CN114681653A - 一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法及检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法及检测方法，启动除蛋白灭菌仪，除蛋白灭菌槽内相对设置的两个探针转变为正电极和负电极，所述月抛水凝胶接触镜表面附着的蛋白在生理盐水中带电荷，带电荷的蛋白朝向与其电性相反的电极位置移动，所述生理盐水中的Cl‑生成次氯酸，所述次氯酸与蛋白在除蛋白灭菌槽内发生氧化反应，蛋白被降解，所述次氯酸使得所述微生物的功能蛋白失活，微生物被灭杀；所述检测方法通过检测镜片清洗前后的蛋白含量来计算除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶接触镜上的蛋白的洗脱率。本发明所述的除蛋白灭菌方法及检测方法有效解决了角膜接触镜还原困难，清洗效果难以评测的问题。

Description

一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法及检测方法
技术领域
本发明涉及角膜接触镜领域，尤其涉及一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法及检测方法。
背景技术
角膜接触镜如何除蛋白的问题困扰了行业半个多世纪，引发了各国的眼视光行业对接触镜佩戴安全的高度重视。我国也因角膜接触镜上的角膜感染案例频发，从而将接触镜在2012年便列入第三类医疗器械类，作为高风险管理，其原因在于：接触镜材质结构有大量肉眼不见的纤维透痒孔，人眼时刻分泌大量的泪液，泪液里含有大量泪蛋白，泪蛋白极易渗透到纤维透痒孔中，造成镜片DK值降低(透氧率)，造成角膜缺氧、水肿等症状，严重的会造成角膜受损，细菌感染，角膜炎症甚至是视力受损等问题。
现有的为了配合角膜接触镜进行清洗还原以保证用户的眼部安全，市面上也推出了多款用以将佩戴过的角膜接触镜进行清洗还原的清洗器，而这些清洗器针对不同规格型号的角膜接触镜的清洗还原效果也未曾被检验过，这就埋下了潜在的安全隐患，假若清洗器配合清洗液对角膜接触镜进行清洗还原具有局限性，那么，在清洗器不适用的情况下用户依然在使用清洗器进行清洗还原角膜接触镜，如此这般持续一段时间后，用户的眼部安全问题就有可能爆发出来，这样即是对用户的入眼安全的不负责任。现今市面上推出了各种规格型号的隐形眼镜，月抛水凝胶接触镜因为使用周期可达一月，相比日抛镜片而言，用户使用月抛接触镜可以节约成本，相比季抛镜片而言，月抛镜片使用周期短，安全性更高。因此，月抛水凝胶接触镜也是一种较普遍的入眼产品。那么，有效清除月抛水凝胶接触镜表面的蛋白，保证眼部安全就是用户较为关注的健康问题了，因此，有必要提出一种针对月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法，为用户的眼部安全保驾护航。
如今市场也推出了多种用于去除角膜接触镜表面泪蛋白的方法，但由于肉眼不可见泪蛋白是否被完全有效的洗脱降解，为了检验经清洗器清洗还原后的角膜接触镜的清洗效果，保障消费者的眼部安全，逐渐的蛋白检测方法、杀菌检测方法等就被重视发展起来，以使得通过科学检测有效验证是否蛋白、细菌等被完全降解、杀灭，但是现阶段市场上的角膜接触镜有效除蛋白的检测方法具有局限性，暂时无法找到一种可以直接有效且精确测量角膜接触镜所吸附泪蛋白的具体量值，因此其检测结果不全面，仅具有一定的参考意义，其并不能成为定量定性检测蛋白降解程度的专业检测依据。因此，有必要提出一种针对月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌效果的检测方法，通过该检测方法检测提出的针对月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法的效果，而得到的检测结果就是对用户的一个保证，该除蛋白灭菌方法可以指导用户正确对月抛水凝胶接触镜进行除蛋白灭菌清洗，从而减少用户的眼部感染率，保障用户眼部安全。
因此，亟需提出一种新的技术方案来解决上述问题。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种针对月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法，该方法可对月抛水凝胶接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白和细菌以及脂质进行清除，实现对月抛水凝胶接触镜的还原，为广大消费者提供一种针对月抛水凝胶接触镜的有效清洗模式，保障镜片入眼安全；本发明的另一个目的是提供一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，该方法可以有效验证通过本发明所述的除蛋白灭菌方法对月抛水凝胶接触镜的还原效果，该检测方法是对肉眼不可见的细菌、蛋白及脂质的检测，通过化学实验方法给消费者提供检测结果，证明本发明所述的除蛋白灭菌方法可以对月抛水凝胶接触镜进行清洗还原，从科学的角度保障经清洗器清洗的镜片是安全无害的，进一步保障用户的入眼安全。
一方面，本发明提供的一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，采用的技术方案如下：
一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，其包括：对采用除蛋白灭菌方法除蛋白灭菌后的月抛水凝胶接触镜上的蛋白进行洗脱率检测，具体包括：
检测月抛水凝胶软性亲水接触镜表面吸附的蛋白含量，获得镜片原始蛋白量，将该月抛水凝胶软性亲水接触镜置于除蛋白灭菌仪中配合生理盐水进行除蛋白灭菌处理，检测经所述除蛋白灭菌仪处理后的月抛水凝胶软性亲水接触镜的蛋白含量，获得清洗后镜片剩余蛋白量，将所述清洗后镜片剩余蛋白量与所述镜片原始蛋白量进行计算分析，得到除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶软性亲水接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的洗脱率。
上述技术方案进一步的，将该月抛水凝胶软性亲水接触镜置于除蛋白灭菌仪中配合生理盐水进行除蛋白灭菌处理，具体包括：
选择所述除蛋白灭菌仪的清洗模式，将该月抛水凝胶软性亲水接触镜置于除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内配合生理盐水清洗预定时间，得到除蛋白灭菌处理后的月抛水凝胶软性亲水接触镜；
进一步的，检测经所述除蛋白灭菌仪处理后的月抛水凝胶软性亲水接触镜的蛋白含量，获得清洗后镜片剩余蛋白量，具体包括：
