CN114397158A - 一种鱼类预警信息素的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鱼类预警信息素的制备方法，涉及鱼类预警信息素制备技术领域，包括以下步骤：S1：对鱼进行麻醉后在冰上完整取下其表皮；S2：对取下的鱼表皮进行称重；S3：称重后在鱼皮中加入双蒸水，通过高通量组织研磨器中充分研磨；S4：将得到的混合物进行离心提取上清液；S5：向吸出上清液的管中加入双蒸水，离心取上清液：S6：根据计算结果加入双蒸水配制成相应浓度的警戒素，该鱼类预警信息素的制备方法，相较于现有的制备方法而言可有效提高收集到的警戒素量，从而可以减少制备警戒素所用实验鱼的数量，提高了动物福利，同时有利于量化实验所用警戒素浓度，降低实验误差，同时操作较为简单，对实验设备要求较低，有利于进行推广。
Description
技术领域
本发明涉及鱼类预警信息素制备技术领域，具体为一种鱼类预警信息素的制备方法。
背景技术
鱼类预警信息素主要由皮肤棒状细胞分泌，当皮肤受到来自捕食者等外界的机械性损伤时释放至水体，从而引起同伴迅速的预警响应。鱼类预警信息素由于其重要的生态学功能，在鱼类行为学、进化生物学、水域生态学、保护生态学以及污染生态学等领域已备受科学家重视，相关研究正逐渐成为热点领域。当鱼类受伤时，其表皮细胞会释放一种信息素引起同类的警戒反应，这种信息素称为警戒素。警戒素仅存在于部分鱼类的皮肤组织中，当鱼死亡后警戒素也会随之消失。
目前，警戒素已被运用到生命科学的研究中，如用警戒素诱导鱼类的恐惧行为等。目前警戒素常见制备方法有：1.划破鱼皮后用清水冲洗从而获得警戒素。2.取下鱼类皮肤组织浸泡清水从而获得警戒素。3.取单位面积鱼类皮肤组织匀浆从而制备警戒素。
但以上方式存在一定的局限性：1.方法1容易划破鱼皮，且此方法所收集到的警戒素较少，所需鱼较多，从而不利于动物福利；2.方法2对鱼表皮细胞破坏不充分，收集到的警戒素较少，3.方法3对鱼的大小要求较高，体型较小的鱼采用这种方法操作不方便，且部分地方的皮肤组织无法计算面积，造成浪费；4.方法1、2不能量化所得警戒素的浓度，不利于运用到具体实验操作中。因此我们提出了一种鱼类预警信息素的制备方法。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供了一种鱼类预警信息素的制备方法，解决了上述背景技术中提出的问题。
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种鱼类预警信息素的制备方法，包括以下步骤：
S1：对鱼进行麻醉后在冰上完整取下其表皮；
S2：对取下的鱼表皮进行称重；
S3：称重后在鱼皮中加入双蒸水，通过高通量组织研磨器中充分研磨；
S4：将得到的混合物进行离心提取上清液；
S5：向吸出上清液的管中加入双蒸水，离心取上清液：
S6：根据计算结果加入双蒸水配制成相应浓度的警戒素。
作为一种优选的实施方式，所述S1对鱼进行麻醉后在冰上完整取下其表皮的步骤中使用一定浓度的MS-222进行中度麻醉然后取下其表皮。
采用上述进一步方案的技术效果是：使得本方法无需划破鱼皮，从而有利于动物福利，同时使得本方法相较于现有方法而言所收集到的警戒素更多，所需鱼较少，从而有效减少制备警戒素所用实验鱼的数量。
作为一种优选的实施方式，所述S3称重后在鱼皮中加入双蒸水，通过高通量组织研磨器中充分研磨步骤中高通量组织研磨器的工作频率为72赫兹。
采用上述进一步方案的技术效果是：使得本方法相较于现有的方法而言对表皮细胞破坏较为充分，从而使得收集到的警戒素较多，从而有效减少制备警戒素所用实验鱼的数量。
作为一种优选的实施方式，所述S4将得到的混合物进行离心提取上清液步骤中通过离心机进行提取，离心(12000r/min离心1min)取上清液。
采用上述进一步方案的技术效果是：能够提高警戒素的收集率，使得收集到的警戒素较多，从而减少了实验鱼的数量，有利于动物保护，同时减少浪费的发生。
作为一种优选的实施方式，所述S5向吸出上清液的管中加入双蒸水，离心取上清液步骤重复七到八次。
采用上述进一步方案的技术效果是：此步骤重复7到8次，尽量避免了警戒素残留，从而使得制备所需的鱼数量较少，从而有效减少制备警戒素所用实验鱼的数量。
作为一种优选的实施方式，所述S5向吸出上清液的管中加入双蒸水，离心取上清液步骤中加入3ml双蒸水。
采用上述进一步方案的技术效果是：能够尽量避免警戒素的残留，使得收集到的警戒素较多，同时可以有效减少浪费的发生。
作为一种优选的实施方式，所述S3称重后在鱼皮中加入双蒸水，通过高通量组织研磨器中充分研磨步骤中加入的双蒸水为2.5ml。
采用上述进一步方案的技术效果是：使得本方法对于表皮细胞破坏较为充分，从而使得收集到的警戒素较多，从而有效减少制备警戒素所用实验鱼的数量。
本发明提供了一种鱼类预警信息素的制备方法，具备以下有益效果：
该鱼类预警信息素的制备方法，相较于现有的制备方法而言通过可有效提高收集到的警戒素量，从而可以减少制备警戒素所用实验鱼的数量，进而提高了动物福利，同时有利于量化实验所用警戒素浓度，降低实验误差，同时操作较为简单，对实验设备要求较低，有利于进行推广。
附图说明
图1为本发明方法图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
请参阅图1，本发明提供一种技术方案：一种鱼类预警信息素的制备方法，包括以下步骤：
S1：对鱼进行麻醉后在冰上完整取下其表皮；
S2：对取下的鱼表皮进行称重；
S3：称重后在鱼皮中加入双蒸水，通过高通量组织研磨器中充分研磨；
S4：将得到的混合物进行离心提取上清液；
S5：向吸出上清液的管中加入双蒸水，离心取上清液：
S6：根据计算结果加入双蒸水配制成相应浓度的警戒素。
本领域技术人员可以认为，首先实验人员针对不同鱼使用一定浓度的MS-222进行中度麻醉后，实验人员将鱼放置在冰上，接着实验人员在冰上进行操作，从而将鱼表皮完整的取下，然后实验人员对取下的鱼皮进行称重，实验人员在称重后的鱼皮中加入2.5ml双蒸水，然后实验人员将混合物放入至高通量组织研磨器中在工作频率为72赫兹的充分研磨，然后实验人员将混合物取出放入离心机中通过离心(12000r/min离心1min)取上清液，接着实验人员向吸出上清液的管中加入3ml双蒸水，然后实验人员将其再次放入离心机中离心提取上清液，此步骤需要重复7到8次，从而可以尽量避免了警戒素的残留，然后实验人员根据事先计算好的结果，加入双蒸水从而配制成相应浓度的警戒素。
进一步，S1对鱼进行麻醉后在冰上完整取下其表皮的步骤中使用一定浓度的MS-222进行中度麻醉然后取下其表皮。
本领域技术人员可以认为，使得本方法无需划破鱼皮，从而有利于动物福利，同时使得本方法相较于现有方法而言所收集到的警戒素更多，使得收集率显著提高，所需鱼较少，从而有效减少制备警戒素所用实验鱼的数量。
进一步，S3称重后在鱼皮中加入双蒸水，通过高通量组织研磨器中充分研磨步骤中高通量组织研磨器的工作频率为72赫兹。
本领域技术人员可以认为，使得本方法相较于现有的方法而言对表皮细胞破坏较为充分，使得收集率显著提高，从而使得收集到的警戒素较多，从而有效减少制备警戒素所用实验鱼的数量。
进一步，S4将得到的混合物进行离心提取上清液步骤中通过离心机进行提取，离心(12000r/min离心1min)取上清液。
本领域技术人员可以认为，能够尽量避免警戒素的残留，使得收集到的警戒素较多，使得收集率显著提高，从而进一步减少了浪费，同时可以有效提高动物福利。
进一步，S5向吸出上清液的管中加入双蒸水，离心取上清液步骤重复七到八次。
本领域技术人员可以认为，此步骤重复7到8次，尽量避免了警戒素残留，从而使得制备所需的鱼数量较少，从而有效减少制备警戒素所用实验鱼的数量，从而进一步减少了浪费。
进一步，S5向吸出上清液的管中加入双蒸水，离心取上清液步骤中加入3ml双蒸水。
本领域技术人员可以认为，能够尽量避免警戒素的残留，使得收集到的警戒素较多，使得收集率显著提高，从而进一步减少了浪费。
进一步，S3称重后在鱼皮中加入双蒸水，通过高通量组织研磨器中充分研磨步骤中加入的双蒸水为2.5ml。
本领域技术人员可以认为，使得本方法对于表皮细胞破坏较为充分，从而使得收集到的警戒素较多，从而有效减少制备警戒素所用实验鱼的数量。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种鱼类预警信息素的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1：对鱼进行麻醉后在冰上完整取下其表皮；
S2：对取下的鱼表皮进行称重；
S3：称重后在鱼皮中加入双蒸水，通过高通量组织研磨器中充分研磨；
S4：将得到的混合物进行离心提取上清液；
S5：向吸出上清液的管中加入双蒸水，离心取上清液：
S6：根据计算结果加入双蒸水配制成相应浓度的警戒素。
2.根据权利要求1所述的一种鱼类预警信息素的制备方法，其特征在于：所述S1对鱼进行麻醉后在冰上完整取下其表皮的步骤中使用一定浓度的MS-222进行中度麻醉然后取下其表皮。
3.根据权利要求1所述的一种鱼类预警信息素的制备方法，其特征在于：所述S3称重后在鱼皮中加入双蒸水，通过高通量组织研磨器中充分研磨步骤中高通量组织研磨器的工作频率为72赫兹。
4.根据权利要求1所述的一种鱼类预警信息素的制备方法，其特征在于：所述S4将得到的混合物进行离心提取上清液步骤中通过离心机进行提取，离心(12000r/min离心1min)取上清液。
5.根据权利要求1所述的一种鱼类预警信息素的制备方法，其特征在于：所述S5向吸出上清液的管中加入双蒸水，离心取上清液步骤重复七到八次。
6.根据权利要求1所述的一种鱼类预警信息素的制备方法，其特征在于：所述S5向吸出上清液的管中加入双蒸水，离心取上清液步骤中加入3ml双蒸水。
7.根据权利要求1所述的一种鱼类预警信息素的制备方法，其特征在于：所述S3称重后在鱼皮中加入双蒸水，通过高通量组织研磨器中充分研磨步骤中加入的双蒸水为2.5ml。
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