CN114410516A - 一种枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法 - Google Patents

一种枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法 Download PDF

Info

Publication number
CN114410516A
CN114410516A CN202210008535.8A CN202210008535A CN114410516A CN 114410516 A CN114410516 A CN 114410516A CN 202210008535 A CN202210008535 A CN 202210008535A CN 114410516 A CN114410516 A CN 114410516A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fermentation
bacillus subtilis
culture
spore
rate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202210008535.8A
Other languages
English (en)
Inventor
张云泽
张礼
李炳乾
刘洪岩
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Engineering Technology Institute Co ltd Of Cnsic
Original Assignee
Engineering Technology Institute Co ltd Of Cnsic
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Engineering Technology Institute Co ltd Of Cnsic filed Critical Engineering Technology Institute Co ltd Of Cnsic
Priority to CN202210008535.8A priority Critical patent/CN114410516A/zh
Publication of CN114410516A publication Critical patent/CN114410516A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N3/00—Spore forming or isolating processes

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明创造提供了一种枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法，属于菌类培养技术领域。本发明创造所述的发酵方法以枯草芽孢杆菌为发酵菌种，接种于改进后的活化培养基中进行种子活化；再将活化后的菌种接种到改进后的发酵培养基中进行培养；采用本发明创造所述的发酵方法的枯草芽孢杆菌芽孢生成率显著提高，有助于枯草芽孢杆菌的工业化生产中提高产品有效率。

Description

一种枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法
技术领域
本发明创造属于菌类培养技术领域，尤其是涉及一种枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法。
背景技术
枯草芽孢杆菌在水体中繁殖的过程中能够产生胞外酶，它能够将水体和底泥中的残余饵料、排泄废物和动植物残体等有机物分解，这些有机物首先分解为小分子，如高级脂肪酸和多肽等，然后分解为更小的分子有机物，如单糖、氨基酸、低级脂肪酸和环烃等，最终分解为二氧化碳、硝酸盐、硫酸盐等，实现降低水中的BOD、COD，使水中的氮、氨、硫化物和亚硝酸氮的浓度降低，具有清除底泥和减轻水体富营养化的作用，此外芽孢杆菌分泌的多种抗生素和酶类都能抑制其它病原菌的生长。
枯草芽孢杆菌作为水产养殖用添加剂，一些研究证明其能够促进养殖品种加速生长，降低饲料系数，维持肠道微生态平衡，增强动物机体免疫力，提高抗病能力和减少污染等。
目前国内对枯草芽孢杆菌的研究主要集中在筛菌、抑菌效果以及枯草芽孢杆菌的产酶特性等，而对于枯草芽孢杆菌的高芽孢率发酵技术则报道较少。
发明内容
有鉴于此，为解决上述问题，本发明创造提出了一种枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法，以枯草芽孢杆菌为菌种，经种子活化后接种到发酵培养基中培养，通过对培养基配方及培养条件的改进，枯草芽孢杆菌芽孢生成率显著提高。
为达到上述目的，本发明创造的技术方案是这样实现的：
一种枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、以枯草芽孢杆菌为发酵菌种，接种于活化培养基中进行种子活化；所述活化培养基包括如下组分：蛋白胨8～12g/L、牛肉粉2～5g/L、氯化钠3～7g/L、葡萄糖8～12g/L；
S2、将活化后的菌种接种到发酵培养基中进行培养，得到高芽孢率的枯草芽孢杆菌；所述发酵培养基包括如下组分：葡萄糖3～7g/L、糖蜜8～12g/L、豆饼粉8～12g/L、酵母粉3～7g/L、MnSO4 0.1～0.5g/L、KH2PO4 0.1～0.4g/L、K2HPO4 0.1～0.5g/L、碳酸钙1～5g/L。
进一步的，所述S1中，活化培养基包括如下组分：蛋白胨10g/L、牛肉粉3g/L、氯化钠5g/L、葡萄糖10g/L。
进一步的，所述S1中，发酵培养基包括如下组分：葡萄糖5g/L、糖蜜10g/L、豆饼粉10g/L、酵母粉5g/L、MnSO4 0.3g/L、KH2PO4 0.2g/L、K2HPO4 0.3g/L、碳酸钙3g/L。
进一步的，所述S1中，种子活化的培养条件为：PH为7.0～7.2，温度为35～37℃，摇床培养20～26h。
优选的，种子活化的培养条件为：PH为7.0，温度为35℃，摇床培养24h。
进一步的，所述S2中，发酵培养的条件为：pH为7.2～7.4、温度为36～38℃、搅拌转速80～120r/min、培养时间45～50h。
优选的，发酵培养的条件为：pH为7.2、温度为37℃、搅拌转速100r/min、培养时间48h。
进一步的，所述S2中，发酵培养基中添加有作为芽孢载体的不溶物。
进一步的，所述S2中，发酵培养的接种量为6％v/v。
进一步的，所述S2中，每发酵10L体积的通氧量不小于1m3/h。
相对于现有技术，本发明创造所述的枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法具有以下优势：
(1)本发明创造所述的枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法通过对培养基配方及发酵条件的改进，为提高枯草芽孢杆菌的芽孢形成率、提高产品质量及稳定性提供了基础条件；
(2)本发明创造所述的枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法以枯草芽孢杆菌为菌种，经种子活化后接种到发酵培养基中培养，经过发酵周期后，枯草芽孢杆菌芽孢生成率显著提高，达到91.3％以上，比目前普遍收获期的80.7％芽孢率提高了13％。
具体实施方式
除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本发明创造所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
下面结合实施例来详细说明本发明创造。
实施例1
以枯草芽孢杆菌为发酵菌种，经种子活化后接种到发酵培养基中培养。
(1)活化培养
将枯草芽孢杆菌接种于活化培养基中进行种子活化；
其中，活化培养基的组分如下：蛋白胨10g/L、牛肉粉3g/L、氯化钠5g/L、葡萄糖10g/L；
活化培养的条件为：PH 7.0，温度35℃，摇床培养24h。
(2)发酵培养
将活化好的枯草芽孢杆菌接种到发酵培养基中培养，发酵体积为30L；
其中，发酵培养基的组分如下：葡萄糖5g/L、糖蜜10g/L、豆饼粉10g/L、酵母粉5g/L、MnSO4 0.3g/L、KH2PO4 0.2g/L、K2HPO4 0.3g/L、碳酸钙3g/L；
发酵培养的条件为：pH 7.2，温度37℃，转速100r/min，通氧量6m3/h，装液量30L，接种量6％(v/v)，培养时间48h。
培养结束时，测得的芽孢率为92.4％。
实施例2
以枯草芽孢杆菌为发酵菌种，经种子活化后接种到发酵培养基中培养。
(1)活化培养
将枯草芽孢杆菌接种于活化培养基中进行种子活化；
其中，活化培养基的组分如下：蛋白胨10g/L、牛肉粉3g/L、氯化钠5g/L、葡萄糖10g/L；
活化培养的条件为：PH 7.0，温度35℃，摇床培养24h。
(2)发酵培养
将活化好的枯草芽孢杆菌接种到发酵培养基中培养，发酵体积为300L；
其中，发酵培养基的组分如下：葡萄糖5g/L、糖蜜10g/L、豆饼粉10g/L、酵母粉5g/L、MnSO4 0.3g/L、KH2PO4 0.2g/L、K2HPO4 0.3g/L、碳酸钙3g/L；
发酵培养的条件为：pH 7.2，温度37℃，转速100r/min，通氧量30m3/h，装液量300L，接种量6％(v/v)，培养时间48h。
培养结束时，测得的芽孢率为91.6％。
实施例1和2中的芽孢杆菌芽孢率测定方法为：发酵结束后取1mL发酵液加入到9mL无菌生理盐水中，依次做10倍系列稀释，选取5个适当的稀释倍数，分别常温及80℃水浴处理10min，分别吸取0.1mL常温稀释液和水浴后稀释液注入到各自的平板计数培养基中，用涂布棒将稀释液混匀铺平，每个稀释度接三个平板，倒置，于37℃恒温培养箱中培养24h，选取菌落数在30～300之间的培养皿计菌落数；
其中，芽孢率＝水浴后的菌落数/常温菌落数。
以上所述仅为本发明创造的较佳实施例而已，并不用以限制本发明创造，凡在本发明创造的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明创造的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、以枯草芽孢杆菌为发酵菌种，接种于活化培养基中进行种子活化；所述活化培养基包括如下组分：蛋白胨8～12g/L、牛肉粉2～5g/L、氯化钠3～7g/L、葡萄糖8～12g/L；
S2、将活化后的菌种接种到发酵培养基中进行培养，得到高芽孢率的枯草芽孢杆菌；所述发酵培养基包括如下组分：葡萄糖3～7g/L、糖蜜8～12g/L、豆饼粉8～12g/L、酵母粉3～7g/L、MnSO4 0.1～0.5g/L、KH2PO40.1～0.4g/L、K2HPO4 0.1～0.5g/L、碳酸钙1～5g/L。
2.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法，其特征在于：所述S1中，活化培养基包括如下组分：蛋白胨10g/L、牛肉粉3g/L、氯化钠5g/L、葡萄糖10g/L。
3.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法，其特征在于：所述S1中，发酵培养基包括如下组分：葡萄糖5g/L、糖蜜10g/L、豆饼粉10g/L、酵母粉5g/L、MnSO40.3g/L、KH2PO4 0.2g/L、K2HPO4 0.3g/L、碳酸钙3g/L。
4.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法，其特征在于：所述S1中，种子活化的培养条件为：PH为7.0～7.2，温度为35～37℃，摇床培养20～26h。
5.根据权利要求4所述的枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法，其特征在于：种子活化的培养条件为：PH为7.0，温度为35℃，摇床培养24h。
6.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法，其特征在于：所述S2中，发酵培养的条件为：pH为7.2～7.4、温度为36～38℃、搅拌转速80～120r/min、培养时间45～50h。
7.根据权利要求6所述的枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法，其特征在于：发酵培养的条件为：pH为7.2、温度为37℃、搅拌转速100r/min、培养时间48h。
8.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法，其特征在于：所述S2中，发酵培养基中添加有作为芽孢载体的不溶物。
9.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法，其特征在于：所述S2中，发酵培养的接种量为6％v/v。
10.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法，其特征在于：所述S2中，每发酵10L体积的通氧量不小于1m3/h。
CN202210008535.8A 2022-01-05 2022-01-05 一种枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法 Pending CN114410516A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210008535.8A CN114410516A (zh) 2022-01-05 2022-01-05 一种枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210008535.8A CN114410516A (zh) 2022-01-05 2022-01-05 一种枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114410516A true CN114410516A (zh) 2022-04-29

Family

ID=81272303

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210008535.8A Pending CN114410516A (zh) 2022-01-05 2022-01-05 一种枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114410516A (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102168055A (zh) * 2011-03-03 2011-08-31 大连吉翔农业科技有限公司 一种高芽孢率的枯草芽孢杆菌发酵方法
CN103865826A (zh) * 2012-12-15 2014-06-18 重庆江合生物科技有限责任公司 一种高密度培养高芽孢率枯草芽孢杆菌的方法
CN106190885A (zh) * 2015-05-05 2016-12-07 上海邦成生物工程有限公司 一种枯草芽孢杆菌发酵培养基及其应用
CN107815431A (zh) * 2017-11-22 2018-03-20 山东京青农业科技有限公司 一种以水溶原料培养枯草芽孢杆菌的方法
CN109722408A (zh) * 2017-10-30 2019-05-07 中粮生物化学（安徽）股份有限公司 促使枯草芽孢杆菌产芽孢的方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102168055A (zh) * 2011-03-03 2011-08-31 大连吉翔农业科技有限公司 一种高芽孢率的枯草芽孢杆菌发酵方法
CN103865826A (zh) * 2012-12-15 2014-06-18 重庆江合生物科技有限责任公司 一种高密度培养高芽孢率枯草芽孢杆菌的方法
CN106190885A (zh) * 2015-05-05 2016-12-07 上海邦成生物工程有限公司 一种枯草芽孢杆菌发酵培养基及其应用
CN109722408A (zh) * 2017-10-30 2019-05-07 中粮生物化学（安徽）股份有限公司 促使枯草芽孢杆菌产芽孢的方法
CN107815431A (zh) * 2017-11-22 2018-03-20 山东京青农业科技有限公司 一种以水溶原料培养枯草芽孢杆菌的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
王法富等: "枯草芽孢杆菌出芽培养条件优化", 当代化工, vol. 47, no. 2, pages 1 - 2 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110066746B (zh) 一株加速堆肥腐熟的耐高温芽孢杆菌属细菌njau-nd8及其应用
CN107541477B (zh) 一种利用乳酸菌发酵液培养光合细菌的方法
CN112375693A (zh) 一种利用天然生物絮凝剂对春雷霉素发酵菌丝进行预处理后制备微生物菌剂的方法
CN107488600A (zh) 一株高产耐氧化低温葡萄糖氧化酶的黑曲霉
CN110982750A (zh) 一种沼泽红假单胞菌高密度发酵方法及其应用
CN106867937A (zh) 用豌豆蛋白废水液体发酵生产纳豆枯草芽孢杆菌菌剂的菌株、方法及应用
CN113817635A (zh) 一种利用大豆乳清废水培养芽孢杆菌的方法
CN101153294B (zh) 琥珀酸的固定化细胞单罐高强度连续发酵工艺
CN111100830B (zh) 一种用于水产养殖水体净化的复合微生态制剂及其应用
CN114410516A (zh) 一种枯草芽孢杆菌高芽孢率的发酵方法
CN108408921B (zh) 一种提升养殖水体透明度的微生态制剂及其制备方法
CN115786191B (zh) 一株弗氏柠檬酸杆菌及其在农药生产废水处理中的应用
CN103952447A (zh) 一种利用厌氧条件下发酵生产丁二酸的方法
CN1693450A (zh) 一种好氧高温堆肥发酵功能菌培养基的配制方法
CN104293721A (zh) 一种高密度培养枯草芽孢杆菌的方法
CN115491338A (zh) 一种化工中间体降解菌株及其在废水处理中的应用
CN110564804B (zh) 一种用于生产核黄素的清液发酵培养基及发酵方法
CN114591859A (zh) 一种用于水质改良的微生物菌剂配方及其制备方法
CN114134043A (zh) 一种环保污水处理剂的制备方法
CN1667115A (zh) 一种黑曲霉菌株及其在果胶酶固态发酵生产中的应用
CN1053697C (zh) 发酵生产d-核糖新菌株及用该菌株制备d-核糖的方法
CN1958525A (zh) 玫瑰黄链霉菌变种0116发酵液菌渣作为肥料的应用
KR0134131B1 (ko) 세파로스포린 c를 생산하는 미생물 및 이를 이용한 세파로스포린 c의 제조방법
CN114940950B (zh) 一种丁酸梭菌发酵废液资源化利用的方法
CN112662609B (zh) 一种用于提高β-丙氨酸产量的发酵培养基及应用方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination