CN114645032A

CN114645032A - 4种raf蛋白及其编码基因在植物抗旱中的应用

Info

Publication number: CN114645032A
Application number: CN202011517349.4A
Authority: CN
Inventors: 巩志忠; 王瑜; 孙志慧; 胡晓莹
Original assignee: China Agricultural University
Current assignee: China Agricultural University
Priority date: 2020-12-21
Filing date: 2020-12-21
Publication date: 2022-06-21
Anticipated expiration: 2040-12-21
Also published as: CN114645032B

Abstract

本发明公开了4种RAF蛋白及其编码基因在植物抗旱中的应用。本发明所要保护的一个技术方案是蛋白质的任一种应用，所述蛋白质的氨基酸序列可为序列表中序列1、序列表中序列2、序列表中序列3或序列表中序列4。本发明将玉米B73 MAPKKK家族蛋白基因ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34分别导入B73中得到四种基因的过表达株系；与野生型B73植株相比，分别过表达四种基因均增加了玉米对干旱胁迫的敏感性。说明玉米MAPKKK家族蛋白ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34参与植物对干旱胁迫的调控与适应。

Description

4种RAF蛋白及其编码基因在植物抗旱中的应用

技术领域

本发明涉及植物生物技术领域，具体涉及4种RAF蛋白及其编码基因在植物抗旱中的应用。

背景技术

MAPK(mitogen-activated protein kinase)级联反应在真核生物的进化上普遍保守，一般认为外界刺激被受体感知，受体被激活，激活的受体激活MAPK级联反应。MAPK级联由MAPKKK(MAPK kinase kinase)、MAPKK(MAPK kinase)、MAPK(MAP kinase)所组成，MAPKKK可以磷酸化MAPKK，磷酸化的MAPKK可以磷酸化MAPK，MAPK靶向细胞胞质或者核内的效应蛋白从而将信号向下游传递。MAPK级联可通过三种类型可逆的磷酸化激酶将信号逐级放大和传递。植物中的MAPKKK主要分为三类：ZIKs、MEKKs、RAF-like MAPKKKs。在拟南芥中，有一些RFA类的激酶有些报道，比如CTR1参与乙烯信号通路的转导，LIK1参与离子渗透以及转运体的调控等过程，RAF19参与二氧化碳信号通路等研究。但是在玉米中该类基因的研究和报导相对很少。作为第二大粮食作物和重要的饲料作物，玉米的产量和质量关系到我国农业经济的发展。因此如何利用新技术和新方法，通过对重要基因进行遗传改造，提高玉米抗旱性，最终获得抗逆新品种，是现代基础生物学和农业育种的共同目标之一。玉米的产量容易受到干旱胁迫影响，通过基因工程方法改良玉米抗旱性，对保护玉米产量具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何调控植物的抗旱性。

为了解决上述技术问题，本发明首先提供了蛋白质的下述任一种应用。

所述蛋白质为蛋白质A、蛋白质B、蛋白质C或蛋白质D。

P1、所述蛋白质在调控植物抗旱性中的应用，

P2、所述蛋白质在制备降低植物抗旱性的产品中的应用，

P3、所述蛋白质在植物育种中的应用。

所述蛋白质A为如下A1)、A2)或A3)的蛋白质：

A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质；

A2)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的由A1)衍生的或与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有相同功能的蛋白质；

A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。

所述蛋白质B为如下B1)、B2)或B3)的蛋白质：

B1)氨基酸序列是序列表中序列2的蛋白质；

B2)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的由B1)衍生的或与B1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有相同功能的蛋白质；

B3)在B1)或B2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。

所述蛋白质C为如下C1)、C2)或C3)的蛋白质：

C1)氨基酸序列是序列表中序列3的蛋白质；

C2)将序列表中序列3所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的由C1)衍生的或与C1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有相同功能的蛋白质；

C3)在C1)或C2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。

所述蛋白质D为如下D1)、D2)或D3)的蛋白质：

D1)氨基酸序列是序列表中序列4的蛋白质；

D2)将序列表中序列4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的由D1)衍生的或与D1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有相同功能的蛋白质；

D3)在D1)或D2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。

上述蛋白质中，序列表中序列1由415个氨基酸残基组成。序列表中序列2由762个氨基酸残基组成。序列表中序列3由574个氨基酸残基组成。序列表中序列4由598个氨基酸残基组成。

上述蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。

上述蛋白质中，所述蛋白标签(protein-tag)是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和/或纯化。所述蛋白标签可为Flag标签、His标签、MBP标签、HA标签、myc标签、GST标签和/或SUMO标签等。

上述蛋白质中，同一性是指氨基酸序列的同一性。可使用国际互联网上的同源性检索站点测定氨基酸序列的同一性，如NCBI主页网站的BLAST网页。例如，可在高级BLAST2.1中，通过使用blastp作为程序，将Expect值设置为10，将所有Filter设置为OFF，使用BLOSUM62作为Matrix，将Gap existence cost，Per residue gap cost和Lambda ratio分别设置为11，1和0.85(缺省值)并进行检索一对氨基酸序列的同一性进行计算，然后即可获得同一性的值(％)。

上述蛋白质中，所述80％以上的同一性可为至少81％、82％、85％、86％、88％、90％、91％、92％、95％、96％、98％、99％或100％的同一性。

上述应用中，所述植物可为玉米。

为了解决上述技术问题，本发明还提供了与上述蛋白质相关的生物材料的下述任一种应用：

Q1、所述生物材料在调控植物抗旱性中的应用，

Q2、所述生物材料在制备降低植物抗旱性的产品中的应用，

Q3、所述生物材料在植物育种中的应用。

所述生物材料为下述E1)至E11)中的任一种：

E1)编码上述蛋白质的核酸分子；

E2)含有E1)所述核酸分子的表达盒；

E3)含有E1)所述核酸分子的重组载体、或含有E2)所述表达盒的重组载体；

E4)含有E1)所述核酸分子的重组微生物、或含有E2)所述表达盒的重组微生物、或含有E3)所述重组载体的重组微生物；

E5)含有E1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、或含有E2)所述表达盒的转基因植物细胞系；

E6)含有E1)所述核酸分子的转基因植物组织、或含有E2)所述表达盒的转基因植物组织；

E7)含有E1)所述核酸分子的转基因植物器官、或含有E2)所述表达盒的转基因植物器官；

E8)促进或提高上述蛋白质的基因表达的核酸分子；

E9)含有E8)所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因植物细胞系；

E10)抑制或降低上述蛋白质的基因表达的核酸分子；

E11)含有E10)所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因植物细胞系。

上述生物材料中，所述核酸分子为如下a1)、b1)、c1)或d1)。

所述a1)为a1-1)、a1-2)或a1-3)所示的所述蛋白质的编码基因：

a1-1)编码链的编码序列是序列表中序列5的核苷酸的cDNA分子或DNA分子；

a1-2)核苷酸是序列表中序列5的cDNA分子或DNA分子；

a1-3)与a1-2)限定的cDNA或DNA分子杂交且编码具有相同功能的蛋白质的cDNA分子或DNA分子。

所述b1)为b1-1)、b1-2)或b1-3)所示的所述蛋白质的编码基因：

b1-1)编码链的编码序列是序列表中序列6的核苷酸的cDNA分子或DNA分子；

b1-2)核苷酸是序列表中序列6的cDNA分子或DNA分子；

b1-3)与b1-2)限定的cDNA或DNA分子杂交且编码具有相同功能的蛋白质的cDNA分子或DNA分子。

所述c1)为c1-1)、c1-2)或c1-3)所示的所述蛋白质的编码基因：

c1-1)编码链的编码序列是序列表中序列7的核苷酸的cDNA分子或DNA分子；

c1-2)核苷酸是序列表中序列7的cDNA分子或DNA分子；

c1-3)与c1-2)限定的cDNA或DNA分子杂交且编码具有相同功能的蛋白质的cDNA分子或DNA分子。

所述d1)为d1-1)、d1-2)或d1-3)所示的所述蛋白质的编码基因：

d1-1)编码链的编码序列是序列表中序列8的核苷酸的cDNA分子或DNA分子；

d1-2)核苷酸是序列表中序列8的cDNA分子或DNA分子；

d1-3)与d1-2)限定的cDNA或DNA分子杂交且编码具有相同功能的蛋白质的cDNA分子或DNA分子。

上述生物材料中，B2)所述的含有核酸分子的表达盒，是指能够在宿主细胞中表达上述应用中所述蛋白质的DNA，该DNA不但可包括启动蛋白编码基因转录的启动子，还可包括终止蛋白编码基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。可用于本发明的启动子包括但不限于：组成型启动子，组织、器官和发育特异的启动子，和诱导型启动子。可用现有的植物表达载体构建含有所述蛋白编码基因表达盒的重组表达载体。所述植物表达载体包括双元农杆菌载体和可用于植物微弹轰击的载体等。如pAHC25、pWMB123、pBin438、pCAMBIA1302、pCAMBIA2301、pCAMBIA1301、pCAMBIA1300、pBI121、pCAMBIA1391-Xa或pCAMBIA1391-Xb(CAMBIA公司)等。

上述生物材料中，所述重组微生物具体可为酵母，细菌，藻和真菌。

为了解决上述技术问题，本发明还提供了调控基因表达的物质的下述任一种应用：

F1、调控基因表达的物质在调控植物抗旱性中的应用，

F2、调控基因表达的物质在制备降低植物抗旱性的产品中的应用，

F3、调控基因表达的物质在植物育种中的应用。

所述调控基因表达的物质具体可为下述任一种：

E1)编码上述蛋白质的核酸分子；

E2)含有E1)所述核酸分子的表达盒；

E3)含有E1)所述核酸分子的重组载体、或含有E2)所述表达盒的重组载体。

上文所述调控植物抗旱性为提高植物对干旱的敏感性。

上述应用中，所述调控基因表达可为增强或提高所述基因表达。

上述应用中，所述调控基因表达的物质可为增强或提高所述基因表达的试剂。

为了解决上述技术问题，本发明还提供了一种培育干旱敏感植物的方法。包括提高目的植物中上述蛋白质的生物表达量或/和上文所述核酸分子的表达量，得到干旱敏感的植物。所述干旱敏感植物对干旱的敏感性高于所述目的植物。

包含上文所述蛋白质和/或上文所述的生物材料和/或上文所述调控基因表达的物质的下述任意一种产品，也属于本发明的保护范围：

G1、调控植物抗旱性的产品；

G2、降低植物抗旱性的产品；

G3、提高植物干旱敏感性的产品。

上文中，所述降低植物抗旱性的产品可为植物抗逆调控剂。所述植物抗逆调控剂可含有上述蛋白质或/和所述生物材料。

上述方法中，所述对干旱敏感植物可为转基因植物，也可为通过杂交等常规育种技术获得的植物。

上述方法中，所述转基因植物理解为不仅包含第一代到第二代转基因植物，也包括其子代。对于转基因植物，可以在该物种中繁殖该基因，也可用常规育种技术将该基因转移进入相同物种的其它品种，特别包括商业品种中。所述转基因植物包括种子、愈伤组织、完整植株和细胞。

上文所述植物和/或所述目的植物可为玉米。

上文所述蛋白质和/或上文所述生物材料也属于本发明的保护范围。

上文所述核酸分子可产生不同转录本，翻译出不同蛋白质，所述核酸分子产生的不同转录本以及翻译出的不同蛋白质均在本专利保护范围内。

本发明将来自玉米B73的四种MAPKKK家族蛋白基因ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34分别导入玉米B73中得到四种基因的转基因过表达株系；与未转化的野生型B73对照植株相比，分别过表达四种基因均增加了转基因玉米对干旱胁迫的敏感性。说明玉米MAPKKK家族蛋白ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34参与植物对干旱相关逆境胁迫的调控与适应。

附图说明

图1为对照B73和ZmRaf11，ZmRaf19，ZmRAF34过表达株系干旱处理后植株生长情况照片。其中图中WT为对照B73；图中ZmRaf11-OE1和ZmRaf11-OE2为ZmRaf11过表达株系；图中ZmRaf19-OE1和ZmRaf19-OE2为ZmRaf19过表达株系；图中ZmRAF34为ZmRAF34过表达株系。

图2为对照B73和ZmRAF32过表达株系在干旱处理前、干旱处理一周和干旱处理3周复水3天后的表型。其中图中WT为对照B73；ZmRAF32为ZmRAF32过表达株系。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实例中所用基因的转录本均为基因的一个转录本，由于玉米同一DNA段序列可产生不同转录本，翻译出不同蛋白质，该段序列产生的不同转录本以及翻译出的不同蛋白质均在本专利保护范围内。如未特别指明，实例均按照常规实验条件或产品说明书条件进行。

本发明引物合成和测序由英骏公司完成。

实施例1，ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34基因过表达株系的构建和干旱处理表型检测

一、ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34基因过表达株系的构建

1.ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34基因过表达载体的构建

玉米B73中的四个MAPKKK家族蛋白ZmRaf11，ZmRaf19，ZmRAF32和ZmRAF34的氨基酸序列分别如序列表中序列1、序列2、序列3和序列4所示。四种蛋白对应的四种基因中ZmRaf11基因由5402个碱基组成，T01转录本读码框为自5’端的第1460位碱基至4415位碱基,其在玉米基因组数据库中的编号为GRMZM2G102088；玉米ZmRaf19基因由6140个碱基组成，T07转录本读码框为自5’端的第746位碱基至5236位碱基，其在玉米基因组数据库中的编号为GRMZM2G098187；玉米ZmRAF32基因由6097个碱基组成，T01转录本的读码框为自5'端第2860位到第5100位碱基，其在玉米基因组数据库中的编号为GRMZM2G055334；玉米ZmRAF34基因由5716个碱基组成，T01转录本的读码框为自5'端第1836位到第4669位碱基，其在玉米基因组数据库中的编号为GRMZM2G114093。ZmRaf11，ZmRaf19，ZmRAF32和ZmRAF34蛋白的cDNA基因的CDS(编码序列)分别如序列表中的序列5、序列6、序列7和序列8所示。

