CN114306287A - 一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法，本发明属生物技术应用领域。公开了一种用于难愈合创伤治疗的生物膜，此生物修复膜作为一种外用生物制剂，可以覆盖创面或创口，也可以填充瘘道或瘘管。采用生物膜主要成分冷沉淀凝血因子中添加促进组织再生和增长的如细胞因子、血小板、间充质干细胞、羧甲基壳聚糖等生物活性物质，促进难治性创口的愈合，满足现在临床医学的需求。此外，其具有极强地促进各种表皮组织生长作用,还能促进正常表皮细胞的新陈代谢,同时具有修复损伤、抗瘢痕生成、消除炎症和抗菌作用；同时本发明完全使用血液制剂(成分)、医用生物制剂和已经证明可以用于人体的生物提取物来进行制备的，其是安全无毒的安全产品。
Description
技术领域
本发明属于生物技术应用领域，具体涉及一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法。
背景技术
外伤、烧伤、糖尿病足、血栓性静脉炎、闭塞性脉管炎等疾病常形成大片创面、难治性溃疡、组织缺损、瘘管或窦道。很多糖尿病足、血栓性静脉炎、闭塞性脉管炎引起的皮肤溃疡患者不得不截指、截肢。患者如果创面或溃疡继发感染，可以引起患者休克、死亡。上述疾病不但给患者带来难以忍受的痛苦和死亡威胁，也给患者的家庭和社会带来巨大的经济负担。以糖尿病足为例，患者每天花费超过千元，一次住院总平均费用超过2万元。如何促进创面的愈合，如何缩短创面的愈合时间，如何提高创面的愈合质量是目前临床亟待解决的难题。难以愈合的创面、难治性溃疡及组织缺损、瘘管或窦道一般采用清创、创面局部用药、创面局部负压治疗、创面皮肤移植、高压氧治疗等治疗方法，但是治疗效果不理想。血小板凝胶治疗来源患者，不容易接受，而且操作复杂。
目前，未检索到生物膜用于创伤治疗的专利和论文的报告。目前创伤一般采用清创、创面局部用药、创面局部负压治疗、创面皮肤移植、高压氧治疗等治疗方法，但这些方法都存在着严重的缺陷，同时其成本较高。
因此，针对上述提到的问题我们发明了一种用于难愈合创伤治疗的生物膜，此生物修复膜作为一种外用生物制剂，可以覆盖创面或创口，也可以填充瘘道或瘘管。生物膜成分中添加促进组织增生和增长的如冷沉淀凝血因子、细胞因子、间充质干细胞、血小板等生物活性物质，促进难治性创口的愈合，满足现在临床医学的需求。
发明内容
为了达到背景技术中的目的，本发明提出的一种用于难愈合创伤治疗的生物膜；本发明通过利用生物膜作为一种外用生物制剂，可以通过覆盖创面或创口，也可以填充瘘道或瘘管。在生物膜主要成分冷沉淀凝血因子中添加促进组织再生和增长的如细胞因子、血小板、间充质干细胞、羧甲基壳聚糖等生物活性物质，可以促进难治性创口的愈合，达到良好的治疗效果。
本发明通过如下的技术方案实现的：
一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法，其特征在于，所述的用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法为：在35-40℃条件下，水浴解冻滤白冷沉淀凝血因子，解冻时间在8-12min，然后加入外用重组人表皮生长因子、血小板、间充质干细胞和羧甲基壳聚糖，并混合均匀；最后，将平衡至室温的凝血酶加入上述含有外用重组人表皮生长因子、血小板、间充质干细胞和羧甲基壳聚糖的冷沉淀凝血因子中，其中冷沉淀凝血因子和凝血酶按照20-40:1的体积比进行加入；加入方法采用多点式加入凝血酶，边加边轻轻转动培养皿使其混合混匀，室温静置5-10min后，得到就是创伤生物修复膜。
其中，所述冷沉淀凝血因子的制备方法如下：
(1)从-18℃以下冰箱中取出新鲜冰冻血浆放置4±2℃冰箱中过夜融化或在1-6℃水浴装置中融化，当血浆基本融化后会有沉淀析出；取出血浆，在4±2℃的环境下离心分离；离心参数为：离心力为2800-30000g，时间为20-25min；
(2)离心结束后，从离心机中取出离心杯，从离心杯中取出血袋，在此过程中避免振动；
(3)将血袋置于分离架，将大部分上层血浆移至空袋，在-18℃以下冷冻制成去冷沉淀冰冻血浆。将留下的40～50ml血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子，在-18℃以下冷冻保存备用，得到的就是冷沉淀凝血因子；
所述的冷沉淀凝血因子为，血液制剂，其含有丰富的凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原，一个单位的冷沉淀凝血因子所含Ⅷ因子一般在40IU以上，纤维蛋白原含量75mg以上；冷沉淀凝血因子具有止凝血作用，纤维蛋白原在凝血酶的作用下形成纤维蛋白，纤维蛋白除了止凝血作用外，还具有介导血小板和内皮细胞扩散，组织成纤维细胞增殖，毛细管形成和血管生成，从而起到促进组织血运重建，伤口愈合和组织修复的作用；冷沉淀凝血因子也是生物修复膜的主要基础物质，可以不加其他活性成分单独使用就有治疗作用。
其中，所述的外用重组人表皮生长因子为，医用生物制剂，其加入量在终溶液中，浓度在4000-5000IU/ml，其具有极强地促进各种表皮组织生长作用,在医学上己用于烧烫伤、溃疡、各类创伤以及角膜损伤等的治疗，同时，还能促进正常表皮细胞的新陈代谢,添加到美容护肤品中可以达到美白、抗皱、延缓衰老的作用。
其中，所述的羧甲基壳聚糖为生物提取物壳聚糖的衍生物，其加入量为总质量的0.5-1％，其具有生物降解性、细胞亲和性和生物效应等许多独特的性质，尤其是含有游离氨基的壳聚糖，是天然多糖中唯一的碱性多糖，具有修复创口、促进创面愈合、止血、抑制瘢痕增生、镇痛、抗菌和大分子支架作用。
其中，所述的凝血酶为，医用生物制剂，其配制方法为，用10％葡萄糖酸钙注射液溶解凝血酶冻干粉，终浓度为1U/μl。
其中，所述的血小板为，血液成分，其加入量为1×108-1×109/ml，其具有止凝血作用外，还含有大量细胞因子和生物活性物质，具有促进组织细胞生长、修复损伤、抗瘢痕生成、消除炎症和抗菌作用。
其中，所述的间充质干细胞为，脐带来源的间充质干细胞，其加入量为5×104-5×105/ml，其对损伤的组织细胞具有修复和再生功能。
有益效益
(1)本发明制备的用于难愈合创伤治疗的生物膜，此生物修复膜作为一种治疗外用生物制剂，可以覆盖创面或创口，也可以填充瘘道或瘘管，采用生物膜成分中添加促进组织增生和增长的如冷沉淀凝血因子、细胞因子、血小板、间充质干细胞等生物活性物质，促进难治性创口的愈合，满足现在临床医学的需求。
(2)本发明制备的用于难愈合创伤治疗的生物膜，具有极强地促进各种表皮组织生长和促进创口愈合作用,还能促进正常表皮细胞的新陈代谢,同时具有修复损伤、抗瘢痕生成、消除炎症和抗菌作用。
(3)本发明完全使用血液制剂(成分)、医用生物制剂和已经证明可以用于人体的生物提取物来进行制备，其是安全无毒的安全产品。
附图说明
图1实验组与对照组疗效比较
图2实验组和对照组治疗创伤愈合时间比较
图3用于难愈合创伤治疗的生物膜产品图。(本发明可根据创口的大小和深度，制成直径和厚度不同的生物修复膜)
图4直径大小不同的生物修复膜。
图5不同厚度的生物修复膜。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，下面将结合实验数据，对本发明的优选实施例进行详细的说明，以方便技术人员理解。
实施例1
一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法，其特征在于，所述的用于难愈合创伤治疗的生物膜的备方法为：在35-40℃条件下，水浴解冻滤白冷沉淀凝血因子，解冻时间在8-12min，然后加入外用重组人表皮生长因子、血小板、间充质干细胞和羧甲基壳聚糖，并混合均匀；最后，将平衡至室温的凝血酶加入上述含有外用重组人表皮生长因子、血小板、间充质干细胞和羧甲基壳聚糖的冷沉淀凝血因子中，其中冷沉淀凝血因子和凝血酶按照20:1的体积比进行加入；加入方法采用多点式加入凝血酶，边加边轻轻转动培养皿使其混合混匀，室温静置5-10min后，得到就是创伤生物修复膜。
其中，所述冷沉淀凝血因子的制备方法如下：
(1)从-18℃以下冰箱中取出新鲜冰冻血浆放置4±2℃冰箱中过夜融化或在1-6℃水浴装置中融化，当血浆基本融化后会有沉淀析出；取出血浆，在4±2℃的环境下离心分离；离心参数为：离心力为2800-30000g，时间为20-25min；
(2)离心结束后，从离心机中取出离心杯，从离心杯中取出血袋，在此过程中避免振动；
(3)将血袋置于分离架，将大部分上层血浆移至空袋，在-18℃以下冷冻制成去冷沉淀冰冻血浆。将留下的40～50ml血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子，在-18℃以下冷冻保存备用，得到的就是冷沉淀凝血因子；
所述的冷沉淀凝血因子为，血液制剂，其含有丰富的凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原，一个单位的冷沉淀凝血因子所含Ⅷ因子一般在40IU以上，纤维蛋白原含量75mg以上；冷沉淀凝血因子具有止凝血作用，纤维蛋白原在凝血酶的作用下形成纤维蛋白，纤维蛋白除了止凝血作用外，还具有介导血小板和内皮细胞扩散，组织成纤维细胞增殖，毛细管形成和血管生成，从而起到促进组织血运重建，伤口愈合和组织修复的作用；冷沉淀凝血因子也是生物修复膜的主要基础物质，可以不加其他活性成分单独使用就有治疗作用。
其中，所述的外用重组人表皮生长因子为，医用生物制剂，其加入量在终溶液中，浓度在4500IU/ml，其具有极强地促进各种表皮组织生长作用,在医学上己用于烧烫伤、溃疡、各类创伤以及角膜损伤等的治疗，同时，还能促进正常表皮细胞的新陈代谢,添加到美容护肤品中可以达到美白、抗皱、延缓衰老的作用。
其中，所述的羧甲基壳聚糖为生物提取物壳聚糖的衍生物，其加入量为总质量的0.5％，其具有生物降解性、细胞亲和性和生物效应等许多独特的性质，具有修复创口、促进创面愈合、止血、抑制瘢痕增生、镇痛、抗菌和大分子支架作用。
其中，所述的凝血酶为，医用生物制品，其配制方法为，用10％葡萄糖酸钙注射液溶解凝血酶冻干粉，终浓度为1U/μl。
其中，所述的血小板为，血液成分，其加入量为1×108/ml，其具有止凝血作用外，还含有大量细胞因子和生物活性物质，具有促进组织细胞生长、修复损伤、抗瘢痕生成、消除炎症和抗菌作用。
其中，所述的间充质干细胞为，脐带来源的间充质干细胞，其加入量为1×105/ml，其对损伤的组织细胞具有修复和再生功能。
实施例2
一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法，其特征在于，所述的用于难愈合创伤治疗的生物膜的备方法为：在35-40℃条件下，水浴解冻滤白冷沉淀凝血因子，解冻时间在8-12min，然后加入外用重组人表皮生长因子、血小板和羧甲基壳聚糖，并混合均匀；最后，将平衡至室温的凝血酶加入上述含有外用重组人表皮生长因子、血小板和羧甲基壳聚糖的冷沉淀凝血因子中，其中冷沉淀凝血因子和凝血酶按照30:1的体积比进行加入；加入方法采用多点式加入凝血酶，边加边轻轻转动培养皿使其混合混匀，室温静置5-10min后，得到就是创伤生物修复膜。
其中，所述冷沉淀凝血因子的制备方法如下：
(1)从-18℃以下冰箱中取出新鲜冰冻浆放置4±2℃冰箱中过夜融化或在1-6℃水浴装置中融化，当血浆基本融化后会有沉淀析出；取出血浆，在4±2℃的环境下离心分离；离心参数为：离心力为2800-30000g，时间为20-25min；
(2)离心结束后，从离心机中取出离心杯，从离心杯中取出血袋，在此过程中避免振动；
(3)将血袋置于分离架，将大部分上层血浆移至空袋，在-18℃以下冷冻制成去冷沉淀冰冻血浆后，将留下的40～50ml血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子，在-18℃以下冷冻保存备用，得到的就是冷沉淀凝血因子；
所述的冷沉淀凝血因子为，血液制剂，其含有丰富的凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原，一个单位的冷沉淀凝血因子所含Ⅷ因子一般在40IU以上，纤维蛋白原含量75mg以上；冷沉淀凝血因子具有止凝血作用，纤维蛋白原在凝血酶的作用下形成纤维蛋白，纤维蛋白除了止凝血作用外，还具有介导血小板和内皮细胞扩散，组织成纤维细胞增殖，毛细管形成和血管生成，从而起到促进组织血运重建，伤口愈合和组织修复的作用；冷沉淀凝血因子也是生物修复膜的主要基础物质，可以不加其他活性成分单独使用就有治疗作用。
