分阐明[Waters等人,2003,Br J Cancer[英国癌症杂志].6月2日；88(11):1808-1816]。

在结直肠患者中，已经在随机选择的结肠癌样本(包括LN和转移性病变)中通过免疫组织化学确定GRP的存在和GRPR的表达。超过80％的样本异常表达GRP或GRPR，并且超过60％表达GRP和GRPR二者，然而在邻近的正常健康上皮细胞中未观察到表达[Scopinaro F等人,Cancer Biother Radiopharm[癌症生物治疗与放射性药物]2002,17(3):327-335]。

GRP在生理学上存在于肺神经内分泌细胞中，并且在刺激肺发育和成熟中发挥作用。然而，它似乎也参与生长失调和癌变。GRP的刺激导致表皮生长因子受体(EGFR)配体的释放增加以及随后的EGFR和丝裂原活化蛋白激酶下游通路的活化。已使用非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系证实了，EGF和GRP均可刺激NSCLC增殖，并且抑制EGFR或GRPR导致细胞死亡[Shariati F等人,Nucl Med Commun[核医学通讯]2014,35(6):620-625]。

在核医学中，肽受体激动剂一直是用于示踪剂开发和利用的优选配体。使用基于激动剂的构建体背后的根本原理在于受体-放射性配体络合物内化使靶细胞内的放射性高度累积。对于经放射性核素标记的肽，响应于激动剂刺激的有效的受体介导的内吞作用在靶组织中提供了高体内放射性摄取，这是恶性肿瘤最佳成像的关键前提。然而，当受体选择性肽拮抗剂与高效的激动剂相比显示出更优选的生物分布(包括高得多的体内肿瘤摄取)时，发生了范式转移。GRPR拮抗剂展现的另一个优势是，与其说在当前的诊断角度的示踪剂剂量下，不如说是在用于潜在治疗目的的更大剂量下更安全的临床使用，因为使用拮抗剂没有预见急性生物学不良反应[Stoykow C等人,Theranostics[治疗诊断学]2016,6(10):1641-1650]。

最近发现，某些GRPR拮抗剂(如NeoB)可以用不同的放射性核素进行放射性标记并且有可能用于成像和治疗表达GRPR的癌症，例如但不限于前列腺癌和乳腺癌。

在非临床模型中，[⁶⁸Ga]-NeoB和[¹⁷⁷Lu]-NeoB已经显示出对乳腺、前列腺和胃肠道间质瘤(GIST)中表达的GRPR的高度亲和性、以及在结合至特异性受体时的较低的内化程度。在动物模型中的体内成像和生物分布研究中已经证实了经放射标记的肽靶向表达GRPR的肿瘤的能力[Dalm等人,Journal of nuclear medicine[核医学杂志]2017,第58(2)卷:293-299]。

对于该放射医学应用，靶细胞受体结合部分通常与螯合剂连接，所述螯合剂能够与放射性核素的金属离子形成强络合物。然后将该放射性药物递送至靶细胞，并且放射性核素的衰变在靶位点释放高能电子、正电子或α粒子以及γ射线。

这些放射性药物产品的一个技术问题是放射性核素的衰变不断发生，例如，还发生在药物产品的制造期间和储存期间，并且释放的高能量发射引起形成药物产品的一部分的分子的化学键的裂解。这通常被称为放射性分解或放射性分解降解。药物的受体结合部分的放射性分解降解可导致其作为诊断和/或治疗剂的功效降低。

这些放射性药物产品的稳定性差且它们缺乏任何显著的保质期，所以要求这些药物到目前为止在医院的实验室中作为单独患者的剂量单位制造并立即施用必须在该医院内且已经在等待放射治疗的患者。

为了减少放射性药物产品的放射性分解并因此提高稳定性，已经探索了多种策略，并或多或少取得了成功：该药物产品可以在低温下储存，或者以高稀释度生产，或者可以添加稳定剂。

然而，添加稳定剂可能是有问题的，因为这些化学品可能具有对放射性核素与螯合剂的络合作用的负面影响，或者可能具有有限的溶解度并且从溶液中沉淀出来。已报道乙醇是抗放射性分解的稳定剂(WO2008/009444)。虽然乙醇可能不会具有对络合作用或溶解度问题的负面影响，但输注溶液中较高量的乙醇可能具有生理学方面的问题，并且可能具有对药物产品的耐受性的负面影响。

以高稀释度生产药物产品的缺点是需要施用至患者大容量的输注溶液。为了患者的便利以及药物耐受性原因，非常希望提供高浓度的放射性药物产品。然而，那些高度浓缩的溶液特别容易发生放射性分解。因此，一方面，通过稀释药物产品避免放射性分解，另一方面，通过提供浓缩药物溶液避免患者在治疗期间的不适，如上两方面之间存在矛盾。在Mathur等人Cancer Biotherapy and Radiopharmaceuticals[癌症生物治疗和放射性药物],2017,32(7),266-273中已经报道了一种高浓度的产品，并声称为即用型。然而，此组合物在耐受性方面可能存在问题，因为其含有大量乙醇。

因此，设计可以以商业规模生产并作为高浓度(导致为患者提供方便的小输注量并且是高生理耐受性的组合物(例如不含有乙醇的组合物))的足够稳定和无菌的溶液形式递送的即用型放射性药物组合物仍然是一个挑战。

发明内容

本发明人现在已经找到了一种设计和生产高浓度放射性核素络合物溶液的方法，该溶液即使在环境温度或短期升高的温度下储存也在化学和放射化学上非常稳定，因此它可以以商业规模生产并作为即用型放射性药物产品供应。

本披露提供于如下概述的各个方面：

1.一种药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)由如下形成的络合物

(ai)放射性核素，和

(aii)与螯合剂连接的GRP受体肽拮抗剂结合部分；以及；

(b)至少两种抗放射性分解降解的稳定剂；以及

(c)任选地表面活性剂。

2.根据实施例1所述的药物组合物，其中所述放射性核素选自¹¹¹In、¹⁸F、²¹¹At、⁸²Rb、¹²³I、¹³¹I、¹³³mIn、⁹⁹mTc、⁹⁴mTc、⁶⁷Ga、⁶⁶Ga、⁶⁸Ga、⁵²Fe、¹⁶⁹Er、⁷²As、⁹⁷Ru、²⁰³Pb、²¹²Pb、⁶²Cu、⁶⁴Cu、⁶⁷Cu、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、⁸⁶Y、⁹⁰Y、⁵¹Cr、⁵²mMn、¹⁵⁷Gd、¹⁷⁷Lu、¹⁶¹Tb、⁶⁹Yb、¹⁷⁵Yb、¹⁰⁵Rh、¹⁶⁶Dy、¹⁶⁶Ho、¹⁵³Sm、¹⁴⁹Pm、¹⁵¹Pm、¹⁷²Tm、¹²¹Sn、¹¹⁷mSn、²¹³Bi、²¹²Bi、¹⁴²Pr、¹⁴³Pr、¹⁹⁸Au、¹⁹⁹Au、⁸⁹Zr、²²⁵Ac、⁴³Sc、⁴⁴Sc和⁴⁷Sc，优选地选自¹¹¹In、¹⁷⁷Lu、²²⁵Ac和⁶⁸Ga，更优选地是¹⁷⁷Lu。

