CN114344352B - 一种具有抗晚期糖基化终产物功效的组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种具有抗晚期糖基化终产物功效的组合物及其应用，属于中药技术领域。本发明所述的组合物包括余甘子提取物、橄榄果粉、显齿蛇葡萄提取物中的一种或多种，具有较好的抗晚期糖基化终产物功效，能够明显的抑制AGEs的生成，促进AGEs的断裂，降低AGEs的水平。且本发明所述的组合物制备方法简单，易于工业化生产。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域，具体涉及一种具有抗晚期糖基化终产物功效的组合物及其应用。
背景技术
晚期糖基化终末产物(advanced glycationend products，AGEs)是指蛋白质、脂质或核酸等大分子在没有酶参与的条件下，自发的与葡萄糖或其他还原单糖反应所生成的稳定的共价加成物。它是非酶糖基化反应(Maillard反应)的终末产物，是过量的糖和蛋白质结合的产物。已鉴定的AGEs已有数十种，如羧甲基赖氨酸(CML)、羧乙基赖氨酸(CEL)、吡咯素等。在病理情况下，相应病变组织中均可有AGEs存在。
AGEs在体内有两个来源，一是过量的糖和蛋白质在体内合成AGEs，二是通过进食将食物中存在的AGEs摄入体内。AGEs能够和身体的组织细胞相组合并破坏这些组织细胞，从而对人体产生危害。正常情况下，体内的AGEs可以依靠肾脏清除。然而，随着年龄的增加，或在某些病理条件下AGEs在体内发生蓄积，这对机体可以产生明显的损伤等不利影响，干预正常的体内生理生化过程，影响机体的正常代谢，导致疾病的发生和发展。
目前的研究证明：AGEs会加速人体的衰老和导致很多慢性退化型疾病的发生，比如糖尿病、动脉粥样硬化、慢性肾病、肝病、神经退行性疾病等疾病。降低AGEs可以起到抗衰老和预防各种慢性退化性疾病的作用。例如，专利CN201910305690.4公开了一种祛黄抗皮肤光老化的组合物及其应用，所述的组合物包括以下组分：人参提取物、灵芝提取物、马齿苋提取物、桑提取物，应用该组合物制备的化妆品，可抵御自然环境尤其日光侵害，同时防止自由基形成、脂质过氧化和AGEs形成。专利CN202110048900.3则公开了一种抑制晚期糖基化终末产物表达和抑制血管硬化的组合物及其制备方法，所述组合物包括：红葡萄浓缩粉、姜黄、雨生红球藻虾青素微囊粉和余甘子粉，还包括接骨木莓提取物、黑莓提取物和黑加仑提取物等，其各组分协同作用，实现了优越的抗糖化和血管软化的效果。
尽管现有技术中已有诸多降低或抑制晚期糖基化终末产物表达的化合物或组合物，然而，具有更好地抗晚期糖基化终产物功效的组合物仍然是令人期待的。
发明内容
针对上述不足，本发明提供了一种抗晚期糖基化终产物功效的组合物及其应用。本发明所述的组合物包括余甘子提取物、橄榄果粉、显齿蛇葡萄提取物中的一种或多种，具有较好的抗晚期糖基化终产物功效，能够明显的抑制AGEs的生成，促进AGEs的断裂，降低AGEs的水平。且本发明所述的组合物制备方法简单，易于工业化生产。
一方面，本发明提供了一种组合物，所述的组合物包括：余甘子提取物、橄榄果粉、显齿蛇葡萄提取物中的一种或多种。
具体地，所述组合物包括余甘子提取物和橄榄果粉，所述的余甘子提取物和橄榄果粉的重量比为1：0.25-1，优选为1：0.5。
具体地，所述的组合物包括余甘子提取物和显齿蛇葡萄提取物，所述的余甘子提取物和显齿蛇葡萄提取物的重量比为1：0.25-1，优选为1：0.5。
具体地，所述的组合物包括橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物，所述的橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物的重量比为1：0.5-2，优选为1：1。
具体地，所述的组合物包括余甘子提取物、橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物，所述的余甘子提取物、橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物的重量比为1：0.25-1：0.25-1，优选为1：0.5：0.5。
进一步具体地，所述的组合物还包括：肉桂提取物和/或黄花落叶松提取物。
进一步具体地，所述的余甘子提取物、橄榄果粉、显齿蛇葡萄提取物、肉桂提取物、黄花落叶松提取物的重量比为1：0.25-1：0.25-1：0.1-0.5：0.01-0.05。
进一步具体地，所述余甘子提取物中植物多酚成分含量≥15％；所述橄榄果粉中羟基酪醇含量≥10％；所述显齿蛇葡萄提取物中二氢杨梅素含量≥40％；所述肉桂提取物中肉桂多酚含量≥20％；所述黄花落叶松提取物中二氢槲皮素含量大于90％。
进一步具体地，所述的余甘子提取物的制备方法包括以下步骤：以叶下珠属植物余甘子(Phyllanthus Emblica)为原料，通过提取、过滤、喷雾干燥而成；其中提取采用溶剂提取物法，所述溶剂为水、乙醇或乙醇水溶液；提取料液比1：10-20；提取物温度40-80℃；提取时间1-4h。
进一步具体地，所述的橄榄果粉的制备方法包括以下步骤：以木犀榄属植物木犀榄(Olea europaea)为原料，经提取、过滤、浓缩、冷冻干燥而成；其中所述木犀榄为其果实在榨油之后的残渣；其中提取采用溶剂提取物法，所述溶剂为水、乙醇或乙醇水溶液；提取料液比1：10-20；提取物温度40-80℃；提取时间1-4h。
进一步具体地，所述的显齿蛇葡萄提取物的制备方法包括以下步骤：以蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata)的茎叶为原料，经过提取、过滤、喷雾干燥而成；其中提取采用溶剂提取物法，所述溶剂为水、乙醇或乙醇水溶液；料液比为1：10-30；提取温度40-100℃，提取时间1-4h。
进一步具体地，所述的肉桂提取物的制备方法包括以下步骤：以樟属植物肉桂(Cinnamomum cassia)为原料，经提取、过滤、喷雾干燥而成；其中提取采用溶剂提取物法，所述溶剂为水、乙醇或乙醇水溶液；料液比为1：10-30；提取温度40-100℃，提取时间1-4h。
进一步具体地，所述的黄花落叶松提取物的制备方法包括以下步骤：以落叶松属植物黄花落叶松(Larix olgensist)的根部为原料经过提取、过滤、浓缩、纯化、冷冻干燥而成；其中提取采用溶剂提取物，所述溶剂为水、乙醇或乙醇水溶液；所述纯化采用醇沉结合重结晶法。
具体地，所述的组合物还可以包括辅料。
进一步具体地，所述的辅料可以选自甜味剂、酸味剂、填充剂、润滑剂、混悬剂、黏合剂或防腐剂中的一种或多种。
进一步具体地，所述的组合物可根据实际需要，制备成外用制剂、口服制剂或注射制剂中的任意一种。
另一方面，本发明提供了上述组合物在制备具有抗晚期糖基化终产物功效的食品、保健品或药物中的应用。
又一方面，本发明提供了一种具有抗晚期糖基化终产物功效的食品、保健品或药物，所述的食品、保健品或药物包括上述组合物。
又一方面，本发明提供了上述组合物在制备抗衰老或预防和/或治疗慢性退化型疾病产品中的应用。
具体地，所述的产品为化妆品、食品、保健品或药物。
具体地，所述的慢性退化型疾病包括但不限于糖尿病、动脉粥样硬化、慢性肾病、肝病、神经退行性疾病等疾病。
又一方面，本发明提供了一种抗衰老或预防和/或治疗慢性退化型疾病产品，所述的产品包括上述组合物。
与现有技术相比，本发明的积极和有益效果在于：
本发明所述的组合物能够通过抑制AGEs的生成，促进AGEs的断裂，降低AGEs的水平；且本发明所述组合物之间相互协同，大大提高了对AGEs的抑制效果。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的阐述，下述实施例不用于限制本发明，仅用于说明本发明。以下实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，下述实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
基础实施例1.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述的组合物包含余甘子提取物200份；
所述余甘子提取物以叶下珠属植物余甘子(Phyllanthus Emblica)的果实为原料，通过提取、过滤、浓缩、喷雾干燥而成；其中提取采用溶剂提取物法，所述溶剂为水，提取料液比1：10；提取物温度40℃；提取时间1h。
基础实施例2.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份；
所述余甘子提取物以叶下珠属植物余甘子(Phyllanthus Emblica)的果实为原料，通过提取、过滤、喷雾干燥而成；其中提取采用溶剂提取物法，所述溶剂为水，提取料液比1：15；提取物温度80℃；提取时间3h。
基础实施例3.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份；
所述余甘子提取物以叶下珠属植物余甘子(Phyllanthus Emblica)的果实为原料，通过提取、过滤、喷雾干燥而成；其中提取采用溶剂提取物法，所述溶剂为30％的乙醇水溶液，提取料液比1：12；提取物温度60℃；提取时间2h。
基础实施例4.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含橄榄果粉100份；
所述橄榄果粉以木犀榄属植物木犀榄Olea europaea的果实榨油之后残渣为原料，经提取、过滤、纯化、冷冻干燥而成；其中提取采用溶剂提取物法，所述溶剂为水；提取料液比1：15；提取物温度60℃；提取时间2h。
基础实施例5.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含橄榄果粉100份；
所述橄榄果粉以木犀榄属植物木犀榄Olea europaea的果实榨油之后残渣为原料，经提取、过滤、浓缩、冷冻干燥而成；其中提取采用溶剂提取物法，所述溶剂为30％乙醇水溶液；提取料液比1：15；提取物温度70℃；提取时间1h。
基础实施例6.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含橄榄果粉100份；
所述橄榄果粉以木犀榄属植物木犀榄Olea europaea的果实榨油之后残渣为原料，经提取、过滤、浓缩、冷冻干燥而成；其中提取采用溶剂提取物法，所述溶剂为60％乙醇水溶液；提取料液比1：10；提取物温度50℃；提取时间3h。
基础实施例7.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含显齿蛇葡萄提取物100份；
所述显齿蛇葡萄提取物以蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata的茎叶为原料，经过提取、过滤、浓缩、喷雾干燥而成；其中提取采用溶剂提取物，所述溶剂为水，提取料液比1：10；提取物温度50℃；提取时间1h。
基础实施例8.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含显齿蛇葡萄提取物100份；
所述显齿蛇葡萄提取物以蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata的茎叶为原料，经过提取、过滤、浓缩、喷雾干燥而成；其中提取采用溶剂提取物，所述溶剂为水，提取料液比1：15；提取物温度80℃；提取时间2h。
基础实施例9.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含显齿蛇葡萄提取物100份；
所述显齿蛇葡萄提取物以蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata的茎叶为原料，经过提取、过滤、浓缩、喷雾干燥而成；其中提取采用溶剂提取物，所述溶剂为水，提取料液比1：20；提取物温度100℃；提取时间3h。
基础实施例10.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含肉桂提取物30份；
所述肉桂提取物制备方法为以樟属植物肉桂(Cinnamomum cassia)为原料，经提取、过滤、喷雾干燥而成；其中提取采用溶剂提取物法，所述溶剂为水、乙醇或乙醇水溶液；料液比为1：10-30；提取温度40-100℃，提取时间1-4h。。
基础实施例11.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含黄花落叶松提取物5份；
所述黄花落叶松提取物制备方法为以人工种植的长白落叶松的根部为原料，经去皮、撕裂处理，进行提取、浓缩、醇沉、上清液浓缩、萃取、再浓缩、结晶、离心分离、冷冻真空干燥、粉碎过筛等工艺制成。
基础实验例1：活性成分检测
基础实施例1-9中各主要活性成分检测如下表1所示。
表1
| 组别 | 控制成分 | 检测结果 | 检测方法 |
| 基础实施例1 | 植物多酚 | 6.72％ | GB/T 8313 |
| 基础实施例2 | 植物多酚 | 15.18％ | GB/T 8313 |
| 基础实施例3 | 植物多酚 | 18.93％ | GB/T 8313 |
| 基础实施例4 | 羟基酪醇 | 6.72％ | 高效液相色谱法(HPLC) |
| 基础实施例5 | 羟基酪醇 | 11.49％ | 高效液相色谱法(HPLC) |
| 基础实施例6 | 羟基酪醇 | 12.74％ | 高效液相色谱法(HPLC) |
| 基础实施例7 | 二氢杨梅素 | 28.52％ | 高效液相色谱法(HPLC) |
| 基础实施例8 | 二氢杨梅素 | 41.76％ | 高效液相色谱法(HPLC) |
| 基础实施例9 | 二氢杨梅素 | 46.35％ | 高效液相色谱法(HPLC) |
| 基础实施例10 | 植物多酚 | 20.3％ | GB/T 8313 |
| 基础实施例11 | 二氢槲皮素 | 90.3％ | 高效液相色谱法(HPLC) |
实施例1.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份和橄榄果粉100份，其中余甘子提取物和橄榄果粉按重量份数比值为1：0.5；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同。
实施例2.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份和橄榄果粉50份，其中余甘子提取物和橄榄果粉按重量份数比值为1：0.25；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同。
实施例3.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份和橄榄果粉200份，其中余甘子提取物和橄榄果粉按重量份数比值为1：1；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同。
对比例1.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份和橄榄果粉32份，其中余甘子提取物和橄榄果粉按重量份数比值为1：0.16；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同。