其中，所述的外用重组人表皮生长因子为，医用生物制剂其加入量在终溶液中，浓度在5000IU/ml，其具有极强地促进各种表皮组织生长作用,在医学上己用于烧烫伤、溃疡、各类创伤以及角膜损伤等的治疗，同时，还能促进正常表皮细胞的新陈代谢,添加到美容护肤品中可以达到美白、抗皱、延缓衰老的作用。
其中，所述的羧甲基壳聚糖为生物提取物壳聚糖的衍生物，其加入量为总质量的0.5％，，其具有生物降解性、细胞亲和性和生物效应等许多独特的性质，具有促进创面愈合、止血、抑制瘢痕增生、镇痛、修复创口、抗菌和大分子支架作用。
其中，所述的凝血酶为，医用生物制剂，其配制方法为，用10％葡萄糖酸钙注射液溶解凝血酶冻干粉，终浓度为1U/μl。
其中，所述的血小板为，血液成分，其加入量为1×109/ml，其具有止凝血作用外，还含有大量细胞因子和生物活性物质，具有促进组织细胞生长、修复损伤、抗瘢痕生成、消除炎症和抗菌作用。
实施例3
一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法，其特征在于，所述的用于难愈合创伤治疗的生物膜的备方法为：在35-40℃条件下，水浴解冻滤白冷沉淀凝血因子，解冻时间在8-12min，然后加入外用重组人表皮生长因子、间充质干细胞和羧甲基壳聚糖，并混合均匀；最后，将平衡至室温的凝血酶加入上述含有外用重组人表皮生长因子、间充质干细胞和羧甲基壳聚糖的冷沉淀凝血因子中，其中冷沉淀凝血因子和凝血酶按照25:1的体积比进行加入；加入方法采用多点式加入凝血酶，边加边轻轻转动培养皿使其混合混匀，室温静置5-10min后，得到就是创伤生物修复膜。
其中，所述滤白冷沉淀凝血因子的制备方法如下：
(1)从-18℃以下冰箱中取出新鲜冰冻血浆放置4±2℃冰箱中过夜融化或在1-6℃水浴装置中融化，当血浆基本融化后会有沉淀析出；取出血浆，在4±2℃的环境下离心分离；离心参数为：离心力为2800-30000g，时间为20-25min；
(2)离心结束后，从离心机中取出离心杯，从离心杯中取出血袋，在此过程中避免振动；
(3)将血袋置于分离架，将大部分上层血浆移至空袋，在-18℃以下冷冻制成去冷沉淀冰冻血浆后，将留下的40～50ml血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子，在-18℃以下冷冻保存备用，得到的就是冷沉淀凝血因子；
所述的冷沉淀凝血因子为，血液制剂，其含有丰富的凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原，一个单位的冷沉淀凝血因子所含Ⅷ因子一般在40IU以上，纤维蛋白原含量75mg以上；冷沉淀凝血因子具有止凝血作用，纤维蛋白原在凝血酶的作用下形成纤维蛋白，纤维蛋白除了止凝血作用外，还具有介导血小板和内皮细胞扩散，组织成纤维细胞增殖，毛细管形成和血管生成，从而起到促进组织血运重建，伤口愈合和组织修复的作用；冷沉淀凝血因子也是生物修复膜的主要基础物质，可以不加其他活性成分单独使用就有治疗作用。
其中，所述的外用重组人表皮生长因子为，医用生物制剂，其加入量在终溶液中，浓度在4000IU/ml，其具有极强地促进各种表皮组织生长作用,在医学上己用于烧烫伤、溃疡、各类创伤以及角膜损伤等的治疗，同时，还能促进正常表皮细胞的新陈代谢,添加到美容护肤品中可以达到美白、抗皱、延缓衰老的作用。
其中，所述的羧甲基壳聚糖为生物提取物壳聚糖的衍生物，其加入量为总质量的0.5％，其具有生物降解性、细胞亲和性和生物效应等许多独特的性质，具有促进创面愈合、止血、抑制瘢痕增生、镇痛、修复创口、抗菌和大分子支架作用。
其中，所述的凝血酶为，医用生物制剂，其配制方法为，用10％葡萄糖酸钙注射液溶解凝血酶冻干粉，终浓度为1U/μl。
其中，所述的间充质干细胞为，脐带来源的间充质干细胞，其加入量为5×105/ml，其对损伤的组织细胞具有修复和再生功能。
实施例4
一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法，其特征在于，所述的用于难愈合创伤治疗的生物膜的备方法为：在35-40℃条件下，水浴解冻滤白冷沉淀凝血因子，解冻时间在8-12min，然后加入外用重组人表皮生长因子、血小板和间充质干细胞，并混合均匀；最后，将平衡至室温的凝血酶加入上述含有外用重组人表皮生长因子、血小板和间充质干细胞的冷沉淀凝血因子中，其中冷沉淀凝血因子和凝血酶按照35:1的体积比进行加入；加入方法采用多点式加入凝血酶，边加边轻轻转动培养皿使其混合混匀，室温静置5-10min后，得到就是创伤生物修复膜。
其中，所述滤白冷沉淀凝血因子的制备方法如下：
(1)从-18℃以下冰箱中取出新鲜冰冻血浆放置4±2℃冰箱中过夜融化或在1-6℃水浴装置中融化，当血浆基本融化后会有沉淀析出；取出血浆，在4±2℃的环境下离心分离；离心参数为：离心力为2800-30000g，时间为20-25min；
(2)离心结束后，从离心机中取出离心杯，从离心杯中取出血袋，在此过程中避免振动；
(3)将血袋置于分离架，将大部分上层血浆移至空袋，在-18℃以下冷冻制成去冷沉淀冰冻血浆后，将留下的40～50ml血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子，在-18℃以下冷冻保存备用，得到的就是冷沉淀凝血因子；
所述的冷沉淀凝血因子为，血液制剂，其含有丰富的凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原，一个单位的冷沉淀凝血因子所含Ⅷ因子一般在40IU以上，纤维蛋白原含量75mg以上；冷沉淀凝血因子具有止凝血作用，纤维蛋白原在凝血酶的作用下形成纤维蛋白，纤维蛋白除了止凝血作用外，还具有介导血小板和内皮细胞扩散，组织成纤维细胞增殖，毛细管形成和血管生成，从而起到促进组织血运重建，伤口愈合和组织修复的作用；冷沉淀凝血因子也是生物修复膜的主要基础物质，可以不加其他活性成分单独使用就有治疗作用。
其中，所述的外用重组人表皮生长因子为，医用生物制剂，其加入量在终溶液中，浓度在5000IU/ml，其具有极强地促进各种表皮组织生长作用,在医学上己用于烧烫伤、溃疡、各类创伤以及角膜损伤等的治疗，同时，还能促进正常表皮细胞的新陈代谢,添加到美容护肤品中可以达到美白、抗皱、延缓衰老的作用。
其中，所述的凝血酶为，医用生物制剂，其配制方法为，用10％葡萄糖酸钙注射液溶解凝血酶冻干粉，终浓度为1U/μl。
其中，所述的血小板为，血液成分，其加入量为5×108/ml，其具有止凝血作用外，还含有大量细胞因子和生物活性物质，具有促进组织细胞生长、修复损伤、抗瘢痕生成、消除炎症和抗菌作用。
其中，所述的间充质干细胞为，脐带来源的间充质干细胞，其加入量为3×105/ml，其对损伤的组织细胞具有修复和再生功能。
实验分析：
1、用于难愈合创伤治疗的生物膜的性能实验
表1产品性能测试结果
| 样品名 | 皮肤刺激性 | 抑菌性能 | 无菌 | 急性全身毒性 | 重金属含量 |
| 实施例1 | 无刺激 | 95％ | 无 | 符合国标 | 符合国标 |
| 实施例2 | 无刺激 | 94％ | 无 | 符合国标 | 符合国标 |
| 实施例3 | 无刺激 | 95％ | 无 | 符合国标 | 符合国标 |
| 实施例4 | 无刺激 | 97％ | 无 | 符合国标 | 符合国标 |
结果表明本发明制备的用于难愈合创伤治疗的生物膜，属实际无毒产品，符合国家标准。
2、使用效果测试
将实施例1-4的用于难愈合创伤治疗的生物膜进行使用效果测试。将生物膜用于糖尿病足创面的治疗。选择糖尿病足溃疡患者60例进行研究。将患者随机分为实验组和对照组2组，每组各30例。对照组参照《中国糖尿病足诊治指南》给予常规治疗，实验组在此基础上加以生物膜治疗(实施例1治疗10例，实施例2治疗7例，实施例3治疗7例，实施例4治疗6例)，比较2组患者临床疗效和愈合时间(见图1和图2)。结果显示实验中的疗效明显优于对照组，经统计学分析2组差别具有显著意义。
上述试验结果可知，本发明制备的用于难愈合创伤治疗的生物膜，其对创伤恢复具有显著效果，能够大大加快创伤的恢复时间。
最后说明的是，以上优选实施例仅用于说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，包括在冷沉淀凝血因子基本成分的基础上其他活性成分的加减，而不偏离本发明权利要求书所限定的。
Claims (7)
1.一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法，其特征在于，所述的用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法为：在35-40℃条件下，水浴解冻冷沉淀凝血因子，解冻时间在8-12min，然后加入外用重组人表皮生长因子、血小板、间充质干细胞和羧甲基壳聚糖，并混合均匀；最后，将平衡至室温的凝血酶加入上述含有外用重组人表皮生长因子、血小板、间充质干细胞和羧甲基壳聚糖的冷沉淀凝血因子中，其中冷沉淀凝血因子和凝血酶按照20-40:1的体积比进行加入。
2.根据权利要求1所述的用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法，其特征在于，所述冷沉淀凝血因子的制备方法如下：
(1)从-18℃以下冰箱中取出新鲜冰冻血浆放置4±2℃冰箱中过夜融化或在1-6℃水浴装置中融化，当血浆基本融化后会有沉淀析出；取出血浆，在4±2℃的环境下离心分离；离心参数为：离心力为2800-30000g，时间为20-25min；
(2)离心结束后，从离心机中取出离心杯，从离心杯中取出血袋，在此过程中避免振动；
(3)将血袋置于分离架，将大部分上层血浆移至空袋，在-18℃以下冷冻制成去冷沉淀冰冻血浆。将留下的40～50ml血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子，在-18℃以下冷冻保存备用，得到的就是冷沉淀凝血因子；
所述的冷沉淀凝血因子为，血液制剂，其含有丰富的凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原，一个单位的冷沉淀凝血因子所含Ⅷ因子一般在40IU以上，纤维蛋白原含量75mg以上。
3.根据权利要求1所述的一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法，其特征在于:所述的外用重组人表皮生长因子为，医用生物制剂，其加入量在终溶液中，浓度在4000-5000IU/ml。
4.根据权利要求1所述的一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法，其特征在于:所述的羧甲基壳聚糖为生物提取物壳聚糖的衍生物，其加入量为总质量的0.5-1％。
5.根据权利要求1所述的一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法，其特征在于：所述的凝血酶为，医用生物制剂，其配制方法为，用10％葡萄糖酸钙注射液溶解凝血酶冻干粉，终浓度为1U/μl。
6.根据权利要求1所述的一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法，其特征在于：所述的血小板为，血液成分，其加入量为1×108-1×109/ml。
7.根据权利要求1所述的一种用于难愈合创伤治疗的生物膜的制备方法，其特征在于：所述的间充质干细胞为，脐带来源的间充质干细胞，其加入量为5×104-5×105/ml。
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114085773A (zh) * | 2021-11-26 | 2022-02-25 | 李剑平 | 一种干细胞自动培养设备 |
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2021
- 2021-12-27 CN CN202111636058.1A patent/CN114306287A/zh not_active Withdrawn
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114085773A (zh) * | 2021-11-26 | 2022-02-25 | 李剑平 | 一种干细胞自动培养设备 |
| CN114085773B (zh) * | 2021-11-26 | 2024-08-02 | 李剑平 | 一种干细胞自动培养设备 |
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