将被所述除蛋白灭菌仪处理过的月抛水凝胶软性亲水接触镜置于蛋白提取液中，振动提取蛋白，通过微量紫外分光光度计检测蛋白提取液中的蛋白浓度值，通过所述蛋白浓度值计算得到清洗后镜片剩余蛋白量。
进一步的，所述预定时间为3分钟，利用所述除蛋白灭菌仪清洗月抛水凝胶软性亲水接触镜的过程中所述除蛋白灭菌槽内的两个电泳解离探针之间的电压差值为0.5V-4.8V，电流值为0.5-4.85mA。
进一步的，所述蛋白提取液由50份乙腈、50份去离子水和0.2份100％的三氟乙酸混合组成。
进一步的，将所述清洗后镜片剩余蛋白量与所述镜片原始蛋白量进行计算分析，得到除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶软性亲水接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的洗脱率：
Figure BDA0002880897710000041
上述技术方案中进一步的，其还包括：对采用除蛋白灭菌方法除蛋白灭菌后的月抛水凝胶接触镜进行灭菌效果检测，具体包括：
于除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内加入生理盐水，启动所述除蛋白灭菌仪，预定时间后，自所述除蛋白灭菌槽内获得灭菌发生水原液；选择用于灭菌检测实验的中和剂和菌悬液，将所述菌悬液与有机干扰物混合水浴，预定时间后加入获得的所述灭菌发生水原液，得到混合液，预定作用时间后，取所述混合液与所述中和剂混合，稀释，接种，进行活菌培养计数，检测得到所述灭菌发生水原液对菌悬液中细菌的杀灭对数值。
进一步的，所述菌悬液与有机干扰物按重量份1：1混合；所述混合液与所述中和剂按重量份1：9混合。
进一步的，其还包括：对采用除蛋白灭菌方法除蛋白灭菌后的月抛水凝胶接触镜进行表面油脂清除效果检测，具体包括：
检测表面吸附有油脂的月抛水凝胶接触镜表面的油脂含量，
于所述除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内加入生理盐水，将该表面吸附有油脂的月抛水凝胶接触镜置于所述生理盐水中，启动所述除蛋白灭菌仪，清洗完成后，检测经所述除蛋白灭菌仪清洗过的月抛水凝胶接触镜表面的油脂含量，测得所述除蛋白灭菌仪配合生理盐水对所述月抛水凝胶接触镜的除脂率。
进一步的，通过荧光分光光度计向所述表面吸附有油脂的月抛水凝胶接触镜发射光束，记录发射光谱的荧光强度值，所述荧光强度值对应所述月抛水凝胶接触镜表面的油脂含量；
Figure BDA0002880897710000042
另一方面，本发明提供的一种针对月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法，采用的技术方案如下：
一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法，其包括：提供除蛋白灭菌仪，所述除蛋白灭菌仪具有除蛋白灭菌槽，所述除蛋白灭菌槽内至少设置有两个电泳解离探针；于所述除蛋白灭菌槽内加入生理盐水和月抛水凝胶接触镜，启动所述除蛋白灭菌仪，所述两个电泳解离探针通电，其中一个电泳解离探针为正电极，另一个电泳解离探针为负电极；所述月抛水凝胶接触镜表面附着的蛋白在所述生理盐水中带电荷，带电荷的蛋白朝向与其电性相反的电极位置移动；所述生理盐水中的Cl-朝向正电极移动，且失去电子被氧化为氯气，所述氯气溶于所述生理盐水生成次氯酸，所述次氯酸与蛋白在除蛋白灭菌槽内发生氧化还原反应，蛋白被降解；所述次氯酸在所述生理盐水中发生自身氧化还原反应，分解出氢离子、氯离子和氧气，所述次氯酸在分解过程中吸收所述除蛋白灭菌槽内微生物的功能蛋白的电子，以使得所述微生物的功能蛋白失活，所述微生物被灭杀。
上述技术方案进一步的，其还包括：所述生理盐水中的带正电荷的氢离子向负电极移动，并在所述负电极附近发生还原反应生成氢气，所述生理盐水中的钠离子与氢氧根离子生成氢氧化钠，所述月抛水凝胶接触镜表面的油脂与所述氢氧化钠发生皂化反应，所述月抛水凝胶接触镜表面的油脂被清除。
进一步的，所述次氯酸与蛋白在除蛋白灭菌槽内发生氧化还原反应，蛋白被降解，具体包括：
所述次氯酸与形成蛋白骨架的肽链反应，得到氯醛甲酰胺，以氯醛甲酰胺形成的肽链在溶液中水解，所述肽链中的肽键断裂，分解为小分子蛋白和氨基酸，蛋白降解，和/或，
所述次氯酸与形成蛋白骨架的肽链的侧链反应，所述侧链包括赖氨酸侧链，所述次氯酸与所述赖氨酸侧链发生反应，在蛋白的赖氨酸侧链以及蛋白的氨基上形成氯胺，所述氯胺分解形成羰基形式的有机分子片段【1,2】，所述赖氨酸侧链上的肽键断裂，分解为小分子蛋白和氨基酸，蛋白被降解。
进一步的，所述微生物包括细菌和病毒，所述次氯酸在分解过程中吸收所述细菌的细胞壁上的功能蛋白的电子，所述细菌失活；所述次氯酸在分解过程中吸收所述病毒的外壳上的功能蛋白的电子，所述病毒失活；所述次氯酸具有强氧化性，其渗透所述微生物细胞内，与所述微生物细胞内的菌体蛋白、核酸和酶发生氧化反应，以使得所述微生物被灭杀。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果中的一个或多个：
1、本发明提供一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法，该方法通过除蛋白灭菌仪配合生理盐水实现了电泳解离除蛋白灭菌(生理盐水本身并不具备杀菌效果)，除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽中相对设置有两个电泳解离探针，该两个电泳解离探针在除蛋白灭菌仪通电的状态下可以转变为一个正电极和一个负电极，形成了蛋白电泳的基础，且两个电极与生理盐水作用可生成具有强氧化性的次氯酸，而次氯酸可以降解蛋白质也可杀菌，且生理盐水中的钠离子与氢氧根离子生成的氢氧化钠也可去油脂，因此，本发明所述的除蛋白灭菌方法可有效对月抛水凝胶接触镜进行除蛋白灭菌。
2、本发明提供的一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法，将蛋白电泳原理与电解技术结合得到了一种新的电泳解离除蛋白灭菌技术，该技术配合生理盐水(含有氯离子)，可以在除蛋白灭菌槽内生成次氯酸，而次氯酸作为强氧化剂其可以吸收细菌的细胞壁的表面蛋白的电子，从而氧化细菌表面的功能蛋白，细菌最终因无法摄取营养、不能正常代谢、并停止分裂而失活，最终达到杀菌消毒的效果；次氯酸作为强氧化剂其还可以吸收病毒外壳上的表面蛋白的电子，致使病毒失活；次氯酸不仅能作用在微生物的表面，其还可以渗透微生物细胞内，与微生物细胞内的菌体(病毒)蛋白、核酸和酶等有机高分子发生氧化反应，从而杀死病原微生物，因此，在本发明所述的除蛋白灭菌方法具有除蛋白及灭菌的双重效果。
3、长期使用的月抛水凝胶接触镜上、以及清洗槽内会有沉积性蛋白，通过本发明所述的除蛋白灭菌方法，利用次氯酸可以降解泪蛋白的特性，使得次氯酸与沉积性蛋白发生氧化反应就可以将这些顽固的沉积性蛋白分解为小分子蛋白和氨基酸，小分子蛋白相比沉积性蛋白更易于吸附，因而，本发明所述的除蛋白灭菌方法可以有效的去除月抛水凝胶接触镜上的沉积性蛋白。
4、本发明通过次氯酸降解蛋白，而次氯酸降解蛋白包括以下两种方式，其一是直接降解蛋白质的骨架肽链，这种降解方式是通过次氯酸与肽骨架反应，形成氯醛甲酰胺，氯醛甲酰胺形式的骨架在水溶液中容易水解，从而导致肽键断裂，蛋白降解；其二则是通过次氯酸降解肽骨架上的侧链，按照侧链与次氯酸的反应活性排列，所述侧链是甲硫氨酸>半胱氨酸>组氨酸>α-氨基酸>色氨酸>赖氨酸>络氨酸>精氨酸>谷氨酸，在氨基和赖氨酸侧链上形成不稳定的氯胺，最后分解成羰基形式的有机分子片段【1,2】，两种反应降解方式均是将泪蛋白分解为小分子蛋白，帮助电泳吸附，除蛋白效果更彻底，当然，由于蛋白质分子的多样性，通过次氯酸进行降解蛋白的方式也不止以上两种，本发明仅给出这两种较有效的降解方式，因此，本发明提出的除蛋白方法可以对月抛接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白进行有效清除。
5、本发明提供的一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法通过除蛋白灭菌仪与生理盐水共同作用产生了除蛋白灭菌的效果，该方法通过电泳解离技术深层次披露了除蛋白灭菌的原理，从生物化学的角度诠释了该方法的有效性。
6、本发明还提供一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，该方法通过检测月抛镜片清洗前后的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的含量来计算得到利用本发明所述除蛋白灭菌方法对月抛水凝胶接触镜的蛋白洗脱率，而检测镜片清洗前后的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的含量则是通过本发明所述的蛋白提取液进行振动提取的，现有技术中，角膜接触镜吸附泪蛋白的具体含量难以测量，而本发明通过乙腈-纯水-三氟乙酸混合溶液组成的蛋白提取液实现了对蛋白的提取，再配合紫外分光光度计检测蛋白提取液中的蛋白含量，以此测得角膜接触镜吸附泪蛋白的具体含量，本发明所述蛋白分离液与角膜接触镜材料无反应，不影响蛋白质的测量值，通过人工泪液培养的角膜接触镜作为检测样本，将其放置在所述蛋白分离液中进行振动提取分离蛋白，计算得到所述蛋白分离液对蛋白的洗脱率。
7、本发明还提供一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，可以检测除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶接触镜的灭菌效果，为了不污染除蛋白灭菌仪，不直接在除蛋白灭菌仪中接种细菌，本发明所述检测方法是于除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内加入生理盐水，启动所述除蛋白灭菌仪，预定时间后，自所述除蛋白灭菌槽内获得灭菌发生水原液，使用获得的灭菌发生水原液进行杀菌检测，检测得到所述灭菌发生水原液对菌悬液中细菌的杀灭对数值，应当说明的是，这种利用灭菌发生水原液进行杀菌的杀菌效果实际上是劣于利用除蛋白灭菌仪的杀菌效果的，利用除蛋白灭菌仪配合生理盐水进行杀菌，在除蛋白灭菌槽中的灭菌原液还配合有电流进行电泳解离，因此，利用除蛋白灭菌仪进行杀菌的效果实际上是更优于利用灭菌发生水原液的杀菌效果的。
8、本发明还提供一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，本发明所述检测方法通过荧光分光光度计向所述表面吸附有油脂的月抛水凝胶接触镜发射光束，记录发射光谱的荧光强度值，以此来获得清洗前后镜片上的油脂附着情况，再通过计算分析就可检测得到除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶接触镜表面油脂的清除效果。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
在本发明的描述中，需要理解的是，除非另有明确的规定和限定，术语应做广义理解，对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
下面结合实施例进一步说明本发明要旨。
实施例1：
角膜接触镜在2012年便列入第三类医疗器械类，作为高风险管理，且与角膜接触镜配合清洗的护理液产品也被列入第三类医疗器械类。因角膜接触镜引起的角膜感染案例频发，而市场销量良好的月抛水凝胶接触镜也存在清洁不到位引起角膜感染的风险，因此，月抛水凝胶角膜接触镜的清洁还原问题也成为了大众关注的焦点。本发明专注于为月抛水凝胶接触镜提供一种除蛋白灭菌方法，通过电泳解离技术对月抛水凝胶接触镜进行清洁还原，保障佩戴使用后的月抛水凝胶接触镜可以得到有效清洁，保证入眼安全。
本发明提供一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法，其包括：提供除蛋白灭菌仪，所述除蛋白灭菌仪具有除蛋白灭菌槽，所述除蛋白灭菌槽内至少设置有两个电泳解离探针，于所述除蛋白灭菌槽内加入生理盐水，将月抛水凝胶接触镜置于所述生理盐水中，启动所述除蛋白灭菌仪，其中，
所述两个电泳解离探针在通电后形成一个正电极和一个负电极，所述月抛水凝胶接触镜表面附着的蛋白在所述生理盐水中带电荷，带电荷的蛋白朝向与其电性相反的电极位置移动(即蛋白电泳现象)，所述生理盐水中的Cl-朝向正电极移动，且失去电子被氧化为氯气，所述氯气溶于所述生理盐水生成次氯酸(即电解技术)，所述次氯酸与蛋白在除蛋白灭菌槽内发生氧化还原反应，蛋白被降解。此即为通过电泳解离技术除蛋白的作用原理。本发明所述的电泳解离探针是一种纳米级镀层材料电泳解离探针，该探针在除蛋白灭菌仪和生理盐水(或者说是电解质溶液)的共同作用下会在除蛋白灭菌槽内促进发生电泳现象和解离反应。
进一步说明本发明所述电泳解离除蛋白的原理：
本发明通过电泳解离除蛋白灭菌的方法主要是将蛋白电泳技术与电解技术进行叠加。首先，蛋白电泳技术(Electrophoresis)是指带电荷的粒子或分子在电场中移动的现象，大分子的蛋白质，多肽，病毒粒子，甚至细胞或小分子的氨基酸，核苷等在电场中都可作定向泳动，在本发明所述隐形眼镜清洗器的作用下，泪蛋白带电荷，在清洗仓镜片清洗槽内探针场强作用下向着探针电极位置移动，从而达到清洁角膜接触镜的功效。再者，电解技术是指，将电流通过电解质溶液或熔融态电解质(又称电解液)后，在阴极和阳极上引起氧化还原反应的过程。
在一种实施例中，本发明将生理盐水作为清洗镜片的电解质溶液，电解过程中生理盐水中的氯离子向正极探针移动，并失去电子被还原为氯气，一定浓度的生理盐水，产生的氯气一部分通过由气泡排出，一部分溶于水并发生如下化学反应：