对比例2.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份和橄榄果粉300份，其中余甘子提取物和橄榄果粉按重量份数比值为1：1.5；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同。
实施例4.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含橄榄果粉100份和显齿蛇葡萄提取物100份，其中橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：1；
其中橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
实施例5.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含橄榄果粉100份和显齿蛇葡萄提取物50份，其中橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：0.5；
其中橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
实施例6.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含橄榄果粉100份和显齿蛇葡萄提取物200份，其中橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：2；
其中橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
对比例3.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含橄榄果粉100份和显齿蛇葡萄提取物30份，其中橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：0.3；
其中橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
对比例4.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含橄榄果粉100份和显齿蛇葡萄提取物300份，其中橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：3；
其中橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
实施例7.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份和显齿蛇葡萄提取物100份，其中余甘子提取物和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：0.5；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
实施例8.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份和显齿蛇葡萄提取物50份，其中余甘子提取物和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：0.25；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
实施例9.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份和显齿蛇葡萄提取物200份，其中余甘子提取物和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：1；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
对比例5.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份和显齿蛇葡萄提取物32份，其中余甘子提取物和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：0.16；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
对比例6.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份和显齿蛇葡萄提取物300份，其中余甘子提取物和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：1.5；
其中橄榄果粉的制备方法与基础实施例3相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
实施例10.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份、橄榄果粉100份和显齿蛇葡萄提取物100份，其中余甘子提取物、橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：0.5：0.5；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
实施例11.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份、橄榄果粉50份和显齿蛇葡萄提取物50份，其中余甘子提取物、橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：0.25：0.25；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
实施例12.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份、橄榄果粉200份和显齿蛇葡萄提取物200份，其中余甘子提取物、橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：1：1；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
对比例7.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份、橄榄果粉32份和显齿蛇葡萄提取物32份，其中余甘子提取物、橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：0.16：0.16；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
对比例8.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物100份、橄榄果粉150份和显齿蛇葡萄提取物150份，其中余甘子提取物、橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物按重量份数比值为1：1.5：1.5；
其中橄榄果粉的制备方法与基础实施例3相同；橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同。
实施例13.一种能有效抑制和分解AGEs的组合物
所述组合物包含余甘子提取物200份、橄榄果粉100份、显齿蛇葡萄提取物100份、肉桂提取物20份，黄花落叶松提取物4份，其中余甘子提取物、橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物、肉桂提取物、黄花落叶松提取物按重量份数比值为1：0.5：0.5：0.1：0.02；
其中余甘子提取物的制备方法与基础实施例3相同；橄榄果粉的制备方法与基础实施例6相同；显齿蛇葡萄提取物的制备方法与基础实施例9相同；肉桂提取物的制备方法与基础实施例10相同；黄花落叶松提取物的制备方法与基础实施例11相同。
实验例1.性能测定
1.AGEs生成抑制率检测
1.1受试物、对照品的配制
配制应在供试品配制室内超净工作台或细胞室内生物安全柜进行操作。
各实施例或对比例受试物配置方法：
1)储存液：待测受试物样品用DMSO或生理盐水配制成浓度为100mg/mL的储存液。无菌管密封，详细填写配制标签，于-20℃保存。使用时提前30min拿出复温，震荡混匀。
2)工作液：取储存液用生理盐水稀释成1mg/mL。无菌管密封，详细填写配制标签，于-20℃保存。使用时提前30min拿出复温，震荡混匀。
3)阳性药工作液配置方法：用天平称取10mg对应阳性药，置10mL容量瓶中，用PBS溶解定容，制得浓度为1mg/mL的阳性药工作液。无菌管密封，详细填写配制标签，放置于2-8℃冰箱暂存，有效期为1个月。使用时提前30min拿出复温，震荡混匀。
1.2检测方法：采用无菌黑色非透明96孔板进行试验检测，反应体系为：每孔加入90μL 10mg/mL BSA(PBS)溶液及加入10μL 1.25M MGO(PBS)溶液，随后，各试验孔根据设计分别加入基础实施例3\6\9、实施例1-13、对比例1-8制备的组合物10μL或生理盐水(阴性对照)10μL，阳性对照组加入10μL/well的1mg/mL阳性药工作液(氨基胍，aladdin，CAS:996-19-0)。反应液充分混匀后，用M5酶标仪分别检测实验开始时荧光值(激发波长Ex＝370nm，发射波长Em＝440nm)。检测结束后，无菌封板膜封板，黑色非透明96孔板置于37℃避光反应24h后相同条件下再次检测荧光值。每个受试物组及对照组均进行6-8个复孔检测，计算每组各孔的荧光值增加量，并计算得到各组的AGEs生成抑制率。
2.AGEs断裂率检测方法
采用无菌黑色非透明96孔板进行AGEs断裂作用筛选试验检测，反应条件为：每孔加入90μL 5mg/mL AGEs(PBS)溶液，随后各试验孔分别加入10μL基础实施例3\6\9、实施例1-13、对比例1-8样品溶液或PBS溶剂(对照组)。反应液充分混匀后，用酶标仪检测实验开始时荧光值(激发波长Ex＝370nm，发射波长Em＝440nm)。检测结束后，无菌封板膜封板，黑色非透明96孔板置于37℃避光反应5天后相同条件下再次检测荧光值。每个受试物组及对照组均进行6-8个复孔检测，根据各组荧光值前后变化反应AGEs减少量，计算受试物对AGEs的降解清除率。
检测结果如下表2所示。
表2
注：与阴性对照组比P＜0.05*；与实施例2、实施例3、对比例1、对比例2比P＜0.05#；与实施例8、实施例9、对比例5、对比例6比P＜0.05@；与实施例11、实施例12、对比例7、对比例8比P＜0.05^；与实施例10相比P＜0.05$
[1]与实施例5、实施例6、对比例3、对比例4比P>0.05
根据上表2可知，本发明所述的组合物能够抑制AGEs的生成，促进AGEs的断裂，从而降低AGEs的水平；且本发明所述组合物之间相互协同，大大提高了对AGEs的抑制效果。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (3)
1.一种组合物在制备抑制晚期糖基化终末产物药物中的应用，其特征在于：所述的组合物由余甘子提取物与橄榄果粉或显齿蛇葡萄提取物中的任意一种组成；所述余甘子提取物与橄榄果粉或显齿蛇葡萄提取物的重量比为1：0.25-1；所述余甘子提取物中植物多酚成分含量≥15％；所述橄榄果粉中羟基酪醇含量≥10％；所述显齿蛇葡萄提取物中二氢杨梅素含量≥40％；所述余甘子提取物是以叶下珠属植物余甘子Phyllanthus Emblica为原料，以水、乙醇或乙醇水溶液为溶剂，在料液比1：10-20，温度40-80℃，时间1-4h的条件下进行提取，进一步过滤、喷雾干燥而成；所述橄榄果粉是以木犀榄属植物木犀榄Olea europaea的果实在榨油之后的残渣为原料，以水、乙醇或乙醇水溶液为溶剂，在料液比1：10-20，温度40-80℃，时间1-4h的条件下进行提取，进一步过滤、浓缩、冷冻干燥而成；所述显齿蛇葡萄提取物是以蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata的茎叶为原料，以水、乙醇或乙醇水溶液为溶剂，在料液比1：10-30，温度40-100℃，时间1-4h的条件下进行提取，进一步过滤、喷雾干燥而成。
2.一种组合物在制备抑制晚期糖基化终末产物药物中的应用，其特征在于，所述组合物由余甘子提取物、橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物组成，所述余甘子提取物、橄榄果粉和显齿蛇葡萄提取物的重量比为1：0.25-1：0.25-1；所述余甘子提取物中植物多酚成分含量≥15％；所述橄榄果粉中羟基酪醇含量≥10％；所述显齿蛇葡萄提取物中二氢杨梅素含量≥40％；所述余甘子提取物是以叶下珠属植物余甘子Phyllanthus Emblica为原料，以水、乙醇或乙醇水溶液为溶剂，在料液比1：10-20，温度40-80℃，时间1-4h的条件下进行提取，进一步过滤、喷雾干燥而成；所述橄榄果粉是以木犀榄属植物木犀榄Olea europaea的果实在榨油之后的残渣为原料，以水、乙醇或乙醇水溶液为溶剂，在料液比1：10-20，温度40-80℃，时间1-4h的条件下进行提取，进一步过滤、浓缩、冷冻干燥而成；所述显齿蛇葡萄提取物是以蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata的茎叶为原料，以水、乙醇或乙醇水溶液为溶剂，在料液比1：10-30，温度40-100℃，时间1-4h的条件下进行提取，进一步过滤、喷雾干燥而成。
3.一种组合物在制备抑制晚期糖基化终末产物药物中的应用，其特征在于，所述组合物由余甘子提取物、橄榄果粉、显齿蛇葡萄提取物、肉桂提取物和黄花落叶松提取物组成；所述的余甘子提取物、橄榄果粉、显齿蛇葡萄提取物、肉桂提取物、黄花落叶松提取物的重量比为1：0.5：0.5：0.1：0.02；所述余甘子提取物中植物多酚成分含量≥15％；所述橄榄果粉中羟基酪醇含量≥10％；所述显齿蛇葡萄提取物中二氢杨梅素含量≥40％；所述肉桂提取物中肉桂多酚含量≥20％；所述黄花落叶松提取物中二氢槲皮素含量大于90％；所述余甘子提取物是以叶下珠属植物余甘子Phyllanthus Emblica为原料，以水、乙醇或乙醇水溶液为溶剂，在料液比1：10-20，温度40-80℃，时间1-4h的条件下进行提取，进一步过滤、喷雾干燥而成；所述橄榄果粉是以木犀榄属植物木犀榄Olea europaea的果实在榨油之后的残渣为原料，以水、乙醇或乙醇水溶液为溶剂，在料液比1：10-20，温度40-80℃，时间1-4h的条件下进行提取，进一步过滤、浓缩、冷冻干燥而成；所述显齿蛇葡萄提取物是以蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata的茎叶为原料，以水、乙醇或乙醇水溶液为溶剂，在料液比1：10-30，温度40-100℃，时间1-4h的条件下进行提取，进一步过滤、喷雾干燥而成；所述肉桂提取物是以樟属植物肉桂Cinnamomum cassia为原料，以水、乙醇或乙醇水溶液为溶剂，在取料液比1：10-30，温度40-100℃，时间1-4h的条件下进行提取，进一步过滤、喷雾干燥而成；所述黄花落叶松提取物是以落叶松属植物黄花落叶松Larix olgensist的根部为原料，以水、乙醇或乙醇水溶液为溶剂进行提取，然后过滤、浓缩，并采用醇沉结合重结晶法纯化，进一步冷冻干燥而成。
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