3.根据实施例1所述的药物组合物，其中所述放射性核素以其提供至少370MBq/mL(在EOP时)±37MBq/mL(±10％)的体积放射性的浓度存在。

4.根据实施例1所述的药物组合物，其中所述螯合剂选自DOTA、DTPA、NTA、EDTA、DO3A、NOC和NOTA，优选地是DOTA。

5.根据实施例1所述的药物组合物，其中所述与螯合剂连接的GRP受体肽拮抗剂结合部分是具有式(I)的NeoB：

6.根据实施例1所述的药物组合物，其中所述至少两种稳定剂选自龙胆酸(2,5-二羟基苯甲酸)或其盐、抗坏血酸(L-抗坏血酸、维生素C)或其盐(例如抗坏血酸钠)、蛋氨酸、组氨酸、褪黑素、乙醇和Se-蛋氨酸，优选地选自龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐。

7.根据实施例6所述的药物组合物，其中所述至少两种稳定剂是龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐。

8.根据实施例7所述的药物组合物，其中龙胆酸与抗坏血酸之间的比值在1:16和1:10之间，典型地在1:15和1:10之间，例如在1:12和1:11之间。

9.根据实施例7或8所述的药物组合物，其中所述龙胆酸或其盐以至少1000μg/mL、例如1000μg/mL和1500μg/mL之间的浓度存在。

10.根据实施例7至9所述的药物组合物，其中所述抗坏血酸或其盐以至少10000μg/mL、优选地至少12000μg/mL、优选地至少15000μg/mL、例如12000和18000μg/mL之间的浓度存在。

11.根据实施例7至10所述的药物组合物，其中所述龙胆酸或其盐以至少1000μg/mL、例如1000μg/mL和1500μg/mL之间的浓度存在，并且抗坏血酸或其盐以15000μg/mL、例如12000和18000μg/mL之间的浓度存在。

12.根据实施例1至11所述的药物组合物，其中所述药物配制品的放射化学纯度高于95％长达72小时，优选地高于98％长达72h。

13.根据实施例1至12所述的药物组合物，其中所述表面活性剂是非离子表面活性剂。

14.根据实施例13所述的药物组合物，其中所述非离子表面活性剂选自聚乙二醇15羟基硬脂酸酯、泊洛沙姆、聚山梨酯20、聚山梨酯80或聚乙烯吡咯烷酮(平均分子量10,000)。

15.根据实施例14所述的药物组合物，其中所述非离子表面活性剂是聚乙二醇15羟基硬脂酸酯。

16.根据实施例1-15所述的药物组合物，其中所述表面活性剂以至少5μg/mL、优选地至少25μg/mL、并且更优选地至少50μg/mL的浓度存在。

17.根据实施例16所述的药物组合物，其中所述表面活性剂以包含在5μg/mL和5000μg/mL之间、优选地25μg/mL和2000μg/mL之间、并且更优选地50μg/mL和1000μg/mL之间的浓度存在。

18.根据实施例17所述的药物组合物，其中所述表面活性剂以100μg/mL的浓度存在。

19.一种药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)由如下形成的络合物

(ai)放射性核素¹⁷⁷镥(Lu-177)，和

(aii)具有式(I)的NeoB：

以及；

(b)龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐；

(c)任选地，聚乙二醇15羟基硬脂酸酯，

(d)任选地，至少一种其他药学上可接受的赋形剂。

20.根据实施例19所述的药物组合物，其中所述至少一种其他药学上可接受的赋形剂选自缓冲液和/或溶剂、和/或pH调节剂。

21.根据实施例20所述的药物组合物，其中所述缓冲剂选自乙酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液和磷酸盐缓冲液，优选地是乙酸盐缓冲液。

22.根据实施例20或21所述的药物组合物，其中所述溶剂是注射用水。

23.根据实施例20、21或22所述的药物组合物，其中所述pH调节剂是NaOH。

24.一种药物组合物，所述药物组合物由以下组成：

(a)由如下形成的络合物

(ai)放射性核素¹⁷⁷镥(Lu-177)，和

(aii)具有式(I)的NeoB：

以及；

(b)龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐；

(c)聚乙二醇15羟基硬脂酸酯；

(d)乙酸盐缓冲液；

(e)注射用水，以及

(f)NaOH，

(g)DTPA。

25.根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物是水溶液。

26.根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物是输注用溶液。

27.根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，用于治疗或预防癌症，典型地，GRPR阳性癌症。

28.根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，其中所述溶液以商业规模制造进行生产、特别是以至少0.5Ci的批量大小进行生产。

29.根据前述实施例中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物用于商业用途。

30.一种用于制造如上定义的所述药物组合物的方法，所述方法包括以下方法步骤：

(1)通过如下形成放射性核素和与螯合剂连接的GRP受体肽拮抗剂结合部分的络合物

(1.1)制备包含放射性核素和仅一种稳定剂的水溶液，所述稳定剂是抗放射性分解降解的龙胆酸或其盐；

(1.2)制备包含与螯合剂连接的GRP受体肽拮抗剂结合部分和任选地表面活性剂的水溶液；以及

(1.3)将步骤(1.1)和(1.2)中获得的溶液混合，加热所得混合物，并且任选地过滤获得的溶液；

(2)通过如下稀释由步骤(1)获得的络合物溶液

(2.1)制备任选地包含仅一种为抗坏血酸的抗放射性分解降解的稳定剂的水性稀释溶液；以及

(2.2)将由步骤(1)获得的络合物溶液与由步骤(2.1)获得的稀释溶液混合以获得最终溶液。

31.根据实施例30所述的方法，其中步骤(1.1)的溶液包含作为放射性核素的¹⁷⁷LuCl₃，和HCl。

32.根据实施例30至31中任一项所述的方法，其中步骤(1.1)中制备的溶液仅包含一种稳定剂，所述稳定剂是浓度为至少1000μg/mL、例如1000μg/mL和1500mg/mL之间的龙胆酸或其盐。

33.根据实施例30至32中任一项所述的方法，其中步骤(1.1)的溶液进一步包含缓冲液，优选乙酸盐缓冲液。

34.根据实施例30至33中任一项所述的方法，其中步骤(1.2)中的溶液中的所述与螯合剂连接的GRP受体肽拮抗剂结合部分是具有式(I)的NeoB：

35.根据实施例30至34中任一项所述的方法，其中步骤(1.2)的溶液进一步包含表面活性剂，所述表面活性剂是聚乙二醇15羟基硬脂酸酯。

36.根据实施例30至35中任一项所述的方法，其中步骤(2.1)中制备的溶液仅包含一种稳定剂，所述稳定剂是浓度为至少10000μg/mL、优选地至少12000mg/mL、优选地至少15000μg/mL、例如12000和18000μg/mL之间的抗坏血酸或其盐。

37.根据实施例30至36中任一项所述的方法，其中步骤(1.2)的溶液进一步包含聚乙二醇15羟基硬脂酸酯，其浓度包含在5μg/mL和5000μg/mL之间、优选地25μg/mL和2000μg/mL之间、更优选地50μg/mL和1000μg/mL之间，以及甚至更优选地浓度为100μg/L。

38.根据实施例30至37中任一项所述的方法，其中在步骤(1.3)中，将所得混合物加热至从70℃至99℃、优选地从90℃至98℃的温度，持续从1至59min、优选地从2至15min。

39.根据实施例30至38中任一项所述的方法，其中在步骤(1.3)结束时获得的络合物进一步通过0.20μm过滤。

40.根据实施例30至39中任一项所述的方法，其中步骤(2.1)的溶液进一步包含多价螯合剂(Sequestering agent)，所述多价螯合剂是二乙烯三胺五乙酸(DTPA)或其盐。

