CN114641497A - 抗bdca-2抗体 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及与BDCA‑2(CLEC4C)结合的抗原结合分子，特别是抗体、其片段和变体，以及所述抗原结合分子在治疗和/或预防炎性病症和免疫病症例如自身免疫疾病中的用途。
Description
技术领域
本发明涉及与BDCA-2(CLEC4C)结合的抗原结合分子，特别是抗体、其片段和变体，以及所述抗原结合分子在治疗和/或预防炎性病症和免疫病症例如自身免疫疾病中的用途。
背景技术
在保持感知微生物核酸的能力的同时避免识别自身DNA和自身RNA是至关重要的。先天免疫系统似乎已经定制了几种不同的机制来区分病原体衍生的外源核酸和宿主衍生的自身核酸。然而，有相当多的新证据表明，尽管先天免疫系统发展出不同的机制来阻止自身识别，但在某些情况下还是会发生自身核酸的Toll样受体(TLR)识别。慢性活化的浆细胞样树突状细胞(pDC)和它们响应自身核酸产生的IFN-α是一些自身免疫疾病的发病机制中的促成因素，例如硬皮病(SSc)、系统性红斑狼疮(SLE)和干燥综合征银屑病(Bekic z，etal.Ann Rheum Dis 2016；75：1567-73；Fei T，et al.Sci China Life Sci.2010；53：172-182；van Bon L，et al.Current Opinion in Rheumatology 2011；23：505-510；Banchereau J and Pascual V.Immunity 2006；25：383392)。
浆细胞样树突状细胞(pDC)是骨髓衍生的细胞，专门分泌I型IFN(Colonna M，etal.Nat.Immunol.2004；5：1219-1226；Gilliet M，et al.Nat.Rev.Immunol.2008；8：594-606)。pDC主要发现于外周血以及初级和次级淋巴器官中。pDC迅速检测被内吞并递送至含有TLR7和TLR9的内体的病毒核酸。这些受体的参与导致I型IFN的立即释放，为病毒感染提供了非常早期的防御(Swiecki M and Colonna M.Immunol.Rev.2010；234：142-162)。pDC还分泌I型IFN，以响应在细胞坏死和/或凋亡过程中释放的或与抗核自身抗体结合的内源性核酸。
大量证据表明自身核酸识别参与炎性疾病和自身免疫疾病。特别是TLR对自身免疫的贡献已在多种疾病模型中得到强调。最好的例子是TLR9和TLR7通过免疫复合物积累自身DNA/RNA后在狼疮中所起的作用(Barrat FJ et al.J.Exp.Med.2005,202：1131-1139；Hagberg N and Ronnblom L Scand.J.Immunol.2015,82：199-207)。另一个例子是自身抗菌肽在促进自身免疫中的重要性(Lande R et al.Nature 2007，449；564-569)。已经表明，单独的TLR过表达足以在比如野生型动物中诱导自身免疫，如TLR7或TLR8所示(Deane，JAet al.Immunity 2007；27：801-810；Guiducci C，et al.J.Exp.Med.2013；210：2903-2919)。
SSc是一种多系统的纤维化疾病，其中血管病变、自身免疫和炎症导致多种改变生命和威胁生命的临床表现。SSc的风湿性疾病的发病率和死亡率最高，10年死亡率为23％至45％(Mayes MD，et al.Arthritis Rheum.2003；48：2246-2255)。女性多发，为约4：1，一般发病年龄为35岁至55岁。SSc的病理生理学尚不完全清楚，但大量证据表明免疫紊乱、内皮功能障碍和促纤维化机制之间存在相互影响。
证据表明了pDC在SSc中的作用。pDC渗入SSc患者的皮肤并被慢性激活，导致IFNα和CXCL4的分泌，这两者都是该疾病的标志。Ah Kioon等人(Sci.Transl.Med.2018；10：eaam8458)证明了CXCL4的分泌是由于SSc患者的pDC上的TLR8异常存在，这在健康供体中没有看到，并且CXCL4主要通过pDC增强TLR8和TLR9诱导的IFN产生来发挥作用。SSC中IFN诱导趋化因子的其他研究(Liu X，et al.Arthritis Rheum.2013；65：226-35)和关于CXCL4作为SSC生物标志物的报告(van Bon L，et al.N Engl J Med.2014；370：433-43)，越来越多的兴趣建立在IFN在SSc进展和早期阶段的作用上。最近的另一篇论文表明，在临床纤维化发作之前存在IFN特征(以前与活动性SSc相关)(Brkic Z et al.Ann Rheum Dis.2016；75：1567-73)。此外，体内数据表明，消耗pDC可以预防硬皮病小鼠模型中的疾病，并且可以使已确诊疾病小鼠的纤维化逆转(Ah Kioon et al.Sci.Transl.Med.2018；10：eaam8458)。
pDC表达抑制I型IFN分泌的多种受体，从而预防免疫监视。这些受体之一是CLEC4C，也称为血树突细胞抗原2(Blood dendritic cell antigen-2，BDCA-2)和CD303(Dzionek A，et al.J.Exp.Med.2001；194：1823-1834)。CLEC4C是一种II型跨膜糖蛋白，属于C型凝集素(CTL)超家族(Crocker PR et al.Nat Rev Immunol.2007；7：255-66)。BDCA-2是对人pDC最特异的标记，仅在灵长类动物中表达。BDCA-2由单个的胞外碳水化合物识别结构域、跨膜区和没有明显信号传导基序的短胞质结构域组成。BDCA-2通过相关的跨膜衔接子FcεRγ(募集蛋白质酪氨酸激酶Syk)传递细胞内信号，从而诱导蛋白质酪氨酸磷酸化和钙动员(Cao W，et al.PLoS Biol.2007；5：e248)。尽管它促进其他淋巴和骨髓细胞的细胞活化，但Fc∈Rγ-Syk信号传导通路干扰TLR7和TLR9诱导的pDC活化，抑制I型IFN分泌(Dzionek A，et al.J.Exp.Med.2001；194：1823 1834)。
pDC在外周血或病变部位被异常激活，并在自身免疫疾病如SLE、SSc、多发性肌炎和皮肌炎、银屑病、干燥综合征、类风湿性关节炎、格雷夫斯病和桥本氏病中产生大量IFNα以及其他炎性细胞因子和趋化因子(Li et al.Front Immunol.2017；8：1268；Eloranta etal.Arthritis Rheum.2013；65：853-863)。
发明内容
在本发明的第一方面，提供了一种抗原结合分子或其片段或变体，其包含含有VHCDR3的重链可变区和/或含有VLCDR3的轻链可变区，其中该抗原结合分子与BDCA-2(CLEC4C)结合。
在本发明的第二方面，提供了一种抗原结合分子或其片段或变体，其包含重链可变区和/或轻链可变区，每个可变区包含3个CDR区，其中该抗原结合分子与BDCA-2(CLEC4C)结合。
在本发明的第三方面，提供了一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子具有小于约2nM的对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)。在一些实施方式中，该抗原结合分子具有小于约0.01nM的对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)。
在本发明的第四方面，提供了一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子具有小于约2nM的抑制IFN分泌的半数最大抑制浓度(IC50)。在一些实施方式中，该抗原结合分子具有小于约0.1nM的抑制IFN分泌的半数最大抑制浓度(IC50)。
在本发明的第五方面，提供了一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子具有小于约20nM的抑制IFN分泌的IC90。在一些实施方式中，该抗原结合分子具有小于约5nM的抑制IFN分泌的IC90。
在本发明的第六方面，提供了一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子包含：包含SEQ ID NO48、28、8、38、58、68和78中任一个的氨基酸序列的VHCDR3；和/或包含SEQ ID NO34、24、44、4、14、54、64和74中任一个的氨基酸序列的VLCDR3。
在本发明的第七方面，提供了一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子包含：包含SEQ ID NO46、49、26、29、6、9、16、19、36、39、56、59、66、69、76和79中任一个的氨基酸序列的VHCDR1；包含SEQ ID NO 47、50、27、30、7、10、17、20、37、40、57、60、67、70、77和80中任一个的氨基酸序列的VHCDR2；和包含SEQ ID NO 48、28、8、18、38、58、68和78中任一个的氨基酸序列的VHCDR3；和/或包含SEQ ID NO 32、22、42、2、12、52、62和72中任一个的氨基酸序列的VLCDR1；包含SEQ ID NO 33、23、43、3、13、53、63和73中任一个的氨基酸序列的VLCDR2；和包含SEQ ID NO 34、24、44、4、14、54、64和74中任一个的氨基酸序列的VLCDR3。
在本发明的第八方面，提供了一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子包含：重链可变区，该重链可变区具有选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ IDNO：45、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：55、SEQ IDNO：65和SEQ ID NO：75；和/或轻链可变区，该轻链可变区具有选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：41、SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ IDNO：51、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：71。
在本发明的第九方面，提供了一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子是与BDCA-2(CLEC4C)特异性结合的抗体并且选自以下组成的组：3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_vat5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06、28B01。本发明还提供了衍生自所述抗体的片段和变体。
在本发明的另一方面，提供了一种抗原结合分子或其片段或变体，其与BDCA-2(CLEC4C)结合并与本发明的第一至第九方面中任一个的抗原结合分子竞争结合BDCA-2(CLEC4C)。
在本发明的另一方面，提供了一种与BDCA-2(CLEC4C)的表位特异性结合的抗原结合分子，该表位被本发明第一至第九方面中任一个的抗原结合分子结合。
在本发明的另一方面，提供了一种与BDCA-2(CLEC4C)特异性结合并抑制BDCA-2(CLEC4C)与本发明第一至第九方面中任一个的抗原结合分子结合的抗原结合分子。
在本发明的另一方面，提供了一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其包含对本发明第一至第九方面任一个的抗原结合分子的1至10个、1至5个或1至2个氨基酸替换。
在本发明的另一方面，提供了一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子是本发明的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子的人源化或去免疫衍生物。
在本发明的另一方面，提供了一种本发明的抗原结合分子或抗体的亲和力成熟突变体。
在本发明的另一方面，提供了一种药物组合物，该药物组合物包含本发明的抗原结合分子或其片段、变体或亲和力成熟突变体。
在本发明的另一方面，提供了本发明的抗原结合分子或药物组合物在医学中的用途。
在另一个方面，提供了本发明的抗原结合分子或药物组合物在用于预防和/或治疗炎性病症或疾病中的用途。
在另一方面，提供了本发明的抗原结合分子或药物组合物在制备用于治疗炎性病症或疾病的药物中的用途。
在另一方面，提供了一种治疗或预防有需要的对象的炎性病症或疾病的方法，包括向对象施用治疗有效量的本发明的抗原结合分子或药物组合物。
还提供了编码本发明的抗原结合分子的核酸。还提供了包含本发明核酸的运载体或质粒。本发明还提供了包含本发明的核酸、运载体或质粒的宿主细胞。
本发明还提供了产生表达抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子的细胞的方法，包括用本发明的质粒或运载体转染所述细胞。本发明还提供了产生抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子的方法，包括在细胞内表达质粒或运载体的编码核酸序列的条件下在细胞培养基中培养本发明的宿主细胞，并可选地从细胞上清液收集抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子。
本发明还提供了包含抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或本发明其他方面的试剂盒，该试剂盒可选地还包含使用说明。
附图说明
图1.与人和食蟹猴细胞表达的BDCA-2结合的嵌合型mAb。针对人或食蟹猴表达的BDCA-2测试了5ug/ml纯化的mAb。使用的阳性对照是抗BDCA-2mAb、AC144(MiltenyiBiotec，目录号130-090-690)和BIIB059(专利WO2014093396)，阴性对照是缓冲液(无Ab)；
图2.与浆细胞样树突状细胞结合的嵌合型mAb。通过流式细胞术测试纯化的mAb(10ug/ml)与纯化的pDC结合。使用的阳性对照是抗BDCA-2mAb、AC144(Miltenyi Biotech，目录号130-090-690)和BIIB059(专利WO2014093396)，阴性对照是缓冲液(无Ab)；
图3A.嵌合抗BDCA-2mAb抑制来自ODN刺激的pDC的IFNα的作用。测试了1ug/ml或0.1ug/ml的mAb抑制来自人纯化pDC的ODN诱导的IFNα。使用的阳性抗BDCA-2mAb对照是：AC144(Miltenyi Biotec，目录号130-090-690)和BIIB059(专利WO2014093396)，阴性对照是缓冲液(无Ab)；
图3B.嵌合抗BDCA-2mAb抑制来自TLR9(ODN，1uM)刺激的PBMC的IFNα的作用。测试了10ug/ml、lug/ml或0.1ug/ml的mAb抑制来自人PBMC(500K/孔)的ODN诱导的IFNα。阴性对照是缓冲液(对照)和10ug/ml、1ug/ml或0.1ug/ml的hIgG1；
图3C：嵌合抗BDCA-2mAb抑制来自TLR8(ORN，luM)刺激的PBMC的IFNα的作用。测试了10ug/ml、1ug/ml或0.1ug/ml的mAb抑制来自人PBMC(500K/孔)的ORN诱导的IFNα。阴性对照是缓冲液(对照)和10ug/ml、1ug/ml或0.1ug/ml的hIgG1；
图3D：嵌合抗BDCA-2mAb抑制来自TLR7(咪喹莫特，1uM)刺激的PBMC的IFNα的作用。测试了10ug/ml、1ug/ml或0.1ug/ml的mAb抑制来自人PBMC(500K/孔)的咪喹莫特诱导的IFNα。阴性对照是缓冲液(对照)和10ug/ml、1ug/ml或0.1ug/ml的hIgG1；
图4A.嵌合抗BDCA-2mAb(10ug/ml)抑制来自ODN刺激的健康pDC的细胞内IFNα和TNFα的作用。阳性对照是抗BDCA-2mAb BIIB059(专利WO2014093396)，阴性对照是缓冲液(无Ab)；
图4B.嵌合抗BDCA-2mAb(10ug/ml)抑制来自ODN刺激的健康pDC的TNFα分泌的作用。阳性对照是抗BDCA-2mAb BIIB059(专利WO2014093396)，阴性对照是缓冲液(无Ab)；
图5.通过流式细胞术将人源化3E5和28B1变体mAb与pDC结合；
图6A.人源化28B1抗BDCA-2mAb抑制来自ODN刺激的PBMC的IFNα分泌的作用。阳性对照是抗BDCA-2mAb BIIB059(专利WO2014093396)，阴性对照是缓冲液(无Ab)；
图6B.人源化3E5抗BDCA-2mAb抑制来自ODN刺激的PBMC的IFNα分泌的作用。阳性对照是抗BDCA-2mAb BIIB059(专利WO2014093396)，阴性对照是缓冲液(无Ab)；
图7A和7B.BDCA2的嵌合型mAb 3E5抑制ODN刺激的pDC转录组激活。图7A示出了三个独立的有和没有ODN刺激的人pDC供体(Lineage-HLA-DR+CD123+CD304+)的全局RNA-seq分析，以及差异表达基因(DEG)的通路分析。图7B示出了3E5对ODN刺激的pDC DEG的抑制，其表现出与无刺激的pDC相似的表达谱；
图8A、8B和8C.器官型3D皮肤培养和嵌合抗BDCA-2mAb 3E5的作用。图8A概述了培养技术和气液界面(ALI)。图8B：苏木精和伊红(H&E)染色显示了体内类似上皮的发育。图8C示出了上皮内ODN刺激的pDC上清液相对于静息pDC上清液和嵌合抗BDCA-2mAb 3E5抑制的上皮内表达上调的27个IFN刺激基因；
图9A和9B.人pDC激活的异种移植小鼠模型。嵌合抗BDCA-2mAb 28B1和3E5对小鼠干扰素基因特征的影响。将正常的人原发性pDC尾静脉注射到NOD-SCID小鼠中，并用具有和不具有嵌合抗BDCA-2mAb 3E5或28B1或人IgG(5mg/kg)的Aldara乳膏处理背部皮肤。来自一式三份实验的总RNA用于生成cDNA，并对I型干扰素反应期间通常上调的78个基因进行了qRT-PCR分析。将来自Qiagen面板的IGS针对hIgG条件与对照(仅Aldara/咪喹莫特)中的差异表达进行排列。选择10个差异表达最大的基因进行分析；
图10A、10B、10C、10D和10E.三周pDC和博来霉素诱导的皮肤纤维化模型。从第0天开始，每隔一天将博来霉素(Bleo)或PBS(对照，100μl)皮下(s.c)注射到NOD-SCID小鼠剃背上的单个位置，持续3周。接受人PDc(2.5×105个)的小鼠在第0、7和14天静脉(i.v)注射。从第-1天开始，每5天注射一次3E5 mAb(var_6)或人IgG(2.5mg/kg，i.p.)(n＝每只小鼠i.p.注射5次)(施用时间表显示在图10E中)。用苏木精和伊红(H&E，图10A)或马松三色(MT)染色剂(图10A)对来自经处理的小鼠的福尔马林固定、石蜡包埋的皮肤组织进行染色。处理组中的表皮和真皮皮肤厚度显示在图10B和10C中。皮肤穿孔活检中相对于总蛋白的总胶原显示在图10D中。统计显著性(非配对t检验)；P＜0.05*、0.01**、0.001***；
图11A和11B.亲本3E5序列和4个人源化/去免疫变体1至4的比对；
图12A、12B、12C和12D.亲本3E5重链和轻链可变序列和4个人源化/去免疫变体1至4(SEQ ID NO1、11、21、31、41、5、15、25、35和45)的序列，一起构成16个基于亲本3E5抗体的变体抗体。图A和B根据Kabat方案识别了6个CDR。图C和D根据Chothia方案识别了6个CDR。这些图还提供了与3E5亲本抗体及其16个变体(SEQ ID NO：1至50)相关的每个序列(重、轻、Kabat和Chothia识别的CDR)的SEQ ID NO。如果这些图的序列与随附的序列表或本说明书其他地方的序列之间存在任何差异，则以这些图的序列为准；
图13.胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、ASP-N、弹性蛋白酶和嗜热菌蛋白酶肽的重叠作图设计，使用蛋白水解确定表位。结合胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶和嗜热菌蛋白酶蛋白水解的肽，100％的序列被覆盖。氨基酸编号是指BDCA-2的胞外结构域，Q8WTT0的氨基酸45至213，其中图13中的氨基酸1是Q8WTTO中的氨基酸45。
具体实施方式
如本文所用，“抗原结合分子”是对彼此具有结合特异性的一对分子中的成员。抗原结合对的成员可以是天然衍生的或全部或部分合成产生的。该对分子的一个成员在其表面上具有这样的区域：该区域可以是突起或空腔，与该对分子的另一个成员的特定空间和极性组织特异性结合，并因此与其互补。因此，该对的成员具有彼此特异性结合的特性。抗原结合对的类型的例子有抗原-抗体、生物素-亲和素、激素-激素受体、受体-配体、以及酶-底物。本发明一般涉及抗原-抗体型相互作用。本发明中使用的抗原结合分子与BDCA-2(CLEC4C)或BDCA-2(CLEC4C)的表位特异性结合。抗原结合分子对BDCA-2(CLEC4C)或BDCA-2(CLEC4C)的表位的结合亲和力可以使用解离常数(KD)来测量。抗原结合分子对BDCA-2(CLEC4C)或BDCA-2(CLEC4C)的表位的结合亲和力可以使用缔合常数(Ka)来测量。抗原结合分子对由本发明的抗原结合分子结合的BDCA-2(CLEC4C)表位的KD值将低于该抗原结合分子对BDCA-2(CLEC4C)的替换表位或非BDCA-2(CLEC4C)表位的KD值。
与BDCA-2(CLEC4C)结合的抗原结合分子包括抗BDCA-2(CLEC4C)抗体及其抗原结合片段。本发明中使用的抗原结合分子通常是抗体。
如本文所用，术语“抗体”是指免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性部分，即含有特异性结合抗原的抗原结合位点的分子，无论是天然的还是部分或全部合成产生的。该术语还涵盖具有结合结构域的任何多肽或蛋白质，该结合结构域是抗体结合结构域或与抗体结合结构域同源。抗体可以是多克隆的或单克隆的。这些抗体可来自天然来源，或者它们可以部分或全部合成产生。抗体是通常包含两个相同重链和两个相同轻链(比重链小)的多肽。哺乳动物中有两种类型的轻链，称为lambda(λ)和kappa(κ)。每个重链和每个轻链都由可变区和恒定区组成。重链可变区称为VH区，轻链可变区称为VL区。对于kappa轻链，VL区也可以称为VK区。轻链和重链的每个可变区包括三个互补决定区(CDR)：CDR1、CDR2和CDR3。它们分别被命名为VLCDR1、VLCDR2、VLCDR3、VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3。抗体的实例是免疫球蛋白同种型(例如，IgG、IgE、IgM、IgD和IgA)及其同种型亚型；包含抗原结合结构域如Fab、F(ab’)2、Fv、scFv、dAb、Fd的片段；以及双体抗体。
抗体和抗原结合分子的片段
本发明的抗原结合分子可以是抗体片段，具体是抗体的抗原结合片段。抗原结合片段包含一个或多个抗原结合区。已经表明，完整抗体的片段能够执行结合抗原的功能。结合片段的实例是：(i)由VL、VH、CL和CH1结构域组成的Fab片段；(ii)由VH和CH1结构域组成的Fd片段；(iii)由单个抗体的VL和VH结构域组成的Fv片段；(iv)由VH结构域组成的dAb片段(Ward，E.S.et al.，Nature 341：544-546(1989))；(v)分离的CDR区；(vi)F(ab′)2片段：包含两个连接的Fab片段的二价片段；(vii)单链Fv分子(scFv)，其中VH结构域和VL结构域通过肽接头连接，该肽接头使两个结构域缔合形成抗原结合位点(Bird et al.，Science242：423426(1988)；Huston et al.，PNAS USA 85：58795883(1988))；(viii)双特异性单链Fv二聚体(PCT/US92/09965)；以及(ix)“双体抗体”：通过基因融合构建的多价或多特异性片段(WO94/13804；P.Hollinger et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90：6444-6448(1993))。通常，该片段是Fab、F(ab′)2或Fv片段或scFv分子。
双体抗体是多肽的多聚体，每个多肽包括含有免疫球蛋白轻链的结合区的第一结构域和含有免疫球蛋白重链的结合区的第二结构域，所述两个结构域连接(例如通过肽接头)，但不能相互缔合形成抗原结合位点：抗原结合位点通过多聚体内一种多肽的第一结构域与多聚体内另一种多肽的第二结构域的缔合形成(WO94/13804)。
在使用双特异性抗体的情况下，这些可以是可以以各种方式例如化学制备或杂交瘤杂交来制造的常规双特异性抗体(Hollinger&Winter，Current OpinionBiotechnol.4：446-449(1993))，或者可以是下文提及的任何双特异性抗体片段。可能优选使用scFv二聚体或双体抗体而不是整个抗体。双体抗体和scFv可以在没有Fc区的情况下仅使用可变结构域构建，潜在地降低了抗独特型反应的效果。其他形式的双特异性抗体包括在Trauneckeret al.，EMBO Journal 10：36553659(1991)中描述的单链“Janusins”。
双特异性抗体是一种可以同时结合两个靶分子(例如两个抗原或两个表位)的抗体。双特异性抗体也可称为双结合抗体。双特异性抗体形式的例子包括但不限于：(mAb)2、Fcab、F(mAb′)2、四价体瘤、scFv(单链可变片段)、bsDb(双特异性双体抗体)、scBsDb(单链双特异性双体抗体)、BiTE(双特异性T细胞衔接子)、DART(双亲和性)重新靶向抗体)、电荷对、串联抗体、串联scFv-Fc、Fab-scFv-Fc、Fab-scFv、微型抗体、zybodies、DNL-F(ab)3(对接锁定三价Fab)、bssdAb(双特异性单结构域抗体)和匙孔(knobs-in-holes)。
与双特异性完整抗体相反，双特异性双体抗体也可能是有用的，因为它们可以容易地在E.coli中构建和表达。使用噬菌体展示(WO94/13804)可容易地从文库选择具有适当结合特异性的双体抗体(和许多其他多肽，例如抗体片段)。如果双体抗体的一个臂要保持恒定，例如，具有针对抗原X的特异性，则可以制备其中另一臂变化的文库，并选择具有适当特异性的抗体。
本发明的抗原结合分子可以允许相邻抗原结合分子之间交联的形式提供。例如，包含Fc区的抗原结合分子(例如单克隆抗体形式的那些抗原结合分子)允许两个相邻分子的Fc区之间的交联(并且因此允许由于共定位而在相邻的BDCA-2分子之间交联)。在某些情况下，这可能会促进BDCA2的内化并抑制IFN分泌。在其他实施方式中，抗原结合分子可以不允许相邻抗原结合分子之间交联的形式提供。例如，缺乏Fc区的抗原结合分子(例如Fab形式的那些抗原结合分子或类似物)可能不会交联。然而，已经证明即使以不允许交联的形式提供本发明的抗原结合分子(具体地，具有本文公开的序列的抗原结合分子)，其仍然能够以剂量依赖性方式促进BDCA2的内化并抑制IFN分泌。这意味着可以提供两种类型的抗原结合分子(允许交联的那些形式的抗原结合分子和不允许交联的那些形式的抗原结合分子)，从而相比于现有技术，增加了本发明的抗原结合分子的实用性和功能性。
此外，本发明的抗原结合分子能够以剂量依赖性方式促进BDCA2的内化并抑制IFN分泌，即使当以单价方式结合BDCA2的形式提供抗原结合分子时也是如此。例如，以单价方式(即一个抗原结合分子与一个BDCA2分子的比率)与BDCA-2结合的Fab形式的抗原结合分子已显示出以剂量依赖的方式促进BDCA2的内化并抑制IFN分泌。这再次与现有技术的抗BDCA2分子形成对比。
因此，在一些实施方式中，抗原结合分子以单价方式结合BDCA2(即一个抗原结合分子与一个BDCA2分子的比率)。在一些实施方式中，抗原结合分子不相互交联。Fab形式实现了这两个目标，因为它们不相互交联(由于缺少Fc区)，而且它们以单价方式结合其抗原。在一些实施方式中，本发明提供了具有促进BDCA2内化并抑制IFN分泌(体外或体内)的序列的抗原结合分子。本发明的抗原结合分子的优点包括促进BDCA2内化和抑制IFN分泌的能力，而不管抗原结合分子彼此交联(并因此对BDCA2分子进行共定位)的能力，以及无论结合价如何(即单价或二价结合)。
同一性和同源性
如本领域已知的“同一性”是通过比较序列所确定的两个或更多个多肽序列或两个或更多个多核苷酸序列之间的关系。在本领域中，同一性也意指多肽或多核苷酸序列(视情况而定)之间的序列相关程度，如通过这种序列的字符串之间的匹配所确定。虽然存在许多测量两个多肽序列或两个多核苷酸序列之间的同一性的方法，但通常用于确定同一性的方法是在计算机程序中编码化的。用于确定两个序列之间的同一性的优选计算机程序包括但不限于GCG程序包((Devereux，et al.，Nucleic Acids Research，12，387(1984)、BLASTP、BLASTN和FASTA(Atschul et al.，J.Molec.Biol.215，403(1990))。
可以使用程序(例如CLUSTAL程序)来比较氨基酸序列。该程序比较氨基酸序列，并通过视情况在任一序列中插入空格来找到最优比对。可以计算氨基酸同一性或相似性(同一性加上氨基酸类型的保守性)来进行最优比对。像BLASTx这样的程序会比对相似序列的最长延伸(longest stretch)，并为该拟合赋值。因此，可以在发现若干相似区，每个区具有不同的分数的情况下获得比较。本发明中考虑了两种类型的同一性分析。
通过出于最优比较目的对序列进行比对(例如，可以在第一序列中引入空位以与序列进行最佳比对)并且比较相应位置处的氨基酸残基或核苷酸，来确定两个氨基酸序列或两个核酸序列的百分比同一性。“最佳比对”是获得最高的同一性百分比的两个序列的比对。同一性百分比由所比较序列中的相同氨基酸残基或核苷酸的数量来确定的(即，同一性％＝相同位置数/位置总数×100)。通常，除非上下文另有规定或暗示，否则本文中提及的同一性％指的是分子整个长度上的同一性％。
可以使用本领域技术人员已知的数学算法来完成两个序列之间的百分比同一性的确定。用于比较两个序列的数学算法的例子是Karlin and Altschul(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87：2264-2268的算法，该算法在Karlin and Altschul(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90：5873-5877中进行了改进。Altschul，et al.(1990)J.Mol.Biol.215：403-410的BLASTn和BLASTp程序已经合并了这种算法。可以用NBLAST程序(评分＝100，字长＝12)来执行BLAST核酸检索，得到与本发明核酸分子同源的核酸序列。可以用XBLAST程序(评分＝50，字长＝3)来执行BLAST蛋白检索，得到与本发明蛋白质分子同源的氨基酸序列。为了获得出于比较目的的空位比对，可以如Altschul et al.(1997)Nucleic Acids Res.25：3389-3402所述使用GappedBLAST。可选择地，可以使用PSI-Blast来执行迭代搜索，检测分子之间的远距离关系(Id.)。当使用BLAST、Gapped BLAST和PSI-Blast程序时，可以使用各个程序(例如，BLASTp和BLASTp)的默认参数。参见http://www.ncbi.nlm.nih.gov。用于序列比较的数学算法的另一例子是Myers and Miller，CABIOS(1989)的算法。作为CGC序列比对软件包的一部分的ALIGN程序(版本2.0)已经合并了这种算法。本领域已知的用于序列分析的其他算法包括如Torellis and Robotti(1994)Comput.Appl.Biosci.，10：3-5中所述的ADVANCE和ADAM；以及Pearson and Lipman(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.85：2444-8中所述的FASTA。在FASTA中，ktup是设置搜索的灵敏度和速度的控制选项。
典型地，本发明中提供的抗原结合分子的CDR的氨基酸序列在氨基酸水平上与下述CDR的氨基酸序列具有至少70％的同一性，例如使用HGMP(人类基因组图谱项目)提供的BLAST计算机程序(Atschul et al.，J.Mol.Biol.215，403-410(1990))的默认参数。更典型地，CDR序列在氨基酸水平上与如下所示的序列具有至少75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％的同一性。典型地，本发明中使用的抗原结合分子的每个CDR序列与下面列出的CDR的氨基酸序列都具有这种水平的同一性。可选择地，本发明中使用的抗原结合分子的任何1、2、3、4或5个CDR与下面列出的CDR的氨基酸序列都具有这种水平的同一性。
本发明提供的抗原结合分子的VH区和VL区的氨基酸序列在氨基酸水平上与下述VH区和VL区的氨基酸序列具有至少70％的同一性，例如使用HGMP(人类基因组图谱项目)提供的BLAST计算机程序(Atschul et al.，J.Mol.Biol.215，403-410(1990))的默认参数。更典型地，VH区和VL区在氨基酸水平上与以下所示的序列具有至少75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或至少99％的同一性。典型地，本发明中使用的抗原结合分子的每个VH区和VL区与下面列出的VH区和VL区的氨基酸序列都具有这种水平的同一性。可选择地，本发明中使用的抗原结合分子的VH区和VL区中只有一个与下面列出的VH区和VL区的氨基酸序列具有这种水平的同一性。
如本文所用，同一性可与“同源性”和“相似性”互换使用。对特定同一性％的引用同样适用于同源性％和相似性％。同源性和相似性可以使用适当的算法来确定，例如FASTA、BLAST和Gapped BLAST。执行这些分析的软件可公开获得。
在一些实施方式中，特别是对于参考与参考序列具有特定序列同一性的序列的任何实施方式，可以在没有指定重链或轻链可变区的所有6个CDR的序列的情况下计算序列同一性％。在这种实施方式中，序列变化仅发生在框架区中。
变体
本发明还扩展到下文所述肽序列的变体。如本文所用，术语“变体”是指具有相似氨基酸序列和/或保留相同功能的蛋白质。例如，术语“变体”涵盖包括一个或多个氨基酸的添加、删除、替换等的蛋白质或多肽。本发明变体的一个实例是包含如下文所定义的且用一个或多个其他氨基酸替换一个或多个氨基酸的肽的蛋白质。例如，可以进行氨基酸替换以减少或消除氨基酸序列中的不稳定性(liabilities)。可选择地，如果需要，可以进行氨基酸替换以提高抗原亲和力或使抗体人源化或去免疫。本文提供了指定抗体的亲和力成熟变体、人源化变体和去免疫变体，以及包含氨基酸替换的变体，以减少或消除抗体序列中的任何不稳定性。
如上所述，在一些实施方式中，任何替换可以仅发生在框架区中。在这种实施方式中，原始CDR序列被保留，但变异可能发生在一个或多个框架区中。
具有一个或多个氨基酸替换的变体抗原结合分子可以保留衍生出变体抗原结合分子的抗原结合分子的功能活性(例如EC50、IC50、IC90和/或Kd)。本发明的变体抗原结合分子可以与对衍生出该变体抗原结合分子的抗原结合分子所述相同的方式使用和配制。
替换
技术人员知道各种氨基酸具有相似的性质。物质的一种或多种此类氨基酸通常可以被一种或多种其他此类氨基酸替换，而不会消除该物质的所需活性。
因此，氨基酸甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸通常可以相互(具有脂肪族侧链的氨基酸)替换。在这些可能的替换中，优选使用甘氨酸和丙氨酸来互相替换(因为它们具有相对短的侧链)，以及使用缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸来互相替换(因为它们具有较大的疏水脂肪族侧链)。通常可以互相替换的其他氨基酸包括：苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸(具有芳香族侧链的氨基酸)；赖氨酸、精氨酸和组氨酸(具有碱性侧链的氨基酸)；天冬氨酸和谷氨酸(具有酸性侧链的氨基酸)；天冬酰胺和谷氨酰胺(具有酰胺侧链的氨基酸)；以及半胱氨酸和甲硫氨酸(具有含硫侧链的氨基酸)。
这种性质的替换通常被称为“保守”或“半保守”氨基酸替换。
使用三个字母和一个字母代码，天然存在的氨基酸可按以下称为：甘氨酸(G或Gly)、丙氨酸(A或Ala)、缬氨酸(V或Val)、亮氨酸(L或Leu)、异亮氨酸(I或Ile)、脯氨酸(P或Pro)、苯丙氨酸(F或Phe)、酪氨酸(Y或Tyr)、色氨酸(W或Trp)、赖氨酸(K或Lys)、精氨酸(R或Arg)、组氨酸(H或His)、天冬氨酸(D或Asp)、谷氨酸(E或Glu)、天冬酰胺(N或Asn)、谷氨酰胺(Q或Gln)、半胱氨酸(C或Cys)、蛋氨酸(M或Met)、丝氨酸(S或Ser)和苏氨酸(T或Thr)。如果残基可能是天冬氨酸或天冬酰胺，则可以使用符号Asx或B。如果残基可能是谷氨酸或谷氨酰胺，则可以使用符号Glx或z。除非上下文另有规定，否则提及天冬氨酸包括天冬氨酸盐，谷氨酸包括谷氨酸盐。
也可以相对于以下所述融合蛋白的氨基酸序列进行氨基酸删除或插入。因此，例如，可以删除对多肽活性没有实质性影响的氨基酸，或者至少不会消除这种活性的氨基酸。这种删除可能是有利的，因为多肽的总长度和分子量可以减少，同时仍然保持活性。这能够使特定用途所需的多肽量减少，例如，可减少剂量水平。
在一些实施方式中，以下氨基酸可以相互交换以进行保守氨基酸替换：
| 分类 | 可交换的氨基酸 |
| 脂肪族 | 甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸 |
| 羟基或含硫/含硒 | 丝氨酸、半胱氨酸、苏氨酸、蛋氨酸 |
| 芳香族 | 苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸 |
| 碱性 | 组氨酸、赖氨酸、精氨酸 |
| 酸性及其酰胺 | 天冬氨酸盐、谷氨酸盐、天冬酰胺、谷氨酰胺 |
因此，提及“保守”氨基酸替换指的是抗体序列中(例如CDR中或VH或VL序列中)的一个或多个氨基酸被上述同一类别的另一个氨基酸替换的氨基酸替换。保守氨基酸替换可优选在CDR区中，以尽量减少对抗体功能的不利影响。然而，保守氨基酸替换也可能发生在框架区内。
可以使用任何合适的技术，例如通过定点诱变或固态合成，来进行相对于与下面给出的序列的氨基酸变化。
应当理解，本发明范围内的氨基酸替换或插入可以使用天然存在或非天然存在的氨基酸进行，尽管天然存在的氨基酸可能是优选的。无论是否使用天然或合成氨基酸，只存在L-氨基酸可能是优选的。
在本发明的一个实施方式中，提供了本发明的抗原结合分子或其抗原结合片段，其在抗体结合结构域或抗原结合结构域中包含1至10个、优选1至5个氨基酸替换。例如，在本发明的一个实施方式中，提供了一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗体或其抗原结合片段，其中该抗BDCA-2(CLEC4C)抗体或其抗原结合片段包含选自由3E05_var12、3E05_var6、3E05_varl4、3E05、3E05_varl、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01组成的组的抗体的6个CDR区，其中该抗原结合分子在其所有CDR区具有1至10个氨基酸替换，优选1至5个氨基酸替换。在本发明的另一个实施方式中，提供了一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或其抗原结合片段，其中该抗BDCA-2(CLEC4C)抗体或其抗原结合片段包含选自由3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_varl5、3E05_var16、21E06、25E06和28B01组成的组的抗体的VH和VL序列，其中该抗原结合分子在其VH和VL序列具有1至10个氨基酸替换，优选1至5个氨基酸替换。在本发明的又一实施方式中，提供了一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗体，其中该抗BDCA-2(CLEC4C)抗体是选自由3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01组成的组的抗体，其中该抗体具有1至10个氨基酸替换，优选1至5个氨基酸替换。替换当然是关于起始抗体的原始CDR或可变链序列的替换。
在一些实施方式中，一个或多个氨基酸替换位于一个或多个CDR区中。在其他实施方式中，一个或多个氨基酸替换位于框架区中，即位于可变重链和轻链中，但不在一个或多个CDR区中。在其他实施方式中，一个或多个氨基酸替换可位于重链可变区和/或轻链可变区的任何位置。在一些实施方式中，氨基酸替换不会发生在CDR序列中。
在一些实施方式中，氨基酸替换不会对抗体的结合特异性和/或亲和力产生不利影响。因此，变体抗体可能具有与衍生该变体抗体的抗体相同或更好的功能特性。
亲和力成熟变体
在本发明范围内的其他变体包括本发明的抗原结合分子，该抗原结合分子经修饰以增加对BDCA-2(CLEC4C)的亲和力。在一个实施方式中，本发明的抗原结合分子是亲和力成熟抗体。在一个实施方式中，本发明的抗原结合分子是人源化亲和力成熟抗体。
任何已知方法均可用于增加本发明的抗原结合分子的亲和力，以产生对BDCA-2(CLEC4C)亲和力增强的亲和力成熟抗体或人源化亲和力成熟抗体。