Cl2+H2O＝HCl+HClO
该反应生成的HClO具有降解蛋白质和杀菌消毒的作用。
以上理论证明了本发明在实现电泳解离除蛋白灭菌方法时使用的电解质溶液可以是任何不含重金属的含氯离子的溶液，甚至普通护理液(基本上市面流通的护理液均含有氯离子)都可以作为本发明所述的电解质溶液，比较常规的比如NaCl溶液、KCl溶液、MgCl2溶液，以及含Cl-的眼镜护理液，或者这些溶液中多种的组合(前提是不会发生反应从而破坏电解使得在镜片清洗槽内不能产生次氯酸)。因此，在本发明所述的电泳解离除蛋白灭菌方法中任何可用的含氯离子的溶液均可以起到除蛋白和灭菌的双重效果。
在一种实施例中，本发明所述次氯酸与蛋白在除蛋白灭菌槽内发生氧化还原反应，蛋白被降解，是通过所述次氯酸与形成蛋白骨架的肽链反应，得到氯醛甲酰胺，以氯醛甲酰胺形成的肽链在溶液中水解，所述肽链中的肽键断裂，分解为小分子蛋白和氨基酸，蛋白降解。
在另一种实施例中，本发明所述次氯酸与蛋白在除蛋白灭菌槽内发生氧化还原反应，蛋白被降解，是通过所述次氯酸与形成蛋白骨架的肽链的侧链反应，所述侧链包括赖氨酸侧链，所述次氯酸与所述赖氨酸侧链发生反应，在蛋白的赖氨酸侧链以及蛋白的氨基上形成氯胺，所述氯胺分解形成羰基形式的有机分子片段【1,2】，所述赖氨酸侧链上的肽键断裂，分解为小分子蛋白和氨基酸，蛋白降解。
在另一种实施例中，本发明所述次氯酸与蛋白在除蛋白灭菌槽内发生氧化还原反应，蛋白被降解，是通过所述次氯酸与形成蛋白骨架的肽链，以及形成蛋白骨架的肽链的侧链进行反应，致使蛋白降解。
生理盐水本身并不具有杀菌的作用，而本发明所述的除蛋白灭菌方法通过除蛋白灭菌仪配合生理盐水，即可产生可以杀菌的次氯酸，所述次氯酸在所述生理盐水中发生自身氧化还原反应，分解出氢离子、氯离子和氧气，其在分解过程中吸收所述除蛋白灭菌槽内微生物的功能蛋白的电子，以使得所述微生物的功能蛋白失活，所述微生物被灭杀。此即为利用次氯酸的强氧化性进行杀菌的作用原理。在一种实施例中，角膜接触镜上附着的微生物包括细菌和病毒，所述次氯酸在分解过程中吸收所述细菌的细胞壁上的功能蛋白的电子，所述细菌失活；所述次氯酸在分解过程中吸收所述病毒的外壳上的功能蛋白的电子，所述病毒失活；所述次氯酸具有强氧化性，其渗透所述微生物细胞内，与所述微生物细胞内的菌体蛋白、核酸和酶发生氧化反应，以使得所述微生物被灭杀。这些杀菌的方式均是利用了次氯酸的强氧化性。
上述技术方案中，启动所述除蛋白灭菌仪，所述生理盐水中的带正电荷的氢离子向负电极移动，并在所述负电极附近发生还原反应生成氢气，所述生理盐水中的钠离子与氢氧根离子生成氢氧化钠，所述月抛水凝胶接触镜表面的油脂与所述氢氧化钠发生皂化反应，所述月抛水凝胶接触镜表面的油脂被水解。此即为本发明所述除蛋白灭菌方法带来的去脂质效果，所述除蛋白灭菌作用时也促进了溶液酸碱度的变化，当镜片上附着有脂质时，电泳解离会促进皂化反应的进行，因此，当月抛接触镜表面有脂质时，本发明所述电泳解离除蛋白灭菌方法可以顺带去脂质。
现有月抛型水凝胶材质的软性亲水接触镜，若是通过手揉搓镜片、护理液浸泡方式进行日常清洗的话，清洗能效非常低，仅10％以下的除蛋白效果，且因软性亲水接触镜的主要成分是甲基丙烯酸羟乙酯，其为一种胶体特性材料，手指揉搓易造成镜片的划伤和破损，降低了镜片的使用寿命。而本发明所述除蛋白灭菌方法通过电泳解离技术安全高效去蛋白灭菌，当镜片表面附着有油脂时还能顺带去脂质，可谓一举多得，清洗高效，可速效还原。
实施例2：
为了检测本发明所述除蛋白灭菌方法对月抛水凝胶接触镜的清洗效果，本发明还提出了一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，其包括：检测除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的洗脱率，具体包括：
检测月抛水凝胶软性亲水接触镜表面吸附的蛋白含量，获得镜片原始蛋白量；
将该月抛水凝胶软性亲水接触镜置于除蛋白灭菌仪中配合生理盐水进行除蛋白灭菌处理：将该月抛水凝胶软性亲水接触镜置于除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内配合生理盐水清洗3分钟，清洗过程中所述除蛋白灭菌槽内的两个电泳解离探针之间的电压差值为0.5V-4.8V，电流值为0.5-4.85mA；
检测经所述除蛋白灭菌仪处理后的月抛水凝胶软性亲水接触镜的蛋白含量，获得清洗后镜片剩余蛋白量：将被所述除蛋白灭菌仪处理过的月抛水凝胶软性亲水接触镜置于蛋白提取液中，振动提取蛋白，通过微量紫外分光光度计检测蛋白提取液中的蛋白浓度值，通过所述蛋白浓度值计算得到清洗后镜片剩余蛋白量；
将所述清洗后镜片剩余蛋白量与所述镜片原始蛋白量进行计算分析，得到除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶软性亲水接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的洗脱率：
Figure BDA0002880897710000121
在一种实施例中，所述蛋白提取液由50份乙腈、50份去离子水和0.2份100％的三氟乙酸混合组成。上述检测方法依附的主要原理是角膜接触镜表面及内部透氧孔中所吸附的泪蛋白，可以根据乙腈-三氟乙酸-水的混合溶液进行100％提取，所述蛋白提取溶液与角膜接触镜材料不发生反应，也不影响蛋白质的测量值，因而，可以将作为检测样本的角膜接触镜放置在所述蛋白提取溶液中进行振动提取分离蛋白，再通过微量紫外分光光度计检测蛋白提取溶液中的蛋白浓度，通过对该蛋白浓度进行简单计算就可以得到镜片吸附蛋白含量值。
其中需要说明的是，现阶段公知的可以提取蛋白质的物质是pbs溶液(磷酸盐缓冲溶液，一种标准盐溶液)，但是其也存在缺陷，即其不能充分提取角膜接触镜上的蛋白。因而，暂时还没有一种公认的方法可以检验人眼佩戴的角膜接触镜上实际吸附的蛋白含量，但为了证明本发明所述方法的有效性，本发明通过人工泪液培养的角膜接触镜进行实验，且在没有方法可以具体量测角膜接触镜上实际吸附的蛋白含量的前提下，本实验默认自人工泪液中培养出来的角膜接触镜上吸附的实际蛋白含量即为通过计算得到的镜片吸附蛋白理论含量。
对于上述论述的验证实验步骤如下：
1、由50份乙腈、50份去离子水和0.2份100％的三氟乙酸混合得到所述蛋白提取液；
2、取FDA归类的IV类软性亲水性接触镜，在含人工泪液(2.2mg/ml)1ml的离心管中恒温37℃培养1天，取出镜片后实测离心管中蛋白浓度为1.328mg/ml，镜片吸附的蛋白含量理论值为2.2-1.328＝0.872mg，
3、取1ml或4ml所述蛋白提取液充分溶解步骤2中被人工泪液培养的镜片，并在常温下振动24小时，振动提取后实测蛋白浓度为0.805mg/ml，因此，计算得到利用所述蛋白提取液进行提取蛋白的蛋白提取率为0.805/0.872*100％＝92.3％。
通过上述实验验证得到了本发明所述蛋白提取液的蛋白提取能力，因此，可以使用本发明所述蛋白提取液来进行蛋白浓度提取检测的实验。
实施例3：
针对实施例2所述的检测方法进行实验，以在本实施例中检测得到除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的洗脱率，实验步骤如下：
1、人眼佩戴强生->库博光学Biomedics Now(国械注进20153222303,LOT:LB6933A)月抛型水凝胶软性亲水接触镜8小时，镜片材质：comfilcon A水凝胶，含水量：48％；
2、人眼佩戴满8小时后，取下左、右眼镜片分别放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈-三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量，分别为0.341mg，0.345mg，测得镜片配戴1天(8h)平均吸附蛋白量为0.343mg，即认为镜片原始蛋白量为0.343mg；
3、重复步骤1，同一人佩戴强生->库博光学Biomedics Now(国械注进20153222303,LOT:LB6933A)月抛型水凝胶软性亲水接触镜8小时，获得两片表面带有蛋白的角膜接触镜；
4、取步骤3中的一片角膜接触镜置于1ml 0.9％生理盐水中浸泡3分钟，再将其放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈-三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量为0.339mg；
5、取步骤3中的另一片角膜接触镜置于除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内，加入1ml0.9％生理盐水，启动除蛋白灭菌仪清洗3分钟，清洗中测量探针两端电压为4.43V，电流大小为4.55mA(清洗中测量探针两端电压大小可为0.5V-4.8V，电流大小为0.5-4.85mA)，清洗完成后将角膜接触镜放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈-三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量为0.014mg；
6、计算除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的洗脱率：
Figure BDA0002880897710000141
同理，计算用生理盐水浸泡月抛水凝胶接触镜的蛋白洗脱率等于(1-0.339mg/0.343mg)*100％＝1.16％。
根据上述实验结果可以发现，除蛋白灭菌仪配合生理盐水对强生->库博光学月抛水凝胶接触镜的蛋白洗脱率可达95.9％，而通过生理盐水浸泡强生->库博光学月抛水凝胶接触镜可以达到的蛋白洗脱率仅有1.16％，因此，除蛋白灭菌仪配合生理盐水对强生->库博光学月抛水凝胶接触镜可达到高效清洁还原的效果。
需说明的是，本发明实施例所述的实验过程中，利用乙腈-三氟乙酸溶液进行振动提取蛋白，可将镜片上附着的蛋白自镜片上脱离，即蛋白溶于蛋白提取液中，再通过微量紫外分光光度计检测蛋白提取溶液的吸光值，再根据蛋白浓度检测标准曲线计算得到蛋白含量。
所述蛋白浓度检测标准曲线需人为建立，建立所述蛋白浓度检测标准曲线具体包括：
配置4mg/ml的蛋白溶液，对所述蛋白溶液进行倍比稀释，多次测试蛋白溶液的吸光值及蛋白浓度，记录测试得到的吸光值的平均值，记录测试得到的蛋白浓度的平均值，见下表3-1，根据所述吸光值的平均值和蛋白浓度的平均值制作标准曲线，若线性偏离度超出±10％范围，认为建标数据无效，需重做；
所述蛋白浓度检测标准曲线的函数表达式为：
y＝2.64033436x-0.001002579，
其中，y表示测得的蛋白浓度值，x表示蛋白在280nm处的吸光值；根据实际试验数据进行曲线拟合，试验数据与拟合函数之间的吻合程度，用一个与相关系数有关的一个量R2来评价，R2值越接近1，吻合程度越高，越接近0，则吻合程度越低，在一种情况下计算得到R2＝0.999999835。
表3-1蛋白溶液倍比稀释表
Figure BDA0002880897710000151
实施例4：
针对实施例2所述的检测方法进行实验，以在本实施例中检测得到除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的洗脱率，实验步骤如下：
1、人眼佩戴海昌优氧月抛型水凝胶软性亲水接触镜(国械注准20173220957，LOTNo.:6923604412327)8小时，镜片材质：由甲基丙烯酸羟乙酯、甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯、聚乙二醇及着色剂等聚合而成,含水量：55％；
2、人眼佩戴满8小时后，取下左、右眼镜片分别放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈-三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量，分别为0.322mg，0.341mg，测得镜片配戴1天(8h)平均吸附蛋白量为0.332mg，即认为镜片原始蛋白量为0.332mg；
3、重复步骤1，同一人佩戴海昌优氧月抛型水凝胶软性亲水接触镜(国械注准20173220957，LOT No.:6923604412327)8小时，获得两片表面带有蛋白的角膜接触镜；
4、取步骤3中的一片角膜接触镜置于1ml 0.9％生理盐水中浸泡3分钟，再将其放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈-三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量为0.329mg；
5、取步骤3中的另一片角膜接触镜置于除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内，加入1ml0.9％生理盐水，启动除蛋白灭菌仪清洗3分钟，清洗中测量探针两端电压为4.67V，电流大小为4.67mA(清洗中测量探针两端电压大小可为0.5V-4.8V，电流大小为0.5-4.85mA)，清洗完成后将角膜接触镜放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈-三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量为0.016mg；
6、计算除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的洗脱率：
Figure BDA0002880897710000161
同理，计算用生理盐水浸泡月抛水凝胶接触镜的蛋白洗脱率等于(1-0.329mg/0.332mg)*100％＝0.9％。
根据上述实验结果可以发现，除蛋白灭菌仪配合生理盐水对海昌优氧月抛水凝胶接触镜的蛋白洗脱率可达95.1％，而通过生理盐水浸泡海昌优氧月抛水凝胶接触镜可以达到的蛋白洗脱率仅有0.9％，因此，除蛋白灭菌仪配合生理盐水对海昌优氧月抛水凝胶接触镜可达到高效清洁还原的效果。
实施例5：
针对实施例2所述的检测方法进行实验，以在本实施例中检测得到除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的洗脱率，实验步骤如下：
1、人眼佩戴博士伦清朗TM舒适SofLens59(hilafilcon B)Visibility TintedContact Lenses(国械注进20163220371，LOT：W92046373)月抛水凝胶接触镜8小时，镜片材质：Hilafilcon B，含水量：59％；
2、人眼佩戴满8小时后，取下左、右眼镜片分别放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈-三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量，分别为0.318mg，0.325mg，测得镜片配戴1天(8h)平均吸附蛋白量为0.321mg，即认为镜片原始蛋白量为0.321mg；
3、重复步骤1，同一人佩戴博士伦清朗TM舒适SofLens59(hilafilcon B)Visibility Tinted Contact Lenses(国械注进20163220371，LOT：W92046373)月抛水凝胶接触镜8小时，获得两片表面带有蛋白的角膜接触镜；
4、取步骤3中的一片角膜接触镜置于1ml 0.9％生理盐水中浸泡3分钟，再将其放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈-三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量为0.316mg；
5、取步骤3中的另一片角膜接触镜置于除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内，加入1ml0.9％生理盐水，启动除蛋白灭菌仪清洗3分钟，清洗中测量探针两端电压为4.73V，电流大小为4.80mA(清洗中测量探针两端电压大小可为0.5V-4.8V，电流大小为0.5-4.85mA)，清洗完成后将角膜接触镜放入1.5ml的离心管中，并向离心管中加入1ml的乙腈-三氟乙酸溶液，振动30分钟后测试离心管中的溶菌酶量为0.016mg；
6、计算除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的洗脱率：
Figure BDA0002880897710000171
同理，计算用生理盐水浸泡月抛水凝胶接触镜的蛋白洗脱率等于(1-0.316mg/0.321mg)*100％＝1.6％。
根据上述实验结果可以发现，除蛋白灭菌仪配合生理盐水对博士伦清朗TM舒适SofLens59月抛水凝胶接触镜的蛋白洗脱率可达95％，而通过生理盐水浸泡博士伦清朗TM舒适SofLens59月抛水凝胶接触镜可以达到的蛋白洗脱率仅有1.6％，因此，除蛋白灭菌仪配合生理盐水对博士伦清朗TM舒适SofLens59月抛水凝胶接触镜可达到高效清洁还原的效果。
综合实施例2-5可以发现，本发明所述的除蛋白灭菌仪配合生理盐水可以对各大品牌的月抛水凝胶软性亲水接触镜进行有效除蛋白。
实施例6：
为了检测本发明所述除蛋白灭菌方法对月抛水凝胶接触镜的清洗效果，本发明还提出了一种针对月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌效果的检测方法，其包括：
检测除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶接触镜的灭菌效果，具体包括：
于除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内加入生理盐水，启动所述除蛋白灭菌仪，预定时间后，自所述除蛋白灭菌槽内获得灭菌发生水原液；
选择用于灭菌检测实验的中和剂和菌悬液，
将所述菌悬液与有机干扰物1：1混合水浴，预定时间后加入获得的所述灭菌发生水原液，得到混合液，预定作用时间后，取所述混合液与所述中和剂1：9混合，稀释，接种，进行活菌培养计数，检测得到所述灭菌发生水原液对菌悬液中细菌的杀灭对数值。
针对本实施例中所述的杀菌检测方法进行杀菌检测实验，杀菌实验涉及菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌。具体的杀菌检测实验步骤如下：
一、器材
1.试验菌株：铜绿假单胞菌ATCC15442
2.中和剂：D/E中和肉汤
3.作用浓度：原液(除蛋白灭菌仪+0.9％生理盐水的发生水，即于除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内加入生理盐水，启动所述除蛋白灭菌仪，预定时间后，自所述除蛋白灭菌槽内获得灭菌发生水原液)
二、方法
1.检验依据：中和剂鉴定试验、定量杀菌试验分别按卫生部《消毒技术规范》(2002年版)2.1.1.5条和2.1.1.7、2.1.1.9条进行。
其中，杀灭对数值KL标准要求：铜绿假单胞菌≥5.00。
2.中和剂鉴定试验：所用中和剂D/E中和肉汤。消毒剂浓度原液，作用时间2min，试验重复三次，试验菌株为铜绿假单胞菌。
三、结果
1、中和剂鉴定试验
组别1：1.0mL菌悬液加于试验样液4.0mL，作用至预定时间，取0.5mL混匀液加入稀释液4.5mL，吸1.0mL培养计数。
组别2：1.0mL菌悬液加于试验样液4.0mL，作用至预定时间，取0.5ml混匀液加入中和剂4.5mL，混匀作用10min，吸1.0mL培养计数，用稀释液10倍稀释。
组别3：0.1mL菌悬液加入0.4mL硬水，混匀后加入中和剂4.5mL，混匀作用10min，吸1.0mL培养计数，用中和剂10倍稀释。
组别4:0.1mL菌悬液加于中和产物4.9mL，混匀作用10min，吸1.0mL培养计数，用中和产物10倍稀释。
组别5：0.1mL菌悬液加于0.4mL硬水，混匀后加入稀释液4.5mL，混匀作用10min，吸1.0mL培养计数，用稀释液10倍稀释。
组别6：稀释液、中和剂和硬水各1.0mL接种平板。
中和剂鉴定试验结果见下表6-1。
表6-1中和剂鉴定试验结果
Figure BDA0002880897710000191
对表6-1中的试验结果进行分析，第1组不长菌，第2组有菌较第1组为多，但较第3,4,5组为少，第3、4、5组有相似量试验菌生长，且其组间误差率为6.9％(＜15％)，第6组无菌生长，中和剂评价合格。
2.对试验菌的杀灭效果
取0.5mL菌悬液加入0.5mL有机干扰物质，混匀水浴5min后，加消毒剂4.0mL，作用至预定时间，取0.5mL混合液加于4.5mL中和剂中，混匀，取适宜稀释度，1.0mL接种平皿，再进行活菌培养计数，同时做对照样。结果详见下表6-2。
表6-2样品对试验菌的杀灭对数值KL
Figure BDA0002880897710000201
四、结论
经三次重复试验结果表明，用灭菌发生水原液，作用时间3min，对铜绿假单胞菌杀灭对数值＞5.00，该灭菌发生水原液对铜绿假单胞菌具有杀灭作用。
实施例7：
为了检测本发明所述除蛋白灭菌方法对月抛水凝胶接触镜的清洗效果，本发明还提出了一种针对月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌效果的检测方法，该方法主要检测镜片的去脂质效果，其包括：
检测除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶接触镜表面油脂的清除效果，具体包括：
检测表面吸附有油脂的月抛水凝胶接触镜表面的油脂含量，
于所述除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内加入生理盐水，将该表面吸附有油脂的月抛水凝胶接触镜置于所述生理盐水中，启动所述除蛋白灭菌仪，清洗完成后，检测经所述除蛋白灭菌仪清洗过的月抛水凝胶接触镜表面的油脂含量，测得所述除蛋白灭菌仪配合生理盐水对所述月抛水凝胶接触镜的除脂率。
进一步的，可通过荧光分光光度计向所述表面吸附有油脂的月抛水凝胶接触镜发射光束，记录发射光谱的荧光强度值，所述荧光强度值对应所述月抛水凝胶接触镜表面的油脂含量；
Figure BDA0002880897710000202
针对本实施例中所述镜片表面油脂的清除检测方法进行检测实验，实验步骤如下：
1、选择月抛镜片：海昌优氧月抛型水凝胶软性亲水接触镜(国械注准20173220957，LOTNo.:6923604408199)材质：由甲基丙烯酸羟乙酯、甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯、聚乙二醇及着色剂等聚合而成；
2、配置人工泪液：磷脂酰胆碱-0.0005mg/ml、胆固醇-0.0018mg/ml、溶菌酶-1.9mg/ml、BSA-0.2mg/ml、g-球蛋白-0.1mg/ml、Nacl-9mg/ml、GaCL2·2H2O-0.25mg/ml、Na2HPO4·7H2O-0.28mg/ml，PH使用NaOH或Hcl调至7.8；
3、角膜接触镜体外人工吸附沉淀物过程：在无菌环境中，取海昌优氧月抛型水凝胶软性亲水接触镜2片，置于步骤2配制的人工泪液中，人工泪液须浸没接触镜，然后置于37℃培养箱中，每隔24小时更换一次人工泪液。经过3天的沉淀物吸附后，从溶液中取出镜片，用生理盐水冲洗后进行测试。
4、荧光分光光度计试验：激发波长360nm，发射波长360nm，将经过沉淀物吸附后的角膜接触镜置于荧光分光光度计中，使镜片中心面向光束，记录发射光谱的荧光强度值。
5、将步骤3中培养的两片镜片使用生理盐水冲洗后，置于荧光分光光度计中进行测试，记录发射光谱的荧光强度值，得出清洗前的荧光强度为31.2、31.4；
6、将步骤5中测得荧光强度为31.2的镜片放入除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内，并加入1ml的0.9％的生理盐水，启动除蛋白灭菌仪清洗，除蛋白灭菌槽内探针两端电压为6.228-7.384V，3分钟后，取出镜片再置于荧光分光光度计中进行测试，记录发射光谱的荧光强度值，得出清洗后的荧光强度4.6；
7、将步骤5中测得荧光强度为31.4的镜片放入除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内，并加入1ml的0.9％的生理盐水，静置浸泡3分钟后，取出再置于荧光分光光度计中进行测试，记录发射光谱的荧光强度值，得出清洗后的荧光强度31.4；
8、计算步骤6中启动除蛋白灭菌仪配合生理盐水清洗镜片的除脂率为：((31.2-4.6)/31.2)×100％＝85.3％；
同理，计算步骤7中于除蛋白灭菌仪中配合生理盐水浸泡镜片的除脂率为：
((31.4-31.4)/31.4)×100％＝0。
根据上述实验结果可以发现，除蛋白灭菌仪配合生理盐水对海昌优氧月抛水凝胶接触镜表面油脂的去除率可达85.3％，而同样的镜片在除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内配合生理盐水进行浸泡去除镜片表面油脂的清除率为0，因而，本发明所述的除蛋白灭菌仪配合生理盐水在启动清洗的情况下还兼具有去脂质的功效。
综上所述，本发明公开了一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法及检测方法，所述除蛋白灭菌方法可对月抛水凝胶接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白和细菌以及脂质进行清除，实现对月抛水凝胶接触镜的还原，为广大消费者提供一种针对月抛水凝胶接触镜的有效清洗模式，保障镜片入眼安全；本发明提供的除蛋白灭菌检测方法可以有效验证通过本发明所述的除蛋白灭菌方法对月抛水凝胶接触镜的还原效果，该检测方法是对肉眼不可见的细菌、蛋白及脂质的检测，通过化学实验方法给消费者提供检测结果，证明本发明所述的除蛋白灭菌方法可以对月抛水凝胶接触镜进行清洗还原，从科学的角度保障经清洗器清洗的镜片是安全无害的，进一步保障用户的入眼安全。本发明实施例的实验结果表明，本发明所述除蛋白灭菌仪配合生理盐水可对月抛水凝胶接触镜进行除蛋白、灭菌、去油脂的多方位清洗还原。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，本领域人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例进行接合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改和变型。

Claims (11)

1.一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，其特征在于，其包括：对采用除蛋白灭菌方法除蛋白灭菌后的月抛水凝胶接触镜上的蛋白进行洗脱率检测，具体包括：
检测月抛水凝胶软性亲水接触镜表面吸附的蛋白含量，获得镜片原始蛋白量，
将该月抛水凝胶软性亲水接触镜置于除蛋白灭菌仪中配合生理盐水进行除蛋白灭菌处理，
检测经所述除蛋白灭菌仪处理后的月抛水凝胶软性亲水接触镜的蛋白含量，获得清洗后镜片剩余蛋白量，
