CN114231451A - 一株高效降解双酚a的耐盐芽孢杆菌及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌，所述菌株的名称为：Bacillus sp.HYH‑S2227，分类名称为：芽孢杆菌(Bacillus sp.)，保藏编号为：CGMCC No.23771，保藏日期：2021年11月10日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本发明芽孢杆菌能够实现从高盐废水中高效去除BPA污染物，利用该菌株可以实现在6小时内100％去除废水中BPA污染物，可以预计Bacillus sp.HYH‑S2227能够广泛的应用在各种环境中的BPA有机污染物去除过程。
Description
技术领域
本发明属于微生物污染物降解和环境治理技术领域，尤其是一种高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌及其应用。
背景技术
双酚A(Bisphenol A，BPA)广泛应用于许多行业，主要被用作各种消费品的增塑剂，包括洗涤剂、苯酚树脂、环氧树脂、聚碳酸酯、聚酯、聚丙烯酸酯、塑料包装材料和食品罐头上的漆涂层。在过去的几十年里，随着石化工业的发展，人们对BPA的需求和产量都逐年增加。然而BPA在环境中的施放对人类的健康构成了巨大的隐患。BPA是一种已知的内分泌干扰物，它通过与许多生物体中的雄激素或雌激素类似物与激素受体结合，对发育或生殖功能造成不利影响。由于人体内的荷尔蒙水平是以生物活性浓度存在的，因此即使在低剂量下接触这些外源性内分泌干扰物也会扰乱人体内分泌系统的正常功能。
在石化工业，以BPA为原料生产环氧树脂、聚碳酸酯塑料的过程中，伴随产生的BPA工业废水往往具有较高的盐浓度。因此，高盐废水中BPA的去除技术是目前环境保护和治理领域的研究热点。现有的高盐废水中有机物(包含BPA)的去除技术主要包括：吸附法(Chemosphere.2014,107:249-256)、化学去除法(Green Chem.2017,19:4234-4262)、光催化降解法(J Environ Manage.2018；213:189-205)、酶法(Bioresour Technol.2020,306:123169)生物降解法(Appl Microbiol Biotechnol.2013,97:5681-9.)。在这些技术中，生物降解法与其它方法相比成本更低、对环境的破坏少，因此成为最有效的有机物去除技术。很多微生物能够直接代谢BPA，在BPA的生物降解过程中发挥着重要的作用。据报道，已经从土壤、污泥、河流、海水、渗滤液、废水和植物根际中分离出多种降解BPA的细菌，但是这些细菌大多不能耐受高盐度，在高盐度环境中不能有效去除BPA污染物。少数细菌，比如Alcaligenes faecalis BPAN5、Sphingomonas sp.Strain BP-7，具有耐盐特性，但是它们在高盐环境下去除BPA的效率低。在高盐度环境中，需要7-15天的时间才能达到100％的BPA去除率(Desalination andWater Treatment 2020,189:276–282)(Biosci.Biotechnol.Biochem.2007,71:51–57)。
发明内容
本发明目的在于克服现有技术中的生产原料昂贵、毒性较大、步骤繁琐等不足之处，提供一种高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌及其应用。
本发明解决技术问题所采用的技术方案是：
一株高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌，所述菌株的名称为：Bacillus sp.HYH-S2227，分类名称为：芽孢杆菌(Bacillus sp.)，保藏编号为：CGMCC No.23771，保藏日期：2021年11月10日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
进一步地，所述菌株是从天津市渤海湾海滩污泥中分离得到的。
进一步地，所述芽孢杆菌对于pH＝6-9、盐度范围＝0-7.5％的含BPA废水，在28℃-33℃培养条件下，在添加无机盐培养基组分和0.1％的酵母提取物时，菌株在6小时内能将10mg/L的BPA完全去除。
如上所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌在废水中双酚A的生物降解去除方面中的应用。
进一步地，所述芽孢杆菌适用于盐度范围在0-10％、pH＝5-9的BPA废水，所述生物降解时的处理温度为28℃-33℃。
进一步地，所述芽孢杆菌废水中双酚A的生物降解去除时，在接种该芽孢杆菌的同时，添加无机盐培养基组分(Na2HPO4(2.3g/L)、KH2PO4(2.3g/L)、MgSO4(0.097g/L)、CaCl2(0.015g/L)、(NH4)2SO4(0.5g/L)、ZnSO4·7H2O(0.021g/L)、H3BO3(0.011g/L)、MnCl2·4H2O(0.005g/L)、FeSO4·7H2O(0.005g/L)、CoCl2·6H2O(0.0017g/L)、CuSO4·5H2O(0.0016g/L)、Na2MoO4·2H2O(0.0015g/L)、EDTA(0.051g/L))和0.1％酵母提取物。
如上所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌在双酚A的生物降解去除方面中的应用。
如上所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌在土壤中双酚A的生物降解去除方面中的应用。
如上所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌在环境中BPA类似物及除BPA类似物之外的有机污染物的去除方面中的应用。
本发明取得的有益效果是：
1、本发明芽孢杆菌能够实现从高盐废水中高效去除BPA污染物，利用该菌株可以实现在6小时内100％去除废水中BPA污染物。由于Bacillus sp.HYH-S2227对pH、盐度都具有宽泛的耐受范围，在工业高盐废水中BPA的去除效果明显优于已有技术，可以预计Bacillus sp.HYH-S2227能够广泛的应用在各种环境中的BPA有机污染物去除过程。
2、本发明经过富集培养，从渤海湾海滩污泥中分离得到一株能够降解BPA的耐盐菌，鉴定为芽孢杆菌属细菌，命名为Bacillus sp.HYH-S2227。该菌株的最适生长温度为28℃-33℃，在pH范围(6-9)、盐度范围(0-7.5％)生长良好。在实验室合成培养基中，经过6小时震荡培养，Bacillus sp.HYH-S2227能够实现对BPA(<20mg/L)的完全降解；在实际的高盐工业废水中，Bacillus sp.HYH-S2227也实现了类似的效果。说明菌株Bacillus sp.HYH-S2227在处理高盐BPA工业废水时能够发挥较强的降解性能，可以将其应用在高盐BPA工业废水的处理中。
3、本发明芽孢杆菌对于pH＝6-9、盐度范围＝0-7.5％的含BPA废水，在28℃-33℃培养条件下，在添加无机盐培养基组分和0.1％的酵母提取物时，菌株在6小时内能将废水中的BPA完全去除。
附图说明
图1为本发明中菌株HYH-S2227的照片图；其中，a为菌株HYH-S2227在LB培养基中的生长菌落图，b为菌株HYH-S2227在电镜下的形态结构图；
图2为本发明中菌株在28℃条件下，在含有10mg/LBPA的无机盐培养基中，在菌株接种与否的情况下BPA降解的情况图；
图3为本发明中菌株HYH-S2227在23℃、28℃、33℃、37℃、42℃条件下，在含有10mg/LBPA的无机盐培养基中的菌体生长和BPA降解情况图；其中，a为菌体生长情况，b为BPA降解情况；
图4为本发明中菌株HYH-S2227在不同pH(4、5、6、7、8、9)条件下，在含有10mg/LBPA的无机盐培养基中菌体生长和BPA的降解情况图；其中，a为菌体生长情况，b为BPA降解情况；
图5为本发明中菌株HYH-S2227在不同盐浓度(0％、2.5％、5％、7.5％、10％)条件下，在含有10mg/L BPA的无机盐培养基中菌体生长和BPA的降解情况图；其中，a为菌体生长情况，b为BPA降解情况；
图6为本发明中菌株HYH-S2227在不同初始BPA浓度(5、10、20mg/l)条件下，12小时内菌体生长和BPA降解情况图；其中，a为菌体生长情况，b为BPA降解情况；
图7为本发明中菌株HYH-S2227在实际高盐工业废水中12小时内去除BPA的情况图。
具体实施方式
为更好理解本发明，下面结合实施例对本发明做进一步地详细说明，但是本发明要求保护的范围并不局限于实施例所表示的范围。
本发明中所使用的原料，如无特殊说明，均为常规市售产品，本发明中所使用的方法，如无特殊说明，均为本领域常规方法，本发明所使用的各物质质量均为常规使用质量。
一株高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌，所述菌株的名称为：Bacillus sp.HYH-S2227，分类名称为：芽孢杆菌(Bacillus sp.)，保藏编号为：CGMCC No.23771，保藏日期：2021年11月10日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
较优地，所述菌株是从天津市渤海湾海滩污泥中分离得到的。
较优地，所述芽孢杆菌对于pH＝6-9、盐度范围＝0-7.5％的含BPA废水，在28℃-33℃培养条件下，在添加无机盐培养基组分和0.1％的酵母提取物时，菌株在6小时内能将10mg/L的BPA完全去除。
如上所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌在废水中双酚A的生物降解去除方面中的应用。
较优地，所述芽孢杆菌适用于盐度范围在0-10％、pH＝5-9的BPA废水，所述生物降解时的处理温度为28℃-33℃。
较优地，所述芽孢杆菌废水中双酚A的生物降解去除时，在接种该芽孢杆菌的同时，添加无机盐培养基组分(Na2HPO4(2.3g/L)、KH2PO4(2.3g/L)、MgSO4(0.097g/L)、CaCl2(0.015g/L)、(NH4)2SO4(0.5g/L)、ZnSO4·7H2O(0.021g/L)、H3BO3(0.011g/L)、MnCl2·4H2O(0.005g/L)、FeSO4·7H2O(0.005g/L)、CoCl2·6H2O(0.0017g/L)、CuSO4·5H2O(0.0016g/L)、Na2MoO4·2H2O(0.0015g/L)、EDTA(0.051g/L))和0.1％酵母提取物，可显著提升BPA去除效率。
如上所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌在双酚A的生物降解去除方面中的应用。
如上所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌在土壤中双酚A的生物降解去除方面中的应用。
如上所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌在环境中BPA类似物及除BPA类似物之外的有机污染物的去除方面中的应用。
具体地，相关制备及检测如下：
实施例1：菌株的分离和鉴定
1.菌株的分离
营养肉汤培养基：蛋白胨(10g/L)、牛肉浸粉(3g/L)、氯化钠(5g/L)。
无机盐液体培养基(MSM4)：(Na2HPO4(2.3g/L)、KH2PO4(2.3g/L)、MgSO4(0.097g/L)、CaCl2(0.015g/L)、(NH4)2SO4(0.5g/L)、ZnSO4·7H2O(0.021g/L)、H3BO3(0.011g/L)、MnCl2·4H2O(0.005g/L)、FeSO4·7H2O(0.005g/L)、CoCl2·6H2O(0.0017g/L)、CuSO4·5H2O(0.0016g/L)、Na2MoO4·2H2O(0.0015g/L)、EDTA(0.051g/L))。
无机盐固体培养基：MSM4添加1.5％(w/v)琼脂粉。
采集天津市渤海海滩污泥，将污泥样品用海水稀释((m/v)5％)，按2％的接种量接种于含有5mg/L BPA的营养肉汤培养基。采用梯度压力驯化法，每隔4天以2％的接种量依次转接到含有10、20、30、40mg/L和50mg/L的BPA营养肉汤培养基中，以相同条件下继续培养。前期驯化完成后，采用稀释涂布平板法，在含有50mg/LBPA的无机盐固体平板上进行涂布。待菌体生长后，选择生长良好、形态不同的单一菌落，采用平板划线法，在含有50mg/LBPA的无机盐固体平板上进行纯化，直至获得单一菌落。将分离得到的单菌落接种至含有20mg/LBPA的MSM4液体培养基中(添加0.1％(w/v)酵母提取物)，28℃、200rpm震荡培养4天，然后采用HPLC法进行BPA含量检测，观察不同菌株的降解能力。HPLC检测流程如下：取1ml样品，12000rpm离心3min取上清，并用0.22μm的滤膜过滤后用于HPLC法检测。HPLC法检测条件为：色谱柱：Ultimate C18。流动相：乙腈/水＝体积比40/60，流动相使用前过0.22μm滤膜并脱气20min。检测波长：275nm。柱温：40℃。流速：1.0mL/min。进样量：20μL。BPA标品的保留时间为14.66min。其中一株菌(编号为HYH-S2227)的培养基中检测不到BPA的残留，呈现出较强的BPA去除能力。
2.菌株的形态特征
菌株HYH-S2227在LB平板上呈圆形菌落，边缘光滑平整，且表面中心略凸起有褶皱，菌落呈淡黄色，不透明，室温下生长良好(图1a)。电镜下观察，细胞呈杆状，单个，无鞭毛(图1b)。
3.菌株的16s DNA鉴定
将分离出的HYH-S2227菌株接种到LB培养基(培养基组分：胰蛋白胨(10g/L)、酵母提取物(5g/L)、NaCl(10g/L))中，28℃、200rpm条件下过夜培养，提取基因组DNA，采用引物27F和1541R(27F:AGAGTTTGATCCTGGCTCAG1541R:AAGGAGGTGATTCCAGCC)进行16S rDNA的PCR扩增，PCR扩增条件如下：反应体系体积50μl：21μl ddH2O、0.5μl基因组DNA模板、25μl DNA聚合酶Rapid Taq2×、上下游引物各2μl。反应条件：(1)95℃3min，(2)95℃15sec，55℃15sec，72℃30sec，35个循环，(3)72℃5min，(4)4℃hold。扩增产物送华大基因公司进行测序，序列如SEQ ID No.1所示。序列分析表明该菌株属于芽孢杆菌属细菌，因此命名为Bacillus sp.HYH-S2227。
实施例2：菌株HYH-S2227对双酚A的降解
将菌株HYH-S2227划线到LB固体平板上活化，约24h后将长出的单菌落接种至LB液体培养基中，28℃、200rpm条件下过夜培养获得种子液，种子液OD600约为2.1左右。用MSM4培养基洗菌体两遍，按照3％的接种量接种到含有10mg/L BPA的MSM4(添加0.1％(w/v)酵母提取物)培养基中。28℃、200rpm条件下震荡培养，每隔3h取样测定OD600和BPA的浓度。
结果如图2所示，菌株HYH-S2227在含有10mg/LBPA的MSM4培养基中生长良好，6h能够完全降解BPA。说明菌株HYH-S2227是一种高效降解BPA的菌株，在含BPA废水处理中具有较高的应用价值。
实施例3：不同温度对菌株HYH-S2227 BPA降解能力的影响
将菌株HYH-S2227划线到LB固体平板上活化，约24h后将长出的单菌落接种至LB液体培养基中，28℃、200rpm条件下过夜培养获得种子液。用MSM4培养基洗菌体两遍，按照3％的接种量接种到含10mg/lBPA的50mlMSM4(添加0.1％(w/v)酵母提取物)培养基中，在23℃、28℃、33℃、37℃、42℃，200rpm条件下震荡培养，每隔3h取样测定OD600和BPA的浓度。
结果如图3所示，菌株HYH-S2227在28℃和33℃条件下生长较好，并且6h都能够完全降解10mg/lBPA，在其它温度下，培养12h后的降解情况为49.7％(23℃)、70.7％(37℃)、46.4％(42℃)。表明菌株HYH-S2227的最适生长和降解温度范围为28℃-33℃。
实施例4：不同pH对菌株HYH-S2227 BPA降解能力的影响
分别配制不同pH(4-9)(采用HCl和NaOH调节pH)的MSM4(添加0.1％(w/v)酵母提取物)液体培养基，灭菌备用。将菌株HYH-S2227划线到LB固体平板上活化，约24h后将长出的单菌落接种至LB液体培养基中，28℃、200rpm条件下过夜培养获得种子液。用MSM4培养基洗菌体两遍，按照3％的接种量接种到含10mg/LBPA的MSM4(添加0.1％(w/v)酵母提取物)培养基中，在28℃、200rpm条件下震荡培养，每隔3h取样测定OD600和BPA的浓度。
结果如图4所示，菌株S2227在pH为6-9时生长情况较好，并且6h能够完全降解10mg/LBPA，在PH＝5时12h能够完全降解10mg/L BPA，表明该菌株在中性及偏碱性条件下都能够高效降解BPA，该菌株对PH的耐受范围宽泛。
实施例5：不同盐浓度对菌株HYH-S2227 BPA降解能力的影响
分别配制添加不同浓度NaCl(2.5％、5％、7.5％、10％)的MSM4(添加0.1％(w/v)酵母提取物)液体培养基，灭菌备用。将菌株HYH-S2227划线到LB固体平板上活化，约24h后将长出的单菌落接种至LB液体培养基中，28℃、200rpm条件下过夜培养获得种子液。用MSM4培养基洗菌体两遍，按照3％的接种量接种到含10mg/L BPA的MSM4(添加0.1％(w/v)酵母提取物)培养基中，在28℃、200rpm条件下震荡培养，每隔3h取样测定OD600和BPA的浓度。
结果如图5所示，菌株HYH-S2227在含NaCl浓度为7.5％以内的MSM4培养基中均能生长，且9h能够完全降解10mg/LBPA，在Nacl浓度为2.5％时6h能够完全降解10mg/L BPA。培养12h后的降解情况为100％(0％NaCl)、100％(2.5％NaCl)、100％(5％NaCl)、100％(7.5％NaCl)、78％(10％NaCl)。所以该菌株的耐盐度较高，能够在含BPA的高盐废水处理中发挥较好的作用。
实施例6：BPA的不同初始浓度对芽孢杆菌HYH-S2227降解BPA能力的影响
分别配制添加不同浓度BPA(5、10、20mg/l)的MSM4(添加0.1％(w/v)酵母提取物)液体培养基，灭菌备用。将菌株HYH-S2227划线到LB固体平板上活化，约24h后将长出的单菌落接种至LB液体培养基中，28℃、200rpm条件下过夜培养获得种子液。用MSM4无机盐培养基洗菌体两遍，按照3％的接种量接种到含不同浓度BPA的MSM4(添加0.1％(w/v)酵母提取物)液体培养基中，在28℃、200rpm条件下震荡培养，培养12小时后，取样测定OD600和BPA的浓度。
结果如图6所示，随着BPA浓度的增加，菌体生物量变小，表明BPA对菌株生长有一定的抑制作用。但是不同浓度的BPA对降解效率没有显著影响，培养12h后即使对于20mg/L的BPA也能够完全降解。
实施例7：实际高盐工业废水中BPA的去除
为了观察菌株HYH-S2227对实际工业废水BPA的去除能力，本发明选择了环氧树脂工业废水。该工业废水各项参数为：pH＝7.5，COD＝507mg/L，溶解性固体总量(TDS)约为30000mg/L，氨氮含量3mg/L，总磷含量2.3mg/L，BPA含量约为6mg/L。实验分为三组：(1)单独使用废水；(2)在废水中加入菌株HYH-S2227；(3)在废水中添加MSM4组分(Na2HPO4(2.3g/L)、KH2PO4(2.3g/L)、MgSO4(0.097g/L)、CaCl2(0.015g/L)、(NH4)2SO4(0.5g/L)、Trace elements(1ml/L))和酵母提取物(1g/L)并接种菌株HYH-S2227。接种流程如下：将菌株HYH-S2227划线到LB固体平板上活化，约24h后将长出的单菌落接种至LB液体培养基中，28℃、200rpm条件下过夜培养获得种子液，种子液OD600约为2.1左右。用MSM4无机盐培养基洗菌体两遍，按照3％的接种量接种，28℃、200rpm条件下震荡培养，每隔3h取样测定OD600和BPA的浓度。
结果如图7所示，结果表明，菌株HYH-S2227在添加MSM4组分和酵母提取物的废水中生长良好，并且12h能够完全降解废水中的BPA。在废水中直接接种菌株HYH-S2227，培养12h后BPA降解率达到21％。说明菌株HYH-S2227在添加MSM4组分和酵母提取物的废水中，具有较强的BPA降解性能。
本发明中使用的序列如下：
Seq ID No.1 16S rDNA：
GGCTGGCTCCATAAAGGTTACCTCACCGACTTCGGGTGTTGCAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCAGCTTCACGCAGTCGAGTTGCAGACTGCGATCCGAACTGAGAACAGATTTGTGGGATTGGCTAAACCTTGCGGTCTCGCAGCCCTTTGTTCTGTCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCACCTTAGAGTGCCCAACTGAATGCTGGCAACTAAGATCAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACTCTGTCCCCGAAGGGAAAGCCCTATCTCTAGGGTTGTCAGAGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGTCTTGCGACCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCAGCACTAAGGGGCGGAAACCCCCTAACACTTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTCGCTCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTCCACATCTCTACGCATTTCACCGCTACACGTGGAATTCCACTCTCCTCTTCTGCACTCAAGTTTCCCAGTTTCCAATGACCCTCCCCGGTTGAGCCGGGGGCTTTCACATCAGACTTAAGAAACCGCCTGCGAGCCCTTTACGCCCAATAATTCCGGACAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTGGTTAGGTACCGTCAAGGTGCAAGCAGTTACTCTTGCACTTGTTCTTCCCTAACAACAGAGCTTTACGATCCGAAAACCTTCATCACTCACGCGGCGTTGCTCCGTCAGACTTTCGTCCATTGCGGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTACGCATCGTCGCCTTGGTGAGCCGTTACCTCACCAACTAGCTAATGCGCCGCGGGTCCATCTGTAAGTGACAGCCGAAACCGTCTTTCATCCTTGAACCATGCGGTTCAAGGAACTATCCGGTATTAGCTCCGGTTTCCCGGAGTTATCCCAGTCTTACAGGCAGGTTACCCACGTGTTACTCACCCGTCCGCCGCTAACATCCGGGAGCAAGCTCCCTTC。
尽管为说明目的公开了本发明的实施例，但是本领域的技术人员可以理解：在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内，各种替换、变化和修改都是可能的，因此，本发明的范围不局限于实施例所公开的内容。
序列表
<110> 天津科技大学
<120> 一株高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌及其应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1398
<212> DNA
<213> 芽孢杆菌HYHS2227的基因序列(Unknown)
<400> 1
ggctggctcc ataaaggtta cctcaccgac ttcgggtgtt gcaaactctc gtggtgtgac 60
gggcggtgtg tacaaggccc gggaacgtat tcaccgcggc atgctgatcc gcgattacta 120
gcgattccag cttcacgcag tcgagttgca gactgcgatc cgaactgaga acagatttgt 180
gggattggct aaaccttgcg gtctcgcagc cctttgttct gtccattgta gcacgtgtgt 240
agcccaggtc ataaggggca tgatgatttg acgtcatccc caccttcctc cggtttgtca 300
ccggcagtca ccttagagtg cccaactgaa tgctggcaac taagatcaag ggttgcgctc 360
gttgcgggac ttaacccaac atctcacgac acgagctgac gacaaccatg caccacctgt 420
cactctgtcc ccgaagggaa agccctatct ctagggttgt cagaggatgt caagacctgg 480
taaggttctt cgcgttgctt cgaattaaac cacatgctcc accgcttgtg cgggcccccg 540
tcaattcctt tgagtttcag tcttgcgacc gtactcccca ggcggagtgc ttaatgcgtt 600
agctgcagca ctaaggggcg gaaaccccct aacacttagc actcatcgtt tacggcgtgg 660
actaccaggg tatctaatcc tgttcgctcc ccacgctttc gctcctcagc gtcagttaca 720
gaccagagag tcgccttcgc cactggtgtt cctccacatc tctacgcatt tcaccgctac 780
acgtggaatt ccactctcct cttctgcact caagtttccc agtttccaat gaccctcccc 840
ggttgagccg ggggctttca catcagactt aagaaaccgc ctgcgagccc tttacgccca 900
ataattccgg acaacgcttg ccacctacgt attaccgcgg ctgctggcac gtagttagcc 960
gtggctttct ggttaggtac cgtcaaggtg caagcagtta ctcttgcact tgttcttccc 1020
taacaacaga gctttacgat ccgaaaacct tcatcactca cgcggcgttg ctccgtcaga 1080
ctttcgtcca ttgcggaaga ttccctactg ctgcctcccg taggagtctg ggccgtgtct 1140
cagtcccagt gtggccgatc accctctcag gtcggctacg catcgtcgcc ttggtgagcc 1200
gttacctcac caactagcta atgcgccgcg ggtccatctg taagtgacag ccgaaaccgt 1260
ctttcatcct tgaaccatgc ggttcaagga actatccggt attagctccg gtttcccgga 1320
gttatcccag tcttacaggc aggttaccca cgtgttactc acccgtccgc cgctaacatc 1380
cgggagcaag ctcccttc 1398
Claims (9)
1.一株高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌，其特征在于：所述菌株的名称为：Bacillussp.HYH-S2227，分类名称为：芽孢杆菌(Bacillus sp.)，保藏编号为：CGMCC No.23771，保藏日期：2021年11月10日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.根据权利要求1所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌，其特征在于：所述菌株是从天津市渤海湾海滩污泥中分离得到的。
3.根据权利要求1或2所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌，其特征在于：所述芽孢杆菌对于pH＝6-9、盐度范围＝0-7.5％的含BPA废水，在28℃-33℃培养条件下，在添加无机盐培养基组分和0.1％的酵母提取物时，菌株在6小时内能将10mg/L的BPA完全去除。
4.如权利要求1至3任一项所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌在废水中双酚A的生物降解去除方面中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述芽孢杆菌适用于盐度范围在0-10％、pH＝5-9的BPA废水，所述生物降解时的处理温度为28℃-33℃。
6.根据权利要求4或5所述的应用，其特征在于：所述芽孢杆菌废水中双酚A的生物降解去除时，在接种该芽孢杆菌的同时，添加无机盐培养基组分(Na2HPO4(2.3g/L)、KH2PO4(2.3g/L)、MgSO4(0.097g/L)、CaCl2(0.015g/L)、(NH4)2SO4(0.5g/L)、ZnSO4·7H2O(0.021g/L)、H3BO3(0.011g/L)、MnCl2·4H2O(0.005g/L)、FeSO4·7H2O(0.005g/L)、CoCl2·6H2O(0.0017g/L)、CuSO4·5H2O(0.0016g/L)、Na2MoO4·2H2O(0.0015g/L)、EDTA(0.051g/L))和0.1％酵母提取物。
7.如权利要求1至3任一项所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌在双酚A的生物降解去除方面中的应用。
8.如权利要求1至3任一项所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌在土壤中双酚A的生物降解去除方面中的应用。
9.如权利要求1至3任一项所述的高效降解双酚A的耐盐芽孢杆菌在环境中BPA类似物及除BPA类似物之外的有机污染物的去除方面中的应用。
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| CN202111533830.7A Active CN114231451B (zh) | 2021-12-15 | 2021-12-15 | 一株高效降解双酚a的耐盐芽孢杆菌及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114231451B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115786211A (zh) * | 2022-12-16 | 2023-03-14 | 杭州秀川科技有限公司 | 一种用于降解苯胺类物质的复合菌群及其应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006061055A (ja) * | 2004-08-26 | 2006-03-09 | Teijin Chem Ltd | ビスフェノールａの分解微生物および該微生物を用いるビスフェノールａの分解方法 |
| CN102168050A (zh) * | 2011-01-24 | 2011-08-31 | 中国科学院广州地球化学研究所 | 芽孢杆菌gzb及其在降解环境内分泌干扰物双酚a中的应用 |
-
2021
- 2021-12-15 CN CN202111533830.7A patent/CN114231451B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006061055A (ja) * | 2004-08-26 | 2006-03-09 | Teijin Chem Ltd | ビスフェノールａの分解微生物および該微生物を用いるビスフェノールａの分解方法 |
| CN102168050A (zh) * | 2011-01-24 | 2011-08-31 | 中国科学院广州地球化学研究所 | 芽孢杆菌gzb及其在降解环境内分泌干扰物双酚a中的应用 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115786211A (zh) * | 2022-12-16 | 2023-03-14 | 杭州秀川科技有限公司 | 一种用于降解苯胺类物质的复合菌群及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114231451B (zh) | 2023-07-21 |
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