CN114344292B - 苯并咪唑类化合物的新应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及化学药物新应用技术领域，具体而言，涉及苯并咪唑类化合物的新应用。苯并咪唑类化合物在制备抗菌药物中的应用，其结构式如下所示：

苯并咪唑类化合物能够杀灭MRSA浮游菌，且有效抑制和根除MRSA生物膜的形成，并对MRSA介导的疾病有良好的治疗效果。

Description

苯并咪唑类化合物的新应用

技术领域

本发明涉及化学药物新应用技术领域，具体而言，涉及苯并咪唑类化合物的新应用。

背景技术

金黄色葡萄球菌是一种常见的细菌病原体，可造成皮肤和软组织感染(SSTI)、肺炎、化脓性关节炎、心内膜炎、骨髓炎和败血症等疾病。临床过度使用甲氧西林导致具有多种毒力因子的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)出现。已发现，MRSA对氨基糖苷类、β-内酰胺类等抗生素具高度耐药性。生物膜(biofilm)是包裹在细菌自身及其分泌的胞外聚合物组成的大量聚集膜样物细菌群落。MRSA biofilm的形成是MRSA对多种传统抗生素耐药的主要原因之一，其让MRSA的感染威胁持续增大。万古霉素是目前公认治疗MRSA引起的重症感染首选抗菌药物。研究表明，万古霉素在最高的测试浓度(MBEC>2000μM)也无法根除MRSAbiofilm。因万古霉素中间体金黄色葡萄球菌、耐万古霉素金黄色葡萄球菌的出现以及万古霉素具有肾毒性、耳毒性等不良反应，临床上要求慎用、少用万古霉素。已知生物膜根除剂包括膜干扰物季铵盐阳离子(QAC-10)、羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)等，但QAC-10有明显的真核细胞毒性和溶血活性。解决biofilm相关的持续性MRSA感染问题迫在眉睫而能有效抑制MRSA、根除MRSA biofilm且毒副作用低的化合物很少，开发这类对细菌生物膜起靶向持续作用的新型抗菌药物具有重要意义。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供苯并咪唑类化合物的新应用。本发明实施例提供的苯并咪唑类化合物对MRSA biofilm的根除效果，能够杀灭MRSA浮游菌，且有效抑制和根除MRSA生物膜的形成，并对MRSA介导的疾病有良好的治疗效果。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明提供一种苯并咪唑类化合物在制备抗菌药物中的应用，所述苯并咪唑类化合物的结构式如下所示：

在可选的实施方式中，所述抗菌药物针对的细菌为耐药菌株。

在可选的实施方式中，所述抗菌药物针对的细菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。

在可选的实施方式中，所述抗菌药物针对的细菌为MRSA浮游菌。

在可选的实施方式中，所述抗菌药物为能清除或抑制MRSA生物膜的药物。

第二方面，本发明提供一种苯并咪唑类化合物在制备治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌介导的疾病的药物中的应用，所述苯并咪唑类化合物的结构式如下所示：

在可选的实施方式中，所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌介导的所述疾病包括所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌导致的感染。

在可选的实施方式中，所述药物包括杀灭MRSA浮游菌的药物。

在可选的实施方式中，所述药物包括清除或抑制MRSA生物膜的药物。

在可选的实施方式中，所述药物包括降低感染部位载菌量的药物。

本发明具有以下有益效果：本发明实施例提供的苯并咪唑类化合物对MRSAbiofilm的根除效果，能够杀灭MRSA浮游菌，继而可以抑制甚至杀灭耐药菌株MRSA，并对MRSA介导的疾病有良好的治疗效果。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为本发明实验例1提供的凝胶成像结果图；

图2为本发明实验例2提供的MTT法的检测结果图；

图3为本发明实验例2提供的时间杀伤动力学分析的检测结果图；

图4为本发明实验例3提供的平板涂布法的检测结果图；

图5为本发明实验例3提供的BCA蛋白定量分析的检测结果图；

图6为本发明实验例3提供的LIVE\DEAD荧光染色法的检测结果图；

图7为本发明实验例4提供的结晶紫定量法的检测结果图；

图8为本发明实验例4提供的场发射扫描电镜检测的检测结果图；

图9为本发明实验例5提供的细胞毒性实验的检测结果图；

图10为本发明实验例5提供的溶血实验的检测结果图；

图11-图12为本发明实验例6提供的体内抗菌活性研究的检测结果图。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。

实施例

本实施例提供一种苯并咪唑类化合物，具体为2-(3,5-双三氟甲基苯基)-4-硝基-6-三氟甲基苯并咪唑-1-醇(记为SH-99)的合成方法，

参考已报道的合成方法Angew.Chem.Int.Ed.2018,57,9645–9649(SupportingInformation Page 9)，具体地：

步骤：(1)2-chloro-1,3-dinitro-5-(trifluoromethyl)benzene(1.08g,4.00mmol,1.00equiv)和(3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl)methanamine(1.16g,4.80mmol,1.20equiv)之后加入DMF(40.0mL,0.100M)。搅拌反应混合物10min后，加入碳酸钾(0.330g,2.40mmol,0.600equiv)。将得到的混合物在50℃加热2小时，然后冷却到室温，并用100mL 1M HCl水溶液淬火。

(2)将混合物转移到500mL分离漏斗中，用乙酸乙酯(3x 100mL)萃取。有机层依次用1M HCl水溶液(2x 50mL)、水(2x 50mL)和盐水(2x 50mL)清洗，再用硫酸镁干燥，过滤，真空浓缩得到固体。

(3)在氮气保护下用甲醇(30mL)溶解上一步得到的固体，加入新鲜配制的0.8M甲醇钠溶液(10mL,2.00equiv)。将反应混合物在氮气保护下室温搅拌2h后倒入100mL 1M HCl水溶液中。

(4)将水层转移到500mL的分离漏斗中，用乙酸乙酯(3x 100mL)萃取。组合的有机层依次用1M的HCl水溶液(3x 50mL)、水(3x 50mL)和盐水(3x 50mL)清洗。

(5)收集有机层，用硫酸镁干燥，过滤。滤液真空浓缩，固体残渣用100mL二氯甲烷超声，过滤收集固体，得到化合物为白色固体(1.30g,2.84mmol,收率71％)。其核磁氢谱数据如下：¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO,25℃),δ13.52(br,1H),8.86(s,2H),8.43(s,2H),8.38(s,1H)；¹³C NMR(175MHz,(CD₃)₂SO,25℃),δ149.4,138.3,136.1,132.9,131.0(q,J＝33.5Hz),129.5,128.9,124.9,123.5(q,J＝271.4Hz),123.1(q,J＝33.8Hz),123.0(q,J＝273.0Hz),116.3(d,J＝3.5Hz),113.8(d,J＝3.7Hz)；¹⁹F NMR(376MHz,(CD₃)₂SO,25℃)δ-59.5(s,3F),-61.5(s,6F).HRMS(ESI):Calcd for:C₁₆H₇F₉N₃O₃ ⁺([M+H]⁺)460.0344,found:460.0354.

参照上述合成方法合成下述化合物：

SH-98参考已报道的合成方法:Angew.Chem.Int.Ed.2018,57,9645–9649(Supporting Information Page 11)

SH-100参考已报道的合成方法:Angew.Chem.Int.Ed.2018,57,13795-13799(Supporting Information Page 7)

SH-101参考已报道的合成方法:Angew.Chem.Int.Ed.2018,57,13795-13799(Supporting Information Page 8)

实验例

试剂和仪器

1、供试菌种、试剂

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus strain ATCC 43300,MRSA)为中科院昆明植物所赠；COS-7细胞购于中国典型培养物保藏中心(武汉大学保藏中心)；胰酪大豆胨液体培养基(HB4114-19，青岛高科技工业园海博生物技术)；Hueller-Hinton Agar(HB6232，青岛高科技工业园海博生物技术)；万古霉素溶液(HB0102-2a，青岛高科技工业园海博生物技术)；活细菌/死细菌染色试剂(B13-41266-500T，上海贝博生物科技)；细菌基因组DNA提取试剂盒(离心柱型，DP302-02，天根生化科技)；Easy-LoadTM PCRMaster Mix(Blue，2X，D7251，碧云天生物技术)；BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型，NO.P0010，碧云天生物技术)；Phosphate Buffered Saline(1X，SH30256.01，HyClone)；头孢西丁(35607-66-0，上海源叶生物)；甲氧西林(S31130-25mg，Acmec)；兔全血(JS16086，河南巨石生物)。

2.仪器

凝胶成像系统(BioDoc-It220，BioDoc-It)；PCR仪(BIO-RAD T100型，BIO-RAD)；多功能酶标仪(SPARK 10M，TECAN)；激光共聚焦显微镜(Leica TCS sp8，德国莱卡)；场发射扫描电镜(SU8010，日立)。

实验例1

细菌培养与细菌甲氧西林耐药基因mec A的检测

取对数生长期细菌5mL，10000rpm离心1min，用细菌基因组DNA提取试剂盒提取细菌总DNA。

针对MRSA耐药基因mecA，选用引物1，利用Primer 5.0软件设计引物2，引物序列如表1所示。使用PCR MIX试剂盒进行PCR扩增，反应条件：94℃-95℃预变性3min，94℃变性30s，56℃-65℃退火30s，72℃延伸1min，进行35个循环，最后72℃延伸10min。PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶(10g/L)电泳，在凝胶成像分析系统进行分析。

表1 PCR引物

结果参见图1，根据图1可知，两对引物均成功扩增出产物，验证细菌具有甲氧西林耐药性。

需要说明的是，本发明实验例提供的引物为现有公知的引物，不用再提供相关引物的基因遗传信息。

实验例2

化合物对MRSA浮游菌的抑菌作用

(1)化合物的抑菌浓度(MIC)测定

取对数生长期MRSA菌液按照稀释倍比用TSB稀释至5x10⁵ CFU/mL，96孔板中每孔加100μL菌液。实验组加入两倍系列稀释的化合物溶液100μL(PBS稀释)，阴性对照组加入100μL含菌液的TSB和100μL不含化合物溶液的PBS，空白组加入100μL不含菌液的TSB和100μL不含化合物溶液的PBS，反应总体积均为200μL，于37℃静置培养24h，使用多功能酶标仪检测OD₆₀₀值，计算抑制率为100％时所对应的浓度即为化合物的MIC值。

(2)最低杀菌浓度(MBC)和最低清除生物膜浓度(MBEC)的测定

CBD装置中每孔接种125μL稀释后的对数期菌液(5x10⁵CFU/mL)，在37℃下静置培养24h建立细菌生物膜。取下CBD装置盖子，用0.9％NaCl溶液清洗2-3遍，除去杂菌。将盖子转移到另一个含2倍系列稀释的化合物溶液(TSB稀释)的96孔板中，板上每个孔中含化合物的培养基的总体积为150μL，37℃培养24h，测OD₆₀₀，计算MBEC。后取20μL菌液加入含有180μLTSB培养基的新96孔板中，37℃培养24h，测OD₆₀₀，计算MBC。

上述(1)和(2)中采用的化合物是SH-98、SH-99、SH-100、SH-101和万古霉素。

上述(1)和(2)的检测结果如下表：

根据上表可以看出，SH-99对MRSA的MIC是4μg/mL，MBC是8μg/mL，MBEC是8μg/mL，而改变其结构后，例如SH-98、SH-100和SH-101MIC大于50μg/mL，MBC和MBEC无法测出，说明上述三者不能杀菌，说明本发明实施例特定提供的SH-99具有良好的抗菌活性。

(3)MTT法

取对数生长期菌液按照稀释倍比，用TSB培养基稀释至5x10⁵ CFU/mL，96孔板中每孔加100μL菌液，加入100μL PBS稀释浓度为0.5，1，2，4，8μg/mL的化合物溶液，阴性对照组加入100μL含菌液的TSB和100μL PBS(不含化合物溶液的)，空白组加入100μL TSB(不含菌液)和100μL PBS(不含化合物溶液)，于37℃静置培养24h，后去除培养液，加入100μL MTT(0.5mg/mL)，37℃避光孵育4h，弃去上层液，加入150μL DMSO继续孵育5min，检测570nm处的吸光度值。细菌存活率％＝(实验组的OD₅₇₀)/(阴性对照组的OD₅₇₀)*100％。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

上述(3)中采用的化合物是SH-99和万古霉素。

结果参见图2，根据图2可知，与阴性对照组比较，在MIC水平(4μg/mL)，存活率下降了88％，实验结果表明，SH-99对MRSA浮游菌有明显抑菌作用。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

