CN114246833A

CN114246833A - 一种乳糖酶组合物及其制备方法和应用

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Publication number: CN114246833A
Application number: CN202011006011.2A
Authority: CN
Inventors: 王洪飞; 蔡程科; 孙腾跃; 檀丽萍
Original assignee: Beijing Quantum Hi Tech Pharmacy Technology Co ltd
Current assignee: Beijing Quantum Hi Tech Pharmacy Technology Co ltd
Priority date: 2020-09-23
Filing date: 2020-09-23
Publication date: 2022-03-29
Anticipated expiration: 2040-09-23
Also published as: CN114246833B

Abstract

本发明公开了一种乳糖酶组合物及其制备方法和应用。特别是，本发明的组合物为冻干闪释片，其可有效保证乳糖酶的活性，外观和口感均良好，崩解时间短，可用于有效缓解乳糖不耐受的症状，克服了药量不准、婴幼儿拒药等问题，具有良好的应用前景。

Description

一种乳糖酶组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种乳糖酶组合物(特别是冻干闪释片形式)及其制备方法和应用。

背景技术

乳糖酶，别名：β-半乳糖苷酶，主要作用是使乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，其为一种白色粉末，无味道、无嗅，溶解后是一种浅棕色液体。乳糖酶的溶解度较低，在冷动物制品中容易析出，使得产品带有颗粒状结构。

乳糖酶可将乳汁中的乳糖分解成葡萄糖和半乳糖。葡萄糖是人体各部分代谢的能量来源，半乳糖则是人大脑和黏膜组织代谢时必需的结构糖，是婴幼儿脑发育的必要成分，与婴儿大脑的迅速成长有密切联系。再者，乳糖酶还可在人体内通过转糖苷作用生成低聚糖，这些低聚糖是一种低分子量、不粘稠的水溶性膳食纤维，它在肠道内作为增殖因子仅被双歧杆菌利用却不会被腐败细菌利用，如此可大大减少肠道有害毒素的产生，对预防便秘和腹泻有很重要的作用。

乳糖不耐受是指因乳糖酶的相对或绝对缺乏而导致的以腹泻为主的相关消化道症状的现象。由于遗传的多态性，不同种族人群发病率不同，中国人是乳糖不耐受的高发人群，乳糖不耐受在中国婴幼儿中发病率极高，可达 46.9％-70.0％，其最常见的症状为腹泻，如若不引起重视可导致慢性腹泻、营养不良、贫血、骨质疏松等长期危害。

目前国内上市了不少乳糖酶制剂，均是以按食品申报，尚无药品，主要的剂型有固体饮料、滴剂，患儿服用时不方便且不好把握剂量。

发明内容

为克服现有技术的不足，本发明提供一种含乳糖酶的组合物。

在本发明的一个实施方式中，上述组合物为冻干闪释片。

具体地，上述组合物包含以下原料：乳糖酶、奶粉、碳水化合物类原料、助悬剂。

具体地，上述助悬剂可以选自：卡拉胶、果胶、槐豆胶、瓜尔胶、黄原胶和海藻糖中的一种或多种；特别是选自：卡拉胶、果胶、槐豆胶、瓜尔胶中的一种或多种，更特别是选自：卡拉胶、果胶、瓜尔胶中的一种或多种；在本发明的一个实施例中，上述助悬剂为瓜尔胶。

具体地，上述乳糖酶可以为市售的乳糖酶产品(例如可以为来源于微生物发酵提取的乳糖酶，该微生物具体如米曲霉、黑曲霉、脆壁克鲁维酵母、乳克鲁维酵母和巴斯德毕赤酵母等)，也可以根据现有技术中公开的方法制备。

具体地，上述奶粉可以选自：全脂奶粉、脱脂奶粉、无乳糖奶粉和发酵乳粉等中的一种多种。

在本发明的一个实施例中，上述碳水化合物类原料为绵白糖。

在本发明的一个实施方式中，上述组合物包含以下重量份数的原料：乳糖酶20-40份，奶粉40-70份，碳水化合物类原料0.01-1份，助悬剂0.1-10 份。

具体地，上述原料中，乳糖酶的重量份数可以为20、21、22、23、24、 25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40份。

在本发明的一个实施例中，上述原料中，乳糖酶的重量份数为29份。

具体地，上述原料中，奶粉的重量份数可以为40、42、44、46、48、50、 52、54、56、58、60、62、64、66、68、70份。

在本发明的一个实施例中，上述原料中，奶粉的重量份数为53.9份。

具体地，上述原料中，碳水化合物类原料的重量份数可以为0.01、0.02、 0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、 0.8、1份。

在本发明的一个实施例中，上述原料中，碳水化合物类原料的重量份数为0.05份。

具体地，上述原料中，助悬剂的重量份数可以为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、 0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10份。

在本发明的一个实施例中，上述原料中，助悬剂的重量份数为0.5份。

在本发明的一个实施方式中，上述组合物包含以下重量份数的原料：乳糖酶29份，奶粉53.9份，碳水化合物类原料0.05份，助悬剂0.5份。

在本发明的一个实施例中，上述组合物包含以下重量份数的原料：乳糖酶29份，奶粉53.9份，绵白糖0.05份，瓜尔胶0.5份。

具体地，上述组合物中还可以包含其他原料组分，例如骨架剂、冻干保护剂、酸碱度调节剂、乳化剂等。

具体地，上述骨架剂可以选自：普鲁兰、甘露醇、γ-环糊精、山梨醇、麦芽糖等中的一种或多种；在本发明的一个实施例中，上述骨架剂为普鲁兰和甘露醇；在本发明另一个实施例中，上述骨架剂为γ-环糊精。

本发明还提供一种上述组合物的制备方法。

具体地，上述制备方法包括冻干闪释的步骤，其中，冻干闪释可包括固体分散、低温冷冻和冷冻干燥步骤。

具体地，上述固体分散步骤包括：将上述组合物的原料干混，加入溶剂 (例如水，特别是纯化水)，混合。

具体地，上述固体分散步骤还包括：将上述所得原料混合物进行乳化剪切。

具体地，上述乳化剪切的速率为1500-3500rpm(具体如1500、1600、1800、2000、2200、2400、2500、2600、2800、3000、3200、3400、3500rpm)；在本发明的一个实施例中，乳化剪切的速率为2500rpm。

具体地，上述乳化剪切的时间为1-60分钟(具体如1、2、3、4、5、6、 7、8、9、10、15、20、25、30、40、50、60分钟)；在本发明的一个实施例中，乳化剪切的时间为10分钟。

具体地，上述固体分散步骤还包括：将经过乳化剪切的原料混合物进行脱气。

具体地，上述低温冷冻包括：将经过固体分散步骤的原料混合物在 -80～-40℃(具体如-80、-75、-70、-65、-60、-55、-50、-45、-40℃)下冷冻 1-10分钟(具体如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10分钟)。

在本发明的一个实施例中，上述低温冷冻包括：将经过固体分散步骤的原料混合物分装于模具中，在-60℃下冷冻5分钟。

具体地，上述冷冻干燥步骤包括三个阶段：阶段一，将经过低温冷冻的原料混合物在-30～-20℃(具体如-30、-28、-26、-25、-24、-22、-20℃)下冷冻干燥1-24小时(具体如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、18、 24小时)；阶段二，在1-24小时(具体如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、 11、12、18、24小时)内由-30～-20℃(具体如-30、-28、-26、-25、-24、-22、 -20℃)逐渐升温至20-30℃(具体如20、22、24、25、26、28、30℃)；阶段三，在20-30℃(具体如20、22、24、25、26、28、30℃)保温1-24小时 (具体如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、18、24小时)。

在本发明的一个实施例中，上述冷冻干燥步骤包括：将经过低温冷冻的原料混合物在-25℃下冷冻干燥5.5小时，在3.5小时内由-25℃升温至25℃，在25℃下保温2小时。