本发明提供所提供的抗原结合剂的亲和力成熟变体。亲和力成熟变体与BDCA-2(CLEC4C)的结合亲和力高于亲本抗体。优选地，所产生的抗体与BDCA-2(CLEC4C)的结合亲和力比亲本抗体与BDCA-2(CLEC4C)的结合亲和力高至少20％、至少30％、至少40％、更优选至少50％，例如通过Kd测定的。
在一些实施方式中，本发明提供一种制备本发明抗原结合分子的方法，该方法包括提供如本文所述的抗原结合分子(例如，抗BDCA-2(CLEC4C)结合分子或抗体或其抗原结合片段或变体)，并使抗体经历亲和力成熟，其中所产生的抗体与BDCA-2(CLEC4C)结合的亲和力高于亲本抗体。优选地，所产生的抗体与BDCA-2(CLEC4C)的结合亲和力比亲本抗体与BDCA-2(CLEC4C)的结合亲和力高至少20％、至少30％、至少40％、更优选至少50％，例如通过Kd测定的。测量亲和力的方法是本领域已知的，并在下面的实施例中描述。通过此类方法产生的亲和力成熟抗体可如本文针对其他抗BDCA-2(CLEC4C)结合分子所述那样配制并使用。
亲和力成熟可根据技术人员已知的任何合适方法来进行。例如，体外抗体展示系统广泛用于产生具有高亲和力的特异性抗体。在这些系统中，表型(即抗体片段)与基因型(即抗体基因)结合，从而允许直接测定抗体序列。已经开发了若干个系统来实现抗体库的展示，以允许随后选择结合物，并通过增加选择的严格性，允许选择亲和力越来越高的变体。抗体片段可以在酵母、核糖体、噬菌体展示颗粒中表达，或通过直接与DNA结合来表达。
目前的抗体亲和力成熟方法属于两种诱变类别：随机和非随机。易错聚合酶链反应(PCR)、突变菌株和饱和诱变是随机诱变方法的典型实例。非随机技术通常使用丙氨酸扫描或定点诱变来生成有限的特定变体集合。另外，获得亲本抗体的混合变体的改组方法也可以用来进一步提高抗体的亲和力。
因此，在本发明的一个实施方式中，亲和力成熟方法选自由以下组成的组：随机诱变(例如易错聚合酶链反应(PCR)、突变菌株或饱和诱变)、非随机诱变(例如丙氨酸扫描或定点诱变)、改组(例如DNA改组、链改组或CDR改组)以及使用CRISPR-Cas9系统引入修饰。
亲和力成熟方法见述于，例如，Rajpal et al.，Proc Natl Acad Sci USA，2005，102(24)：8466-71、Steinwand et al.，MAbs，2014，6(1)：204-18以及治疗性抗体手册(Handbook of Therapeutic Antibodies)，Wiley，2014，第6章，抗体亲和力(115-140页)。
在一些实施方式中，提供一种制备药物组合物的方法，该方法包括提供根据以上方法制备的抗体，(即，通过亲和力成熟产生抗体)，并将抗体与至少一种或更多种药学上可接受的赋形剂进行共同配制。用于制备药物组合物的抗体可以是3E05、21E06、25E06或28B01的亲和力成熟变体。用于制备药物组合物的抗体可以是3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15或3E05_var16的亲和力成熟变体。通过此类方法产生的药物组合物可用于如本文针对其他抗BDCA-2(CLEC4C)结合分子所述的本发明的治疗方法中。
因此，提供了作为本发明抗原结合分子的亲和力成熟突变体或变体的抗原结合分子。例如，在一个实施方式中，提供了选自由以下组成的组的抗体的亲和力成熟变体：3E05_var12、3E05_var6、3E05_varl4、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_varl1、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01。一般来说，亲和力成熟突变体对BDCA-2(CLEC4C)(特别是人BDCA-2(CLEC4C))的亲和力高于亲本抗体(衍生突变体的抗体)。本发明还提供了通过本发明的抗原结合分子或抗体的亲和力成熟可获得或获得的抗原结合分子和抗体。
其他变体
本发明的抗原结合分子通常是抗体，更通常是单克隆抗体。在一个优选的实施方式中，本发明的单克隆抗体是人源化抗体。在一些实施方式中，抗体是全人单克隆抗体，其中使用人恒定区。
用于生产单克隆抗体的方法是本领域技术人员熟知的，例如Frenzel et al.，“Expression of Recombinant Antibodies”，Front Immunol，2013，4：217中所述的，其内容通过引用并入本文。
本发明的单克隆抗体可以通过修饰抗体的氨基酸序列进行人源化。降低本发明的抗原结合分子的免疫原性的方法包括将CDR移植到合适的抗体框架支架或可变表面残基重塑，例如通过定点诱变或其他常用的分子生物学技术(Roguska et al Protein Eng.9895-904(1996))。
其他适用的方法可以包括识别分子内潜在的T细胞表位，然后例如随后通过定点诱变(去免疫)去除这些表位。在将抗原结合分子用作治疗剂的情况下，可能需要对抗原结合分子进行人源化。可以根据需要进行CDR区或周围框架序列的人源化。
可以采用单克隆抗体和其他抗体，利用重组DNA技术生产保留原始抗体的特异性的其他抗体或嵌合分子。此类技术可能涉及将编码抗体的免疫球蛋白可变区或互补决定区(CDR)的DNA引入到不同免疫球蛋白的恒定区或恒定区加框架区。杂交瘤或产生抗体的其他细胞可能会经历基因突变或其他变化，这可能会或可能不会改变所产生的抗体的结合特异性。
在一个实施方式中，重链可变区和/或轻链可变区是至少85％人源化的、至少90％人源化的、至少95％人源化的、至少96％人源化的、至少97％人源化的、至少98％人源化的或至少99％人源化的。在一些实施方式中，抗体是保守人源化的，例如以保留更好的抗原结合。在这种保守人源化抗体中，与人源化抗体相比，可以进行更少的抗体替代。
在一些实施方式中，本发明的抗原结合分子是去免疫的，例如使用Jones et al.，“Deimmunization of monoclonal antibodies”，Methods Mol Biol，2009，525：405-23中描述的方法，其内容通过引用并入本文。去免疫使用免疫学和分子生物学联合技术从序列中去除T细胞表位。
因此在本发明的一些实施方式中，提供了一种去免疫抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或其抗原结合片段，其中该抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或其抗原结合片段包含选自由3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01组成的组的抗体的6个CDR区的去免疫变体。在本发明的其他实施方式中，提供了一种去免疫抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或其抗原结合片段，其中该抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或其抗原结合片段包含选自由3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01组成的组的抗体的VH和/或VL序列的去免疫变体。在本发明的又一个实施方式中，提供了一种去免疫抗BDCA-2(CLEC4C)抗体，其中该抗BDCA-2(CLEC4C)抗体是选自由3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01组成的组的抗体。
抗原结合分子及其抗原结合片段基于4种亲本抗体3E05、21E06、25E06和28B01。除了亲本抗体之外，本发明特别涉及亲本抗体之一3E05的人源化和去免疫衍生物，包括3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15和3E05_var16。在优选的实施方式中，本发明特别涉及3E05的人源化和去免疫衍生物，包括3E05_var12、3E05_var6和3E05_var14。然而，还提供了其余3种亲本抗体的人源化和去免疫衍生物。本发明还基于这样的抗体片段：包含一个或多个来自本发明的亲本或人源化/去免疫抗体的抗原结合结构域，以及另外的变体，例如本发明抗原结合分子的包含一个或多个保守氨基酸替换(例如1至10个替换，或优选1至5个替换)的抗原结合结构域和亲和力成熟的变体。本发明的所有抗原结合分子都特异性结合BDCA-2(CLEC4C)。
本文提供的抗体的人源化和去免疫变体可以与人源化或去免疫的原始亲本序列具有至少90％的序列同一性，例如至少95％的序列同一性。
本发明的抗原结合分子，特别是抗体，可以是任何合适的类型，包括IgA、IgD、IgE、IgG、IgM和IgY，尽管IgG可能是优选的。IgG1主链可能是最优选的。在相关实施方式中，可以修饰本发明抗体的恒定区以获得有利效果，例如增加稳定性和减少Fcγ受体相互作用。此类修饰包括Fc区中的S241P和L248E替换。其他合适的修饰是本领域技术人员已知的。
“特异性结合”、“特异性地结合”和“特异性的结合”被理解为是指抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子对BDCA-2(CLEC4C)具有小于约10-6M、10-7M、10-8M、10-9M、10-10M、10- 11M或10-12M的解离常数(Kd)。在优选的实施方式中，解离常数小于10-8M，例如在10-9M、10- 10M、10-11M或10-12M的范围内。根据本发明的一些实施方式，“特异性结合”、“特异性地结合”和“特异性的结合”可以指亲和力和/或活动性。在一些实施方式中，抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子的亲和力为10-8M至10-6M(例如约10-7M)。在本发明的一些实施方式中，抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子的亲合力为约10-10M至10-8M(例如约10-9M)。在本发明的一些实施方式中，抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子的亲和力和/或活动性为约1nM至700nM，或约1至600nM，或约1至500nM，或约1至400nM，或约1至300nM。
制造不稳定性
由于化学修饰和翻译后修饰(PTM)，治疗性蛋白质如抗体本质上是异质和复杂的。修饰可能由许多因素引起，例如宿主细胞系统、制造中所用的工艺或储存或制造期间的条件。修饰可能涉及分子本身的化学稳定性或聚集电位以及这对抗体的内在物理稳定性的影响。给定抗体序列中的氨基酸基序或残基在制造或储存期间可能会发生自发修饰称为不稳定性。因此，可以对抗体序列进行突变，以解决不稳定性，从而降低抗体对修饰和降解的易感性。
由于抗体序列中的不稳定性而产生的此类修饰可包括糖基化、脱酰胺、氧化以及C-和N-末端的变化。此类修改可能在制造过程中出现。某些残基和结构或序列基序更容易发生某些修饰。此类会导致修饰不稳定性的实例包括Asn N-连接糖基化、Ser/Thr O-连接糖基化、Asn脱酰胺、Asp异构化/片段化、Lys糖基化、Met/Trp氧化、游离硫醇基、焦谷氨酸盐、C-末端Lys。
技术人员知道，计算工具可用于预测和识别可能潜在地导致修饰的结构和顺序的不稳定性。为了尽量减少修饰的发生，可以对制造过程进行更改。还考虑了蛋白质工程来降低风险。例如，这些不稳定性的选择性突变有助于识别和降低危及抗体稳定性的修饰风险。
天冬氨酸残基(Asp)可能会发生自发修饰。含有Asp的基序，如Asp-Gly序列可能会经历自发异构化以形成异天冬氨酸。异天冬氨酸盐的形成可能会削弱或完全消除抗体的结合。如果Asp残基出现在抗体的CDR中，则尤为重要。
因此，天冬氨酸残基(Asp)可以被任何天然存在的氨基酸替换，以减少这种会导致修饰的不稳定性。可选地，天冬氨酸残基(Asp)可以被丙氨酸(Ala)、谷氨酰胺(Gln)或谷氨酸(Glu)替换，以减少这种会导致修饰的不稳定性。还可以研究生产/配制的优化以减少异构化。作为选择，Asp-Gly基序可以通过用另一种天然存在的氨基酸替换甘氨酸残基以抑制去酰胺化而不是通过替换Asp残基来修饰。
蛋氨酸残基(Met)可能会经历自发修饰。CDR中蛋氨酸(Met)的存在，尤其是暴露在溶剂中时，如果蛋氨酸被氧化并干扰结合，则可能会产生问题。因此，蛋氨酸残基可以被任何其他天然存在的氨基酸替换，以减少这种会导致修饰的不稳定性。蛋氨酸残基可以优选用Ala或Leu替换。还可以研究生产/配制的优化以减少氧化。
因此，本文还提供了衍生自3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01中的任何但包含一个或多个氨基替换以解决如上所述的任何潜在不稳定性中的一个或多个的变体抗体。
例如，对于本文中由一个或多个氨基酸序列定义的任何抗原结合分子，如果存在一个或多个Met残基，则一个或多个Met残基可各自独立地被Ala残基或Leu残基替换。如果存在一个或多个Asp残基，则一个或多个Asp残基可各自独立地被Ala残基、Gln残基或Glu残基替换。
提供的抗原结合分子的概述
下文提供了本发明提供的抗原结合分子的概述，其中在随附的序列表中标识了指定的SEQ ID NO.。作为本发明的一部分，还提供了抗原结合变体、其衍生物和片段：
表1.亲本小鼠抗体和两种亲本抗体的保守人源化、人源化和去免疫版本的概述
表2-人源化/去免疫重链和轻链可变区的组合产生了16种衍生自3E05亲本抗体的抗体
| 变体名称 | 轻链 | SEQ ID NO. | 重链 | SEQ ID NO. |
| 3E05 | 3E05_VL | 1 | 3E05_VH | 5 |
| 3E05var1 | 3E05_VL_1 | 11 | 3E05_VH_1 | 15 |
| 3E05var2 | 3E05_VL_1 | 11 | 3E05_VH_2 | 25 |
| 3E05var3 | 3E05_VL_1 | 11 | 3E05_VH_3 | 35 |
| 3E05var4 | 3E05_VL_1 | 11 | 3E05_VH_4 | 45 |
| 3E05var5 | 3E05_VL_2 | 21 | 3E05_VH_1 | 15 |
| 3E05var6 | 3E05_VL_2 | 21 | 3E05_VH_2 | 25 |
| 3E05var7 | 3E05_VL_2 | 21 | 3E05_VH_3 | 35 |
| 3E05var8 | 3E05_VL_2 | 21 | 3E05_VH_4 | 45 |
| 3E05var9 | 3E05_VL_3 | 31 | 3E05_VH_1 | 15 |
| 3E05var10 | 3E05_VL_3 | 31 | 3E05_VH_2 | 25 |
| 3E05var11 | 3E05_VL_3 | 31 | 3E05_VH_3 | 35 |
| 3E05var12 | 3E05_VL_3 | 31 | 3E05_VH_4 | 45 |
| 3E05var13 | 3E05_VL_4 | 41 | 3E05_VH_1 | 15 |
| 3E05var14 | 3E05_VL_4 | 41 | 3E05_VH_2 | 25 |
| 3E05var15 | 3E05_VL_4 | 41 | 3E05_VH_3 | 35 |
| 3E05var16 | 3E05_VL_4 | 41 | 3E05_VH_4 | 45 |
现在更详细地讨论本发明的各种实施方式。
包含vHCDR3和/或VLCDR3区的抗原结合分子
在一个实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含含有选自由SEQ ID NO：48、28、8、18、38、58、68和78组成的组的氨基酸序列的VHCDR3；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含含有由SEQ ID NO：34、24、44、4、14、54、64和74组成的组的氨基酸序列的VLCDR3。某些氨基酸可以进行替换以提供一种或多种如本文所述的变体抗体。
3E05
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含与氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含与氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ IDNO：4)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含与氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)具有至少90％同一性的氨基酸序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含与氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)具有至少90％同一性的氨基酸序列。
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)。在一个具体实施方式中，抗原结合分子是抗体或其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)，可选地包含1或2个氨基酸替换；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)，可选地包含1或2个氨基酸替换。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，抗原结合分子是抗体或其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)，可选地其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var 1、5、9和13
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含与氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含与氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ IDNO：14)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，重链可变区包含与氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)具有至少90％同一性的氨基酸序列和/或轻链可变区包含与氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)具有至少90％同一性的氨基酸序列。
在一个实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)。在一个具体实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05var1、5、9或13的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)，可选地包含1或2个氨基酸替换；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)，可选地包含1或2个氨基酸替换。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，抗原结合分子是抗体或其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)，可选地其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var 2、6、10和14
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含与氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含与氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ IDNO：14)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，重链可变区包含与氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)具有至少90％同一性的氨基酸序列和/或轻链可变区包含与氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)具有至少90％同一性的氨基酸序列。
在一个实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)。在一个具体实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05var 2、6、10或14的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)，可选地包含1或2个氨基酸替换；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)，可选地包含1或2个氨基酸替换。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，抗原结合分子是抗体或其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)，可选地包含1或2个氨基酸替换，和/或包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的轻链可变区，可选地其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gin和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var 3、7、11和15
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含与氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含与氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ IDNO：14)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，重链可变区包含与氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)具有至少90％同一性的氨基酸序列和/或轻链可变区包含与氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)具有至少90％同一性的氨基酸序列。
在一个实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)。在一个具体实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 3、7、11或15的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)，可选地包含1或2个氨基酸替换；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)，可选地包含1或2个氨基酸替换。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，抗原结合分子是抗体或其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)，可选地包含1或2个氨基酸替换，和/或包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的轻链可变区，可选地其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var 4、8、12和16
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含与氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含与氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ IDNO：14)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，重链可变区包含与氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)具有至少90％同一性的氨基酸序列和/或轻链可变区包含与氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)具有至少90％同一性的氨基酸序列。
在一个实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)。在一个具体实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 4、8、12或16的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)，可选地包含1或2个氨基酸替换；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)，可选地包含1或2个氨基酸替换。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，抗原结合分子是抗体或其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)，可选地其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、G1n和Glu组成的组的氨基酸替换。
21E06
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含与氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含与氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ IDNO：54)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含与氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)具有至少90％同一性的氨基酸序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含与氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)具有至少90％同一性的氨基酸序列。
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)。在一个具体实施方式中，抗原结合分子是抗体或其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自21E06的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区的，该重链可变区包含氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)，可选地包含1或2个氨基酸替换；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)，可选地包含1或2个氨基酸替换。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，抗原结合分子是抗体或其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)，可选地其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
25E06
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含与氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含与氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ IDNO：64)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含与氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)具有至少90％同一性的氨基酸序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含与氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)具有至少90％同一性的氨基酸序列。
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)。在一个具体实施方式中，抗原结合分子是抗体或其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自25E06的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)，可选地包含1或2个氨基酸替换；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)，可选地包含1或2个氨基酸替换。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，抗原结合分子是抗体或其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)，可选地其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
28B01
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含与氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含与氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ IDNO：74)具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含与氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO∶78)具有至少90％同一性的氨基酸序列；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含与氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)具有至少90％同一性的氨基酸序列。
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)。在一个具体实施方式中，抗原结合分子是抗体或其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自28B01的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，其包含：重链可变区，该重链可变区包含氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)，可选地包含1或2个氨基酸替换；和/或轻链可变区，该轻链可变区包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)，可选地包含1或2个氨基酸替换。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，抗原结合分子是抗体或其片段或变体，其中所述抗体或其片段或变体的VHCDR3区是HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)和/或所述抗体或其片段或变体的VLCDR3区是QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)，可选地其中Met残基各自独立地被选自由A1a和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
重链和/或轻链CDR
在一个实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包含：
VHCDRl，该VHCDR1包含选自由SEO ID NO：46、49、26、29、6、9、16、19、36、39、56、59、66、69、76和79组成的组的氨基酸序列；
VHCDR2，该VHCDR2包含选自由SEQ ID NO：47、50、27、30、7、10、17、20、37、40、57、60、67、70、77和80组成的组的氨基酸序列；和
VHCDR3，该VHCDR3包含选自由SEQ INO：48、28、8、18、38、58、68和78组成的组的氨基酸序列；和
轻链可变区，该轻链可变区包含：
VLCDR1，该VLCDR1包含选自由SEQ ID NO：32、22、42、2、12、52、62和72组成的组的氨基酸序列；
VLCDR2，该VLCDR2包含选自由SEQ ID NO：33、23、43、3、13、53、63和73组成的组的氨基酸序列；和
VLCDR3，该VLCDR3包含选自由SEQ ID NO：34、24、44、4、14、54、64和74组成的组的氨基酸序列。
可以进行某些氨基酸替换以提供一种或多种如本文所述的变体抗体。
3E05
在一个实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包含相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：6)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：7)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包含相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1，相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：3)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包含相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：9)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1，相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：10)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包含相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1，相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：3)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包含相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：6)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：7)包括至少90％同一性的VHCDR2和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包含相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)包括至少90％同一性的VLCDR1，相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：3)包括至少90％同一性的VLCDR2和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包含相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：9)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：10)包括至少90％同一性的VHCDR2和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包含相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)包括至少90％同一性的VLCDR1，相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：3)包括至少90％同一性的VLCDR2和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：6)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：7)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：3)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：6)的VHCDR1、包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：7)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)的VLCDR1、包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：3)的VLCDR2以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：6)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：7)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：3)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由A1a和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、G1n和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：9)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：10)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：3)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：9)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：10)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)VLCDR1、包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：3)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：9)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：10)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：3)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由A1a、G1n和G1u组成的组的氨基酸替换。
3E05_var 12
在一个实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包含相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、以及相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包含相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1，相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供了一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包含相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、以及相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包含相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包含相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包含相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包含相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包含相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var12的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1、包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var12的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1、包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或AsD残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var12的抗原结合分子或衍生自3E05_var12的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD、小于约0.5M的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。在一个具体的实施方式中，3E05_var12的抗原结合分子或衍生自3E05_var12的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD，小于约0.2nM的针对IFN分泌的IC50，和/或小于约2nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 6
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 6的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 6的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var 6的抗原结合分子或衍生自3E05_var 6的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD、小于约0.5M的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。在一个具体的实施方式中，3E05_var 6的抗原结合分子或衍生自3E05_var 6的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD、小于约0.1nM的针对IFN分泌的IC50，和/或小于约1nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 14
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)具的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 14的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 14的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2、和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var14的抗原结合分子的或衍生自3E05_var14的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD、小于约0.5M的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。在一个具体实施方式中，3E05_var14的抗原结合分子或衍生自3E05_var14的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD、小于约0.2nM的针对IFN分泌的IC50，和/或小于约2nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 1
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少90％同一性的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 1的变体抗体，例如提供一种抗体、片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEO ID NO：16)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEO ID NO：16)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由A1a和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 1的变体抗体，例如提供一种抗体、片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASOSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEO ID NO：13)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQID NO：14)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var1的抗原结合分子或衍生自3E05_var1的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD。这种抗原结合分子可以另外或替代地表现出小于约0.5nM的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 2
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID No：14)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID No：13)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID No：14)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ INO：14)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 2的变体抗体，例如提供一种抗体、片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由A1a和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 2的变体抗体，例如提供一种抗体、片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGNTY(SEQID NO：30)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASOSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var2的抗原结合分子或衍生自3E05_var2的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.5nM的KD。这种抗原结合分子可以另外或替代地表现出小于约0.5nM的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 3
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 3的变体抗体，例如提供一种抗体、片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 3的变体抗体，例如提供一种抗体、片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由A1a、G1n和G1u组成的组的氨基酸替换。
3E05_var3的抗原结合分子或衍生自3E05_var3的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD。这种抗原结合分子可以另外或替代地表现出小于约0.5nM的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 4
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：12)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES (SEQ ID NO：13)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO∶12)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var4的变体抗体，例如提供一种抗体、片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由A1a和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3)；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 4的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2，以及包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var4的抗原结合分子或衍生自3E05_var4的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD。这种抗原结合分子可以另外或替代地表现出小于约0.5nM的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 5
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID No：23)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID No：24)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 5的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 5的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var5的抗原结合分子或衍生自3E05_var5的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD。这种抗原结合分子可以另外或替代地表现出小于约0.5nM的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 7
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 7的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 7的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var7的抗原结合分子或衍生自3E05_var7的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD。这种抗原结合分子可以另外或替代地表现出小于约0.5nM的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 8
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：22)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEO ID NO：46)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 8的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGOTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 8的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGQTY(SEQID NO：50)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var 8的抗原结合分子或衍生自3E05_var 8的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD。这种抗原结合分子可以另外或替代地表现出小于约0.5nM的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 9
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：32)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：32)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：32)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：32)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 9的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID No：17)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID No：32)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或AsD残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 9的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或AsD残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var9的抗原结合分子或衍生自3E05_var9的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD。这种抗原结合分子可以另外或替代地表现出小于约0.5nM的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 10
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：32)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：32)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：32)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：32)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 10的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEO ID NO：33)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 10的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var 10的抗原结合分子或衍生自3E05_var 10的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约1nM的KD。这种抗原结合分子可以另外或替代地表现出小于约0.5nM的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 11
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：32)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：32)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS (SEQ ID NO：36)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：32)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ IDNO：32)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 11的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 11的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var11的抗原结合分子或衍生自3E05_var11的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约1nM的KD。这种抗原结合分子可以另外或替代地表现出小于约0.5nM的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 13
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES (SEQ ID NO：43)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 13的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 13的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var13的抗原结合分子或衍生自3E05_var13的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD。这种抗原结合分子可以另外或替代地表现出小于约0.5nM的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 15
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID No：36)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 15的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 15的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var15的抗原结合分子或衍生自3E05_var15的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD。这种抗原结合分子可以另外或替代地表现出小于约0.5nM的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。
3E05_var 16
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ IDNO：42)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 16的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自3E05_var 16的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
3E05_var 16的抗原结合分子或衍生自3E05_var 16的抗原结合分子(例如具有一个或多个氨基酸替换的抗体)可以具有小于约0.01nM的KD。这种抗原结合分子可以另外或替代地表现出小于约0.5nM的针对IFN分泌的IC50和/或小于约5nM的针对IFN分泌的IC90。
21E06
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTIS(SEQ ID NO：56)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVKG(SEQ ID NO：57)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ IDNO：52)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：59)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：60)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ IDNO：52)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTIS(SEQ ID NO：56)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVKG(SEQ ID NO：57)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ IDNO：52)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：59)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：60)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ IDNO：52)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTIS(SEQ ID NO：56)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVKG(SEQ ID NO：57)的VHCDR2和包含氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ ID NO：52)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自21E06的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTIS(SEQ ID NO：56)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVKG(SEQ ID NO：57)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ ID NO：52)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTIS(SEQ ID NO：56)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVKG(SEQ ID NO：57)的VHCDR2和包含氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ ID NO：52)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)的VLCDR3。
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：59)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：60)的VHCDR2和包含氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ ID NO：52)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自21E06的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：59)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：60)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ ID NO：52)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：59)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：60)的VHCDR2和包含氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ ID NO：52)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)的VLCDR3。
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
25E06
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：66)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISGVGGDTYYPDSVKG(SEQ ID NO：67)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ IDNO：62)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：69)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SGVGGD(SEQ ID NO：70)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ IDNO：62)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：66)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISGVGGDTYYPDSVKG(SEQ ID NO：67)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ IDNO：62)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：69)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SGVGGD(SEQ ID NO：70)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ IDNO：62)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：66)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISGVGGDTYYPDSVKG(SEQ ID NO：67)的VHCDR2和包含氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ ID NO：62)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自25E06的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：66)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISGVGGDTYYPDSVKG(SEQ ID NO：67)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ ID NO：62)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)的VLCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：66)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISGVGGDTYYPDSVKG(SEQ ID NO：67)的VHCDR2和包含氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ ID NO：62)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：69)的VHCDR1、包含氨基酸序列SGVGGD(SEQ ID NO：70)的VHCDR2和包含氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ ID NO：62)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自25E06的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：69)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SGVGGD(SEQ ID NO：70)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ ID NO：62)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)的VLCDR2，和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：69)的VHCDR1、包含氨基酸序列SGVGGD(SEQ ID NO：70)的VHCDR2和包含氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ ID NO：62)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
28B01
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列YYTMS(SEQ ID NO：76)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVRG(SEQ ID NO：77)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ IDNO：72)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：73)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSYY(SEQ ID NO：79)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：80)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ IDNO：72)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：73)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)包括至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列YYTMS(SEQ ID NO：76)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVRG(SEQ ID NO：77)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ IDNO：72)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：73)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：相对于氨基酸序列GFTFSYY(SEQ ID NO：79)包括至少90％同一性的VHCDR1、相对于氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：80)包括至少90％同一性的VHCDR2、和相对于氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)包括至少90％同一性的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：相对于氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ ID NO∶72)包括至少90％同一性的VLCDR1、相对于氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：73)包括至少90％同一性的VLCDR2、和相对于氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)包括至少90％同一性的VLCDR3。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列YYTMS(SEQ ID NO：76)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVRG(SEQ ID NO：77)的VHCDR2和包含氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ ID NO：72)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：73)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自28B01的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YYTMS(SEQ ID NO：76)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVRG(SEQ ID NO：77)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ ID NO：72)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：73)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列YYTMS(SEQ ID NO：76)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVRG(SEQ ID NO∶77)的VHCDR2和包含氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ ID NO：72)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：73)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由A1a和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由A1a、G1n和G1u组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSYY(SEQ ID NO：79)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：80)的VHCDR2和包含氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ ID NO：72)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：73)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)的VLCDR3。
可以进行氨基酸替换以提供衍生自28B01的变体抗体，例如提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列GFTFSYY(SEQ ID NO：79)的VHCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：80)的VHCDR2，以及包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)的VHCDR3；和/或
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ ID NO：72)的VLCDR1，包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：73)的VLCDR2和包含可选地包含1或2个氨基酸替换的氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)的VLCDR3。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供一种抗体、其片段或变体，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSYY(SEQ ID NO：79)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：80)的VHCDR2和包含氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ ID NO：72)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：73)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)的VLCDR3；
可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
重链可变区和/或轻链可变区
在一个实施方式中，本发明提供了一种抗原结合分子，特别是与BDCA-2(CLEC4C)结合的抗体，其包含：与选自由SEQ ID NO：45、SEQ ID NO：25、SEQ ID N0：5、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：55、SEQ ID NO：65和SEQ ID No：75组成的组的氨基酸序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的重链可变区，和/或与选自由SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：41、SEQ IDNO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：51、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：71组成的组的氨基酸序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的轻链可变区。
在一个实施方式中，该抗体与BDCA-2(CLEC4C)结合并且包含具有选自由SEQ IDNO：45、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：55、SEQ IDN0：65和SEQ ID NO：75组成的组的氨基酸序列的重链可变区，和/或具有选自由SEQ ID NO：NO：31、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：41、SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：51、SEQ IDNO：61和SEQ ID NO：71组成的组的氨基酸序列的轻链可变区。