(4)时间杀伤动力学分析

取对数生长期菌液按照稀释倍比用TSB稀释至5x10⁵ CFU/mL，96孔板中每孔加100μL菌液，加入100μL不同浓度的化合物溶液(PBS稀释)，100μL万古霉素(2μg/mL)，阴性对照组加入100μL含菌液的TSB和100μL PBS(不含化合物溶液的)共孵育24h，选取2，4，6，12，18，24h监测细菌的生长，使用多功能酶标仪检测OD₆₀₀值。

上述(4)中采用的化合物是SH-99和万古霉素。

检测结果参见图3，根据图3可知，与阴性对照组比较，在MIC水平(4μg/mL)，SH-99组吸光度值约为0.05，且不随培养时间的增加而增大；实验结果表明，SH-99对MRSA浮游菌有明显抑菌作用，效果与万古霉素组相当。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

实验例3

化合物对MRSA浮游菌的杀菌作用

(1)平板涂布法

配制含有3％TSB、2％琼脂的灭菌TSA固体培养基浇注平板，取96孔板中每孔加100μL用TSB培养基稀释的对数期菌液(5x10⁵CFU/mL)，加入100μL PBS稀释的浓度为0，0.5，1，2，4，8μg/mL化合物溶液于平板，均匀涂布，密封倒置于37℃培养24h后，对平板上菌落进行计数。其中，采用的化合物是SH-99和万古霉素。

检测结果参见图4，根据图4可知，在MBC水平(8μg/mL)未观测到可见菌落的生长，且菌落数量呈现浓度依赖性，验证了CBD装置所测MBC，同时也反映出对于MRSA浮游细菌，阳性药万古霉素的杀菌作用优于SH-99。

(2)BCA蛋白定量

取六孔板，每孔加1mL用TSB培养基稀释的对数期菌液(5x10⁵CFU/mL)以及1mL PBS稀释的SH-99(1，2，4μg/mL)作实验组，阴性对照组每孔加1mL含菌液的TSB和1mL不含SH-99溶液的PBS，空白组每孔加1mL不含菌液的TSB和1mL不含SH-99的PBS，37℃共处理4h。5000rpm离心3min，收集上层清液，根据BCA蛋白检测试剂盒检测细菌胞外蛋白质。

检测结果参见图5。测定释放到上清液中的蛋白质含量是评价细菌细胞膜完整性的重要指标之一。当细菌细胞膜被破坏以后，胞内核酸和蛋白质释放到无细胞上清液中，而蛋白质是细菌生命活动的必要成分。故测定经SH-99处理后上清液中蛋白的含量，以此验证细胞膜完整性是否被破坏。根据图5可知，与阴性对照组比较，SH-99能使浮游MRSA的细胞膜完整性且呈现浓度依赖性。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

(3)LIVE\DEAD荧光染色法

取六孔板，每孔加1mL用TSB培养基稀释的对数期菌液(5x10⁵CFU/mL)以及1mL SH-99(4，8μg/mL)，阴性对照组为含菌液的TSB和1mL不含SH-99的PBS，37℃共培养4h。10000rpm离心3min，0.85％NaCl溶液清洗3遍，后分别与N01(绿色荧光染料，可染活细菌，Ex/Em＝488nm/525nm)和PI(红色荧光染料，可染死细菌,Ex/Em＝540nm/620nm)的NaCl溶液共培养进行染色，每种染料室温孵育30min，用0.85％NaCl溶液清洗1次。加入适量的0.85％NaCl溶液重悬细菌，取5μL菌悬液滴至载玻片上，盖上载玻片，用激光共聚焦显微镜观察。

检测结果参见图6，根据图6可知，在MIC水平(4μg/mL)表现出微弱绿色信号(存活细菌信号)和强烈红色荧光信号(死亡细菌信号)，随着SH-99浓度增加，绿色信号明显减弱而红色荧光强度明显增强。实验结果进一步验证了SH-99对MRSA浮游菌具有良好杀菌活性。

