CN114591867A - 一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114591867A
CN114591867A CN202210324337.2A CN202210324337A CN114591867A CN 114591867 A CN114591867 A CN 114591867A CN 202210324337 A CN202210324337 A CN 202210324337A CN 114591867 A CN114591867 A CN 114591867A
Authority
CN
China
Prior art keywords
c1tb
culture
microbial preparation
enterobacter cloacae
preparation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202210324337.2A
Other languages
English (en)
Inventor
彭轶楠
季彬
王治业
赵廷伟
梁燕
祁宏山
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Biology of Gansu Academy of Sciences
Original Assignee
Institute of Biology of Gansu Academy of Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Biology of Gansu Academy of Sciences filed Critical Institute of Biology of Gansu Academy of Sciences
Priority to CN202210324337.2A priority Critical patent/CN114591867A/zh
Publication of CN114591867A publication Critical patent/CN114591867A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G13/00—Protecting plants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G22/00—Cultivation of specific crops or plants not otherwise provided for
    • A01G22/20—Cereals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G7/00—Botany in general
    • A01G7/06—Treatment of growing trees or plants, e.g. for preventing decay of wood, for tingeing flowers or wood, for prolonging the life of plants
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Forests & Forestry (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Ecology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明提供了一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂及其制备方法和应用，属于微生物制剂技术领域。复合微生物制剂包括阿氏芽孢杆菌C1TB‑10、短小芽孢杆菌C1TB‑17和阴沟肠杆菌C1TB‑26。本发明复合微生物制剂不仅分泌大量的植物激素，促进植物生长，同时具有溶磷、解钾和固氮，提高土壤肥效，改善土壤微生物菌群结构的作用，复合微生物制剂中添加阴沟肠杆菌，玉米的农艺性状和产量具有显著提高，施用玉米后有效发挥了促生的功效，且生产工艺简单，便于实现工业化生产。

Description

一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂及其制备方法和 应用
技术领域
本发明涉及微生物制剂技术领域，尤其涉及一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂及其制备方法和应用。
背景技术
植物促生菌通过植物根际或共生微生物产生植物激素改善植物生长，包括假单胞菌属(Pseudomonas)、固氮螺菌属(Azospirillum)、固氮菌属(Azotobacter)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、肠杆菌属(Enterobacter)、产碱菌属(Alcaligens)、节杆菌属(Arthobacter)、布克霍尔德氏菌(Burkholderia)和沙雷氏菌属(Serratia)等。由于微生物代谢的多样性，促生菌对植物的促生作用也是通过多种机制和途径来实现的，主要包括：(1)产生调节植物生长的信号物质，如吲哚乙酸、赤霉素、细胞分裂素和乙烯；(2)非共生固氮；(3)溶解磷矿物及其他养分；(4)产生ACC脱氨酶；(5)产生铁载体；(6)抵抗病原菌。植物促生菌在提高作物固氮能力、改善土壤环境、调节植物生长、促进植物抗病抗逆能力、改善作物品质提高产量等各方面有重要的意义。