在一个实施方式中，该抗体与BDCA-2(CLEC4C)结合并且包含具有选自SEQ ID NO：45、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：55、SEQ ID NO：65和SEQ ID NO：75组成的组的氨基酸序列的重链可变区，和/或具有选自由SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：41、SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：51、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：71组成的组的氨基酸序列的轻链可变区，可选地，其中Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由A1a、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如抗体、其变体或片段，其中该抗原结合分子包含选自由以下组成的组的重链可变区和轻链可变区：
(a)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：45和SEQ ID NO：31具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(b)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：25和SEQ ID NO：21具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(c)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：25和SEQ ID NO：41具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(d)包含SEQ ID NO：5的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：1具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(e)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：11具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(f)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：25和SEQ ID NO：11具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(g)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：35和SEQ ID NO：11具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(h)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：45和SEQ ID NO：11具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(i)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：21具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(j)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：35和SEQ ID NO：21具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(k)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：45和SEQ ID NO：21具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(1)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：31具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(m)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：25和SEQ ID NO：31具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(n)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：35和SEQ ID NO：31具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(o)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：41具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(p)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：35和SEQ ID NO：41具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(q)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：45和SEQ ID NO：41具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(r)包含SEQ ID NO：55的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：51的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：55和SEQ ID NO：51具有至少90％同一性的VH和VL序列)；
(s)包含SEQ ID NO：65的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：61的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：65和SEQ ID NO：61具有至少90％同一性的VH和VL序列)；和
(t)包含SEQ ID NO：75的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：71的氨基酸序列的VL(或包含分别与SEQ ID NO：75和SEQ ID NO：71具有至少90％同一性的VH和VL序列)。
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如抗体、其变体或片段，其中该抗原结合分子包含选自由以下组成的组的重链可变区和轻链可变区：
(a)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(b)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(c)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(d)包含SEQ ID NO：5的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列的VL；
(e)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(f)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(g)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(h)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(i)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(j)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(k)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(1)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(m)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(n)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(o)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(p)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(q)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(r)包含SEQ ID NO：55的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：51的氨基酸序列的VL；
(s)包含SEQ ID NO：65的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：61的氨基酸序列的VL；和
(t)包含SEQ ID NO：75的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：71的氨基酸序列的VL。
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如抗体、其变体或片段，其中该抗原结合分子包含选自由以下组成的组的重链可变区和轻链可变区：
(a)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(b)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(c)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(d)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：5的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：1的氨基酸序列的VL；
(e)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(f)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(g)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(h)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(i)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(j)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(k)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(l)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(m)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(n)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(o)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(p)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(q)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(r)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：55的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：51的氨基酸序列的VL；
(s)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：65的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：61的氨基酸序列的VL；和
(t)包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：75的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多5个氨基酸替换的SEQ ID NO：71的氨基酸序列的VL。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。氨基酸替换可能仅发生在一个或多个框架区中。在一些实施方式中，氨基酸替换可以是保守氨基酸替换并且仅发生在一个或多个框架区中。
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如抗体、其变体或片段，其中该抗原结合分子包含选自由以下组成的组的重链可变区和轻链可变区：
(a)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(b)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(c)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(d)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：5的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：1的氨基酸序列的VL；
(e)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(f)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(g)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(h)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(i)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(j)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(k)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(1)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(m)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(n)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(o)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(p)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(q)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(r)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：55的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：51的氨基酸序列的VL；
(s)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：65的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：61的氨基酸序列的VL；和
(t)包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：75的氨基酸序列的VH，和包含可选地包含至多2个氨基酸替换的SEQ ID NO：71的氨基酸序列的VL。氨基酸替换可以是保守氨基酸替换。氨基酸替换可以仅发生在一个或多个框架区中。在一些实施方式中，氨基酸替换可以是保守氨基酸替换并且仅发生在一个或多个框架区中。
在一个实施方式中，提供了一种抗原结合分子，例如抗体、其变体或片段，其中该抗原结合分子包含选自由以下组成的组的重链可变区和轻链可变区：
(a)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(b)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(c)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(d)包含SEQ ID NO：5的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列的VL；
(e)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(f)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(g)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(h)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
(i)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(j)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(k)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
(l)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(m)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(n)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
(o)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(p)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(q)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
(r)包含SEQ ID NO：55的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：51的氨基酸序列的VL；
(s)包含SEQ ID NO：65的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：61的氨基酸序列的VL；和
(t)包含SEQ ID NO：75的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：71的氨基酸序列的VL；
可选地，其中对于以上(a)至(t)中的任一个，任何Met残基各自独立地被选自由Ala和Leu组成的组的氨基酸替换，和/或Asp残基各自独立地被选自由Ala、Gln和Glu组成的组的氨基酸替换。在一些实施方式中，任何被替换的Met和/或Asp残基仅存在于框架区中。
因此，如上所述，还提供了变体，包括其人源化和亲和力成熟变体，以及与特定序列具有更小或更高同一性％或同源性％的变体，例如至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性或同源性。还提供了具有一个或多个氨基酸替换的变体。在一些实施方式中，氨基酸替换不会发生在CDR序列中。
如上所述，可以进行氨基酸替换以减少或消除本发明的抗原结合分子的重链可变区和/或轻链可变区中的不稳定性。这种减少或消除不稳定性的替换可能发生在CDR中。这种减少或消除不稳定性的替换可能发生在可变区的框架区中。
编码抗原结合分子的核酸序列
在本发明的一个方面，提供了编码本发明的抗原结合分子(包括其片段和变体)的核酸序列。
在一个实施方式中，提供了编码抗原结合分子的核酸分子，该抗原结合分子与BDCA-2(CLEC4C)结合并包含：与选自由SEQ ID NO：45、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：5、SEQ IDNO：15、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：55、SEQ ID NO：65和SEQ ID NO：75组成的组的氨基酸序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的重链可变区；和/或与选自由SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：41、SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：51、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：71组成的组的氨基酸序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的轻链可变区。
在一个实施方式中，提供了编码抗体的核酸分子，该抗体与BDCA-2(CLEC4C)结合并包含：重链可变区，该重链可变区具有选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO：45、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：55、SEQ ID NO：65和SEQ ID NO：75；和/或轻链可变区，该轻链可变区具有选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：41、SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：51、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：71。
本发明还提供了编码本文公开的包含一个或多个氨基酸替换的所有变体抗体序列的核酸分子。本发明还提供了包含编码本文公开的任何抗体序列或本文公开的包含一个或多个氨基酸替换的变体抗体序列的核酸分子或核酸分子组合的运载体、质粒和/或宿主细胞。
还提供了编码根据SEQ ID NO 1至80中任一个的氨基酸序列的核酸分子。
还提供了包含编码本发明的抗原结合分子的核酸序列的质粒和运载体和质粒。可以将核酸掺入质粒或运载体中用于表达，特别是在真核表达系统中，更具体地，在哺乳动物细胞系中。因此，还提供了用本发明的质粒或运载体转染的宿主细胞，例如NS0鼠骨髓瘤细胞或CHO细胞。
还提供了一种产生抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子的方法，该方法包括在在细胞内表达质粒或运载体的编码核酸序列的条件下在细胞培养基中培养本发明的宿主细胞。该方法可以进一步包括从细胞培养上清液中获得抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子。然后可以将获得的抗原结合分子配制成药物组合物。此外，提供了产生表达抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子的细胞的方法，该方法包括用本发明的质粒或运载体转染所述细胞。然后可以培养所述细胞以产生抗原结合分子。
抗原
本发明的抗原结合分子与BDCA-2(CLEC4C)、特别是人BDCA-2(CLEC4C)特异性结合。
BDCA-2是一种II型跨膜糖蛋白，属于C型凝集素超家族(Crocker PR et al.NatRev Immunol.2007；7：255-66)。BDCA-2是对人pDC最具特异性的标记，仅在灵长类动物中表达。BDCA-2通过相关的跨膜衔接子FcεRγ(募集蛋白质酪氨酸激酶Syk)发信号，从而诱导蛋白质酪氨酸磷酸化和钙动员(Cao W，et al.PLoS Biol.2007；5：e248)。
尽管它促进其他淋巴和骨髓细胞的细胞活化，但Fc∈Rγ-Syk信号传导通路干扰TLR7和TLR9诱导的pDC活化，抑制I型IFN分泌和其他炎症介质(Dzionek A，etal.J.Exp.Med.2001；194：1823-1834；Fanning SL et al.JImmunol.2006；177：5829-39.2006；Rock J et al.Eur J Immunol.2007；37：3564-75)。出于这个原因，已经探索了结合BDCA-2的抗体阻断pDC活化以及作为其他IFN介导的自身免疫疾病(例如SLE)的治疗选项的潜力(Furie R et al.J Clin Invest.2019；129：1359-1371)。
下面提供了本发明的抗原结合分子所结合的BDCA-2变体的氨基酸序列。
Q8WTT0(SEQ ID NO：82和90)
MVPEEEPQDREKGLWWFQLKVWSMAVVSILLLSVCFTVSSVVPHNFMYSKTVKRLSKLREYQQYHPSLTCVMEGKDIEDWSCCPTPWTSFQSSCYFISTGMQSWTKSQKNCSVMGADLVVINTREEQDFIIQNLKRNSSYFLGLSDPGGRRHWQWVDQTPYNENVTFWHSGEPNNLDERCAIINFRSSEEWGWNDIHCHVPQKSICKMKKIYI
Q8WTT0-2(SEQ ID NO：91)
MVPEEEPQDRVPHNFMYSKTVKRLSKLREYQQYHPSLTCVMEGKDIEDWSCCPTPWTSFQSSCYFISTGMQSWTKSQKNCSVMGADLVVINTREEQDFIIQNLKRNSSYFLGLSDPGGRRHWQWVDQTPYNENVTFWHSGEPNNLDERCAIINFRSSEEWGWNDIHCHVPQKSICKMKKIYI
Q8WTT0-2缺少Q8WTT0的氨基酸11至41。Q8WTT0中从第45位开始的细胞外结构域存在于Q8WTT0-2中。
因此本发明的结合膜BDCA-2(CLEC4C)的抗原结合分子也将与表达BDCA-2(CLEC4C)的细胞结合。因此，本发明还提供具有式TM-Ln-AM的结合分子，其中TM是靶向部分并且是本发明的抗原结合分子，L是接头，n是0或1(因此接头可以存在或可以不存在)，以及AM是活性部分。本发明的抗原结合分子可用于将活性部分靶向于表达BDCA-2(CLEC4C)的细胞。合适的接头包括肼基、多肽、二硫基和硫醚基，并且接头可以通过酶作用裂解。合适的活性部分包括药学活性组分，例如抗炎剂、免疫抑制剂或适合或希望与本发明的抗原结合分子组合使用的其他此类组分。合适的此类试剂也在别处讨论。
抗原结合分子的功能特性
所提供的抗原结合分子具有一种或多种优先的功能特征。功能特征可以在本文提供的不同抗原结合分子之间共享，和/或衍生自本文提供的抗原结合分子的变体和片段可以优先保留衍生出该变体和片段的抗原结合分子的功能特征。在一些实施方式中，片段或变体可以具有改进的功能特性。在一些实施方式中，变体抗体(例如表现出一个或多个替换的那些)将保留抗体的有利功能特性(例如KD、IC50和/或IC90)。
KD
在一个实施方式中，本发明的抗原结合分子具有小于约2nM的对BDCA-2(CLEC4C)的KD值。在一些实施方式中，本发明的抗原结合分子具有小于约1nM的对BDCA-2(CLEC4C)的KD值。在更优选的实施方式中，本发明的抗原结合分子具有小于约0.01nM的对BDCA-2(CLEC4C)的KD值。术语KD为本领域技术人员所熟知并且是指衡量抗体和抗原之间的结合相互作用的强度的平衡解离常数。KD可以根据任何合适的方式来测量。例如，合适的测定可以是流式细胞术测定，包括将表达BDCA-2(CLEC4C)的细胞与浓度高达70μg/mL的测试抗原结合分子在4℃孵育30分钟至40分钟。这样可以确定剂量反应曲线并提供KD值。例如，合适的测定可以是流式细胞术测定，包括将表达BDCA-2(CLEC4C)的细胞与浓度为0.1μg/mL、0.3μg/mL、1μg/mL、3μg/mL、10μg/mL和30μg/mL的测试抗原结合分子在4℃孵育35分钟。
在一些实施方式中，抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或其片段、变体或亲和力成熟突变体具有小于约2nM的对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)值，特别是抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或其片段、变体或亲和力成熟突变体，其对BDCA-2(CLEC4C)的KD值小于约1nM、小于约0.75nM、小于约0.5nM、小于约0.4nM、小于约0.3nM、小于约0.2nM、小于约0.1nM、小于约0.08nM、小于约0.06nM、小于约0.05nM、小于约0.04nM、小于约0.03nM、小于约0.02nM或小于约0.01nM。在一些可能优选的实施方式中，抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或其片段、变体或亲和力成熟突变体具有小于约0.01nM的对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)值。
IC50
在一些实施方式中，抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或其片段、变体或亲和力成熟突变体具有小于约2nM的抑制IFN分泌的50％最大抑制浓度(IC50)。在一些实施方式中，抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或其片段、变体或亲和力成熟突变体的50％最大抑制浓度(IC50)小于约1.5nM、小于约1nM、小于约0.9nM、小于约0.8nM、小于约0.7nM、小于约0.6nM、小于约0.5nM、小于约0.4nM、小于约0.3nM、小于约0.2nM或小于约0.1nM。在一些可能优选的实施方式中，抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或其片段、变体或亲和力成熟突变体表现出小于约0.5nM的IC50。
术语IC50为本领域技术人员所熟知，是指药物或物质的半数最大抑制浓度，或诱导50％抑制的该物质的浓度。IC50是物质抑制特定生物或生化功能的效力的量度。IC50越低，拮抗剂药物或物质作为抑制剂的效力就越大。本发明的抗原结合分子的IC50是针对从表达BDCA-2的细胞例如浆细胞样树突状细胞或外周血单核细胞分泌IFN的IC50。抑制作用在于抑制细胞响应于诱导IFN分泌的激动剂而分泌IFN。
可以根据以下方法测量抑制IFN分泌的IC50，该方法包括：
(a)将表达BDCA-2的细胞(例如浆细胞样树突状细胞或外周血单核细胞)的悬液在96孔板中于37℃和5％CO2中孵育1小时；
(b)向96孔板的一个或多个孔中加入测试抗体和诱导IFN分泌的激动剂(例如TLR7激动剂或TLR9激动剂)的溶液，其中测试抗体以适合于提供IFN分泌的剂量反应曲线的浓度范围提供，例如以0至10μg/ml(例如0.001、0.003、0.01、0.03、0.1、0.3、1、3和10μg/ml，并且0μg/ml作为对照)的浓度提供；
(c)将细胞与测试抗体和诱导IFN分泌的激动剂在37℃和5％CO2中一起孵育16小时；
(d)对于测试的每个抗体浓度，对无细胞上清液中的IFN的量进行定量，例如通过ELISA；
(e)提供IFN分泌对抗体浓度的剂量反应曲线；以及
(f)通过参考步骤(e)中提供的剂量反应曲线来确定测试抗体的IC50，其中IC50定义为与不存在测试抗体情况下的IFN分泌量相比诱导50％的IFN分泌抑制的测试抗体的浓度。
使用的细胞悬液体积可以与添加到板的每个孔中的抗体溶液的体积相同。例如，该方法可以包括在96孔板的每个孔中孵育50μl表达BDCA-2的细胞的悬液，以及在每种测试的抗体浓度下孵育50μl的测试抗体(或50μl不含测试抗体的溶液，用于对照)。
所用细胞的数量和它们的培养基条件可以由技术人员确定。例如，该测定可以包括在包含L-谷氨酰胺和碳酸氢钠的、板的每个孔中含有10％FBS的细胞培养基中以待测试抗体的每种浓度孵育50μl包含1至2×104个pDC的细胞悬液。或者，该测定可以包括在板的每个孔中以及以待测试抗体的每种浓度在10％自体血清中孵育包含1至2×106个PBMC的50μl细胞悬液。
诱导IFN分泌的激动剂刺激培养的细胞以将IFN分泌到上清液中。诱导IFN-分泌的激动剂的量可以由技术人员确定，并以适合刺激细胞分泌IFN的量提供。4μM可以是合适的量，例如4μM的TLR7激动剂或4μM的TLR9激动剂。合适的TLR7激动剂的例子包括咪喹莫特。合适的TLR9激动剂的示例包括RNA寡核糖核苷酸(ORN)激动剂或DNA寡核苷酸激动剂，例如ODN2216(具有序列ggGGGACGATCGTCgggggg的寡核苷酸)。在一些实施方式中，以待测试抗体的每种浓度，将板的至少1个孔用表达BDCA-2的细胞的悬液和测试抗体溶液的组合孵育，但不存在诱导IFN分泌的激动剂，以用于对照目的。本领域技术人员熟悉提供剂量反应曲线所需的适当对照。
IC90
在一些实施方式中，抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或其片段、变体或亲和力成熟突变体的抑制IFN分泌的90％最大抑制浓度(IC90)小于约20nM、小于约15nM、小于约10nM、小于约9nM、小于约8nM、小于约7nM、小于约6nM、小于约5nM、小于约4nM、小于约3nM、小于约2nM或小于约1nM。在一些可能优选的实施方式中，抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或其片段、变体或亲和力成熟突变体表现出小于约5nM的IC90。
术语IC90为本领域技术人员所熟知，是指物质诱导90％抑制的浓度。IC90是物质抑制特定生物或生化功能的效力的量度。IC90越低，拮抗剂药物或物质作为抑制剂的效力就越大。
抑制IFN分泌的IC90可以根据上面为IC90提供的相同方法测量，除了步骤(f)是：
(f)通过参考步骤(e)中提供的剂量反应曲线来确定测试抗体的IC90，其中IC90定义为与不存在测试抗体情况下的IFN分泌量相比诱导90％的IFN分泌抑制的测试抗体的浓度。
特征组合
本发明的抗原结合分子可以表现出本文所述的功能特征的组合。例如，在一些实施方式中，本发明的抗原结合分子具有：
(i)小于约2nM的对BDCA-2(CLEC4C)的KD值和小于约2nM的抑制IFN分泌的IC50；
(ii)小于约2nM的对BDCA-2(CLEC4C)的KD值和小于约20nM的抑制IFN分泌的IC90；
(iii)小于约2nM的抑制IFN分泌的IC50和小于约20nM的抑制IFN分泌的IC90；
(iv)小于约2nM的对BDCA-2(CLEC4C)的KD值、小于约2nM的抑制IFN分泌的IC50和小于约20nM的抑制IFN分泌的IC90；
(v)小于约1nM的对BDCA-2(CLEC4C)的KD值和小于约1nM的抑制IFN分泌的IC50；
(vi)小于约1nM的对BDCA-2(CLEC4C)的KD值和小于约10nM的抑制IFN分泌的IC90；
(vii)小于约1nM的抑制IFN分泌的IC50和小于约10nM的抑制IFN分泌的IC90；
(viii)小于约1nM的对BDCA-2(CLEC4C)的KD值、小于约1nM的抑制IFN分泌的IC50和小于约10nM的抑制IFN分泌的IC90；
(ix)小于约0.01nM的对BDCA-2(CLEC4C)的KD值和小于约0.5nM的抑制IFN分泌的IC50；
(x)小于约0.01nM的对BDCA-2(CLEC4C)的KD值和小于约5nM的抑制IFN分泌的IC90；
(xi)小于约0.5nM的抑制IFN分泌的IC50和小于约5nM的抑制IFN分泌的IC90；或
(xii)小于约0.01nM的对BDCA-2(CLEC4C)的KD值、小于约0.5nM的抑制IFN分泌的IC50和小于约5nM的抑制IFN分泌的IC90。具有如(xii)中的特征组合的抗原结合分子可能是优选的。
其他特征
除了抑制TLR9诱导的IFN基因表达外，令人惊讶的是，3E05和变体抗体抑制了许多参与以下的基因：淋巴细胞和骨髓迁移(CXCL9、CCL3L3、CCL3L1、CCL5和CXCL8)；炎症介质(MAP3K8、IL6和PTGS2)；免疫反应(CD274、RNF115、SLAMF7和HLA-F)；以及血管生成和纤维化(ENPP2和ITGB8)。在一些实施方式中，提供了可以抑制这些基因中的一种或多种基因的表达的抗原结合分子。在一些实施方式中，提供了可以抑制图7B中列出的一种或多种基因的表达的抗原结合分子。在一些实施方式中，提供了可以抑制图8C中列出的一种或多种基因的表达的抗原结合分子。在一些实施方式中，提供了可以抑制一种或多种ODN刺激基因、例如图7B中列出的那些基因的表达的抗原结合分子。在一些实施方式中，提供了可以抑制一种或多种ODN刺激基因、例如图8C中列出的那些基因的表达的抗原结合分子。
其他提供的抗原结合分子
在一个方面中，提供了一种抗LIGHT抗原结合分子，例如抗体、其片段或变体，其中抗原结合分子与上文定义的本发明的抗原结合分子竞争与BDCA-2(CLEC4C)的结合。
例如，在一个实施方式中，本发明提供一种抗原结合分子(优选抗体)，其中该抗原结合分子与BDCA-2(CLEC4C)特异性结合，并与选自由3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01组成的组的抗体竞争与BDCA-2(CLEC4C)的结合。还提供了与其片段及变体竞争与BDCA-2(CLEC4C)结合的抗原结合分子(例如，包含上述抗体的6个CDR区或VH和VL序列的抗原结合分子，以及其他变体)。
为确定测试抗原结合分子是否可以竞争与由本发明抗体结合的表位相同的表位的结合，可以进行交叉阻断试验，例如竞争性ELISA试验。在示例性竞争ELISA试验中，微滴定板的BDCA-2(CLEC4C)涂覆孔或BDCA-2(CLEC4C)涂覆的sepharose珠与或不与候选竞争抗体一起预孵育，然后添加本发明的生物素标记的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体。在孔中或珠上结合BDCA-2(CLEC4C)抗原的标记的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体的量可使用亲和素-过氧化物酶偶联物和适当的底物进行测量。
可选择地，抗BDCA-2(CLEC4C)抗体可以被标记，例如，使用放射性或荧光标记或一些其他可检测和可测量的标记。结合抗原的经标记的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体的量与候选竞争抗体(测试抗原结合分子)竞争与抗原上相同表位结合的能力成反比，即，测试抗原结合分子对相同表位的亲和力越大，则将与抗原涂覆的孔结合的经标记的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体越少。
候选竞争抗体被视为基本上结合与本发明的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体相同表位的抗体或竞争结合该相同表位的抗体，前提是与在没有候选竞争抗体(但可能存在已知的非竞争抗体)的情况下平行进行的对照相比，候选竞争抗体可以阻断抗BDCA-2(CLEC4C)抗体的结合至少20％，优选至少20％至50％，甚至更优选至少50％。可以理解，该试验可进行变化以达到相同的定量值。
在本发明的一个实施方式中，提供了一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，例如抗体、其片段或变体，其中该抗原结合分子与如上文定义的本发明的抗结合分子竞争结合BDCA-2(CLEC4C)，其中竞争性抗体可阻断本发明的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体的至少50％的结合，如在竞争性ELISA测定中测量的。
还提供了一种抗原结合分子，其与BDCA-2(CLEC4C)特异性结合并抑制BDCA-2(CLEC4C)与本发明的抗原结合分子的结合。
例如，在一个实施方式中，抗原结合分子(优选抗体)与BDCA-2(CLEC4C)特异性结合并抑制BDCA-2(CLEC4C)与选自由3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01组成的组的抗体的结合。还提供了与BDCA-2(CLEC4C)特异性结合并抑制BDCA-2(CLEC4C)与其片段及变体结合的抗原结合分子(例如，包含上述抗体的6个CDR区或VH和VL序列的抗原结合分子，以及其他变体)。
还提供了一种抗原结合分子，其与由本发明的抗原结合分子结合的BDCA-2(CLEC4C)的表位特异性结合。
例如，在一个实施方式中，本发明提供一种抗原结合分子(优选抗体)，其中该抗原结合分子与BDCA-2(CLEC4C)的表位特异性结合，该表位被选自由3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01组成的组的抗体结合。还提供了与被其片段及变体结合的BDCA-2(CLEC4C)的表位特异性结合的抗原结合分子(例如，包含上述抗体的6个CDR区或VH和VL序列的抗原结合分子，以及其他变体)。
本发明的抗原结合分子可以结合以下表位：包含人BDCA-2(SEQ ID NO：82)的氨基酸残基166至179或由人BDCA-2(SEQ ID NO：82)的氨基酸残基166至179组成。该表位可以完全包含在人BDCA-2的166至179(包括本数)内。可选择地，在一些实施方式中，表位可以包含人BDCA-2的残基166至179的一个或多个氨基酸残基或与其重叠。表位可以是线性表位(例如包含在人BDCA-2的氨基酸残基X至X(包括本数)内的线性表位，或与人BDCA-2的氨基酸残基166至179重叠的线性表位)，或者表位可以是构象表位(例如，包含人BDCA-2的残基166至179的一个或多个氨基酸残基的构象表位，或由人BDCA-2的残基166至179的一个或多个氨基酸残基组成的构象表位)。本发明的抗原结合分子也可以在另外的表位处结合BDCA-2。在一个优选的实施方式中，本发明的抗原结合分子结合由人BDCA-2的残基166至179的一个或多个氨基酸残基组成的表位。
组合物
在本发明的一个方面中，提供了一种包含本发明抗原结合分子的药物组合物。
本发明的组合物可通过任何方便的途径配制以供使用。除了本发明的抗原结合分子外，本发明的药物组合物通常还包含药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、佐剂、溶媒、缓冲液或稳定剂。此类载体包括但不限于生理盐水、缓冲生理盐水、葡萄糖、脂质体、水、甘油、聚乙二醇、乙醇及其组合。
药物组合物可以是任何合适的形式，这取决于向患者施用药物的所需方法。
本发明的药物组合物可以每剂量含有预定量的每种活性成分的单位剂量形式存在。这样的单位可适于提供5-100mg/天的化合物，优选5-15mg/天、10-30mg/天、25-50mg/天、40-80mg/天或60-100mg/天。对于式I的化合物，提供100-1000mg/天的剂量，优选100-400mg/天、300-600mg/天或500-1000mg/天。这种剂量可以单剂量或作为多个离散剂量提供。最终剂量当然取决于治疗情况、施用途径以及患者的年龄、体重和状况，并由医生决定。
本发明的药物组合物可适于通过任何适当途径施用，例如通过口服(包括口腔或舌下)、直肠、鼻、局部(包括口腔、舌下或经皮)、阴道或肠胃外(包括皮下、肌肉内、静脉或皮内)途径。IV施用可能是优选的。此类制剂可通过药学领域已知的任何方法制备，例如通过将活性成分与一种或多种载体或一种或多种赋形剂结合。
适于口服施用的药物制剂可呈现为离散单元，例如胶囊或片剂；粉末或颗粒；水性或非水性液体中的溶液或悬液；可食泡沫或起泡制剂；或水包油液体乳剂或油包水液体乳剂。
适用于经皮施用的药物制剂可呈现为离散贴片，旨在长期与接受者表皮保持紧密接触。例如，活性成分可通过离子导入法从贴片中递送，如Pharmaceutical Research，3(6)，318(1986)中所述。
适于局部施用的药物制剂可配制为软膏、乳膏、悬液、洗剂、粉末、溶液、糊剂、凝胶、喷雾剂、气溶胶或油。
对于眼部或其他外部组织(例如口腔和皮肤)的施用，优选将制剂作为局部软膏或乳膏应用。当配制于软膏中时，活性成分可与石蜡或水溶性软膏基质一起使用。作为选择，活性成分可以与水包油乳膏基质或油包水基质配制成乳膏。
适于眼局部施用的药物制剂包括滴眼液，其中活性成分溶解或悬浮在合适的载体中，尤其是水性溶剂中。
适于口腔局部施用的药物制剂包括含片、锭剂和漱口液。
适于直肠施用的药物制剂可呈现为栓剂或灌肠剂。
适于鼻腔施用的药物制剂(其中载体为固体)包括粒径例如为在20微米至500微米范围内的粗粉，其以吸食鼻烟的方式施用，即，从靠近鼻子的粉末容器中通过鼻道快速吸入。载体为液体、作为鼻喷雾剂或滴鼻剂施用的合适制剂包括活性成分的水性溶液或油溶液。
适于通过吸入施用的药物制剂包括细颗粒粉尘或薄雾，其可通过各种类型的计量剂量的加压气溶胶、雾化器或吹入器来产生。
适于阴道施用的药物制剂可呈现为阴道栓剂、卫生棉条、乳膏、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾制剂。
适于肠胃外施用的药物制剂包括水性和非水性无菌注射溶液，其可含有：抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与预期接受者的血液等渗的溶质；以及可包含悬浮剂和增稠剂的水性和非水性无菌悬液。制剂可存在于单位剂量或多剂量容器，例如密封安瓿和小瓶，并可在冷冻干燥(冻干)条件下储存，在立即使用前仅需添加无菌液体载体，例如注射用水。可由无菌粉末、颗粒和片剂制备临时注射溶液和悬液。
除了本发明的分子外，本发明的药物组合物还可包含一种或多种其他治疗活性剂。
在一些实施方式中，活性药物浓缩物的制剂可包含药学上可接受的渗透剂、缓冲剂和药学上可接受的表面活性剂。
可选择地，制剂可包含活性成分加磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠、聚山梨酯80或聚山梨酯20(使搅拌诱导的聚集风险最小化的表面活性剂)和水(USP/Ph.Eur)，可选地将pH调整至约6.0至7.0，例如约6.5。
优选的单位剂量制剂是指含有如上文所述的每日剂量或亚剂量或其适当部分的活性成分的制剂。
应当理解，除了上述特别提到的成分之外，考虑到所讨论的制剂的类型，制剂还可包含本领域常规的其他试剂，例如，适于口服施用的那些可包括调味剂。
在一些实施方式中，药物组合物可以包含额外的治疗活性剂。
本发明还提供制备药物组合物的方法，该方法包括将本发明的抗原结合分子与一种或多种药学上可接受的赋形剂一起配制。
本发明还提供了包含本发明的抗原结合分子的试剂盒。该试剂盒可包含额外的治疗活性剂。在一些实施方式中，该试剂盒可以包括使用说明。
可与本发明的抗原结合分子组合使用的额外的治疗活性剂包括，例如，抗炎剂或免疫调节剂。
治疗方法
本发明的抗原结合分子可用于预防和/或治疗BDCA-2(CLEC4C)介导的病症或疾病，特别是炎性病症或疾病。因此，本发明的该方面还包括治疗对象的BDCA-2(CLEC4C)介导的病症或疾病(例如炎性病症或疾病)的方法，该方法包括向对象施用本发明的抗原结合分子。因此，本发明还扩展到本发明的抗原结合分子在制造用于治疗和/或预防BDCA-2(CLEC4C)介导的病症或疾病(例如炎性病症或疾病)的药物中的用途，以及本发明的抗原结合分子在预防和/或治疗此类状况中的用途。
治疗方法可以是用于人或动物对象，并且本发明同样延伸到用于人类医学和/或兽医学二者中的用途。本发明的抗原结合分子优选以“治疗有效量”施用于个体，这足以显示对个体的益处。如本文所用，“治疗”包括可使人或非人动物(优选哺乳动物)受益的任何方案。治疗可以针对现有的状况，也可以是预防性的(预防性治疗)。
如本文所用，术语“治疗有效量”是指当根据治疗给药方案施用于患有或易患疾病和/或状况的群体时足以治疗此类疾病和/或状况的(药剂或药物组合物的)量。治疗有效量是使疾病、病症和/或状况的一种或多种症状的发生率和/或严重性降低、稳定和/或延迟发作的量。本领域普通技术人员将理解，“治疗有效量”实际上并不需要在特定对象中实现成功治疗。
在一个实施方式中，本发明的抗原结合分子用于炎症、炎性疾病，包括自身免疫疾病。在一些实施方式中，本发明的抗原结合分子用于治疗系统性硬化症、纤维化(例如皮肤纤维化)、寻常型天疱疮、系统性红斑狼疮(SLE)、皮肤狼疮、盘状狼疮、狼疮性肾炎、多发性肌炎和皮肌炎、银屑病、类风湿性关节炎、格雷夫斯病、硬斑病、炎性肠病、硬斑病、I型糖尿病、干燥病和桥本病。如本文所用，“炎性肠病”(IBD)涉及结肠和小肠的炎症状况。特别感兴趣的是治疗寻常型天疱疮、系统性硬化症、狼疮和干燥病。
根据所治疗的病症，本发明的抗原结合分子可以与其他药物活性组分组合使用，以同时、单独或顺序使用。例如，当治疗炎性疾病或病症时，本发明的抗原结合分子可以与抗炎剂组合使用。合适的抗炎剂包括非甾体抗炎药(NSAIDS)和类固醇。NSAIDS可能是优选的，包括但不限于水杨酸盐(例如阿司匹林(乙酰水杨酸)、二氟尼柳、水杨酸、水杨酰水杨酸)、丙酸衍生物(布洛芬、右旋布洛芬、萘普生)、乙酸衍生物(茚甲新、双氯芬酸)、烯醇酸衍生物、邻氨基苯甲酸衍生物(芬那酸盐)、选择性COX-2抑制剂和磺胺类药物。
当治疗免疫介导的病症或疾病时，可以使用免疫抑制剂，例如糖皮质激素、细胞抑制剂(例如烷化剂、抗代谢物、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤、巯基嘌呤或细胞毒性抗生素)。与GvHD特别相关的是糖皮质激素，例如皮质醇、可的松、强的松、强的松龙、甲基强的松龙、地塞米松、倍他米松、曲安西龙、倍氯米松、氟氢可的松、脱氧皮质酮和醛固酮。
期望与本发明的抗原结合分子组合使用的其他额外的组分包括TNF抑制剂、IL-12抑制剂、IL-23抑制剂和α4β7整联蛋白抑制剂。抑制剂本身可以是抗原结合分子，例如抗体，优选单克隆抗体。
合适的TNF抑制剂包括英夫利昔单抗(Remicade)、阿达木单抗(Humira)、赛妥珠单抗(Cimzia)和戈利木单抗(Simponi)。合适的IL-12和IL-23抑制剂包括优特克单抗(Stelara)，它是IL-12和IL-23的抑制剂。合适的α4β7整合素抑制剂包括维多珠单抗(Entyvio)。
本发明的药物组合物可以配制成包括一种或多种额外的药物活性组分，例如上面列出的那些。本发明的抗原结合分子可以作为试剂盒的一部分提供。这样的试剂盒可以包括使用说明和/或额外的药物活性组分。抗原结合分子和额外的药物活性组分可以分开设置在试剂盒内，或者在一些实施方式中，抗原结合分子和额外的药物活性组分可以一起配制。
在本发明的一个实施方式中，提供了一种与BDCA-2(CLEC4C)特异性结合的抗体，特别是单克隆抗体。抗体选自由以下组成的组的：3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01。这些抗体具有用于治疗炎性疾病(包括IBD)的用途。
在一个实施方式中，本发明提供与人BDCA-2(CLEC4C)的表位特异性结合的抗原结合分子或其片段或变体在治疗以下疾病中的用途：系统性硬化症、纤维化(例如皮肤纤维化)、寻常型天疱疮、系统性红斑狼疮(SLE)、皮肤狼疮、盘状狼疮、狼疮性肾炎、多发性肌炎和皮肌炎、银屑病、类风湿性关节炎、格雷夫斯病、硬斑病、炎性肠病、硬斑病、I型糖尿病、干燥病和桥本病，其中该抗原结合分子选自3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01。如本文所用，“炎性肠病”(IBD)涉及结肠和小肠的炎症状况。特别感兴趣的是治疗寻常型天疱疮、系统性硬化症、狼疮和干燥病。
因此，本发明的这个方面还扩展到治疗炎性肠病的方法，该方法包括向对象施用本发明的抗原结合分子。在一个实施方式中，炎性肠病可以是克罗恩病。在一个实施方式中，炎性肠病可以是溃疡性结肠炎。在可选的实施方式中，本发明可被视为提供本发明的抗原结合分子在制备用于治疗炎性肠病的药物中的用途。在一个实施方式中，炎性肠病可以是克罗恩病。在一个实施方式中，炎性肠病可以是溃疡性结肠炎。
现在将参考许多具体实施例进一步描述本发明，这些具体实施例是为了说明的目的而呈现的并且不应被解释为限制本发明的范围。
实施例
BDCA-2的克隆和表达
用BsmI和SbfI消化大约2μg的含有SEQ ID NO：85或SEQ ID NO：87的GeneArt盒，并用Qiagen凝胶提取试剂盒纯化消化物凝胶。使用T4连接酶将插入物连接到pMQRtg中，然后在化学感受态大肠杆菌XL1-蓝色细胞中转化连接混合物(～25ng运载体)。进行过夜培养(每个构建体4个克隆)以进行小量制备，然后进行序列验证和甘油储液的制备。使用Sigma无内毒素大提试剂盒制备1个经过序列验证的克隆的无内毒素质粒DNA。
根据制造商的说明，使用Polyplus FectoPRO DNA转染试剂将每种质粒DNA(hIgG1-Fc-hBDCA-2或His-hBDCA-2)转染到500ml的HEK293F细胞中。在第5天收获培养基，并使用MabSelect SuRe蛋白A亲和层析纯化Fc-hBDCA-2，使用Ni-NTA琼脂糖树脂纯化His-hBDCA-2。通过透析将洗脱的级分缓冲至磷酸盐缓冲盐水(PBS)，过滤灭菌(0.2μM)并通过A280分析浓度。
用人和食蟹猴BDCA-2构建体转染U937细胞
通过KpnI/NotI将人BDCA-2(SEQ ID NO：81)或食蟹猴BDCA-2(SEQ ID NO：83)克隆到pCDNA3.1(+)表达载体中。根据制造商的说明，使用Lipofectamine 2000转染试剂(Invitrogen，11668019)用质粒转染0.5×106个U937细胞(ECACC 85011440)。24小时后，使用FITC偶联的小鼠抗BDCA-2抗体(Miltenyi Biotec目录号130-090-510)通过流式细胞术测定来测定转染和未转染细胞的人和食蟹猴BDCA-2的细胞表面表达。通过亚克隆程序分离高表达阳性BDCA-2细胞。
免疫
用100ug人BDCA-2-Fc(SEQ ID NO：88)的弗氏完全佐剂溶液s.c免疫小鼠(C3H)，然后在第22天、第43天和第78天进行3次加强i.p.注射人BDCA-2-Fc。在第54天和第89天取血用于分析抗BDCA-2抗体滴度。然后使两只抗体滴度最高的小鼠在第116天接受80ug人BDCA-2-His，然后在第121天收获脾脏并进行电融合。
电融合产生分泌抗BDCA-2单克隆抗体(mAb)的杂交瘤
脾细胞使用来自制造商的方案用gentleMACS分离器(MiltenyiBiotec)从免疫小鼠中分离出来。杂交瘤由30×106个分离的脾细胞与(NS-1)骨髓瘤细胞以1∶1的比例电融合(Techno Center RU Nijmegen)产生。将产生的杂交瘤细胞接种到Dulbecco的MEM F12中的50×96孔细胞培养板中，其中MEM F12不含谷氨酰胺(Gibco目录号21331046)，含有2mMGlutaMax(Gibco目录号10566016)和1×青霉素/链球菌(Gibco目录号15140122)+20％FBS(胎牛血清，Gibco)。加入HAT选择培养基(ThermoFisher目录号21060017)，并将杂交瘤板在37℃下孵育10天至14天。然后通过ELISA和高通量流式细胞术针对BDCA-2和BDCA-2表达细胞系筛选杂交瘤上清液。
浆细胞样树突状细胞(pDC)的分离
使用预填充的LeucosepTM管(GreinerBio-One Ltd，UK)通过密度梯度分离从EDTA抗凝血液中分离外周血单核细胞(PBMC)，并使用Diamond浆细胞样树突状细胞分离试剂盒II(Miltenyi-Biotec，Bergisch Gladbach，德国)遵循制造商的方案从PBMC中富集pDC。简而言之，PDC的分离分两步进行，首先，非pDC用针对谱系特异性抗原的生物素偶联抗体和抗生物素微珠的混合物进行间接磁性标记。使用LD 
柱和磁场MACS分离器(Miltenyi-Biotec)去除非pDC(阴性选择)。然后用pDC特异性CD304(BDCA-4/Neuropilin-1)Diamond微珠对来自第一步的预富集的pDC进行标记，并在MSMACS柱和磁场MACS分离器(Miltenyi-Biotec)上通过阳性选择进行分离。然后对纯化的pDC进行计数并使用针对谱系标志物(VioBlue-CD3、CD14、CD19、CD56和CD11c)的小鼠抗人抗体APC-Vio770 HLA-DR、PerCPVio770-CD123(IL-3R)和PE-CD304(BDCA4)Abs通过FACS染色测试纯度。获得的pDC纯度＞98％。
BDCA-2抗体的单克隆抗体测定(纯化的mAb或杂交瘤)和血浆筛选测定
抗BDCA-2杂交瘤的ELISA
将96孔板用100ng/孔的his-BDCA-2(SEQ ID NO：86)的100ul磷酸盐缓冲盐水(PBS)溶液在4℃下包被过夜。然后将孔用PBST(PBS加0.05％Tween20)洗涤3次，然后在室温(RT)下用1％BSA(Sigma Aldrich A2934)的PBST溶液封闭1小时。将孔用PBST洗涤3次，并在室温下加入50μl杂交瘤上清液以及1％BSA的50μlPBST溶液，进行1小时。将孔用PBST洗涤3次，然后在室温下加入100μl山羊抗小鼠Ig-HRP 1/5000(Thermo Fisher Scientific)的1％BSA的PBST溶液，再持续1小时。将孔用PBST洗涤3次，然后用PBS洗涤3次，然后加入50μlTMB并用50μl 2M H2SO4使反应停止。测量每个孔的450nm吸光度。阴性对照(1％FBS/PBS)和阳性对照(抗BDCA-2，AC144，2μg/ml，Miltenyi Biotec目录号130-090-690；抗BDCA-2BIIB059来自专利WO2014093396)。
流式细胞术测定
U937细胞
收获人和食蟹猴U937细胞并以1×106细胞/ml重悬于1％FBS/PBS中。将50ul每种细胞系加入96孔板的孔中，然后将50ul杂交瘤上清液加入板中，并在冰上避光孵育60分钟。然后将板以350g离心7分钟，弃去上清液并用200ulPBS洗涤孔，随后离心并再次弃去上清液。每孔加入50ul每孔山羊抗小鼠PE(ThermoFisher Scientific)1∶400的1％FBS/PBS溶液，并在室温避光下孵育60分钟。再次洗涤孔并加入30μl/孔2％多聚甲醛(PFA)的PBS溶液，并在4℃下避光孵育20分钟，然后使用高通量IntelliCyt iQue筛选器分析板。
细胞表达靶标的EC50测量
将表达人和食蟹猴BDCA-2的细胞以2×106个细胞/ml重悬于FACS缓冲液(2％FBS/PBS)中，并在96孔V底板中每孔加入50μl细胞悬液。将板离心并弃去上清液。在FACS缓冲液中从50μg/ml(范围50μg/ml至0.024μg/ml)开始，制备12个连续2倍的mAb稀释液，并将25μl的mAb稀释液加入孔中，一式三份。然后将板在室温下孵育60分钟，然后离心并用150μlFACS缓冲液洗涤3次。然后向每个孔中加入25μl山羊抗人PE偶联物(或在AC144的情况下为山羊抗小鼠)，按1∶200稀释于FACS缓冲液中。将板在室温下避光孵育60分钟，离心并用150μlFACS缓冲液洗涤3次。每孔加入25μl 2％PFA2％并4℃避光孵育20分钟，并在iQue筛选器上进行分析。
BDCA2内化
将PBMC(200万个细胞)在96孔圆底板中在RPMI1640+10％FBS+1％PS中维持16小时。在3E5浓度(0.0005μg/ml至10μg/ml)增加的情况下，在有或没有0.5μM ODN2216(Miltenyi Biotec)的情况下培养细胞。将板以300g离心10分钟，用针对谱系标志物的小鼠抗人抗体APC-Vio770 HLA-DR、PerCPVio770-CD123(IL-3R)和PE-CD304和FITC-CD303标记细胞以进行FACS染色。门控策略分析检测到pDC(CD3-18-56-14-CD11C-DR+CD123+CD304+)上细胞表面CD303表达的平均荧光强度变化(用Miltenyi Biotec AC144检测到)。
蛋白质和细胞因子的细胞内检测
来自健康志愿者或来自患者的PBMC是使用预填充的LeucosepTM管(Greiner Bio-One Ltd，UK)通过密度梯度分离从EDTA抗凝血液中制备的。将PBMC(2×106个细胞)在96孔圆底板中在含有10％胎牛血清(FBS)和1％青霉素链霉素(Gibco Laboraories，GrandIsland，NY)的RPMI1640中维持16小时至18小时。在存在或不存在10ug/mL浓度的mAb或对照人IgG1的情况下，将细胞在有或没有1μM ODN2216(TLR9激动剂，MiltenyiBiotec)的情况下培养。然后将板以300g离心10分钟，收集上清液用于血清学研究，然后用针对全部来自BD Biosciences的谱系标志物(UV395-CD3、UV395-CD14、UV395-CD19、UV395-CD56和BV605-CD11c)的全部来自Miltenyi Biotec的小鼠抗人抗体APC-Vio770 HLA-DR、Viogreen-CD123(IL-3R)和FITC-CD304(BDCA4)标记细胞沉淀以进行表面FACS染色。然后将板在4℃下孵育30分钟，然后将200ulFACS缓冲液添加到孔中，将板在5℃下以300g离心10分钟，然后倾析上清液。
使用每孔200ul冰冷的Dulbecco的PBS重复细胞洗涤，并将板以300g离心10分钟。然后将细胞重悬在根据制造商说明制备的200ul Fix/perm缓冲液(e-Biosciences)中，并将板在4℃下孵育30分钟。将板在4℃下再次以300g离心10分钟，然后通过重悬在200ul中将细胞用perma/wash缓冲液(e-Biosciences)洗涤一次，随后在4℃下以300g离心10分钟，倾析上清液并将细胞重悬于100ulperm/wash缓冲液中，并用针对PE-Vio615或APCIFN-I的PEVi770TNF(均来自MiltenyiBiotec)抗体进行标记。将板在4℃下孵育30分钟，然后重悬于200ul perm/wash缓冲液中，并在4℃下以300g离心10分钟。最后，将细胞重悬在FACS缓冲液中进行流式细胞术分析。
pDC或PBMC中抗BDCA-2mAb抑制IFNα和TNFα的功能筛选
当将TLR7或TLR9配体如咪喹莫特(InvivoGen)或ODN(InvivoGen)添加到人外周血单核细胞(PBMC)或纯化的pDC中时，细胞被激活并从pDC中诱导产生IFNα(Dzionek et al.JExp.Med.2001，194：1823-1834)。将抗人BDCA-2mAb对从pDC产生的IFNα的产生抑制用作mAb的功能活性的指标。
在测定中使用纯化的健康pDC(Stemcell)、供体PBMC或SSc PBMC。将50ul细胞(1×104个至2×104个pDC的RPMI1640/10％FBS溶液或1×106个至2×106个PBMC的10％自体血清溶液和1％青霉素链霉素，来自Gibco Laboratories，Grand Island，NY)添加到圆底96孔板的孔中，在37℃、5％CO2下保持1小时。然后加入50ul mAb或杂交瘤上清液，加入或不加入4μM TLR7激动剂(咪喹莫特，Sigma-Aldrich Corp，St.Louis，MO，USA)、1μM TLR8或TLR9激动剂(分别为来自Miltenyi Biotec的ORN和ODN2216)。将板在37℃、5％CO2下孵育16小时，然后使用市售的ELISA试剂盒(PBLAssay Science，Piscataway，NJ，USA)或TNFα(ThermoFisher试剂盒)按照制造商的说明测定无细胞上清液的IFN I水平。阴性对照仅为缓冲液，阳性对照为AC144(Miltenyi Biotec，目录号130-090-690)。
蛋白质和细胞因子的细胞内检测
用针对谱系标志物(UV395-CD3、UV395-CD14、UV395-CD19、UV395-CD56和BV605-CD11c)(BD Biosciences)的小鼠抗人抗体APC-Vio770 HLA-DR、Viogreen-CD123(IL-3R)和FITC-CD304(BDCA4)(Miltenyi Biotec)对来自上述测定的细胞沉淀进行标记以进行表面FACS染色。然后将板在4℃孵育30分钟，随后加入200ul FACS缓冲液并在4℃以300g离心10分钟。倾析上清液并使用200ul冰冷的Dulbecco的PBS洗涤细胞。将细胞沉淀重悬在200ul的Fix/perm缓冲液(e-Biosciences)中，并将板在4℃下孵育30分钟。离心后，将细胞在200ul的perma/wash缓冲液(e-Biosciences)中洗涤一次并再次离心。将剩余的细胞重悬在100ul的perm/wash缓冲液中，并用针对PE-Vio615或APC IFN-I的抗体PE-Vio770 TNF(Miltenyibiotec)进行标记。将板在4℃孵育30分钟，然后重悬于200ul的perm/wash缓冲液中并离心。最后，将细胞重悬在FACS缓冲液中以进行流式细胞术分析。
健康pDC的RNA测序
首先，在有或没有10ug/ml抗BDCA-2mAb的情况下，在RPMI1640加10％FBS+1％PS(未刺激的)、1μM ODN2216中如上所述培养pDC。根据制造商的方案，使用RNeasy minikit(Qiagen，Hilden，Germany)从细胞中提取RNA。使用
RNA-Seq System V2(NuGEN，SanCarlos，USA)扩增来自所有样本的总RNA。简而言之，制备第一链cDNA并用于产生双链cDNA，然后进行
扩增。使用Qubit dsDNA BR分析试剂盒(Thermo Fisher Scientific，Waltham，MA)对cDNA进行定量，并在Tapestation(Agilent，Santaclara，CA，USA)上使用D1000 Screen Tape检查质量。使用Covaris S2超声发生器(Woburn，MA，USA)将所有cDNA进行片段化成200bp大小。通过用于Illumina的
UltraTM DNA Library制备试剂盒(Ipswich，MA，USA)用50ng的cDNA制备文库，无需任何尺寸选择。
使用Tapestation检查最终文库的大小分布，并使用Quant-iTTM PicoGreenTMdsDNA测定试剂盒(Thermo Fisher Scientific)进行定量。所有文库均以10ng的浓度合并，并在Hiseq 3000仪器(Illumina，SanDiego，CA，USA)上测序。使用Illumina bcl2fastq软件对合并的序列数据进行多路分解，从而使读取索引序列中没有错配。使用FastQC软件(Andrews 2010)对Fastq格式的原始配对末端序列数据进行质量检查。
使用Cutadapt软件(Martin 2011)从原始读数中修剪劣质碱基(Phred质量评分＜20)和污染的接头序列。丢弃修剪后少于30个核苷酸的读数和孤立的配对读数。使用剪接-感知STAR比对器(splicing-aware STAR aligner)(Dobin et al.2013)将读数与从UCSC数据库(Kuhn et al.2013)获得的人hg38分析集参考序列进行比对。STAR比对器以2-pass模式运行，已知的剪接点使用Table Browser工具从UCSC数据库的hg38 RefSeq基因注释表获得，以GTF文件格式提供(Karolchik et al.2004)。
使用QualiMap软件(Okonechnikov etal.2015)和Picard工具(Wysokeretal.2013)检查生成的BAM文件格式的比对的质量。使用Picard工具来标记PCR/光学重复比对。使用Samtools软件(Li et al.2009)对BAM文件进行分类和索引，并使用IGV阅读器(Robinson et al.2011)进行可视化。使用Bioconductor Rpackage RSubread(Liaoet al.2013)来用RefSeq hg38转录注释集提取每个转录本的原始测序片段计数。配对末端读数计为单个片段，多映射读数对计为所有等效比对的一部分。
使用中值比法(Anders andHuber2010)对原始计数数据进行文库大小差异的归一化，如在DESeq2 RBioconductor package(Love et al.2014)中实施的。DESeq2还用于执行额外的数据QC步骤和差异表达分析。使用Benjamini-Hochberg多重测试校正计算错误发现率(FDR)。低于5％FDR阈值的基因被认为是差异表达的。使用对数转换的归一化基因表达值作为输入，使用Pheatmap R package(Kolde 2012)将差异表达的基因表达以聚类热图进行可视化。使用1000个最可变基因的表达作为输入，用′prcomp′R函数进行主组分分析(PCA)。使用R Bioconductor package clusterProfiler(Yu et al.2012)和ReactomePA(Yu etal.2016)进行基因富集分析和注释。此外，使用Pathview package(Luo and Brouwer2013)使KEGG(Kanehisa and Goto 2000)通路可视化。
器官型3D皮肤培养物
使用人原代正常真皮成纤维细胞和角质形成细胞(来自白种人女性乳房组织)(Promocell)来生成皮肤样3D培养物。将这些细胞分别在DMEM+10％FBS+I％PS和完全角质形成细胞生长培养基2+1％PS(Promocell)中常规培养，并根据用户指南进行处理。首先，在Falcon细胞培养插件中制备成纤维细胞-胶原培养物，并放入Falcon 6孔深孔TC处理的聚苯乙烯板(BD Biosciences)。这些培养物通过以下方式在冰上制备：通过添加PureCol牛1型胶原(高级基质)，然后添加10×HBSS(ThermoFisher Scientific)(使用NaOH单液滴达到正确的pH值，直到培养基变成粉红色)，然后添加在FBS中的2×105个成纤维细胞，遵循组成比例8∶1∶1。使用冷却的试纸，将2.5ml混合物小心地添加到每个孔中。
将培养物在没有CO2的情况下在37℃下放置2小时。然后将完整的KGMTM角质形成细胞生长培养基BulletKitTM(Lonza)添加到孔中(12.5ml)，在固定的胶原培养物(2.5ml)的顶部，并在37℃和5％CO2下放置过夜。小心地从凝胶中除去培养基，将2×106个角质形成细胞接种在2ml培养基/孔中并放置过夜。通过小心去除所有培养基并将10ml ALI培养基添加到孔的底部，最终将培养物放入气液界面(ALI)。ALI包含完整KGM Lonza培养基，该培养基不含BPE补充剂，添加了50ug/ml抗坏血酸、1mg/mlBSA、10ug/ml转铁蛋白和1.1mM CaCl2(Promocell)。培养物每2天至3天更换一次培养基并放置5天。在第5天，向ALI补充来自如上处理的pDC的上清液(CTR；无TLR9刺激，ODN；TLR9刺激，ODN+AB；TLR9刺激加10ug/ml抗体)以在ODN实验中产生终浓度为6000pg/ml的IFN(通过ELISA测定，上清液大约稀释1∶20)。将培养物放置48小时。进行3mm穿孔活检并收集用于组织学分析。将剩余的培养物收集到1ml的TRIzolTM中并按照所述处理以用于RNA提取。
人pDC激活的异种移植小鼠模型
20只雌性NOD-SCID小鼠，年龄4周至8周，购自Charles River。所有小鼠均按照当地和内政部规定饲养。将小鼠背部剃毛并接受局部Aldara施用(5％，TLR7激动剂咪喹莫特；3M Health Care Limited)。12小时后，第二次施用乳膏并腹膜内(i.p.)注射3E5 mAb(5mg/kg)。12小时后，小鼠接受了2.5×105个pDC的尾静脉内(i.v)注射。再过12小时后对小鼠实施安乐死。使用穿孔活检采集皮肤并处理以用于RNA、FACS和组织学分析。
对于博来霉素诱导的纤维化模型，使用了15只4至8周龄的雌性NOD-SCID小鼠。用PBS将博来霉素(BLM)(Sigma)稀释至200μg/ml。每隔一天一次，将博来霉素或PBS(100μl)皮下注射到雌性小鼠的剃光背部的单个位置，持续3周。接受了人PDc(2.5×105个)的九只小鼠在第0、7和14天以100μl体积i.v注射。从第-1天开始，每5天腹膜内注射2.5mg/kg剂量的3E5 mAb或人IgG(n＝每只小鼠i.p.注射5次)。使用马松三色将胶原染成蓝色，将肌肉染成红色，以确定皮肤样本中的纤维化程度。简而言之，依次使用3种染料；Weigerts铁苏木精用于细胞核，丽春红品红用于肌肉、细胞质和红细胞，甲基蓝用于胶原。在染色间隙，将载玻片在水中洗涤。在添加最终的甲基蓝染料之前，进行了两次磷钨酸孵育。在水冲洗、酒精和二甲苯中脱水后安装载玻片。对于表皮和真皮测量，每种情况在小鼠中按一式三份进行。对于每只小鼠，使用一张20×H&E代表图像进行10次测量。表皮测量是从皮肤部分的顶部到基底膜进行的，而真皮测量也包括直到肌肉层的顶部。
使用Sircol可溶性胶原测定法(Biocolor，Belfast，UK)对可溶性胶原进行定量。从NOD-SCID小鼠获得穿孔活检皮肤样本，并使用M-PER哺乳动物蛋白质提取试剂(ThermoScientific)和两个7mm金属珠对蛋白质进行提取和均质化。然后使用乙酸-胃蛋白酶溶液进一步提取样本。根据制造商的方案分析样本的胶原含量。简而言之，将100μl样本添加到1ml比色试剂中并搅拌30分钟，随后以10000g离心10分钟。使用碱性试剂从沉淀中释放SR染料，并使用酶标仪测量555nm吸光度。使用由胶原参考标准生成的标准曲线计算胶原浓度。针对通过PierceTM BCA蛋白检测试剂盒(Thermo Scientific)计算的总蛋白浓度进行浓度标准化。
从小鼠皮肤、器官型3D皮肤培养物中提取RNA和ISG反应分析
使用TRIzolTM Plus RNA纯化试剂盒(Thermo Fisher Scientific，Waltham，MA)根据制造商的说明提取RNA。简言之，使用两个7mm金属珠和TissueLyser LT(Qiagen)在TRIzol中使RNA随后固定的小鼠皮肤均质化。离心匀浆以分离含有RNA的水相，然后通过PureLink柱进一步纯化，并通过DNase(Life Technologies，Carlsbad，CA，USA)去除基因组DNA。使用RT2 First Strand试剂盒(Qiagen)将洗脱的RNA转化为cDNA。接下来，将cDNA与适当的RT2 SYBR Green Mastermix(Qiagen)混合。执行小鼠IFN I RT2 Profiler PCR Array(Qiagen)并使用ΔΔCT方法确定相对表达，并根据制造商的指导对5个管家基因进行标准化。
组织学
来自小鼠、器官型3D皮肤培养物或患者的3毫米穿孔活检物被福尔马林固定并包埋在石蜡中。切出5μM切片并进行苏木精和伊红染色。使用10mM pH6.0柠檬酸钠进行抗原修复，切片以1∶1000稀释度用抗MX1抗体(abcam，Cambridge，UK)染色，然后用ImmPRESSTM(过氧化物酶)聚合物抗兔IgG试剂(Vector Laboratories，Burlingame，USA)染色，并用3，3-二氨基联苯胺(DAB)(Vector Laboratories)可视化。进行小鼠脾脏、健康皮肤和阴性染色用于对照。使用带有MicroFire(Optronics)的Olympus BX50进行显微分析，并使用StereoInvestigator软件以20倍放大率捕获图像。
对小鼠皮肤样本进行FACS
在Hanks的平衡盐培养基(Sigma-Aldrich Corp)中，使用1mg/ml胶原酶D(Roche，Basel，Switzerland)、0.5mg/ml分散酶(Roche)和0.1mg/ml DNase-I(Invitrogen，Carlsbad，CA，USA)对小鼠皮肤样本进行酶促消化以释放细胞。对于FACS分析，将释放的细胞用针对人CD45、CD123、CD304的抗体(Miltenyi Biotec)染色。门控策略使用氨基放线菌素D(7-AAD)(BD Biosciences)和对人CD45+CD123+CD304+的连续门控排除死细胞。在LSRII4激光流式细胞仪(BD Biosciences)上进行数据采集，并使用FACS DIVA软件(BDBiosciences)进行分析。
BIAcore对人源化mAb的亲和力分析
BIAcoreT200与pH7.4的BIAcore运行缓冲液(HBS-EP)一起使用。根据制造商的说明，使用5μg/ml的huBDCA2-Fc和BIAcore EDC/NHS试剂盒将692RU的huBDCA2-Fc固定在CM5芯片(CFJB156)上。注射人源化mAb的两倍稀释液，从200nM开始下至3.1nM，接触时间为60秒，在25℃下以30ul/min或60ul/min的流速注射，然后用BIAcore缓冲液进行5分钟的解离洗涤。芯片的再生通过在样本之间两次注射10μl的10mM NaOH/1M NaCl来实现的。使用BIAcore T200软件计算Ka(1/Ms)、Kd(1/s)和KD(nM)。
人源化mAb的ELISA测定
将每孔100ul的0.5μg/m1人BDCA2-Fc的PBS溶液(pH7.4)4℃孵育过夜。然后用PBST(PBS+0.05％Tween20)将孔洗涤3次，然后用250ul的4％脱脂奶(Marvel，目录号3023033，生产批号7169)的PBS溶液在室温下封闭120分钟。洗涤孔，然后在pH7.4的1％脱脂奶PBS缓冲液中用每孔100ul的3倍稀释度(从1μg/ml到0.001μg/ml)的人源化mAb孵育。在室温下60分钟后，将孔在PBST中洗涤3次，并添加100ul的小鼠抗人IgG(抗CH1-HRP；1∶1000，BDPharmigen，目录号555788)或驴抗小鼠IgG(抗小鼠IgGHRP，1∶5000稀释度，JacksonImmunoResearch，目录号715-035-150)的1％脱脂奶PBS溶液。使用TMB(ThermoFisher，目录号00-4201-56)以100ul/孔进行显影，使用100μl/孔H2SO4(cat.nr.J/8430/15，lot nr.)终止反应，并读取450nm吸光度。使用Graphpad Prism软件计算EC50。在测定中使用阴性对照(1％脱脂奶/PBS)和阳性对照(抗BDCA-2，AC144，Miltenyi Biotec，目录号130-090-690)。
嵌合型mAb的制备
从GeneWiz(GeneWiz France Ltd)购买含有编码人IgG1恒定结构域(哺乳动物密码子优化)的合成基因的构建体，其具有用于正确克隆到哺乳动物表达运载体中的DNA侧翼区域。根据制造商的说明使DNA复原并转化到大肠杆菌TOP10化学感受态细胞(C Cell)中。将编码人IgG1恒定结构域的DNA插入片段从构建体中消化出来并连接到哺乳动物表达运载体中。人IgG1表达运载体的正确生成通过DNA序列分析(如下)得到证实。将编码四种抗BDCA-2小鼠Fab(下)的可变结构域的合成基因重新克隆到包含人IgG1 HC和人CL结构域的哺乳动物表达运载体中。根据制造商的说明使用ExpiCHO-S表达系统(ThermoFisher，目录号A29133)。
使用HiTrap MabSelect SuRe(Sigma Aldrich)5ml柱在
pure 25系统(GEHealthcare Life Sciences)中纯化产生的嵌合型mAb人IgG1分子，并使用pH3.0的0.1M柠檬酸钠洗脱，并将1.0ml级分收集在含有0.1ml Tris-HClpH9.0的管中以中和。将含有嵌合型mAb的级分合并且在
中使用HiTrap脱盐柱进行缓冲液交换到PBS(磷酸盐缓冲盐水)中。使用微量分光光度计通过测量280nm光密度来确定蛋白质浓度，并通过SDS-PAGE分析纯化的嵌合型mAb。
人源化mAb的制备
合成了mAb 28B01VHVL(VH1-3；VK1-2)(SEQ ID NO：75和SEQ ID NO：71)和mAb3E05VHVL(VH1-4；VK1-4)(SEQ ID NQ：5和SEQ ID NO：1的野生型和变体VH和VL序列)并优化密码子以在CHO细胞中表达，亚克隆到重链和轻链表达运载体中，并在CHO转染前使用质粒中提DNA进行序列验证以确认身份。使用的方法与嵌合型mAb表达和纯化所描述的方法相同。
统计分析
使用GraphPad Prism 7软件(GraphPad 50 Software，Inc.，LaJolla，CA，USA)进行统计分析。使用皮尔森(Pearson)相关系数来分析所有研究参数之间的关联。使用单向方差分析结合Mann-Whitney检验或非配对双尾t检验来评估组与组之间的统计学显著差异。数据表示为平均值±标准误差(SE)。P值小于0.05时考虑显著性。
3E5的表位作图
为了表征BDCA2(CLEC4C)/3E5(变体12)复合物，使用配备有CovalXHM4交互模块的Autoflex II MALDI ToF ToFF质谱仪(Bruker)进行测量。CovalX交互模块包含检测系统，旨在优化高达2MDa的检测，具有纳摩尔级灵敏度。初步实验确定，使用高质量MALDI质谱和化学交联，我们没有检测到任何3E5或CLEC4C多聚体的非共价聚集体。为了表征CLEC4C，我们将样本进行胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、Asp-N、弹性蛋白酶和嗜热菌蛋白酶蛋白水解，然后进行nLC-LTQ-Orbitrap MS/MS分析。对于表征，使用与LTQ-Orbitrap质谱仪(ThermoScientific)接轨的nLC Ultimate 3000-RSLC系统。样本制备如下：
还原烷基化
将10μL的CLEC4C(15.11μM)与1μL的DSS d0/d12(2mg/mL；DMF)混合，然后室温孵育180分钟。孵育后，加入1μL碳酸氢铵(20mM终浓度)终止反应，然后室温孵育1小时。然后使用speedvac干燥溶液，之后添加H2O 8M尿素悬液(10μL)。混合后，向溶液中加入1μl DTT(500mM)。然后将混合物在37℃下孵育1小时。孵育后，加入1μl碘乙酰胺(1M)，然后在暗室中室温孵育1小时。孵育后，加入100μl蛋白水解缓冲液。胰蛋白酶缓冲液含有50mM AmbicpH8.5、5％乙腈，胰凝乳蛋白酶缓冲液含有TrisHcl 100mM、CaCL2 10mM pH7.8；ASP-N缓冲液含有磷酸盐缓冲液50MM pH7.8；弹性蛋白酶缓冲液含有Tris Hcl 50mM pH8.0；以及嗜热菌蛋白酶缓冲液含有Tris Hcl 50mM、CaCL2 0.5mM pH9.0。
胰蛋白酶蛋白水解
将100μl还原/烷基化CLEC4C与1μl胰蛋白酶(Roche Diagnostic)以1/100的比例混合。使蛋白水解混合物在37℃下孵育过夜。
胰凝乳蛋白酶蛋白水解
将100μl还原/烷基化CLEC4C与0.5μl胰凝乳蛋白酶(Roche Diagnostic)以1/200的比例混合。使蛋白水解混合物在25℃下孵育过夜。
ASP-N蛋白水解
将100μl还原/烷基化CLEC4C与0.5μl ASP-N(Roche Diagnostic)以1/200的比例混合。使蛋白水解混合物在37℃下孵育过夜。
弹性蛋白酶蛋白水解
将100μl还原/烷基化CLEC4C与1μl弹性蛋白酶(Roche Diagnostic)以1/100的比例混合。使蛋白水解混合物在37℃下孵育过夜。
嗜热菌蛋白酶蛋白水解
将100μl还原/烷基化CLEC4C与2μl嗜热菌蛋白酶(Roche Diagnostic)以1/50的比例混合。使蛋白水解混合物在70℃下孵育过夜。消化后，将最终为1％的甲酸添加到溶液中。
蛋白水解后，将蛋白水解产生的10μl肽溶液加载到纳米液相色谱系统(Ultimate3000-RSLC)上，然后进行LTQ-Orbitrap MS分析。
结果：胰蛋白酶蛋白水解：在CLEC4C的序列中识别出17种肽，占序列的75.74％。胰凝乳蛋白酶蛋白水解：在CLEC4C的序列中识别出33种肽，占序列的98.81％。ASP-N蛋白水解：在CLEC4C的序列中没有识别出肽。弹性蛋白酶蛋白水解：在CLEC4C的序列中识别出21种肽，占序列的91.72％。嗜热菌蛋白酶蛋白水解：在CLEC4C的序列中识别出28种肽，占序列的83.43％。
基于获得的结果，我们设计了胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、ASP-N、弹性蛋白酶和嗜热菌蛋白酶肽的重叠作图(图13)。结合胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶和嗜热菌蛋白酶蛋白水解的肽，覆盖了100％的序列。
分子界面的表征
为了以高分辨率确定CLEC4C/3E5复合物的表位，将蛋白质复合物与氘化交联剂一起孵育并进行多酶切割。富集交联肽后，通过高分辨率质谱(nLC-LTQ-Orbitrap MS)分析样本，并使用XQuest和Stavrox软件分析生成的数据。
样本制备：
制备以下浓度的CLEC4C/3E5的混合物：
| <u>CLEC4C</u> | <u>3E5</u> | CLEC4C/3E5 | |
| <u>混合物</u> | 体积 浓度 | 体积 浓度 | 体积 浓度 |
| CLEC4C/3E5 | 10μl 5μM | 10μl 2.5μM | 20μl 2.5μM/1.25μM |
还原烷基化
将制备的20μL的CLEC4C/3E5混合物与2μL的DSS d0/d12(2mg/mL；DMF)混合，然后室温孵育180分钟。孵育后，加入1μL碳酸氢铵(20mM终浓度)终止反应，然后室温孵育1小时。然后使用speedvac干燥溶液，之后添加H2O 8M尿素悬液(20μL)。混合后，向溶液中加入2μlDTT(500mM)。然后将混合物在37℃下孵育1小时。孵育后，加入2μl碘乙酰胺(1M)，然后在暗室中室温孵育1小时。孵育后，加入80μl蛋白水解缓冲液。胰蛋白酶缓冲液含有50mM AmbicpH8.5、5％乙腈，胰凝乳蛋白酶缓冲液含有Tris Hcl 100mM、CaCl2 10mM pH7.8；ASP-N缓冲液含有磷酸盐缓冲液50MM pH7.8；弹性蛋白酶缓冲液含有Tris Hcl 50mM pH8.0；以及嗜热菌蛋白酶缓冲液含有Tris Hcl 50mM、CaCl2 0.5mM pH9.0。
胰蛋白酶蛋白水解
将100μl还原/烷基化CLEC4C/3E5混合物与1.12μl胰蛋白酶(Roche Diagnostic)以1/100的比例混合。使蛋白水解混合物在37℃下孵育过夜。
胰凝乳蛋白酶蛋白水解
将100μl还原/烷基化CLEC4C/3E5混合物与0.56μl胰凝乳蛋白酶(RocheDiagnostic)以1/200的比例混合。使蛋白水解混合物在25℃下孵育过夜。
ASP-N蛋白水解
将100μl还原/烷基化CLEC4C/3E5混合物与0.56μlASP-N(Roche Diagnostic)以1/200的比例混合。使蛋白水解混合物在37℃下孵育过夜。
弹性蛋白酶蛋白水解
将100μl还原/烷基化CLEC4C/3E5混合物与1.12μl弹性蛋白酶(RocheDiagnostic)以1/100的比例混合。使蛋白水解混合物在37℃下孵育过夜。
嗜热菌蛋白酶蛋白水解
将100μl还原/烷基化CLEC4C/3E5混合物与2.24μl嗜热菌蛋白酶(RocheDiagnostic)以1/50的比例混合。使蛋白水解混合物在70℃下孵育过夜。消化后，将最终为1％的甲酸添加到溶液中。
结果
杂交瘤筛选
最初通过ELISA筛选来自96孔板的杂交瘤，鉴定出99个阳性，并在人和食蟹猴BDCA-2U937细胞上进一步筛选。从第二次筛选中鉴定出34个阳性，将培养物放大至24孔板，从培养基中纯化小鼠IgG并重新测试。在这些阳性克隆中，选择了8个与pDC选择性结合的克隆。在这些阳性克隆中，5个显示出抑制ODN刺激的IFNα释放。
将编码所选五种mAb(3E05、25E06、21E06、28B01和24F3)的重链和轻链的基因克隆到人IgG1运载体中，进行表达、纯化并重新测试。5种mAb中的4种在细胞结合测定中显示出与人和食蟹猴BDCA-2的良好结合(图1)，而mAb 24F3显示出弱结合(数据未显示)并不选择用于进一步测定。嵌合型mAb(3E05、28B01、21E06和25E06)与人pDC结合(图2)，而mAb 3E05和28B01抑制IFNα从ODN刺激的pDC释放，mAb 21E06和25E06仅观察到弱抑制。
制备4种嵌合型mAb的系列稀释液(50ug/ml至0.25ug/ml)，并与表达人和食蟹猴BDCA-2的细胞一起孵育。染色后，测量细胞的中值荧光强度(MFI)，并将稀释系列的数据点在标准化后拟合到S形曲线上，以确定EC50值。表3总结了结果并显示出mAb 28B01对食蟹猴和人BDCA-2具有相同的EC50值(表4)，而其他3个克隆对人BDCA-2比食蟹猴BDCA-2的EC50更好。
表3.嵌合型mAb在细胞表达的人和食蟹猴BDCA-2上的EC50测定。
阳性对照为：AC144(Miltenyi Biote)
还测试了嵌合型mAb抑制ODN刺激IFNα从pDC释放的能力(图3A)。在1ug/ml的浓度下，嵌合型mAb 3E05将IFNα抑制到与阳性对照AC144 mAb相似的基线水平。尽管嵌合型mAb28B01显示出对IFNα的抑制作用，但嵌合型mAb 21E06和25E06观察到非常弱的抑制作用。进一步的实验描述了嵌合型mAb 28B01和3E05抑制TLR9(图3B)、TLR8(图3C)和TLR7(图3D)激动剂刺激的IFNαα从健康PBMC释放的作用。两种mAb在完全抑制TLR9(ODN)或TLR7(咪喹莫特)刺激的IFNα从pDC释放方面非常有效，而TLR8(ORN，图3C)未观察到刺激，这表明pDC不具有TLR8受体。
与健康pDC的结果相似，嵌合型mAb 3E05和28B01也能够完全抑制来自SSc患者的PBMC制剂中从ODN刺激的pDC分泌的IFNαα(表4)。
表4.嵌合抗BDCA-2mAb抑制来自SSc患者的ODN刺激的PBMC的IFNa的作用。
测试10ug/mlmAb以抑制来自SScPBMC(500K细胞；n＝3名患者)的ODN诱导的IFNα，对照是缓冲液(无Ab)。
嵌合型mAb 28B01和3E05还抑制ODN刺激的pDC IFNα和TNFα的细胞内水平(如图4A所示)以及ODN诱导的pDC分泌的TNFα水平(图4B)。
选择mAb 3E05和28B01进行人源化。所有人源化28B01和3E05变体与pDC结合(图5)并抑制ODN刺激的IFNα从pDC释放(图6A和图6B)。从这些单剂量测定中观察到人源化mAb构建体的中和活性之间没有重大差异，并且它们的活性也与野生型mAb(28B01VHVL和3E05VHVL)相当。
在EC50(BDCA-2ELISA)和BIAcore分析方面对3E05人源化mAb进行了进一步分析，结果显示在表5和表6中。
表5.人源化3E05 mAb的EC50(ELISA)测定。
野生型mAb是3E05VHVL(SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：1)以及阳性对照是抗BDCA-2mAbAC144(Miltenyi Biotec)。
表6.人源化3E05 mAb的BIAcore亲和力测定。
野生型亲本mAb是3E05，而使用的阳性对照mAb是抗BDCA-2mAb、AC144(Mi1tenyiBiotec)和BIIB059(来自专利WO2014093396)。
ELISA EC50分析表明，16种3E05人源化mAb中的13种具有相似的EC50，并且在该测定中与阳性对照mAb AC144相当。这种ELISA检测的形式可能处于灵敏度的极限。然而，BIAcore亲和力分析是一种更为敏感的技术，它揭示了一些关于人源化mAb 3E05变体的令人惊讶的结果。虽然野生型3E05 mAb(亲本3E05)具有350pM的可测量KD，但大多数人源化mAb变体(13/16)的KD显著改善为＜10pM(该值处于BIAcore仪器的检测极限)。抗BDCA-23E5人源化变体的KD也远比比较物mAb AC144和BIIB059得到改善。
野生型3E05和人源化变体之间的主要区别是VL中框架2(与CDR2相邻)中的半胱氨酸53替换了VL1、VL2和VL4中的丝氨酸和VL3中的酪氨酸。一般来说，在EC50分析方面，VL3C53Y替换比C53S差。
野生型mAb中的游离半胱氨酸残基具有修饰和聚集风险，并且经常在抗原接触中发现。半胱氨酸替换为丝氨酸部分保留了侧链特征，而替换为种系酪氨酸(VL3)可能会影响抗原结合。尽管有VH修饰，但值得注意的是，VL1、VL2和VL4构建体通常对BDCA-2具有非常高的亲和力(KD<10pM)。3E05人源化的构建体：3E05_var1、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var6、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var12、3E05_var13、3E05_var14、3E05_var15、3E05_var16的亲和力比亲本野生型3E05以及抗BDCA-2mAb AC144高出＞100倍。
选择三种mAb(3E05_var_6、3E05_var_12和3E05_var_14)来通过生物测定进行进一步分析：来自健康供体的ODN刺激的PBMC的IFNα的抑制。完成了对不同供体PBMC的四次单独测定，通过将三参数逻辑曲线拟合到标准化数据来计算mAb的IC50值和IC90值(表7)。IC90是完全抑制人PBMC产生IFNα所需的mAb浓度的最小值。
表7A.主要人源化mAb对IFNα的抑制。
在mAb(0.001ug/ml至10ug/m1)存在下，用ODN刺激健康供体PBMC，并在37℃过夜孵育后通过ELISA测量上清液中的IFNα。阳性对照mAb是抗BDCA-2mAb、AC144(MiltenyiBiotec)和BIIB059(来自专利WO2014093396)。平均值±SEM。
在表7A中，AC 144和BIIB059用作比较物阳性对照mAb。根据测量由IC50值显见3E05_var_6、3E05_var_12和3E05_var_14具有比比较物mAb AC144(12-18倍)和BIIB059(7-10倍)更高的IFNα产生抑制活性(表7A)。此外，根据IC90值，完全抑制IFNα产生的3E05_var_6、3E05_var_12和3E05var_14的浓度低于比较物mAb AC144和BIIB059的浓度，分别为约12-19倍和7-10倍(表7A)。据报道，在SLE中，少量的IFNα会导致病理恶化，而完全抑制IFNα对于预防和治疗SLE和可能的其他IFNα驱动的疾病很重要(Mathian et al.J.Immunology2005；174：2499,2005)。因此，3E05_var_6、3E05_var_12和3E05_var_14对IFN的这种抑制水平在治疗应用上是非常令人鼓舞的。
表7B.以nM为单位的IC50值和IC90值。
为了确定3E5是否诱导BDCA2内化，我们开始测量BDCA2(CD303)的平均荧光强度(MFI)，如通过在PBMC内门控的pDC上的结合AC144测量并使用BDCA4 mAb(CD304)的MFI(pDC的另一个标志物)对pDC细胞数进行标准化。用3E5处理导致pDC上BDCA2表面表达的剂量依赖性降低，表明BDCA2内化，并且在14ng/ml的3E5下，BDCA2内化达到饱和。Jahn等人已经表明BDCA2内化和抑制IFN分泌依赖于受体与mAb的Fc区的交联，并且抗BDCA2 Fab片段的单价结合不能抑制ODN诱导的IFN分泌(Jahn，PS.，et al.，Cell Immunol，2010.265：15-22)。为了确定3E5抑制机制是否依赖于Fc交联，我们生成了3E5的消化的Fab片段，并在与表7A中相同的实验设置中量化和使用纯化的Fab。3E5 Fab能够以剂量依赖性方式减少IFN分泌，IC50为18nM。Fab的IC50和IC90是含Fc的完整IgG等效物的约100倍。这不同于现有技术的抗BDCA-2抗体，包括AC144(Miltenyi Biotec，目录号130090690)和BIIB059(Biogen)(Jahn，PS.，et al.，Cell Immunol，2010.265：15-22and US9902775)。
转录组分析已广泛用于描述免疫细胞群，包括DC亚集和pDC亚群(Alculumbre etal.Nat Immunol.2018；19：63-75)。对三个独立的有和没有ODN刺激的人pDC供体(Lineage-HLA-DR+CD123+CD304+)进行了RNA-seq分析，以确定TLR9对全局pDC的影响，并描述除了减少IFN分泌之外，BDCA-2靶向还如何影响pDC。转录组分析揭示了无刺激和ODN刺激的pDC之间的168个差异表达基因(DEG，倍数变化＞2，FDR＜1％)(图7A)。对这组DEG的通路分析在富集的生物过程的顶部确定了参与“对病毒的反应”、对其他生物体的防御反应和“对病毒的防御反应”的基因(图7A)。在涉及这些通路的基因中，我们看到许多IFN相关基因的上调，通路分析还显示JAK/STAT、IL-6、NF-kB和血管生成通路是TLR刺激上调的主要生物学过程(图7A)。用mAb 3E5预处理(15分钟)阻止了大多数DEG的上调，这驱动了类似于无刺激的pDC的表达谱(图7B)。除了抑制TLR9诱导的IFN基因表达，正如预期的那样，令人惊讶的是，确定了3E5抑制了许多参与以下的基因：淋巴细胞和骨髓迁移(CXCL9、CCL3L3、CCL3L1、CCL5和CXCL8)；炎症介质(MAP3K8、IL6和PTGS2)；免疫反应(CD274、RNF115、SLAMF7和HLA-F)；以及血管生成和纤维化(ENPP2和ITGB8)。
有趣的是，CD274表达是TLR9诱导的并且依赖于BDCA-2靶向，这支持了先前的观察结果，即12-18小时流感刺激主要产生了为CD274+的pDC的P1亚群(约66％)和P2亚群(19％)(Alculumbre et al.NatImmunol.2018；19：63-75)。IL6产生也是ODN诱导的且依赖于BDCA-2靶向，并且已显示出与B细胞分化所需的IFN分泌具有相关和协同作用(JegoImmunity.2003；19：225-34)。
越来越多的证据表明，SSc患者在皮肤内具有诱导的IFN特征、pDC皮肤浸润和慢性激活的循环pDC(Brkic et al.Ann Rheum Dis.2016；75：1567-73；Lande et al.NatCommun.2019；10：1731)。为了证实慢性激活的人pDC可以在皮肤内诱导ISG反应，我们利用器官型3D皮肤培养系统作为体外模型来模拟表皮的微环境并允许两种主要细胞组分成纤维细胞和角质形成细胞之间的串扰。人原代成纤维细胞被接种到胶原基质中，一旦受到气液界面(ALI)的影响，该胶原基质就支持人原代角质形成细胞的分化和上皮生长(图8A)。5天后，用来自RPMI培养基(对照)、培养基加ODN刺激(ODN)或ODN+mAb 3E5(ODN+3E5)中培养的pDC的上清液补充培养基48小时，以在ODN实验中产生6000pg/ml终浓度的IFN(如ELISA测定的)。组织学分析显示上皮细胞在体内的发育类似(图8B)。为了更广泛地查看依赖于ODN刺激的pDC的上皮细胞内IFN诱导的信号传导，提取了来自一式三份的3D实验的总RNA并用于生成cDNA，然后对I型干扰素反应期间通常上调的78个基因进行了qRT-PCR分析。来自慢性活化的pDC(+ODN)的上清液导致35个ISG在上皮内相对于静息pDC上清液(对照)的上皮内表达上调1.8倍至32倍。由于供体的变异性和一式三份的实验之间基因诱导的规模，只有8个基因达到统计学意义(P＞0.05)，包括ISG15、IFITM1、BST2、IFI6、IFIH1、NMI、HLA-B和IFITM3(相对于对照3倍至19倍)。通过mAb 3E5进行BDCA-2靶向导致28个基因下调(＞1.8倍至11倍；图8C)。此外，BDCA2靶向的pDC上清液不会在上皮细胞内引起显著的I型IFN反应，因为转录谱模拟了用无刺激的pDC上清液培养的上皮细胞(图8C)。被TLR9刺激的pDC上清液上调＞2倍的所有27个基因被pDC通过3E5的BDCA-2靶向和相应降低的IFN水平下调，与对照条件下观察到的水平相似(图8C)。
使用人pDC活化的异种移植小鼠模型来确定嵌合型mAb 28B01和3E05的体内功效(图9A和图9B)。将嵌合3E05和28B01 mAb和人IgG1对照mAb i.p.注射到NOD-SCID小鼠中，24小时后i.v注射人pDC，并检查了mAb抑制人TLR7激动剂(小鼠皮肤上的Aldara乳膏)诱导小鼠IFN基因特征(IGS)的能力。如通过小鼠处理的皮肤中的人CD123+CD304+细胞所检测到的，Aldara诱导的pDC皮肤浸润没有被hIgG(0.3％)降低，但pDC用抗BDCA-2mAb处理降低至0.1％。在图9A中，将mAb 28B01和3E05的影响与人IgG1对照mAb进行了比较。将来自Qiagen面板的IGS针对在hIgG条件与对照(仅Aldara/咪喹莫特)下的差异表达进行排列。选择10个最具差异表达的基因进行分析，发现与IgG1对照相比，3E5显著抑制(p＜0.001)小鼠IGS谱。mAb 28B01产生的影响较小，但仍与hIgG1对照显著不同，p＜0.05。总体概况存在差异，但两种抗体都显著降低了一些个体基因(图9B)。
上述数据表明，慢性激活的人pDC可以在引发皮肤内的免疫反应中发挥作用，并且通过mAb 3E5和28B1进行BDCA2靶向可以减少这种影响。已显示出IFN特征在SSc临床纤维化发作之前就存在(Brkic Z et al.Ann Rheum Dis.2016；75：1567-73)并且消耗pDC可预防硬皮病小鼠模型的疾病并且可以使已确诊疾病小鼠的纤维化逆转(Ah Kioon etal.Sci.Transl.Med.2018；10：eaam8458)。然而，人pDC是否直接导致皮肤内的纤维化尚不清楚。为了解决这个问题，在NOD-SCID小鼠中通过注射博来霉素诱导皮肤纤维化(Yamamotoet al.J Rheumatol.1999；26；2628-34)，然后注射人健康pDC。正如预期的那样，如部分保留的脂肪层所示，单独的博来霉素在三周时诱导纤维化反应有限，整体皮肤厚度(图10A、图10B和图10C)或胶原含量(图10D)没有显著增加。相反，异种移植人pDC和博来霉素的小鼠显示出脂肪层完全丧失，同时胶原形成增加(图10A和图10D)，整体皮肤厚度增加40％(图10B、图10C)。这些数据清楚地表明，人pDC足以在小鼠皮肤内诱导博莱霉素诱导的纤维化，而T细胞和B细胞(这些细胞在NOD-SCID小鼠中不存在)没有任何适应性免疫反应。重要的是要注意注射pDC本身是没有效果的。
这些数据清楚地表明人pDC是诱导小鼠皮肤内纤维化的基础。为了确定BDCA-2靶向对预防纤维化的治疗意义，用人源化mAb 3E5(var_6)处理NOD-SCID博莱霉素加人pDC的模型，并将对皮肤纤维化的影响与施用hIgG进行了比较。与hIgG相比，通过施用mAb 3E5，pDC诱导的皮肤纤维化急剧且显著降低(图10A至图10D)，如一些脂肪层组织的保留(类似于仅博来霉素处理的小鼠)、真皮和表皮厚度的显著减少(图10B和图10C)以及显著降低胶原含量(图10D)所证明。从小鼠数据来看，这是一个重要的发现，因为它暗示pDC会放大初始纤维化损伤，并且mAb 3E5可以逆转这种纤维化过程。这种疾病机制可以转化为类似的人疾病过程。
3E5变体12的表位作图分析
基于获得的结果，我们设计了胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、ASP-N、弹性蛋白酶和嗜热菌蛋白酶肽的重叠作图(图13)。结合胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、ASP-N、弹性蛋白酶和嗜热菌蛋白酶蛋白水解的肽，覆盖了100％的CLEC4C序列。在用氘代d0d12交联剂对蛋白质复合物CLEC4C/3E5进行胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、ASP-N、弹性蛋白酶和嗜热菌蛋白酶蛋白水解后，nLC-orbitrap MS/MS分析检测到CLEC4C和抗体3E5之间的4个交联肽。交联的序列和位置在下表8中给出。
表8.在CLEC4C/3E5之间检测到的蛋白间交联肽。
3E5互补决定区和CLEC4C之间的3E5-胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、ASP-N、弹性蛋白酶和嗜热菌蛋白酶互连
CT：胰凝乳蛋白酶；Th：嗜热菌蛋白酶
使用化学交联、高质量MALDI质谱和nLC-Orbitrap质谱，我们能够表征CLEC4C和3E5之间的分子界面。我们的分析表明相互作用包括CLEC4C上的以下氨基酸：Q8WTT0/BDCA-2的166至179(分别为SEQ ID NO：90和82)，或Q8WTT0-2的残基135至148(SEQ ID NO：91)，其对应于序列TFWHSGEPNNLDER(SEQ ID NO：92)。
发明的具体实施方式
除其他外，本发明提供：
1.一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子具有小于约2nM的对BDCA-2
(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)。
2.根据实施方式1的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)小于约1nM、小于约0.75nM、小于约0.5nM、小于约0.4nM、小于约0.3nM、小于约0.2nM、小于约0.1M、小于约0.08nM、小于约0.06nM、小于约0.05nM、小于约0.04nM、小于约0.03nM、小于约0.02nM或小于约0.01nM。
3.一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子具有小于约2nM的抑制IFN分泌的半数最大抑制浓度(IC50)。
4.根据实施方式3的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子的抑制IFN分泌的半数最大抑制浓度(IC50)小于约1.5nM、小于约1nM、小于约0.9nM、小于约0.8nM、小于约0.7nM、小于约0.6nM、小于约0.5nM、小于约0.4nM、小于约0.3nM、小于约0.2nM或小于约0.1nM。
5.一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子具有小于约20nM的抑制IFN分泌的IC90。
6.根据实施方式5的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子的抑制IFN分泌的IC90小于约15nM、小于约10nM、小于约9nM、小于约8nM、小于约7nM、小于约6nM、小于约5nM、小于约4nM、小于约3nM、小于约2nM或小于约1nM。
7.根据任一前述实施方式的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子具有小于约2nM的对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)、小于约2nM的抑制IFN分泌的半数最大抑制浓度(IC50)、和小于约20nM的抑制IFN分泌的IC90。
8.根据实施方式7的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子具有小于约0.01nM的对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)、小于约0.5nM的抑制IFN分泌的半数最大抑制浓度(IC50)、和小于约5nM的抑制IFN分泌的IC90。
9.一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子包含：
与SEQ ID NO 48、28、8、38、58、68和78中任一个的氨基酸序列具有至少80％同一性的VHCDR3；和/或
与SEQ ID NO 34、24、44、4、14、54、64和74中任一个的氨基酸序列具有至少80％同一性的VLCDR3。
10.根据实施方式9的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子包含：
包含SEQ ID NO 48、28、8、38、58、68和78中任一个的氨基酸序列的VHCDR3；和/或
包含SEQ ID NO 34、24、44、4、14、54、64和74中任一个的氨基酸序列的VLCDR3。
11.根据实施方式9至10中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子包含：
与SEQ ID NO 46、49、26、29、6、9、16、19、36、39、56、59、66、69、76和79中任一个的氨基酸序列具有至少80％同一性的VHCDR1；
与SEQ ID NO 47、50、27、30、7、10、17、20、37、40、57、60、67、70、77和80中任一个的氨基酸序列具有至少80％同一性的VHCDR2；和
与SEQ ID NO 48、28、8、18、38、58、68和78中任一个的氨基酸序列具有至少80％同一性的VHCDR3；
和/或
与SEQ ID NO 32、22、42、2、12、52、62和72中任一个的氨基酸序列具有至少80％同一性的VLCDR1；
与SEQ ID NO33、23、43、3、13、53、63和73中任一个的氨基酸序列具有至少80％同一性的VLCDR2；和
与SEQ ID NO34、24、44、4、14、54、64和74中任一个的氨基酸序列具有至少80％同一性的VLCDR3。
12.根据实施方式9至11中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子包含：
包含SEQ ID NO46、49、26、29、6、9、16、19、36、39、56、59、66、69、76和79中任一个的氨基酸序列的VHCDR1；
包含SEQ ID NO47、50、27、30、7、10、17、20、37、40、57、60、67、70、77和80中任一个的氨基酸序列的VHCDR2；和
包含SEQ ID NO48、28、8、18、38、58、68和78中任一个的氨基酸序列的VHCDR3；
和/或
包含SEQ ID NO32、22、42、2、12、52、62和72中任一个的氨基酸序列的VLCDR1；
包含SEQ ID NO33、23、43、3、13、53、63和73中任一个的氨基酸序列的VLCDR2；和
包含SEQ ID NO34、24、44、4、14、54、64和74中任一个的氨基酸序列的VLCDR3。
13.根据实施方式9至12中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子选自由以下组成的组：
(a)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(b)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(c)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(d)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(e)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID No：44)的VLCDR3；
(f)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(g)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：6)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：7)的VHCDR2，和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：3)的VLCDR2，包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)的VLCDR3；
(h)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：9)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：10)的VHCDR2，和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID No：3)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)的VLCDR3；
(i)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(j)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3，和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(k)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(1)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(m)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(n)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID No：12)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID N0：13)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(o)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(p)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(q)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(r)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(s)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(t)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID No：24)的VLCDR3；
(u)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(v)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(w)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(x)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(y)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(z)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(aa)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(bb)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(cc)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(dd)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(ee)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(ff)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(gg)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQID NO：44)的VLCDR3；
(hh)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2，包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(ii)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTIS(SEQ ID NO：56)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVKG(SEQ ID NO：57)的VHCDR2，包含氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ ID NO：52)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)的VLCDR3；
(jj)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：59)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：60)的VHCDR2，包含氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ ID NO：52)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)的VLCDR3；
(kk)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：66)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISGVGGDTYYPDSVKG(SEQ ID NO：67)的VHCDR2，包含氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ ID NO：62)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)的VLCDR3；
(11)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：69)的VHCDR1，包含氨基酸序列SGVGGD(SEQ ID NO：70)的VHCDR2，包含氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ ID NO：62)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)的VLCDR3；
(mm)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列YYTMS(SEQ ID NO：76)的VHCDR1，包含氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVRG(SEQ ID NO：77)的VHCDR2，包含氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ ID NO：72)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：73)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)的VLCDR3；和
(nn)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，该重链可变区包括：包含氨基酸序列GFTFSYY(SEQ ID NO：79)的VHCDR1，包含氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：80)的VHCDR2，包含氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)的VHCDR3；和
轻链可变区，该轻链可变区包括：包含氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ ID NO：72)的VLCDR1，包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：73)的VLCDR2，和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)的VLCDR3。
14.根据实施方式9至13中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子包含：
重链可变区，该重链可变区与选自由SEQ ID NO：45、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：55、SEQ ID NO：65和SEQ ID NO：75组成的组的氨基酸序列具有至少80％同一性；
和/或
轻链可变区，该轻链可变区与选自由SEQ ID NO：31、SEQ ID No：21、SEQ ID No：41、SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：51、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：71组成的组的氨基酸序列具有至少80％同一性。
15.根据实施方式9至14中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子包含：
重链可变区，该重链可变区包含选自由SEQ ID NO：45、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：55、SEQ ID NO：65和SEQ ID NO：75组成的组的氨基酸序列；
和/或
轻链可变区，该轻链可变区包含选自由SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：41、SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：51、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：71组成的组的氨基酸序列。
16.根据实施方式9至15中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子选组由以下组成的组：
a.包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
b.包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
c.包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
d.包含SEQ ID NO：5的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列的VL；
e.包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
f.包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
g.包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
h.包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
i.包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
j.包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
k.包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
1.包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
m.包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
n.包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
o.包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
p.包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
q.包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
r.包含SEQ ID NO：55的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：51的氨基酸序列的VL；
s.包含SEQ ID NO：65的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：61的氨基酸序列的VL；和
t.包含SEQ ID NO：75的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：71的氨基酸序列的VL。
17.根据任一前述实施方式的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子是选自由以下组成的组的抗体：3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_var10、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01。
18.根据实施方式17的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体，其中该抗体在所有6个CDR区中包含1至10个、1至5个或1至2个氨基酸替换。
19.根据实施方式17的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体，其中该抗体在所有6个CDR区中包含1或2个氨基酸替换。
20.根据实施方式17的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体，其中该抗体在一个或多个框架区中包含1至10个、1至5个或1至2个氨基酸替换。
21.根据实施方式17的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体，其中该抗体在一个或多个框架区中包含1或2个氨基酸替换。
22.根据实施方式18至21中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中氨基酸替换是保守氨基酸替换。
23.根据实施方式9至22中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子具有小于约2nM的对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)。
24.根据实施方式23的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)小于约1nM、小于约0.75nM、小于约0.5nM、小于约0.4nM、小于约0.3nM、小于约0.2nM、小于约0.1M、小于约0.08nM、小于约0.06nM、小于约0.05nM、小于约0.04nM、小于约0.03nM、小于约0.02nM或小于约0.01nM。
25.根据实施方式9至24中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子具有小于约2nM的抑制IFN分泌的半数最大抑制浓度(IC50)。
26.根据实施方式25的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子的抑制IFN分泌的半数最大抑制浓度(IC50)小于约1.5nM、小于约1nM、小于约0.9nM、小于约0.8nM、小于约0.7nM、小于约0.6nM、小于约0.5nM、小于约0.4nM、小于约0.3nM、小于约0.2nM或小于约0.1nM。
27.根据实施方式9至26中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子具有小于约20nM的抑制IFN分泌的IC90。
28.根据实施方式27的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子的抑制IFN分泌的IC90小于约15nM、小于约10nM、小于约9nM、小于约8nM、小于约7nM、小于约6nM、小于约5nM、小于约4nM、小于约3nM、小于约2nM或小于约1nM。
29.根据实施方式9至28中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子具有小于约2nM的对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)、小于约2nM的抑制IFN分泌的半数最大抑制浓度(IC50)、和小于约20nM的抑制IFN分泌的IC90。
30.根据实施方式29的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子具有小于约0.01nM的对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)、小于约0.5nM的抑制IFN分泌的半数最大抑制浓度(IC50)、和小于约5nM的抑制IFN分泌的IC90。
31.一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其与BDCA-2(CLEC4C)特异性结合，并与根据实施方式1至30中任一个的抗原结合分子竞争结合BDCA-2(CLEC4C)。
32.一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其与BDCA-2(CLEC4C)特异性结合，并抑制BDCA-2(CLEC4C)与根据实施方式1至31中任一个的抗原结合分子结合。
33.一种与BDCA-2(CLEC4C)特异性结合的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子是实施方式1至32中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子的人源化或去免疫衍生物。
34.一种与BDCA-2(CLEC4C)特异性结合的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子是实施方式1至33中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子的亲和力成熟突变体。
35.一种与BDCA-2(CLEC4C)的表位特异性结合的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，该表位被实施方式1至34中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子结合。
36.根据任一实施方式的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子是抗体或其抗原结合片段或衍生物。
37.根据实施方式36的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中其抗原结合片段或衍生物为Fab、F(ab′)2、Fv、scFv、dAb、Fd或双体抗体。
38.根据实施方式1至36中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中，该抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子为单克隆抗体。
39.根据实施方式36至40中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体或其抗原结合片段或衍生物，其中该抗体或其抗原结合片段或衍生物是IgA、IgD、IgE、IgG、IgM或IgY抗体或其抗原结合片段或衍生物。
40.根据实施方式36至39中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体或其抗原结合片段或衍生物，其中该抗体或其抗原结合片段或衍生物是IgG抗体或其抗原结合片段或衍生物。
41.根据实施方式36至40中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体或其抗原结合片段或衍生物，其中该抗体或其抗原结合片段或衍生物是IgG1抗体或其抗原结合片段或衍生物。
42.根据任一前述实施方式的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子在体内或体外施用时减少IFNα的分泌。
43.根据实施方式42的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中当体内或体外施用时，该抗原结合分子使IFNα的分泌相对于不包含抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子的对照减少至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％、至少约95％或至少约99％。
44.根据任一前述实施方式的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子结合由人BDCA-2的残基166至179(SEQ ID NO：82)的一个或多个氨基酸残基组成的表位。
45.一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中该抗原结合分子结合由人BDCA-2的残基166至179(SEQ ID NO：82)的一个或多个氨基酸残基组成的表位。
46.一种药物组合物，其包含任一前述实施方式的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子和药学上可接受的赋形剂。
47.一种试剂盒，其包含实施方式1至45中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或根据实施方式46的药物组合物，并且还包含额外的治疗活性剂。
48.根据实施方式1至45中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，或根据实施方式46的药物组合物、或根据实施方式47的试剂盒在医药中的用途。
49.根据实施方式1至45中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，或根据实施方式46的药物组合物、或根据实施方式47的试剂盒在治疗或预防炎性病症或疾病或自身免疫性病症或疾病中的用途。
50.如实施方式49中使用的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或药物组合物或试剂盒，其中炎性病症或疾病或自身免疫性病症或疾病选自由以下组成的组：系统性硬化症、纤维化(例如皮肤纤维化)、寻常型天疱疮、系统性红斑狼疮(SLE)、皮肤狼疮、盘状狼疮、狼疮性肾炎、多发性肌炎和皮肌炎、银屑病、类风湿性关节炎、格雷夫斯病、硬斑病、炎性肠病、硬斑病、I型糖尿病、干燥病和桥本病。
51.如实施方式49中使用的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或药物组合物或试剂盒，其中炎性疾病为系统性硬化症、纤维化(如皮肤纤维化)或寻常型天疱疮。
52.一种治疗或预防BDCA-2(CLEC4C)介导的疾病或病症的方法，该方法包括向对象施用实施方式1至45中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或根据实施方式46的药物组合物，或实施方式47的试剂盒的组分。
53.一种治疗或预防炎性病症或疾病或自身免疫性病症或疾病的方法，该方法包括向对象施用实施方式1至45中任一个的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或根据实施方式46的药物组合物，或实施方式47的试剂盒的组分。
序列表
<110> 卡佩拉生物科学有限公司
<120> 抗BDCA-2抗体
<130> P116564WO
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 3E05 VH_4 CDR 2 (Chothia)
<400> 50
Ser Ser Gly Gly Gly Gln Thr Tyr
1 5
<210> 51
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 21E06 VL
<400> 51
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp
20 25 30
Gly Asp Asn Cys Leu His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn
85 90 95
Glu Asp Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 52
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 21E06 VL CDR 1 (Kabat and Chothia)
<400> 52
Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp Gly Asp Asn Cys Leu His
1 5 10 15
<210> 53
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 21E06 VL CDR 2 (Kabat and Chothia)
<400> 53
Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser
1 5
<210> 54
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 21E06 VL CDR 3 (Kabat and Chothia)
<400> 54
Gln Gln Ser Asn Glu Asp Pro Pro Thr
1 5
<210> 55
<211> 122
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 21E06 VH
<400> 55
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Ser Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Glu Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Thr Ile Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Asn Ala Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Leu Tyr Tyr Gly Asp Tyr Phe Tyr Val Met Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 21E06 VH CDR 1 (Kabat)
<400> 56
Ser Tyr Thr Ile Ser
1 5
<210> 57
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 21E06 VH CDR 2 (Kabat)
<400> 57
Tyr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Asn Ala Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 58
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 21E06 VH CDR 3 (Kabat and Chothia)
<400> 58
His Leu Tyr Tyr Gly Asp Tyr Phe Tyr Val Met Asp Tyr
1 5 10
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<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 21E06 VH CDR 1 (Chothia)
<400> 59
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 60
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 21E06 VH CDR 2 (Chothia)
<400> 60
Ser Ser Gly Gly Asp Asn
1 5
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<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 25E06 VL
<400> 61
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp
20 25 30
Gly Asp Gly Phe Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ala Asp Phe Thr Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn
85 90 95
Glu Asp Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
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<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 25E06 VL CDR 1 (Kabat and Chothia)
<400> 62
Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp Gly Asp Gly Phe Met Asn
1 5 10 15
<210> 63
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 25E06 VL CDR 2 (Kabat and Chothia)
<400> 63
Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser
1 5
<210> 64
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 25E06 VL CDR 3 (Kabat and Chothia)
<400> 64
Gln Gln Ser Asn Glu Asp Pro Pro Thr
1 5
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<211> 121
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 25E06 VH
<400> 65
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Ser Gly Val Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Phe Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His His Tyr Ser His Tyr Phe Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly
100 105 110
Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 25E06 VH CDR 1 (Kabat)
<400> 66
Ser Tyr Thr Met Ser
1 5
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<211> 17
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 25E06 VH CDR 2 (Kabat)
<400> 67
Tyr Ile Ser Gly Val Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
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<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 25E06 VH CDR 3 (Kabat and Chothia)
<400> 68
His His Tyr Ser His Tyr Phe Trp Tyr Phe Asp Val
1 5 10
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<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 25E06 VH CDR 1 (Chothia)
<400> 69
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
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<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 25E06 VH CDR 2 (Chothia)
<400> 70
Ser Gly Val Gly Gly Asp
1 5
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<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 28B01 VL
<400> 71
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala
20 25 30
Gly Asp Ser Tyr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn
85 90 95
Glu Asp Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 72
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 28B01 VL CDR 1 (Kabat and Chothia)
<400> 72
Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Ala Gly Asp Ser Tyr Val Asn
1 5 10 15
<210> 73
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 28B01 VL CDR 2 (Kabat and Chothia)
<400> 73
Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser
1 5
<210> 74
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 28B01 VL CDR 3 (Kabat and Chothia)
<400> 74
Gln Gln Ser Asn Glu Asp Pro Pro Thr
1 5
<210> 75
<211> 121
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 28B01 VH
<400> 75
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr
20 25 30
Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Asn Ala Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His His Tyr Ser Asn Tyr Phe Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly
100 105 110
Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 28B01 VH CDR 1 (Kabat)
<400> 76
Tyr Tyr Thr Met Ser
1 5
<210> 77
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 28B01 VH CDR 2 (Kabat)
<400> 77
Tyr Ile Ser Ser Gly Gly Asp Asn Ala Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Arg
1 5 10 15
Gly
<210> 78
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 28B01 VH CDR 3 (Kabat and Chothia)
<400> 78
His His Tyr Ser Asn Tyr Phe Trp Tyr Phe Asp Val
1 5 10
<210> 79
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 28B01 VH CDR 1 (Chothia)
<400> 79
Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 80
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Parental 28B01 VH CDR 2 (Chothia)
<400> 80
Ser Ser Gly Gly Asp Asn
1 5
<210> 81
<211> 642
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 81
atggtgcctg aagaagagcc tcaagaccga gagaaaggac tctggtggtt ccagttgaag 60
gtctggtcca tggcagtcgt atccatcttg ctcctcagtg tctgtttcac tgtgagttct 120
gtggtgcctc acaattttat gtatagcaaa actgtcaaga ggctgtccaa gttacgagag 180
tatcaacagt atcatccaag cctgacctgc gtcatggaag gaaaggacat agaagattgg 240
agctgctgcc caaccccttg gacttcattt cagtctagtt gctactttat ttctactggg 300
atgcaatctt ggactaagag tcaaaagaac tgttctgtga tgggggctga tctggtggtg 360
atcaacacca gggaagaaca ggatttcatc attcagaatc tgaaaagaaa ttcttcttat 420
tttctggggc tgtcagatcc agggggtcgg cgacattggc aatgggttga ccagacacca 480
tacaatgaaa atgtcacatt ctggcactca ggtgaaccca ataaccttga tgagcgttgt 540
gcgataataa atttccgttc ttcagaagaa tggggctgga atgacattca ctgtcatgta 600
cctcagaagt caatttgcaa gatgaagaag atctacatat aa 642
<210> 82
<211> 213
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 82
Met Val Pro Glu Glu Glu Pro Gln Asp Arg Glu Lys Gly Leu Trp Trp
1 5 10 15
Phe Gln Leu Lys Val Trp Ser Met Ala Val Val Ser Ile Leu Leu Leu
20 25 30
Ser Val Cys Phe Thr Val Ser Ser Val Val Pro His Asn Phe Met Tyr
35 40 45
Ser Lys Thr Val Lys Arg Leu Ser Lys Leu Arg Glu Tyr Gln Gln Tyr
50 55 60
His Pro Ser Leu Thr Cys Val Met Glu Gly Lys Asp Ile Glu Asp Trp
65 70 75 80
Ser Cys Cys Pro Thr Pro Trp Thr Ser Phe Gln Ser Ser Cys Tyr Phe
85 90 95
Ile Ser Thr Gly Met Gln Ser Trp Thr Lys Ser Gln Lys Asn Cys Ser
100 105 110
Val Met Gly Ala Asp Leu Val Val Ile Asn Thr Arg Glu Glu Gln Asp
115 120 125
Phe Ile Ile Gln Asn Leu Lys Arg Asn Ser Ser Tyr Phe Leu Gly Leu
130 135 140
Ser Asp Pro Gly Gly Arg Arg His Trp Gln Trp Val Asp Gln Thr Pro
145 150 155 160
Tyr Asn Glu Asn Val Thr Phe Trp His Ser Gly Glu Pro Asn Asn Leu
165 170 175
Asp Glu Arg Cys Ala Ile Ile Asn Phe Arg Ser Ser Glu Glu Trp Gly
180 185 190
Trp Asn Asp Ile His Cys His Val Pro Gln Lys Ser Ile Cys Lys Met
195 200 205
Lys Lys Ile Tyr Ile
210
<210> 83
<211> 639
<212> DNA
<213> Cynomolgus
<400> 83
atggtgccag aggaggagcc acaggacaga gagaagggcg tgtggtggtt tcagctgaag 60
gtgtggagcg tggccgtggt gagcatcctg ctgctgtgcg tgtgctttac cgtgagcagc 120
gtggccagcc acaattttat gtatagcaag accgtgaaga gactgagcaa gctgcaggag 180
tatcagcagt attatccaag cctgacctgc gtgatggagg gcaaggacat ggaggactgg 240
agctgctgcc caaccccatg gaccagcttt cagagcagct gctattttat cagcaccgtg 300
atgcagagct ggaccaagag ccagaataat tgcagcgtga tgggcgccga cctggtggtg 360
atcaatacca aggaggagca ggactttatc acccagaatc tgaagatcaa tagcgcctat 420
tttctgggcc tgagcgaccc aaagggctgg agacactggc agtgggtgga ccagacccca 480
tataataaga atgtgacctt ttggcacagc ggcgagccaa atagcccaga cgagagatgc 540
gccatcatca attttagaag cgaggagtgg ggctggaatg acgtgcactg ccacgtgcca 600
cagaagagca tctgcaagat gaagaagatc tatatctaa 639
<210> 84
<211> 212
<212> PRT
<213> Cynomolgus
<400> 84
Met Val Pro Glu Glu Glu Pro Gln Asp Arg Glu Lys Gly Val Trp Trp
1 5 10 15
Phe Gln Leu Lys Val Trp Ser Val Ala Val Val Ser Ile Leu Leu Leu
20 25 30
Cys Val Cys Phe Thr Val Ser Ser Val Ala Ser His Asn Phe Met Tyr
35 40 45
Ser Lys Thr Val Lys Arg Leu Ser Lys Leu Gln Glu Tyr Gln Gln Tyr
50 55 60
Tyr Pro Ser Leu Thr Cys Val Met Glu Gly Lys Asp Met Glu Asp Trp
65 70 75 80
Ser Cys Cys Pro Thr Pro Trp Thr Ser Phe Gln Ser Ser Cys Tyr Phe
85 90 95
Ile Ser Thr Val Met Gln Ser Trp Thr Lys Ser Gln Asn Asn Cys Ser
100 105 110
Val Met Gly Ala Asp Leu Val Val Ile Asn Thr Lys Glu Glu Gln Asp
115 120 125
Phe Ile Thr Gln Asn Leu Lys Ile Asn Ser Ala Tyr Phe Leu Gly Leu
130 135 140
Ser Asp Pro Lys Gly Trp Arg His Trp Gln Trp Val Asp Gln Thr Pro
145 150 155 160
Tyr Asn Lys Asn Val Thr Phe Trp His Ser Gly Glu Pro Asn Ser Pro
165 170 175
Asp Glu Arg Cys Ala Ile Ile Asn Phe Arg Ser Glu Glu Trp Gly Trp
180 185 190
Asn Asp Val His Cys His Val Pro Gln Lys Ser Ile Cys Lys Met Lys
195 200 205
Lys Ile Tyr Ile
210
<210> 85
<211> 525
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> His-Human BDCA-2 DNA
<400> 85
catcatcatc accatcactt catgtacagc aagaccgtga agcggctgag caagctgaga 60
gagtaccagc agtaccaccc cagcctgacc tgcgtgatgg aaggcaagga catcgaggac 120
tggtcctgct gccctacccc ctggaccagc ttccagtcca gctgctactt catcagcacc 180
ggcatgcaga gctggaccaa gagccagaaa aactgcagcg tgatgggcgc cgacctggtc 240
gtgatcaaca ccagagagga acaggacttc atcatccaga acctgaagcg gaacagcagc 300
tacttcctgg gcctgagcga tcctggcggc agacggcatt ggcagtgggt ggaccagacc 360
ccctacaacg agaacgtgac cttctggcac agcggcgagc ccaacaacct ggacgagaga 420
tgcgccatca tcaacttccg gtccagcgag gaatggggct ggaacgacat ccactgccac 480
gtgccccaga aatccatctg caagatgaag aagatctaca tatga 525
<210> 86
<211> 174
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> His-Human BDCA-2 protein
<400> 86
His His His His His His Phe Met Tyr Ser Lys Thr Val Lys Arg Leu
1 5 10 15
Ser Lys Leu Arg Glu Tyr Gln Gln Tyr His Pro Ser Leu Thr Cys Val
20 25 30
Met Glu Gly Lys Asp Ile Glu Asp Trp Ser Cys Cys Pro Thr Pro Trp
35 40 45
Thr Ser Phe Gln Ser Ser Cys Tyr Phe Ile Ser Thr Gly Met Gln Ser
50 55 60
Trp Thr Lys Ser Gln Lys Asn Cys Ser Val Met Gly Ala Asp Leu Val
65 70 75 80
Val Ile Asn Thr Arg Glu Glu Gln Asp Phe Ile Ile Gln Asn Leu Lys
85 90 95
Arg Asn Ser Ser Tyr Phe Leu Gly Leu Ser Asp Pro Gly Gly Arg Arg
100 105 110
His Trp Gln Trp Val Asp Gln Thr Pro Tyr Asn Glu Asn Val Thr Phe
115 120 125
Trp His Ser Gly Glu Pro Asn Asn Leu Asp Glu Arg Cys Ala Ile Ile
130 135 140
Asn Phe Arg Ser Ser Glu Glu Trp Gly Trp Asn Asp Ile His Cys His
145 150 155 160
Val Pro Gln Lys Ser Ile Cys Lys Met Lys Lys Ile Tyr Ile
165 170
<210> 87
<211> 1206
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Fc-Human BDCA-2 DNA
<400> 87
agctgcgaca agacccacac ctgtccccct tgtcctgccc ctgaactgct gggcggacct 60
agcgtgttcc tgttcccccc aaagcccaag gacaccctga tgatcagccg gacccccgaa 120
gtgacctgcg tggtggtgga tgtgtcccac gaggaccctg aagtgaagtt caattggtac 180
gtggacggcg tggaagtgca caacgccaag accaagccca gagaggaaca gtacaacagc 240
acctaccggg tggtgtccgt gctgaccgtg ctgcaccagg actggctgaa cggcaaagag 300
tacaagtgca aggtgtccaa caaggccctg cctgccccca tcgagaaaac catcagcaag 360
gccaagggcc agccccgcga accccaggtg tacacactgc cccctagcag ggacgagctg 420
accaagaacc aggtgtccct gacctgtctc gtgaagggct tctacccctc cgatatcgcc 480
gtggaatggg agagcaacgg ccagcccgag aacaactaca agaccacccc ccctgtgctg 540
gacagcgacg gctcattctt cctgtacagc aagctgacag tggacaagag ccggtggcag 600
cagggcaacg tgttcagctg cagcgtgatg cacgaggccc tgcacaacca ctacacccag 660
aagtccctgt ccttaagccc cggcaagatc gagggccggt tcatgtactc caagaccgtg 720
aagcggctgt ccaagctgag agagtaccag cagtaccacc ccagcctgac atgcgtgatg 780
gaaggcaagg acatcgagga ctggtcctgc tgccctaccc cctggaccag cttccagtcc 840
agctgctact tcatcagcac cggcatgcag agctggacaa agagccagaa aaactgctcc 900
