CN114272300A

CN114272300A - 改善脑缺血的药物组合物及其应用

Info

Publication number: CN114272300A
Application number: CN202111585113.9A
Authority: CN
Inventors: 肖红斌; 方聪; 刘洁; 贾志鑫; 李月婷
Original assignee: Beijing University of Chinese Medicine
Current assignee: Beijing University of Chinese Medicine
Priority date: 2021-12-22
Filing date: 2021-12-22
Publication date: 2022-04-05
Anticipated expiration: 2041-12-22
Also published as: CN114272300B

Abstract

本发明公开了一种改善脑缺血的药物组合物及其应用。其中，该药物组合物的原料药包括如下重量份的组分：人参1‑30份、熟地黄0‑30份、当归1‑30份、川芎1‑30份、白芍1‑30份、石菖蒲0‑30份和远志0‑45份。本发明药物组合物能够改善脑缺血导致的学习记忆能力下降，促进脑缺血所致血管性认知障碍的大脑皮质实质性脑血管新生，改善脑缺血所致血管性认知障碍的大脑皮质血流量等，因此本发明能够为脑缺血药物的制备提供药物选择，为临床用药开发奠定工作基础。

Description

改善脑缺血的药物组合物及其应用

技术领域

本发明涉及中医药技术领域，具体而言，涉及一种改善脑缺血的药物组合物及其应用。

背景技术

血管性认知障碍(VCI)是认知障碍是第二大常见病因。VCI或血管性痴呆是脑部血流持续受损的结果。VCI的病因有多种：脑小血管疾病，多发梗死性痴呆，策略性脑梗死(即位于关键脑区)，出血/微出血；血管病(包括脑淀粉样血管病)，严重低灌注(如心力衰竭，心律失常)和遗传性血管病(如伴有皮质下梗死和白质脑病的常染色体显性遗传性动脉病)等。

血管性认知障碍属中医"痴呆"的范畴，肾虚血瘀痰阻是血管性认知障碍的常见病因，中医药的重要治法是补肾活血化瘀，补肾益髓并清除体内瘀滞痰饮，减轻神经元损伤、抑制炎症、调整脂代谢紊乱，改善脑功能障碍，在VCI和VaD的管理方面取得的进展有限，而且还没有很好的改善疾病的治疗方法。目前对症治疗的策略包括胆碱酯酶抑制剂(加兰他明、多奈哌齐、利瓦斯明)、N-甲基-D-天冬氨酸拮抗剂美金刚和各种中药。在随机对照试验中，胆碱酯酶抑制剂和美金刚在认知方面都显示出较小的益处。因此对于血管性认知障碍的药物研究具有重要意义。中药立足整体、辩证论治，在VCI等慢性疾病的防治中已显示出独特的优势，可对其进行多途径、多环节、多靶点调节。

发明内容

本发明旨在提供一种改善脑缺血的药物组合物及其应用，发挥中药在血管性认知障碍治疗方面的优势。

为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种改善脑缺血的药物组合物。该药物组合物的原料药包括如下重量份的组分：人参1-30份、黄芪1-30份、熟地黄0-30份、当归1-30份、川芎1-30份、白芍1-30份、石菖蒲0-30份和远志0-45份。

进一步地，药物组合物的原料药包括如下重量份的组分：人参9份、熟地黄9份、当归9份、川芎9份、白芍9份。

进一步地，药物组合物的原料药包括如下重量份的组分：人参9份、熟地黄9份、当归9份、川芎9份、白芍9份、黄芪9份。

进一步地，药物组合物的原料药包括如下重量份的组分：人参9份、熟地黄9份、当归9份、川芎9份、白芍9份、石菖蒲6份、远志6份。

根据本发明的另一方面，提供了一种改善脑缺血的药物组合物在制备用于治疗或改善脑缺血相关的疾病或症状的药物制剂中的应用。

进一步地，脑缺血相关的疾病或症状包括血管性认知障碍、脑缺血所致的学习记忆能力受损、脑缺血所致的大脑皮质血流量异常、海马CA1区神经元结构异常和大脑皮质CD31表达异常。

进一步地，脑缺血包括慢性脑缺血。

进一步地，药物制剂通过促进脑缺血所致的大脑皮质实质性脑血管新生治疗或改善脑缺血相关的疾病或症状。

进一步地，药物制剂为将原料药按比例混合后粉碎，得到的粉末状药物；可选的，药物制剂为将原料药按比例混合后加工成提取物制备的成药。

本发明药物组合物能够改善脑缺血导致的学习记忆能力下降，促进脑缺血所致血管性认知障碍的大脑皮质实质性脑血管新生，改善脑缺血所致血管性认知障碍的大脑皮质血流量等，因此本发明能够为脑缺血药物的制备提供药物选择，为临床用药开发奠定工作基础。

附图说明

构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：

图1示出了本发明实施例6中药物组合物对VCI大鼠大脑皮质血流量的影响(注：统计学检验方法采用单因素ANOVA，^*P<0.05and^**P<0.01vs.sham group；^#P<0.05,^##P<0.01,vs.model groups)；

图2中的A和B示出了本发明实施例7中药物组合物对VCI大鼠海马CA1区病理形态学及尼氏小体数量的影响(注：统计学检验方法采用单因素ANOVA，^*P<0.05and^**P<0.01vs.sham group；^#P<0.05,^##P<0.01,vs.model groups)；

图3示出了本发明实施例7中药物组合物对VCI大鼠大脑皮质微血管数量(CD31)的影响(注：统计学检验方法采用单因素ANOVA，^*P<0.05and^**P<0.01vs.sham group；^#P<0.05,^##P<0.01,vs.model groups)；以及

图4示出了本发明实施例7中药物组合物对大鼠胸主动脉环收缩的影响。

具体实施方式

需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考附图并结合实施例来详细说明本发明。

本发明针对目前血管性认知障碍药物治疗存在的不足，结合中药在血管性认知障碍治疗方面的优势，提供了一种具有治疗血管性认知障碍作用的中药提取物组合。

根据本发明一种典型的实施方式，提供一种改善脑缺血的药物组合物。该药物组合物的原料药包括如下重量份的组分：人参1-30份、黄芪1-30份、熟地黄0-30份、当归1-30份、川芎1-30份、白芍1-30份、石菖蒲0-30份、远志0-45份。优选的，药物组合物的原料药包括如下重量份的组分：人参9份、熟地黄9份、当归9份、川芎9份、白芍9份；或药物组合物的原料药包括如下重量份的组分：人参9份、熟地黄9份、当归9份、川芎9份、白芍9份、黄芪9份；或药物组合物的原料药包括如下重量份的组分：人参9份、熟地黄9份、当归9份、川芎9份、白芍9份、石菖蒲6份、远志6份。

在本发明一种典型的实施方式中，提供改善脑缺血的药物组合物在制备用于治疗或改善脑缺血相关的疾病或症状的药物制剂中的应用。其中，脑缺血相关的疾病或症状包括血管性认知障碍、脑缺血所致的学习记忆能力受损和脑缺血所致的大脑皮质血流量异常、海马CA1区神经元结构异常和大脑皮质CD31表达异常；优选的，脑缺血包括慢性脑缺血。

本发明的发明人发现，本发明的药物制剂通过促进脑缺血所致的大脑皮质实质性脑血管新生治疗或改善脑缺血相关的疾病或症状。

根据本发明一种典型的实施方式，药物制剂为将原料药按比例混合后粉碎，得到的粉末状药物；可选的，药物制剂为将原料药按比例混合后加工成提取物制备的成药。

在本发明一种典型的实施方式中，药物制剂还可以包括药学上可接受的辅料，药物制剂的剂型可以为片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、栓剂、散剂、膏剂、滴剂、气雾剂、粉雾剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂、合剂、酒剂、茶剂、口含片、冻干粉针剂、或乳剂；可以是普通制剂、缓释制剂、控释制剂及各种微粒给药系统。

运用本领域技术人员熟悉的药物载体可以制备成含有效剂量的本发明的药物制剂。例如，口服制剂(如片剂、胶囊剂、溶液或混悬液)。药物制剂载体包括：口服制剂使用的粘合剂(如淀粉，通常是玉米、小麦或米淀粉、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮)，稀释剂(如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素，和/或甘油)，润滑剂(如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其盐，通常是硬脂酸镁或硬脂酸钙，和/或聚乙二醇)，以及如果需要，还含有崩解剂，如淀粉、琼脂、海藻酸或其盐，通常是藻酸钠，和/或泡腾混合物，助溶剂、稳定剂、悬浮剂、无色素、矫味剂等，可注射的制剂使用的防腐剂、加溶剂、稳定剂等；局部制剂用的基质、稀释剂、润滑剂、防腐剂等。药物制剂可以经口服给药，如果某些药物在胃部条件下是不稳定的，可以将其配制成肠衣片剂。

词语“有效剂量”的本发明药物制剂指以适用于任何医学治疗和/或预防的合理效果/风险比治疗障碍的足够量的化合物。但应认识到，本发明的药物制剂的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体化合物的活性；所采用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的具体化合物的给药时间、给药途径和排泄率；治疗持续时间；与所采用的具体化合物组合使用或同时使用的药物；及医疗领域公知的类似因素。例如，本领域的做法是，中药药物组合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。

下面将结合实施例进一步说明本发明的有益效果。

实施例1

药物组合物Y1的制备

按重量称取人参9份，熟地黄9份，当归9份，白芍9份，川芎9份。

药物组合物的工艺制备采用传统方法和现代方法结合，具体处理如下：各药材按比例配制混合，采用加8倍重量的水浸泡1小时后，回流提取1小时，收集浸出液，重复此步骤，收集浸出液，两次浸出液合并，减压浓缩至稠膏状，得水提稠膏。

实施例2

药物组合物Y2的制备

按重量称取人参9份，黄芪9份，熟地黄9份，当归9份，白芍9份，川芎9份。

实施例3

药物组合物Y3的制备

按重量称取人参9份，熟地黄9份，当归9份，白芍9份，川芎9份，石菖蒲6份，远志6份。

实施例4

四物汤、开心散的制备

四物汤：按重量称取熟地黄9份，当归9份，白芍9份，川芎9份

开心散：按重量称取人参9份，茯苓9份，石菖蒲6份，远志6份。

实施例5

本实施例药物组合物Y4的制备

按重量称取人参9份，熟地黄30份，当归30份，白芍30份，川芎30份，石菖蒲30份，远志45份。

对比例1

本对比例与实施例3的区别在于，原料份数不同，具体如下：

人参18份，熟地黄60份，当归60份，白芍60份，川芎60份，石菖蒲60份，远志90份。

对比例2

本对比例与实施例3的区别在于，将原料替换为功能相似的中药，具体为：人参9份，生地黄9份，红花9份，赤芍9份，桃仁9份，知母6份，远志6份。

实施例6

药效学评价

1，材料与方法

实验动物：雄性SD大鼠(SPF级)110只，体重200～220g，购自于北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号：SCXK(京)2016-0006；大鼠饲养于北京中医药大学动物房屏障环境；饲养条件：温度，20℃，湿度，60度，12h光照和黒暗循环，喂食正常维持饲料，自由饮水。本研究是按照北京中医药大学伦理委员会的政策和程序(许可证号：BUCM-4-2021090101-3051)进行的。将110只雄性SD大鼠，按随机原则选出10只作为假手术组，仅分离双侧颈总动脉但不结扎，其余100只大鼠采用两血管阻断法制备血管性认知障碍大鼠模型。将大鼠随机分为8组，分别为假手术组、模型组、多奈哌齐组、四物汤组(4g/kg)、开心散组(1.5g/kg)、Y1(2g/kg)、Y2(2g/kg)、Y3(2g/kg)、Y4(2g/kg)、对比例1(2g/kg)、对比例2(2g/kg)、假手术组和模型组灌胃相应体积的纯净水。按10mL/kg灌胃给药。连续给药4周，每天给药一次。

实验方法：

大鼠学习记忆能力评估：采用Morris水迷宫评估药物对血管认知障碍大鼠模型学习记忆能力的影响；给药第30天开始，大鼠进行连续5天训练，每天2次，记录大鼠找到隐匿平台所需时间，即为逃避潜伏期。第6天进行空间探索实验，记录大鼠60s内穿越平台的次数等指标。

大鼠脑血流量检测；采用激光散斑系统，将大鼠麻醉后，头部皮肤剪开，暴露颅骨，清理颅骨部位血液及组织，形成一个前至前囟，左至矢状缝，右至右侧颞线，后至冠状缝近似矩形的观测窗。观测过程中将激光均匀照射在观测区域，观测区域的散射光信号由连接在体视显微镜上CCD摄像机采集。获得脑血流分布图，并进行分析。

实施例7

对大鼠胸主动脉环收缩的影响

雄性SD大鼠麻醉后，快速打开胸腔取出胸主动脉，置于4℃的改良Krebs–Henseleit(118mM氯化钠，4.7mM氯化钾，2.5mM氯化钙，1.2mM磷酸二氢钠，1.2mM硫酸镁，25mM碳酸氢钠，10mM葡萄糖)溶液中。清洗血管并清除周围的结缔组织，分割为长度3-5mm的血管环。将血管环悬挂于盛有10mL K-H溶液并持续通入95％O₂和5％CO₂的37±0.2℃恒温浴槽中。采用累积加药法进行加药，浓度依次为0.4mg/ml,0.8mg/ml,1.6mg/ml,3.2mg/ml,6.4mg/ml，在静息状态下加入Y1、Y2、Y3不同浓度的药物，生物信号采集系统记录血管张力变化情况。

2，实验结果

2.1对血管认知障碍大鼠学习记忆能力的影响

与假手术对照组比较，模型对照组大鼠平均逃避潜伏期自第2d出现明显延长(P＜0.05)，与模型对照组比较，Y1、Y2、Y3、Y4大鼠自第5d平均逃避潜伏期明显缩短(P＜0.01)。在空间探索实验中，相较于假手术对照组，模型对照组穿越平台次数显著减少(P＜0.05)；与模型对照组比较，Y1、Y2、Y3、Y4组穿越平台次数明显增加(P＜0.05)，开心散组有一定程度改善作用，但效果差于Y1、Y2、Y3组，四物汤、对比例1、对比例2及多奈哌齐组无明显改善。具体数据见表1，表2。

表1药物组合物对血管认知障碍大鼠Morris水迷宫空间探索试验的影响(

n＝10)

注：与模型对照组比较^*P＜0.05，^＊＊P＜0.01。

表2药物组合物对血管认知障碍大鼠Morris水迷宫空间探索试验的影响(

n＝10)

注：与模型对照组比较^*P＜0.05，^＊＊P＜0.01。

2.2对血管认知障碍大鼠皮质脑血流量的影响

相较于假手术对照组，模型对照组皮质脑血流量显著减少(P＜0.05)；与模型对照组比较，Y1、Y2、Y3皮质脑血流量显著增加(P＜0.05)，见表3，图1。

表3药物组合物对VCI大鼠皮质脑血流量的影响(

n＝6)

注：与模型对照组比较^*P＜0.05，^＊＊P＜0.01。

2.3对血管认知障碍大鼠海马CA1区病理形态学的影响

假手术组大鼠海马CA1区神经元结构正常，细胞排列整齐，形态完整，胞核与胞质界限清晰，核仁明显；模型组大鼠海马CA1区细胞排列紊乱，间隙增大，数量减少，且形态不完整，胞核深染固缩，Y1、Y2、Y3大鼠海马神经元分布则相对均匀，排列较为紧密部分神经元核仁固缩，偶见损伤。见图2中的A。

2.4对血管认知障碍大鼠海马CA1区尼氏小体数量的影响

假手术组可见大鼠海马CA1区神经元排列整齐密集，胞体饱满，着色较深，核大而圆，可见较多尼氏小体。而模型大鼠脑海马CA1区神经元数量稀少，着色浅，胞体萎缩呈空泡状，尼氏小体少见。Y1、Y2、Y3脑海马CA1区神经元恢复较好，数量多，胞体较为饱满，着色较深，核较大而圆，可见较多尼氏小体。见图2中的B。

2.5对血管认知障碍大鼠大脑皮质CD31表达的影响

免疫荧光结果显示，假手术组可见一定数量大鼠皮质微血管数量(绿色荧光)。而模型大鼠大脑皮质微血管数量有一定程度的增加，Y1、Y2、Y3显著增加大鼠大脑皮质微血管数量。见图3。

2.6对大鼠胸主动脉环收缩的影响

实验结果显示，加用药物后，大鼠胸主动脉环的张力显著升高，对于血管收缩的效果，Y3>Y2>Y1，四物汤、开心散对动脉血管环的张力无明显影响。表明大脑缺血后，药物组合物可通过收缩血管升高全身血压而促进脑部供血。见图4。

从以上的描述中，可以看出，本发明上述的实施例实现了如下技术效果：本发明的药物组合物能够改善脑缺血导致的学习记忆能力下降；促进脑缺血所致血管性认知障碍的大脑皮质实质性脑血管新生，改善脑缺血所致血管性认知障碍的大脑皮质血流量。本发明能够为脑缺血药物的制备提供药物选择，为临床用药开发奠定工作基础。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种改善脑缺血的药物组合物，其特征在于，其特征在于，所述药物组合物的原料药包括如下重量份的组分：人参1-30份、黄芪0-30份、熟地黄1-30份、当归1-30份、川芎1-30份、白芍1-30份、石菖蒲0-30份、远志0-45份。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的原料药包括如下重量份的组分：人参9份、熟地黄9份、当归9份、川芎9份、白芍9份。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的原料药包括如下重量份的组分：人参9份、熟地黄9份、当归9份、川芎9份、白芍9份、黄芪9份。

4.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的原料药包括如下重量份的组分：人参9份、熟地黄9份、当归9份、川芎9份、白芍9份、石菖蒲6份、远志6份。

5.如权利要求1-4中任一项所述的改善脑缺血的药物组合物在制备用于治疗或改善脑缺血相关的疾病或症状的药物制剂中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述脑缺血相关的疾病或症状包括血管性认知障碍、脑缺血所致的学习记忆能力受损、脑缺血所致的大脑皮质血流量异常、海马CA1区神经元结构异常和大脑皮质CD31表达异常。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述脑缺血包括慢性脑缺血。

8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物制剂通过促进脑缺血所致的大脑皮质实质性脑血管新生治疗或改善脑缺血相关的疾病或症状。

9.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物制剂为将原料药按比例混合后粉碎，得到的粉末状药物。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述药物制剂为将原料药按比例混合后加工成提取物制备的成药。