CN114470005A - 益生菌和透明质酸钠的组合物及其应用 - Google Patents
益生菌和透明质酸钠的组合物及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种组合物，所述组合物包括益生菌复合物和透明质酸钠，其中所述益生菌复合物包括以下菌种：植物乳杆菌、乳双歧杆菌、卷曲乳杆菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、格氏乳杆菌、干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、两歧双歧杆菌。所述组合物还包括益生元、重瓣玫瑰粉、茯苓粉、维生素C、烟氨酸、γ‑氨基丁酸中的一种或多种。本发明的组合物中，多种益生菌及益生元协同作用，能够促进人体微生态平衡，达到抗炎、抗感染、通便、抗衰老、提高免疫的作用。本发明的益生菌复合物还能促进透明质酸钠在人体内的吸收及利用，达到美白美容、祛皱、改善肤质的作用。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种益生菌复合物和透明质酸钠的组合物及其在提高免疫力、抗炎、抗衰老中的应用。
背景技术
益生菌对人体健康有着巨大的作用，通过长期应用，有益于维持机体正常的功能，对人体健康与美容有显著作用。透明质酸钠(玻尿酸)过去只在人体外部以化妆品形式或者以注射形式用于抗衰、祛皱、美容。食品级玻尿酸属于天然透明质酸钠，可放心口服，长期饮用，可以起到增加肌肤储水量的作用，口服透明质酸钠(食品级)无疑是较好的选择。
人们期望通过服用益生菌和透明质酸钠达到较好的健康与美容作用，但常规应用中菌种活性差或功能不明确(无菌株编号)、菌种配伍不科学或单一、活菌数量低、益生元配伍不科学等问题导致益生菌类产品功效不明显；通过口服透明质酸钠，由于食品级玻尿酸分子量较大，吸收效果不好，实际应用效果并不显著，传统注射施用又有感染风险。
因此，需要研究和开发有效的生物制剂解决现有技术中的不足。
发明内容
本发明的目的在于提供益生菌和透明质酸钠的组合物，以及其在提高免疫力、预防肠道疾病、抗炎、抗感染、抗衰老、改善肤质、健体美容中的应用。
为达到此目的，本发明采用以下技术方案。
第一方面，本发明提供一种组合物，所述组合物包括益生菌复合物和透明质酸钠，其中所述益生菌复合物包括以下菌种或由以下菌种组成：植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、卷曲乳杆菌(Lactobacilluscrispatus)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)、格氏乳杆菌(Lactobacillus gersoni)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus Paracasei)、两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)。
在一些实施方案中，本发明所述益生菌复合物由如下菌种组成：植物乳杆菌、乳双歧杆菌、卷曲乳杆菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、格氏乳杆菌、干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、两歧双歧杆菌。
在一些实施方案中，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)LP9B，于2019年1月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17243。
在一些实施方案中，所述乳双歧杆菌为乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)Bb108，于2020年6月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.20165。
在一些实施方案中，所述卷曲乳杆菌为卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)LCP018，于2021年4月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.22190。
在一些实施方案中，所述嗜酸乳杆菌为嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)LA5Y，于2019年1月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17242。
在一些实施方案中，所述鼠李糖乳杆菌为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)LR2Y，于2019年11月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.18800。
在一些实施方案中，所述格氏乳杆菌为格氏乳杆菌(Lactobacillus gersoni)LGD2，于2021年2月1日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.21785。
在一些实施方案中，所述干酪乳杆菌为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)BLc08，于2020年11月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.21128。
在一些实施方案中，所述罗伊氏乳杆菌为罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)B1r06，于2020年6月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.20164。
在一些实施方案中，所述副干酪乳杆菌为副干酪乳杆菌(LactobacillusParacasei)LP36，于2021年4月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.22191。
在一些实施方案中，所述两歧双歧杆菌为两歧双歧杆菌(Bifidobacteriumbifidum)BMB9，于2019年11月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.18799。
益生菌是人体不可缺少的物质，特别是富含本发明10种益生菌的益生菌复合物，其活菌数总量大于1000亿CFU/g，在动物实验和人体应用中证明具有维持人体微生态平衡、抗炎、抗感染、通便、抗衰老、提高免疫力的效果。
本发明所述益生菌优选采用上述10种保藏编号的菌株，这些菌株在人体健康应用中作用显著，采用上述特定菌株，组成益生菌复合物，能够起到调节肠道菌群的作用，促进肠道健康，提高免疫力，而且还能促进透明质酸钠和组合物中其他组分的有效吸收和利用，具有美白美容、祛皱、改善肤质作用。
本发明的组合物中，所述透明质酸钠为食品级透明质酸钠。
透明质酸钠具有保湿、营养、皮肤损伤修复的作用。透明质酸又叫做玻尿酸，是一种粘多糖，广泛地存在于人体组织中。透明质酸的钠盐形式叫做透明质酸钠，具有以下几个方面的作用：(1)保湿作用，保湿作用是透明质酸钠最重要的作用，透明质酸的吸水能力非常强，是公认的天然保湿因子；(2)营养作用，透明质酸钠是皮肤固有的生物物质，外源性透明质酸钠是对皮肤内源性透明质酸钠的补充，小分子的透明质酸钠促进皮肤营养的供给以及废物的排泄，从而防止皮肤老化，起到一定的美容和养颜的作用；(3)透明质酸钠有促进皮肤损伤修复的作用，可以通过促进表皮细胞的增殖和分化，加速表皮细胞的再生，从而促进损伤部位皮肤的愈合。
在一些实施方案中，本发明所述透明质酸钠的分子量为8-100万道尔顿，分子量小，易于被人体吸收。优选的分子量为8-50万道尔顿，更优选的分子量为8-20万道尔顿，进一步优选的分子量为8-10万道尔顿，甚至更优选的分子量为8万道尔顿。
如果将透明质酸钠单独应用在食品中，分子量较大的透明质酸钠吸收效果不好，因此起效不佳。当将本发明益生菌复合物与透明质酸钠组合应用时，能够解决透明质酸钠吸收率低的问题。
益生菌复合物可以促进透明质酸钠的吸收，改善皮肤状态，使皮肤由粗糙变得细腻，使气色由灰暗变得红润，使皮肤弹性增强。因此本发明的益生菌复合物与透明质酸钠组合应用，具有协同增效的作用，相得益彰。通过服用本发明的益生菌复合物与透明质酸钠的组合物，可以达到促进健康与美容作用。
在一些实施方案中，本发明的所述组合物还包括益生元、重瓣玫瑰粉、茯苓粉、维生素C、烟氨酸、γ-氨基丁酸中的一种或多种。
在一些实施方案中，本发明的所述组合物包括益生元，所述益生元包括低聚果糖和菊粉。
低聚果糖是一种水溶性的膳食纤维，长期服用可以降低血清胆固醇、改善脂质，能够有效降低胆固醇和甘油三酯，对于因血脂升高而引起的高血压、动脉粥样硬化也有比较好的改善作用，另一方面还可以改善肠道菌群。低聚果糖能够刺激结肠益生菌的生产，改善肠道微生态环境。
菊粉具有控制血脂、促进矿物质的吸收、防治便秘的作用，能够调节肠道微生物菌群，改善肠道健康。
本发明的组合物中，所述低聚果糖能够促进益生菌增殖并提高益生菌活性，促进肠道蠕动、易于排便，效果优于赤藓糖醇；所述菊粉作为天然水溶性膳食纤维，可影响肠道微生物的生长，与一般的膳食纤维如胡萝卜相比，能够更有效地降血脂，并且促进益生菌增殖。
本发明的所述益生元采用纯度为95％以上的优质原料，也可通过商购获得。
本发明的益生元能够促进益生菌增殖并提高益生菌活性，益生元与多种益生菌复合物能够协同作用，促进人体微生态平衡，达到抗炎、抗感染、通便、抗衰老、提高免疫力的作用。
在一些实施方案中，本发明的所述组合物包括重瓣玫瑰粉。
重瓣玫瑰可以美容养颜、补气血等，重瓣玫瑰中含有多种氨基酸和微量元素，能够调节人体的内分泌功能，从而对于女性月经不调、痛经等能够起到一定的治疗效果。还能够起到安神的作用，并且能够减少黑色素在皮肤内的沉淀，达到美容养颜的功效。
本发明的组合物中，所述重瓣玫瑰粉采用新鲜重瓣玫瑰花，经优选、除杂、清洗、阴干、低温-40℃冷冻粉碎萃取而制成。本发明采用的重瓣玫瑰粉香气浓郁，制成制剂后使受试者乐于接受，效果比普通玫瑰好。
在一些实施方案中，本发明的所述组合物包括茯苓粉。
茯苓是寄生于松树根上的菌类植物，外形酷似甘薯，富含茯苓多糖、茯苓酸、蛋白质，具有渗湿利水、益脾和胃、宁心安神的作用。
本发明的组合物中，所述茯苓粉采用新鲜茯苓经除杂、清洗、切片、灭菌后，晒干或100-150℃直接烘干，然后粉碎而制成。所述茯苓粉能够补充膳食纤维摄入不足，消化吸收好，健脾和胃，功效优于山药。
在一些实施方案中，本发明的所述组合物包括维生素C。
维生素C具有抗氧化、维持免疫功能、抗自由基、抑制酪氨酸酶的形成的作用，从而达到美白、淡斑的功效。
本发明的组合物中，所述维生素C以维生素C粉的形式存在；优选地，所述维生素C为天然维生素C；进一步优选地，所述维生素C由针叶樱桃(Acerola cherry)提取得到。针叶樱桃中的维生素C含量比普通水果、蔬菜的维生素C含量高，是柠檬维生素C含量的三十多倍。因此，本发明的组合物中维生素C也可以用针叶樱桃提取物代替。
在一些实施方案中，本发明的所述组合物包括烟氨酸。
烟氨酸是水溶性维生素B族的一员。口服容易吸收，可以促进生物氧化过程和组织的新陈代谢，对于维持皮肤的完整性具有重要作用，有美白皮肤、改善皮肤屏障功能、保湿、控油与缩小毛孔等功效。
本发明的组合物中，所述烟氨酸作为B族维生素，与维生素C组合在皮肤上会有很好的协同作用，可以保湿，营养皮肤。
本发明所述烟氨酸采用纯度为99％以上的优质原料，也可通过商购获得。
在一些实施方案中，本发明的所述组合物包括γ-氨基丁酸。
γ-氨基丁酸是在人脑能量代谢过程中起重要作用的活性氨基酸,它具有激活脑内葡萄糖代谢、促进乙酰胆碱合成、降血氨、抗惊厥、降血压、改善脑机能、精神安定、促进生长激素分泌等多种生理功能。研究表明，口服给予γ-氨基丁酸对改善小鼠睡眠具有积极影响。
本发明的组合物中，所述γ-氨基丁酸为食品级。γ-氨基丁酸具有改善睡眠、安神的作用。优选地，所述γ-氨基丁酸由酸枣仁(Semen Ziziphi Spinosae)经水煮提取得到。酸枣仁为药食同源的物质，由酸枣仁提取的γ-氨基丁酸，其安全性和有效性比化学合成途径获取的γ-氨基丁酸要高。因此，本发明的组合物中γ-氨基丁酸也可以用酸枣仁提取物代替。
本发明所述γ-氨基丁酸采用纯度为99％以上的优质原料，也可通过商购获得。
在一些实施方案中，本发明所述组合物包括益生菌复合物、透明质酸钠、低聚果糖、菊粉、重瓣玫瑰粉、茯苓粉、维生素C、烟氨酸和γ-氨基丁酸。
在一些实施方案中，本发明所述组合物包括如下重量份的组分：益生菌复合物7-13份、低聚果糖14-26份、菊粉27-39份、透明质酸钠0.04-0.09份、重瓣玫瑰粉7-13份、茯苓粉7-13份、维生素C 0.01-0.03份、烟氨酸0.02-0.04份、γ-氨基丁酸0.02-0.04份。
优选地，本发明所述组合物包括如下重量份的组分：益生菌复合物9-12份、低聚果糖18-24份、菊粉30-35份、透明质酸钠0.06-0.08份、重瓣玫瑰粉9-12份、茯苓粉9-12份、维生素C 0.01-0.02份、烟氨酸0.03-0.04份、γ-氨基丁酸0.03-0.04份。
更优选地，本发明所述组合物包括如下重量份的组分：益生菌复合物10份、低聚果糖20份、菊粉33.3份、透明质酸钠0.065份、重瓣玫瑰粉10份、茯苓粉10份、维生素C 0.017份、烟氨酸0.03份、γ-氨基丁酸0.03份。
在一些实施方案中，本发明所述益生菌复合物中，菌株的活菌数分别为：植物乳杆菌400-600亿CFU/g、乳双歧杆菌100-300亿CFU/g、卷曲乳杆菌30-70亿CFU/g、嗜酸乳杆菌30-70亿CFU/g、鼠李糖乳杆菌30-70亿CFU/g、格氏乳杆菌30-70亿CFU/g、干酪乳杆菌30-70亿CFU/g、罗伊氏乳杆菌20-40亿CFU/g、副干酪乳杆菌10-30亿CFU/g、两歧双歧杆菌5-15亿CFU/g。
优选地，所述益生菌复合物中，菌株的活菌数分别为：植物乳杆菌450-550亿CFU/g、乳双歧杆菌150-260亿CFU/g、卷曲乳杆菌40-60亿CFU/g、嗜酸乳杆菌40-60亿CFU/g、鼠李糖乳杆菌40-60亿CFU/g、格氏乳杆菌40-60亿CFU/g、干酪乳杆菌40-60亿CFU/g、罗伊氏乳杆菌25-35亿CFU/g、副干酪乳杆菌15-25亿CFU/g、两歧双歧杆菌8-12亿CFU/g。
更优选地，所述益生菌复合物中，菌株的活菌数分别为：植物乳杆菌500亿CFU/g、乳双歧杆菌200亿CFU/g、卷曲乳杆菌50亿CFU/g、嗜酸乳杆菌50亿CFU/g、鼠李糖乳杆菌50亿CFU/g、格氏乳杆菌50亿CFU/g、干酪乳杆菌50亿CFU/g、罗伊氏乳杆菌30亿CFU/g、副干酪乳杆菌20亿CFU/g、两歧双歧杆菌10亿CFU/g。
在一些实施方案中，本发明所述益生菌复合物中，活菌数总量大于1000亿CFU/g。
第二方面，本发明提供一种含有本发明所述组合物的制剂。
本发明的制剂可以通过如下方法制备：取组合物中的各组分，作为原料，制成粉末状，将各组分的粉末混合，按照常规制剂方法制成固体饮料、咀嚼片剂或口腔含片。温水冲调或直接口服。
第三方面，本发明还提供本发明所述组合物或本发明所述制剂在制备用于提高免疫力、预防肠道疾病、抗炎、抗感染、抗衰老和/或改善肤质的药物和/或食品中的用途。
本发明采用的组合物，其作用主要表现在，具有10种所述菌株保藏号的益生菌，活菌数总量可达1000亿CFU/g以上，且菌粉通过包埋技术，能顺利通过胃肠道，并能在体内起到定植、杀灭有害菌、维持人体微生态平衡的作用；另一方面，本发明的组合物中增加益生元，协同作用于益生菌复合物，能够起到提高益生菌活性作用。
本发明提供的组合物，具有如下至少一种有益效果：
1.本发明的组合物中富含多种特定益生菌(益生菌复合物中活菌数总量达1000亿CFU/g以上)，与益生元协同作用，维护和促进人体微生态平衡，达到健康体质、提高免疫力、抗炎、抗感染、抗衰老、通便、预防肠道疾病及妇科炎症疾病的作用；
2.本发明的组合物中，益生菌复合物在体内能够促进透明质酸钠被人体细胞的极大吸收和利用，从而解决透明质酸钠吸收率低的问题，使透明质酸钠的美白美容、补水、抗衰、祛皱、改善肤质的作用凸显出来；
3.本发明的组合物具有健脾利湿、减肥、美容养颜、改善皮肤干枯、促进血液循环的作用；
4.本发明的组合物具有调和气血、改善睡眠、改善皮肤色质、祛斑、促进新陈代谢的作用；
5.本发明的组合物的抗炎和抗感染效果与化学药品的起效原理不同，抗炎和抗感染的化学药品会杀灭体内的有益菌，而本发明的组合物中含有益生菌复合物，通过与益生元、透明质酸钠及其他组分共同作用，维护人体微生态平衡，提高免疫力，实现抗炎抗感染的效用；
6.本发明的组合物制成的制剂没有特殊异味，口感好，易被人体吸收，能够满足成年人特别是成年各年龄段女性日常保健与抗衰、美容的需求；
7.本发明的组合物制成的制剂服用方便，既可用水冲作饮料，也可作为调味剂加入其他食物中；
8.本发明的组合物原料易得，制剂成本低，施用方便，菌种活性好、菌种配伍科学、活菌数量高，功效明显。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述具体实施方式仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例1
本实施例提供一种益生菌组合物，包括如下重量份的组分：
益生菌复合物10份(植物乳杆菌LP9B 500亿CFU/g、乳双歧杆菌BB108 200亿CFU/g、卷曲乳杆菌LCP018 50亿CFU/g、嗜酸乳杆菌LA5Y 50亿CFU/g、鼠李糖乳杆菌LR2Y 50亿CFU/g、格氏乳杆菌LGD2 50亿CFU/g、干酪乳杆菌BLC08 50亿CFU/g、罗伊氏乳杆菌B1R06 30亿CFU/g、副干酪乳杆菌LP36 20亿CFU/g、两歧双歧杆菌BMB9 10亿CFU/g)；
低聚果糖20份，菊粉33.3份，透明质酸钠0.065份，重瓣玫瑰粉10份，茯苓粉10份，维生素C粉0.017份，烟氨酸0.03份，γ-氨基丁酸0.03份。
采用包埋技术对上述十种菌粉进行处理，然后与其他组分粉末混合，制成固体饮料制剂。
实施例2
本实施例提供一种益生菌组合物，包括如下重量份的组分：
益生菌复合物7份(植物乳杆菌LP9B 600亿CFU/g、乳双歧杆菌BB108 100亿CFU/g、卷曲乳杆菌LCP018 30亿CFU/g、嗜酸乳杆菌LA5Y 70亿CFU/g、鼠李糖乳杆菌LR2Y 30亿CFU/g、格氏乳杆菌LGD2 70亿CFU/g、干酪乳杆菌BLC08 30亿CFU/g、罗伊氏乳杆菌B1R06 70亿CFU/g、副干酪乳杆菌LP36 10亿CFU/g、两歧双歧杆菌BMB9 15亿CFU/g)；
低聚果糖14份，菊粉27份，透明质酸钠0.04份，重瓣玫瑰粉7份，茯苓粉7份，维生素C粉0.01份，烟氨酸0.02份，γ-氨基丁酸0.02份。
采用包埋技术对上述十种菌粉进行处理，然后与其他组分粉末混合，制成咀嚼片剂。
实施例3
本实施例提供一种益生菌组合物，包括如下重量份的组分：
益生菌复合物13份(植物乳杆菌LP9B 400亿CFU/g、乳双歧杆菌BB108 300亿CFU/g、卷曲乳杆菌LCP018 70亿CFU/g、嗜酸乳杆菌LA5Y 30亿CFU/g、鼠李糖乳杆菌LR2Y 70亿CFU/g、格氏乳杆菌LGD2 30亿CFU/g、干酪乳杆菌BLC08 70亿CFU/g、罗伊氏乳杆菌B1R06 30亿CFU/g、副干酪乳杆菌LP36 30亿CFU/g、两歧双歧杆菌BMB9 5亿CFU/g)；
低聚果糖26份，菊粉39份，透明质酸钠0.09份，重瓣玫瑰粉13份，茯苓粉13份，维生素C粉0.03份，烟氨酸0.04份，γ-氨基丁酸0.04份。
采用包埋技术对上述十种菌粉进行处理，然后与其他组分粉末混合，制成口腔含片制剂。
实施例4
本实施例提供一种益生菌组合物，包括如下重量份的组分：
益生菌复合物9份(植物乳杆菌LP9B 500亿CFU/g、乳双歧杆菌BB108 200亿CFU/g、卷曲乳杆菌LCP018 50亿CFU/g、嗜酸乳杆菌LA5Y 50亿CFU/g、鼠李糖乳杆菌LR2Y 50亿CFU/g、格氏乳杆菌LGD2 50亿CFU/g、干酪乳杆菌BLC08 50亿CFU/g、罗伊氏乳杆菌B1R06 30亿CFU/g、副干酪乳杆菌LP36 20亿CFU/g、两歧双歧杆菌BMB9 10亿CFU/g)；
低聚果糖18份，菊粉30份，透明质酸钠0.06份，重瓣玫瑰粉9份，茯苓粉9份，维生素C粉0.01份，烟氨酸0.03份，γ-氨基丁酸0.03份。
采用包埋技术对上述十种菌粉进行处理，然后与其他组分粉末混合，制成固体饮料制剂。
对比例1
对比例1与实施例1的组合物不同之处在于：乳双歧杆菌BB108、卷曲乳杆菌LCP018、嗜酸乳杆菌LA5Y分别替换为保加利亚杆菌(Bacillus bulgaricus)、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)、嗜热乳杆菌(Lactobacillus thermophilus)。
对比例2
对比例2与实施例1的组合物不同之处在于：将低聚果糖替换为赤藓糖醇，将菊粉替换为胡萝卜粉。
对比例3
对比例3与实施例1的组合物不同之处在于，对比例3的组合物的重量份如下：
益生菌复合物10份，低聚果糖10份，菊粉10份，透明质酸钠0.03份，重瓣玫瑰粉10份，茯苓粉10份，维生素C粉0.017份，烟氨酸0.03份，γ-氨基丁酸0.03份。
对比例4
对比例4与实施例1的组合物不同之处在于，对比例4的组合物中益生菌复合物的活菌数如下：
植物乳杆菌LP9B 200亿CFU/g、乳双歧杆菌BB108 100亿CFU/g、卷曲乳杆菌LCP01830亿CFU/g、嗜酸乳杆菌LA5Y 30亿CFU/g、鼠李糖乳杆菌LR2Y 30亿CFU/g、格氏乳杆菌LGD230亿CFU/g、干酪乳杆菌BLC08 30亿CFU/g、罗伊氏乳杆菌B1R06 30亿CFU/g、副干酪乳杆菌LP36 20亿CFU/g、两歧双歧杆菌BMB9 10亿CFU/g。
实验例1.菌株的分离和筛选
1.分离和筛选方法
样品：酸奶、泡菜、人体肠道分离物
称取适量样品于灭菌生理盐水中(加适量玻璃珠)作为母液，振荡10min充分混匀，进行10-2～10-7的梯度稀释。涂布于乳杆菌MRS培养基和双歧杆菌BL选择性培养基上，每个稀释度做2个平行。37℃恒温厌氧培养48h，观察、编号并记录菌落形态。通过过氧化氢酶试验和产气、荚膜芽孢试验，将革兰氏阳性、过氧化氢酶阴性的无芽孢杆菌进行冷藏保存。同时，于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心进行保藏。
2.微生物学特性
植物乳杆菌(CGMCC No.17243)：MRS平板上呈直径0.5mm-2mm、白色、圆形、表面光滑湿润、边缘整齐、凸起的菌落。革兰氏阳性，过氧化氢酶阴性，菌体镜检图为短杆状。
乳双歧杆菌(CGMCC No.20165)：双歧培养基厌氧培养，菌落呈白色、圆形、表面湿润、不透明、边缘整齐。革兰氏阳性，过氧化氢酶阴性，显微镜下观察，菌体呈端部膨大的杆状。
卷曲乳杆菌(CGMCC No.22190)：菌落白色，边缘不整齐，片状，中央凸起，可利用甘露糖、半乳糖、葡萄糖、麦芽糖、蜜二糖、棉子糖、核糖、蔗糖、海藻糖、果糖。革兰氏阳性，显微镜下细长杆，微弯成链出现。
嗜酸乳杆菌(CGMCC No.17242)：平板上形成较小、网形、凸起、表面粗糙、边缘卷曲的菌落。革兰氏阳性，显微镜下呈杆菌。
鼠李糖乳杆菌(CGMCC No.18800)：平板上呈白色、圆形、表面光滑湿润、边缘整齐、凸起的菌落。不能利用乳糖，但可代谢单糖；革兰氏阳性，显微镜下呈杆菌。
格氏乳杆菌(CGMCC No.21785)：菌株在MRS固体培养基上的菌落形态为圆形菌落，直径0.5-0.75mm，表面粗糙，在显微镜下呈革兰氏染色阳性短杆菌。
干酪乳杆菌(CGMCC No.21128)：形成直径0.5～2mm，白色，有时呈微黄色，圆形湿润菌落，革兰氏阳性菌，不产芽孢，无鞭毛，不运动，菌体长短不一，常成链。
罗伊氏乳杆菌(CGMCC No.20164)：在MRS平板上生长菌落均呈圆形，乳白色，表面光滑；革兰氏阳性菌，显微镜观察菌体为微微弯曲的杆状。
副干酪乳杆菌(CGMCC No.22191)：发酵葡萄糖、果糖、纤维二糖、半乳糖、松三糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇、甘露糖、海藻糖；革兰氏阳性，菌体呈杆状，无芽胞，菌落圆形，接触酶阴性，兼性厌氧。
两歧双歧杆菌(CGMCC No.18799)：革兰氏阳性，细胞杆状，单生、成对、V字或堆状排列，不产芽胞。严格厌氧，发酵葡萄糖产乳酸。
3.增殖特性
植物乳杆菌、卷曲乳杆菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、格氏乳杆菌、干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、副干酪乳杆菌在增殖培养时，均为兼性厌氧，37℃培养12-24h，发酵时产酸，生长适宜pH值约为5.5。
乳双歧杆菌，厌氧菌株，37℃培养24-48h，发酵产酸，生长适宜pH值约为5.5。
两歧双歧杆菌，严格厌氧菌株，37℃培养24-48h，发酵产酸，生长适宜pH值约为5.5。
实验例2.本发明的组合物的抗炎效果
选取80例妇科炎症受试者，年龄和身体状况相当，炎症表现为分泌物颜色发黄，较粘稠，异味重，瘙痒严重较难忍。经受试者知情同意，随机分为2组，治疗组40例，对照组40例。
治疗组施用本发明实施例1-4的组合物制剂，对照组施用对比例1-4的组合物制剂。口服以益生菌活菌数总量计为1000亿CFU，每天一次，服用7-14天(D7-D14)。
本发明实施例1-4的组合物制剂及对比文件1-4的组合物制剂对妇科炎症的症状改善效果的总体状况，参见表1。
表1.组合物制剂对妇科炎症的改善效果
注：表1中的总体状况是指每组中90％以上的受试者的改善状况。
由表1的结果可知，服用本申请实施例1-4的组合物制剂7天时，分泌物改善，异味改善，瘙痒减轻，服用14天时，分泌物颜色和粘稠度正常，异味消失，瘙痒消失。服用对比例1-4的组合物制剂，各项指标没有明显改善效果(对比例1-2)，或改善效果很慢(对比例3-4)。
由此可见，本发明的组合物制剂对妇科炎症的症状改善效果明显，具有抗炎、抗感染的作用。
实验例3.本发明组合物的调节肠道、抗衰老和提高免疫力的效果
选取80例受试者，年龄相当，性别比例相当，身体状况主要表现为睡眠障碍、排便困难、皮肤暗淡粗糙。经受试者知情同意，随机分为2组，治疗组40例，对照组40例。
治疗组施用本发明实施例1-4的组合物制剂，对照组施用对比例1-4的组合物制剂。口服以益生菌活菌数总量计为1000亿CFU，每天一次，服用5-15天(D5-D15)。
本发明实施例1-4的组合物制剂及对比文件1-4的组合物制剂对调节肠道、抗衰老和提高免疫力的症状改善效果的总体状况，参见表2。
表2.组合物制剂对调节肠道、抗衰老和提高免疫力的改善效果
注：表2中的总体状况是指每组中90％以上的受试者的改善状况。
由表2的结果可知，服用本申请实施例1-4的组合物制剂5天时，受试者排便频率明显增加，7天后排便正常；服用5天时，受试者睡眠障碍减轻，睡眠时间增加1-2小时，10天后，受试者睡眠正常；服用5-10天时，受试者皮肤颜色和细腻程度明显改善，15天后，面部皮肤红润，气色好，精神状态好。服用对比例1-4的组合物制剂5天时，各项指标没有明显改善效果，服用7-15天后，改善效果也很慢。
由此可见，本发明的组合物制剂由于特定的益生菌复合物与益生元协同作用，能够调节肠道菌群，改善排便状况；对比文件1-2由于改变了益生菌和益生元的组成，没有使用本发明的特定菌株的益生菌复合物和相应的益生元，因而没有明显调节肠道菌群的作用，对排便困难的症状没有明显改善效果。另外，本发明的组合物制剂中，适宜比例的益生菌复合物对透明质酸钠及组合物中的其他物质具有很好的促进吸收和利用的效果，通过调节肠道菌群、改善睡眠、改善肤质，进而达到美白美容、抗衰老、提高免疫力的作用。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括益生菌复合物和透明质酸钠，其中所述益生菌复合物包括以下菌种或由以下菌种组成：植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、格氏乳杆菌(Lactobacillus gersoni)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus Paracasei)、两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括益生元、重瓣玫瑰粉、茯苓粉、维生素C、烟氨酸、γ-氨基丁酸中的一种或多种。
3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述益生元包括低聚果糖和菊粉。
4.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述维生素C由针叶樱桃提取得到；和/或，所述γ-氨基丁酸由酸枣仁提取得到。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物包括益生菌复合物、透明质酸钠、低聚果糖、菊粉、重瓣玫瑰粉、茯苓粉、维生素C、烟氨酸和γ-氨基丁酸。
6.根据权利要求1-4中任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物包括如下重量份的组分：益生菌复合物7-13份、低聚果糖14-26份、菊粉27-39份、透明质酸钠0.04-0.09份、重瓣玫瑰粉7-13份、茯苓粉7-13份、维生素C 0.01-0.03份、烟氨酸0.02-0.04份、γ-氨基丁酸0.02-0.04份；
优选地，本发明所述组合物包括如下重量份的组分：益生菌复合物9-12份、低聚果糖18-24份、菊粉30-35份、透明质酸钠0.06-0.08份、重瓣玫瑰粉9-12份、茯苓粉9-12份、维生素C 0.01-0.02份、烟氨酸0.03-0.04份、γ-氨基丁酸0.03-0.04份；
更优选地，所述组合物包括如下重量份的组分：益生菌复合物10份、低聚果糖20份、菊粉33.3份、透明质酸钠0.065份、重瓣玫瑰粉10份、茯苓粉10份、维生素C 0.017份、烟氨酸0.03份、γ-氨基丁酸0.03份。
7.根据权利要求1-4中任一项所述的组合物，其特征在于，所述益生菌复合物中，菌株的活菌数分别为：植物乳杆菌400-600亿CFU/g、乳双歧杆菌100-300亿CFU/g、卷曲乳杆菌30-70亿CFU/g、嗜酸乳杆菌30-70亿CFU/g、鼠李糖乳杆菌30-70亿CFU/g、格氏乳杆菌30-70亿CFU/g、干酪乳杆菌30-70亿CFU/g、罗伊氏乳杆菌20-40亿CFU/g、副干酪乳杆菌10-30亿CFU/g、两歧双歧杆菌5-15亿CFU/g；
优选地，所述益生菌复合物中，菌株的活菌数分别为：植物乳杆菌450-550亿CFU/g、乳双歧杆菌150-260亿CFU/g、卷曲乳杆菌40-60亿CFU/g、嗜酸乳杆菌40-60亿CFU/g、鼠李糖乳杆菌40-60亿CFU/g、格氏乳杆菌40-60亿CFU/g、干酪乳杆菌40-60亿CFU/g、罗伊氏乳杆菌25-35亿CFU/g、副干酪乳杆菌15-25亿CFU/g、两歧双歧杆菌8-12亿CFU/g；
更优选地，所述益生菌复合物中，菌株的活菌数分别为：植物乳杆菌500亿CFU/g、乳双歧杆菌200亿CFU/g、卷曲乳杆菌50亿CFU/g、嗜酸乳杆菌50亿CFU/g、鼠李糖乳杆菌50亿CFU/g、格氏乳杆菌50亿CFU/g、干酪乳杆菌50亿CFU/g、罗伊氏乳杆菌30亿CFU/g、副干酪乳杆菌20亿CFU/g、两歧双歧杆菌10亿CFU/g。
8.含有权利要求1-7中任一项所述的组合物的制剂。
9.根据权利要求8所述的制剂，其特征在于，所述制剂的剂型为固体饮料、咀嚼片剂或口腔含片。
10.权利要求1-7中任一项所述的组合物或权利要求8-9任一项所述的制剂在制备用于提高免疫力、预防肠道疾病、抗炎、抗感染、抗衰老和/或改善肤质的药物和/或食品中的用途。
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