CN114128668A - 一种提高水牛夏季同期发情-定时输精效果的处理方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种提高水牛夏季同期发情‑定时输精效果的处理方法，在日粮中添加一定量的辣椒碱连续喂养产后的水牛一段时间后，进行同期发情‑定时输精。本发明的处理方法，有效提高夏季产后水牛同期发情率、配种率及受胎率，并能提高水牛产奶量和早期胚胎存活率，且不需要检测发情，定时输精，操作方便。
Description
技术领域
本发明属于畜牧业水牛繁殖技术领域，具体涉及一种提高水牛夏季同期发情-定时输精效果的处理方法。
背景技术
水牛是季节性发情的繁殖动物，主要分布于热带和亚热带地区，其繁殖性能容易受到环境和气候的影响。水牛生活在这些地方，所以繁殖性能受到这些因素的影响，水牛虽然可以全年发情，但是配种受胎率比奶牛低，尤其是夏季，主要原因是夏天热应激导致安静发情，假发情，发情排卵不规律，发情症状不明显，发情鉴定比较难，很难把握排卵时间，发情持续时间比较长，产后乏情期长，很难预算排卵时间，因此很难掌握适时输精时机，致使配种受胎率较低，性成熟的时间比较晚、发情持续的时间较长(4-64h)(Ohashi etal.1994，Baruselli et al.2001)、产犊间隔较长，发情症状不明显，发情检测相对较难(30-40％)(Singh et al.1984，Barkawi et al.1993，De Rensis et al.2005)。此外，夏季热应激会引起水牛采食量下降，产奶量下降，食欲降低，导致机体能量供需不平衡，产后能量供需不平衡状态会直接影响繁殖性能。
水牛的繁殖性能较低，主要表现为发情表现不明显，较高的卵泡闭锁率和较低的受胎率(Campanile et al.2010，Perera 2011)。人为调控卵巢活动和控制排卵时间，通过生殖激素不同组合，人为调控卵巢活动和控制排卵时间，即通过同步发情和排卵方案，提高水牛的配种受胎率。同期发情技术的应用还可以提高水牛在低繁殖季节或乏情季节水牛的配种受胎率和同期发情效果。许多研究报道，据(Dirandeh et al.2015)研究报道，在夏季选择1374头经产母水牛采用Double-Ovsynch与Presych-Ovsynch同期发情方案进行同期发情处理，结果发现，Double-Ovsynch同期发情方法的发情率和排卵最大直径分别为87.2％，16.1±0.3mm，Presych-Ovsynch方案的同期排卵率和排卵最大直径分别为72.1％，15.2±0.12mm。(Pursley et al.1998)研究报道，采用GPG同期发情方案进行同期发情处理，第二次GnRH注射后不同的时间定时输精，结果发现，第二次注射GnRH后8、16、24h时定时输精受胎率差异不显著。Ovsynch-TAI同期发情方案是在家畜繁殖中已广泛应用，同期发情效果相对较好，但在夏季同期发情效果还不理想，表现为夏季的情期受胎率显著下降，胚胎早期死亡率升高，推测是因为热应激引起血液循环于体表，致使循环于消化、生殖、泌乳系统的血液供应不足，进而影响消化、生殖和泌乳，会导致胚胎早起死亡率升高，情期受胎率显著下降。
夏季水牛产奶量和配种受胎率更低，主要是夏季水牛不发情，安静发情，卵泡囊肿率高，产后乏情期长，产后子宫和卵巢机能恢复比较晚，产后子宫炎症和子宫内膜炎较多，发情持续时间比较长，很难预算排卵时间，因此，研究杂交水牛的卵泡发育规律和发情排卵调控技术，对于提高水牛受配率和受胎率，进而提高繁殖率、加快品种改良具有非常重要的意义。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供一种提高水牛夏季同期发情-定时输精效果的处理方法
为实现上述目的，本发明采用以下的技术方案为：
一种提高水牛夏季同期发情-定时输精效果的处理方法，该方法对产后的水牛在日粮中添加辣椒碱进行连续喂养一段时间后，进行同情发情-定时输精。