实验例4

化合物对MRSA biofilm的抑制与清除作用

(1)结晶紫定量法

取96孔板，每孔加入200μL对数期菌液(5x10⁵ CFU/mL)，静置培养48h，弃旧培养基，在每孔中加入无菌PBS清洗去除浮游细胞和其他内容物，实验组加入100μL TSB和100μL(1，2，4，8μg/mL)化合物。阴性对照组加入100μL含菌液TSB和100μL不含化合物的PBS，空白组加入100μL不含菌液的TSB和100μL不含化合物溶液的PBS。37℃下孵育24h，弃去培养基，用无菌PBS清洗2-3次，保留孔底生物膜，风干，每孔加150μL甲醇固定30min，弃去甲醇，用200μL1％结晶紫溶液染色15min，弃去染色液，用无菌PBS清洗3次，加150μL 33％冰醋酸处理15-30min，测定OD₅₉₅。其中，采用的化合物是SH-99和万古霉素。

检测结果参见图7，根据图7可知，与阴性对照组比较，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，MRSA biofilm量随SH-99浓度增加而降低，且同等浓度下，SH-99根除MRSA biofilm效果更优于万古霉素，也证实了CBD装置的MBEC测定结果。

(2)场发射扫描电子显微镜检测

场发射扫描电子显微镜可在纳米尺度上观察生物样品如组织、细胞、微生物以及生物大分子等，获得忠实原貌的样品表面超微形貌结构信息。取盖玻片置于6孔板中，37℃培养48h形成生物膜。SH-99溶液(设置阴性对照组、MIC组和MBC组)，37℃培养4h后用PBS洗涤3次，4℃下在2.5％戊二醛中固定6h。在分级乙醇(25％、50％、75％、90％、95％和100％)中逐渐脱水，每次脱水处理15min。样品随后被冻干处理，镀金，扫描电子显微镜扫描检测细菌形貌。

检测结果参见图8，根据图8可知，不同浓度的SH-99处理后MRSA细菌显示出明显的形态变化。阴性对照组中的MRSA呈球形，边界清晰，且聚团堆积；SH-99处理后的实验组MRSA较分散，随着SH-99浓度增加，更多MRSA细胞包内物质释放，MRSA出现皱褶和萎缩，甚至原貌完全消失。表明SH-99对MRSA细菌生物膜有破坏作用，也进一步验证SH-99对MRSA biofilm有显著抑制与清除效果。

实验例5

化合物对哺乳类细胞活力的影响

(1)细胞毒性实验

COS-7细胞用使用添加10％胎牛血清的DMEM液体培养基培养于37℃，含5％CO₂培养箱中，每组设置3个复孔，将不同浓度SH-99溶液加入COS-7细胞中。阴性对照组加入含菌液的TSB和不含化合物溶液的PBS，空白组加入不含菌液的TSB和不含化合物溶液的PBS。24h后去除培养液，加入100μL MTT(0.5mg/mL)，37℃避光孵育4h，弃去上层液，加入150μL DMSO继续孵育15-20min，检测572nm处的吸光度值。细胞存活率％＝(实验组的OD₅₇₂-空白组的OD₅₇₂)/(阴性对照组的OD₅₇₂-空白组的OD₅₇₂)*100％。

检测结果参见图9，根据图9可知，SH-99在12.5倍MIC水平(50μg/mL)未表现出明显细胞毒性。故MIC、MBC、MBEC浓度的SH-99对COS-7细胞的细胞毒性极低。

(2)溶血实验

新鲜兔血用PBS稀释至8％后加入96孔板中，每孔100μL，并加入等体积的不同浓度SH-99，以PBS作为阴性对照，去离子水为阳性对照，孵育2h，吸出转移至离心管，3000rpm离心5min，吸取100μL加入至新的96孔板中在572nm处测定其吸光度值。溶血率计算公式：溶血率％＝(化合物OD₅₇₂-PBS OD₅₇₂)/(去离子水OD₅₇₂-PBS OD₅₇₂)*100％。

检测结果参见图10，根据图10可知，SH-99最高浓度(100μg/mL)的溶血率为5％，而其他浓度的溶血率均低于2％，表明MIC浓度的SH-99对兔血细胞没有溶血作用，MBC、MBEC浓度的SH-99对兔血细胞的溶血作用极小。

实验例6

体内抗菌活性研究

30只雌性BALB/c小鼠(5周龄)购自辽宁长生生物科技有限公司(SCXK 2020-0001证；辽宁、中国)。所有小鼠均保持在标准的特定无菌条件下，光照/黑暗循环12小时，持续1周，并可自由获得无菌食品和水。环磷酰胺预处理(细菌感染前96h和24h分别为150mg/kg和100mg/kg致小鼠中性粒细胞减少。将小鼠随机分为5组：空白组，模型组，阳性对照组，低剂量治疗组和高剂量治疗组。除空白组以外，其他组均在小鼠右侧注入MRSA(10⁹ CFU/mL)进行皮下感染36小时。通过静脉注射给药分别给予PBS(空白组，无菌液感染)，PBS(模型组)、万古霉素(10mg/kg，阳性对照组)、SH-99(10mg/kg，低剂量治疗组)、SH-99(20mg/kg，高剂量治疗组)各100μL。每24h称重并进行临床评分，临床评分按以下量表评定:0分，无疾病征象；1.折边的皮毛；2.非常轻微的后肢无力；3.轻度后肢无力；4.中度后肢无力；5.严重后肢无力/拖拽；6.后肢功能完全丧失；7.奄奄一息；8.死亡。治疗7天后将小鼠处死。取出皮下感染部位，置于生理盐水中匀浆。连续稀释后，在LB琼脂培养皿孵育24h，计数琼脂上菌落形成单位的数量。收集感染组织和主要器官(心、肝、脾、肺、肾)，用10％福尔马林溶液固定。石蜡包埋固定组织，切片，苏木精伊红染色，进行组织病理学评价。

检测结果参见图11和图12，其中，图11中A为MRSA感染小鼠模型构建及SH-99治疗评价示意图；图11中B为PBS、万古霉素、SH-99治疗7天前后感染小鼠的典型照片；图11中C为不同处理下感染组织的H&E染色图像；图11中D为各组小鼠治疗期间体重率曲线；图11中E为治疗期间小鼠临床评分。图12中A为小鼠主要器官H&E染色对比图；图12中B为MRSA引起小鼠后肢感染组织载菌量LB琼脂板图；图12中C为载菌量对数图。

根据图11和12可知，在治疗过程中，所有小鼠按体重和疾病体征进行平行评估。在感染早期，小鼠体重明显下降。治疗后，SH-99处理组比模型组能更有效恢复小鼠减轻的体重(图11中D)。模型组小鼠症状迅速恶化，后肢活动功能下降，小鼠右腿表现出拖沓无力。表明SH-99有效抑制细菌扩散和后肢无力(图11中E)。治疗前后小鼠照片见图11中B，可见，SH-99组治疗后感染部位愈合趋势明显，而模型组组织感染面积有扩大趋势，证明化合物能够改善由细菌感染引起的皮肤脓肿溃破。此外，通过组织学分析评估体内治疗效果(图11中C)。正常健康组皮肤组织表皮层完整、排列紧密，真皮层富含胶原纤维，有毛囊、皮脂腺等器官。相反，模型组皮肤组织大面积受损，甚至侵润皮下肌层，并伴有大量炎症细胞浸润。表明SH-99治疗组对由细菌感染引发的一系列炎症反应均能明显抑制，皮肤组织结构趋于正常。小鼠的心、肝、脾、肺、肾也无明显病变(图12中A)。再者，化合物SH-99能显著减少感染部位载菌量(图12中B和C)。综上，SH-99能有效治疗小鼠后肢皮肤由MRSA感染引起的脓肿，具有良好的体内抗菌活性、较高的生物相容性，可能用于治疗MRSA引起的感染。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种苯并咪唑类化合物在制备抗菌药物中的应用，其特征在于，所述苯并咪唑类化合物的结构式如下所示：

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗菌药物针对的细菌为耐药菌株。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗菌药物针对的细菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗菌药物针对的细菌为MRSA浮游菌。

5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述抗菌药物为能清除或抑制MRSA生物膜的药物。

6.一种苯并咪唑类化合物在制备治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌介导的疾病的药物中的应用，其特征在于，所述苯并咪唑类化合物的结构式如下所示：

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌介导的所述疾病包括所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌导致的感染。

8.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述药物包括杀灭MRSA浮游菌的药物。

9.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述药物包括清除或抑制MRSA生物膜的药物。

10.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述药物包括降低感染部位载菌量的药物。

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