研究表明，阴沟肠杆菌发酵液16倍稀释后喷施甜玉米Sh2幼苗叶片，其株高比对照增加了25.54％，根系干重增加2.19倍，阴沟肠杆菌发酵液可促进甜玉米Sh2生长(徐幼平，等.2001)。李浩(2019)研究玉米根际促生试验结果表明，施用阴沟肠杆菌后，株高、叶面积、根干重及地上干重分别增加了29.6％、33.94％、105.65％和86.35％；施用阴沟肠杆菌复合制剂后，玉米株高、叶面积、根干重及地上干重分别增加了70.86％、51.15％、105.65％和139.96％。刘娟(2018)发现阴沟肠杆菌制剂灌根处理可以显著增加甜玉米的可溶性糖含量。但是单独使用阴沟肠杆菌的效果并不理想。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂及其制备方法和应用，采用本发明提供的复合微生物制剂相较于单一使用阴沟肠杆菌，进一步提高了玉米农艺性状和产量。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂，包括阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26。
优选的，所述复合微生物制剂中阿氏芽孢杆菌C1TB-10的有效活菌数在1.6×108CFU/mL以上。
优选的，所述复合微生物制剂中短小芽孢杆菌C1TB-17的有效活菌数在1.6×108CFU/mL以上。
优选的，所述复合微生物制剂中阴沟肠杆菌C1TB-26的有效活菌数在1.6×108CFU/mL以上。
本发明还提供了上述技术方案所述的复合微生物制剂的制备方法，包括以下步骤：
1)将所述阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26分别接种于细菌固体斜面培养基上培养，得到种子斜面；
2)将所述步骤1)得到的阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26的种子斜面分别接种于细菌液体培养基中培养，得到种子液；
3)将所述步骤2)得到的阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26的种子液分别进行扩大培养，当菌液中阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26的有效活菌数分别在5×108CFU/mL以上时，得到发酵液；
4)将所述步骤3)得到的阿氏芽孢杆菌C1TB-10发酵液、短小芽孢杆菌C1TB-17发酵液和阴沟肠杆菌C1TB-26发酵液按照体积比为1:1:1混合，得到复合微生物制剂。
优选的，所述步骤1)细菌固体斜面培养基的组分为：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g、琼脂20g和蒸馏水1000mL，pH至7.0；
所述培养的条件包括：培养温度为30℃，培养时间为48h。
优选的，所述步骤2)细菌液体培养基的组分为：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g和蒸馏水1000mL，pH至7.0；
所述培养的条件包括：培养温度为30℃，培养时间为30h，转速为200rpm。
优选的，所述步骤3)扩大培养使用的培养基为细菌液体培养基，所述为细菌液体培养基的组分为：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g和蒸馏水1000mL，pH至7.0；
所述扩大培养的条件包括：培养温度为30℃，培养时间为30h，转速为200rpm，接种量为10％。
本发明还提供了上述技术方案所述的复合微生物制剂在强化玉米生长效应中的应用。
优选的，所述玉米生长效应包括玉米的农艺性状和/或产量。
本发明提供了一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂，包括阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26。
本发明采用的是阴沟肠杆菌复合微生物制剂，其中阿氏芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和阴沟肠杆菌可产生吲哚乙酸(IAA)、ACC脱氨酶等植物激素，对植物的生长促进作用具有广谱性；还可以保护植物，预防重金属、亚硝酸盐对植物的毒害作用，具有溶磷解钾、固氮的作用，促进磷钾肥吸收，促进植物生长。
与不添加阴沟肠杆菌的微生物制剂相比，本发明复合微生物制剂中，凡添加了阴沟肠杆菌的微生物制剂均对玉米的农艺性状和产量的提高具有显著效果；单独施用阴沟肠杆菌制剂与不添加该菌株的制剂相比，对玉米农艺性状和产量的提高也有明显效果，但与阴沟肠杆菌复合制剂相比，单独施用该菌株制剂对提高玉米农艺性状及产量的效果略低；复合微生物制剂中，阿氏芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和阴沟肠杆菌的复配对玉米的农艺性状和产量提升效果为最佳。说明在玉米种植中，添加阴沟肠杆菌可明显提高其农艺性状和产量，其中，复合微生物制剂的效果明显好于单一微生物制剂。本发明中菌株之间无相互拮抗，相互抑制作用，不同菌株其功能不尽相同，菌株复配后形成复合微生物制剂，通过外源添加的方式施用于玉米土壤，经过大量繁殖形成优势菌群，从而达到对玉米促生的效果。
本发明的优点为：
(1)本发明复合微生物制剂由具有促生功能的微生物复配而成，不仅分泌大量的植物激素，促进植物生长，同时具有溶磷、解钾和固氮，提高土壤肥效，改善土壤微生物菌群结构的作用；
(2)本发明微生物制剂中促生菌株，菌株之间无抑制作用，微生物菌种协同作用，共同发挥促生的作用；