将核苷酸序列是序列表中的序列5、序列6、序列7和序列8的DNA分子分别单独插入pBCXUN载体中分别得到ZmRaf11基因过表达重组载体(命名为pBCXUN-ZmRaf11)、ZmRaf19基因过表达重组载体(命名为pBCXUN-ZmRaf19)、ZmRAF32基因过表达重组载体(命名为pBCXUN-ZmRAF32)和ZmRAF34基因过表达重组载体(命名为pBCXUN-ZmRAF34)。pBCXUN-ZmRaf11中，序列表中的序列5所示的DNA分子由玉米泛素基因Ubi的启动子启动并由Nos终止子终止，能够表达ZmRaf11蛋白(氨基酸序列如序列表中序列1所示)；pBCXUN-ZmRaf19中，序列表中的序列6所示的DNA分子由玉米泛素基因Ubi的启动子启动并由Nos终止子终止，能够表达ZmRaf19蛋白(氨基酸序列如序列表中序列2所示)；pBCXUN-ZmRAF32中，序列表中的序列7所示的DNA分子由玉米泛素基因Ubi的启动子启动并由Nos终止子终止，能够表达ZmRAF32蛋白(氨基酸序列如序列表中序列3所示)；pBCXUN-ZmRAF34中，序列表中的序列8所示的DNA分子由玉米泛素基因Ubi的启动子启动并由Nos终止子终止，能够表达ZmRAF34蛋白(氨基酸序列如序列表中序列4所示)。

pBCXUN载体是将pCXUN(GenBank:FJ905215.1，06-JUL-2009)的HYG基因(hptII，潮霉素抗性基因)替换为Bar基因(编码膦丝菌素乙酰转移酶)(GenBank:MG719235.1中的第284-835位核苷酸，02-OCT-2018)，保持pCXUN的其它核苷酸不变得到的表达载体。

2.ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34基因过表达株系的获得

2.1重组农杆菌的获得

将步骤1中构建的pBCXUN-ZmRaf11、pBCXUN-ZmRaf19、pBCXUN-ZmRAF32和pBCXUN-ZmRAF34过表达载体转化农杆菌EHA105感受态，菌落PCR鉴定阳性克隆，并测序。含有pBCXUN-ZmRaf11的阳性克隆即为pBCXUN-ZmRaf11/EHA105重组农杆菌；含有pBCXUN-ZmRaf19的阳性克隆即为pBCXUN-ZmRaf19/EHA105重组农杆菌；含有pBCXUN-ZmRAF32的阳性克隆即为pBCXUN-ZmRAF32/EHA105重组农杆菌；含有pBCXUN-ZmRAF34的阳性克隆即为pBCXUN-ZmRAF34/EHA105重组农杆菌。四种重组农杆菌的菌落PCR和测序鉴定引物均为UbiP-seq(对应于Ubi启动子中)和NosR-seq(对应于Nos终止子中)。

UbiP-seq:5′-TTTTAGCCCTGCCTTCATACGC-3′，

NosR-seq:5′-AGACCGGCAACAGGATTCAATC-3′。

将重组农杆菌pBCXUN-ZmRaf11/EHA105、pBCXUN-ZmRaf19/EHA105、pBCXUN-ZmRAF32/EHA105和pBCXUN-ZmRAF34/EHA105的单菌落分别接种于2-3mL含有100μg/mL硫酸卡那霉素和50μg/mL利福平的液体培养基中，28℃振荡培养过夜。第二天转接到含有相应抗生素的大量液体培养基中震荡培养，转接几次后收集菌体。将菌体重新悬浮至OD₆₀₀在0.8-1.0之间，得到四种重组农杆菌的菌悬液。

2.2转基因过表达株系的获得

将2.1中获得的四种重组农杆菌的菌悬液侵染无菌条件下扒出的B73玉米幼胚，然后使用除草剂草丁膦筛选诱导出的愈伤组织，将筛选出的愈伤组织诱导成苗。

采用PCR鉴定筛选得到的ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34转基因植株(提取植株叶片的基因组DNA，采用UbiP-seq和NosR-seq组成的引物对进行PCR扩增，得到特异性扩增产物的植株为ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34的转基因植株)。转四种基因的转基因植株分别经过自交繁种后获得T3代稳定遗传的ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34基因的过表达植株，用于进行后续干旱处理实验。

提取不同转基因自交系的RNA(Magen公司的RNA提取试剂盒)，反转录出cDNA(Thermo公司的反转录试剂盒)，定量PCR检测转基因过表达情况(Takara公司的定量PCR试剂)。ZmRaf11转基因过表达植株中ZmRaf11基因的表达量高于野生型B73中ZmRaf11基因的表达量；ZmRaf19转基因过表达植株中ZmRaf19基因的表达量高于野生型B73中ZmRaf19基因的表达量；ZmRAF32转基因过表达植株中ZmRAF32基因的表达量高于野生型B73中ZmRAF32基因的表达量；ZmRAF34转基因过表达植株中ZmRAF34基因的表达量高于野生型B73中ZmRAF34基因的表达量。

二、ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34基因过表达玉米干旱处理表型检测

实验包含三个重复。每个重复中包含对照B73的15个小盆和ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34基因过表达植株(T3代)的各15个小盆。在每个小盆中加入140g土，托盘里加上水，每小盆放4粒种子，覆盖50ml土，吸满水后将托盘中剩余的水倒掉后于培养间(温度25℃，湿度40％)正常培养，出苗后将长势不齐的一棵苗去掉，在托盘里加入1L水，吸满后将水倒掉，开始干旱处理不再浇水。

在干旱处理1周时，玉米植株叶片出现干旱萎蔫表型，结果如图1和图2所示。图1中ZmRaf11基因过表达株系(图1中A中的ZmRaf11-OE1和ZmRaf11-OE2所示)、ZmRaf19基因过表达株系(图1中B中的ZmRaf19-OE1和ZmRaf19-OE2所示)以及ZmRAF34基因过表达株系(图1中C中的ZmRAF34所示)和ZmRAF32基因过表达株系(图2中的ZmRAF32所示)的生长状况均差于对照B73(图1和图2中WT所示)；所有材料植株在干旱胁迫下均出现叶片萎蔫表型，但四种转基因株系植株叶片的萎蔫程度均高于WT。结果表明四种转基因株系植株相比于野生型对照B73对干旱更敏感；ZmRaf11、ZmRaf19、ZmRAF32和ZmRAF34基因的过表达会导致干旱敏感的表型。

在干旱处理3周出现较严重干旱胁迫后进行复水，复水3天后观察玉米植株存活率。结果显示三次重复ZmRAF32基因过表达株系的平均存活率为2％，对照B73植株的平均存活率为46.7％(图2)。结果表明，在干旱条件下ZmRAF32基因过表达株系的存活率远低于野生型对照B73，ZmRAF32基因在玉米抵御干旱胁迫中起负调控作用。

以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围，可以进行一些基本特征的应用。

序列表

<110> 中国农业大学

<120> 4种RAF蛋白及其编码基因在植物抗旱中的应用

<130> GNCSQ203240

<160> 8

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 415

<212> PRT

<213> 玉米（Zea mays）

<400> 1

Met Met Ala Glu Gly Pro Asn Phe Ala Gly Met Ile Gly Gly His Asp

1 5 10 15

Asn Gly Gly Asp Phe Cys Asp Met Ala Tyr Tyr Arg Lys Leu Gly Glu

20 25 30

Gly Ser Asn Met Ser Val Asp Asn Leu Asn Ser Met Gln Thr Ser Thr

35 40 45

His Gly Gly Ser Ile Ala Met Ser Val Asp Asn Ser Ser Val Gly Ser

50 55 60

Cys Asp Ser His Thr Arg Met Leu Asn His Pro Gly Leu Lys Gly Pro

65 70 75 80

Val Val Gly Asn Tyr Ser Val Gly Gly His Ser Ile Phe Arg His Gly

85 90 95

Arg Val Ser His Ala Leu Ser Asp Asp Ala Leu Ala Gln Ala Leu Met

100 105 110

Asp Pro Arg Tyr Pro Thr Glu Thr Leu Lys Asp Tyr Glu Glu Trp Thr

115 120 125

Ile Asp Leu Ala Lys Leu His Met Gly Met Pro Phe Ala Gln Gly Ala

130 135 140

Phe Gly Lys Leu Tyr Arg Gly Thr Tyr Asn Gly Glu Asp Val Ala Ile

145 150 155 160

Lys Leu Leu Glu Arg Pro Glu Ala Asp Pro Glu Arg Ala Gly Leu Met

165 170 175

Glu Gln Gln Phe Val Gln Glu Val Met Met Leu Ala Thr Leu Arg His

180 185 190

Gln Asn Ile Val Lys Phe Ile Gly Ala Cys Arg Lys Pro Val Val Trp

195 200 205

Cys Ile Val Thr Glu Tyr Ala Lys Gly Gly Ser Val Arg Gln Phe Leu

210 215 220

Ala Lys Arg Gln Asn Arg Ser Val Pro Leu Lys Leu Ala Val Lys Gln

225 230 235 240

Ala Leu Asp Val Ala Arg Gly Met Ala Tyr Val His Gly Leu Gly Phe

245 250 255

Ile His Arg Asp Leu Lys Ser Asp Asn Leu Leu Ile Ser Gly Asp Lys

260 265 270

Ser Ile Lys Ile Ala Asp Phe Gly Val Ala Arg Ile Glu Val Lys Thr

275 280 285

Glu Gly Met Thr Pro Glu Thr Gly Thr Tyr Arg Trp Met Ala Pro Glu

290 295 300

Met Ile Gln His Arg Pro Tyr Asp Gln Lys Val Asp Val Tyr Ser Phe

305 310 315 320

Gly Ile Val Leu Trp Glu Leu Ile Thr Gly Met Leu Pro Phe Ala Asn

325 330 335

Met Thr Ala Val Gln Ala Ala Phe Ala Val Val Asn Lys Gly Val Arg

340 345 350

Pro Ala Ile Pro Gln Asp Cys Leu Pro Thr Leu Ala Glu Ile Met Thr

355 360 365

Arg Cys Trp Asp Pro Asn Pro Asp Val Arg Pro Pro Phe Thr Glu Val

370 375 380

Val Arg Met Leu Glu His Ala Glu Met Glu Ile Leu Ser Thr Val Arg

385 390 395 400

Lys Ala Arg Phe Arg Cys Cys Met Ser Gln Pro Met Thr Thr Asp

405 410 415

<210> 2

<211> 762

<212> PRT

<213> 玉米（Zea mays）

<400> 2

Met Pro His Arg Arg Arg Ala Leu Asn Pro Thr Leu Pro Pro Pro Pro

1 5 10 15

Pro Ala Ala Thr Ala Phe His Leu Gly Gly Asp Glu Ala Arg Leu Pro

20 25 30

Leu Leu Ala Asp Tyr Ala Leu Leu His Gln Pro Ala Ala Ser Ala Val

35 40 45

Asp Ala Pro Ala Ser Ser Glu Trp Ser Ala Gly Ser Ala Phe Thr Ala

50 55 60

Thr Ser Asp Ala Ala Thr Thr Thr Ala Ser Ser Thr Ala Thr Ala Pro

65 70 75 80

Pro Gly Ser Ser Gln Ser Gln Leu Leu Ala Ala Gly Gly Arg Asp Ser

85 90 95

Asp Thr Trp Val Arg Arg Ala Arg Glu Gly Tyr Tyr Leu Gln Leu Ser

100 105 110

Leu Ala Ile Arg Leu Thr Ser Gln Ala Phe Leu Ala Gly Ala Pro Pro

115 120 125

Ala Pro Asp Leu Leu Phe Gly Cys Ser Pro Val Val Val Ala Asp His

130 135 140

His Ala Ala Ala Gly Asp Gly Ala Asp Asp Ser Glu Ala Ile Ser Tyr

145 150 155 160

Arg Leu Trp Val Asn Gly Cys Leu Ser Trp Gly Asp Lys Ile Ala His

165 170 175

Gly Phe Tyr Asn Ile Leu Gly Ile Asp Pro His Leu Trp Ala Met Cys

180 185 190

Asn Val Ala Glu Glu Gly Arg Arg Leu Pro Ser Leu Ala Ala Leu Arg

195 200 205

Ala Val Gly Ala Ser Glu Ser Ser Leu Glu Val Val Leu Val Asp Lys

210 215 220

Gly Ala Asp Ser Val Leu Leu Asp Leu Glu Arg Arg Ala Leu Asp Leu

225 230 235 240

Val Arg Ser Leu Ala Val Leu Val Ser Asp His Met Gly Gly Ala Leu

245 250 255

Arg Ser Glu Asp Gly Asp Leu Tyr Leu Arg Trp Lys Ala Val Ser Lys

260 265 270

Lys Leu Lys Lys Arg Gln Lys Cys Val Val Val Pro Ile Gly Gly Leu

275 280 285

Ser Ile Gly Phe Cys Arg His Arg Ala Ile Leu Phe Lys Val Leu Ala

290 295 300

Asp Phe Ile Gly Leu Pro Cys Arg Ile Ala Gln Gly Cys Lys Tyr Cys

305 310 315 320

Ser Ala Pro His Arg Ser Ser Cys Leu Val Lys Val Asp Ser Glu Arg

325 330 335

Arg Tyr Val Arg Glu Tyr Val Val Asp Leu Val Val Glu Pro Gly Ser

340 345 350

Ile Ser Cys Pro Asp Ser Ser Ile Asn Gly Gln Leu Leu Ser Thr Val

355 360 365

Pro Ser Pro Phe Lys Thr Ser Ser Ala Val Gly Ser Gly Asn Tyr Thr

370 375 380

Thr Pro Val Ala Ala Trp Asn Gln Ser Thr Ala Gly Glu Arg Arg Asn

385 390 395 400

Met Val Ser Ser Asn Pro Gln Cys Ser Val Ala Arg Cys Arg Val Val

405 410 415

Glu Asn Ser Ser Ala Gln Val Ala Arg Ser Lys Glu Asp Leu Val Pro

420 425 430

Lys Cys Gly Gln Ile Thr Gln Asn Gly Asn Cys Asn Gly Val Ser Val