将所述清洗后镜片剩余蛋白量与所述镜片原始蛋白量进行计算分析，得到除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶软性亲水接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的洗脱率。
2.根据权利要求1所述的一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，其特征在于，
将该月抛水凝胶软性亲水接触镜置于除蛋白灭菌仪中配合生理盐水进行除蛋白灭菌处理，具体包括：
选择所述除蛋白灭菌仪的清洗模式，将该月抛水凝胶软性亲水接触镜置于除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内配合生理盐水清洗预定时间，得到除蛋白灭菌处理后的月抛水凝胶软性亲水接触镜；
检测经所述除蛋白灭菌仪处理后的月抛水凝胶软性亲水接触镜的蛋白含量，获得清洗后镜片剩余蛋白量，具体包括：
将被所述除蛋白灭菌仪处理过的月抛水凝胶软性亲水接触镜置于蛋白提取液中，振动提取蛋白，
通过微量紫外分光光度计检测蛋白提取液中的蛋白浓度值，通过所述蛋白浓度值计算得到清洗后镜片剩余蛋白量。
3.根据权利要求2所述的一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，其特征在于，
所述预定时间为3分钟，利用所述除蛋白灭菌仪清洗月抛水凝胶软性亲水接触镜的过程中所述除蛋白灭菌槽内的两个电泳解离探针之间的电压差值为0.5V-4.8V，电流值为0.5-4.85mA。
4.根据权利要求2所述的一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，其特征在于，
所述蛋白提取液由50份乙腈、50份去离子水和0.2份100％的三氟乙酸混合组成；
将所述清洗后镜片剩余蛋白量与所述镜片原始蛋白量进行计算分析，得到除蛋白灭菌仪配合生理盐水对月抛水凝胶软性亲水接触镜的表面和透氧孔内所吸附的蛋白的洗脱率：
Figure FDA0002880897700000021
5.根据权利要求1所述的一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，其特征在于，其还包括：
对采用除蛋白灭菌方法除蛋白灭菌后的月抛水凝胶接触镜进行灭菌效果检测，具体包括：
于除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内加入生理盐水，启动所述除蛋白灭菌仪，预定时间后，自所述除蛋白灭菌槽内获得灭菌发生水原液；
选择用于灭菌检测实验的中和剂和菌悬液，
将所述菌悬液与有机干扰物按重量份1：1混合水浴，预定时间后加入获得的所述灭菌发生水原液，得到混合液，预定作用时间后，取所述混合液与所述中和剂按重量份1：9混合，稀释，接种，进行活菌培养计数，检测得到所述灭菌发生水原液对菌悬液中细菌的杀灭对数值。
6.根据权利要求1所述的一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，其特征在于，其还包括：
对采用除蛋白灭菌方法除蛋白灭菌后的月抛水凝胶接触镜进行表面油脂清除效果检测，具体包括：
检测表面吸附有油脂的月抛水凝胶接触镜表面的油脂含量，
于所述除蛋白灭菌仪的除蛋白灭菌槽内加入生理盐水，将该表面吸附有油脂的月抛水凝胶接触镜置于所述生理盐水中，启动所述除蛋白灭菌仪，清洗完成后，检测经所述除蛋白灭菌仪清洗过的月抛水凝胶接触镜表面的油脂含量，测得所述除蛋白灭菌仪配合生理盐水对所述月抛水凝胶接触镜的除脂率。
7.根据权利要求6所述的一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌检测方法，其特征在于，
通过荧光分光光度计向所述表面吸附有油脂的月抛水凝胶接触镜发射光束，记录发射光谱的荧光强度值，所述荧光强度值对应所述月抛水凝胶接触镜表面的油脂含量；
Figure FDA0002880897700000031
8.一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法，其特征在于，其包括：
提供除蛋白灭菌仪，所述除蛋白灭菌仪具有除蛋白灭菌槽，所述除蛋白灭菌槽内至少设置有两个电泳解离探针；
于所述除蛋白灭菌槽内加入生理盐水和月抛水凝胶接触镜，启动所述除蛋白灭菌仪，所述两个电泳解离探针通电，其中一个电泳解离探针为正电极，另一个电泳解离探针为负电极；
所述月抛水凝胶接触镜表面附着的蛋白在所述生理盐水中带电荷，带电荷的蛋白朝向与其电性相反的电极位置移动；
所述生理盐水中的Cl-朝向正电极移动，且失去电子被氧化为氯气，所述氯气溶于所述生理盐水生成次氯酸，所述次氯酸与蛋白在除蛋白灭菌槽内发生氧化还原反应，蛋白被降解；
所述次氯酸在所述生理盐水中发生自身氧化还原反应，分解出氢离子、氯离子和氧气，所述次氯酸在分解过程中吸收所述除蛋白灭菌槽内微生物的功能蛋白的电子，以使得所述微生物的功能蛋白失活，所述微生物被灭杀。
9.根据权利要求8所述的一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法，其特征在于，其还包括：
所述生理盐水中的带正电荷的氢离子向负电极移动，并在所述负电极附近发生还原反应生成氢气，所述生理盐水中的钠离子与氢氧根离子生成氢氧化钠，所述月抛水凝胶接触镜表面的油脂与所述氢氧化钠发生皂化反应，所述月抛水凝胶接触镜表面的油脂被清除。
10.根据权利要求8所述的一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法，其特征在于，
所述次氯酸与蛋白在除蛋白灭菌槽内发生氧化还原反应，蛋白被降解，具体包括：
所述次氯酸与形成蛋白骨架的肽链反应，得到氯醛甲酰胺，以氯醛甲酰胺形成的肽链在溶液中水解，所述肽链中的肽键断裂，分解为小分子蛋白和氨基酸，蛋白降解，和/或，
所述次氯酸与形成蛋白骨架的肽链的侧链反应，所述侧链包括赖氨酸侧链，所述次氯酸与所述赖氨酸侧链发生反应，在蛋白的赖氨酸侧链以及蛋白的氨基上形成氯胺，所述氯胺分解形成羰基形式的有机分子片段【1,2】，所述赖氨酸侧链上的肽键断裂，分解为小分子蛋白和氨基酸，蛋白被降解。
11.根据权利要求8所述的一种月抛水凝胶接触镜的除蛋白灭菌方法，其特征在于，
所述微生物包括细菌和病毒，所述次氯酸在分解过程中吸收所述细菌的细胞壁上的功能蛋白的电子，所述细菌失活；
所述次氯酸在分解过程中吸收所述病毒的外壳上的功能蛋白的电子，所述病毒失活；
所述次氯酸具有强氧化性，其渗透所述微生物细胞内，与所述微生物细胞内的菌体蛋白、核酸和酶发生氧化反应，以使得所述微生物被灭杀。
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