(3)本发明的阴沟肠杆菌分离自玉米根际土壤，施用于制种玉米和饲用玉米种植中，且同时表现出显著的提高玉米农艺性状及产量的效果，说明该菌株适应玉米根际土壤生态环境，可在该环境中存活繁殖、促进玉米生长；
(4)本发明通过田间试验验证，促生微生物制剂中凡添加阴沟肠杆菌的制剂，玉米的农艺性状和产量具有显著提高，说明阴沟肠杆菌与玉米根际微生物菌群存在一定相关性；
(5)本发明阴沟肠杆菌微生物制剂施用玉米后有效发挥了促生的功效，且生产工艺简单，便于实现工业化生产。
具体实施方式
本发明提供了一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂，包括阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26。
在本发明中，所述所述复合微生物制剂中阿氏芽孢杆菌C1TB-10的有效活菌数优选在1.6×108CFU/mL以上。在本发明中，所述阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)C1TB-10在细菌培养基菌落呈乳白色，表面凸起，光滑，不透明，边缘整齐。该菌为植物促生菌，产植物激素，于2021年9月9日保藏于中国工业菌种保藏管理中心甘肃分中心。在本发明中，所述阿氏芽孢杆菌C1TB-10购买于中国工业菌种保藏管理中心甘肃分中心，保藏号：GSICC32850。
在本发明中，所述复合微生物制剂中短小芽孢杆菌C1TB-17的有效活菌数优选在1.6×108CFU/mL以上。在本发明中，所述短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)C1TB-17在细菌培养基上菌落成乳白色，表面皱褶，边缘不整齐；菌体呈杆状，两端钝圆。该菌为植物促生菌，有钝化土壤重金属，改善土壤质量的功能，于2021年9月9日保藏于中国工业菌种保藏管理中心甘肃分中心。在本发明中，所述短小芽孢杆菌C1TB-17购买于中国工业菌种保藏管理中心甘肃分中心，保藏号：GSICC 32852。
在本发明中，所述复合微生物制剂中阴沟肠杆菌C1TB-26的有效活菌数优选在1.6×108CFU/mL以上。在本发明中，所述阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)C1TB-26在细菌培养基菌落较小，表面凸起，呈微黄色，不透明，短杆状，无芽孢。该菌株为植物促生菌，有溶磷、解钾、固氮，改善土壤微生物菌群结构的功能，于2021年9月9日保藏于中国工业菌种保藏管理中心甘肃分中心。在本发明中，所述阴沟肠杆菌C1TB-26购买于中国工业菌种保藏管理中心甘肃分中心，保藏号：GSICC 30522。
在本发明中，所述阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26的菌株促生功能测定结果详见发明名称为《玉米促生、益生、生防菌肥一体化制剂及其制备方法》，申请号：CN202111214350.4中表1的结果。
本发明还提供了上述技术方案所述的复合微生物制剂的制备方法，包括以下步骤：
1)将所述阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26分别接种于细菌固体斜面培养基上培养，得到种子斜面；
2)将所述步骤1)得到的阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26的种子斜面分别接种于细菌液体培养基中培养，得到种子液；
3)将所述步骤2)得到的阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26的种子液分别进行扩大培养，当菌液中阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26的有效活菌数分别在5×108CFU/mL以上时，得到发酵液；
4)将所述步骤3)得到的阿氏芽孢杆菌C1TB-10发酵液、短小芽孢杆菌C1TB-17发酵液和阴沟肠杆菌C1TB-26发酵液按照体积比为1:1:1混合，得到复合微生物制剂。
本发明将所述阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26分别接种于细菌固体斜面培养基上培养，得到种子斜面。在本发明中，所述细菌固体斜面培养基的组分优选为：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g、琼脂20g和蒸馏水1000mL，pH至7.0；所述培养的条件优选包括：培养温度为30℃，培养时间为48h。在本发明中，所述细菌固体斜面培养基优选经121℃高压蒸汽灭菌20min后再使用。
本发明将得到的阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26的种子斜面分别接种于细菌液体培养基中培养，得到种子液。在本发明中，所述细菌液体培养基的组分优选为：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g和蒸馏水1000mL，pH至7.0；所述培养的条件优选包括：培养温度为30℃，培养时间为30h，转速为200rpm。在本发明中，所述细菌液体培养基优选经121℃高压蒸汽灭菌20min后再使用。
本发明将得到的阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26的种子液分别进行扩大培养，当菌液中阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26的有效活菌数分别在5×108CFU/mL以上时，得到发酵液。在本发明中，所述扩大培养使用的培养基为细菌液体培养基，所述为细菌液体培养基的组分为：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g和蒸馏水1000mL，pH至7.0；所述扩大培养的条件优选包括：培养温度为30℃，培养时间为30h，转速为200rpm，接种量为10％。