435 440 445

Leu Gln Val Ser Met Gln Leu Lys Ala Met Asp Ile Gly Ala Glu Asn

450 455 460

Gly Asn Lys Glu Asn Val Pro Gly Ala Asp Leu Pro Lys Pro Met Ser

465 470 475 480

Ile Glu Pro Pro Phe Ala Val Asp Trp Leu Glu Ile Ser Trp Glu Glu

485 490 495

Leu Glu Leu Lys Glu Arg Val Gly Ala Gly Ser Phe Gly Thr Val Tyr

500 505 510

Arg Ala Asp Trp His Gly Ser Asp Val Ala Val Lys Val Leu Thr Asp

515 520 525

Gln Asp Val Gly Glu Ala Gln Leu Lys Glu Phe Leu Arg Glu Ile Ala

530 535 540

Ile Met Lys Arg Val Arg His Pro Asn Val Val Leu Phe Met Gly Ala

545 550 555 560

Val Thr Lys Cys Pro Gln Leu Ser Ile Val Thr Glu Tyr Leu Pro Arg

565 570 575

Gly Ser Leu Phe Arg Leu Ile Asn Lys Ala Ala Asn Gly Glu Met Leu

580 585 590

Asp Leu Lys Arg Arg Leu Arg Met Ala Leu Asp Val Ala Lys Gly Ile

595 600 605

Asn Tyr Leu His Cys Leu Asn Pro Pro Ile Val His Trp Asp Leu Lys

610 615 620

Thr Pro Asn Met Leu Val Asp Arg Asn Trp Ser Val Lys Val Gly Asp

625 630 635 640

Phe Gly Leu Ser Arg Phe Lys Ala Asn Thr Phe Ile Ser Ser Lys Ser

645 650 655

Val Ala Gly Thr Pro Glu Trp Met Ala Pro Glu Phe Leu Arg Gly Glu

660 665 670

Pro Ser Asn Glu Lys Cys Asp Val Tyr Ser Phe Gly Val Ile Leu Trp

675 680 685

Glu Leu Leu Thr Met Gln Gln Pro Trp Ser Gly Leu Gly Pro Ala Gln

690 695 700

Val Val Gly Ala Val Ala Phe Gln Asn Arg Arg Leu Pro Ile Pro Lys

705 710 715 720

Asp Thr Ser Pro Glu Leu Ala Ala Leu Val Glu Ala Cys Trp Asp Asp

725 730 735

Asp Pro Arg Gln Arg Pro Ser Phe Ser Ser Ile Val Asp Thr Leu Lys

740 745 750

Lys Leu Leu Lys Ala Leu Leu Gly Gly Ser

755 760

<210> 3

<211> 574

<212> PRT

<213> 玉米（Zea mays）

<400> 3

Met Glu Glu Gln Asn Ser Trp Leu Ile Arg Thr Lys Phe Ser His Thr

1 5 10 15

Val Tyr Thr Arg Val Asp Pro Arg Arg Val Ala Ala Val Ala Pro Val

20 25 30

Gly Lys Asp Val Val Leu Pro Phe Ala Pro Leu Ser Lys Asp Val Glu

35 40 45

Arg Lys Leu Gln Lys Ile Phe Ser Met Lys Lys Ser Ala Ser Met Pro

50 55 60

Val Asp Arg Asp Asp Glu Asp Thr Gly Thr Ala Phe Lys His Cys Ala

65 70 75 80

Ser Leu Pro Leu Val Arg Ser Ser Pro Gln Leu Asp Arg Asp Lys Val

85 90 95

Asn Lys Pro Arg Arg Ala Gly Leu Glu Val Pro Ala Ser Pro Pro Met

100 105 110

Asn Ser Glu Ser Cys Lys Thr Pro Lys Ala Arg Ser Leu Val Lys Ser

115 120 125

Pro Ser Ser Met Met Leu Leu Ser Tyr Leu Asn Lys Ala Pro Ser Asn

130 135 140

Gln Gly Tyr Ser Pro Gln Lys Ala Tyr Gly Ser Arg Pro Arg Pro Arg

145 150 155 160

Ser Lys Ser Pro Leu Pro Ser Ile Ala Pro Ser Glu Val Phe Arg Glu

165 170 175

Ala Lys Ser Thr Ser Lys Arg Phe Ala Ser Pro Pro Pro Gln Arg Arg

180 185 190

Gly Ser Glu Lys Ser Ile Tyr Gly Lys Ser Phe Ala Arg Gln Val Ser

195 200 205

Asp Ile Gly Gln Ser Pro Asp Trp Cys Ser Thr Pro Val Val Ser Gly

210 215 220

Lys His Lys Ser Gln Lys Asn Ser Ala Trp Ser Arg Lys Ser Ser Gly

225 230 235 240

Gly Arg Arg Ile Ser Ala Val Asn Pro Ala Asp Asp Arg Arg Ala Gln

245 250 255

Met Val Arg Met Asn Gln Ala Val Gln Thr Thr Phe Asp Trp Thr Leu

260 265 270

Asp Pro Ser Lys Leu Leu Val Gly His Arg Phe Ala Ser Gly Ala Cys

275 280 285

Ser Arg Leu Tyr Lys Gly Phe Tyr Asp Glu Lys Pro Val Ala Ile Lys

290 295 300

Phe Ile Arg Gln Pro Asp Asp Asp Asp Asn Gly Lys Thr Ala Ala Lys

305 310 315 320

Leu Glu Lys Gln Tyr Asn Ser Glu Ile Asn Ser Leu Ser His Leu Tyr

325 330 335

His Arg Asn Val Ile Lys Leu Val Ala Ala Tyr Lys Cys Pro Pro Val

340 345 350

Phe Tyr Ile Ile Thr Glu Phe Leu Pro Gly Gly Ser Leu Arg Ser Tyr

355 360 365

Leu Asn Asn Thr Glu Asn His Pro Ile Pro Leu Glu Lys Thr Ile Ser

370 375 380

Ile Ala Leu Asp Ile Ala Arg Gly Leu Glu Tyr Val His Ser Gln Gly

385 390 395 400

Ile Val His Arg Asp Ile Lys Pro Glu Asn Ile Leu Phe Asp Glu Asp

405 410 415

Ser Cys Val Lys Val Ala Asp Phe Gly Ile Ala Cys Glu Glu Thr Leu

420 425 430

Cys Asp Val Leu Val Glu Asp Glu Gly Thr Tyr Arg Trp Met Ala Pro

435 440 445

Glu Met Ile Lys Gln Lys Ala Tyr Asn Arg Lys Val Asp Val Tyr Ser

450 455 460

Phe Gly Leu Val Met Trp Glu Met Val Ser Gly Arg Val Pro Tyr Glu

465 470 475 480

Asn Leu Thr Pro Phe Gln Val Ala Tyr Ala Val Ala Asn Arg Asn Leu

485 490 495

Arg Pro Thr Ile Ser Pro Glu Cys Pro Ser Ala Leu Gly Pro Leu Ile

500 505 510

Glu Gln Cys Cys Ala Leu Gln Pro Asp Lys Arg Pro Asp Phe Trp Gln

515 520 525

Ile Val Lys Val Leu Glu Gln Ser His Ser Ile Leu Ser Gln Gly Gly

530 535 540

Cys Leu Asp Ala Gln Lys Ser Gly Thr Cys Gln Asp Pro Lys Lys Arg

545 550 555 560

Leu Met Gln Trp Ile Gln Lys Leu Lys Pro Thr His Gly Ala

565 570

<210> 4

<211> 598

<212> PRT

<213> 玉米（Zea mays）

<400> 4

Met Asp Asp Glu Asp Tyr Ser Trp Val Arg Arg Thr Arg Phe Ser His

1 5 10 15

Ser Val Val Arg Ser Asn Ser Gly Arg Glu Gln Phe Gly Ala Phe Val

20 25 30

Glu Gln Phe Asn Arg Gly Ala Ala Leu Arg Gln Lys Gly Ser Ala Ser

35 40 45

Gly Phe Lys Leu His Gly Leu Asn Met Glu Pro Gly Thr Arg Leu Ser

50 55 60

Thr Ser Ser Leu Pro Thr Thr Ser Ser Phe Cys Ala Gln Pro Lys Pro

65 70 75 80

Lys Pro Lys Asp Met Ser Ser Ser Asp Ala Lys Pro Gly Gln His Ala

85 90 95

Lys Ala Val Ser Asp Arg Pro Ser Ser Gln Glu Ala Ser Ala Arg Lys

100 105 110

Glu Asp Asp Ala Lys Ala Ser Asn Gly Lys Lys Gly Ile Gly Lys Leu

115 120 125

Ser Val Ala Val Pro Arg Val Pro Ala Val Gln Ser Ala Glu Val Glu

130 135 140

Ser Pro Gly Ala Leu Glu Phe Ser Phe His Pro Asp Glu Gln Ser Leu

145 150 155 160

Lys Leu Gln Arg Ala Cys Ser Ser Pro Ala Pro Phe Pro Arg Lys Lys

165 170 175

Thr Pro Gly Asp Asp Ala Leu Thr Arg Ser Ser Ser Leu Ser Val Leu

180 185 190

Gly Glu Ala Pro Lys Thr Lys Gln Arg Ala Arg Ser Pro Leu Pro Ser

195 200 205

Arg His Val Ala Glu Val Phe Gln Glu Ala Lys Ser Ala Thr Lys Arg

210 215 220

Phe Ser Thr Pro Pro Pro Pro Arg Arg Ser Ala Ser Ser Leu Glu Leu

225 230 235 240

Asn Gly Cys Pro Pro Ala Pro Val Thr Val Arg Ala Pro Gly Lys Leu

245 250 255

Lys Asn Arg Lys Glu Gly His Ala Asn Gly Arg Met Lys Val Ala Ala

260 265 270

Thr Ala Leu Glu Val Leu Glu Lys Trp Ser Val Asp Arg Ser Gln Leu

275 280 285

Leu Ile Gly His Arg Phe Ala Ser Gly Ala His Ser Arg Leu Phe His

290 295 300

Gly Ile Tyr Lys Glu Gln Pro Val Ala Val Lys Phe Ile Arg Gln Pro

305 310 315 320

Asp Asp Glu Glu Asp Ala Glu Leu Ala Ala Gln Leu Glu Lys Gln Phe

325 330 335

His Thr Glu Val Ala Thr Leu Ser Arg Leu Asn His Pro Asn Val Ile

340 345 350

Lys Leu Val Gly Ala Cys Ser Ser Pro Pro Val Phe Cys Val Ile Thr

355 360 365

Glu Phe Leu Ser Gly Gly Ser Leu Arg Ala Phe Leu His Lys Leu Asp

370 375 380

His Lys Ala Leu Pro Leu Gly Lys Ile Ile Ser Ile Ser Leu Asp Ile

385 390 395 400

Ala Arg Gly Met Ser Tyr Ile His Ser Gln Gly Val Val His Arg Asp

405 410 415

Val Lys Pro Glu Asn Ile Ile Phe Asp Asp Val Phe Cys Ala Lys Ile

420 425 430

Val Asp Phe Gly Ile Ala Cys Glu Glu Glu Tyr Cys Asp Pro Leu Ala

435 440 445

Asn Asp Thr Gly Thr Phe Arg Trp Met Ala Pro Glu Met Met Lys His

450 455 460

Lys Ala Tyr Gly Arg Lys Val Asp Val Tyr Ser Phe Gly Leu Ile Leu

465 470 475 480

Trp Glu Met Phe Ser Gly Thr Ile Pro Tyr Glu Glu Leu Asn Pro Phe

485 490 495

Gln Ala Ala Phe Ala Val Phe Asp Lys Asn Val Arg Pro Ala Ile Pro

500 505 510

Thr Ser Cys Pro Thr Pro Val Arg Leu Leu Ile Glu Gln Cys Trp Ala

515 520 525

Ser His Pro Glu Lys Arg Pro Asp Phe Ser Gln Ile Val Gln Ile Leu

530 535 540

Glu Lys Phe Lys Ser Val Leu Asp Arg Asp Gly Thr Leu Asp Asn Met

545 550 555 560

Pro Ser Ser Ile Cys Gln Glu Thr His Asp His Lys Asn Trp Leu Ala

565 570 575

His Trp Val Gln Arg Leu Lys His Ser Gln Pro Asp Leu Ser Gly Pro

580 585 590

Pro Pro Pro Lys Leu Leu

595

<210> 5

<211> 1248

<212> DNA

<213> 人工序列（Artificial Sequence）

<400> 5

atgatggcgg aaggccccaa tttcgctggc atgattggag gccatgacaa tggtggggat 60

ttctgcgaca tggcatacta ccggaagctc ggtgagggct caaacatgtc ggtagacaac 120

cttaatagca tgcagaccag cacacatggt ggctccattg caatgtctgt ggacaacagc 180

agcgtagggt cctgtgactc ccatactagg atgctcaatc accctggcct caagggacct 240

gtcgttggca attactcggt cggcgggcac agcattttcc gtcatggacg ggtgtctcac 300

gccttgagcg acgatgcgct ggcacaggcg ttgatggacc caaggtaccc gactgagaca 360

ctcaaggatt atgaggagtg gacgattgat ttagctaagc tccacatggg aatgcccttt 420

gcacagggcg cctttggaaa gctctacagg ggtacctaca acggtgagga tgttgccatt 480

aagcttttgg agaggccaga ggcagatccg gagagagccg ggttaatgga acagcagttt 540

gtgcaagaag ttatgatgct tgcaaccttg aggcaccaga atattgttaa atttattgga 600

gcatgcagga agccagtggt ttggtgcatt gttacggagt atgccaaggg cggatcagtt 660

aggcagtttc tggcaaagag gcagaatagg tcagttccac taaaactggc ggttaagcaa 720

gcactggatg ttgcaagggg gatggcgtat gttcatggtc ttggcttcat tcatagggat 780

cttaagtcag ataacctctt gatatctggt gataaatcta tcaagatagc tgactttgga 840

gtagctcgga ttgaagtaaa aactgagggg atgacacctg aaacgggaac ctatcgttgg 900

atggcaccag agatgattca gcacaggcca tatgaccaaa aagttgatgt ctacagcttt 960

ggcattgtgc tgtgggagct cataactggc atgctccctt ttgctaatat gacagcagtg 1020

caggctgctt tcgctgtggt gaacaagggt gtccgcccag ctatacccca ggactgcctg 1080

cccacccttg ctgagatcat gaccaggtgc tgggatccaa atcctgatgt ccgtccgcca 1140

ttcactgaag ttgtgaggat gctggagcat gctgagatgg agatcctgag cactgtccgc 1200

aaggcccgat ttcggtgttg catgtcccaa ccgatgacta ccgactga 1248

<210> 6

<211> 2289

<212> DNA

<213> 人工序列（Artificial Sequence）

<400> 6

atgccgcacc gccgccgagc ccttaacccg acgctgcccc cgccacctcc cgccgccacc 60

gcgttccacc tcggcgggga cgaggcgcgg ctgccgctcc tcgcggacta cgcgctgctc 120

caccagcccg ccgcctccgc cgtcgacgcg ccggcgtcgt ccgagtggag cgccgggagc 180

gccttcaccg ccacctccga cgcggccacc accaccgcct cctccaccgc cacggcgccg 240

ccgggctcct cccagtccca gctgctggcc gccggcggta gggacagcga cacgtgggtc 300

cgccgcgcca gggagggcta ctacctccag ctgtccctcg ccatccgcct cacctcgcag 360

gccttcctcg ccggcgctcc tcccgcgccc gacctcctct tcggctgcag ccccgtcgtc 420

gtcgccgacc accacgccgc tgctggcgac ggcgcggatg attcggaggc catctcctac 480

cggctctggg tgaacgggtg cctgtcgtgg ggcgacaaga tcgcgcacgg gttctacaac 540

atcctgggca tcgacccgca cctgtgggcc atgtgcaacg tcgcggagga gggccgccgg 600

ctgccgtcgc tggcggcgct gcgggcggtg ggcgccagcg agtcctcgct ggaggtggtg 660

ctcgtcgaca agggcgccga ctcggtgctc ctcgacctcg agcgccgcgc gctcgacctc 720

gtccgcagcc tcgccgtcct cgtctccgac cacatgggag gtgcgttgcg atcggaggat 780

ggggacctgt acctgcggtg gaaggcggtg agcaagaagc tgaagaagag gcagaagtgc 840

gtcgtcgtcc ccattggcgg cctgtccata ggcttctgcc ggcaccgtgc cattcttttc 900

aaggtacttg cagacttcat cggcctgcca tgccggattg cgcaaggttg caagtactgc 960

tctgcgcctc accgatcatc ttgccttgtc aaagttgaca gtgagagaag atacgtaagg 1020

gaatacgtcg tggaccttgt agttgagccg gggagcatca gctgcccgga ctcatccatc 1080

aacggccagc tgctgtccac cgtgccttca cctttcaaga cttcgtccgc agtcggctca 1140

gggaactaca caacaccagt cgcagcctgg aaccaatcaa cagccggtga acgtcgcaac 1200

atggtatcat cgaatcccca gtgctcagtt gctaggtgcc gcgttgtgga gaacagctct 1260

gctcaggtag ccagaagcaa agaagacttg gtgccgaagt gtggacagat cacacagaat 1320

ggaaactgta atggcgtatc agtgttacaa gtgtcgatgc agttgaaggc aatggacatc 1380

ggtgctgaga acggcaacaa ggagaacgtc cctggtgctg atcttccgaa acccatgagc 1440

attgagccgc cttttgccgt agattggctg gagatatcat gggaggagct cgagctcaag 1500

gaacgcgtgg gcgccggttc tttcggcacg gtttatcgcg cagactggca tggttcagat 1560

gttgcagtaa aggtgcttac agaccaggat gttggcgaag cccagctgaa ggaattccta 1620

agagagattg ctattatgaa acgagtccgc catccgaatg tggtattgtt catgggtgcg 1680

gtgacaaaat gcccacaatt gtcgatagtg acagagtatt tgcccagagg gagcctcttc 1740

cgactcatca acaaggcagc taatggagag atgctggatc tcaagcgtcg tttgcgcatg 1800

gcactagatg ttgcaaaagg catcaactat ctccactgcc tgaatcctcc tattgtgcat 1860

tgggatctca agacaccaaa catgctggtc gaccggaact ggtccgtgaa ggtaggtgac 1920

tttggcctgt ccagatttaa ggcaaacacc ttcatatcat ccaaatcagt tgctggaaca 1980

ccagaatgga tggcgcctga gtttctgcgc ggcgagccat cgaacgagaa gtgcgatgtt 2040

tacagcttcg gcgtcatctt gtgggagctc ctgacgatgc agcaaccatg gagtggccta 2100

ggccctgcgc aggtagtagg agctgtagcg tttcagaaca gaaggcttcc gattccgaaa 2160

gataccagtc cagaacttgc tgctctagtg gaagcctgct gggatgacga tccaaggcag 2220

cggccttcgt tttcgagcat tgtggatacg ctgaagaagt tactgaaggc tcttcttgga 2280

ggttcatga 2289

<210> 7

<211> 1725

<212> DNA

<213> 人工序列（Artificial Sequence）

<400> 7

atggaggagc agaactcatg gcttattagg accaagttct cccatactgt ctacactaga 60

gtggatccac gaagagtagc agctgttgct ccggtgggca aagatgtggt gctgcctttt 120

gctccgctta gtaaggatgt tgagcggaag ctgcagaaaa ttttcagtat gaagaagtct 180

gcatcgatgc ctgttgatcg ggatgatgaa gacacaggga ctgcattcaa gcactgcgct 240

agcttgccgc tagtccggtc ctcgcctcag cttgataggg acaaggtcaa caagcccagg 300

agggcgggcc tggaggttcc tgcaagcccc ccgatgaact cagagagttg caagacacca 360

aaggcaagga gcctggtcaa gagcccaagt tcgatgatgc tcctgagcta cttgaacaag 420

gcaccatcaa accaaggcta cagtccgcaa aaggcttatg gatctcggcc cagaccgaga 480

tcaaagtccc cccttcccag tatcgcgcct tcggaagtgt tcagggaagc gaagtctacc 540

agcaagaggt ttgcaagccc tcctccacag cgaagaggat ctgaaaagag tatctatggc 600

aaatcgtttg ctagacaggt gtcggatatt ggtcagagtc ctgattggtg ttcaactcca 660

gtggtatctg gtaagcacaa gtctcaaaag aatagtgctt ggtcaaggaa atccagcggt 720

ggaaggagga ttagcgcagt aaaccctgcg gatgatcgta gggcgcagat ggttagaatg 780

aatcaggcgg tgcagacgac gttcgattgg acgctcgatc catccaagct gcttgttggg 840

cacaggtttg ctagtggagc gtgtagccgg ctgtacaagg ggttctatga tgagaagcca 900

gttgcaatta aatttatccg ccaacctgat gatgacgaca atgggaagac ggctgcaaag 960

cttgagaagc agtataacag tgagatcaat tcgttgtctc acctgtacca taggaacgtg 1020

atcaagcttg tagcagccta caaatgccca ccggtttttt acatcatcac cgagttcctt 1080

cccggaggct cgttaaggtc atacctaaac aacacggaga accacccaat ccctctggag 1140

aagaccatat ccatcgctct cgacatcgct cgaggtctgg agtacgtaca ctctcaaggg 1200

atcgttcacc gcgacatcaa gcccgagaac atcctcttcg acgaggactc gtgcgtgaag 1260

gtcgctgatt tcggtatcgc ctgcgaggag accttgtgtg acgtgcttgt ggaggatgaa 1320

ggcacctaca ggtggatggc gcctgagatg atcaagcaga aggcgtacaa ccggaaggtg 1380