如上所述的处理方法，优选地，所述产后水牛为产后15～25天的水牛，辣椒碱按每kg TMR(Total Mixed Rations(全混合日粮)日粮中添加3～9mg后作为日粮。
如上所述的处理方法，优选地，辣椒碱喂养时间为25～35天。
如上所述的处理方法，优选地，按每kgTMR日粮中添加6mg的辣椒碱作为日粮，辣椒碱喂养时间为30天。
如上所述的处理方法，优选地，所述同情发情-定时输精包括如下步骤：
S1、向健康的处于发情周期的母水牛肌肉注射促性腺素释放激素；这一天记为水牛同期发情处理的第0天，
S2、水牛同期发情处理后的第7天，肌肉注射氯前列醇钠(PGF2ɑ)；
S3、水牛同期发情处理后的第9天，第二次注射促性腺素释放激素(GnRH)，同时注射米非司酮以促进排卵；
S4、水牛同期发情处理后的第10天，注射米非司酮后24小时，实施人工输精；
S5、水牛同期发情处理后的第15天，即人工输精后第5天肌肉注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)，以促进早期胚胎存活；
S6、水牛同期发情处理后的第45天即在人工输精后第35天，用B超确定牛只妊娠情况。
如上所述的处理方法，优选地，在步骤S1中，促性腺素释放激素按400μg/头进行。
如上所述的处理方法，优选地，在步骤S2中，氯前列醇钠按0.5mg/头进行。
如上所述的处理方法，优选地，在步骤S3中，促性腺素释放激素按400μg/头进行，米非司酮按0.4mg/kg体重进行。
如上所述的处理方法，优选地，在步骤S5中，人绒毛膜促性腺激素按2000IU/头进行。
辣椒碱在提高夏季水牛配种受胎率及提高产奶量中的应用。
如上所述的应用，优选地，所述辣椒碱在同期发情处理之前即选择产后的(分娩当天为0天)第20天的奶牛按每公斤TMR日粮中添加3～9mg，连续喂一个月(30天)；在产后第50天即记为奶牛同期发情处理第0天，下午肌肉注射促性腺素释放激素GnRH，第7天下午肌肉注射氯前列醇钠PGF2ɑ，第9天下午第二次肌肉注射促性腺素释放激素GnRH，同时注射米非司酮，第10天下午(注射米非司酮注射后24个小时)进行人工输精，第15天(即人工输精后第5天)对接受配种的牛只肌肉注射人绒毛膜促性腺激素hCG，第45天(即人工输精后第35天)用B超确定牛只妊娠情况。
如上所述的应用，优选地，促性腺素释放激素GnRH的注射剂量为400μg/头；注射米非司酮后24小时，实施人工输精。
如上所述的应用，优选地，米非司酮按0.4mg/kg体重进行；人绒毛膜促性腺激素按2000IU/头进行。
本发明的有益效果在于：
本发明提供的提高水牛夏季同期发情-定时输精效果的处理方法，具体是在日粮中添加辣椒碱对水牛在夏季进行同期发情-定时输精效果的处理方法，在饲料中添加可以促进血液循环的添加剂辣椒碱，可能通过促进消化道、生殖道和泌乳系统的血液循环，提高消化率，促进能量正平衡，进而促进卵泡发育和排卵、促进泌乳，进一步提高情期的受胎率，并能有效提高水牛日产奶量，同时还提高了乳成分中的蛋白质率、乳糖含量及乳脂率。
附图说明
图1为本发明的同期发情定时输精的流程示意图。
图2为杂交水牛补饲不同剂量的辣椒碱对其最大卵泡直径的影响结果。
图3为杂交水牛日粮中补饲不同剂量的辣椒碱采用GPGMH同期发情处理后同期发情第0天到最大卵泡直径卵泡发育规律。
图4为补饲不同剂量的辣椒碱对产奶性能的影响结果。
图5为杂交水牛补饲不同剂量的辣椒碱对其血糖浓度的影响结果。
图6为杂交水牛补饲不同剂量的辣椒碱对其脂蛋白酯酶的影响结果。
图7为杂交水牛补饲不同剂量的辣椒碱对其产谷草转氨酶的影响结果。
具体实施方式
以下实施例用于进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的前提下，对本发明所作的修饰或者替换，均属于本发明的范畴。