本发明将所述步骤3)得到的阿氏芽孢杆菌C1TB-10发酵液、短小芽孢杆菌C1TB-17发酵液和阴沟肠杆菌C1TB-26发酵液按照体积比为1:1:1混合，得到复合微生物制剂。
本发明对所述复合微生物制剂的使用方法没有特殊限定，采用常规即可，如将所述复合微生物制剂与有机肥混合后施入玉米地，所述复合微生物制剂的用量优选为20kg/亩，本发明对所述有机肥的种类和用量没有特殊限定，本领域技术人员依据玉米地情况常规操作即可。
本发明还提供了上述技术方案所述的复合微生物制剂在强化玉米生长效应中的应用。在本发明中，所述玉米生长效应优选包括玉米的农艺性状和/或产量。在本发明中，所述玉米的农艺性状优选包括：株高、叶片数、穗重、穗长、穗粗、穗粒数和千粒重。
为了进一步说明本发明，下面结合实例对本发明进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
一种阴沟肠杆菌强化玉米生长效应的复合微生物制剂制备：
步骤一：微生物斜面种子的制备：将阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17、阴沟肠杆菌C1TB-26接种于细菌固体斜面培养基，30℃恒温培养48h后，即为种子斜面。
细菌固体斜面培养基为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH至7.0。在121℃高压蒸汽灭菌20min。
步骤二：微生物液体种子的培养：将阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17、阴沟肠杆菌C1TB-26接种于细菌液体培养基，在温度为30℃，转速为200r/min震荡培养30h后，即为液体种子。
液体培养基与步骤一中细菌培养基相同，区别为不添加琼脂。
步骤三：菌株液体扩大培养：将阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17、阴沟肠杆菌C1TB-26分别接种于50L发酵罐中，培养基为细菌液体培养基，接种量为10％，在温度为30℃，转速为200r/min培养30h，直至阿氏芽孢杆菌C1TB-10菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL，短小芽孢杆菌C1TB-17菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL，阴沟肠杆菌C1TB-26菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL。
细菌液体培养基与步骤二相同。
步骤四：复合微生物制剂的制备：将步骤三中分别扩大培养的微生物菌剂按体积比1:1:1混合均匀，即得到一种阴沟肠杆菌强化玉米生长效应的复合微生物制剂。
对比例1
一种阴沟肠杆菌强化玉米生长效应的复合微生物制剂制备：
步骤一：微生物斜面种子的制备：将阿氏芽孢杆菌C1TB-10和短小芽孢杆菌C1TB-17接种于细菌固体斜面培养基，30℃恒温培养48h后，即为种子斜面。
细菌固体斜面培养基为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH至7.0。在121℃高压蒸汽灭菌20min。
步骤二：微生物液体种子的培养：将阿氏芽孢杆菌C1TB-10和短小芽孢杆菌C1TB-17接种于细菌液体培养基，在温度为30℃，转速为200r/min震荡培养30h后，即为液体种子。
液体培养基与步骤一中细菌培养基相同，区别为不添加琼脂。
步骤三：菌株液体扩大培养：将阿氏芽孢杆菌C1TB-10和短小芽孢杆菌C1TB-17分别接种于50L发酵罐中，培养基为细菌液体培养基，接种量为10％，在温度为30℃，转速为200r/min培养30h，直至阿氏芽孢杆菌C1TB-10菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL，短小芽孢杆菌C1TB-17菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL。
细菌液体培养基与步骤二相同。
步骤四：微生物制剂的制备：将步骤三中分别扩大培养的微生物菌剂按体积比1:1混合均匀，即得到一种阴沟肠杆菌强化玉米生长效应的复合微生物制剂。
对比例2
一种阴沟肠杆菌强化玉米生长效应的复合微生物制剂制备：
步骤一：微生物斜面种子的制备：将阿氏芽孢杆菌C1TB-10和阴沟肠杆菌C1TB-26接种于细菌固体斜面培养基，30℃恒温培养48h后，即为种子斜面。
细菌固体斜面培养基为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH至7.0。在121℃高压蒸汽灭菌20min。
步骤二：微生物液体种子的培养：将阿氏芽孢杆菌C1TB-10和阴沟肠杆菌C1TB-26接种于细菌液体培养基，在温度为30℃，转速为200r/min震荡培养30h后，即为液体种子。
液体培养基与步骤一中细菌培养基相同，区别为不添加琼脂。
步骤三：菌株液体扩大培养：将阿氏芽孢杆菌C1TB-10和阴沟肠杆菌C1TB-26分别接种于50L发酵罐中，培养基为细菌液体培养基，接种量为10％，在温度为30℃，转速为200r/min培养30h，直至阿氏芽孢杆菌C1TB-10菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL，阴沟肠杆菌C1TB-26菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL。
细菌液体培养基与步骤二相同。
步骤四：微生物制剂的制备：将步骤三中分别扩大培养的微生物菌剂按体积比1:1混合均匀，即得到一种阴沟肠杆菌强化玉米生长效应的复合微生物制剂。
对比例3
一种阴沟肠杆菌强化玉米生长效应的复合微生物制剂制备：
步骤一：微生物斜面种子的制备：短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26接种于细菌固体斜面培养基，30℃恒温培养48h后，即为种子斜面。
细菌固体斜面培养基为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH至7.0。在121℃高压蒸汽灭菌20min。
步骤二：微生物液体种子的培养：短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26接种于细菌液体培养基，在温度为30℃，转速为200r/min震荡培养30h后，即为液体种子。
液体培养基与步骤一中细菌培养基相同，区别为不添加琼脂。
步骤三：菌株液体扩大培养：短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26分别接种于50L发酵罐中，培养基为细菌液体培养基，接种量为10％，在温度为30℃，转速为200r/min培养30h，直至短小芽孢杆菌C1TB-17菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL，阴沟肠杆菌C1TB-26菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL。
细菌液体培养基与步骤二相同。
步骤四：微生物制剂的制备：将步骤三中分别扩大培养的微生物菌剂按体积比1:1混合均匀，即得到一种阴沟肠杆菌强化玉米生长效应的复合微生物制剂。
对比例4
一种阴沟肠杆菌强化玉米生长效应的复合微生物制剂制备：
步骤一：微生物斜面种子的制备：阴沟肠杆菌C1TB-26接种于细菌固体斜面培养基，30℃恒温培养48h后，即为种子斜面。
细菌固体斜面培养基为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH至7.0。在121℃高压蒸汽灭菌20min。
步骤二：微生物液体种子的培养：阴沟肠杆菌C1TB-26接种于细菌液体培养基，在温度为30℃，转速为200r/min震荡培养30h后，即为液体种子。
液体培养基与步骤一中细菌培养基相同，区别为不添加琼脂。
步骤三：菌株液体扩大培养：阴沟肠杆菌C1TB-26分别接种于50L发酵罐中，培养基为细菌液体培养基，接种量为10％，在温度为30℃，转速为200r/min培养30h，直至阴沟肠杆菌C1TB-26菌液中有效活菌数为5×108CFU/mL，即得到一种阴沟肠杆菌强化玉米生长效应的复合微生物制剂。
细菌液体培养基与步骤二相同。
实施例2
田间应用效果
将对比例1-4和实施例1制备的复合微生物制剂施用于制种玉米，验证不同配比的复合微生物制剂对制种玉米生长的影响。试验地点位于甘肃省河西地区玉米制种基地，试验采用小区设计，各小区面积为30m2(5m×6m)，共设置6个试验组，分别为：对比例1-4、实施例1和不添加微生物制剂的空白对照组。将对比例1-4和实施例1制备的复合微生物制剂分别与有机肥混合均匀后施入各试验小区，对照组只添加有机肥，不添加微生物制剂，每个试验组3个重复，采用完全随机区组设计，微生物制剂添加量为20kg/亩。制种玉米成熟后统计其农艺性状和产量。
试验结果：不同复合微生物制剂的施用对河西制种玉米的农艺性状及产量的影响如表1。施用复合微生物制剂组玉米农艺性状及产量明显好于对照；施用复合微生物制剂组中，玉米农艺性状及产量由高到底依次为：实施例1>对比例2>对比例3>对比例4>对比例1，说明本发明提供的复合微生物制剂中添加阴沟肠杆菌有效促进制种玉米植株生长，提升制种玉米穗粒重量，提高制种玉米产量；单独施用阴沟肠杆菌制剂对制种玉米农艺性状及产量的提升效果低于阴沟肠杆菌复合制剂；复合微生物制剂中，阿氏芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和阴沟肠杆菌的复配对制种玉米的农艺性状和产量提升效果最佳。
表1复合微生物制剂对制种玉米农艺性状及产量影响
Figure BDA0003571258980000111
实施例3
田间应用效果
将对比例1-4和实施例1制备的复合微生物制剂施用于饲用玉米，验证不同配比的复合微生物制剂对饲用玉米生长的影响。试验地点位于甘肃省河西地区饲用玉米种植基地，试验采用小区设计，各小区面积为30m2(5m×6m)，共设置6个试验组，分别为：对比例1-4、实施例1和不添加微生物制剂的空白对照组。将对比例1-4和实施例1制备的复合微生物制剂分别与有机肥混合均匀后施入各试验小区，对照组只添加有机肥，不添加微生物制剂，每个试验组3个重复，采用完全随机区组设计，微生物制剂添加量为20kg/亩。饲用玉米成熟后统计其农艺性状和产量。
试验结果：不同微生物制剂的施用对河西饲用玉米的农艺性状及产量的影响如表2。施用复合微生物制剂组玉米农艺性状及产量明显好于对照；施用复合微生物制剂组中，玉米农艺性状及产量由高到底依次为：实施例1>对比例2>对比例3>对比例4>对比例1，说明复合微生物制剂中添加阴沟肠杆菌有效促进饲用玉米植株生长，饲用玉米粗蛋白含量、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量与对照组相比均较好，玉米产量最高；单独施用阴沟肠杆菌制剂对饲用玉米农艺性状及产量的提升效果低于阴沟肠杆菌复合制剂；复合微生物制剂中，阿氏芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和阴沟肠杆菌的复配对饲用玉米的农艺性状和产量提升效果最佳。
表2复合微生物制剂对饲用玉米农艺性状及产量的影响
Figure BDA0003571258980000121
Figure BDA0003571258980000131
以上所述仅是本发明的优选实施方式，并非对本发明作任何形式上的限制。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂，其特征在于，包括阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26。
2.根据权利要求1所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述复合微生物制剂中阿氏芽孢杆菌C1TB-10的有效活菌数在1.6×108CFU/mL以上。
3.根据权利要求1所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述复合微生物制剂中短小芽孢杆菌C1TB-17的有效活菌数在1.6×108CFU/mL以上。
4.根据权利要求1所述的复合微生物制剂，其特征在于，所述复合微生物制剂中阴沟肠杆菌C1TB-26的有效活菌数在1.6×108CFU/mL以上。
5.权利要求1～4任一项所述的复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将所述阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26分别接种于细菌固体斜面培养基上培养，得到种子斜面；
2)将所述步骤1)得到的阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26的种子斜面分别接种于细菌液体培养基中培养，得到种子液；
3)将所述步骤2)得到的阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26的种子液分别进行扩大培养，当菌液中阿氏芽孢杆菌C1TB-10、短小芽孢杆菌C1TB-17和阴沟肠杆菌C1TB-26的有效活菌数分别在5×108CFU/mL以上时，得到发酵液；
4)将所述步骤3)得到的阿氏芽孢杆菌C1TB-10发酵液、短小芽孢杆菌C1TB-17发酵液和阴沟肠杆菌C1TB-26发酵液按照体积比为1:1:1混合，得到复合微生物制剂。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)细菌固体斜面培养基的组分为：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g、琼脂20g和蒸馏水1000mL，pH至7.0；
所述培养的条件包括：培养温度为30℃，培养时间为48h。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)细菌液体培养基的组分为：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g和蒸馏水1000mL，pH至7.0；
所述培养的条件包括：培养温度为30℃，培养时间为30h，转速为200rpm。
8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)扩大培养使用的培养基为细菌液体培养基，所述为细菌液体培养基的组分为：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g和蒸馏水1000mL，pH至7.0；
所述扩大培养的条件包括：培养温度为30℃，培养时间为30h，转速为200rpm，接种量为10％。
9.权利要求1～4任一项所述的复合微生物制剂在强化玉米生长效应中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述玉米生长效应包括玉米的农艺性状和/或产量。
CN202210324337.2A 2022-03-29 2022-03-29 一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂及其制备方法和应用 Pending CN114591867A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210324337.2A CN114591867A (zh) 2022-03-29 2022-03-29 一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210324337.2A CN114591867A (zh) 2022-03-29 2022-03-29 一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂及其制备方法和应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114591867A true CN114591867A (zh) 2022-06-07

Family

ID=81811865

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210324337.2A Pending CN114591867A (zh) 2022-03-29 2022-03-29 一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114591867A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115353992A (zh) * 2022-07-13 2022-11-18 安徽省农业科学院土壤肥料研究所 一种具有促生作用的微生物菌剂、制备方法及应用
CN115362924A (zh) * 2022-08-22 2022-11-22 江西省中国科学院庐山植物园 一种用于砾石环境下促进水生植物生根的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20210368807A1 (en) * 2018-12-17 2021-12-02 Agrivalle Brasil Ind E Comercio De Produtos Agricolas Ltda Composition containing microorganisms for promoting growth and reducing hydric stress in cultivated plants and use thereof
CN113862189A (zh) * 2021-10-19 2021-12-31 甘肃省科学院生物研究所 玉米促生、益生、生防菌肥一体化制剂及其制备方法
CN114107096A (zh) * 2021-11-10 2022-03-01 甘肃省科学院生物研究所 玉米种植地生物法改善连作障碍微生物菌剂及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20210368807A1 (en) * 2018-12-17 2021-12-02 Agrivalle Brasil Ind E Comercio De Produtos Agricolas Ltda Composition containing microorganisms for promoting growth and reducing hydric stress in cultivated plants and use thereof
CN113862189A (zh) * 2021-10-19 2021-12-31 甘肃省科学院生物研究所 玉米促生、益生、生防菌肥一体化制剂及其制备方法
CN114107096A (zh) * 2021-11-10 2022-03-01 甘肃省科学院生物研究所 玉米种植地生物法改善连作障碍微生物菌剂及其制备方法

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115353992A (zh) * 2022-07-13 2022-11-18 安徽省农业科学院土壤肥料研究所 一种具有促生作用的微生物菌剂、制备方法及应用
CN115362924A (zh) * 2022-08-22 2022-11-22 江西省中国科学院庐山植物园 一种用于砾石环境下促进水生植物生根的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101225367B (zh) 一种微生物、用该微生物制造的微生物磷肥及其制造方法
CN110283751B (zh) 促进豆科植物生长的菌剂及其所用菌株与应用
CN107493897B (zh) 用丛枝菌根真菌和有机肥促进甜高粱在盐碱地生长的方法
CN111362751B (zh) 一种人参专用的复合微生物抗病促生菌肥及其制备方法
CN101717315B (zh) 一种生物防治根结线虫病的花生专用有机无机复合肥及其制备方法
CN105130685A (zh) 一种含γ-聚谷氨酸有机肥的制备方法
CN114591867A (zh) 一种强化玉米生长效应的复合微生物制剂及其制备方法和应用
CN106701603A (zh) 一种高效促腐剂的制备方法
CN111607526B (zh) 一种秸秆腐熟剂及其制备方法和应用
CN109721421A (zh) 一种含海藻多糖和黄腐酸复合增效磷肥的制备及应用
WO2017082761A1 (ru) Штамм paenibacillus mucilaginosus, используемый в качестве удобрения и для стимуляции роста и защиты растений от грибковых болезней
CN101928161B (zh) 一种直播压缩营养钵原料的制备方法
CN113528398B (zh) 一种具有解磷解钾作用的枯草芽孢杆菌、微生物菌剂及其应用
CN109055274B (zh) 一株锦鸡儿根瘤菌及其发酵培养方法与应用
CN104705347A (zh) 一种花生慢生型根瘤菌剂,其制备方法和用途
CN107628894A (zh) 提高土壤肥力的复合生物菌剂及其制备方法和应用
CN114686387B (zh) 一株黏着剑菌及其在制备微生物肥料中的应用
CN110713953B (zh) 一种具有解磷特性的中间根瘤菌属菌株及其应用
CN112680373B (zh) 一种胶质芽孢杆菌及使用其固态发酵制备生物有机肥的方法
CN113773988B (zh) 一种枯草芽孢杆菌及其在辣椒防病增产中的应用
CN115594549A (zh) 改良盐碱地土壤耕层结构的微生物有机肥及其制备方法
CN115413676A (zh) 一种具有促生作用的微生物制剂
CN113913337A (zh) 一种农用微生物菌液及其应用
CN103756909A (zh) 一种解磷真菌及其在生物磷肥制备和蘑菇栽培中的应用
CN105669262B (zh) 一种甜叶菊废渣复合棉仁发酵生产的微生物有机肥料及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination