CN114264531A - 一种超活体s染色液 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种超活体S染色液，涉及尿液检测染色技术领域，所述该超活体S染色液含有阴离子官能团的三芳基甲烷染料细胞核染色成分及细胞质染色成分中的任一种或多种染色成分以及螯合剂，其中，含有阴离子官能团三芳基甲烷染料和细胞质染色成分的超活体S染色液效果最佳，所述三芳基甲烷染料的含量为2.0‑6.0mmol/L，所述细胞质染色成分的含量为4.0‑12.0mmol/L，所述螯合剂的含量为10‑25mmol/L。该超活体S染色液，把含阴离子官能团的三芳基甲烷染料用于尿沉渣检测的超活体S染色液时，能够在抑制尿液中杂质染色的同时，只将尿液有形成分中的细胞核染色，此外，本发明在对尿液沉渣进行检测分析时，还能够灵敏地检测出上皮细胞、管型等稀有成分。
Description
技术领域
本发明涉及尿液检测染色技术领域，具体为一种超活体S染色液。
背景技术
尿液有形成分检查是一种非常重要的、无创的形态学试验，对被检测者来说负担很小，标本容易获得。目前，尿液有形成分分析镜检，通常使用未染色镜检。然而，这种操作重复性差，漏检率比较高，部分有形成分不易鉴别。已知有多种方法可以对生物成分进行染色。其中，通过向活体注射染料对细胞进行染色的方法被称为“生物染色”，而对从活体中取出的细胞在活体状态下进行染色的方法被称为“活体染色”。
在传统的尿沉渣检查中，不仅有需要测定细胞，尿液中可能存在的一些杂质也会被染色而造成背景干扰，使得目标细胞的检出变得困难。特别是在使用有形成分分析仪进行尿沉渣检查时，如果背景中出现的杂质被染色，可能成像时会与待测成分重叠，导致难以分类或分类不正确，使自动分析仪难以准确分析有形成分。此外，传统的尿沉渣检查除了杂质易被染色外，还会出现上皮细胞和管型等稀有成分难以染色的情况，造成稀有成分测出不充分，为此，我们提出了一种超活体染色液，用于快速对尿液有形成分染色，尤其是对尿液细胞及管型成分。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供了一种超活体S染色液，解决了上述背景技术中提出的问题。
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现，一种超活体S染色液，所述该超活体S染色液含有阴离子官能团的三芳基甲烷染料细胞核染色成分及细胞质染色成分中的任一种或多种染色成分以及螯合剂，其中，含有阴离子官能团三芳基甲烷染料和细胞质染色成分的超活体S染色液效果最佳，所述三芳基甲烷染料的含量为2.0-6.0mmol/L，所述细胞质染色成分的含量为4.0-12.0mmol/L，所述螯合剂的含量为10-25mmol/L。
进一步的，所述带有阴离子官能团的三芳基甲烷染料至少含有一种以下色素：甲基蓝、专利蓝V、海王星绿SBX，阿西伦亮蓝R、酸性快速紫BG，艳丽酸性蓝B，艳丽蓝R、蓝R，亮蓝FCF，亮蓝G，亮放蓝G，酸性蓝B、艳蓝R、艳蓝FCF、艳蓝G、艳放蓝G、酸性蓝、酸性蓝13、酸性蓝15、酸性蓝100、酸性蓝103、酸性蓝100、酸性蓝103、酸性蓝104和酸性蓝269等，但不限于以上成分。
进一步的，所述细胞核染色成分用于细胞核染色，至少含有一种以下色素：醋酸金黄素、醋酸胭脂红、亚甲基漂白剂、阿尔西恩漂白剂、晶体生物桥、甲基生物桥、苏木素、7-二氨基荧光素、铁氰化锂、亚速尔11等，但不限于以上成分。
进一步的，所述细胞质染色成分用于细胞质染色，至少含有一种以下色素：曙红黄、曙红蓝、獐牙菜绿、氯化三苯基四氮唑溶液、中性红、沙弗林、黄连素B溶液和曙光黄、曙光蓝、雅努斯绿、三苯基氯化四氮唑溶液、中性红、萨弗林、派洛宁B溶液、4/5000兹丹III、4/5000兹丹黑、油菜红、乳酸菌素、甲基绿、派洛宁B溶液、兹丹III、兹丹黑、豆蔻红、乳囊素、甲基绿、派洛宁碘，碘化钾、亮甲酚蓝、亮绿、靛蓝胭脂红、新亚甲基蓝、中性红等，但不限于以上成分。
进一步的，所述含有阴离子官能团的三芳基甲烷染料具体为水溶性染料，在20℃的水中溶解度为200g/L-1000g/L。
进一步的，所述带有阴离子官能团的三芳基甲烷染料的分子量为700-900。
进一步的，所述带有阴离子官能团的三芳基甲烷染料的PH值在6-7之间，调节PH值的缓冲具体为液Good’s缓冲液。
进一步的，所述含有阴离子官能团三芳基甲烷染料与细胞质染色成分的混合摩尔比为1-4，其中细胞质染色成分以曙光黄为最佳。
进一步的，所述该超活体S染色液将细胞核染色成分及/或细胞质染色成分组合使用时，可以只单独使用其中一种，也可以组合使用两种以上。
进一步的，所述用于尿沉渣分析/尿液有形成分分析/尿液形态学分析时，超活体S染色液与尿样的比例为1：3-1：9。
本发明提供了一种超活体S染色液，具备以下有益效果：该超活体S染色液，在三芳基甲烷系列染料构造中添加了阴离子官能团，把含阴离子官能团的三芳基甲烷染料用于尿沉渣检测的超活体S染色液时，能够在抑制尿液中杂质染色的同时，只将尿液有形成分中的细胞核染色，因此含有阴离子官能团的三芳基甲烷染料，在尿沉渣检测时，能够通过抑制尿液沉淀物的染色来减少背景干扰，有效抑制尿沉渣检测时杂质的混入，从而提供一种能有效提高目标细胞检出率的方法，此外，本发明在对尿液沉渣进行检测分析时，还能够灵敏地检测出上皮细胞、管型等稀有成分，通过提高尿样中上皮细胞和管型等稀有成分的检出率来进行高灵敏度尿沉渣检查，由此，能够使用自动分析仪对尿样中的有形成分进行高度精准的分析，并且螯合剂通过抑制无定形盐类的影响，能够使图像处理式尿液有形成分分析仪拍摄的画面更加清晰、鲜明。
具体实施方式
下面将结合本发明的具体实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
一种超活体S染色液，该超活体S染色液含有阴离子官能团的三芳基甲烷染料细胞核染色成分及细胞质染色成分中的任一种或多种染色成分以及螯合剂，其中，含有阴离子官能团三芳基甲烷染料和细胞质染色成分的超活体S染色液效果最佳，三芳基甲烷染料的含量为2.0-6.0mmol/L，细胞质染色成分的含量为4.0-12.0mmol/L，螯合剂的含量为10-25mmol/L；
该超活体S染色液将细胞核染色成分及/或细胞质染色成分组合使用时，可以只单独使用其中一种，也可以组合使用两种以上；含有阴离子官能团三芳基甲烷染料与细胞质染色成分的混合摩尔比为1-4，其中细胞质染色成分以曙光黄为最佳；用于尿沉渣分析/尿液有形成分分析/尿液形态学分析时，超活体S染色液与尿样的比例为1：3-1：9；
带有阴离子官能团的三芳基甲烷染料至少含有一种以下色素：甲基蓝、专利蓝V、海王星绿SBX，阿西伦亮蓝R、酸性快速紫BG，艳丽酸性蓝B，艳丽蓝R、蓝R，亮蓝FCF，亮蓝G，亮放蓝G，酸性蓝B、艳蓝R、艳蓝FCF、艳蓝G、艳放蓝G、酸性蓝、酸性蓝13、酸性蓝15、酸性蓝100、酸性蓝103、酸性蓝100、酸性蓝103、酸性蓝104和酸性蓝269等，但不限于以上成分；含有阴离子官能团的三芳基甲烷染料具体为水溶性染料，在20℃的水中溶解度为200g/L-1000g/L；带有阴离子官能团的三芳基甲烷染料的分子量为700-900。；带有阴离子官能团的三芳基甲烷染料的PH值在6-7之间，调节PH值的缓冲具体为液Good’s缓冲液。
细胞核染色成分用于细胞核染色，至少含有一种以下色素：醋酸金黄素、醋酸胭脂红、亚甲基漂白剂、阿尔西恩漂白剂、晶体生物桥、甲基生物桥、苏木素、7-二氨基荧光素、铁氰化锂、亚速尔11等，但不限于以上成分。
细胞质染色成分用于细胞质染色，至少含有一种以下色素：曙红黄、曙红蓝、獐牙菜绿、氯化三苯基四氮唑溶液、中性红、沙弗林、黄连素B溶液和曙光黄、曙光蓝、雅努斯绿、三苯基氯化四氮唑溶液、中性红、萨弗林、派洛宁B溶液、4/5000兹丹III、4/5000兹丹黑、油菜红、乳酸菌素、甲基绿、派洛宁B溶液、兹丹III、兹丹黑、豆蔻红、乳囊素、甲基绿、派洛宁碘，碘化钾、亮甲酚蓝、亮绿、靛蓝胭脂红、新亚甲基蓝、中性红等，但不限于以上成分。
具体实施例一、
染色液配制如下：
MES – NaOH 100 mM pH 6.3
甲基溴3 mmol /L
曙红黄6 mmol /L
用尿液为试剂，将染色液和尿样以1：4的比例混合进行测定，测定时可通过有形成分分析仪进行测定，测定可得背景杂质没有被染色，可以更准确地分析有形成分；
具体实施例二、
染色液配制如下：
MES - NaOH 1 0 0 mM pH 6.0
乙二胺四甲酸三钙 20 mmol/L
甲基蓝 2 mmol/L
曙光黄 4 mmol/L
用尿液为试剂，将染色液和尿样以1：3的比例混合进行测定，测定时可通过有形成分分析仪进行测定，测定可得上皮细胞、管型等稀少成分的检出率较高，能够充分染色。
综上所述，该超活体S染色液，使用时超活体S染色液包括以下具体步骤：
首先配制染色液，配制含有阴离子官能团三芳基甲烷染料和细胞质染色成分的超活体S染色液，并添加螯合剂，其中三芳基甲烷染料的含量为2.0-6.0mmol/L，细胞质染色成分的含量为4.0-12.0mmol/L，螯合剂的含量为10-25mmol/L，并且带有阴离子官能团的三芳基甲烷染料的分子量为700-900，然后对尿检样本进行染色操作，并将超活体S染色液和尿样以1：3-1：9的比率混合进行染色，在混合尿样和染色液时添加调节PH值的Good’s缓冲液，使得PH值在6-7之间，该PH值接近人体尿液PH值，使得超活体S染色液在上述PH值范围内最为稳定，呈色最好，最后使用尿液有形成分分析仪对染色后的尿样进行成像分析。
该超活体S染色液，在三芳基甲烷系列染料构造中添加了阴离子官能团，把含阴离子官能团的三芳基甲烷染料用于尿沉渣检测的超活体S染色液时，能够在抑制尿液中杂质染色的同时，只将尿液有形成分中的细胞核染色，因此含有阴离子官能团的三芳基甲烷染料，在尿沉渣检测时，能够通过抑制尿液沉淀物的染色来减少背景干扰，有效抑制尿沉渣检测时杂质的混入，从而提供一种能有效提高目标细胞检出率的方法，此外，本发明在对尿液沉渣进行检测分析时，还能够灵敏地检测出上皮细胞、管型等稀有成分，通过提高尿样中上皮细胞和管型等稀有成分的检出率来进行高灵敏度尿沉渣检查，由此，能够使用自动分析仪对尿样中的有形成分进行高度精准的分析，并且螯合剂通过抑制无定形盐类的影响，能够使图像处理式尿液有形成分分析仪拍摄的画面更加清晰、鲜明。