gacgtctaca gcttcgggct ggtcatgtgg gagatggtgt ccggtagagt tccttacgag 1440

aacctgaccc ctttccaggt ggcttacgca gtggccaaca ggaacttgag gccaacgatt 1500

tctccagaat gcccatcggc cctcgggccc ctgatcgagc agtgctgcgc cttgcagcct 1560

gacaagaggc ccgacttctg gcagatcgtc aaagtcctgg agcagtccca ctccatcctc 1620

tcgcagggtg gctgcctcga cgcgcagaag agcggcacct gccaggaccc caagaagcgg 1680

ctcatgcagt ggatccagaa gctgaaacca acgcatggcg cctga 1725

<210> 8

<211> 1797

<212> DNA

<213> 人工序列（Artificial Sequence）

<400> 8

atggacgacg aggattactc gtgggtgcgg cggacgcgct tctcccactc cgtcgtccgc 60

tccaattccg ggagggagca gttcggcgca ttcgtcgagc agttcaaccg tggggccgcg 120

ctcaggcaga agggctccgc ctcggggttc aagctccatg gcctcaacat ggagccaggg 180

acgaggttgt ccacatcgtc ccttccgacg acgagctcgt tctgcgccca gcccaagccc 240

aagcctaagg acatgtcatc ttcagacgcc aagccggggc agcacgccaa ggcagtcagc 300

gatcgcccgt cgtcgcaaga ggcatcggcg aggaaggagg acgatgccaa ggcttcaaac 360

ggaaagaaag gaattggcaa actcagcgtg gccgtacctc gggtacccgc ggttcagagc 420

gcggaggttg agagcccggg agcactcgag ttctccttcc accctgacga gcagagcctg 480

aagctgcaga gagcgtgctc aagccctgcc ccgttcccgc ggaagaaaac gcccggcgat 540

gatgccctca cgcgcagctc gtcgctaagt gtgctcggcg aggcgcccaa gacgaagcag 600

agggcgaggt ctcccctccc gtctcgccac gttgctgaag tgtttcaaga ggccaaatca 660

gccaccaaga ggttctccac tccgccgccg ccccggagat ccgcgtcttc tctagagctg 720

aatggttgtc ctccagcgcc ggtgacggtg agggcaccgg gcaagctgaa gaataggaag 780

gagggccatg ccaacgggag gatgaaggtt gctgcaactg cactggaggt actcgagaaa 840

tggtccgtcg atcgctccca gctgctcatt gggcacagat tcgcgtccgg ggctcacagc 900

cggttgttcc acggaatcta caaagagcag cctgttgctg tcaagttcat cagacagcct 960

gatgatgagg aagatgcaga gctggctgct cagcttgaga agcagttcca caccgaggtc 1020

gccactctgt cacgcctcaa tcatcctaat gtcatcaagc tggttggagc atgcagcagt 1080

ccaccagtat tctgtgtcat cactgaattc ctttctggtg gttctctgcg agcgtttttg 1140

cacaagttgg atcacaaagc tcttcctcta ggcaagatca tctcaattag cttggacatc 1200

gcacgcggca tgtcatacat tcactcgcag ggagttgttc atcgtgatgt gaagccagag 1260

aacatcatat tcgatgatgt attctgtgca aagattgttg attttggaat agcttgtgaa 1320

gaagagtact gtgaccctct ggcaaacgac actgggacat ttagatggat ggctccagag 1380

atgatgaagc acaaagcgta cggtcgaaaa gtcgacgtct acagctttgg ccttattttg 1440

tgggaaatgt tttctggaac gataccatat gaagagctga acccatttca agcagctttc 1500

gctgtttttg acaagaatgt gaggccggcc attcctacta gctgcccaac accagtacgt 1560

cttctaattg agcaatgttg ggcctcgcat ccggagaaga ggcctgactt ctctcaaata 1620

gttcagatac tggagaagtt taagagtgtt cttgacagag atggcacact cgacaatatg 1680

ccaagctcga tctgtcagga gactcatgat cacaagaact ggcttgctca ttgggtccaa 1740

aggctcaagc atagccagcc tgatctctct gggcctcctc cgccaaaact gttgtaa 1797

Claims

1.蛋白质的下述任一种应用，其特征在于：所述蛋白质为蛋白质A、蛋白质B、蛋白质C或蛋白质D：

P1、所述蛋白质在调控植物抗旱性中的应用，

P2、所述蛋白质在制备降低植物抗旱性的产品中的应用，

P3、所述蛋白质在植物育种中的应用；

所述蛋白质A为如下A1)、A2)或A3)的蛋白质：

A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质；

A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质；

所述蛋白质B为如下B1)、B2)或B3)的蛋白质：

B1)氨基酸序列是序列表中序列2的蛋白质；

B3)在B1)或B2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质；

所述蛋白质C为如下C1)、C2)或C3)的蛋白质：

C1)氨基酸序列是序列表中序列3的蛋白质；

C3)在C1)或C2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质；

所述蛋白质D为如下D1)、D2)或D3)的蛋白质：

D1)氨基酸序列是序列表中序列4的蛋白质；

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述植物为玉米。

3.与权利要求1中所述的蛋白质相关的生物材料的下述任一种应用：

Q1、所述生物材料在调控植物抗旱性中的应用，

Q2、所述生物材料在制备降低植物抗旱性的产品中的应用，

Q3、所述生物材料在植物育种中的应用；

所述生物材料为下述E1)至E11)中的任一种：

E1)编码权利要求1中所述蛋白质的核酸分子；

E2)含有E1)所述核酸分子的表达盒；

E8)促进或提高权利要求1中所述蛋白质的基因表达的核酸分子；

E10)抑制或降低权利要求1中所述蛋白质的基因表达的核酸分子；

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：E1)所述核酸分子为如下a1)、b1)、c1)或d1)；

所述a1)为a1-1)、a1-2)或a1-3)所示的所述蛋白质的编码基因：

a1-2)核苷酸是序列表中序列5的cDNA分子或DNA分子；

a1-3)与a1-2)限定的cDNA或DNA分子杂交且编码具有相同功能的蛋白质的cDNA分子或DNA分子；

所述b1)为b1-1)、b1-2)或b1-3)所示的所述蛋白质的编码基因：

b1-2)核苷酸是序列表中序列6的cDNA分子或DNA分子；

b1-3)与b1-2)限定的cDNA或DNA分子杂交且编码具有相同功能的蛋白质的cDNA分子或DNA分子；

所述c1)为c1-1)、c1-2)或c1-3)所示的所述蛋白质的编码基因：

c1-2)核苷酸是序列表中序列7的cDNA分子或DNA分子；

c1-3)与c1-2)限定的cDNA或DNA分子杂交且编码具有相同功能的蛋白质的cDNA分子或DNA分子；

所述d1)为d1-1)、d1-2)或d1-3)所示的所述蛋白质的编码基因：

d1-2)核苷酸是序列表中序列8的cDNA分子或DNA分子；

5.调控基因表达的物质的下述任一种应用：

F1、调控基因表达的物质在调控植物抗旱性中的应用，

F3、调控基因表达的物质在植物育种中的应用。

6.根据权利要求1-5中任一权利要求所述的应用，其特征在于：所述调控植物抗旱性为提高植物对干旱的敏感性。

7.一种培育干旱敏感植物的方法，包括提高目的植物中权利要求1中所述蛋白质生物表达量或/和权利要求4中所述核酸分子的表达量，得到干旱敏感的植物；所述干旱敏感植物对干旱的敏感性高于所述目的植物。

8.包含权利要求1所述蛋白质和/或权利要求3或4所述的生物材料和/或权利要求5所述调控基因表达的物质的下述任意一种产品：

G1、调控植物抗旱性的产品；

G2、降低植物抗旱性的产品；

G3、提高植物干旱敏感性的产品。

9.根据权利要求3-6中任一权利要求所述的应用或权利要求7中所述的方法或权利要求8所述的产品，其特征在于：所述植物和/或所述目的植物为玉米。

10.权利要求1中所述的蛋白质或权利要求3或4中所述的生物材料。