CN114404642A - 一种可吸收止血骨泥及其制备方法 - Google Patents

一种可吸收止血骨泥及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种可吸收止血骨泥及其制备方法，按照质量百分比，所述的可吸收止血骨泥包括如下原料制成：高分子量聚乙二醇60%‑90%、低分子量聚乙二醇5%‑35%和胶原蛋白5%‑30%。本发明的止血骨泥通过利用不同分子量的聚乙二醇混合而成，且各原料需要特定的配比，通过本发明的方法得到的止血骨泥质地柔软、可塑性强，能够迅速填充创面大大小小的裂隙及血窦，具有一定的粘弹性，能够牢固粘附创面，一定时间内不脱落，可以逐渐被降解和被机体组织吸收，不影响创面愈合，生物相容性好，无毒副作用，组织反应小，具有促进创面修复的作用。

Description

一种可吸收止血骨泥及其制备方法
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种可吸收止血骨泥及其制备方法。
背景技术
术中创面出血是外科手术中常见问题，术中出血过多使得手术时间延长，重则出现严重的并发症，如失血性休克，甚至造成患者死亡。术中出血不仅会影响临床医生术中操作，同时还对患者带来不应有的损害。因此，止血材料的发展始终是临床医学、生物材料及医疗器械领域关注的重点之一。
在许多外伤和手术过程中，都会出现骨出血的现象，因而，控制骨的出血或者骨的止血是很有必要的。松质骨创面出血不止或难以止血，究其原因，与松质骨创面的出血特点有关，松质骨结构松散、血运丰富，局部血流压力相对较大，加之创面多为锐器切割、暴力打击所致，其出血多为渗血，难以靠血管收缩自行止血，术中也很难依靠电凝、钳夹、止血纱布、明胶海绵填塞等常规方法止血。目前，比较有效的止血方法是迅速填充松质骨创面裂隙、血窦，中止渗血过程进而激活血管内、外凝血途径达到止血目的。
骨蜡是目前临床上常用的机械止血剂，虽然止血效果良好，但由于其不可降解从而会在体内产生异物反应，影响创面愈合时间，甚至会出现长时间不愈合。
鉴于以上原因，特提出本发明。
发明内容
为了解决现有技术存在的以上问题，本发明提供了一种可吸收止血骨泥及其制备方法，本发明所述的止血骨泥止血速度快，生物相容性好，可降解吸收，可以促进创面修复。
本发明的第一目的，提供了一种可吸收止血骨泥，按照质量百分比，所述的可吸收止血骨泥包括如下原料制成：高分子量聚乙二醇60%-90%、低分子量聚乙二醇5%-35%和胶原蛋白5%-30%。
进一步的，按照质量百分比，所述的可吸收止血骨泥包括如下原料制成：高分子量聚乙二醇60%、低分子量聚乙二醇25%和胶原蛋白15%。
进一步的，所述的高分子量聚乙二醇重均分子量为1000-5000，低分子量聚乙二醇重均分子量为400-800。
聚乙二醇的合成单体是环氧乙烷，具有高度的生物相容性、生物降解性和非免疫原性。它已被证明是有效的聚合物，可用于细胞结合、生长和增殖，药物输送和医学研究。相对分子质量在1000以下时，PEG以液体形式存在。当相对分子质量在1000以上时，PEG以固体形式存在。本发明人经过大量的试验发现，将两种不同分子量的PEG共混，获得了用手揉搓塑性的可吸收止血骨泥。其中，胶原蛋白是常见的止血材料之一，植入体内后可降解，释放的大量氨基酸为骨形成提供充足的营养，促进创面愈合。
本发明的第二目的，提供了一种所述的可吸收止血骨泥的制备方法，所述的方法包括如下步骤：
（1）按照各原料的重量，分别称取备用；
（2）将胶原蛋白加水溶解成质量分数为0.5%-1.0%，低温放置至形成冰块，冷冻干燥，粉碎，得到胶原蛋白絮状物；
（3）将高分子量聚乙二醇和所述的胶原蛋白絮状物混合，搅拌，加热，得到溶液；
（4）将所述的溶液中加入低分子量聚乙二醇，加热搅拌，混合均匀，倒入模具，冷却，灭菌，得到所述的可吸收止血骨泥。
进一步的，步骤（2）中低温放置的温度为-80℃～-20℃，放置时间为6 h -24h。
进一步的，步骤（2）中冷冻干燥为在真空度小于10Pa，温度0-20℃下，冷冻干燥12h -24h。
进一步的，步骤（3）中加热温度为45℃-55℃。
进一步的，步骤（4）中加热温度为45℃-55℃。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明的止血骨泥通过利用不同分子量的聚乙二醇混合而成，且各原料需要特定的配比，通过本发明的制备方法得到的止血骨泥质地柔软、可塑性强，能够迅速填充创面大大小小的裂隙及血窦，具有一定的粘弹性，能够牢固粘附创面，长时间内不脱落，可以逐渐被降解和被机体组织吸收，不影响创面愈合，生物相容性好，无毒副作用，组织反应小，具有促进创面修复的作用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例3制备的止血骨泥的外观图；
图2是本发明实施例3制备的止血骨泥的粘附性试验图；
图3本发明所述的止血骨泥的细胞毒性试验图；
图4是本发明实施例3制备的止血骨泥的止血有效性试验图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。
实施例1
本实施例的一种可吸收止血骨泥，按照质量百分比，所述的可吸收止止血骨泥包括如下原料制成：高分子量聚乙二醇60%、低分子量聚乙二醇35%和胶原蛋白5%，所述的高分子量聚乙二醇重均分子量为1000-5000，低分子量聚乙二醇重均分子量为400-800。
本实施例的一种可吸收止血骨泥的制备方法，包括如下步骤：
（1）按照各原料的重量，分别称取备用；
（2）将胶原蛋白加水溶解成质量分数为0.6%，-80℃放置24h形成冰块，在真空度小于10Pa，温度0℃下，冷冻干燥24h，利用粉碎机将冷冻干燥胶原蛋白粉碎成絮状，得到胶原蛋白絮状物；
（3）将高分子量聚乙二醇和所述的胶原蛋白絮状物混合，然后在机械搅拌的条件下加热至45℃，使混合物熔化成液体，得到溶液；
（4）将所述的溶液中缓慢加入低分子量聚乙二醇，继续在45℃下加热搅拌，混合均匀，倒入模具，冷却成型，将冷却成型后的产品密封包装，灭菌，得到所述的可吸收止血骨泥。
实施例2
本实施例的一种可吸收止血骨泥，按照质量百分比，所述的可吸收止止血骨泥包括如下原料制成：高分子量聚乙二醇70%、低分子量聚乙二醇20%和胶原蛋白10%，所述的高分子量聚乙二醇重均分子量为1000-5000，低分子量聚乙二醇重均分子量为400-800。
本实施例的一种可吸收止血骨泥的制备方法，包括如下步骤：
（1）按照各原料的重量，分别称取备用；
（2）将胶原蛋白加水溶解成质量分数为0.5%，-60℃放置20h形成冰块，在真空度小于10Pa，温度5℃下，冷冻干燥20h，利用粉碎机将冷冻干燥胶原蛋白粉碎成絮状，得到胶原蛋白絮状物；
（3）将高分子量聚乙二醇和所述的胶原蛋白絮状物混合，然后在机械搅拌的条件下加热至47℃，使混合物熔化成液体，得到溶液；
（4）将所述的溶液中缓慢加入低分子量聚乙二醇，继续在47℃下加热搅拌，混合均匀，倒入模具，冷却成型，将冷却成型后的产品密封包装，灭菌，得到所述的可吸收止血骨泥。
实施例3
本实施例的一种可吸收止血骨泥，按照质量百分比，所述的可吸收止止血骨泥包括如下原料制成：高分子量聚乙二醇60%、低分子量聚乙二醇25%和胶原蛋白15%，所述的高分子量聚乙二醇重均分子量为1000-5000，低分子量聚乙二醇重均分子量为400-800。
本实施例的一种可吸收止血骨泥的制备方法，包括如下步骤：
（1）按照各原料的重量，分别称取备用；
（2）将胶原蛋白加水溶解成质量分数为0.75%，-50℃放置15h形成冰块，在真空度小于10Pa，温度10℃下，冷冻干燥18h，利用粉碎机将冷冻干燥胶原蛋白粉碎成絮状，得到胶原蛋白絮状物；
（3）将高分子量聚乙二醇和所述的胶原蛋白絮状物混合，然后在机械搅拌的条件下加热至50℃，使混合物熔化成液体，得到溶液；
（4）将所述的溶液中缓慢加入低分子量聚乙二醇，继续在50℃下加热搅拌，混合均匀，倒入模具，冷却成型，将冷却成型后的产品密封包装，灭菌，得到所述的可吸收止血骨泥。
本实施例制备的可吸收止血骨泥的外观图如图1所示，为乳白色面泥状。
实施例4
本实施例的一种可吸收止血骨泥，按照质量百分比，所述的可吸收止止血骨泥包括如下原料制成：高分子量聚乙二醇80%、低分子量聚乙二醇15%和胶原蛋白5%，所述的高分子量聚乙二醇重均分子量为1000-5000，低分子量聚乙二醇重均分子量为400-800。
本实施例的一种可吸收止血骨泥的制备方法，包括如下步骤：
（1）按照各原料的重量，分别称取备用；
（2）将胶原蛋白加水溶解成质量分数为0.9%，-40℃放置12h形成冰块，在真空度小于10Pa，温度15℃下，冷冻干燥15h，利用粉碎机将冷冻干燥胶原蛋白粉碎成絮状，得到胶原蛋白絮状物；
（3）将高分子量聚乙二醇和所述的胶原蛋白絮状物混合，然后在机械搅拌的条件下加热至52℃，使混合物熔化成液体，得到溶液；
（4）将所述的溶液中缓慢加入低分子量聚乙二醇，继续在52℃下加热搅拌，混合均匀，倒入模具，冷却成型，将冷却成型后的产品密封包装，灭菌，得到所述的可吸收止血骨泥。
实施例5
本实施例的一种可吸收止血骨泥，按照质量百分比，所述的可吸收止止血骨泥包括如下原料制成：高分子量聚乙二醇80%、低分子量聚乙二醇10%和胶原蛋白10%，所述的高分子量聚乙二醇重均分子量为1000-5000，低分子量聚乙二醇重均分子量为400-800。
本实施例的一种可吸收止血骨泥的制备方法，包括如下步骤：
（1）按照各原料的重量，分别称取备用；
（2）将胶原蛋白加水溶解成质量分数为0.9%， -30℃放置8h形成冰块，在真空度小于10Pa，温度15℃下，冷冻干燥14h，利用粉碎机将冷冻干燥胶原蛋白粉碎成絮状，得到胶原蛋白絮状物；
（3）将高分子量聚乙二醇和胶原蛋白絮状物混合，然后在机械搅拌的条件下加热至53℃，使混合物熔化成液体，得到溶液；
（4）将所述的溶液中缓慢加入低分子量聚乙二醇，继续在53℃下加热搅拌，混合均匀，倒入模具，冷却成型，将冷却成型后的产品密封包装，灭菌，得到所述的可吸收止血骨泥。
实施例6
本实施例的一种可吸收止血骨泥，按照质量百分比，所述的可吸收止止血骨泥包括如下原料制成：高分子量聚乙二醇70%、低分子量聚乙二醇10%和胶原蛋白20%，所述的高分子量聚乙二醇重均分子量为1000-5000，低分子量聚乙二醇重均分子量为400-800。
本实施例的一种可吸收止血骨泥的制备方法，包括如下步骤：
（1）按照各原料的重量，分别称取备用；
（2）将胶原蛋白加水溶解成质量分数为1%， -20℃放置6h形成冰块，在真空度小于10Pa，温度20℃下，冷冻干燥12h，利用粉碎机将冷冻干燥胶原蛋白粉碎成絮状，得到胶原蛋白絮状物；
（3）将高分子量聚乙二醇和胶原蛋白絮状物混合，然后在机械搅拌的条件下加热至55℃，使混合物熔化成液体，得到溶液；
（4）将所述的溶液中缓慢加入低分子量聚乙二醇，继续在55℃下加热搅拌，混合均匀，倒入模具，冷却成型，将冷却成型后的产品密封包装，灭菌，得到所述的可吸收止血骨泥。
对比例1
本对比例的止血骨泥与实施例3相同，不同之处在于，不加低分子量聚乙二醇，高分子量聚乙二醇含量为85%。
对比例2
本对比例的止血骨泥与实施例3相同，不同之处在于，不加高分子量聚乙二醇，低分子量聚乙二醇含量为85%。
试验例1
测试实施例1-6和对比例1-2制备止血骨泥的质量溶胀率
质量溶胀率测试方法选用称重法，将止血骨泥用水完全浸润后，取出，去掉表面多余水分，称重。质量溶胀率为饱和溶胀后的质量m1与原始质量m0的差值占原始质量m0的百分比，如表1所示。
Figure 327690DEST_PATH_IMAGE001
从表1中可以看出，胶原蛋白含量越高，止血骨泥的质量溶胀率一般会越大，而对比例2质量溶胀率太高，由于质量溶胀率过高会导致对周围组织的压迫，而且封堵效果较差，对比例1的质量溶胀率过低，可塑性低，不利于把止血骨泥捏成理想形状，本发明人经过大量的试验确定了本发明的各原料的配比及种类。
试验例2
测试实施例1-6和对比例1-2制备的止血骨泥的粘附性试验。
取0.2g测试样品，涂在骨头切片(图2中（a）)上，室温条件下观察在5min时间内是否有掉渣现象，密实程度是否完好，实施例3的结果如图2所示。
可见实施例3样品能够很好地黏附在骨头片(图2中（b）)上，无掉渣现象，密实程度完好。
本发明人也对其他实施例做了上述试验，结果基本一致，由于篇幅有限，不再一一列举。
试验例3
测试实施例1-6制备的可吸收止血骨泥的细胞毒性试验。
通过CCK-8法进行NIH-3T3细胞毒性试验。96孔板每孔种1.5×103个细胞，贴壁后移除培养基，加入100μL实施例1-6的24h浸提液继续培养，在第1、3和5d检测细胞增殖情况。在检测点，加入10μL CCK8试剂，37℃孵育2h后用酶标仪检测450nm处的吸光度（OD值）如图3所示。
由图3可以看出，浸提液与细胞共培养5d后，对细胞生长无毒副作用，表明所制备的止血骨泥具有良好的安全性。
试验例4
测试实施例3制备的止血骨泥的止血有效性实验
选取健康成年猪，麻醉后在颅骨钻取直径8mm的孔，立刻用上述止血骨泥涂抹至缺损孔处进行止血，如图4所示，对照组不进行止血。结果实验组15s内即可有效止血，且无渗血现象，止血效果优异。对照组缺损处会持续出血。
本发明人也对其他实施例做了上述试验，结果基本一致，由于篇幅有限，不再一一列举。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (8)

1.一种可吸收止血骨泥，其特征在于，按照质量百分比，所述的可吸收止血骨泥包括如下原料制成：高分子量聚乙二醇60%-90%、低分子量聚乙二醇5%-35%和胶原蛋白5%-30%。
2.根据权利要求1所述的一种可吸收止血骨泥，其特征在于，按照质量百分比，所述的可吸收止血骨泥包括如下原料制成：高分子量聚乙二醇60%、低分子量聚乙二醇25%和胶原蛋白15%。
3.根据权利要求1或2所述的一种可吸收止血骨泥，其特征在于，所述的高分子量聚乙二醇重均分子量为1000-5000，低分子量聚乙二醇重均分子量为400-800。
4.一种权利要求1-3任一所述的可吸收止血骨泥的制备方法，其特征在于，所述的方法包括如下步骤：
（1）按照各原料的重量，分别称取备用；
（2）将胶原蛋白加水溶解成质量分数为0.5%-1.0%，低温放置至形成冰块，冷冻干燥，粉碎，得到胶原蛋白絮状物；
（3）将高分子量聚乙二醇和所述的胶原蛋白絮状物混合，搅拌，加热，得到溶液；
（4）将所述的溶液中加入低分子量聚乙二醇，加热搅拌，混合均匀，倒入模具，冷却，灭菌，得到所述的可吸收止血骨泥。
5.根据权利要求4所述的可吸收止血骨泥的制备方法，其特征在于，步骤（2）中低温放置的温度为-80℃～-20℃，放置时间为6h -24h。
6.根据权利要求4所述的可吸收止血骨泥的制备方法，其特征在于，步骤（2）中冷冻干燥为在真空度小于10Pa，温度0-20℃下，冷冻干燥12 h-24h。
7.根据权利要求4所述的可吸收止血骨泥的制备方法，其特征在于，步骤（3）中加热温度为45℃-55℃。
8.根据权利要求4所述的可吸收止血骨泥的制备方法，其特征在于，步骤（4）中加热温度为45℃-55℃。
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