若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，除另有规定，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格。
实施例1
为改良现有同期发情方案夏季同期发情效果不佳的问题，同时提高水牛产奶量。进行辣椒碱+同期发情定时输精方案，流程见图1所示，具体选择体况良好的健康围产前期杂交水牛101头，在7月份，选择产后(分娩当天为0天)第20天的母水牛，按年龄、体重、产奶量、胎次等指标在各组均衡分配分成4组，分别饲喂在每公斤TMR日粮中添加0、3、6、9mg辣椒碱的日粮喂一个月(30天)。其中，第一组在产后20天开始，每天按每kg TMR日粮中添加3mg的辣椒碱，从产后20天开始至产后50天，连续补饲30天；第二组在产后20天开始，每天按每kg TMR日粮中添加6mg辣椒碱，从产后20天开始至产后50天，连续补饲30天；第三组在产后20天开始，每天按每kg TMR日粮中添加9mg的辣椒碱，从产后20天开始至产后50天，连续补饲30天；第四组即对照组不添加辣椒碱。产后第50天计为水牛同期发情处理第0天，下午按400μg/头进行肌肉注射GnRH，B超检查从第6天(PGF2ɑ注射前一天)至第12天排卵为止(即第二次注射GnRH后72h)，记录卵泡发育及发情、排卵状况；第7天下午肌肉注射氯前列醇钠PGF2ɑ，按0.5mg/头注射，第9天下午(注射PGF2ɑ后48小时)第二次肌肉注射GnRH(200μg/头)，同时注射米非司酮(按0.4mg/kg体重)，第10天下午(第二次注射GnRH后24小时)进行人工输精，第15天(即人工输精后第5天)对接受配种的牛只肌肉注射hCG(2000IU/头)，第45天(即人工输精后第35天)用B超确定牛只妊娠情况。
1、对不同辣椒碱的添加剂量的各组分别测定水牛卵泡发育和发情持续时间的影响结果，取平均值，结果见表1，并将最大卵泡直径绘制成图如图2所示。
表1杂交水牛补饲不同剂量的辣椒碱对其卵泡发育和发情持续时间的影响
结果说明杂交水牛日粮中添加不同剂量的辣椒碱，第二组(6mg/kg)的最大卵泡直径(13.7±1.5mm)大于其他组(如图2)，但是没有差异显著(p>0.05)。第二组(6mg/kg)第二次GnRH至排卵间隔时间为8.5±2.7h，第二次GnRH至发情间隔时间为23.5±1.4h，发情持续时间为15.3±0.5h，比其他组短，但是没有差异显著(p>0.05)。虽然不同剂量组实验结果差异不显著，但相较于空白对照组(0)，辣椒碱补饲第二组(中剂量6mg/kg)在一定程度上可以促进杂交水牛卵泡发育、延长发情时间，具有一定的实际生产意义。
2、对各组杂交水牛发情率、排卵率、受胎率和卵泡生长速度测定的结果如表2所示。杂交水牛日粮中添加不同剂量的辣椒碱，第一组(3mg/kg)，第二组(6mg/kg)，第三组(9mg/kg)采用GPGMH同期发情处理后同期发情第0天到最大卵泡直径卵泡发育规律见图3，其中，X坐标和y坐标的值都用对数表示。
表2各组杂交水牛补饲不同剂量辣椒碱的发情，排卵，受胎率的结果
结果说明，杂交水牛日粮中添加不同剂量的辣椒碱，第二组(6mg/kg)的杂交水牛发情率为72.0％(18/25)，排卵率为68.0％(16/25)，受胎率为48.0％(12/25)，卵泡生长速度达到1.619mm/day(图3)高于其他剂量组，但是没有显著性差异(p>0.05)，与其它实验组相比卵泡囊肿率(0％)为最低(p<0.05)。根据(图2)说明，第二组(6mg/kg)的卵泡发育比较规律，稳定，发育速度和排卵卵泡最大直径高于其他组，但是没有显著性差异(p>0.05)。
一般夏季产后水牛子宫炎症和子宫内膜炎的发病率比较高，夏季日粮添加辣椒精后，能够促进水牛的血液循环和能量正平衡，促进食欲，改善消化，减少子宫炎症和子宫内膜炎发生率，辣椒精处理的产后母牛没有发现子宫炎症和子宫内膜炎，卵泡囊肿率也大大降低了。