具体地，上述制备方法还包括密封步骤。

具体地，上述密封步骤可包括在充氮保护下，将通过上述冻干闪释步骤制得的冻干闪释片进行铝塑密封包装。

在本发明的一个实施例中，上述制备方法包括如下步骤：

(1)将上述组合物的原料干混，加入水，混合；

(2)将步骤(1)所得原料混合物进行乳化剪切；

(3)将步骤(2)所得原料混合物脱气；

(4)将步骤(3)所得原料混合物低温冷冻；

(5)将步骤(4)所得原料混合物进行冷冻干燥；

(6)将步骤(5)所得原料混合物进行密封。

本发明还提供一种上述组合物(特别是其冻干闪释片形式)在制备治疗乳糖不耐受的药物中的应用。

具体地，上述乳糖不耐受的患者为哺乳动物；在本发明的一个实施方式中，上述哺乳动物为人类，特别是儿童，如婴幼儿。

具体地，上述治疗包括缓解乳糖不耐受的症状，例如腹泻。

本发明还提供一种治疗乳糖不耐受的药物，其包含上述组合物的冻干闪释片形式，该冻干闪释片密封包装于双铝膜腔内。

本发明还提供一种治疗哺乳动物的乳糖不耐受的方法，其包括对受试者施用有效量的本发明上述组合物(特别是其冻干闪释片形式)的步骤。

具体地，上述受试者为人类，特别是儿童，如婴幼儿。

本发明使用乳糖酶、奶粉、助悬剂(如卡拉胶、果胶、瓜尔胶等)等原辅料，采用冻干闪释技术制备得到乳糖酶冻干闪释片，其中乳糖酶的活性可达6000U/片以上，外观和口感均良好，崩解时间短，克服了药量不准、婴幼儿拒药等问题，极大地提高了婴幼儿服用时的依从性和便利性。

具体实施方式

除非另有定义，本发明中所使用的所有科学和技术术语具有与本发明涉及技术领域的技术人员通常理解的相同的含义。

“冻干闪释技术”是将天然提取物、生物活性成分或原料药等经过固体分散技术以及低温冷冻和冷冻干燥技术处理后形成遇水即溶的固体小片，所得固体小片称为冻干闪释片。

“乳糖不耐受”是指因乳糖酶的相对或绝对缺乏而导致的以腹泻为主的相关消化道症状的现象，又称为乳糖酶缺乏症，可包括：先天性乳糖酶缺乏症、继发性乳糖酶缺乏症、成人型乳糖酶缺乏症。

“儿童”是指从生命诞生之始到成年期之前的人类，在本发明中，儿童时期的年龄段为0-18岁(如0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、 14、15、16、17、18岁)；“婴幼儿”是婴儿和幼儿的统称，在本发明中，婴幼儿是指0-6岁的幼小儿童，其中，婴儿是指0-12个月的儿童，幼儿是指1-6 岁(特别是1-3岁)的儿童。

术语“有效量”是指可在受试者中实现治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病或病症的剂量，其取决于诸多因素，包括受试者的年龄、体重、性别、自然健康状况、营养状况、服用时间、代谢速率、病症的严重程度以及诊治医师的主观判断，等等，因此本发明对有效量不作具体限定。

术语“患者”、“受试者”在本文中具有相同含义，可互换使用，其是指接受本发明的组合物和方法以治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病或病症的动物，如哺乳动物，具体如人类，特别是儿童。

术语“治疗”包括在疾病或病症发作之后，根除、移除、逆转、缓解、改变或控制该疾病或病症。

下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1：配方

配方1-8的组成如表1所示。

1、配方1

制备过程如下：

1)按照表1称取乳糖酶、奶粉、普鲁兰、甘露醇置于适宜容器内，干混均匀后加少量水搅拌均匀；

2)加纯化水定容至配方量，搅拌均匀，进行乳化剪切，剪切速率为2500rpm，乳化时间为10min；

3)将2)所得产品脱气；

4)将3)所得产品分装(0.4ml)于模具(铝窝)中，置于-60℃冰箱中预冻 5min；

5)将4)所得的物料冷冻干燥，具体条件为：设定冻干初始温度为-25℃，将预冻好的产品置于冻干机内，冷冻干燥5.5小时，3.5小时内由-25℃升至25℃，维持25℃，2小时；

6)铝塑袋密封保存。

2、配方2

制备过程如下：

1)按照表1称取乳糖酶、奶粉、γ-环糊精置于适宜容器内，干混均匀后加少量水搅拌均匀；

2)加纯化水定容至配方量，搅拌均匀，进行乳化剪切，剪切速率为 2500rpm，乳化时间为10min；

3)将2)所得产品脱气；

4)将3)所得产品分装于模具中，置于-60℃冰箱中预冻5min；

5)将4)所得的物料冷冻干燥，具体条件为：设定冻干初始温度为-25℃，将预冻好的产品置于冻干机内，冷冻干燥5.5小时，3.5小时内由-25℃升至 25℃，维持25℃，2小时；

6)铝塑袋密封保存。

3、配方3

制备过程如下：

1)按照表1称取乳糖酶、奶粉、卡拉胶置于适宜容器内，干混均匀后加少量水搅拌均匀；

3)将2)所得产品脱气；

4)将3)所得产品分装于模具中，置于-60℃冰箱中预冻5min；

6)铝塑袋密封保存。

4、配方4

制备过程如下：

1)按照表1称取乳糖酶、奶粉、果胶置于适宜容器内，干混均匀后加少量水搅拌均匀；

3)将2)所得产品脱气；

4)将3)所得产品分装于模具中，置于-60℃冰箱中预冻5min；

6)铝塑袋密封保存。

5、配方5

制备过程如下：

1)按照表1称取乳糖酶、奶粉、槐豆胶置于适宜容器内，干混均匀后加少量水搅拌均匀；

3)将2)所得产品脱气；

4)将3)所得产品分装于模具中，置于-60℃冰箱中预冻5min；

6)铝塑袋密封保存。

6、配方6

制备过程如下：

1)按照表1称取乳糖酶、奶粉、瓜尔胶置于适宜容器内，干混均匀后加少量水搅拌均匀；

3)将2)所得产品脱气；

4)将3)所得产品分装于模具中，置于-60℃冰箱中预冻5min；

6)铝塑袋密封保存。

7、配方7

制备过程如下：

1)按照表1称取乳糖酶、奶粉、黄原胶置于适宜容器内，干混均匀后加少量水搅拌均匀；

3)将2)所得产品脱气；

4)将3)所得产品分装于模具中，置于-60℃冰箱中预冻5min；

6)铝塑袋密封保存。

8、配方8

制备过程如下：

1)按照表1称取乳糖酶、奶粉、海藻糖置于适宜容器内，干混均匀后加少量水搅拌均匀；

3)将2)所得产品脱气；

4)将3)所得产品分装于模具中，置于-60℃冰箱中预冻5min；

6)铝塑袋密封保存。

实施例2：检验

1、外观

(1)评价方法

将包装打开后，对实施例1所制备的配方1-8口服冻干片进行目测观察。3 名实验人员目测后进行评价，取平均等级而得。

(2)评价等级划分：

1)“+++++”：表面平整光洁，色泽均匀，边缘整齐，无融化塌陷。

2)“++++”：色泽均匀，边缘整齐，无融化塌陷，但表面粗糙。

3)“+++”：色泽不均匀，边缘裂边，融化塌陷，上述缺陷项出现其中任意1 项的均划为此等级。

4)“++”：色泽不均匀，边缘裂边，融化塌陷，上述缺陷项出现其中任意2 项的均划为此等级。

5)“+”：色泽不均匀，边缘裂边，融化塌陷。

2、崩解

(1)评价方法：

分别取实施例1所制备的配方1-8产品1片，置10ml烧杯中(预先加入 2ml水，温度为37±1℃)，用秒表开始计时，直到药片完全崩解，记录完全崩解的时间；崩解后的药液应能全部通过710μm筛网，必要时用滴管滴水冲洗筛网，用水量不得超过5ml。按此方法检查6片并进行评价，取平均等级而得。

(2)评价等级划分：

1)“+++++”：崩解完成的时间t≤10s，崩解后的药液能全部通过710μm筛网。

2)“++++”：崩解完成的时间10s<t≤20s，崩解后的药液能全部通过710μm 筛网。

3)“+++”：崩解完成的时间20s<t≤30s，崩解后的药液能全部通过710μm筛网。

4)“++”：崩解完成的时间30s<t≤60s，崩解后的药液能全部通过710μm筛网。

5)“+”：崩解完成的时间t>60s或崩解后的药液不能全部通过710μm筛网。

3、口感

(1)评价方法：

将实施例1所制备的配方1-8产品包装打开，取出冻干片，置于舌上，不要咀嚼，不用水送服，直到药片完全崩解后将口腔内全部悬浮物吐出。3名实验人员口尝后进行评价，取平均等级而得。

2.评价等级划分：

1)“+++++”：无苦，无麻舌，无刺激，无异味，无沙砾感，甜度适中。

2)“++++”：无苦，无麻舌，无刺激，无异味，沙砾感和甜度两项中有任意 1项不符合“+++++”中的要求。

3)“+++”：苦、麻舌、刺激、异味四项中有出现其中任意1项的均划为此等级。

4)“++”：苦、麻舌、刺激、异味四项中出现其中任意2-3项的均划为此等级。

5)“+”：苦、麻舌、刺激、异味。

结果如表1所示。

表1配方1-8及其检测结果

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换等，均应包含在本发明的保护范围之内。

本发明中描述的前述实施例和方法可以基于本领域技术人员的能力、经验和偏好而有所不同。

本发明中仅按一定顺序列出方法的步骤并不构成对方法步骤顺序的任何限制。

Claims

1.一种含乳糖酶的组合物，其包含以下原料：乳糖酶20-40份，奶粉40-70份，碳水化合物类原料0.01-1份，助悬剂0.1-10份。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述助悬剂选自：卡拉胶、果胶、槐豆胶、瓜尔胶、黄原胶和海藻糖中的一种或多种；特别是选自：卡拉胶、果胶、槐豆胶、瓜尔胶中的一种或多种，更特别是选自：卡拉胶、果胶、瓜尔胶中的一种或多种；优选地，所述助悬剂为瓜尔胶。

3.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述碳水化合物类原料为绵白糖。

4.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物包含以下重量份数的原料：乳糖酶29份，奶粉53.9份，碳水化合物类原料0.05份，助悬剂0.5份。

5.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物包含以下重量份数的原料：乳糖酶29份，奶粉53.9份，绵白糖0.05份，瓜尔胶0.5份。

6.如权利要求1-5任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物为冻干闪释片。

7.一种权利要求1-6任一项所述的组合物的制备方法，其包括冻干闪释的步骤；

优选地，所述冻干闪释包括固体分散、低温冷冻和冷冻干燥步骤。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述固体分散步骤包括：将所述组合物的原料干混，加入溶剂，混合。

9.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述低温冷冻步骤包括：将经过固体分散步骤的原料的混合物在-80～-40℃下冷冻1-10分钟；

优选地，所述低温冷冻包括：将经过固体分散步骤的原料的混合物分装于模具中，在-60℃下冷冻5分钟。

10.如权利要求7-9任一项所述的制备方法，其特征在于，所述冷冻干燥步骤包括三个阶段：阶段一，将经过低温冷冻的原料的混合物在-30～-20℃下冷冻干燥1-24小时；阶段二，在1-24小时内由-30～-20℃逐渐升温至20-30℃；阶段三，在20-30℃保温1-24小时；

优选地，所述冷冻干燥步骤包括：将经过低温冷冻的原料混合物在-25℃下冷冻干燥5.5小时，在3.5小时内由-25℃升温至25℃，在25℃下保温2小时。

11.一种权利要求1-6任一项所述的组合物在制备治疗乳糖不耐受的药物中的应用；

优选地，所述乳糖不耐受的患者为哺乳动物；

优选地，所述哺乳动物为人类，特别是儿童，如婴幼儿。

12.一种治疗乳糖不耐受的药物，其包含权利要求6所述的组合物，所述组合物密封包装于双铝膜腔内。