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种超活体S染色液，其特征在于，所述该超活体S染色液含有阴离子官能团的三芳基甲烷染料细胞核染色成分及细胞质染色成分中的任一种或多种染色成分以及螯合剂，其中，含有阴离子官能团三芳基甲烷染料和细胞质染色成分的超活体S染色液效果最佳，所述三芳基甲烷染料的含量为2.0-6.0mmol/L，所述细胞质染色成分的含量为4.0-12.0mmol/L，所述螯合剂的含量为10-25mmol/L。
2.根据权利要求1所述的一种超活体S染色液，其特征在于，所述带有阴离子官能团的三芳基甲烷染料至少含有一种以下色素：甲基蓝、专利蓝V、海王星绿SBX，阿西伦亮蓝R、酸性快速紫BG，艳丽酸性蓝B，艳丽蓝R、蓝R，亮蓝FCF，亮蓝G，亮放蓝G，酸性蓝B、艳蓝R、艳蓝FCF、艳蓝G、艳放蓝G、酸性蓝、酸性蓝13、酸性蓝15、酸性蓝100、酸性蓝103、酸性蓝100、酸性蓝103、酸性蓝104和酸性蓝269等，但不限于以上成分。
3.根据权利要求1所述的一种超活体S染色液，其特征在于，所述细胞核染色成分用于细胞核染色，至少含有一种以下色素：醋酸金黄素、醋酸胭脂红、亚甲基漂白剂、阿尔西恩漂白剂、晶体生物桥、甲基生物桥、苏木素、7-二氨基荧光素、铁氰化锂、亚速尔11等，但不限于以上成分。
4.根据权利要求1所述的一种超活体S染色液，其特征在于，所述细胞质染色成分用于细胞质染色，至少含有一种以下色素：曙红黄、曙红蓝、獐牙菜绿、氯化三苯基四氮唑溶液、中性红、沙弗林、黄连素B溶液和曙光黄、曙光蓝、雅努斯绿、三苯基氯化四氮唑溶液、中性红、萨弗林、派洛宁B溶液、4/5000兹丹III、4/5000兹丹黑、油菜红、乳酸菌素、甲基绿、派洛宁B溶液、兹丹III、兹丹黑、豆蔻红、乳囊素、甲基绿、派洛宁碘，碘化钾、亮甲酚蓝、亮绿、靛蓝胭脂红、新亚甲基蓝、中性红等，但不限于以上成分。
5.根据权利要求1所述的一种超活体S染色液，其特征在于：所述含有阴离子官能团的三芳基甲烷染料具体为水溶性染料，在20℃的水中溶解度为200g/L-1000g/L。
6.根据权利要求1所述的一种超活体S染色液，其特征在于：所述带有阴离子官能团的三芳基甲烷染料的分子量为700-900。
7.根据权利要求1所述的一种超活体S染色液，其特征在于：所述带有阴离子官能团的三芳基甲烷染料的PH值在6-7之间，调节PH值的缓冲具体为液Good’s缓冲液。
8.根据权利要求1所述的一种超活体S染色液，其特征在于：所述含有阴离子官能团三芳基甲烷染料与细胞质染色成分的混合摩尔比为1-4，其中细胞质染色成分以曙光黄为最佳。
9.根据权利要求1所述的一种超活体S染色液，其特征在于：所述该超活体S染色液将细胞核染色成分及/或细胞质染色成分组合使用时，可以只单独使用其中一种，也可以组合使用两种以上。
10.根据权利要求1所述的一种超活体S染色液，其特征在于：所述用于尿沉渣分析/尿液有形成分分析/尿液形态学分析时，超活体S染色液与尿样的比例为1：3-1：9。
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2021
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