3、杂交水牛日粮中添加辣椒碱采用上述同期发情-定时输精方案对产奶量的结果见表3，结果绘制成图如图4所示。
表3日粮中添加不同剂量辣椒碱后各期杂交水牛的日产奶量
上表的结果说明，杂交水牛产后日粮添加辣椒碱对杂交水牛生产性能的影响发现最初的25天里泌乳量呈现逐渐增加的趋势。其中从产后20天开始在日粮中每天添加6mg/kg(第二组)辣椒碱补饲一个月对奶水牛提高产奶量有更显著的效果。产奶量在日粮添加辣椒碱第20，25天，第二组(6mg/kg)组升高(P>0.05)。日粮中添加辣椒碱第20，25天开始，产奶量产生显著差异，第二组(6mg/kg)产量均显著高于低剂量组(P<0.05)，第一组(3mg/kg)和第三组(9mg/kg)有高于对照组的趋势，和其他组分没有显著差异(P>0.05)，第三组(9mg/kg)有高于第一组(3mg/kg)的趋势。第30天，第二组(6mg/kg)显著高于对照组(P<0.05)，都处理组均高于对照组。在日粮添加辣椒碱第35天后，第二组(6mg/kg)组产奶量高于第三组(P<0.05)，逐渐稳定趋势，所有处理组产奶量均高于对照组，说明辣椒碱在一定程度上可以提高产奶量(见图4)。
从图4中可看出，杂交水牛产后日粮添加辣椒碱最初的20，25天里泌乳量呈现逐渐增加的趋势。第25，30天开始，泌乳量产生显著差异，第二组(6mg/kg)产奶量均显著高于对照组(P<0.05)，第一组(3mg/kg)和第三组(9mg/kg)有高于对照组的趋势，但没有显著差异(P>0.05)，第三组(9mg/kg)有高于第一组(3mg/kg)的趋势。第30天，组间虽然没有显著差异，但处理组均高于对照组。所以，产后杂交水牛在日粮中添加辣椒碱能够提高产奶量，其中从产后20天后开始在日粮中每天添加6mg/kg(第二组)辣椒碱对提高产奶量有更显著的效果。
4、对各组杂交水牛日粮中添加不同辣椒碱采用同期发情-定时输精方案测定各组：杂交水牛同期发情前一天血糖，脂蛋白酯酶、谷草转氨酶指标浓度血清生化指标结果见表4。将血糖结果绘制成折线图如图5所示。将脂蛋白酯酶结果绘制成折线图如图6所示。将产谷草转氨酶的结果绘制成折线图如图7所示。
表4不同剂量辣椒碱饲喂水牛后的血清生化指标
注：同一指标，同行肩注不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。
从图5折线图显示不同剂量的辣椒碱对杂交水牛血糖浓度的影响中看出，每组的血糖水平在配种后50天上升，为妊娠做准备。第二组(6mg/kg)配种当天和配种后第50天血糖浓度明显高于其他组(P<0.05)，第一组与第三组无显著差异，但有上升趋势。配种50天后，中剂量组(3mg/kg)血糖浓度高于空白组和低剂量组，与高剂量组无显著差异。
折线图6结果显示，杂交水牛日粮中添加不同剂量的辣椒碱0，3，6，9mg/kg)对杂交水牛脂蛋白酯酶的影响。试验前后脂蛋白酯酶(LPL)浓度上升趋势，在配种后第50达到峰值。在本实验中，实验组和对照组在配种当天和配种后第50天脂蛋白酯酶浓度没有显著差异(P>0.05)。
图7折线图显示，杂交水牛日粮中添加不同剂量的辣椒碱(0，3，6，9mg/kg)对杂交水牛产谷草转氨酶的影响。谷草转氨酶浓度在实验后上升趋势，配种当天上升，在配种后第50天后达到峰值。通过观察，配种当天和配种后50谷草转氨酶(AST)血清指标组内之间无显著差异(P>0.05)。空白组谷氨酸转氨酶AST浓度明显低于实验组。综上所述，在夏季日粮添加辣椒精能够提高水牛的产奶量，促进血液循环和能量正平衡，促进食欲，改善消化，维持奶牛的代谢功能。
5、杂交水牛和水牛日粮中添加辣椒碱采用同期发情-定时输精方案对各组乳成分包括总固、脂蛋比、尿素氮、乳糖含量、体细胞数、乳脂率进行测定，其结果见表5所示。
表5补饲不同剂量的辣椒碱对泌乳初期乳成分的影响结果
注:同一列不同小写字母a，b表示差异显著(P<0.05)。
从上表中看出在添加辣椒碱第20天，总固、脂蛋比、尿素氮、乳糖含量、体细胞数、乳脂率和组间均无明显差异(P>0.05)，第二组即6mg/kg组和第三组即9mg/kg组的蛋白质率显著高于对照组(P<0.05)，与3mg/kg组没有显著差异。
在添加辣椒碱第30天，可以看到总固、脂蛋比、体细胞数组间均无明显差异(P>0.05)。乳糖含量，蛋白质率和乳脂率，尿素氮出现了显著差异(P<0.05)，其中第二组(6mg/kg)和第三组(9mg/kg)的乳糖含量显著高于对照组(P<0.05)，与第一组(3mg/kg)差异不显著。第二组蛋白质率显著高于对照组(P<0.05)，但与第一组、第三组之间无显著差异。第三组乳脂率显著高于对照组(P<0.05)，与第一组和第二组没有显著差异。尿素氮对照组显著高于第二组，与第一组和第三组差异不显著。而处理组和未处理组体细胞数差异不显著。说明添加辣椒碱可有效提高水牛牛乳中乳糖含量、蛋白质率。
上述表3实验结果说明，杂交水牛日粮中添加不同剂量的辣椒碱添加量为6mg/kg的杂交水牛发情率为72.0％(18/25)，排卵率为68.0％(16/25)，受胎率为48.0％(12/25)，卵泡生长速度达到1.619mm/day(图3)高于其他剂量组，但是没有显著性差异(p>0.05)。根据(图2)说明，添加量为6mg/kg的卵泡发育比较规律，稳定，发育速度和排卵卵泡最大直径高于其他组，但是没有显著性差异(p>0.05)。
实施例2
一种日粮中添加辣椒碱用于水牛夏季同期发情-定时输精效果的处理方法，选择健康，没有生殖道疾病的水牛，试验前做直肠检查，有生殖道疾病的牛(两侧子宫角大小不对称、卵泡囊肿，卵巢囊肿，子宫角较大、有炎症)不能用于试验，可按流程如图1所述进行，具体方案如下：
选择产后(分娩当天为0天)第20天的母牛，按每kg TMR日粮中添加1～9mg的辣椒碱后作为日粮，进行连续饲喂一个月。
同期发情处理的第0天：在产后第50天(第一周)，向一个或多个健康的处于发情周期的水牛星期一下午16：00pm肌肉注射第一次GnRH，注射剂量为400μg/头，以诱导发情。
同期发情处理的第6天：产后第56天，B超检查从同期发情的第6天(PGF2ɑ注射前一天)至第12天排卵为止(即注射GnRH后72h),记录卵泡发育及发情、排卵状况。
同期发情处理的第7天：在产后第57天(第二周)，星期一下午16：00pm肌肉注射PGF2ɑ，注射剂量为0.5mg/头，以启动发情。
同期发情处理的第9天：在产后第59天(第二周)，星期三下午16：00pm肌肉注射第二次GnRH(400μg/头)，同时肌肉注射米非司酮(0.4mg/kg)以促进排卵。
同期发情处理的第10天：在产后第60天(第二周)，星期四下午16：00pm进行人工输精。需要注意的是：每次人工授精之前，用酒精消毒输精抢，高锰酸钾消毒液(0.1mol/L)消毒外阴部分，人工授精人员确保手指甲剪短；切实掌握好输精技术，使用一次性输精枪套。精液解冻时动作迅速，解冻温度为37.5摄氏度，显微镜检查精子活力，解冻后精子活力高于0.3。
同期发情处理的第15天：在产后第65天(第三周)，星期二下午16：00pm(即人工授精后第5天)，对接受配种的牛只肌肉注射hCG(2000IU/头)，以促进早期胚胎存活率。注：严禁使用过期的激素；注射使用一次性注射器。
同期发情处理的第45天：在产后第110天(第六周，星期五)(即人工授精后第35天)上午10：00利用B超进行妊娠诊断。要注意观察牛的发情、排卵情况，做好记录
上述的同期发情定时输精方案操作，因为考虑胚胎早期死亡的问题，首次妊娠诊断是通过观察牛只是否返情确定，为进一步提高诊断准确率，妊娠诊断是在人工输精后第45天，利用B超确定牛只妊娠情况并记录。
上述利用本发明方法在夏季产后杂交水牛日粮中补饲辣椒碱结合GPGMH同期发情处理可以提高繁殖性能母牛发情率，排卵率、受胎率分别为72.0％、68.0％，48.0％。而夏季利用传统的GPG同期发情方案处理水牛，母牛发情率，排卵率、受胎率分别为86.7％、76.7％和33.3％。生产性能方面，产奶量在辣椒碱添加第20，25天，按添加来量为6mg/kg组升高(P>0.05)，比对照组提高了16.61％。
杂交水牛产后第20天开始至产后50天补饲辣椒碱在每公斤TMR日粮中添加6mg/kg辣椒碱的日粮效果最好(P<0.05)。产后母牛辣椒碱补饲30天可以显著提高乳蛋白质率、乳脂率、乳糖率等指标，乳中尿素氮水平降低，血糖水平升高，提高水牛的产奶性能，提高产奶量和早期胚胎存活率。可见，本发明方法可显著提高夏季水牛排卵率和受胎率及发情率，减少卵泡囊肿率，减少子宫炎症和子宫内膜炎的发生率，降低成本，节约养殖成本，提高养殖效益。而且，本发明操作比较方便，不需要进行发情鉴定，是一种程序化的同期发情定时输精方案，便于推广应用。
Claims (10)
1.一种提高水牛夏季同期发情-定时输精效果的处理方法，其特征在于，对产后的水牛在日粮中添加辣椒碱进行连续喂养一段时间后，进行同情发情-定时输精。
2.如权利要求1所述的处理方法，其特征在于，所述产后水牛为产后15～25天的水牛，辣椒碱按每kg TMR日粮中添加3～9mg后作为日粮。
3.如权利要求1所述的处理方法，其特征在于，辣椒碱喂养时间为25～35天。
4.如权利要求1所述的处理方法，其特征在于，辣椒碱按每kg TMR日粮中添加6mg后作为日粮，辣椒碱喂养时间为30天，所述产后水牛为产后20天的水牛。
5.如权利要求1所述的处理方法，其特征在于，所述同情发情-定时输精包括如下步骤：
S1、向健康的处于发情周期的母水牛肌肉注射促性腺素释放激素；这一天记为水牛同期发情处理的第0天，
S2、水牛同期发情处理后的第7天，肌肉注射氯前列醇钠；
S3、水牛同期发情处理后的第9天，第二次注射促性腺素释放激素，同时注射米非司酮以促进排卵；
S4、水牛同期发情处理后的第10天，注射米非司酮后24小时，实施人工输精；
S5、水牛同期发情处理后的第15天，即人工输精后第5天肌肉注射人绒毛膜促性腺激素，以促进早期胚胎存活；
S6、水牛同期发情处理后的第45天，即在人工输精后第35天，用B超确定牛只妊娠情况。
6.如权利要求5所述的处理方法，其特征在于，在步骤S1中，促性腺素释放激素按400μg/头进行；
在步骤S2中，氯前列醇钠按0.5mg/头进行；
在步骤S3中，促性腺素释放激素按400μg/头进行，米非司酮按0.4mg/kg体重进行；
在步骤S5中，人绒毛膜促性腺激素按2000IU/头进行。
7.辣椒碱在提高水牛夏季配种受胎率及提高产奶量中的应用。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述辣椒碱在同期发情处理之前，选择产后的第20天的奶牛按每公斤TMR日粮中添加3～9mg，连续喂30天；其中将分娩当天记为0天，在产后第50天即记为奶牛同期发情处理第0天，下午肌肉注射促性腺素释放激素，第7天下午肌肉注射氯前列醇钠，第9天下午第二次肌肉注射促性腺素释放激素，同时注射米非司酮，第10天下午进行人工输精，第15天对接受配种的牛只肌肉注射人绒毛膜促性腺激素hCG，第45天用B超确定牛只妊娠情况。
9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，促性腺素释放激素的注射剂量为400μg/头；注射米非司酮后24小时，实施人工输精。
10.如权利要求8所述的应用，其特征在于，米非司酮按0.4mg/kg体重进行；人绒毛膜促性腺激素按2000IU/头进行。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20220304 |
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |