CN114586896A - 一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒及其制备方法 - Google Patents
一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于宠物食品和保健技术领域，具体涉及一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒及其制备方法。本发明通过制备酪蛋白钙肽螯合物，将无机钙转化为有机钙，显著提高了钙的利用率和安全性，在发挥生物活性肽功能的同时补充钙。纳米级的钙更容易被吸收利用，因此，本发明创新地利用纳米包埋技术强化钙吸收同时控制钙释放速率的效果，提高钙在宠物肠道内的生物有效性和可溶性。本发明符合现在人们对宠物食品营养健康越来越重视的趋势，对宠物膳食钙营养补充剂的开发有重要的意义。
Description
技术领域
本发明属于宠物食品和保健技术领域，具体涉及一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒及其制备方法。
背景技术
钙是动物机体内含量最多矿物质元素，具有十分重要的生理生化功能。不仅是构成骨骼的主要物质，参与骨骼的新陈代谢，而且是保持神经、肌肉功能所必需的矿物质元素，钙对维持正常的心、肾、肺和凝血功能以及细胞膜和毛细血管的通透性也起着重要作用，还能调节神经递质和激素的分泌和储存、氨基酸的摄取和利用、维生素的吸收等。钙缺乏时会使犬的采食欲望下降，消化吸收率降低，精神衰退，活动量大幅减少，血钙水平下降，骨质疏松，繁殖力也受到破坏，但摄入过量的钙可引起严重的骨骼异常，尤其是处于生长阶段的幼犬。猫体内钙不足会出现佝偻病，骨软病，低血钙症，食欲不振，异食癖等症状。钙缺乏时会使幼猫骨骼变薄，尤其是腰椎，其次是盆骨，而钙含量过高时，猫的采食性降低，生长减缓，血钙浓度升高。
目前市场上补钙产品主要以无机盐为主，其原料主要存在形式为多羟基磷酸钙，碳酸钙，磷酸氢钙等。这些无机盐在胃的消化过程中，消耗大量的胃酸分解出钙离子才能被吸收，或者存在不同程度的副作用。此外还有以有机盐为主的补钙产品。如乳酸钙、醋酸钙、葡萄糖酸钙等有机钙盐。这类钙制剂产品的溶解性比无机盐好，对胃肠刺激性也较小，但因含钙量低，且不同程度上还有些副作用，例如乳酸钙中的乳酸根易带来疲劳感，葡萄糖酸钙不适用于糖尿病患者，醋酸钙因急性毒性较大，易引起高血压、软组织钙化、肾结石等副作用。基于上述内容，目前市场上还没有能够有效强化宠物钙吸收的产品，因此提供一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物显得尤为必要。
发明内容
基于上述内容，本发明提供一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒及其制备方法。
本发明的技术方案之一，一种高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂，质量份数计，原料包括：酪蛋白钙肽3-10份、甘氨酸钙和/或L天门冬氨酸钙20-30份、维生素D30.0001-0.005份，维生素E 0.05-0.15份；所述钙肽添加剂为纳米乳液。
进一步地，所述酪蛋白钙肽的制备方法包括以下步骤：
步骤1：将酶解后的酪蛋白肽粉末溶解在水中，加入氯化钙，并调节pH值为6.5-9.0得到混合物；
步骤2：混合物在加热条件下进行螯合反应后离心得到上清液；
步骤3：将所述上清液和无水乙醇混合后静置，离心得到沉淀物；
步骤4：所述沉淀物进行冷冻干燥得到所述酪蛋白钙肽。
进一步地，所述步骤1中，酶解后的酪蛋白肽粉末的制备包括以下步骤：
(1)将酪蛋白溶解于氢氧化钠溶液中，配成蛋白质量浓度为5％-8％的酪蛋白溶液，调节pH值为7-10，温度45-65℃，加入蛋白酶酶解2-4h，灭酶，得到酶解液；
(2)调节酶解液pH值为4-5，离心取上清液，得到酪蛋白酶解液；
(3)在酪蛋白酶解液中加入氯化钠，静置1-2h，加入与酪蛋白酶解液等体积量的浓度的乙醇，离心收集沉淀物，将沉淀物冷冻干燥得到酪蛋白肽粉末。
进一步地，所述步骤1中，所述酶解后的酪蛋白肽粉末和氯化钙的质量比为50:7-10；所述步骤2中，螯合反应条件：40-60℃，1-3h；所述步骤3中，无水乙醇加入量为上清液体积的4-6倍，静置时间8-12h；所述步骤4中，所述冷冻干燥温度-45～-60℃；所述步骤2和步骤3中的离心条件4000-6000r/min离心10-20分钟。
本发明的技术方案之二，上述高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤a：将维生素E和乳化剂按照质量比1:1-15混合得到混合物A；
步骤b：将酪蛋白钙肽、甘氨酸钙和/或L天门冬氨酸钙、维生素D3与水按照质量比1:5-20混合得到混合物B；
步骤c：25-45℃条件下，将混合物A加入到混合物B中，搅拌混合得到纳米乳液，即为所述钙肽添加剂。
进一步地，所述乳化剂为质量比为1:1-5的卵磷脂和蔗糖脂肪酸酯的混合物。
进一步地，所述步骤c中搅拌混合条件：500-1000rpm搅拌30-60min。
乳化剂卵磷脂及蔗糖脂肪酸酯是宠物食品中允许使用的表面活性剂，这两种表面活性剂按照特定比例混合，再与一定量的水混合，可以形成油包水纳米乳液，维生素E为油溶性组份，需要溶到表面活性剂中，而CCP(酪蛋白钙肽)，甘氨酸钙以及L天门冬氨酸钙为水溶性组分，需要溶到水中，所以需要先溶解，然后混合就形成了油包水纳米乳液，水相负载CCP，及其他两种钙，而油相负载维生素E，维生素E是一种抗氧化剂，包埋后有利于提高钙肽添加剂的抗氧化性能。另外，本发明使用纳米乳液负载三种钙后，冷冻升华得到的是纳米级钙，更容易吸收利用，从而强化钙吸收。本发明钙肽添加剂纳米乳液是油包水纳米乳液，外相为负载维生素E的表面活性剂，内相为负载钙化合物的水相。
本发明的技术方案之三，一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒，质量份数计，原料包括：鸡胸肉55-65份、鸡肝粉5-10份、奶酪粉1-10份、乳钙5-10份、纤维素0.5-1份、上述钙肽添加剂3-10份；
奶酪能增进宠物抵抗疾病的能力，促进代谢，增强活力，保护眼睛健康并保护肌肤健美。奶酪粉中的乳酸菌及其代谢产物具有保健作用，有利于维持宠物肠道内正常菌群的稳定和平衡，防治便泌和腹泻。同时奶酪粉中含有乳蛋白质，有助于增强纳米乳液的均匀分散，增强钙肽在冻干颗粒中均匀分布。
鸡肝粉含有丰富的蛋白质、磷、铁、锌、维生素A、B族维生素，起到补充矿物质和维生素的目的，使冻干颗粒营养全面，同时增强宠物的食欲。
宠物食品中，补钙同时需要调节钙磷比例，乳钙添加可以调节钙肽总钙磷比，协同增强宠物钙的吸收利用。
鸡胸肉提供宠物优质蛋白质及脂肪，保证冻干颗粒的营养特性，同时赋予冻干颗粒一定的持水性及粘弹性，增强咀嚼质感，增强适口性。
本发明的技术方案之四，上述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒的制备方法，包括以下步骤：
将鸡胸肉、鸡肝粉、奶酪粉、乳钙、维生素混合得到预混料；
预混料和所述钙肽添加剂混合经挤压造粒得到初级制品颗粒；
将所述初级制品颗粒在-20℃～-30℃条件下速冻2～10h，得到冷冻中级制品颗粒；
将所述冷冻中级制品颗粒在30～90℃，-0.1Mpa条件下升华干燥30-300min得到所述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒。
本发明的温度范围和减压真空干燥条件下，钙肽不易变性，维持高生物活性，同时肽与钙离子的结合形式不易发生变化，保证二者螯合形式，提高钙离子的生物利用度。
本发明的技术方案之五，一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物主粮，质量份数计，原料包括：主料、主粮添加剂和上述钙肽添加剂3-10份；
其中，主料：冻干鸡肉20-30份、鸡肉粉10-20份、豌豆10-15份、甘薯粉5-8份、鸡油5-8份、木薯淀粉5-8份、鸡肝水解物2-5份、红甜菜粉0.5-1份、喷雾干燥鸭血球蛋白粉1-3份、啤酒酵母粉1-3份、鱼粉1份、菊糖0.5-1份、鸡肝粉2-5份、纤维素0.5-1份、亚麻籽油1-3份、蔓越莓粉0.1-0.5份、苹果粉0.1-0.5份、蓝莓粉0.1-0.5份；
主粮添加剂：果寡糖0.1-0.2份、维生素A 0.01-0.03份、dl-α-生育酚乙酸酯0.01-0.03份、维生素B2 0.01-0.03份、维生素B1 0.01-0.03份、D-泛酸钙0.01-0.03份、蛋白铜0.01-0.03份、蛋白锰0.01-0.03份、蛋白锌0.01-0.03份、蛋白铁0.01-0.03份、亚硒酸钠0.01-0.03份、氯化胆碱0.01-0.03份、氯化钾0.01-0.03份、氯化钠0.03-0.05份、β-1,3-D-葡聚糖0.1-0.4份、天然类固醇萨洒皂角苷0.01-0.03份、迷迭香提取物0.01-0.03份。
钙肽组合物主粮：添加钙肽目的为了强化主粮钙的利用率，该主粮为营养均衡的宠物日粮，其中的肌肉，豌豆及甘薯粉，淀粉，鸡肝等辅料均为提供维持宠物蛋白，脂肪及碳水化合物的营养需求。同时赋予该钙肽主粮产品特殊的粘弹性及咀嚼质感，增强适口性。
蔓越莓粉、苹果粉、蓝莓粉提供维生素及纤维素。果寡糖具有调节宠物肠道菌群的作用，促进益生菌生长。各种矿物质蛋白补充宠物有机态矿物质，有利于矿物质的吸收利用。同时矿物质蛋白通过与钙肽通过分子间作用，促进钙肽在主粮中的均匀分布，增强钙肽的平衡利用。
本发明的技术方案之六，上述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物主粮的制备方法，包括以下步骤：
粉碎：将除所述钙肽添加剂以外的原料粉碎过100目筛；
调质：对木薯淀粉和甘薯粉进行高温调质后加入除鸡油、亚麻籽油以外的剩余主粮原料进行低温调质得到主料预混合物料；
造粒：将所述主料预混合物料和主粮添加剂、钙肽添加剂混合，挤压造粒得到初级制品颗粒；将所述初级制品颗粒进行挤压膨化后造粒，然后烘干得到物料颗粒；
喷涂：使用鸡油、亚麻籽油混合物对所述物料颗粒进行喷涂，灭菌得到所述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物主粮。
进一步地，所述高温调质条件75-85℃，低温调质条件40-60℃，挤压膨化温度120-125℃，所述烘干为115-120℃条件下烘干至水分含量6-8wt％。
本发明的技术方案之七，一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食冻干粉，原料包括：冻干粉主料、冻干粉添加剂和上述钙肽添加剂3-10份；
其中冻干粉主料：全脂羊乳粉25-40份、冻鸡肉20-35份、鸡肝3-5份、鸡脖3-5份、魔芋粉3-4份、蛋黄粉2-4份、鱼油1-3份、丝兰0.1-0.3份、生姜0.1-0.3份；
冻干粉添加剂：牛磺酸0.1-0.3份，L-半胱氨酸0.1-0.3份，紫苏籽提取物0.5-1.5份，甘露寡糖0.1-0.3份，果寡糖0.1-0.3份，β-半乳糖苷酶0.05-1份，氯化胆碱0.01-0.03份，维生素C 0.01-0.03份，烟酰胺0.01-0.03份，蛋白锌0.01-0.03份，蛋白铁0.01-0.03份，蛋白铜0.01-0.03份，蛋白锰0.01-0.03份，维生素B1 0.01-0.03份，维生素B2 0.01-0.03份，D-泛酸钙0.01-0.03份，盐酸吡哆醇0.01-0.03份，茶多酚0.1-0.3份，德氏乳杆菌0.1-0.3份，嗜热链球菌0.1-0.3份，两歧双歧杆菌0.1-0.3份，枯草芽孢杆菌0.1-0.3份，叶酸0.01-0.03份，酵母硒0.01-0.03份，维生素K 0.01-0.03份、D-生物素0.01-0.03份，氰钴胺0.01-0.03份，迷迭香提取物0.01-0.03份。
全脂羊乳粉富含蛋白，特别是免疫球蛋白，增强宠物免疫力，协同强化钙的吸收利用。
冻鸡肉、鸡肝提供蛋白，同时赋予产品黏性及咀嚼感，增强适口性。
魔芋粉赋予产品特殊黏性。
蛋黄粉富含蛋白及卵磷脂，其中卵磷脂为天然表面活性剂，帮助钙肽在产品中的均匀分布，强化吸收利用。
本发明的技术方案之八，上述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食冻干粉的制备方法，包括以下步骤：
将除钙肽添加剂以外的原料粉碎过100目筛，得到预混料；
所述预混料和所述钙肽添加剂混合经挤压造粒得到初级制品颗粒；
将所述初级制品颗粒在-20℃～-30℃条件下速冻2～10h，得到冷冻中级制品颗粒；
将所述冷冻中级制品颗粒在30～90℃，-0.1Mpa条件下升华干燥30-300min后粉碎，得到所述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食冻干粉。
本发明的技术方案之九，一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食咬胶，原料包括：鸡肉30-45份、牛肉15-25份、鸭肉5-10份、牛皮3-5份、大豆分离蛋白5-8份、淀粉3-5份、上述钙肽添加剂3-10份。
零食产品要求较高的适口性，鸡牛鸭提供蛋白同时强化咀嚼质感，牛皮含有胶原蛋白，强化持水力，淀粉强化粘弹性。
大豆分离蛋白提供植物蛋白，增加咀嚼弹力，同时帮助钙肽在产品中的均匀分布，强化钙的利用率。
本发明的技术方案之十，上述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食咬胶的制备方法，包括以下步骤：
将除钙肽添加剂以外的原料粉碎过100目筛，得到预混料；
所述预混料和钙肽添加剂混合，调质得到混合物；
所述混合物压制、成型后35-45℃真空干燥1-2h得到所述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食咬胶。
进一步地，所述调质温度60-75℃，调质时间10-30min，压制条件模压压力范围10-25公斤。
与现有技术相比，本发明的有益效果：
本发明钙肽添加剂原料中，使用具有生物活性结构的氨基酸钙(甘氨酸钙、L-天门冬氨酸钙)，属于氨基酸螯合钙，其被吸收后并不是立即解离成Ca2+和氨基酸，而是以螫合物的形式持续解离出Ca2+供肌体利用，避免了血清中Ca2+浓度过高所致的肾排Ca2+量增加或高钙血症，保证了钙的充分吸收和利用且服用无毒副反应。此外本发明钙肽添加剂原料中还使用了酪蛋白钙肽，肽是维持生命过程至关重要的物质，肽钙凭借着自身既可以补充钙并提高其在体内的吸收利用率，还可以补充具有重要生物活性的肽的特点，肽与金属元素螯合时，是由末端氨基及邻近的肽链与金属元素形成单环螯合结构，羧基因空间位阻一般不参与螯合，故此种螯合物保留有可通过肽系统吸收的自由羧基，比氨基酸螯合钙更易于吸收，因还有非螯合氧肽键参与配位作用，使得多肽螯合物的稳定性更强。由牛乳中酪蛋白经酶处理制取酪蛋白钙肽，是一种易吸收、含钙丰富、不刺激肠胃的补钙剂。本发明通过制备酪蛋白钙肽螯合物，将无机钙转化为有机钙，显著提高了钙的利用率和安全性，在发挥生物活性肽功能的同时补充钙。纳米级的钙更容易被吸收利用，因此，本发明创新地利用纳米包埋技术强化钙吸收同时控制钙释放速率的效果，提高钙在宠物肠道内的生物有效性和可溶性。本发明符合现在人们对宠物食品营养健康越来越重视的趋势，对宠物膳食钙营养补充剂的开发有重要的意义。
本发明使用有机钙肽作为宠物钙营养补充剂的状况，针对宠物对钙的营养需求，实现补钙同时，不产生任何副作用，同时高效提高宠物对钙的吸收利用率，有效提升机体免疫力。
本发明采用酪蛋白肽与钙进行螯合反应，制得的酪蛋白钙肽螯合物具有钙肽双补的功效，维生素D3与维生素E协同强化钙吸收，提高机体抗氧化能力。
本发明利用新型纳米技术，根据钙肽及其它营养物溶解特性及宠物机体的吸收特性，对钙肽及其它营养素进行纳米包埋，实现钙的纳米级尺度控制，强化钙吸收，同时能够保持肽的生物活性，还能达到控制其缓慢释放的目的，对宠物机体充分发挥作用。
在上述内容的基础上，本发明还公开了一种高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒、主粮、零食冻干粉、零食咬胶及其制备方法，该强化钙吸收的冻干颗粒、主粮及零食中的钙肽组合物添加剂由酪蛋白钙肽(CCP)、甘氨酸钙或L天门冬氨酸钙、维生素D3及维生素E组成。由预混料和添加剂混合经冷冻干燥、挤压膨化干燥和真空干燥制成。本发明将添加剂按照溶解性及释放特性包埋到纳米乳液中，实现钙肽组合物CCP、甘氨酸钙或L天门冬氨酸钙、维生素D3及维生素E的纳米尺度控制，强化吸收效果，同时保护维生素E结构免遭破坏，提高抗氧化能力。本发明利用了先进的纳米技术强化钙吸收，配方合理，在强化宠物钙吸收的同时，提升其机体免疫力及抗氧化能力。本发明对新型钙补充剂在宠物食品中的应用与发展有重要意义。
附图说明
图1为本发明效果验证例1中酪蛋白钙肽微观图片；
图2为本发明效果验证例1中酪蛋白钙肽的抗氧化性能结果图，其中(a)为酪蛋白钙的DPPH自由基清除活性，(b)为酪蛋白钙的ABTS自由基清除活性，(c)为酪蛋白钙的总还原力；
图3为本发明效果验证例1中酪蛋白钙肽在胃液中的释放能力结果图；
图4为本发明效果验证例1中酪蛋白钙肽在肠液中的持钙能力结果图。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本发明说明书和实施例仅是示例性的。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
实施例1一种高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒的制备
质量份数计，称取原料：冻鸡胸肉55份、鸡肝粉5份、奶酪粉1份、乳钙5份、纤维素0.5份、钙肽添加剂3份(质量份数计，构成为：酪蛋白钙肽(CCP)3份、甘氨酸钙25份、维生素D3 0.0001份及维生素E 0.05份)。
制备步骤如下：
步骤1：酪蛋白钙肽的制备：
(1)酶解：将酪蛋白完全溶解于1mol/L的氢氧化钠溶液(0.5-1.5mol/L均可)中，配成蛋白质量浓度5％的酪蛋白溶液。调节pH值为7.5，温度保持在45℃，加入蛋白酶酶解2h，灭酶，得到酶解液。用盐酸调节pH值为4，离心(5000r/min离心10分钟)取上清液，得到酪蛋白酶解液。加入与酪蛋白酶解液等体积量的浓度的乙醇，离心(5000r/min离心10分钟)收集沉淀物，将沉淀物冷冻干燥得到酪蛋白肽粉末。
(2)螯合：将酪蛋白肽粉末溶解在蒸馏水中，浓度为20mg/L(10-50mg/mL均可)，然后按照质量比(酪蛋白肽粉末/CaCl2，W/W)为50:7加入CaCl2，调节pH至6.5。将上述混合物在40℃连续搅拌水浴中充分螯合1h。此后，将样品以4000r/min离心10min。将所得上清液与4倍体积的无水乙醇混合，然后静置8h后以4000r/min离心10min以去除游离Ca2+。
(3)冷冻干燥：收集沉淀物，-45℃冷冻干燥即得到酪蛋白肽钙(CCP)。
步骤2：高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂的制备
(1)将维生素E与乳化剂(质量比为1:2的卵磷脂和蔗糖脂肪酸酯混合物)按照质量比1：5的比例混合，搅拌，得到混合物A。
(2)将酪蛋白钙肽(CCP)、甘氨酸钙及维生素D3混合后得到钙混合物，钙混合物与水按照质量比1：8混合，搅拌，得到混合物B；
(3)在30℃条件下将混合物A缓慢流加入混合物B中，500rpm搅拌30min，制得纳米乳液，即为所述高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂；
步骤3制粒
(1)将冻鸡胸肉、鸡肝粉、奶酪粉、乳钙、纤维素分别进行粉碎过100筛后混合均匀得到预混原料；
(2)将预混原料与添加剂原料纳米乳液混合，然后将其放入挤压机中，经模具造粒制成颗粒状初级制品颗粒(1cm*1cm-2cm*2cm圆柱体)；
步骤4速冻
将颗粒状初级制品颗粒在-25℃条件下进行速冻4h，得到冷冻中级制品颗粒；
步骤5升华干燥
对冷冻中级制品颗粒进行升华干燥，升华干燥温度为30℃升华时间为300min，升华真空度为-0.1Mpa，干燥后进行封装，即得到高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒。
实施例2一种高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒的制备
质量份数计，称取原料：冻鸡胸肉55份、鸡肝粉10份、奶酪粉3份、乳钙8份、纤维素1份、钙肽添加剂10份(质量份数计，构成为：酪蛋白钙肽(CCP)5份、L天门冬氨酸钙20份、维生素D30.0003份及维生素E 0.1份)。
制备步骤如下：
步骤1：酪蛋白钙肽的制备：
(1)酶解：将酪蛋白完全溶解于1.5mol/L的氢氧化钠溶液中，配成蛋白质量浓度7％的酪蛋白溶液。调节pH值为8，温度保持在55℃，加入蛋白酶酶解3h，灭酶，得到酶解液。用盐酸调节pH值为4.5，离心(4000r/min离心10分钟)取上清液，得到酪蛋白酶解液。加入与酪蛋白酶解液等体积量的浓度的乙醇，离心(6000r/min离心10分钟)收集沉淀物，将沉淀物冷冻干燥得到酪蛋白肽粉末。
(2)螯合：将酪蛋白肽粉末溶解在蒸馏水中浓度为50mg/L，然后按照质量比(酪蛋白肽粉末/CaCl2，W/W)为50:8加入CaCl2，调节pH至8。将上述混合物在50℃连续搅拌水浴中充分螯合2h。此后，将样品以5000r/min离心15min。将所得上清液与5倍体积的无水乙醇混合，然静置10h后以5000r/min离心15min以去除游离Ca2+。
(3)冷冻干燥：收集沉淀物，-50℃冷冻干燥即得到酪蛋白肽钙(CCP)。
步骤2：高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂的制备
(1)将维生素E与乳化剂(质量比为1:4的卵磷脂和蔗糖脂肪酸酯混合物)按照质量比1：10的比例混合，搅拌，得到混合物A。
(2)将酪蛋白钙肽(CCP)、L天门冬氨酸钙及维生素D3混合后得到钙混合物，钙混合物与水按照质量比1：15混合，搅拌，得到混合物B；
(3)在25℃条件下将混合物A缓慢流加入混合物B中，800rpm搅拌40min，制得纳米乳液，即为所述高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂；
步骤3制粒
(1)将冻鸡胸肉、鸡肝粉、奶酪粉、乳钙、纤维素分别进行粉碎过100筛后混合均匀得到预混原料；
(2)将预混原料与添加剂原料纳米乳液混合，然后将其放入挤压机中，经模具造粒制成颗粒状初级制品颗粒(1cm*1cm-2cm*2cm圆柱体)；
步骤4速冻
将颗粒状初级制品颗粒在-30℃条件下进行速冻5h，得到冷冻中级制品颗粒；步骤5升华干燥
对冷冻中级制品颗粒进行升华干燥，升华干燥温度为70℃升华时间为90min，升华真空度为-0.1Mpa，干燥后进行封装，即得到高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒。
实施例3一种高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒的制备
质量份数计，称取原料：冻鸡胸肉65份、鸡肝粉5份、奶酪粉1份、乳钙5份、纤维素0.5份、钙肽添加剂8份(质量份数计，构成为：酪蛋白钙肽(CCP)3份、甘氨酸钙20份、维生素D3 0.0001份及维生素E 0.05份)。
制备步骤如下：
步骤1：酪蛋白钙肽的制备：
(1)酶解：将酪蛋白完全溶解于0.5mol/L的氢氧化钠溶液中，配成蛋白质量浓度8％的酪蛋白溶液。调节pH值为10，温度保持在65℃，加入蛋白酶酶解4h，灭酶，得到酶解液。用盐酸调节pH值为5，离心(4000r/min离心10分钟)取上清液，得到酪蛋白酶解液。加入与酪蛋白酶解液等体积量的浓度的乙醇，离心(6000r/min离心10分钟)收集沉淀物，将沉淀物冷冻干燥得到酪蛋白肽粉末。
(2)螯合：将酪蛋白肽粉末溶解在蒸馏水中，浓度为10mg/L，然后按照质量比(酪蛋白肽粉末/CaCl2，W/W)为50:10加入CaCl2，调节pH至9.0。将上述混合物在60℃连续搅拌水浴中充分螯合3h。此后，将样品以6000r/min离心20min。将所得上清液与6倍体积的无水乙醇混合，然静置12h后以6000r/min离心20min以去除游离Ca2+。
(3)冷冻干燥：收集沉淀物，-60℃冷冻干燥即得到酪蛋白肽钙(CCP)。
步骤2：高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂的制备
(1)将维生素E与乳化剂(质量比为1:5的卵磷脂和蔗糖脂肪酸酯混合物)按照质量比1：15的比例混合，搅拌，得到混合物A。
(2)将酪蛋白钙肽(CCP)、甘氨酸钙及维生素D3混合后得到钙混合物，钙混合物与水按照质量比1：20混合，搅拌，得到混合物B；
(3)在35℃条件下将混合物A缓慢流加入混合物B中，1000rpm搅拌50min，制得纳米乳液，即为所述高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂；
步骤3制粒
(1)将冻鸡胸肉、鸡肝粉、奶酪粉、乳钙、纤维素分别进行粉碎过100筛后混合均匀得到预混原料；
(2)将预混原料与添加剂原料纳米乳液混合，然后将其放入挤压机中，经模具造粒制成颗粒状初级制品颗粒(1cm*1cm-2cm*2cm圆柱体)；
步骤4速冻
将颗粒状初级制品颗粒在-30℃条件下进行速冻10h，得到冷冻中级制品颗粒；
步骤5升华干燥
对冷冻中级制品颗粒进行升华干燥，升华干燥温度为50℃升华时间为200min，升华真空度为-0.1Mpa，干燥后进行封装，即得到高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒。
实施例4一种高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒的制备
质量份数计，称取原料：冻鸡胸肉60份、鸡肝粉8份、奶酪粉3份、乳钙5份、纤维素0.5份、钙肽添加剂7份(质量份数计，构成为：酪蛋白钙肽(CCP)3份、L天门冬氨酸钙20份、维生素D3 0.0002份及维生素E 0.15份)。
制备步骤如下：
步骤1：酪蛋白钙肽的制备：
(1)酶解：将酪蛋白完全溶解于1mol/L的氢氧化钠溶液中，配成蛋白质量浓度7％的酪蛋白溶液。调节pH值为8，温度保持在60℃，加入蛋白酶酶解3h，灭酶，得到酶解液。用盐酸调节pH值为4.5，离心(4000r/min离心10分钟)取上清液，得到酪蛋白酶解液。加入与酪蛋白酶解液等体积量的浓度的乙醇，离心(6000r/min离心10分钟)收集沉淀物，将沉淀物冷冻干燥得到酪蛋白肽粉末。
(2)螯合：将酪蛋白肽粉末溶解在蒸馏水中，浓度为20mg/L，然后按照质量比(酪蛋白肽粉末/CaCl2，W/W)为50:7加入CaCl2，调节pH至8。将上述混合物在50℃连续搅拌水浴中充分螯合2h。此后，将样品以6000r/min离心20min。将所得上清液与5倍体积的无水乙醇混合，然静置10h后以5000r/min离心15min以去除游离Ca2+。
(3)冷冻干燥：收集沉淀物，-55℃冷冻干燥即得到酪蛋白肽钙(CCP)。
步骤2：高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂的制备
(1)将维生素E与乳化剂(质量比为1:3的卵磷脂和蔗糖脂肪酸酯混合物)按照质量比1：10的比例混合，搅拌，得到混合物A。
(2)将酪蛋白钙肽(CCP)、L天门冬氨酸钙及维生素D3混合后得到钙混合物，钙混合物与水按照质量比1：15混合，搅拌，得到混合物B；
(3)在45℃条件下将混合物A缓慢流加入混合物B中，600rpm搅拌60min，制得纳米乳液，即为所述高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂；
步骤3制粒
(1)将冻鸡胸肉、鸡肝粉、奶酪粉、乳钙、纤维素分别进行粉碎过100筛后混合均匀得到预混原料；
(2)将预混原料与添加剂原料纳米乳液混合，然后将其放入挤压机中，经模具造粒制成颗粒状初级制品颗粒(1cm*1cm-2cm*2cm圆柱体)；
步骤4速冻
将颗粒状初级制品颗粒在-25℃条件下进行速冻6h，得到冷冻中级制品颗粒；步骤5升华干燥
对冷冻中级制品颗粒进行升华干燥，升华干燥温度为60℃升华时间为180min，升华真空度为-0.1Mpa，干燥后进行封装，即得到高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒。
实施例5一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物主粮
步骤1：原料由主料、主粮添加剂和实施例1制备的钙肽添加剂构成；具体的，质量份数计：
(1)钙肽添加剂3份；
(2)主料：冻干鸡肉20份、鸡肉粉10份、豌豆10份、甘薯粉8份、鸡油8份、木薯淀粉8份、鸡肝水解物5份、红甜菜粉1份、喷雾干燥鸭血球蛋白粉3份、啤酒酵母粉1份、鱼粉1份、菊糖1份、鸡肝粉2份、纤维素1份、亚麻籽油3份、蔓越莓粉0.5份、苹果粉0.5份、蓝莓粉0.5份；
(3)主粮添加剂：果寡糖0.2份、维生素A 0.03份、dl-α-生育酚乙酸酯0.03份、维生素B2 0.03份、维生素B1 0.03份、D-泛酸钙0.03份、蛋白铜0.03份、蛋白锰0.03份、蛋白锌0.03份、蛋白铁0.03份、亚硒酸钠0.03份、氯化胆碱0.03份、氯化钾0.03份、氯化钠0.05份、β-1,3-D-葡聚糖0.4份、天然类固醇萨洒皂角苷0.03份、迷迭香提取物0.03份.
步骤2：
粉碎：将除所述钙肽添加剂以外的原料粉碎过100目筛；
调质：对木薯淀粉和甘薯粉进行高温调质(85℃)后加入剩余主粮原料(鸡油、亚麻籽油除外)进行低温调质(60℃)得到主料预混合物料；
造粒：将所述主料预混合物料和主粮添加剂原料、钙肽添加剂混合，挤压造粒得到初级制品颗粒；将所述初级制品颗粒进行125℃挤压膨化后造粒，然后120℃烘干至含水量6wt％得到物料颗粒；
喷涂：使用鸡油、亚麻籽油混合物对所述物料颗粒进行喷涂，灭菌得到所述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物主粮。
实施例6一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食冻干粉
步骤1：原料由冻干粉主料、冻干粉添加剂和实施例1所制备的钙肽添加剂构成；具体的：
钙肽添加剂10份；
冻干粉主料：全脂羊乳粉40份、冻鸡肉35份、鸡肝5份、鸡脖5份、魔芋粉4份、蛋黄粉4份、鱼油3份、丝兰0.3份、生姜0.3份；
冻干粉添加剂：牛磺酸0.3份，L-半胱氨酸0.3份，紫苏籽提取物1.5份，甘露寡糖0.3份，果寡糖0.1份，β-半乳糖苷酶0.05份，氯化胆碱0.01份，维生素C 0.01份，烟酰胺0.01份，蛋白锌0.01份，蛋白铁0.01份，蛋白铜0.01份，蛋白锰0.01份，维生素B1 0.01份，维生素B2 0.03份，D-泛酸钙0.01份，盐酸吡哆醇0.01份，茶多酚0.3份，德氏乳杆菌0.3份，嗜热链球菌0.3份，两歧双歧杆菌0.3份，枯草芽孢杆菌0.3份，叶酸0.03份，酵母硒0.03份，维生素K0.03份、D-生物素0.03份，氰钴胺0.03份，迷迭香提取物0.03份。
步骤2：
将除钙肽添加剂以外的原料粉碎过100目筛，得到预混料；
所述预混料和所述钙肽添加剂混合经挤压造粒得到初级制品颗粒；
将所述初级制品颗粒在-30℃条件下速冻10h，得到冷冻中级制品颗粒；
将所述冷冻中级制品颗粒在60℃，-0.1Mpa条件下升华干燥150min后粉碎，得到所述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食冻干粉。
实施例7一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食咬胶
步骤1：质量份数计，原料由以下成分构成：鸡肉45份、牛肉25份、鸭肉5份、牛皮3份、大豆分离蛋白8份、淀粉5份，实施例1制备的钙肽添加剂8份。
步骤2：将除钙肽添加剂以外的原料粉碎过100目筛，得到预混料；所述预混料和钙肽添加剂混合，调质(75℃，30min)得到混合物；所述混合物压制、成型后45℃真空干燥2h得到所述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食咬胶。
效果验证例1
(1)实施例1制备的钙肽添加剂中的酪蛋白钙肽微观图片见图1，纳米乳液粒径分析结果显示包裹酪蛋白钙肽纳米乳液粒径为100-130nm范围。
(2)对实施例1制备的酪蛋白钙抗氧化性能(DPPH自由基清除活性、ABTS自由基清除活性、还原力)进行验证，具体验证过程如下：
取2mL不同浓度的酪蛋白钙溶液(0.2mg/mL，0.4mg/mL，0.6mg/mL，0.8mg/mL，1mg/mL，2mg/mL，4mg/mL，6mg/mL，8mg/mL)与2mL DPPH自由基溶液混合，充分摇匀，室温避光孵育30分钟。然后，使用紫外分光光度计在517nm处测量吸光度。无水乙醇代替DPPH溶液作为空白，蒸馏水代替样品作为对照。所有测定一式三份进行。DPPH自由基清除活性定义如下：
其中Ai、Aj和A0分别代表样品、空白和对照的吸光度。
ABTS溶液(7mM)和等体积的过硫酸钾(2.45mM)在黑暗条件下孵育16小时以制备ABTS+溶液。然后通过用无水乙醇将ABTS+溶液稀释至734nm处的吸光度为0.70±0.02来制备ABTS+自由基的工作溶液。随后，将0.1mL不同浓度(0.2mg/mL，0.4mg/mL，0.6mg/mL，0.8mg/mL，1mg/mL，2mg/mL，4mg/mL，6mg/mL，8mg/mL)的酪蛋白钙溶液与3.9mL ABTS+工作溶液混合10分钟，然后在734nm处测定吸光度。用蒸馏水代替样品作为对照。所有测定一式三份进行。ABTS自由基清除活性表示如下：
其中Ai和A0分别代表样品和空白的吸光度。
还原力测定：将2.5mL磷酸盐缓冲液(0.2M，pH6.6)和2.5mL铁氰化钾溶液(1％，w/v)加入1mL酪蛋白钙肽溶液(1mg/mL,2mg/mL,4mg/mL,6mg/mL,8mg/mL,10mg/mL)中，在50℃水浴中摇晃并孵育20分钟。之后，加入2.5mL三氯乙酸(10％，w/v)，将混合物以4000r/min离心10min收集上清液。最后，在2.5mL上清液中加入2.5mL蒸馏水和0.5mL氯化铁(0.1％，w/v)，室温孵育10分钟。在700nm处测量吸光度。所有测定一式三份进行。还原力结果表示为700nm处的吸光度。
结果见图2，图2中(a)为酪蛋白钙的DPPH自由基清除活性，(b)为酪蛋白钙的ABTS自由基清除活性，(c)为酪蛋白钙的总还原力；图2显示，酪蛋白钙肽拥有良好的抗氧化能力。
(3)对实施例1制备的酪蛋白钙在胃液中的释放能力进行检测，具体过程如下：
将酪蛋白钙(5mg/mL)、葡萄糖酸钙(5mM)、氯化钙(5mM)分别溶于同等体积的模拟胃液中，调节pH为2，并在37℃的恒温摇床中孵育(150r/min)，模拟胃部消化，分别在0、5、10、30、60和120min时间点取样，并对取出样本即刻沸水浴15min灭活(沸水浴使得加入的胃蛋白酶丧失活性，即中止反应)，再用1M NaHCO3中和至pH至7。消化物6000r/min离心10分钟，收集上清液通过参考国标GB 5009.92—2016中“食品中钙的测定”中的“EDTA滴定法”测定钙含量。每组实验分别做三份平行。
结果见图3，图3显示和无机的氯化钙及有机的葡萄糖酸钙相比，胃液中钙肽能够缓慢释放钙离子，降低对胃的刺激。
(4)对实施例1制备的酪蛋白钙在肠液中的持钙能力进行检测，具体过程如下：
将经过步骤(3)胃消化后的溶液用1M NaOH调节pH至7.6。然后与预先配制好的人工肠液以5：1(胃液：肠液)的比例混合，所得混合物在37℃恒温摇床下(150r/min)继续模拟体内的小肠消化，分别在0、15、30、60、120和180分钟的五个时间点取样，并对取出样本沸水浴15min灭酶活，再用1M NaHCO3中和至pH至7，消化物6000r/min离心10分钟，收集上清液通过EDTA滴定法测定钙含量。每组实验分别做三份平行。
胃肠消化过程中的钙溶解力按下列公式计算：
其中S和C分别代表可溶性钙含量和总钙含量。
结果见图4，图4显示肠液中钙极容易形成沉淀而降低钙的生物利用度，钙肽的持钙能力远优于无机的氯化钙及有机的葡萄糖酸钙，钙肽的生物利用度最好。
对比例1
采用实施例1所述的方法和原料制备一种高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂，区别在于，省略钙肽添加剂原料中的甘氨酸钙；对得到的钙肽添加剂按照实施例2的方法制备高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒。
对比例2
采用实施例1所述的方法和原料制备一种高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂，区别在于，省略钙肽添加剂原料中的酪蛋白钙肽；对得到的钙肽添加剂按照实施例2的方法制备高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒。
对比例3
采用实施例1所述的原料制备一种高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂，区别在于，区别在于，省略钙肽添加剂原料中的维生素E；对得到的钙肽添加剂按照实施例2的方法制备高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒。
对比例4
采用实施例1所述的原料制备一种高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂，区别在于，区别在于，省略钙肽添加剂原料中的D3；对得到的钙肽添加剂按照实施例2的方法制备高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒。
对比例5
采用实施例1所述的原料制备一种高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂，区别在于，将酪蛋白钙肽、L天门冬氨酸钙、维生素D3、维生素E进行直接混合，省略制备纳米乳液步骤。对得到的钙肽添加剂按照实施例2的方法制备高效强化宠物钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒。
效果验证例2
选择犬龄、健康状况相同的犬240只(生长期犬120只、成年犬120只)，分为12组，每组20只(生长期犬10只、成年犬10只)，标记实验组1-12；实验组1-4分别饲喂市售的犬粮+实施例1-4冻干颗粒4g/日(4-6g/日均可)；实验组5饲喂实施例5主粮；实验组6-10饲喂市售的犬粮+对比例1-5冻干颗粒4g/日(4-6g/日均可)；实验组11饲喂市售的犬粮；实验组12饲喂市售的犬粮+市售补钙营养品4g(乳钙片)；
饲喂30天后观察各组精神状态，测定各组犬的平均日采食量，测定血液中钙含量，生长期犬饲喂结果如表1所示，成年犬饲喂结果如表2所示。
表1生长期犬饲喂结果
表2成年犬饲喂结果
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂，其特征在于，质量份数计，原料包括：酪蛋白钙肽3-10份、甘氨酸钙和/或L天门冬氨酸钙20-30份、维生素D30.0001-0.005份，维生素E0.05-0.15份；所述钙肽添加剂为纳米乳液。
2.一种根据权利要求1所述的高效强化宠物钙吸收的钙肽添加剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤a：将维生素E和乳化剂按照质量比1:1-15混合得到混合物A；
步骤b：将酪蛋白钙肽、甘氨酸钙和/或L天门冬氨酸钙、维生素D3与水按照质量比1:5-20混合得到混合物B；
步骤c：25-45℃条件下，将混合物A加入到混合物B中，搅拌混合得到纳米乳液，即为所述钙肽添加剂。
3.一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒，其特征在于，质量份数计，原料包括：鸡胸肉55-65份、鸡肝粉5-10份、奶酪粉1-10份、乳钙5-10份、纤维素0.5-1份、权利要求1所述的钙肽添加剂3-10份；
其中所述维生素为维生素D3和维生素E。
4.一种根据权利要求3所述的高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将鸡胸肉、鸡肝粉、奶酪粉、乳钙、纤维素混合得到预混料；
所述预混料和所述钙肽添加剂混合经挤压造粒得到初级制品颗粒；
将所述初级制品颗粒在-20℃～-30℃条件下速冻2～10h，得到冷冻中级制品颗粒；
将所述冷冻中级制品颗粒在30～90℃，-0.1Mpa条件下升华干燥30-300min得到所述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物冻干颗粒。
5.一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物主粮，其特征在于，质量份数计，原料包括：主料、主粮添加剂和权利要求1所述的钙肽添加剂3-10份；
其中，主料：冻干鸡肉20-30份、鸡肉粉10-20份、豌豆10-15份、甘薯粉5-8份、鸡油5-8份、木薯淀粉5-8份、鸡肝水解物2-5份、红甜菜粉0.5-1份、喷雾干燥鸭血球蛋白粉1-3份、啤酒酵母粉1-3份、鱼粉1份、菊糖0.5-1份、鸡肝粉2-5份、纤维素0.5-1份、亚麻籽油1-3份、蔓越莓粉0.1-0.5份、苹果粉0.1-0.5份、蓝莓粉0.1-0.5份；
主粮添加剂：果寡糖0.1-0.2份、维生素A 0.01-0.03份、dl-α-生育酚乙酸酯0.01-0.03份、维生素B20.01-0.03份、维生素B10.01-0.03份、D-泛酸钙0.01-0.03份、蛋白铜0.01-0.03份、蛋白锰0.01-0.03份、蛋白锌0.01-0.03份、蛋白铁0.01-0.03份、亚硒酸钠0.01-0.03份、氯化胆碱0.01-0.03份、氯化钾0.01-0.03份、氯化钠0.03-0.05份、β-1,3-D-葡聚糖0.1-0.4份、天然类固醇萨洒皂角苷0.01-0.03份、迷迭香提取物0.01-0.03份。
6.一种根据权利要求5所述的高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物主粮的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
粉碎：将除所述钙肽添加剂以外的原料粉碎过100目筛；
调质：对木薯淀粉和甘薯粉进行高温调质后，加入除鸡油、亚麻籽油以外的剩余主粮原料进行低温调质得到主料预混合物料；
造粒：将所述主料预混合物料和主粮添加剂、钙肽添加剂混合，挤压造粒得到初级制品颗粒；将所述初级制品颗粒进行挤压膨化后造粒，然后烘干得到物料颗粒；
喷涂：使用鸡油、亚麻籽油混合物对所述物料颗粒进行喷涂，灭菌得到所述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物主粮。
7.一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食冻干粉，其特征在于，质量份数计，原料包括：冻干粉主料、冻干粉添加剂和权利要求1所述的钙肽添加剂3-10份；
其中冻干粉主料：全脂羊乳粉25-40份、冻鸡肉20-35份、鸡肝3-5份、鸡脖3-5份、魔芋粉3-4份、蛋黄粉2-4份、鱼油1-3份、丝兰0.1-0.3份、生姜0.1-0.3份；
冻干粉添加剂：牛磺酸0.1-0.3份，L-半胱氨酸0.1-0.3份，紫苏籽提取物0.5-1.5份，甘露寡糖0.1-0.3份，果寡糖0.1-0.3份，β-半乳糖苷酶0.05-1份，氯化胆碱0.01-0.03份，维生素C 0.01-0.03份，烟酰胺0.01-0.03份，蛋白锌0.01-0.03份，蛋白铁0.01-0.03份，蛋白铜0.01-0.03份，蛋白锰0.01-0.03份，维生素B10.01-0.03份，维生素B20.01-0.03份，D-泛酸钙0.01-0.03份，盐酸吡哆醇0.01-0.03份，茶多酚0.1-0.3份，德氏乳杆菌0.1-0.3份，嗜热链球菌0.1-0.3份，两歧双歧杆菌0.1-0.3份，枯草芽孢杆菌0.1-0.3份，叶酸0.01-0.03份，酵母硒0.01-0.03份，维生素K 0.01-0.03份、D-生物素0.01-0.03份，氰钴胺0.01-0.03份，迷迭香提取物0.01-0.03份。
8.一种根据权利要求7所述的高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食冻干粉的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将除钙肽添加剂以外的原料粉碎过100目筛，得到预混料；
所述预混料和所述钙肽添加剂混合经挤压造粒得到初级制品颗粒；
将所述初级制品颗粒在-20℃～-30℃条件下速冻2～10h，得到冷冻中级制品颗粒；
将所述冷冻中级制品颗粒在30～90℃，-0.1Mpa条件下升华干燥30-300min后粉碎，得到所述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食冻干粉。
9.一种高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食咬胶，其特征在在于，质量份数计，原料包括：鸡肉30-45份、牛肉15-25份、鸭肉5-10份、牛皮3-5份、大豆分离蛋白5-8份、淀粉3-5份、权利要求1所述的钙肽添加剂3-10份。
10.一种根据权利要求9所述的高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食咬胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将除钙肽添加剂以外的原料粉碎过100目筛，得到预混料；
所述预混料和钙肽添加剂混合，调质得到混合物；
所述混合物压制、成型后35-45℃真空干燥1-2h得到所述高效强化宠物犬钙吸收的钙肽营养组合物零食咬胶。
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