41.根据实施例30至40中任一项所述的方法，其中步骤(2.1)的溶液进一步包含pH调节剂，所述pH调节剂是NaOH。

42.根据实施例30至41中任一项所述的方法，其中步骤(2.1)的溶液进一步包含注射用水。

43.根据实施例30至42中任一项所述的方法，所述方法进一步包括以下方法步骤：

(3)无菌过滤由步骤(2)获得的溶液；

(4)将由步骤(3)获得的过滤的溶液无菌分配至剂量单位容器，其中所述放射性核素以其提供至少370MBq/mL(在EOP时)±37MBq/mL(±10％)的体积放射性的浓度存在。

44.根据实施例30至43中任一项所述的方法，其中步骤(4)中的剂量单位容器是封闭在铅容器内的带塞的小瓶。

45.一种通过如实施例30至44中任一项所定义的方法获得的药物水溶液。

具体实施方式

定义

在下文中，如本文所用的术语以其含义定义。

术语“约”或“大约”在本文中的含义是下列值可以变化±20％、优选±10％、更优选±5％、甚至更优选±2％、甚至更优选±1％。

除非另有定义，否则“％”在本文中具有重量百分比(wt％)的含义，也称为重量与重量的百分比(w/w％)。

“总浓度”：一个或多个个体浓度的总和。

“水溶液”：一种或多种溶解物在水中的溶液。

“通过如下形成的络合物：

(ai)放射性核素，和

(aii)与螯合剂连接的细胞受体结合有机部分”：

放射性核素金属离子与螯合剂的官能团(例如胺或羧酸)形成非共价键。螯合剂具有至少两个此类络合官能团，以能够形成螯合络合物。

“pH从4至6.0的缓冲液”：可以是乙酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液(例如柠檬酸盐+HCl或柠檬酸+磷酸氢二钠)或磷酸盐缓冲液(例如磷酸二氢钠+磷酸氢二钠)，优选地，所述缓冲液是乙酸盐缓冲液，优选地，所述乙酸盐缓冲液由乙酸和乙酸钠构成。

“多价螯合剂”，适用于络合放射性核素金属离子的螯合剂，优选DTPA：二乙烯三胺五乙酸。

“pH调节剂”是添加至溶液中以调节溶液pH值从而获得所需性能的化学品。控制pH可以通过向配制品中添加pH调节剂进行。pH调节剂的示例包括常用的酸和碱、缓冲液以及酸和碱的混合物。例如，可使用的碱包括NaOH、KOH、Ca(OH)₂、碳酸氢钠、碳酸钾和碳酸钠。可以使用的酸的示例包括盐酸、乙酸、柠檬酸、甲酸、富马酸和氨基磺酸。优选地pH调节剂是碱，更优选地是NaOH。流体的pH范围可以是任何合适的范围，如约2至约14。

“用于商业用途”：药物产品，例如药物水溶液，通过遵守卫生当局(例如US-FDA或EMA)要求的所有药物产品质量和稳定性要求能够获得(优选已获得)此类卫生机构的上市许可，能够以商业规模从或在药物产品生产场所制造(优选已制造)，然后进行质量控制测试程序，并且能够向远的位置的终端用户(例如医院或病人)供应(优选已供应)。

在本披露的上下文中的螯合剂可以是

DOTA：1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸，

DTPA：二乙烯三胺五乙酸，

NTA：次氮基三乙酸，

EDTA：乙二胺四乙酸，

DO3A：1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸，

NOTA：1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸，

屈坦(Trizoxetan)，

泰坦(Tetraxetan)

或其混合物，优选DOTA。

“细胞受体结合部分”：化学分子，其分子的至少部分与细胞表面的受体分子结合。本披露特别合适的细胞受体结合部分是生长抑素受体结合肽，优选地，所述生长抑素受体结合肽选自奥曲肽、奥曲塔特、兰瑞肽、伐普肽、帕瑞肽、伊拉曲肽(ilatreotide)，喷曲肽(pentetreotide)、迪普瑞肽(depreotide)、沙托瑞肽、维多瑞肽(veldoreotide)，优选地选自奥曲肽和奥曲塔特。

“连接”：细胞受体结合有机部分直接与螯合剂连接或经由接头分子连接，优选直接连接。一个或多个连接键是细胞受体结合有机部分(和接头)和螯合剂之间的一个或多个共价键或非共价键，优选地该一个或多个键是共价键。

“抗放射性分解降解稳定剂”：保护有机分子免受放射性分解降解的稳定剂，例如，当从放射性核素发射的γ射线裂解有机分子的原子与自由基之间形成的键时，那些自由基然后被稳定剂清除，这避免了自由基经历可能导致不希望的、潜在无效的或甚至有毒分子的任何其他化学反应。因此，那些稳定剂也被称为“游离自由基清除剂”或简称“自由基清除剂”。那些稳定剂的其他替代术语是“放射稳定性增强剂”、“辐射分解稳定剂”或简称“猝灭剂”。

“放射化学纯度”：是以所陈述化学形式或生物形式存在的所陈述放射性核素的百分比。放射色谱法，例如HPLC法或即时薄层色谱法(iTLC)，是核药学中确定放射化学纯度最普遍接受的方法。

如本文所用，术语化合物的“有效量”或“治疗有效量”是指将引起受试者的生物学或医学应答(例如，改善症状、减轻病症、减缓或延迟疾病进展或预防疾病)的化合物的量。

如本文所用，术语“取代的”或“任选地取代的”是指任选地被选自以下的一个或多个取代基取代的基团：卤素、-OR’、-NR’R”、-SR’、-SiR’R”R’”、-OC(O)R’、-C(O)R’、-CO₂R’、-C(O)NR’R”、-OC(O)NR’R”、-NR”C(O)R’、-NR’-C(O)NR”R’”、-NR”C(O)OR’、-NR-C(NR’R”R’”)＝N R””、-NR-C(NR’R”)＝NR’”、-S(O)R’、-S(O)₂R’、-S(O)₂NR’R”、-NRSO₂R’、-CN、-NO₂、-R’、-N₃、-CH(Ph)₂、氟(C₁-C₄)烷氧基和氟(C₁-C₄)烷基，其数目范围从零到芳族环系统上的开环化合价的总数；其中R’、R”、R’”和R””可以独立地选自氢、烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基。当本披露的化合物包含多于一个R基团时，例如，当存在多于一个这些基团时，每个R基团被独立地选择为分别是R’、R”、R’”和R””基团。

如本文所用，术语“烷基”本身或作为另一取代基的一部分是指具有1至12个碳原子的直链或支链烷基官能团。合适的烷基包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基、戊基及其异构体(例如正戊基、异戊基)和己基及其异构体(例如正己基、异己基)。

如本文所用，术语“杂芳基”是指多不饱和芳族环系统，其具有稠合在一起或共价连接的单个环或多个芳族环，含有5至10个原子，其中至少一个环是芳族的并且至少一个环原子是选自N、O和S的杂原子。氮和硫杂原子可以任选地被氧化并且氮杂原子可以任选地被季铵化。此类环可稠合至芳基、环烷基或杂环基环。此类杂芳基的非限制性实例包括：呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、噁三唑基、噻三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噁嗪基、二噁嗪基、噻嗪基、三嗪基、吲哚基、异吲哚基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻吩基、异苯并噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、嘌呤基、苯并噻二唑基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、喹唑啉基和喹喔啉基。

如本文所用，术语“芳基”是指多不饱和芳族烃基，其具有单环或稠合在一起的多个芳族环，含有6至10个环原子，其中至少一个环是芳族的。芳族环可任选地包括与其稠合的一到两个另外的环(如本文定义的环烷基、杂环基或杂芳基)。合适的芳基包括苯基、萘基和与杂环基稠合的苯环，如苯并吡喃基、苯并间二氧杂环戊烯基、苯并二氧杂环己烷基等。

如本文所用，术语“卤素”是指氟(-F)、氯(-Cl)、溴(-Br)或碘(-I)基团。

如本文所用，术语“任选地取代的脂族链”是指具有4至36个碳原子、优选地12至24个碳原子的任选地取代的脂族链。

下文更详细地描述并例示本披露。

如本文所用的术语“龙胆酸与抗坏血酸的比值”是游离酸浓度比(μg/mL:μg/mL)，即针对GA与AA作为游离酸的浓度比，其中反离子(如钠(Na))的浓度不计算在内。

通常，本披露涉及药物组合物，特别是放射性药物组合物。该药物组合物用于静脉内(IV)使用/应用/施用。该溶液是稳定的，浓缩的，且为即用型。

根据本披露所述的放射性药物组合物包含：

(a)由如下形成的络合物

(ai)放射性核素，和

(aii)与螯合剂连接的GRP受体肽拮抗剂结合部分；以及；

(b)至少两种抗放射性分解降解的稳定剂；以及

(c)任选地表面活性剂。

经放射性标记的GRPR拮抗剂

所述络合物具有下式：

MC-S-P

其中：

M是适用于核医学的放射性核素，

C是结合M的螯合剂，

S是共价连接C与P的N末端的任选间隔子；

P是GRP受体肽拮抗剂，优选地具有以下通式：

Xaa1-Xaa2—Xaa3—Xaa4—Xaa5—Xaa6—Xaa7—Z；

Xaa1不存在或选自由以下氨基酸残基组成的组：Asn、Thr、Phe、3-(2-噻吩基)丙氨酸(Thi)、4-氯苯丙氨酸(Cpa)、α-萘丙氨酸(α-Nal)、β-萘丙氨酸(β-Nal)、1,2,3,4-四氢去甲哈尔满-3-甲酸(Tpi)、Tyr、3-碘代酪氨酸(o-I-Tyr)、Trp和五氟苯丙氨酸(5-F-Phe)(均为L-异构体或D-异构体)；

Xaa2是Gln、Asn或His；

Xaa3是Trp或1,2,3,4-四氢去甲哈尔满-3-甲酸(Tpi)；

Xaa4是Ala、Ser或Val；

Xaa5是Val、Ser或Thr；

Xaa6是Gly、肌氨酸(Sar)、D-Ala、或β-Ala；

Xaa7是His或(3-甲基)组氨酸(3-Me)His；

Z选自-NHOH、-NHNH2、-NH-烷基、-N(烷基)2、和-O-烷基，

或Z是

其中X是NH(酰胺)或O(酯)，并且R1和R2相同或不同并且选自质子、任选地取代的烷基、任选地取代的烷基醚、芳基、芳基醚或烷基-、卤素、羟基、羟烷基、胺、氨基、酰胺基或酰胺取代的芳基或杂芳基基团。

根据实施例，Z选自下式之一，其中X是NH或O：

根据实施例，P是DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Z；

其中Z是如上文定义的。

根据实施例，P是DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Z；

Z选自Leu-ψ(CH2N)-Pro-NH2和NH-CH(CH₂-CH(CH₃)₂)₂

或Z是

其中X是NH(酰胺)，R2是CH₂-CH(CH₃)₂，并且R1与R2是相同或不同的(CH2N)-Pro-NH2。

根据实施例，螯合剂C通过接枝选自以下列表中的一种螯合试剂获得：

根据一个实施例，M是适用于核医学的放射性核素，选自¹¹¹In、¹⁸F、²¹¹At、⁸²Rb、¹²³I、¹³¹I、¹³³mIn、⁹⁹mTc、⁹⁴mTc、⁶⁷Ga、⁶⁶Ga、⁶⁸Ga、⁵²Fe、¹⁶⁹Er、⁷²As、⁹⁷Ru、²⁰³Pb、²¹²Pb、⁶²Cu、⁶⁴Cu、⁶⁷Cu、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、⁸⁶Y、⁹⁰Y、⁵¹Cr、⁵²mMn、¹⁵⁷Gd、¹⁷⁷Lu、¹⁶¹Tb、⁶⁹Yb、¹⁷⁵Yb、¹⁰⁵Rh、¹⁶⁶Dy、¹⁶⁶Ho、¹⁵³Sm、¹⁴⁹Pm、¹⁵¹Pm、¹⁷²Tm、¹²¹Sn、¹¹⁷mSn、²¹³Bi、²¹²Bi、¹⁴²Pr、¹⁴³Pr、¹⁹⁸Au、¹⁹⁹Au、⁸⁹Zr、²²⁵Ac、⁴³Sc、⁴⁴Sc和⁴⁷Sc。优选地，M选自¹¹¹In、¹⁷⁷Lu、²²⁵Ac和⁶⁸Ga。

根据实施例，螯合物C选自由以下组成的组：DOTA、DTPA、NTA、EDTA、DO3A、NOC和NOTA，优选地是DOTA。

根据实施例，S选自由以下组成的组：

a)具有下式的含芳基残基：

其中PABA是对氨基苯甲酸，PABZA是对氨基苄胺，PDA是苯二胺，并且PAMBZA是(氨基甲基)苄胺；

b)具有下式的二羧酸、ω-氨基羧酸、ω-二氨基羧酸或二胺：

其中DIG是二甘醇酸并且IDA是亚氨基二乙酸；

c)各种链长的PEG间隔子，特别地选自以下的PEG间隔子

d)α-氨基酸和β-氨基酸，单链或不同链长的同源链或不同链长的异源链，特别是：

GRP(1-18)、GRP(14-18)、GRP(13-18)、BBN(l-5)、或[Tyr4]BB(1-5)；或

e)a、b、c和d的组合。

根据实施例，GRPR拮抗剂选自由具有以下式的化合物组成的组：

其中MC和P如以上所定义。

根据实施例，P是DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH(CH2-CH(CH₃)₂)₂。

根据实施例，所述络合物是具有式(I)的NeoB1：

(DOTA-(对氨基苄胺-二甘醇酸)-[D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH[CH₂-CH(CH₃)₂]₂。

根据实施例，所述络合物是具有式(II)的经放射性标记的M-NeoB1：

(M-DOTA-(对氨基苄胺-二甘醇酸)-[D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH[CH₂-CH(CH₃)₂]₂；

其中M是放射性核素，优选地，M选自¹⁷⁷Lu、⁶⁸Ga和¹¹¹In。

根据实施例，经放射性标记的GRPR拮抗剂是具有式(III)的经放射性标记的NeoB2：

(M-N₄(对氨基苄胺-二甘醇酸)-[D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH[CH₂-CH(CH₃)₂]₂；

其中M是放射性核素。

在实施例中，M是放射性核素，其可选自¹¹¹In、¹³³mIn、⁹⁹mTc、⁹⁴mTc、⁶⁷Ga、⁶⁶Ga、⁶⁸Ga、⁵²Fe、¹⁶⁹Er、⁷²As、⁹⁷Ru、²⁰³Pb、²¹²Pb、⁶²Cu、⁶⁴Cu、⁶⁷Cu、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、⁸⁶Y、⁹⁰Y、⁵¹Cr、⁵²mMn、¹⁵⁷Gd、¹⁷⁷Lu、¹⁶¹Tb、⁶⁹Yb、¹⁷⁵Yb、¹⁰⁵Rh、¹⁶⁶Dy、¹⁶⁶Ho、¹⁵³Sm、¹⁴⁹Pm、¹⁵¹Pm、¹⁷²Tm、¹²¹Sn、¹¹⁷mSn、²¹³Bi、²¹²Bi、¹⁴²Pr、¹⁴³Pr、¹⁹⁸Au、¹⁹⁹Au、⁸⁹Zr、²²⁵Ac和⁴⁷Sc。优选地，M选自¹¹¹In、¹⁷⁷Lu、²²⁵Ac和⁶⁸Ga。

根据实施例，M是¹⁷⁷Lu。在这种情况下，经放射性标记的GRPR拮抗剂可以用于放射性核素疗法。根据另一个实施例，M是⁶⁸Ga。在这种情况下，经放射性标记的GRPR拮抗剂可以用于PET。根据另一个实施例，M是¹¹¹In。在这种情况下，经放射性标记的GRPR拮抗剂可以用于SPECT。

根据另一个特定实施例，GRPR拮抗剂是具有下式(IV)的ProBOMB1：

(DOTA-pABzA-DIG-D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-ψ(CH2N)-Pro-NH2)。

具有式(I)、(II)、(III)和(IV)的化合物的合成

具有式(I)、(II)、(III)和(IV)的化合物可以使用披露于参考文献“PositronEmission Tomography Imaging of the Gastrin-Releasing Peptide Receptor with aNovel Bombesin Analogue[使用新型铃蟾肽类似物对胃泌素释放肽受体进行正电子发射断层扫描成像]”ACS Omega 2019,4,1470-1478中的方法合成。

药物组合物

经放射性标记的GRPR拮抗剂具有随时间推移降解的趋势，在目标有效期(72小时)结束时放射化学纯度低于规格，这是配制药物组合物中存在的问题。通过使用抗放射性分解降解的稳定剂确定溶液的稳定性。

如本文所用，“抗辐射分解降解的稳定剂”是指保护有机分子免受放射性分解降解的稳定剂，例如，当从放射性核素发射的γ射线裂解有机分子的原子与自由基之间形成的键时，那些自由基然后被稳定剂清除，这避免了自由基经历可能导致不希望的、潜在无效的或甚至有毒分子的任何其他化学反应。因此，那些稳定剂也被称为“游离自由基清除剂”或简称“自由基清除剂”。那些稳定剂的其他替代术语是“放射稳定性增强剂”、“辐射分解稳定剂”或简称“猝灭剂”。

通常，根据本发明使用的稳定剂可选自龙胆酸(2,5-二羟基苯甲酸)或其盐、抗坏血酸(L-抗坏血酸、维生素C)或其盐(例如抗坏血酸钠)、蛋氨酸、组氨酸、褪黑素、乙醇和Se-蛋氨酸。优选的稳定剂选自龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐。

乙醇被认为是不太优选的稳定剂，因为如果以较高浓度存在，则存在与其相关的耐受性问题。在本披露的溶液中应理想地避免乙醇(换句话说：不含乙醇)，至少应限制本披露溶液中乙醇的量，例如预期待注射/输注的最终溶液中少于5％，优选地少于2％，更优选地少于1％。甚至更优选地，该溶液不含乙醇。

在第一方面，本披露涉及药物组合物，该药物组合物包含如本文所述的经放射性标记的GRPR拮抗剂和至少两种抗放射性分解降解的稳定剂。

在实施例中，所述至少两种稳定剂选自龙胆酸(2,5-二羟基苯甲酸)或其盐、抗坏血酸(L-抗坏血酸、维生素C)或其盐(例如抗坏血酸钠)、蛋氨酸、组氨酸、褪黑素、乙醇和Se-蛋氨酸，优选地选自龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐。所述至少两种稳定剂可以是龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐。

特别地，诸位发明人意外地发现，在合成后72小时，在经放射性标记的GRPR拮抗剂化合物的药物组合物中同时添加特定量的抗坏血酸和龙胆酸二者，使得所述组合物的放射化学纯度超过95％。

在实施例中，龙胆酸与抗坏血酸之间的比值在1:16和1:10之间，典型地在1:15和1:10之间，例如在1:12和1:11之间。

在实施例中，所述龙胆酸或其盐能以至少1000μg/mL、例如1000μg/mL和1500μg/mL之间的浓度存在。

在实施例中，所述抗坏血酸或其盐能以至少10000μg/mL、优选地至少12000μg/mL、优选地至少15000μg/mL、例如12000和18000μg/mL之间的浓度存在。

在实施例中，所述龙胆酸或其盐以至少1000μg/mL、例如1000μg/mL和1500μg/mL之间的浓度存在，并且抗坏血酸或其盐以15000μg/mL、例如12000和18000μg/mL之间的浓度存在。

在实施例中，放射性药物组合物包含作为放射性稳定剂的龙胆酸和抗坏血酸二者，浓度分别为1312μg/mL和15000μg/mL。

在实施例中，药物组合物的放射化学纯度高于95％长达72小时，优选地高于98％长达72h。

由于非特异性结合(NSB)，GRPR拮抗剂具有黏附于玻璃和塑料表面的趋势，这是配制药物组合物中存在的问题。

在第二方面，本披露涉及药物组合物，该药物组合物包含本文所述的经放射性标记的GRPR拮抗剂、至少两种抗放射性分解降解的稳定剂和任选地表面活性剂。

所述表面活性剂可以包含具有(i)聚乙二醇链和(ii)脂肪酸酯的化合物。在实施例中，表面活性剂还包含游离乙二醇。

在实施例中，表面活性剂包含具有式(V)的化合物

其中n包含在3和1000之间，优选地在5和500之间，并且更优选地在10和50之间，并且

R是脂肪酸链，优选地是任选地取代的脂肪链。

在实施例中，表面活性剂包含聚乙二醇15羟基硬脂酸酯和游离乙二醇。

在实施例中，所述表面活性剂是非离子表面活性剂。优选地，所述非离子表面活性剂选自聚乙二醇15羟基硬脂酸酯(Kolliphor HS 15)、泊洛沙姆(Kolliphor P188)、聚山梨酯20(Tween 20)、聚山梨酯80(Tween 80)或聚乙烯吡咯烷酮(平均分子量10,000)(聚乙烯吡咯烷酮K10)。优选地，所述非离子表面活性剂是聚乙二醇15羟基硬脂酸酯(Kolliphor HS15)。

经放射性标记的GRPR拮抗剂能以提供370MBq/mL(在EOP时)±37MBq/mL(±10％)的体积放射性的浓度存在。

表面活性剂能以至少5μg/mL、优选地至少25μg/mL、并且更优选地至少50μg/mL的浓度存在。表面活性剂能以包含在5μg/mL和5000μg/mL之间、优选地25μg/mL和2000μg/mL之间、并且更优选地50μg/mL和1000μg/mL之间的浓度存在。表面活性剂能以100μg/mL的浓度存在。

在第三方面，本披露涉及药物组合物，该药物组合物包含如本文所述的经放射性标记的GRPR拮抗剂、至少两种抗放射性分解降解的稳定剂、任选地表面活性剂和至少一种其他药学上可接受的赋形剂。

药学上可接受的赋形剂可以是常规使用的那些中的任一种，并且仅限于理化方面的考虑，如溶解度和缺乏与一种或多种活性化合物的反应性。

特别地，该一种或多种赋形剂可以选自缓冲液和/或溶剂、和/或pH调节剂。

缓冲液包括醋酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液和磷酸盐缓冲液。在实施例中，所述缓冲液是乙酸盐缓冲液。

在实施例中，所述溶剂是注射用水。

在实施例中，所述pH调节剂是NaOH。

在第四方面，本披露涉及药物组合物，该药物组合物包含由放射性核素¹⁷⁷镥(Lu-177)和具有式(I)的NeoB形成的络合物：

(DOTA-(对氨基苄胺-二甘醇酸)-[D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH[CH₂-CH(CH₃)₂]₂

以及，龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐、聚乙二醇15羟基硬脂酸酯、乙酸盐缓冲液、注射用水、和NaOH。

根据实施例，药物组合物是水性溶液，例如可注射配制品。根据具体的实施例，药物组合物是输注用溶液。

对可注射组合物的有效药物载体的要求是本领域普通技术人员众所周知的(参见，例如，Pharmaceutics and Pharmacy Practice[药剂学与药学实践],J.B.LippincottCompany[利平科特出版公司],宾夕法尼亚州费城,Banker和Chalmers编,238-250页(1982),和^SHP Handbook on Injectable Drugs[SHP注射用药物手册],Trissel,第15版,622-630页(2009))。

本披露还涉及如上所述的药物组合物，用于治疗或预防癌症，典型地，GRPR阳性癌症。

如本文所用，术语“癌症”是指具有自主生长能力的细胞，即以快速增殖的细胞生长为特征的异常状态或病症。过度增殖和肿瘤疾病状态可以分类为病理性(即表征或构成疾病状态)，或可以分类为非病理性(即偏离正常状态但与疾病状态无关)。该术语意欲包括所有类型的癌性生长或致癌性过程、转移性组织或恶性转化的细胞、组织或器官，而不考虑组织病理学类型或侵袭的阶段。

在特定的实施例中，癌症选自显示GRPR的瘤形成相关脉管系统的前列腺癌、乳腺癌、小细胞肺癌、结肠癌、胃肠道间质瘤、胃泌素瘤、肾细胞癌、胃肠胰神经内分泌肿瘤、食管鳞状细胞肿瘤、神经母细胞瘤、头颈部鳞状细胞癌，以及卵巢肿瘤、子宫内膜肿瘤和胰腺肿瘤。在实施例中，癌症是前列腺癌或乳腺癌。

在本发明的另一个方面，药物组合物以商业规模制造进行生产，特别是以至少0.5Ci的批量大小进行生产。

在本发明的另一个方面，药物组合物用于商业用途。

在又一个方面，本披露还涉及药物组合物，该药物组合物包含经放射性标记的GRPR拮抗剂(典型地¹⁷⁷Lu-NeoB)，用于治疗或预防有需要的受试者的癌症，其中所述药物组合物用如前述实施例中任一项所述的放射性稳定剂配制，并且以包含在2000和10000MBq之间的治疗有效量向所述受试者施用，典型地在施用时具有高于95％的放射化学纯度(RCP)。

在某些方面，受试者是哺乳动物，例如但不限于啮齿动物、犬、猫、或灵长类动物。在优选的方面，受试者是人。

在特定的实施例中，每次治疗向所述受试者施用治疗有效量的组合物2至8次。

例如，人类患者可以用包含经放射性标记的GRPR拮抗剂(特别是¹⁷⁷Lu-NeoB)的所述药物组合物治疗，静脉施用2至8个周期，每周期2000至10000MBq，典型地，在施用时具有高于95％的放射化学纯度(RCP)。

根据本披露，提供以下实施例：

1.一种药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)由如下形成的络合物

(ai)放射性核素，和

(aii)与螯合剂连接的GRP受体肽拮抗剂结合部分；以及；

(b)至少两种抗放射性分解降解的稳定剂；以及

(c)任选地表面活性剂。

2.根据实施例1所述的药物组合物，其中所述放射性核素选自¹¹¹In、¹⁸F、²¹¹At、⁸²Rb、¹²³I、¹³¹I、¹³³mIn、⁹⁹mTc、⁹⁴mTc、⁶⁷Ga、⁶⁶Ga、⁶⁸Ga、⁵²Fe、¹⁶⁹Er、⁷²As、⁹⁷Ru、²⁰³Pb、²¹²Pb、⁶²Cu、⁶⁴Cu、⁶⁷Cu、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、⁸⁶Y、⁹⁰Y、⁵¹Cr、⁵²mMn、¹⁵⁷Gd、¹⁷⁷Lu、¹⁶¹Tb、⁶⁹Yb、¹⁷⁵Yb、¹⁰⁵Rh、¹⁶⁶Dy、¹⁶⁶Ho、¹⁵³Sm、¹⁴⁹Pm、¹⁵¹Pm、¹⁷²Tm、¹²¹Sn、¹¹⁷mSn、²¹³Bi、²¹²Bi、¹⁴²Pr、¹⁴³Pr、¹⁹⁸Au、¹⁹⁹Au、⁸⁹Zr、²²⁵Ac、⁴³Sc、⁴⁴Sc和⁴⁷Sc。优选地，M选自¹¹¹In、¹⁷⁷Lu、²²⁵Ac和⁶⁸Ga，更优选地是¹⁷⁷Lu。

19.一种药物组合物，所述药物组合物包含：

(b)由如下形成的络合物

(ai)放射性核素¹⁷⁷镥(Lu-177)，和

(aii)具有式(I)的NeoB：

以及；

(b)龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐；

(c)任选地，聚乙二醇15羟基硬脂酸酯，

(d)任选地，至少一种其他药学上可接受的赋形剂。

24.一种药物组合物，所述药物组合物由以下组成：

(a)由如下形成的络合物

(ai)放射性核素¹⁷⁷镥(Lu-177)，和

(aii)具有式(I)的NeoB：

以及；

(b)龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐；

(c)聚乙二醇15羟基硬脂酸酯；

(d)乙酸盐缓冲液；

(e)注射用水，以及

(f)NaOH；

(g)DTPA。

(1.3)将步骤(1.1)和(1.2)中获得的溶液混合，加热所得混合物，并且任选地过滤获得的络合物；

(2)通过如下稀释由步骤(1)获得的络合物溶液

(3)无菌过滤由步骤(2)获得的溶液；

实例

在下文中，将更详细地并且具体地参考实例来描述本披露，但是这些实例并不意在限制本发明。

材料：

¹⁷⁷LuCl₃可以从商业来源获得，例如，荷兰I.D.B.公司(I.D.B.Holland BV)。药物产品的所有其他组分是可从各种来源商购的。

用于制备药物组合物的方法

使用MiniAIO合成仪自动进行Lu-NeoB制造。已开发合成程序，如下：

1.将¹⁷⁷LuCl₃转移至反应器中；

2.将反应缓冲液转移至反应器中。反应缓冲液由乙酸钠缓冲液和龙胆酸组成。乙酸盐缓冲液使进行标记的pH值维持在4-5之间，而龙胆酸保护肽在进行标记步骤期间不发生放射性分解；

3.将含有Kolliphor HS 15的NeoB溶液添加至反应器中；

4.在95℃下加热5分钟；

在标记结束时，添加稀释溶液以获得10mCi/mL的体积活性。稀释溶液由抗坏血酸(抗氧化剂)、DTPA(多价螯合剂)、NaOH(pH调节剂)和注射用水构成。

实例1：配制品对药物产品放射化学纯度的作用

使用镥氧奥曲肽(Lutathera)配制品中存在的相同的抗氧化剂的量的经¹⁷⁷Lu标记的产品在72小时内的稳定性。特别地，重现了以下条件：

°在标记步骤前添加龙胆酸630μg/mL；

°在标记步骤前添加Kolliphor HS 15：1mg；

°肽:Lu比值≥1.5；

°在配制步骤期间，在反应结束时，添加抗坏血酸2795μg/mL；

°最终体积活性10mCi/mL；

°最终pH 4-6；

°反应缓冲液：乙酸/乙酸盐缓冲液；

使用MiniAIO合成仪手动和自动进行放射性标记测试。开发了合成程序，如下：

1.将¹⁷⁷LuCl₃转移至反应器中；

3.将含有Kolliphor HS 15的NeoB1溶液添加至反应器中；

4.在95℃下加热5分钟；

表1-配制品对药物产品放射化学纯度的作用

*结果不合规格

如表1所示结果所证明的，在与镥氧奥曲肽相同的条件下配制的产品随时间推移逐渐降解，最终在目标有效期(72小时)结束时，放射化学纯度低于规格。

因此，¹⁷⁷LuNeoB的开发聚焦于鉴定龙胆酸和抗坏血酸的合适的量，该量能够发挥所希望的保护功能且不干扰标记步骤。

实例2：鉴定合适的配制品以提高药物产品的放射化学纯度

抗氧化剂/游离自由基清除剂(如抗坏血酸和龙胆酸)典型地在放射性药物制备中使用以保护标记分子不发生放射性分解降解。

因此，为鉴定提高放射化学纯度的合适配制品，通过增加龙胆酸或抗坏血酸的量并保持所有其他条件(包括其他抗氧化剂的量)不变来测试不同配制品。

·龙胆酸率比率改变

首先，我们研究了龙胆酸比率改变的影响。为此，我们测试了增加龙胆酸的量同时保持所有其他条件(包括抗坏血酸的量)不变。

如下表所述，在以下条件下测试了不同浓度的龙胆酸(增加至1000μg/mL)：

°在标记步骤前添加龙胆酸；

°在标记前添加Kolliphor HS 15：1mg；

°在配制步骤期间，在标记结束时，添加抗坏血酸2700μg/mL；

°最终体积活性10mCi/mL；

°肽:Lu比值≥1.5；

°最终pH 4-6；

°反应缓冲液：乙酸/乙酸盐缓冲液；

表2-龙胆酸对药物产品放射化学纯度的作用

*结果不合规格

如表2中所示结果证明，当抗坏血酸浓度设定为2700μg/mL且龙胆酸的最大浓度为1000μg/mL时，在有效期结束时放射化学纯度达不到规格。

因此，龙胆酸比率的改变不影响放射化学纯度。

·抗坏血酸比率改变

之后，我们研究了不同量的抗坏血酸对成品稳定性的影响。如下表所述，已在以下条件下测试了不同浓度的抗坏血酸(增加至15000μg/mL)：

°在标记步骤前添加龙胆酸1000μg/mL；

°在标记前添加Kolliphor HS 15：1mg；

°在配制步骤期间，在标记结束时，添加抗坏血酸；

°最终体积活性10mCi/mL；

°肽:Lu比值≥1.5；

°最终pH 4-6；

°反应缓冲液：乙酸/乙酸盐缓冲液；

表3-合成结束时以及有效期结束时抗坏血酸对药物产品放射化学纯度的作用

*结果不合规格

如表3所示结果所证明的，对于含有至少1000μg/mL的龙胆酸和10000μg/mL抗坏血酸的配制品，药物产品的放射化学纯度高于95％长达72小时。通过提高抗坏血酸浓度进行的测试显示，在15000μg/mL下，产品稳定性明显改善(在有效期结束时RCP％>98％)。

·通过从液体配制品中去除龙胆酸评估抗坏血酸的抗氧化特性

基于表3所示结果，将这些测试的抗坏血酸的最小量设定为15000μg/mL。如表4所述，龙胆酸不是配制品的一部分；仅用抗坏血酸作为抗氧化剂。应用以下条件：

°在标记前添加Kolliphor HS 15：1mg；

°在配制步骤期间，在标记结束时，添加抗坏血酸15000μg/mL；

°最终体积活性10mCi/mL；

°肽:Lu比值≥1.5；

°最终pH 4-6；

°反应缓冲液：乙酸/乙酸盐缓冲液；

表4-合成结束时以及有效期结束时抗坏血酸对药物产品放射化学纯度的作用

*结果不合规格

由此可见，无龙胆酸使药物产品在72小时后的放射化学纯度低于95％。因此，基于该实验结果，龙胆酸和抗坏血酸对药物产品的稳定性有互补的积极作用。

总之，产品在放射化学稳定性方面的最佳结果是使用含有浓度分别为1000μg/mL和15000μg/mL的龙胆酸和抗坏血酸的配制品获得的。

实例3：200mCi下的最终配制品测试

设计下述研究，目标是在200mCi的活性水平下确认通过前述开发测试(实例1-3)鉴定的配制品。

基于前述结果，将龙胆酸和抗坏血酸的量分别设定为1000μg/mL和15000μg/mL。在以下条件下进行合成：

°从开始时就将龙胆酸1000μg/mL添加至反应器中；

°将Kolliphor HS 15添加至肽水溶液中，最终浓度为100μg/mL；

°在配制步骤期间，在标记结束时，添加抗坏血酸15000μg/mL；

°配制后最终体积活性10mCi/mL；

°肽:Lu比值≥1.5；

°最终pH 4-6；

°反应缓冲液：乙酸/乙酸盐缓冲液；

使用MiniAIO合成仪自动进行放射标记。开发了合成程序，如下：

1.将¹⁷⁷LuCl3转移至反应器中；

3.将含有Kolliphor HS 15的NeoB1溶液添加至反应器中；

4.在95℃下加热5分钟；

5.在标记结束时，添加稀释溶液以获得10mCi/mL的体积活性。稀释溶液由抗坏血酸(抗氧化剂)、DTPA(多价螯合剂)、NaOH(pH调节剂)和盐水溶液构成。

如表7中所示结果所证明的，对于在200mCi的水平的活性，在具有1000μg/mL龙胆酸和15000μg/mL抗坏血酸时，¹⁷⁷LuNeoB的放射化学纯度一直远超过95％长达72小时。

表7-合成结束时以及有效期结束时所选配制品对药物产品放射化学纯度的作用

实例4：0.5Ci批次下的最终配制品测试

基于R&D实验室规模中产品开发期间获得的结果，为第一个规模扩大批次生产选择了以下组成：

°龙胆酸1000μg/mL；

°抗坏血酸15000μg/mL；

°Kolliphor HS 15 100μg/mL；

°体积活性10mCi/mL；

°最终pH 4.0-6.0；

°反应缓冲液：乙酸/乙酸盐缓冲液；

为了将研发配制品转变为具有药学品质的药物产品，使用由Gipharma公司生产并用于生产镥氧奥曲肽的反应缓冲液(产品代码F193)和配制品缓冲液(产品代码F191)生产了规模扩大批次。

在储存于25℃±2℃下的三个不同样品体积(4mL、6mL和25mL)上已评估了长达72小时的¹⁷⁷LuNeoB成品的稳定性。

为实现原料药(Drug Substance)制造工业化，规模扩大测试还旨在优化在自动合成模块的辅助下进行的制造方法。

合成模块用于制备含有经¹⁷⁷Lu-标记的分子的原料药(母液)。

开发了自动合成方法，以将放射性原料药生产为无菌水性浓缩母液。原料药合成步骤在MiniAIO(TRASIS公司)合成仪模块中设定，该合成仪模块是自给式的封闭系统合成模块，其由GMP兼容软件自动操作和远程控制，该软件能够监测和记录工艺参数。

Mini AIO放射性合成仪模块广泛应用于放射性药物行业，用于PET放射性药物的制造。此模块整合了优于固定液路装置的一次性液路，因为它确保了无菌和无热原液路并且消除了批次间交叉污染的可能性。

将合成模块置于铅屏蔽的热室中，该铅屏蔽的热室提供了C级HEPA过滤空气供给。隔离器位于洁净的C级实验室内。

表8中描述了为制造0.5Ci批量大小选择的目标配制品特征。

表8-目标配制品特征

°¹⁷⁷LuCl₃的理论活性＝0.5Ci；

°合成开始时¹⁷⁷LuCl₃比活性＝9.7Ci/mg；

°NeoB1净量＝0.600mg；

°摩尔比(NeoB1:Lu)＝1.300；

°用MiniAIO模块合成(Trasis)；

°进行标记的时间：5min；

°进行标记的温度：95℃；

表9中列出了¹⁷⁷LuNeoB1.0.5Ci批量大小的制造期间获得的一些相关的IPC结果。

表9-IPC结果和合成产率

为评估氧化降解的作用，在生产结束时分配三种样品体积：

·25mL(小瓶-1)；

·4mL(小瓶-2、小瓶-3、小瓶-4)；

·6mL(小瓶-5)。

在配制步骤期间，向样品小瓶-4中添加了额外量的龙胆酸，以获得约1.312mg/mL的最终浓度，并且最终进一步减少放射分解降解。

在整个稳定性研究中，将样品小瓶-3保持在搅拌下。

所有样品均储存在25±2℃下。分配的不同样品均列于表10中。

表10-样品特征和储存条件

表11总结了针对¹⁷⁷LuNeoB1 0.5Ci规模扩大批次获得的放射化学纯度结果。如值得注意的是，在t0h时产品的放射化学纯度符合>97.00％的目标规格。

对小瓶-1(25mL样品)进行的稳定性研究即使在72小时后也显示出非常有前景的结果，而小瓶-2(4mL样品)和小瓶-3(搅拌中的4mL样品)在目标有效期结束时显示的放射化学纯度低于95.00％。这些初步结果似乎证明了O₂对成品稳定性的负面影响。

尽管未成功达到目标有效期，添加额外量的龙胆酸(样品小瓶-4)改善了成品的稳定性。

最后，尽管在72h时的放射化学纯度未达到规格，小瓶-5(6mL样品)与4mL样品体积相比在稳定性结果方面显示出了改善。

表11-质量控制结果

*结果不合规格

最终目标配制品和详细组成

基于开发活动期间收集的数据，定义了抗坏血酸和龙胆酸的最终量。特别地，浓度为1312ppm的龙胆酸和浓度为15000ppm的抗坏血酸已显示出优异的抗氧化特性，从而实现目标有效期。

基于进行的所有开发测试，为¹⁷⁷LuNeoB制造(在高达500mCi的放射性水平上)选择的配制品为如下：

表12-¹⁷⁷LuNeoB配制品

Claims

1.一种药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)由如下形成的络合物

(ai)放射性核素，和

(aii)与螯合剂连接的胃泌素释放肽受体肽拮抗剂结合部分；以及；

(b)至少两种抗放射性分解降解的稳定剂；以及

(c)任选地表面活性剂。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述放射性核素选自¹¹¹In、¹⁸F、²¹¹At、⁸²Rb、¹²³I、¹³¹I、¹³³mIn、⁹⁹mTc、⁹⁴mTc、⁶⁷Ga、⁶⁶Ga、⁶⁸Ga、⁵²Fe、¹⁶⁹Er、⁷²As、⁹⁷Ru、²⁰³Pb、²¹²Pb、⁶²Cu、⁶⁴Cu、⁶⁷Cu、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、⁸⁶Y、⁹⁰Y、⁵¹Cr、⁵²mMn、¹⁵⁷Gd、¹⁷⁷Lu、¹⁶¹Tb、⁶⁹Yb、¹⁷⁵Yb、¹⁰⁵Rh、¹⁶⁶Dy、¹⁶⁶Ho、¹⁵³Sm、¹⁴⁹Pm、¹⁵¹Pm、¹⁷²Tm、¹²¹Sn、¹¹⁷mSn、²¹³Bi、²¹²Bi、¹⁴²Pr、¹⁴³Pr、¹⁹⁸Au、¹⁹⁹Au、⁸⁹Zr、²²⁵Ac、⁴³Sc、⁴⁴Sc和⁴⁷Sc，优选地选自¹¹¹In、¹⁷⁷Lu、²²⁵Ac和⁶⁸Ga，更优选地是¹⁷⁷Lu。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述放射性核素以其提供至少370MBq/mL(在处理结束时)±37MBq/mL(±10％)的体积放射性的浓度存在。

4.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述螯合剂选自DOTA、DTPA、NTA、EDTA、DO3A、NOC和NOTA，优选地是DOTA。

5.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述与螯合剂连接的胃泌素释放肽受体肽拮抗剂结合部分是具有式(I)的NeoB：

6.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述至少两种稳定剂选自龙胆酸或其盐、抗坏血酸或其盐、蛋氨酸、组氨酸、褪黑素、乙醇和Se-蛋氨酸，优选地选自龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐。

7.根据权利要求6所述的药物组合物，其中所述至少两种稳定剂是龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐。

8.根据权利要求7所述的药物组合物，其中龙胆酸与抗坏血酸之间的比值在1:16和1:10之间，典型地在1:15和1:10之间，例如在1:12和1:11之间。

9.根据权利要求7或8所述的药物组合物，其中所述龙胆酸或其盐以至少1000μg/mL、例如1000μg/mL和1500μg/mL之间的浓度存在。

10.根据权利要求7至9所述的药物组合物，其中所述抗坏血酸或其盐以至少10000μg/mL、优选地至少12000μg/mL、优选地至少15000μg/mL、例如12000和18000μg/mL之间的浓度存在。

11.根据权利要求7至10所述的药物组合物，其中所述龙胆酸或其盐以至少1000μg/mL、例如1000μg/mL和1500μg/mL之间的浓度存在，并且抗坏血酸或其盐以15000μg/mL、例如12000和18000μg/mL之间的浓度存在。

12.根据权利要求1至11所述的药物组合物，其中所述药物配制品的放射化学纯度高于95％长达72小时，优选地高于98％长达72h。

13.一种药物组合物，所述药物组合物包含：

(c)由如下形成的络合物

(ai)放射性核素¹⁷⁷镥(Lu-177)，和

(aii)具有式(I)的NeoB：

以及；

(b)龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐；

(c)任选地，聚乙二醇15羟基硬脂酸酯，

(d)任选地，至少一种其他药学上可接受的赋形剂。

14.根据权利要求13所述的药物组合物，其中所述至少一种其他药学上可接受的赋形剂选自缓冲液和/或溶剂、和/或pH调节剂。

15.一种药物组合物，所述药物组合物由以下组成：

(a)由如下形成的络合物

(ai)放射性核素¹⁷⁷镥(Lu-177)，和

(aii)具有式(I)的NeoB：

以及；

(b)龙胆酸或其盐和抗坏血酸或其盐；

(c)聚乙二醇15羟基硬脂酸酯；

(d)乙酸盐缓冲液；

(e)注射用水，以及

(f)NaOH，

(g)DTPA。