gtgatgggcg ccgacctggt cgtgatcaac acccgcgagg aacaggactt catcatccag 960
aacctgaagc ggaacagcag ctacttcctg ggcctgagcg atcctggcgg cagacggcat 1020
tggcagtggg tggaccagac cccctacaac gagaacgtga ccttctggca cagcggcgag 1080
cccaacaacc tggacgagag atgcgccatc atcaacttcc ggtccagcga ggaatggggc 1140
tggaacgaca tccactgcca cgtgccccag aaatccatct gcaagatgaa gaagatctac 1200
atatga 1206
<210> 88
<211> 400
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Fc-Human BDCA-2 protein
<400> 88
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
1 5 10 15
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
20 25 30
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
35 40 45
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
50 55 60
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
65 70 75 80
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
85 90 95
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
100 105 110
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
115 120 125
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln
130 135 140
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
145 150 155 160
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
165 170 175
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
180 185 190
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
195 200 205
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
210 215 220
Leu Ser Pro Gly Lys Ile Glu Gly Arg Phe Met Tyr Ser Lys Thr Val
225 230 235 240
Lys Arg Leu Ser Lys Leu Arg Glu Tyr Gln Gln Tyr His Pro Ser Leu
245 250 255
Thr Cys Val Met Glu Gly Lys Asp Ile Glu Asp Trp Ser Cys Cys Pro
260 265 270
Thr Pro Trp Thr Ser Phe Gln Ser Ser Cys Tyr Phe Ile Ser Thr Gly
275 280 285
Met Gln Ser Trp Thr Lys Ser Gln Lys Asn Cys Ser Val Met Gly Ala
290 295 300
Asp Leu Val Val Ile Asn Thr Arg Glu Glu Gln Asp Phe Ile Ile Gln
305 310 315 320
Asn Leu Lys Arg Asn Ser Ser Tyr Phe Leu Gly Leu Ser Asp Pro Gly
325 330 335
Gly Arg Arg His Trp Gln Trp Val Asp Gln Thr Pro Tyr Asn Glu Asn
340 345 350
Val Thr Phe Trp His Ser Gly Glu Pro Asn Asn Leu Asp Glu Arg Cys
355 360 365
Ala Ile Ile Asn Phe Arg Ser Ser Glu Glu Trp Gly Trp Asn Asp Ile
370 375 380
His Cys His Val Pro Gln Lys Ser Ile Cys Lys Met Lys Lys Ile Tyr
385 390 395 400
<210> 89
<211> 385
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 89
Trp Leu Ala Phe Lys Leu Lys Leu Gly Thr Ala Ala Thr Met Gly Trp
1 5 10 15
Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly Val His Ser
20 25 30
Gly Asp Ala Ser Phe Thr Arg Ile Arg Thr His Thr Leu Ser Gly Arg
35 40 45
Gln Val Val Val Val Arg Leu Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
50 55 60
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
65 70 75 80
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
85 90 95
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
100 105 110
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
115 120 125
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
130 135 140
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
145 150 155 160
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
165 170 175
Asp Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
180 185 190
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
195 200 205
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
210 215 220
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ala Thr Tyr Arg Val
225 230 235 240
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
245 250 255
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Glu Glu Lys
260 265 270
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
275 280 285
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
290 295 300
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
305 310 315 320
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
325 330 335
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
340 345 350
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
355 360 365
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
370 375 380
Lys
385
<210> 90
<211> 213
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Q8WTT0 construct
<400> 90
Met Val Pro Glu Glu Glu Pro Gln Asp Arg Glu Lys Gly Leu Trp Trp
1 5 10 15
Phe Gln Leu Lys Val Trp Ser Met Ala Val Val Ser Ile Leu Leu Leu
20 25 30
Ser Val Cys Phe Thr Val Ser Ser Val Val Pro His Asn Phe Met Tyr
35 40 45
Ser Lys Thr Val Lys Arg Leu Ser Lys Leu Arg Glu Tyr Gln Gln Tyr
50 55 60
His Pro Ser Leu Thr Cys Val Met Glu Gly Lys Asp Ile Glu Asp Trp
65 70 75 80
Ser Cys Cys Pro Thr Pro Trp Thr Ser Phe Gln Ser Ser Cys Tyr Phe
85 90 95
Ile Ser Thr Gly Met Gln Ser Trp Thr Lys Ser Gln Lys Asn Cys Ser
100 105 110
Val Met Gly Ala Asp Leu Val Val Ile Asn Thr Arg Glu Glu Gln Asp
115 120 125
Phe Ile Ile Gln Asn Leu Lys Arg Asn Ser Ser Tyr Phe Leu Gly Leu
130 135 140
Ser Asp Pro Gly Gly Arg Arg His Trp Gln Trp Val Asp Gln Thr Pro
145 150 155 160
Tyr Asn Glu Asn Val Thr Phe Trp His Ser Gly Glu Pro Asn Asn Leu
165 170 175
Asp Glu Arg Cys Ala Ile Ile Asn Phe Arg Ser Ser Glu Glu Trp Gly
180 185 190
Trp Asn Asp Ile His Cys His Val Pro Gln Lys Ser Ile Cys Lys Met
195 200 205
Lys Lys Ile Tyr Ile
210
<210> 91
<211> 182
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Q8WTT0-2 construct
<400> 91
Met Val Pro Glu Glu Glu Pro Gln Asp Arg Val Pro His Asn Phe Met
1 5 10 15
Tyr Ser Lys Thr Val Lys Arg Leu Ser Lys Leu Arg Glu Tyr Gln Gln
20 25 30
Tyr His Pro Ser Leu Thr Cys Val Met Glu Gly Lys Asp Ile Glu Asp
35 40 45
Trp Ser Cys Cys Pro Thr Pro Trp Thr Ser Phe Gln Ser Ser Cys Tyr
50 55 60
Phe Ile Ser Thr Gly Met Gln Ser Trp Thr Lys Ser Gln Lys Asn Cys
65 70 75 80
Ser Val Met Gly Ala Asp Leu Val Val Ile Asn Thr Arg Glu Glu Gln
85 90 95
Asp Phe Ile Ile Gln Asn Leu Lys Arg Asn Ser Ser Tyr Phe Leu Gly
100 105 110
Leu Ser Asp Pro Gly Gly Arg Arg His Trp Gln Trp Val Asp Gln Thr
115 120 125
Pro Tyr Asn Glu Asn Val Thr Phe Trp His Ser Gly Glu Pro Asn Asn
130 135 140
Leu Asp Glu Arg Cys Ala Ile Ile Asn Phe Arg Ser Ser Glu Glu Trp
145 150 155 160
Gly Trp Asn Asp Ile His Cys His Val Pro Gln Lys Ser Ile Cys Lys
165 170 175
Met Lys Lys Ile Tyr Ile
180
<210> 92
<211> 14
<212> PRT
<213> Homo Sapians
<400> 92
Thr Phe Trp His Ser Gly Glu Pro Asn Asn Leu Asp Glu Arg
1 5 10
Claims (25)
1.一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子具有小于约2nM的对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)。
2.一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子具有小于约2nM的抑制IFN分泌的半数最大抑制浓度(IC50)。
3.一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子具有小于约20nM的抑制IFN分泌的IC90。
4.根据任一前述权利要求所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子具有小于约2nM的对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)、小于约2nM的抑制IFN分泌的半数最大抑制浓度(IC50)、和小于约20nM的抑制IFN分泌的IC90。
5.根据权利要求4所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子具有小于约0.01nM的对BDCA-2(CLEC4C)的平衡解离常数(KD)、小于约0.5nM的抑制IFN分泌的半数最大抑制浓度(IC50)、和小于约5nM的抑制IFN分泌的IC90。
6.根据任一前述权利要求所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子包含：
包含SEQ ID NO 48、28、8、38、58、68和78中任一个的氨基酸序列的VHCDR3；和/或
包含SEQ ID NO 34、24、44、4、14、54、64和74中任一个的氨基酸序列的VLCDR3。
7.根据任一前述权利要求所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子包含：
包含SEQ ID NO 46、49、26、29、6、9、16、19、36、39、56、59、66、69、76和79中任一个的氨基酸序列的VHCDR1；
包含SEQ ID NO 47、50、27、30、7、10、17、20、37、40、57、60、67、70、77和80中任一个的氨基酸序列的VHCDR2；和
包含SEQ ID NO 48、28、8、18、38、58、68和78中任一个的氨基酸序列的VHCDR3；
和/或
包含SEQ ID NO 32、22、42、2、12、52、62和72中任一个的氨基酸序列的VLCDR1；
包含SEQ ID NO 33、23、43、3、13、53、63和73中任一个的氨基酸序列的VLCDR2；和
包含SEQ ID NO 34、24、44、4、14、54、64和74中任一个的氨基酸序列的VLCDR3。
8.根据任一前述权利要求所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子选自由以下组成的组：
(a)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(b)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(c)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO3：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(d)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID N0：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(e)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(f)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(g)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：6)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：7)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：3)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)的VLCDR3；
(h)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：9)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：10)的VHCDR2和包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：8)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：2)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：3)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：4)的VLCDR3；
(i)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(j)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(k)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(l)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(m)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(n)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID No：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(o)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(p)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：12)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：13)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：14)的VLCDR3；
(q)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(r)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(s)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(t)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(u)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(v)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：22)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：23)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：24)的VLCDR3；
(w)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(x)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(y)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：26)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYADSVKG(SEQ ID NO：27)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(z)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：29)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：30)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQID NO：28)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(aa)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(bb)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KSSQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：32)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：33)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：34)的VLCDR3；
(cc)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：16)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGNTYYPDSVKG(SEQ ID NO：17)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(dd)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：19)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGNTY(SEQ ID NO：20)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQID NO：18)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(ee)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：36)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：37)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQ ID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(ff)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：39)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：40)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYDGGLYYAMDY(SEQID NO：38)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(gg)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：46)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGGQTYYPDSVKG(SEQ ID NO：47)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQ ID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYEGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(hh)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：49)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGGQTY(SEQ ID NO：50)的VHCDR2、包含氨基酸序列HDYYEGGLYYAMDY(SEQID NO：48)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDSSMN(SEQ ID NO：42)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASTLES(SEQ ID NO：43)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQTNEDPPT(SEQ ID NO：44)的VLCDR3；
(ii)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTIS(SEQ ID NO：56)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVKG(SEQ ID NO：57)的VHCDR2、包含氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ ID NO：58)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ ID NO：52)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)的VLCDR3；
(jj)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：59)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：60)的VHCDR2、包含氨基酸序列HLYYGDYFYVMDY(SEQ IDNO：58)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDNCLH(SEQ ID NO：52)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：53)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：54)的VLCDR3；
(kk)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列SYTMS(SEQ ID NO：66)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISGVGGDTYYPDSVKG(SEQ ID NO：67)的VHCDR2、包含氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ ID NO：68)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ ID NO：62)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)的VLCDR3；
(ll)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSSY(SEQ ID NO：69)的VHCDR1、包含氨基酸序列SGVGGD(SEQ ID NO：70)的VHCDR2、包含氨基酸序列HHYSHYFWYFDV(SEQ IDNO：68)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYDGDGFMN(SEQ ID NO：62)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：63)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：64)的VLCDR3；
(mm)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列YYTMS(SEQ ID NO：76)的VHCDR1、包含氨基酸序列YISSGGDNAYYPDSVRG(SEQ ID NO：77)的VHCDR2、包含氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ ID NO：78)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ ID NO：72)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID NO：73)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)的VLCDR3；以及
(nn)抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，包括：
重链可变区，所述重链可变区包括包含氨基酸序列GFTFSYY(SEQ ID NO：79)的VHCDR1、包含氨基酸序列SSGGDN(SEQ ID NO：80)的VHCDR2、包含氨基酸序列HHYSNYFWYFDV(SEQ IDNO：78)的VHCDR3；和
轻链可变区，所述轻链可变区包括包含氨基酸序列KASQSVDYAGDSYVN(SEQ ID NO：72)的VLCDR1、包含氨基酸序列AASNLES(SEQ ID N0：73)的VLCDR2和包含氨基酸序列QQSNEDPPT(SEQ ID NO：74)的VLCDR3。
9.根据任一前述权利要求所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子包含：
重链可变区，所述重链可变区与选自由SEQ ID NO：45、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：55、SEQ ID NO：65和SEQ ID NO：75组成的组的氨基酸序列具有至少80％的同一性；
和/或
轻链可变区，所述轻链可变区与选自由SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：41、SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：51、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：71组成的组的氨基酸序列具有至少80％的同一性。
10.根据任一前述权利要求所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子包含：
重链可变区，所述重链可变区包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO：45、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：35、SEQ ID NO：55、SEQ ID NO：65和SEQ ID NO：75：
和/或
轻链可变区，所述轻链可变区包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：41、SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：51、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：71。
11.根据任一前述权利要求所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子选自由以下组成的组：
a)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
b)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
c)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
d)包含SEQ ID NO：5的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列的VL；
e)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
f)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
g)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
h)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的VL；
i)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
j)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
k)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：21的氨基酸序列的VL；
l)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
m)包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
n)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：31的氨基酸序列的VL；
0)包含SEQ ID NO：15的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
p)包含SEQ ID NO：35的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
q)包含SEQ ID NO：45的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：41的氨基酸序列的VL；
r)包含SEQ ID NO：55的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：51的氨基酸序列的VL；
s)包含SEQ ID NO：65的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：61的氨基酸序列的VL；和
t)包含SEQ ID NO：75的氨基酸序列的VH和包含SEQ ID NO：71的氨基酸序列的VL。
12.根据任一前述权利要求所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子是选自由以下组成的组的抗体：3E05_var12、3E05_var6、3E05_var14、3E05、3E05_var1、3E05_var2、3E05_var3、3E05_var4、3E05_var5、3E05_var7、3E05_var8、3E05_var9、3E05_varl0、3E05_var11、3E05_var13、3E05_var15、3E05_var16、21E06、25E06和28B01。
13.根据权利要求12所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体，其中所述抗体在所有6个CDR区中包含1或2个氨基酸替换。
14.根据权利要求12或13所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体，其中所述抗体在一个或多个框架区中包含1或2个氨基酸替换。
15.一种抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其与BDCA-2(CLEC4C)特异性结合，并与权利要求1至14中任一项所述的抗原结合分子竞争结合BDCA-2(CLEC4C)。
16.根据任一前述权利要求所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子是抗体或其抗原结合片段或衍生物。
17.根据权利要求16所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子的抗原结合片段或衍生物为Fab、F(ab′)2、Fv、scFv、dAb、Fd或双体抗体。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中，所述抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子为单克隆抗体。
19.根据权利要求16至18中任一项所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗体或其抗原结合片段或衍生物，其中所述抗体或其抗原结合片段或衍生物为IgA、IgD、IgE、IgG、IgM或IgY抗体或其抗原结合片段或衍生物，可选地其中所述抗体或其抗原结合片段或衍生物是IgG抗体或其抗原结合片段或衍生物，进一步可选地其中所述抗体或其抗原结合片段或衍生物是IgG1抗体或其抗原结合片段或衍生物。
20.根据任一前述权利要求所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，其中所述抗原结合分子在体内或体外施用时减少IFNα的分泌。
21.一种药物组合物，包含任一前述权利要求的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子和药学上可接受的赋形剂。
22.根据权利要求1至20中任一项所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，或根据权利要求21所述的药物组合物在医药中的用途。
23.根据权利要求1至20中任一项所述的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子，或根据权利要求21所述的药物组合物在治疗或预防炎性病症或疾病或自身免疫性病症或疾病中的用途。
24.如权利要求23所述使用的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或药物组合物或试剂盒，其中所述炎性病症或疾病或自身免疫性病症或疾病选自由以下组成的组：系统性硬化症、纤维化(例如皮肤纤维化)、寻常型天疱疮、系统性红斑狼疮(SLE)、皮肤狼疮、盘状狼疮、狼疮性肾炎、多发性肌炎和皮肌炎、银屑病、类风湿性关节炎、格雷夫斯病、硬斑病、炎性肠病、硬斑病、I型糖尿病、干燥病和桥本病。
25.如权利要求23所述使用的抗BDCA-2(CLEC4C)抗原结合分子或药物组合物或试剂盒，其中所述炎性疾病为系统性硬化症、纤维化(如皮肤纤维化)或寻常型天疱疮。
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