CN110368132B - 一种提高奶牛夏季同期发情-定时输精效果的处理方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种用于奶牛夏季同期发情‑定时输精的处理方法,其包括如下步骤:S1、从奶牛妊娠第260天或预产期前20天开始至产后50天,每天日粮中添加NCG,连续饲喂70天。S2、奶牛同期发情处理第0天,向发情周期的母牛肌肉注射促性腺素释放激素;S3、第7天,肌肉注射PGF2ɑ;S4、第9天,注射促性腺素释放激素,同时注射米非司酮;S5、第10天,实施人工输精;S6、第15天肌肉注射人绒毛膜促性腺激素;S7、第55天,用B超确定牛只妊娠情况。本发明的处理方法可有效提高产后奶牛同期发情率、配种率及受胎率,并能提高奶牛产奶量和早期胚胎存活率,且不需要检测发情,定时输精,操作方便。
Description
技术领域
本发明属于畜牧业水牛繁殖技术领域,具体涉及一种提高奶牛同期发情-定时输精的处理方法。
背景技术
在奶牛业生产中,繁殖率低是导致我国奶牛生产性能和效益低的关键因素。奶牛繁殖性能直接关系着奶牛生产和养殖效益,也是奶牛生产可持续发展的重要条件之一。高产奶牛在产后的泌乳高峰期由于受到各种应激,容易出现异常发情,表现为发情症状不明显、不发情、发情排卵不规律、安静发情、排卵延迟,卵巢静止、卵泡囊肿等,导致繁殖率下降,造成了产奶量和繁殖力“双低”的问题,影响了牧场经济效益。在母牛分娩后一定时间进行药物处理,促进生殖机能恢复,并进行适时配种与早期妊娠诊断,是缩短产犊间隔的重要措施。此外,奶牛繁殖性能易受环境、气候等因素的影响。夏季热应激会导致奶牛采食量下降,食欲降低,能量供需不平衡,影响繁殖性能。
同期发情技术是现代畜牧生产中重要的繁殖调控技术之一,是通过生殖激素不同组合来调控卵泡的生长发育和排卵。为了提高奶牛的产奶量和繁殖效率,人为调控卵巢活动和控制排卵时间,已经开发出一些同期发情定时输精方案,能够准确地控制排卵时间,且无需进行发情检测。Ovsynch-TAI同期发情方案在奶牛繁殖中应用较为广泛,同期发情效果相对较好,本发明人前期在Ovsynch-TAI基础上进行了优化,通过添加孕酮抑制剂米非司酮以促进排卵,但在夏季效果还不理想,存在诱导发情率低、胚胎早期死亡率高、受胎率低等问题,其主要原因是热应激引起血液循环于体表,致使消化、生殖、泌乳系统的血液供应不足,进而影响消化、生殖和泌乳。
发明内容
为了解决夏季奶牛同期发情技术效果不理想的问题,本发明提供一种提高奶牛夏季同期发情-定时输精效果的处理方法,以提高奶牛在夏季的同期发情率和配种受胎率。
为实现上述目的,本发明采用以下的技术方案为:
一种提高奶牛夏季同期发情-定时输精效果的处理方法,其包括如下步骤:
S1、选择妊娠第260天或预产期前20天的母牛,从当天开始至产后50天,每天日粮中添加氮甲酰谷胺酸,连续饲喂70天;并在其后进行如下步骤;
S2、奶牛同期发情处理第0天,向一个或多个健康的处于发情周期的母牛肌肉注射促性腺素释放激素(GnRH),以促进卵泡发育;
S3、第7天,肌肉注射氯前列醇钠(PGF2ɑ),以启动发情;
S4、第9天,第二次注射促性腺素释放激素(GnRH),同时注射米非司酮以促进排卵;
S5、第10天,实施人工输精;
S6、第15天,人工输精后第5天肌肉注射人绒毛膜促性腺激素(hCG),以促进早期胚胎存活;
S7、第55天即在人工输精后第45天,用B超确定牛只妊娠情况。
如上所述的方法,优选地,在步骤S1中,所述氮甲酰谷胺酸按一天补饲量为20g/头添加。
如上所述的方法,优选地,在步骤S2和步骤S4中,所述促性腺素释放激素的注射剂量均为200μg/头。
如上所述的方法,优选地,在步骤S3中,所述注射前列腺素是在步骤S2后第7天注射。进一步地,所述氯前列醇钠的注射剂量为0.5mg/头。
如上所述的方法,优选地,在步骤S4中,所述第二次注射促性腺素释放激素与第一次间隔9天。
如上所述的方法,优选地,在步骤S4中,所述米非司酮的注射剂量为0.4mg/kg体重。
如上所述的方法,优选地,在步骤S5中,所述米非司酮注射16小时后,进行人工输精。
如上所述的方法,优选地,在步骤S6中,所述hCG的注射剂量为2000IU/头。
也就是说,同期发情处理之前(妊娠第260天或预产期前20天)开始添加NCG至产后50天,每天日粮中添加NCG 20g/头饲喂,连续饲喂70天。在产后第50天,计为奶牛同期发情处理第0天,下午肌肉注射GnRH,第7天下午肌肉注射氯前列醇钠PGF2ɑ,第9天下午第二次肌肉注射GnRH,同时按0.4mg/kg体重注射米非司酮,第10天上午(注射米非司酮后16个小时)进行人工输精,第15天(即人工输精后第5天)对接受配种的牛只肌肉注射hCG,第55天(即人工输精后第45天)用B超确定牛只妊娠情况。
本发明在研究过程中确定NCG的最佳用量为20g/头,NCG补饲量过低效果不太明显,过高增加饲养成本,补饲量过高效果没有比补饲量20g/头强,效果不是很好。
本发明在研究过程中确定奶牛注射促性腺激素释放激素(GnRH)的剂量最佳为200ug/头,剂量过低影响排卵率,剂量过高增加经济投入,过高易导致多卵泡排卵。人绒毛膜促性激素(hCG)在奶牛上肌肉的最佳注射剂量为2000IU/头,剂量过低或过高都不利于早期胚胎存活。本发明中的PGF2ɑ肌肉注射剂量为0.5mg/头,如果剂量过低,会导致黄体溶解不完全,影响同期发情率。
本发明的有益效果在于:
本发明提供的一种奶牛夏季同期发情-定时输精效果的处理方法,将NCG和GPGMH同期发情方法有机结合,不仅可以提高奶牛同期发情率、配种率及受胎率,而且可以显著提高奶牛提高产奶量,节约养殖成本,提高养殖效益。
附图说明
图1为本发明方法的流程图。
图2为NCG不同补饲时间对GPGMH同期发情卵泡发育动力学的影响。
图3为NCG补饲天数对产后泌乳初期产奶量的影响。
具体实施方式
本发明人通过大量实验研究发现在夏季,如果在饲料中添加可以促进血液循环的添加剂氮甲酰谷胺酸(NCG,又称精乳康),可通过促进消化道、生殖道和泌乳系统的血液循环,提高消化率,促进能量正平衡,进而促进卵泡发育和排卵、促进泌乳。
以下实施例用于进一步说明本发明,但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的前提下,对本发明所作的修饰或者替换,均属于本发明的范畴。
若未特别指明,实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
实施例1
本试验通过在中国荷斯坦奶牛围产期的不同时间段的日粮中添加N-氨甲酰谷氨酸20g/头,研究N-氨甲酰谷氨酸(NCG)对奶牛卵泡发育、发情率和受胎率的影响,以改良现有同期发情方案夏季同期发情效果不佳的问题,同时提高奶牛产奶量。选择体况良好的健康围产前期荷斯坦奶牛169头,根据年龄、体重、胎次、前一泌乳期产奶量及预产期接近的原则将奶牛随机分为4组。从胚胎妊娠第260天或预产期产前20天开始至产后不同时间(15天,30天,50天),每天日粮中添加NCG 20g/头。试验Ⅰ组在产前20天开始,每天在基础日粮中添加NCG 20g的,从产前20天开始至产后15天,连续补饲35天;试验Ⅱ组产前20天开始以同样的方式添加至产后30天,连续补饲50天;试验Ⅲ组从产前20天开始至产后50天,连续补饲70天;对照组不添加NCG。产后第50天计为奶牛同期发情处理第0天,下午肌肉注射促性腺素释放激素(GnRH),第7天下午肌肉注射氯前列醇钠(PGF2ɑ),第9天下午第二次肌肉注射GnRH,同时按0.4mg/kg体重注射米非司酮,第10天上午(注射米非司酮后16个小时)进行人工输精,第15天(即人工输精后第5天)对接受配种的牛只肌肉注射人绒毛膜促性腺激素(hCG),第55天(即人工输精后第45天)用B超确定牛只妊娠情况,分别测定奶牛的干物质采食量、产奶量、乳成分、血清生化指标、抗氧化指标、发情率、排卵率和受胎率。
具体操作如下:
从妊娠期第260天或预产期前20天开始至产后不同时间(15天,30天,50天),每天将20g/头NCG均匀添加到TMR(全混合日粮)日粮中。产后第50天,计为奶牛同期发情处理第0天,下午肌肉注射GnRH,按200μg/头进行注射,B超检查从第6天(PGF2ɑ注射前一天)至第12天排卵为止(即第二次注射GnRH后72h),记录卵泡发育及发情、排卵状况;第7天下午肌肉注射PGF2ɑ,按0.5mg/头注射,第9天下午(注射PGF2ɑ后48小时)第二次肌肉注射GnRH(200μg/头),同时按0.4mg/kg体重注射米非司酮,第10天下午(注射米非司酮后16个小时)进行人工输精,第15天(即人工输精后第5天)对接受配种的牛只肌肉注射hCG。考虑胚胎早期死亡的问题,妊娠诊断在人工输精后第45天进行,流程如图1所示。
研究围产期NCG补饲时间对奶牛卵泡发育和排卵的影响,结果如表1所示,表明NCG不同补饲时间初始卵泡直径、发情时间、发情持续时间、排卵时间、排卵卵泡最大直径之间没有显著性差异(P>0.05)(表1)。
表1.NCG补饲时间对奶牛卵泡发育和排卵的影响
NCG补饲时间对奶牛同期发情效果的影响,结果如表2所示,结果表明,不同组发情率没有显著差异,补饲按20g/头/天进行为期70天试验Ⅲ组奶牛排卵率为85.5%(34/40),显著高于按20g/头/天为期35天的试验Ⅰ组和对照组,而补饲70天的试验Ⅲ组受胎率为57.5%(23/40),显著高于35天试验Ⅰ组(p<0.05)。卵泡发育动力学研究结果如图2所示,图中X轴代表实际同期发情时间(天),y轴代表卵泡直径对数值。结果表明NCG补饲20g/头/天,70天组卵泡发育比较规律和稳定,表现为卵泡发育速度快,最大卵泡直径大于其他试验组,考虑到上述所有指标,NCG补饲20g/头/天,70天效果最佳。
表2.NCG补饲时间对奶牛同期发情效果的影响
注:同一项目同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05)
实施例2
对实施例1中的四组实验进行产后泌乳初期产奶量测定,对产后第5天、第10天、第15天、等这样依次类推检测每5天的产奶量,奶牛补饲NCG不同时间对产后泌乳初期产奶量的影响结果如表3所示,日产奶量如图3所示。结果表明奶牛产后最初的20天里每天平均泌乳量呈现逐渐增加的趋势。从20-25天开始,20g/70天实验组产奶量均显著高于对照组(P<0.05),和其他实验组没有显著差异(P>0.05),20g/70天的试验III组有高于20g/35天的趋势。第30天,组间虽然没有显著差异,但处理组均高于对照组。第40天和45天NCG实验组补饲20g/70d明显高于对照组(P<0.05),实验组均高于对照组。所以,围产期的奶牛在日粮中添加NCG能够提高产奶量,其中试验Ⅲ组从产前20日开始到产后50天日粮中每天添加20gN-氨甲酰谷氨酸对提高产奶量有更显著的效果。
表3.奶牛补饲NCG不同时间对产后泌乳初期产奶量的影响
注:同一行肩标字母不同表示差异显著(P<0.05)
奶牛补饲NCG不同时间(即实施例1中的四组试验组)对奶牛泌乳初期乳成分进行测定,荷斯坦奶牛的乳成分的变化如表4所示,表中同一行肩注不同字母表示差异显著(P<0.05)。在泌乳期第30天,总固、乳糖含量、脂蛋比、乳脂率、尿素氮和体细胞数组间均无明显差异(P>0.05),蛋白质率20g/70天的试验III组显著高于对照组和20g/50天的试验II组(P<0.05),20g/35天的试验I组和20g/50天的试验II组有高于对照组的趋势,但无明显差异。
在产后第60天,总固、脂蛋比、体细胞数组间均无明显差异(P>0.05)。乳糖含量、蛋白质率、乳脂率和尿素氮发现了显著差异(P<0.05),其中乳糖含量对照组显著低于20g/50天的试验II组和20g/70天的试验III组(P<0.05),20g/35天的试验I组与其他组分无显著差。蛋白质率20g/70天的试验III组显著高于对照组(P<0.05),但20g/35天的试验I组、20g/50天的试验II组之间无显著差异。乳脂率对照组显著低于20g/50天的试验II组和20g/70天的试验III组(P<0.05),20g/35天的试验I组与其他组分无显著差。尿素氮含量20g/70天的试验III组显著高于对照组,与20g/35天的试验I组和20g/50天的试验II差异不显著。体细胞数差异组间不显著。
表4.NCG不同补饲时间对奶牛泌乳初期乳成分的影响
续表4.
实施例3
对不同NCG补饲天数的的四个试验组,同期发情处理前1天、配种当天、配种后50天,进行脂蛋白酯酶、谷草转氨酶、尿素、一氧化氮的测定,结果如表5显示,NCG不同补饲时间对同期发情前一天脂蛋白酯酶、谷草转氨酶、尿素、一氧化氮指标的浓度无明显影响(P>0.05),但不同补饲组精氨酸、血糖有显著差异(P<0.05),其中血糖指标浓度20g/70天的试验III组显著高于20g/35天的试验I组(P<0.05),但对照组和20g/50天的试验II组之间无显著差异。精氨酸指标浓度20g/70天的试验III组显著高于对照组(P<0.05),与20g/35天的试验I组和20g/50天的试验II组差异不显著。
表5.NCG不同补饲时间对奶牛血清生化指标的影响
注:同一项目同列不同字母表示差异显著(P<0.05)
NCG不同补饲时间,对配种当天脂蛋白酯酶、尿素均无显著影响(P>0.05),血糖、谷草转氨酶、精氨酸、一氧化氮指标的浓度组间差异显著(P<0.05),其中血糖指标浓度对照组显著高于实验组(P<0.05),实验组之间无显著差异。谷草转氨酶指标浓度20g/70天的试验III组显著高于20g/35天的试验I组和20g/35天的试验II组(P<0.05),与对照组没有显著差异。精氨酸浓度20g/35天的试验II组显著低于20g/70天的试验III组和对照组,与20g/35天的试验I组没有显著性差异。一氧化氮指标的浓度对照组显著高于20g/35天的试验I组(P<0.05),与20g/35天的试验II组和20g/70天的试验III组没有显著性差异。
配种后第50天脂蛋白酯酶、谷草转氨酶组间均无明显差异(P>0.05),血糖、精氨酸、尿素、一氧化氮指标的浓度有显著差异(P<0.05),其中血糖指标浓度对照组显著高于20g/35天的试验I组,与20g/35天的试验II组和20g/70天的试验III组之间无显著差异。精氨酸指标浓度对照组显著高于20g/35天的试验I组,与20g/35天的试验II组和20g/70天的试验III组之间无显著差异。尿素指标浓度20g/35天的试验I组显著高于对照组,与20g/35天的试验II组和20g/70天的试验III组之间没有显著差异。一氧化氮指标的浓度20g/35天的试验I组显著低于20g/35天的试验II组和20g/70天的试验III组和对照组,对照组和20g/35天的试验II组和20g/70天的试验III组之间没有显著差异。
各组血清血糖浓度在临近分娩时上升,为泌乳早期做准备。本实验中,在配种当天,血糖指标浓度对照组显著高于实验I、II、III组(P<0.05),实验组之间差异不显著。在配种后第50天,血糖指标浓度对照组显著高于20g/35天的试验I组,与20g/35天的试验II组和20g/70天的试验III组之间无显著差异。肝脏是动物机体内含酶最丰富的脏器,酶的含量约占肝总蛋白含量的2/3。通过测定血清酶的活性变化能反应肝脏的病理状态(周庆新等,2012)。奶牛血清中总蛋白的含量反映机体营养状况以及蛋白质的代谢水平的重要指标。表现为营养状况良好以及蛋白质合成增多时,血清中脂蛋白酯酶的浓度会一定程度上降低。而白蛋白由肝脏合成,代表了肝功能是否良好。在本实验中,配种当天和配种后第50天各组之间脂蛋白酯酶指标浓度没有显著差异(P>0.05)。说明补饲NCG后没有出现因为产后能量负平衡而对肝脏的代谢功能带来不利的影响,但同样也没有显著提高机体蛋白质的代谢水平。
谷草转氨酶(AST)的血清浓度反映了肝脏的受损程度。谷草转氨酶主要分布在肝脏细胞中,正常情况下,因为细胞膜的屏障作用,血清中谷草转氨酶的活性较低,当肝细胞受损时,细胞膜的通透性升高,两种酶进入血的速度加快,所以,谷草转氨酶升高的程度与肝细胞受损的程度相一致。当奶牛产后发生能量负平衡,血液中谷草转氨酶活性增高,肝脂肪摄取增加,肝功能不全,严重时活性将显著增加。本发明实验中,配种当天、谷草转氨酶指标浓度20g/70天的试验III组显著高于20g/35天的试验I组和20g/35天的试验II组(P<0.05),与对照组没有显著差异。说明在临产前,奶牛为了准备妊娠及胎儿的营养需要,部分机体内氨基酸可能脱氨基或转氨消耗掉以补充机体能量,所以导致谷草转氨酶浓度升高。说明,补饲NCG对奶牛产后氨基酸的平衡有一定的作用。NCG促进精氨酸合成过程中,精氨酸在奶牛体内可以代谢生成一氧化氮,本实验配种当天一氧化氮指标的浓度对照组显著高于20g/35天的试验I组(P<0.05),与20g/35天的试验II组和20g/70天的试验III组没有显著性差异。配种后第50天一氧化氮指标的浓度20g/35天的试验I组显著低于0g/50天组和20g/70天的试验III组和对照组。说明,NCG促进一氧化氮和多胺含量的升高。
对四组不同NCG补饲时间喂养的犊牛进行出生体重、及9个月后体重、体高、体斜长、胸围、腹围的测定,测定结果如表6所示。
表6.NCG不同补饲时间对犊牛生长的影响
实验结果说明不同NCG补饲时间对犊牛生长有影响,各组间犊牛出生体重差异不显著(P>0.05),说明补饲NCG对于胎儿发育无不利影响。犊牛9个月龄的体重和体尺结果显示,犊牛体重、体高、体斜长差异不显著(P>0.05)。但胸围和腹围发现有显著差异(P<0.05),其中胸围20g/70天试验III组显著高于20g/50天试验II组。腹围20g/70天实验组显著高于20g/35天试验I组和20g/50天试验II组和对照组(P<0.05),20g/35天试验I组和20g/50天试验II组和对照组之间差异不显著。
实施例4
一种日粮中添加NCG用于奶牛夏季同期发情-定时输精效果的处理方法,选择健康,没有生殖道疾病的奶牛,可按流程如图1所述进行,具体方案如下:
在妊娠期260天或预产期前20天,每天在TMR日粮中添加20g/kg的NCG,连续饲喂至产后50天。其后进行如下处理:
第0天:在产后第50天(第一周),向一个或多个健康的处于发情周期的母牛星期一下午16:00pm肌肉注射第一次GnRH,注射剂量为200μg/头,以促进卵泡发育。
第6天:产后第56天,B超检查从同期发情的第6天(PGF2ɑ注射前一天)至第12天排卵为止(即注射GnRH后72h),记录卵泡发育及发情、排卵状况。
第7天:在产后第57天(第二周),星期一下午16:00pm肌肉注射PGF2ɑ,注射剂量为0.5mg/头,以启动发情。
第9天:在产后第59天(第二周),星期三下午16:00pm肌肉注射第二次GnRH(200μg/头),同时按0.4mg/kg体重注射米非司酮以促进排卵。
第10天:在产后第60天(第二周),星期四上午8:00am进行人工输精。
第15天:在产后第65天(第三周),星期二下午16:00pm(即人工授精后第5天),对接受配种的牛只肌肉注射hCG(2000IU/头),以促进早期胚胎存活率。
第55天:在产后第110天(第六周,星期五)(即人工授精后第45天)上午10:00利用B超进行妊娠诊断。
需要注意的是:
1.每天日粮中添加NCG是用TMR均匀混合,从产前20天开始至产后50天,连续补饲NCG 70天。
2.试验前做直肠检查,有生殖道疾病的牛(两侧子宫角大小不对称、卵泡囊肿,卵巢囊肿,子宫角较大、有炎症)不能用于试验。
3.每次人工授精之前,用酒精消毒输精抢,高锰酸钾消毒液(0.1mol/L)消毒外阴部分,人工授精人员确保手指甲剪短;切实掌握好输精技术,使用一次性输精枪套。
4.精液解冻时动作迅速,解冻温度为37.5摄氏度,显微镜检查精子活力,解冻后精子活力高于0.3。
5.严禁使用过期的激素;注射使用一次性注射器。
6.注意观察牛的发情、排卵情况,做好记录。
7.严格按方案执行。
上述的同期发情定时输精方案操作,因为考虑胚胎早期死亡的问题,首次妊娠诊断是通过观察牛只是否返情确定,为进一步提高诊断准确率,妊娠诊断是在人工输精后第45天,利用B超确定牛只妊娠情况并记录。
上述实施例在夏季围产期牛补饲NCG然后GPGMH同期发情处理可以提高繁殖性能母牛发情率、排卵率、受胎率分别为85.5%、82.5%、57.5%。而利用传统的GPG同期发情方案处理奶牛,母牛发情率,排卵率、受胎率分别为60.5%、58.1%和48.8%。泌乳性能方面,可提高产后泌乳初期产奶量11.1%(4.78/43.04)(P<0.05)。
奶牛产前20天开始至产后50天补饲NCG 20g/头效果最好(P<0.05)。围产期NCG补饲70天可以降低乳中尿素氮含量,提高蛋白质量、乳脂量和乳糖量。围产期补饲NCG可以提高血糖的浓度,促进一氧化氮和多胺含量的升高,提高奶牛的产奶性能。可见,本发明方法可显著提高奶牛排卵率和受胎率及发情率。而且,本发明操作比较方便,不需要进行发情鉴定,是一种程序化的同期发情定时输精方案,便于推广应用。
Claims (6)
1.一种提高奶牛夏季同期发情-定时输精效果的处理方法,其特征在于,其包括如下步骤:
S1、选择妊娠第260天或预产期前20天的母牛,从当天开始至产后50天,每天日粮中添加氮甲酰谷胺酸,连续饲喂70天;并在此期间进行如下步骤;
S2、奶牛同期发情处理第0天,向一个或多个健康的处于发情周期的母牛肌肉注射促性腺素释放激素,以促进卵泡发育;
S3、第7天,肌肉注射氯前列醇钠,以启动发情;
S4、第9天,第二次注射促性腺素释放激素,同时按0.4mg/kg体重的注射剂量注射米非司酮以促进排卵;
S5、第10天,实施人工输精;
S6、第15天,人工输精后第5天肌肉注射人绒毛膜促性腺激素,以促进早期胚胎存活;
S7、第55天即在人工输精后第45天,用B超确定牛只妊娠情况。
2.根据权利要求1所述的处理方法,其特征在于,在步骤S1中,所述氮甲酰谷胺酸按一天补饲量为20g/头添加。
3.根据权利要求1所述的处理方法,其特征在于,在步骤S2和步骤S4中,所述促性腺素释放激素的注射剂量为200μg/头。
4.根据权利要求1所述的处理方法,其特征在于,在步骤S3中,所述氯前列醇钠的注射剂量为0.5mg/头。
5.根据权利要求1所述的处理方法,其特征在于,在步骤S5中,所述米非司酮注射16小时后,进行人工输精。
6.根据权利要求1所述的处理方法,其特征在于,在步骤S6中,所述人绒毛膜促性腺激素的注射剂量为2000IU/头。
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