CN114403068A - 一种耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法,属于水产动物遗传育种技术领域,包括如下步骤:(1)基础育种群引进;(2)核心育种群构建;(3)F1代家系建立;(4)F1代苗种培育;(5)低盐胁迫养殖筛选;(6)苗种生长速率对比;(7)F1代亲本留种;(8)F2代家系构建;(9)继代选择。本发明选用不同来源野生群体为基础群体,通过低盐耐受选育,使培育出的新品系生长速度快、低盐耐受力强,适合在江河地区养殖推广;该育种方法简单实用,可操作性强,经过多代选育,可培育出性状优良的脊尾白虾低盐良种。
Description
技术领域
本发明属于水产动物遗传育种技术领域,具体涉及一种耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法。
背景技术
脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)又名白虾、迎春虾、五须虾等,是一种广温、广盐、杂食性的中型经济虾类,其肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富,具有较高的食用价值和市场需求。
脊尾白虾池塘养殖所需苗种主要通过海区自然纳苗、捕捞天然苗或投放养殖成虾亲本等方式获得,苗种数量和质量受外界环境影响较大,常存在种质来源不稳定、遗传背景不清楚等问题,种质退化现象严重,主要表现为生长速度慢、个体大小不均、抗逆能力差等症状,严重制约着脊尾白虾规模化人工养殖的发展,故开展脊尾白虾良种选育研究就显得尤为重要。
截止目前,已报道的脊尾白虾良种主要有“黄育1号”、“科苏红1号”等,这些品种主要集中于高盐水域方向,而有关脊尾白虾低盐选育方面则尚未见报道。而盐度<10‰的江河口低盐水域海水水产养殖品种比较单一,并被完全开发利用,若能培育出耐受低盐水产新品种,对于有效利用低盐水域资源、拓展水产养殖空间等都具有重要的现实意义和科学价值。
因此,如何提供耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法是本领域亟待解决的问题。
发明内容
本发明公开了一种耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法。
为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法,包括如下步骤:
(1)基础育种群引进:
取来自自然海域的不同脊尾白虾野生群体,作为基础育种群体;
(2)核心育种群构建:
对基础育种群体进行遗传背景分析、低盐驯化测试,从中筛选亲缘关系远、低盐耐受性强的群体构建核心育种群;
(3)F1代家系建立:
从核心育种群中挑选大规格健康未抱卵虾体,进行相同基础育种群体来源和不同基础育种群体来源配对繁育,建立F1代全同胞、半同胞家系;
(4)F1代苗种培育:
F1代各家系幼体孵化后进行苗种培育;
(5)低盐胁迫养殖筛选:
F1代苗种培育至30日龄后,在5d内将养殖水体盐度由8-10‰逐渐降低至4-5‰;
(6)苗种生长速率对比:
F1代苗种培育至30日龄后,从各家系苗种中筛选大小均匀、活力强健的健康虾体进行同环境生长速率对比实验,分别设置不同盐度梯度,比较不同家系苗种的生长速率及成活率;
(7)F1代亲本留种:
根据步骤(6)中各家系苗种生长速率、成活率筛选作为留种对象的家系,再根据留种对象取经过步骤(5)养殖筛选的健康虾体进行留种保存,每个留种家系中留种率控制在3-5%;
(8)F2代家系构建:
从F1代留种家系中继续筛选个体大、活力强的健康未抱卵虾体,进行相同家系来源和不同家系来源配对繁育,根据育种需要适当与核心育种群进行亲本回交,构建F2代全同胞、半同胞家系,近交系数控制在0.1以内;
获得各家系中,选择亲缘关系远、个体大、活力强的健康雌雄脊尾白虾作为优良品种供生产应用,或者进行(9)继代选择:
以低盐耐受力强、生长速率快为选育指标,对F2代家系经过4-5代的连续选择;在最终获得各家系中,选择亲缘关系远、个体大、活力强的健康雌雄脊尾白虾作为优良品种供生产应用。
优选地,步骤(1)中的不同脊尾白虾野生群体收集自不同海域,共收集5-6组脊尾白虾野生群体,并且从每个群体种挑选个体大、活力强的健康虾体组成基础育种群体。
优选地,步骤(2)中的低盐驯化测试为:
于不同盐度下对基础育种群体进行驯化,统计各基础育种群体脊尾白虾在各盐度梯度下的成活率,然后按照低盐度高比重、高盐度低比重的方法对各群体成活率进行赋值排序,筛选分值高的群体构建核心育种群。
进一步优选地,步骤(2)中,根据遗传背景分析、低盐驯化测试结果筛选3-4组基础育种群体构成核心育种群。
优选地,步骤(3)于室内池中进行苗种繁育,水体盐度8-10‰,水温20-24℃。
优选地,步骤(3)中对亲虾投喂蛤肉、鲜杂鱼等动物性饵料。
优选地,步骤(4)中幼体孵化后移至室外池中进行培育,水体盐度8-10‰,水温24-26℃。室外池塘中有丰富的浮游藻类、浮游动物,可提高苗种成活率。
优选地,步骤(4)中,早期投喂轮虫、卤虫等饵料,后期逐渐逐渐过渡至颗粒状配合饲料。
优选地,步骤(5)中在室外池中进行筛选,水体盐度先由8-10‰降至6-7‰,待稳定1-2d后再降至4-5‰,水温20-24℃。
优选地,步骤(5)中通过添加淡水调节盐度,并且低盐胁迫养殖筛选过程中随时关注苗种活动状况,及时捞出死亡个体并调整投饵量(颗粒状配合饲料),低盐胁迫养殖筛选后继续在4-5‰盐度下进行养殖管理。
优选地,步骤(6)中在室内池中进行试验,水体盐度在2-10‰范围内设置多个梯度。水温20-24℃。
优选地,步骤(6)养殖过程中投喂颗粒状配合饲料。
优选地,步骤(7)中,留种对象选择4-5组。
优选地,步骤(8)(9)中,苗种繁育在室内池中进行,幼体孵化后的养殖在室外池中进行,水体盐度均为4-5‰。
优选地,步骤(8)中的F2代及步骤(9)中4-5代的苗种繁育、后续养殖方法条件同F1代。
综上所述,本发明选用不同来源野生群体为基础群体,通过低盐耐受选育,使培育出的新品系生长速度快、低盐耐受力强,适合在江河地区养殖推广;该育种方法简单实用,可操作性强,经过多代选育,可培育出性状优良的脊尾白虾低盐良种。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法,包括如下步骤:
(1)基础育种群引进:
从上海奉贤、浙江宁海、江苏启东、江苏赣榆、江苏大丰、江苏如东海域分别收集脊尾白虾野生群体共6组,并对各组进行筛选,从中挑选个体大、活力强的健康虾体作为基础育种群体进行保种备用,每组筛选5000尾。
(2)核心育种群构建:
对基础育种群体进行遗传背景分析、低盐驯化测试,从中筛选亲缘关系远、低盐耐受性强的群体构建核心育种群。
1)遗传背景分析
采用单核苷酸多态性标记法(SNP)进行遗传多样性分析,每个群体取其肌肉进行DNA提取,通过酶切消化处理、片段末端修复、PCR扩增等方法来完成高通量测序,进行SNP分型。遗传多样性结果表1所示。
表1
2)低盐驯化测试
从收集到的上海奉贤、浙江宁海、江苏启东、江苏赣榆、江苏大丰、江苏如东基础群体中每组筛选出规格相近、活力强健的50日龄健康虾体2000余尾,于室内水族箱中进行低盐驯化测试,共设置2‰、4‰、6‰、8‰四个盐度梯度,每组每梯度设3个平行。
低盐驯化时,先将筛选出的不同群体脊尾白虾分别放入各盐度梯度中,每组每梯度放入脊尾白虾100尾,共进行10d,驯化期间对脊尾白虾进行正常投喂管理。
驯化结束时,统计各群体脊尾白虾在不同盐度梯度下的成活率,按2‰组:4‰组:6‰组:8‰组=4:3:2:1的比值对成活率赋值,打分排序,从中筛选出分值较高的基础育种群构建核心育种群。
最终选择上海奉贤、浙江宁海、江苏如东、江苏赣榆4组构建核心育种群。
(3)F1代家系建立:
从核心育种群中挑选体长>4.0cm,体重>2.0g,活力强,健康未抱卵虾体,于室内水泥池中进行相同基础育种群体来源和不同基础育种群体来源配对繁育,建立F1代全同胞、半同胞家系;在后备亲本培育期间主要投喂蛤肉、鲜杂鱼、麻虾等动物性饵料,日投喂量约占虾体体重的5%,繁育水体盐度在8‰,水温为20-24℃。
(4)F1代苗种培育:
待F1代各家系幼体完全孵化后集中将其移至室外帆布池中进行苗种培育,其中帆布池置于钢架大棚内,上面覆盖遮阳网来控制光照。苗种培育水体盐度设置为8‰,水温为24-26℃,投喂饵料最初为轮虫,随着发育进行,逐渐转喂卤虫幼体、虾片等,待幼体完全变态为幼虾后逐渐改喂颗粒状配合饲料。
(5)低盐胁迫养殖筛选:
待F1代苗种培育至30日龄时,开始进行低盐胁迫养殖筛选。
盐度胁迫筛选直接在室外帆布池中逐级进行,即通过添加曝气自来水,先将培育水体盐度由8‰降至6‰,待稳定2d后继续添加自来水直至盐度降至4‰,水温20-24℃。在低盐胁迫期间随时关注苗种活动情况,及时将死亡个体捞出,待苗种稳定后继续在该盐度环境下进行正常养殖管理,投喂南美白对虾颗粒料。
(6)苗种生长速率对比:
待F1代苗种培育至30日龄时,从F1代各家系苗种中筛选大小均匀、活力强健的健康虾体于室内水族箱进行生长速率对比研究,共设置0‰、2‰、4‰、6‰、8‰、10‰盐度梯度,水温20-24℃,时间为45d。实验期间对脊尾白虾苗种正常养殖管理,投喂饵料主要为颗粒状配合饲料,实验结束时比较不同家系苗种的生长速率及成活率指标。
(7)F1代亲本留种:
根据步骤(6)中各家系苗种生长速率、成活率从F1代16个家系中筛选4组作为留种对象的家系,筛选过程中的打分方法参考步骤(2),低盐度高赋值、高盐度低赋值,综合生长速率及成活率进行评价,再根据留种对象取经过步骤(5)养殖筛选的健康虾体进行留种保存,每个留种家系中留种率控制在3-5%;
其中,各家系F1代苗种在2‰、4‰盐度下,成活率接近于100%,且不存在显著差异;在0‰盐度下差异明显,部分结果如表2所示。
表2
(8)F2代家系构建:
从F1代留种家系中继续筛选个体大、活力强的健康未抱卵虾体,进行相同家系来源和不同家系来源繁育,根据育种需要适当与核心育种群进行亲本回交,构建F2代全同胞、半同胞家系,近交系数控制在0.1以内;
苗种繁育在室内池中进行,幼体孵化后的养殖在室外池中进行,水体盐度均为4‰,其余培养条件同F1代。
获得各家系中,选择亲缘关系远、个体大、活力强的健康雌雄脊尾白虾可作为优良品种供生产应用。
(9)继代选择:
以低盐耐受力强、生长速率快为选育指标,对F2代家系经过4-5代的连续选择;苗种繁育在室内池中进行,幼体孵化后的养殖在室外池中进行,水体盐度均为4‰,其余培养条件同F1代。
在最终获得各家系中,选择亲缘关系远、个体大、活力强的健康雌雄脊尾白虾作为优良品种供生产应用。
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述,每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处,各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。
对所公开的实施例的上述说明,使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对上述实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的,本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下,在其它实施例中实现。因此,本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例,而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
Claims (7)
1.一种耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)基础育种群引进:
取来自自然海域的不同脊尾白虾野生群体,作为基础育种群体;
(2)核心育种群构建:
对基础育种群体进行遗传背景分析、低盐驯化测试,从中筛选亲缘关系远、低盐耐受性强的群体构建核心育种群;
(3)F1代家系建立:
从所述核心育种群中挑选大规格健康未抱卵虾体,进行相同基础育种群体来源和不同基础育种群体来源配对繁育,建立F1代全同胞、半同胞家系;
(4)F1代苗种培育:
F1代各家系幼体孵化后进行苗种培育;
(5)低盐胁迫养殖筛选:
F1代苗种培育至30日龄后,在5d内将养殖水体盐度由8-10‰逐渐降低至4-5‰;
(6)苗种生长速率对比:
F1代苗种培育至30日龄后,从各家系苗种中筛选大小均匀、活力强健的健康虾体进行同环境生长速率对比实验,分别设置不同盐度梯度,比较不同家系苗种的生长速率及成活率;
(7)F1代亲本留种:
根据步骤(6)中各家系苗种生长速率、成活率筛选作为留种对象的家系,再根据留种对象取经过步骤(5)养殖筛选的健康虾体进行留种保存,每个留种家系中留种率控制在3-5%;
(8)F2代家系构建:
从F1代留种家系中继续筛选个体大、活力强的健康未抱卵虾体,进行相同家系来源和不同家系来源配对繁育,根据育种需要适当与核心育种群进行亲本回交,构建F2代全同胞、半同胞家系,近交系数控制在0.1以内;
获得各家系中,选择亲缘关系远、个体大、活力强的健康雌雄脊尾白虾作为优良品种供生产应用,或者进行(9)继代选择:以低盐耐受力强、生长速率快为选育指标,对F2代家系经过4-5代的连续选择;在最终获得各家系中,选择亲缘关系远、个体大、活力强的健康雌雄脊尾白虾作为优良品种供生产应用。
2.根据权利要求1所述的一种耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法,其特征在于,
步骤(2)中的低盐驯化测试为:
于不同盐度下对基础育种群体进行驯化,统计各基础育种群体脊尾白虾在各盐度梯度下的成活率,然后按照低盐度高比重、高盐度低比重的方法对各群体成活率进行赋值排序,筛选分值高的群体构建核心育种群。
3.根据权利要求1所述的一种耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法,其特征在于,
步骤(3)于室内池中进行苗种繁育,水体盐度8-10‰,水温20-24℃。
4.根据权利要求1所述的一种耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法,其特征在于,
步骤(4)中幼体孵化后移至室外池中进行培育,水体盐度8-10‰,水温24-26℃。
5.根据权利要求1所述的一种耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法,其特征在于,
步骤(5)中在室外池中进行筛选,水体盐度先由8-10‰降至6-7‰,待稳定1-2d后再降至4-5‰,水温20-24℃。
6.根据权利要求1所述的一种耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法,其特征在于,
步骤(6)中在室内池中进行试验,水体盐度在2-10‰范围内设置多个梯度。水温20-24℃。
7.根据权利要求1所述的一种耐受低盐的脊尾白虾品系育种方法,其特征在于,
步骤(8)(9)中,苗种繁育在室内池中进行,幼体孵化后的养殖在室外池中进行,水体盐度均为4-5‰。
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