CN114467791A - 一种宠物洁齿骨及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于宠物用品技术领域，具体涉及一种宠物洁齿骨及其制备方法。所述制备方法包括：A.将菌剂加入培养基中，混合得到菌液，所述菌剂包括动物双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌和唾液乳杆菌；B.将动物角浸泡于步骤A得到的菌液中，进行真空处理，随后恢复至常压，接着进行干燥。本发明以动物角为载体，动物角内部的海绵状髓质结构能够允许动物双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌、唾液乳杆菌及培养基填充于动物角内部，动物双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌、唾液乳杆菌与宠物口腔接触时，能够附着在其口腔内壁和牙齿表面，与有害微生物形成竞争关系，解决有害微生物在口腔内增殖代谢产生的异味、色素沉积和钙化细胞质等问题。
Description
技术领域
本发明属于宠物用品技术领域，具体涉及一种宠物洁齿骨及其制备方法。
背景技术
目前，常用的宠物洁齿产品有以下三种：咬胶类、洁牙粉类和牙膏/漱口水类。按照来源来划分，可将咬胶类宠物洁齿产品分为动物干皮制品和以植物蛋白、植物淀粉、肉类等为原料加工而成的洁齿骨制品。
动物干皮制品类咬胶是一种传统的洁齿制品，其以牛皮、猪皮等干制品为原料经裁剪、人工加工成型制得。然而，牛皮、猪皮等干制品本身并无肉味或肉味较低，制成的洁齿制品难以有效吸引宠物食用；其次，动物干皮制品类咬胶需进行裁剪，并通过人工加工成特定形状等步骤，加工效率较低；再者，动物皮制品类咬胶质地干硬，食用时易刮伤宠物的牙齿、伤及口腔粘膜(如图1所示)。以植物蛋白、植物淀粉、肉类等为原料加工成的咬胶可分为实心注塑骨制品和采用挤出工艺制备的洁齿骨制品。其中，实心注塑骨制品质地较硬，在啃咬后表面光滑，易被整体吞咽进而出现卡喉现象。与实心注塑骨制品相比，挤出为片条状后再加工为骨形状的洁齿骨制品结构较为复杂，可避免卡喉风险，但挤出加工洁齿骨制品质地较软(如图2所示)，耐久性不佳，且摩擦清洁效果差。
洁牙粉类洁齿产品在使用时，是将洁牙粉与其它食物混合后通过口服方式进入宠物口腔内。然而，犬猫等宠物主要以吞咽方式进行采食，洁牙粉在口腔中停留的时间较短，无法充分发挥清洁口腔的作用。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种宠物洁齿骨及其制备方法，以解决宠物使用主动性差及口腔清洁效果不佳的技术问题。
第一个方面，本发明提供一种宠物洁齿骨的制备方法，包括以下步骤：
A.将菌剂加入培养基中，混合得到菌液，所述菌剂包括动物双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌和唾液乳杆菌；
B.将动物角浸泡于步骤A得到的菌液中，进行真空处理，随后恢复至常压，接着进行干燥。
可选地，步骤A中，所述培养基包括培养基干料和水。
可选地，所述培养基干料包括乳粉、酸奶粉、碳源、氮源、缓冲剂和载体。
可选地，所述培养基干料与水的质量比为1：2-1：5。
可选地，以质量份计，所述培养基干料包括乳粉30-55份、酸奶粉20-50份、碳源0.3-3份、氮源0.1-0.8份、pH调节剂0.5-2份和和载体0.1-0.9份。
可选地，所述碳源选自蔗糖、乳糖、葡萄糖、甘露醇和玉米淀粉中的一种或多种。
可选地，所述氮源选自氯化铵、硫酸铵、尿素、硝酸钠和氨基酸中的一种或多种。
可选地，所述pH调节剂选自柠檬酸、碳酸、磷酸和硫酸中的一种或多种。
可选地，所述载体选自二氧化硅或碳酸钙或二者的组合物。
可选地，步骤A中，所述菌剂与培养基的质量比为1：50-1：100。
可选地，步骤A中，所述菌剂还包括嗜热链球菌。
可选地，步骤A中，以质量份计，所述菌剂包括动物双歧杆菌30-45份、罗伊氏乳杆菌25-35和唾液乳杆菌20-35份。
可选地，步骤A中，以质量份计，所述菌剂包括动物双歧杆菌30-45份、罗伊氏乳杆菌25-35、唾液乳杆菌20-35份和嗜热链球菌10-30份。
可选地，步骤B中，所述动物角选自鹿角或牛角。
可选地，步骤B中，所述真空处理的压力为5-30kPa，时间为30-60s。
可选地，步骤B中，所述干燥为冷冻干燥。
可选地，步骤B中，重复真空处理步骤若干次。
可选地，步骤B中，干燥后还包括切割步骤，具体可切割成圆柱状或在圆柱状的基础上，沿圆柱的中轴进一步切割成半圆柱状。
可选地，所述冷冻干燥包括：先于-10～-30℃下干燥至动物角温度下降至≤-18℃，然后于90-110kPa条件下干燥至含水量≤5wt％。
另一个方面，本发明还提供如上所述制备方法制得的宠物洁齿骨。
如上所述，本发明的宠物洁齿骨及其制备方法，具有以下有益效果：
(1)以动物角为载体，宠物通过啃咬能够将牙齿嵌入动物角内部硬度适中的海绵状髓质结构中，进而对宠物牙齿起到良好的摩擦效果，且外层骨质结构能够避免宠物误食、吞咽。
(2)动物角内部的海绵状髓质结构能够允许动物双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌、唾液乳杆菌及培养基基料填充于动物角内部，动物双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌、唾液乳杆菌及培养基与宠物口腔接触时，能够附着在其口腔内壁和牙齿表面，与唾液混合后，以上三种菌种能够迅速复苏并开始增值代谢，与口腔有害微生物(如卟啉单胞菌属、牛放线菌属、棒杆菌属、奈瑟菌属、梭杆菌属、密螺旋体属等)形成竞争关系，由于额外补充了适合以上三种菌种的培养基基料，口腔内会形成有利于以上三种菌种的环境，使以上三种菌种成为口腔内的优势菌群，从而解决有害微生物在口腔内增殖代谢产生的异味、色素沉积和钙化细胞质等问题；另一方面，以上三种菌种代谢产生的乳酸能够降低口腔酸碱度，长期使用能够软化已形成的牙菌斑和牙结石，使牙菌斑和牙结石松软脱落。
(3)培养基基料中含有乳粉和酸奶粉，其在真空作用下进入并均匀分布于动物角海绵状髓质结构髓质中，能够保证制得的洁齿骨持续具备良好的适口性。
附图说明
图1为牙齿与宠物硬质洁齿骨的接触情况示意图；
图2为牙齿与挤出加工洁齿骨制品的接触情况示意图；
图3为牙齿与实施例1制得的宠物洁齿骨的接触情况示意图；
图4为turesky菌斑指数改良法检测的计分标准对应的示意图。
具体实施方式
以下通过特定的具体实例对本发明进行进一步的说明，但需要指出的是本发明的实施例中所描述的具体的物料配比、工艺条件及结果等仅用于说明本发明，并不能以此限制本发明的保护范围，凡是根据本发明的精神实质所作的等效变化或修饰，都应该涵盖在本发明的保护范围内。需要注意的是，除特别说明外，本发明所述份数均指质量份。
本发明提供了一种宠物洁齿骨的制备方法，包括以下步骤：
A.以质量份计，将乳粉30-55份、酸奶粉20-50份、pH调节剂、碳源0.3-3份、氮源0.1-0.8份和载体0.1-0.9份混合均匀，得到培养基干料；然后将培养基干料与水按照质量比1：2-1：5混合均匀，得到培养基；碳源选自蔗糖、乳糖、葡萄糖、甘露醇和玉米淀粉中的一种或多种；氮源选自氯化铵、硫酸铵、尿素、硝酸钠和氨基酸中的一种或多种；pH调节剂选自柠檬酸、碳酸、磷酸和硫酸中的一种或多种；载体选自二氧化硅或碳酸钙或二者的组合物；
B.向步骤A得到的培养基中加入菌剂，得到菌液，菌剂与培养基的质量比为1：50-1：100，以质量份计，菌剂包括动物双歧杆菌30-45份、罗伊氏乳杆菌25-35和唾液乳杆菌20-35份；
C.将动物角浸泡于步骤B得到的菌液中，动物角选自鹿角或牛角，于5-30kPa下处理30-60s随后恢复至常压，重复真空操作2-3次，接着于-10～-30℃下干燥至鹿角温度下降至≤-18℃，然后于90-110kPa条件下干燥至含水量≤5wt％，再进行切割。
在本发明的另一个实施例中，所述菌剂还包括嗜热链球菌10-30份。
下面通过具体的例举实施例以详细说明本发明。同样应理解，以下实施例只用于对本发明进行具体的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域的技术人员根据本发明的上述内容作出的一些非本质的改进和调整均属于本发明的保护范围。下述示例具体的工艺参数等也仅是合适范围中的一个示例，即本领域技术人员可以通过本文的说明做合适的范围内选择，而并非要限定于下文示例的具体数值。
实施例1
一种宠物洁齿骨的制备方法，具体步骤如下：
A.以质量份计，将全脂羊乳粉49份、酸奶粉45份、柠檬酸1份、葡萄糖1份、氯化铵0.5份和二氧化硅0.5份混合均匀，得到培养基干料；然后将培养基干料与去离子水按照质量比1：2混合均匀，得到培养基；
B.向步骤A得到的培养基中加入菌剂，得到菌液，菌剂与培养基的质量比为1：100，以质量份计，菌剂由动物双歧杆菌33份、罗伊氏乳杆菌33和唾液乳杆菌33份组成；
C.将整根鹿角浸泡于步骤B得到的菌液中，保持鹿角断面处完全浸泡于菌液中，随后于10kPa下处理30s接着恢复至常压，然后于10kPa下处理30s接着恢复至常压……重复该操作3次，随后于-20℃下干燥至鹿角温度下降至-18℃，然后于100kPa条件下干燥至含水量为5wt％，再切割成圆柱状，随后在圆柱状的基础上，沿圆柱的中轴进一步切割成半圆柱状。
实施例2一种宠物洁齿骨的制备方法，具体步骤如下：
A.以质量份计，将全脂羊乳粉43.6份、酸奶粉50份、浓度为5wt％的磷酸溶液0.5份、乳糖2份、硝酸钠3份和碳酸钙0.9份混合均匀，得到培养基干料；然后将培养基干料与去离子水按照质量比1：5混合均匀，得到培养基；
B.向步骤A得到的培养基中加入菌剂，得到菌液，菌剂与培养基的质量比为1：50，以质量份计，菌剂由动物双歧杆菌45份、罗伊氏乳杆菌35和唾液乳杆菌20份组成；
C.将整根鹿角浸泡于步骤B得到的菌液中，保持鹿角断面处完全浸泡于菌液中，随后于5kPa下处理60s接着恢复至常压，然后于5kPa下处理60s接着恢复至常压，随后于-20℃下干燥至鹿角温度下降至-18℃，然后于90kPa条件下干燥至含水量为5wt％，再切割成圆柱状。
实施例3
一种宠物洁齿骨的制备方法，具体步骤如下：
A.以质量份计，将全脂羊乳粉30份、酸奶粉50份、柠檬酸0.5份、果糖2份、尿素3份和二氧化硅0.9份混合均匀，得到培养基干料；然后将培养基干料与去离子水按照质量比1：5混合均匀，得到培养基；
B.向步骤A得到的培养基中加入菌剂，得到菌液，菌剂与培养基的质量比为1：100，以质量份计，菌剂由动物双歧杆菌33份、罗伊氏乳杆菌33和唾液乳杆菌33份组成；
C.将整根牛角浸泡于步骤B得到的菌液中，保持牛角断面处完全浸泡于菌液中，随后于15kPa下处理45s接着恢复至常压，于15kPa下处理45s接着恢复至常压……重复该操作3次，随后于-20℃下干燥至牛角温度下降至-18℃，然后于110kPa条件下干燥至含水量为5wt％，再切割成圆柱状。
实施例4
一种宠物洁齿骨的制备方法，具体步骤如下：
A.以质量份计，将全脂羊乳粉45份、酸奶粉50份、柠檬酸0.5份、玉米淀粉1份、硫酸铵3份和碳酸钙0.5份混合均匀，得到培养基干料；然后将培养基干料与去离子水按照质量比1：3混合均匀，得到培养基；
B.向步骤A得到的培养基中加入菌剂，得到菌液，菌剂与培养基的质量比为1：50，以质量份计，菌剂由动物双歧杆菌30份、罗伊氏乳杆菌25、唾液乳杆菌25份和嗜热链球菌20份组成；
C.将整根牛角浸泡于步骤B得到的菌液中，保持鹿角断面处完全浸泡于菌液中，随后于20kPa下处理40s接着恢复至常压，于20kPa下处理40s接着恢复至常压……重复该操作3次，随后于-20℃下干燥至鹿角温度下降至-18℃，然后于100kPa条件下干燥至含水量为5wt％，再切割成圆柱状。
对比例1
除以下条件外，以与实施例1相同的方式制备宠物洁齿骨：
将整根鹿角干燥至含水量为5wt％，再采用与实施例1相同的方式将鹿角切割成与实施例1同样大小的半圆柱状。
使用期间鹿角髓质中益生菌保存情况检测
选取12只不同品种的犬只作为样本分别饲喂按照实施例1的方法制备得到的12个宠物洁齿骨，饲喂期间，洁齿骨供犬只自由啃咬，7天后回收洁齿骨，切除裸露部位，选取髓质内容物(实验组)，采用平板菌落计数法对髓质内容物中的菌落总数进行测定，，并以一未经饲喂的宠物洁齿骨为对照阻，测定该对照组的鹿角髓质中的菌落总数(除未饲喂犬只外，对照组的其他参数设置与实验组相同，结果如表1所示；
其中，菌落总数检测方法为：
样品：经过7日啃咬的鹿角洁齿骨(实验组)、未经啃咬的鹿角洁齿骨(对照组)、未填充的鹿角洁齿骨(空白组)；
器材：显微镜，镜台尺，1cm2载玻片，微量移液枪，移液枪吸头，酒精灯；
试剂：香柏油，二甲苯，革兰氏染色液，乙酸，生理盐水，水；
操作方法：
在镜台尺中心滴加香柏油，目镜观察调整，并对照镜台尺测定视野半径r；制备样品稀释液，将样品研磨粉碎，按1：100的体积比将样品与生理盐水混合并充分摇晃均匀；用微量移液枪吸取上述菌液0.01ml，滴加于载玻片方格内，涂布均匀后自然干燥，然后用酒精灯加热固定，用革兰氏染色液染色1min，水洗后用乙酸溶液脱色2s，油镜观察，任意选取10个视野内的菌数，并计算平均值X；
计算方法：
稀释液中菌落总数(个/ml)＝X/(3.14*r2)*102
样品中菌落总数(cfu/g)＝稀释液中菌落总数*102，实验组和对照组的最终检测结果均以其样品中菌落总数减去空白组的菌落总数后的结果作为最终结果。
表1菌落数检测结果
| 检测指标 | 对照组 | 实验组 |
| 菌落总数/(cfu/g) | 124821 | 129534 |
由表1可知，对照组与实验组的菌落总数无显著性差异。由此表明，保存期间(即产品货架期)，本发明的宠物洁齿骨中的动物双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌和唾液乳杆菌存活情况良好。
使用前后菌斑指数变化情况检测
检测实施例1及对比例1制得的宠物洁齿骨的改善口腔健康性能，具体为：以12只不同品种的犬只作为样本进行为期30天的饲喂测试，12只不同品种的犬只分别饲喂按照实施例1的方法制备得到的12个宠物洁齿骨(实验组)，并以另外10只不同品种的犬只分别饲喂按照对比例1的方法制备得到的10个宠物洁齿骨(对照组)，饲喂期间，宠物洁齿骨由犬只自由啃咬；
饲喂第0天、第10天、第20天和第30天，分别通过牙菌斑指示剂齿面涂布统计测试对象的牙菌斑指数，测试前统计一次，测试期内每10天统计一次，以turesky菌斑指数改良法对测试对象的右下臼齿进行检测，具体为：检测除第三磨牙外的所有牙的唇(颊)舌面，先用菌斑染色剂使菌斑染色，再根据牙面菌斑面积记分，具体计分标准(如图4所示)为：牙面无菌斑-0分，牙颈部龈缘处有散在的点状菌斑-1分，牙颈部菌斑，宽度不超过1mm-2分，牙颈部菌斑覆盖宽度超过1mm，但在牙面1/3以下-3分，菌斑覆盖面积占牙面1/3-2/3之间，菌斑覆盖面积占牙面2/3以上，结果如表2和表3所示。
表2菌斑指数检测结果(实验组)
| # | 0天 | 10天 | 20天 | 30天 |
| 1 | 1 | 0 | 0 | 0 |
| 2 | 3 | 3 | 1 | 1 |
| 3 | 3 | 3 | 2 | 1 |
| 4 | 2 | 1 | 0 | 0 |
| 5 | 4 | 3 | 3 | 1 |
| 6 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 7 | 1 | 1 | 0 | 0 |
| 8 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 9 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 10 | 2 | 1 | 1 | 0 |
| 11 | 5 | 5 | 4 | 2 |
| 12 | 3 | 2 | 1 | 1 |
表3菌斑指数检测结果(对照组)
| # | 0天 | 10天 | 20天 | 30天 |
| 1 | 2 | 1 | 1 | 1 |
| 2 | 2 | 2 | 2 | 1 |
| 3 | 2 | 2 | 2 | 1 |
| 4 | 4 | 4 | 3 | 4 |
| 5 | 2 | 1 | 1 | 1 |
| 6 | 1 | 1 | 1 | 1 |
| 7 | 1 | 1 | 1 | 1 |
| 8 | 3 | 3 | 3 | 3 |
| 9 | 3 | 2 | 2 | 2 |
| 10 | 2 | 2 | 2 | 1 |
由表2和表3可知，与对照组相比，使用后，实验组的犬只的菌斑指数降低程度得到了显著提高。由此表明，本发明的宠物洁齿骨能够显著改善宠物口腔健康情况。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。
Claims (10)
1.一种宠物洁齿骨的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
A.将菌剂加入培养基中，混合得到菌液，所述菌剂包括动物双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌和唾液乳杆菌；
B.将动物角浸泡于步骤A得到的菌液中，进行真空处理，随后恢复至常压，接着进行干燥。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤A中，所述培养基包括培养基干料和水。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述培养基干料包括乳粉、酸奶粉、碳源、氮源、pH调节剂和载体；
和/或，所述培养基干料与水的质量比为1：2-1：5。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，以质量份计，所述培养基干料包括乳粉30-55份、酸奶粉20-50份、碳源0.3-3份、氮源0.1-0.8份、pH调节剂0.5-2份和载体0.1-0.9份；
和/或，所述碳源选自蔗糖、乳糖、葡萄糖、甘露醇和玉米淀粉中的一种或多种；
和/或，所述氮源选自氯化铵、硫酸铵、尿素、硝酸钠和氨基酸中的一种或多种；
和/或，所述pH调节剂选自柠檬酸、碳酸、磷酸和硫酸中的一种或多种；
和/或，所述载体选自二氧化硅或碳酸钙或二者的组合物。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤A中，所述菌剂与培养基的质量比为1：50-1：100。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤A中，所述菌剂还包括嗜热链球菌；
和/或，步骤A中，以质量份计，所述菌剂包括动物双歧杆菌30-45份、罗伊氏乳杆菌25-35和唾液乳杆菌20-35份。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤B中，所述动物角选自鹿角或牛角；
和/或，步骤B中，所述真空处理的压力为5-30kPa，时间为30-60s。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤B中，所述干燥采用冷冻干燥；
和/或，步骤B中，重复真空处理步骤若干次；
和/或，步骤B中，干燥后还包括切割步骤。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述冷冻干燥包括：先于-10～-30℃下干燥至动物角温度下降至≤-18℃，然后于90-110kPa条件下干燥至含水量≤5wt％。
10.根据权利要求1-9任一项所述制备方法制得的宠物洁齿骨。
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