CN114699557B - 一种自体胶原再生的复合美容填充剂及其制备方法 - Google Patents

一种自体胶原再生的复合美容填充剂及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种自体胶原再生的复合美容填充剂及其制备方法。本发明的自体胶原再生的复合美容填充剂的制备方法为：将左旋聚乳酸混合物熔融混合，并依次造粒、筛选，得到微球颗粒；将微球颗粒与缓冲液搅拌混合，得到左旋聚乳酸缓冲液；先将动物源组织去脂，再加入蛋白酶去除胶原端肽，然后加入碱灭活酶活性并加入酸复溶，最后经纯化沉淀，得到胶原蛋白纤维；将左旋聚乳酸缓冲液与胶原蛋白纤维混合，并采用筒管式纺丝机制备得到复合纤维物；再与胎盘多肽注射液、盐酸利多卡因注射液依次进行混合均质，即得到自体胶原再生的复合美容填充剂。所述制备方法将多种有效成分进行结合，具有及时补充胶原、缓释、填充、美白等效果。

Description

一种自体胶原再生的复合美容填充剂及其制备方法
技术领域
本发明属于医学美容领域，具体涉及一种自体胶原再生的复合美容填充剂及其制备方法。
背景技术
随着人们对胶原蛋白的特性和生物功能认知的不断加深，补充胶原蛋白成为求美者延缓衰老的方法之一，故以胶原蛋白为原材料的美容填充剂应用而生，尤其是动物源性胶原蛋白。
而现有技术制备得到的胶原蛋白美容填充剂注射到体内后，预期效果并不持久，需要不断补充新的填充剂来维持其作用效果，继而令求美者产生产品的依赖性。同时，现有的胶原蛋白美容填充剂的临床修复效果过于单一，无法满足求美者多样化的需求，可开发的市场空间广阔。
故基于此，提出本发明技术方案。
发明内容
为了解决现有技术存在的问题，本发明提供了一种自体胶原再生的复合美容填充剂及其制备方法。所述自体胶原再生的复合美容填充剂的制备方法，将多种有效成分进行结合：所添加的胶原蛋白可以及时补充植入部位缺失的胶原，达到填充皱纹凹陷的作用；并且将不同分子量的左旋聚乳酸进行熔融，赋予其于体内缓释的效果，能持续诱发自体胶原蛋白再生；并协同胎盘多肽和利多卡因，在减少疼痛的条件下达到美白、增弹、淡化色斑和皱纹的功效。
本发明的方案是提供一种自体胶原再生的复合美容填充剂的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
（1）将左旋聚乳酸混合物熔融混合，并依次造粒、筛选，得到粒径分布为20~50μm的微球颗粒；其中，所述左旋聚乳酸混合物包括如下重量份的原料：3~6万Da的左旋聚乳酸25~40份、6~10万Da的左旋聚乳酸20~35份、10~15万Da的左旋聚乳酸15~30份和15~20万Da的左旋聚乳酸15~30份；
（2）将所述微球颗粒与缓冲液搅拌混合，得到左旋聚乳酸缓冲液；
（3）先将动物源组织去脂，再加入蛋白酶去除胶原端肽，然后加入碱灭活酶活性并加入酸复溶，最后经纯化沉淀，得到胶原蛋白纤维；
（4）将所述左旋聚乳酸缓冲液与所述胶原蛋白纤维混合，并采用筒管式纺丝机制备得到复合纤维物；
（5）将所述复合纤维物与胎盘多肽注射液、盐酸利多卡因注射液依次进行混合均质、灌装、灭菌，即得到自体胶原再生的复合美容填充剂。
为便于理解本发明，对本发明的技术构思进行阐述：
具有天然三螺旋结构的胶原蛋白在植入人体面部后，可以及时补充植入部位缺失的胶原，达到填充皱纹凹陷的作用。随着胶原蛋白在体内的降解流失，聚乳酸微球在体内会缓慢降解形成乳酸，不同分子量的聚乳酸在人体内具有不同的降解时间，可持续的产生乳酸，在乳酸释放过程中，通过慢性炎症性组织反应，诱发自体胶原蛋白再生，新生的胶原蛋白搭起支撑肌肤的弹性支架，随着微球的降解吸收，不断新生的胶原蛋白取代了原先的微球，从而形成较长时间的持续性修复效果。该技术从总体上实现了短期支撑和长期修复的双重效果。
胎盘多肽具有抑制机体的过氧化反应，清除自由基，修复体内受损细胞的作用，加入到复合填充剂里可以起到保持肌肤弹性，消除疤痕，美白肌肤，袪除面部老化皮肤组织，养颜和祛除色斑等作用；利多卡因是目前临床常用的局部麻醉剂，加入到复合填充剂里在临床使用时可以减缓患者的疼痛感，在同类型产品中已广泛使用。
优选地，步骤（1）中，所述熔融温度为180~260oC。左旋聚乳酸作为典型的聚合物，其并没有确定的熔点，其对应的熔限为170oC左右的一个范围，经发明人总结验证，180~260oC的温度既能确保左旋聚乳酸充分熔融，又不至于温度过高而破坏其分子链结构。
优选地，步骤（2）中，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液或生理盐水。作为常用的缓冲剂，磷酸盐缓冲液或生理盐水方便易得，成本较低。
优选地，步骤（3）中，所述动物源组织为牛跟腱、牛皮、猪跟腱或猪皮中的一种；所述蛋白酶包括胃蛋白酶、胰蛋白酶、无花果蛋白酶或木瓜蛋白酶中的一种；所述碱包括氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化钙中的一种；所述酸包括冰乙酸、盐酸、硫酸或柠檬酸中的一种。以上优选的原料均为常用原料，容易获取，反应温和。
优选地，步骤（5）中，所述胎盘多肽注射液中胎盘多肽含量为0.5~1.5wt%，且发明人试验后得出，在该浓度范围时，胎盘多肽修复体内受损细胞的作用最佳；所述盐酸利多卡因注射液中盐酸利多卡因含量为0.3wt%，作为局部麻醉剂盐酸利多卡因的含量应严格控制，以避免带来负面影响，而经发明人反复论证，0.3wt%的浓度效果最佳。
基于相同的技术构思，本发明的再一方案是，提供一种由上述制备方法得到的自体胶原再生的复合美容填充剂。
本发明的有益效果为：
本发明所述的自体胶原再生的复合美容填充剂的制备方法，将多种有效成分进行结合：所添加的胶原蛋白可以及时补充植入部位缺失的胶原，达到填充皱纹凹陷的作用；并且将不同分子量的左旋聚乳酸进行熔融，赋予其于体内缓释的效果，能持续诱发自体胶原蛋白再生；并协同胎盘多肽和利多卡因，在减少疼痛的条件下达到美白、增弹、淡化色斑和皱纹的功效。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是实施例1中得到的微球颗粒的电镜图。
图2是实施例2中得到的胶原蛋白纤维的电镜图。
图3是测试志愿者使用前的面部照片图。
图4是测试志愿者使用7d后的面部照片图。
图5是测试志愿者使用14d后的面部照片图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。
实施例1
本实施例提供一种自体胶原再生的复合美容填充剂的制备方法，包括如下步骤：
（1）将左旋聚乳酸在180oC条件下熔融混合，并通过微型挤出机造粒得到微球；然后筛选去除粒径小于20μm及大于50μm的微球；得到粒径分布为20~50μm的微球颗粒；其中，所述左旋聚乳酸包括如下重量份的原料：3~6万Da的左旋聚乳酸25g、6~10万Da的左旋聚乳酸20g、10~15万Da的左旋聚乳酸15g和15~20万Da的左旋聚乳酸15g；所述微球颗粒的电镜图如图1所示，由图片可清晰看出，微球颗粒的尺寸、形态、分布均一，制备成功；
（2）在室温条件下，将所述粒径分布为20~50μm的微球颗粒与磷酸盐缓冲液磁力搅拌混合2h，得到左旋聚乳酸缓冲液；
（3）先将新鲜牛跟腱组织去除脂类物质，再加入0.5wt%胃蛋白酶（基于牛跟腱组织的重量）去除胶原端肽，然后加入氢氧化钠用于灭活酶活性并加入冰乙酸复溶，最后经纯化沉淀，得到胶原蛋白纤维；所述胶原蛋白纤维的电镜图如图2所示，由图片可清晰看出，胶原蛋白纤维形态均匀，制备成功；
（4）将所述左旋聚乳酸缓冲液与所述胶原蛋白纤维混合，所述左旋聚乳酸缓冲液中微球颗粒与胶原蛋白纤维的重量比为10:1，并采用筒管式纺丝机制备得到复合纤维物；
（5）将所述复合纤维物与溶质含量为0.5wt%的胎盘多肽注射液、溶质含量为0.3%的盐酸利多卡因注射液进行混合均质并灌装，再采用钴60辐照灭菌，即得到自体胶原再生的复合美容填充剂。
实施例2
本实施例提供一种自体胶原再生的复合美容填充剂的制备方法，包括如下步骤：
（1）将左旋聚乳酸在260oC条件下熔融混合，并通过微型挤出机造粒得到微球；然后筛选去除粒径小于20μm及大于50μm的微球；得到粒径分布为20~50μm的微球颗粒；其中，所述左旋聚乳酸包括如下重量份的原料：3~6万Da的左旋聚乳酸40g、6~10万Da的左旋聚乳酸35g、10~15万Da的左旋聚乳酸30g和15~20万Da的左旋聚乳酸30g；
（2）在室温条件下，将所述粒径分布为20~50μm的微球颗粒与磷酸盐缓冲液磁力搅拌混合4h，得到左旋聚乳酸缓冲液；
（3）先将新鲜牛皮去除脂类物质，再加入3wt%胰蛋白酶（基于牛皮的重量）去除胶原端肽，然后加入氢氧化钾用于灭活酶活性并加入盐酸复溶，最后经纯化沉淀，得到胶原蛋白纤维；
（4）将所述左旋聚乳酸缓冲液与所述胶原蛋白纤维混合，所述左旋聚乳酸缓冲液中微球颗粒与胶原蛋白纤维的重量比为1:10，并采用筒管式纺丝机制备得到复合纤维物；
（5）将所述复合纤维物与溶质含量为1.5wt%的胎盘多肽注射液、溶质含量为0.3%的盐酸利多卡因注射液进行混合均质并灌装，再采用电子束辐照灭菌，即得到自体胶原再生的复合美容填充剂。
实施例3
本实施例提供一种自体胶原再生的复合美容填充剂的制备方法，包括如下步骤：
（1）将左旋聚乳酸在220oC条件下熔融混合，并通过微型挤出机造粒得到微球；然后筛选去除粒径小于20μm及大于50μm的微球；得到粒径分布为20~50μm的微球颗粒；其中，所述左旋聚乳酸包括如下重量份的原料：3~6万Da的左旋聚乳酸32g、6~10万Da的左旋聚乳酸27g、10~15万Da的左旋聚乳酸22g和15~20万Da的左旋聚乳酸22g；
（2）在室温条件下，将所述粒径分布为20~50μm的微球颗粒与磷酸盐缓冲液磁力搅拌混合3h，得到左旋聚乳酸缓冲液；
（3）先将新鲜猪跟腱去除脂类物质，再加入1.7wt%无花果蛋白酶（基于无花果蛋白酶的重量）去除胶原端肽，然后加入氢氧化钙用于灭活酶活性并加入柠檬酸复溶，最后经纯化沉淀，得到胶原蛋白纤维；
（4）将所述左旋聚乳酸缓冲液与所述胶原蛋白纤维混合，所述左旋聚乳酸缓冲液中微球颗粒与胶原蛋白纤维的重量比为1:1，并采用筒管式纺丝机制备得到复合纤维物；
（5）将所述复合纤维物与溶质含量为1.0wt%的胎盘多肽注射液、溶质含量为0.3%的盐酸利多卡因注射液进行混合均质并灌装，再采用电子束辐照灭菌，即得到自体胶原再生的复合美容填充剂。
为表明本发明所述自体胶原再生的复合美容填充剂的效果，采用实施例3得到的自体胶原再生的复合美容填充剂植入测试志愿者面部皮肤，并分别拍照记录该测试志愿者使用前（图3）、使用7d后（图4）和使用14d后（图5）的面部局部信息（为保护志愿者的隐私，仅对植入区域进行拍照），由图片对比可知，植入14d后皮肤更加美白且色斑、皱纹淡化，效果显著。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (8)

1.一种自体胶原再生的复合美容填充剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
(1)将左旋聚乳酸混合物熔融混合，并依次造粒、筛选，得到粒径分布为20～50μm的微球颗粒；其中，所述左旋聚乳酸混合物包括如下重量份的原料：3～6万Da的左旋聚乳酸25～40份、6～10万Da的左旋聚乳酸20～35份、10～15万Da的左旋聚乳酸15～30份和15～20万Da的左旋聚乳酸15～30份；
(2)将所述微球颗粒与缓冲液搅拌混合，得到左旋聚乳酸缓冲液；
(3)先将动物源组织去脂，再加入蛋白酶去除胶原端肽，然后加入碱灭活酶活性并加入酸复溶，最后经纯化沉淀，得到胶原蛋白纤维；
(4)将所述左旋聚乳酸缓冲液与所述胶原蛋白纤维混合，并采用筒管式纺丝机制备得到复合纤维物；
(5)将所述复合纤维物与胎盘多肽注射液、盐酸利多卡因注射液依次进行混合均质、灌装、灭菌，即得到自体胶原再生的复合美容填充剂。
2.根据权利要求1所述自体胶原再生的复合美容填充剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述熔融温度为180～260℃。
3.根据权利要求1所述自体胶原再生的复合美容填充剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液或生理盐水。
4.根据权利要求1所述自体胶原再生的复合美容填充剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述动物源组织为牛跟腱、牛皮、猪跟腱或猪皮中的一种。
5.根据权利要求1所述自体胶原再生的复合美容填充剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述蛋白酶包括胃蛋白酶、胰蛋白酶、无花果蛋白酶或木瓜蛋白酶中的一种；所述碱包括氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化钙中的一种；所述酸包括冰乙酸、盐酸、硫酸或柠檬酸中的一种。
6.根据权利要求1所述自体胶原再生的复合美容填充剂的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述胎盘多肽注射液中胎盘多肽含量为0.5～1.5wt％；所述盐酸利多卡因注射液中盐酸利多卡因含量为0.3wt％。
7.权利要求1～6任一所述制备方法得到的自体胶原再生的复合美容填充剂。
8.权利要求7所述的一种自体胶原再生的复合美容填充剂，通过27G、30G针头注射到皮肤深层组织。
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