CN114532367A - 一种迷迭香挥发性成分的提取方法及应用 - Google Patents

Abstract

本迷迭香挥发性成分的提取方法，采取动态顶空吸附法提取，包括以下步骤：先选取迷迭香250g，用蒸馏水将其洗涤干净；再将迷迭香枝叶放置于洁净干燥的玻璃干燥器内，然后通气10min去除其中气味；在玻璃干燥器上方通入两根装有吸附剂的巴斯德管，一根用铁氟龙管连接在大气采样仪上，另外一根与空气净化装置相连接，作为净化空气入口；在大气采样仪上控制空气流量为600mL/min，连续吸附6h；收集完成后的样品用2mL正己烷洗脱至4mL棕色样品瓶中，加入辛烷2000ng作为内标，用氮吹法浓缩至100μl，于‑20℃冷藏待用。本方法提取的迷迭香挥发性成分能被应用到农作物害虫防治上，特别能够作为甜菜夜蛾防治。

Description

一种迷迭香挥发性成分的提取方法及应用

技术领域

本发明涉及植物医药研究领域，具体涉及一种迷迭香挥发性成分的提取方法及应用。

背景技术

迷迭香属于双子叶植物纲、唇形科、迷迭香属植物灌木。是一种名贵的天然香料植物，生长季节会散发一种清香气味，有清心提神的功效。它的茎、叶和花具有宜人的香味，花和嫩枝提取的芳香油，可用于调配空气清洁剂、香水、香皂等化妆品原料，最有名的化妆水就是用迷迭香制作的，并可在饮料、护肤油、生发剂、洗衣膏中使用。具有一定的工业价值。同时，迷迭香也具有一定的药用价值，具有镇静提神、醒脑作用，对消化不良和胃痛均有一定疗效。使用者多将其捣碎后，用开水浸泡后饮用，1天2-3次,可起到镇静、利尿作用。也可用于治疗失眠、心悸、头痛、消化不良等多种疾病。外用可治疗外伤和关节炎。还具有强壮心脏、促进代谢、促进末梢血管的血液循环等作用。还改善语言、视觉、听力方面的障碍，增强注意力，治疗风湿痛，强化肝脏功能，降低血糖，有助于动脉硬化的治疗，帮助麻痹的四肢恢复活动能力。

英国诺森比亚大学研究显示，迷迭香的独特气味还可以增强人们的记忆力，提升回溯性记忆和前瞻性记忆能力。迷迭香的独特气味源自植物中的一种化合物——桉叶油素。这一特殊的化合物有助于合成大脑中与记忆相关的化学物质，因此在一定程度上可增强记忆力。

另外，它的食用价值也很高，有较强的收敛作用，调理油腻的肌肤，促进血液循环，刺激毛发再生。改善脱发现象。在西餐中迷迭香是经常使用的香料，在牛排、土豆等料理以及烤制品中特别经常使用。清甜带松木香的气味和风味，香味浓郁，甜中带有苦味。

同时，从迷迭香的花和叶子中能提取具有优良抗氧化性的抗氧化剂和迷迭香精油。迷迭香抗氧化剂广泛用于医药、油炸食品、富油食品及各类油脂的保鲜保质；而迷迭香香精则用于香料、空气清新剂等。

众所周知，目前化学农药是控制植物虫害的主要手段之一，然而化学农药，尤其是化学杀虫剂在消灭虫害的同时，会带来环境污染和害虫抗性、农产品农残超标等问题。随着现代农业和生态环境对化学农药品种性能的要求日益提高，化学农药新品种的研制开发风险也在增加。

有鉴于此，本发明人针对现有技术中的上述缺陷对迷迭香的挥发性成分进行深入研究，遂有本案产生。

发明内容

为解决上述技术问题，我们提出了一种迷迭香挥发性成分的提取方法，用顶空挥发物中提取到活性成分，此挥发性活性成分对甜菜夜蛾具有很好的引诱效果。具有杀虫、杀菌、除草等功效，且高选择性、无残留、对环境安全、对高等动物及天敌安全、害虫不易产生抗药性。

为达到上述目的，本发明的技术方案如下：

一种迷迭香挥发性成分的提取及应用，采取动态顶空吸附法提取迷迭香挥发性成分进行捕集提取，包括以下步骤：

第一步、选取长势良好的迷迭香250g，在实验室用蒸馏水将迷迭香洗涤干净；

第二步、将迷迭香枝叶放置于洁净干燥的玻璃干燥器内，然后通气10min，以去除其中的气味；

第三步、在玻璃干燥器的上方通入两根装有吸附剂的巴斯德管，一根用铁氟龙管连接在大气采样仪上，另外一根与空气净化装置相连接，作为净化空气的入口；

第四步、收集时，在大气采样仪上控制空气流量为500-700mL/min，连续吸附5-7h，并保持环境通风、无异味，光源为自然光；

第五步、收集完成后的样品用2mL正己烷洗脱至4mL棕色样品瓶中，加入辛烷2000ng作为内标，用氮吹法浓缩至100μl，于-20℃冷藏待用。

第六步、重复上述第五步骤5次，用作系统空白对照。

优选的，所述空气净化装置为活性炭吸附器。

优选的，所述大气采样仪上控制空气流量为600mL/min，连续吸附时间为6h。

一种迷迭香挥发性成分的提取方法提取到迷迭香挥发性成分的应用，所提取到迷迭香挥发性成分是应用到农作物害虫的防治。

所提取到迷迭香挥发性成分特别能够作为一种甜菜夜蛾的引诱剂，被应用到甜菜夜蛾的防治。

通过上述技术方案，本发明通过从迷迭香中提取到挥发性成分，并经GC-EAD测试、嗅觉行为测试、产卵行为生物测试和田间产卵试验，此挥发性成分对害虫、特别是甜菜夜蛾具有很好的引诱效果，能够作为一种甜菜夜蛾的引诱剂，用来代替化学农药对甜菜夜蛾进行防治，不会对寄主植物的植株产生不良影响、不会导致该虫产生抗药性。同时其在自然界中有着完整的降解途径，不会对环境产生不良影响，是一种环境友好型活性成分，具有广阔的应用前景。因此，能够以此挥发性成分作为主要成分制成害虫引诱剂，从而实现害虫的无公害防治。达到了研究新颖、方法合理、且应用效果好的目的。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明实施例所公开的一种迷迭香挥发性成分的提取方法的流程图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

下面结合实施例和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。

实施例.

如图1所示，一种迷迭香挥发性成分的提取方法，本方法是采取动态顶空吸附法提取迷迭香挥发性成分进行捕集提取，包括以下步骤：

S1、首先选取长势良好的迷迭香250g，在实验室用蒸馏水将新鲜迷迭香洗干净。

S2、然后摘取枝叶，并将枝叶放置于洁净干燥的玻璃干燥器内，接着通气10min，用以去除其中的气味。

S3、接着在玻璃干燥器的上方通入两根装有吸附剂的巴斯德管，一根用铁氟龙管连接在大气采样仪上；另外一根与活性炭吸附器相连接，作为净化空气的入口。

S4、启动大气采样仪工作并控制空气流量为600mL/min，连续吸附6h进行收集，同时保持环境通风、无异味，光源为自然光；

S5、最后将收集完成后的样品用2mL正己烷洗脱至4mL棕色样品瓶中，然后加入辛烷2000ng作为内标，再用氮吹法浓缩至100μl，并于-20℃冷藏待用。

S6、重复上述S5步骤5次，用作系统空白对照。

本迷迭香挥发性成分的提取方法提取到迷迭香挥发性成分具有实践性的应用，所提取到迷迭香挥发性成分能够被应用到农作物害虫的防治上，特别能够作为一种甜菜夜蛾的引诱剂，被应用到甜菜夜蛾的防治。

下面分别对按照上述方法提取的迷迭香挥发性成分分别进行GC-EAD测试、嗅觉行为测试。

挥发性成分的GC-EAD测试

气相色谱仪的程序升温：起始温度40℃，以3℃/min升温至80℃，再以5℃/min升温至260℃，保持15min(程序升温条件与GC-MS一致)；柱前压100kPa，载气为高纯氮气，流速1.0mL/min，分流比1:1，进样量2.0μl。记录的信号经放大器连接到转换器IDAC，再接到计算机的硬件采集卡上，通过计算机软件(GC-EAD，版本4.6)采集和分析数据。将月季长管蚜(有翅蚜虫)的触角由基部剪下，用导电胶与触角电位仪探针连接。色谱柱为HP-5毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)，出口端接分流器，分流比1：1，其中之一导入FID氢火焰离子化检测器，而另一部分经过加热套吹向触角，用GC-EAD软件同步记录气相色谱和触角电位图。对每一个触角，两个挥发物样品(未处理、诱导后的中国月季挥发物)均分别重复测定3次。用过的触角不再重复使用。

挥发性单体化合物的嗅觉行为测试

主要仪器为Y型嗅觉仪。其中的Y型管主枝22cm、两侧枝均为17cm，内径均为5cm，两臂夹角为75度。将Y型管和250mL味源瓶洗净，用无水乙醇消毒后烘干。将Y型嗅觉仪按空气泵、活性炭、蒸馏水、玻璃转子流量计、三通管、2支味源瓶、Y型管顺序用TefLon管连接，水平放置，黑布遮光，调节气流量为400mL/min。气流交汇于Y型管主枝，从基部口流出。将化合物单体2-癸酮置入其中一支味源瓶中，另一支味源瓶以空气作对照。待气流稳定5min后，将4代后有翅蚜虫从基部口放入，每次150只，用具有2mm小孔的黑纱封口防止甜菜夜蛾逃出。蚜虫可逆风爬向或飞向从单体化合物挥发出的气味源，识别并选择气味源。分别记录30min、60min、90min时Y型管两侧枝中和仍处于基部中未做出反应的虫数，从两侧枝交叉口处前进3cm及以上记作阳性反应。重复5次生测，取平均值。每做完一次生测后，交换Y型管和气味源的方向。做完两次测试后，将Y型管和味源瓶取下，洗净、消毒、烘干，再做下一次生测。用过的虫子不再重复使用。

在本例中通过从迷迭香中提取到挥发性成分，并经GC-EAD测试、嗅觉行为测试、产卵行为生物测试和田间产卵试验，此挥发性成分对害虫、特别是甜菜夜蛾具有很好的引诱效果，能够作为一种甜菜夜蛾的引诱剂，用来代替化学农药对甜菜夜蛾进行防治，不会对寄主植物的植株产生不良影响、不会导致该虫产生抗药性。同时其在自然界中有着完整的降解途径，不会对环境产生不良影响，是一种环境友好型活性成分，具有广阔的应用前景。因此，能够以此挥发性成分作为主要成分制成害虫引诱剂，从而实现害虫的无公害防治。达到了研究新颖、方法合理、且应用效果好的目的。

以上所述的仅是本发明的一种迷迭香挥发性成分的提取方法优选实施方式，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (5)

1.一种迷迭香挥发性成分的提取方法，其特征在于，采取动态顶空吸附法提取迷迭香挥发性成分进行捕集提取，包括以下步骤：

第一步、选取长势良好的迷迭香250g，在实验室用蒸馏水将迷迭香洗涤干净；

第二步、将迷迭香枝叶放置于洁净干燥的玻璃干燥器内，然后通气10min，以去除其中的气味；

第三步、在玻璃干燥器的上方通入两根装有吸附剂的巴斯德管，一根用铁氟龙管连接在大气采样仪上，另外一根与空气净化装置相连接，作为净化空气的入口；

第四步、收集时，在大气采样仪上控制空气流量为500-700mL/min，连续吸附5-7h，并保持环境通风、无异味，光源为自然光；

第五步、收集完成后的样品用2mL正己烷洗脱至4mL棕色样品瓶中，加入辛烷2000ng作为内标，用氮吹法浓缩至100μl，于-20℃冷藏待用；

第六步、重复上述第五步骤5次，用作系统空白对照。

2.根据权利要求1所述的一种迷迭香挥发性成分的提取方法，其特征在于，在第三步骤中，所述空气净化装置为活性炭吸附器。

3.根据权利要求2所述的一种迷迭香挥发性成分的提取方法，其特征在于，在第四步骤中，所述大气采样仪上控制空气流量为600mL/min，连续吸附时间为6h。

4.一种如权利要求1-3任一项所述的迷迭香挥发性成分的提取方法提取到迷迭香挥发性成分的应用，其特征在于，所提取到迷迭香挥发性成分是应用到农作物害虫的防治。

5.根据权利要求4所述的迷迭香挥发性成分的提取方法提取到迷迭香挥发性成分的应用，其特征在于，所提取到迷迭香挥发性成分能够作为一种甜菜夜蛾的引诱剂，是应用到甜菜夜蛾的防治。

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