JP2011030562A - ストレス性刺激による魚類生殖腺の雄化誘導方法 - Google Patents
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Abstract
【課題】 性分化期のとらふぐに食品の作用で、ストレスを与え、温度刺激受容体Transient Receptor Potentialを介して、内在性コルチゾルを増加させ、Fox12遺伝子発現を抑制、さらにアロマターゼ遺伝子の発現が抑制させ、内在性エストロゲンの産生を減少させ、生殖腺の雄化を高率で誘導させることを目的とする。
【解決手段】魚が卵から性決定するまでに、魚にストレス性刺激を与え、生殖腺の雄化を高率で誘導することを特徴とする。
【選択図】 なし
Description
回あるいは極めて短期間に完了し、放卵後雌は産卵場を去るが、雄は産卵場に留まり複数の産卵に関与する。
れた雌性発生二倍体は、第二極体放出阻止により倍化したものと判断される。対照の雌雄比がほぼ1:1であるのに対し、雌性発生魚の93%が雌であったことから、とらふぐは雄性ヘテロ(XX−XY)型と考えられている。また、天然でも雌雄同体の個体が採取されているので、他の魚種と同様に環境要因により個体の性が影響を受けることが予想される。ヒラメ・トウゴロウイワシ・シクリッドに温度依存的性決定が見られ、いずれの種でも高温では生まれてくる子の性比が雄に、低温下では雌に偏ることが知られている。しかしながら、とらふぐにおいては29℃まで温度を上げても性比に偏りは見られず、32℃まで上げると生殖細胞が死滅し貧弱な生殖腺を持つとらふぐが育つことになった。
ロゾール内在性エストロゲンの産制量を抑えることは生殖腺形成には影響がなく高率で生殖腺の雄化を誘導すると考えられる。このように、とらふぐの性分化期におけるアロマターゼの作用は性を決める上で重要な役割を担っている。
これまで、ティラピアなどでアロマターゼのプロモーター領域にFox12の存在が確認されている。ひいては、Fox12のプロモーター領域には、コルチゾル受容体の存在が認められている。そして、コルチゾルにより、Fox12の発現が抑制されることが示唆されている。すなわち、下記性分化期の魚体内でコルチゾルが増加すると、Fox12遺伝子の発現が抑制、さらにアロマターゼ遺伝子の発現が抑制され、内在性エストロゲンの産生が減少、結果として生殖腺の雄化が誘導されることが考えられる。
そこで本発明では、性分化期のとらふぐに食品の作用で、ストレスを与え、ストレスがトラフグに存在する6種の温度刺激受容体Transient Receptor Potential (TRPV1,TRPV4,TRPM4,TRPM5,TRPM2,TRPA1)を介して脳に伝わり、脳内に存在する副腎皮質刺激ホルモンの作用により、内在性コルチゾルを増加させ、Fox12遺伝子発現を抑制、さらにアロマターゼ遺伝子の発現が抑制させ、内在性エストロゲンの産生を減少させ、生殖腺の雄化を高率で誘導させることを目的とする。
とらふぐは、雄化により白子を持たせること付加価値がつく。さらに、雌より雄は成長の面においても15%から20%早く成長する。すなわち、本研究成果はとらふぐ養殖における2つの利点を併せ持つ革新的な技術である。
孵化後1ヶ月以内の体長1〜1.5センチのとらふぐ稚仔魚へ、数種類の食品を添加する試験をおこなった。
ビタミンK、ピペリン、カプサイシン、カロテンの実験結果を記載する。
各水槽に、種類毎に1マイクロg/リットル、10マイクロg/リットル、100マイクロg/リットルを海水に添加し実験した。
それぞれ、3ヶ月間飼育した。以下にその結果を示す。
実験開始時全長1.11±0.17 cm,・体重0.057±0.02 g
卵巣 精巣
コントロール 39% 52%
*9%不明
種類 1マイクロg/L 10マイクロg/L 100マイクロg/L
卵巣 精巣 卵巣 精巣 卵巣 精巣
アリルカラシ 4.2% 95.8% 43.5% 56.5% 死亡 死亡
クルクミン 37% 63% 61% 39% 41% 59%
リモネン 50 % 50% 38% 62% 31% 56%
*13%不明
VitK1 7% 80% 33% 61% 26% 74%
*13%不明 *6%不明
ピペリン 6.3% 81.2% 22.2% 77.8% 36.4% 54.5%
*12.5%不明 *9.1%不明
カプサイシン 12% 76% 17.4% 82.6% 17.4% 82.6%
*12%不明
カロテン 29% 71% 56% 44% 10% 75%
*15%不明
*なお、本試験ではコントロールと成長差・生存率に認められなかった。
実験開始時全長2.22 ±0.34 cm, 体重0.24 ±0.14 g
卵巣 精巣
コントロール 65.2% 34.8%
種類 10マイクロg/L 35マイクロg/L 60マイクロg/L
卵巣 精巣 卵巣 精巣 卵巣 精巣
アリルカラシ 35.5% 64.5% 23.5% 76.5% 25% 75%
種類 100マイクロg/L 500マイクロg/L 1000マイクロg/L
卵巣 精巣 卵巣 精巣 卵巣 精巣
リモネン 19.4 % 80.6% 43.3% 56.7% 33.3% 67.7%
種類 1マイクロg/L 10マイクロg/L 100マイクロg/L
卵巣 精巣 卵巣 精巣 卵巣 精巣
ルチン 36.7% 60% 38.7% 58.1% 48.5% 51.5%
*3.3%不明 *3.2%不明
種類 0.1マイクロg/L 1マイクロg/L 100マイクロg/L
卵巣 精巣 卵巣 精巣 卵巣 精巣
カロテン 43.8% 53.1% 39.3% 60.6% 40.6% 59.4%
*3.1%不明 *0.1%不明
種類 1マイクロg/L 10マイクロg/L 100マイクロg/L
卵巣 精巣 卵巣 精巣 卵巣 精巣
ナリジン 29% 71% 34.4% 65.6% 43.8% 56.3%
種類 0.1マイクロg/L 1マイクロg/L 10マイクロg/L
卵巣 精巣 卵巣 精巣 卵巣 精巣
カプサイシン 27.3% 72.7% 59.4% 37.5% 27.3% 69.7%
*0.1%不明
種類 100マイクロg/L 500マイクロg/L 1000マイクロg/L
卵巣 精巣 卵巣 精巣 卵巣 精巣
カプサイシン 39.3% 50% 41.9% 54.8% 33.3% 57.6%
*10.7%不明 *3.3%不明 *10.7%不明
種類 0.1マイクロg/L 1マイクロg/L 10マイクロg/L
卵巣 精巣 卵巣 精巣 卵巣 精巣
ピペリン 59.4% 40.6% 34.4% 65.6% 46.9% 53.1%
種類 100マイクロg/L 500マイクロg/L 1000マイクロg/L
卵巣 精巣 卵巣 精巣 卵巣 精巣
ピペリン 50% 50% 40.9% 59.1% 36.4% 63.6%
種類 1マイクロg/L 5マイクロg/L 10マイクロg/L
卵巣 精巣 卵巣 精巣 卵巣 精巣
VITK2 35.3% 58.8% 35.5% 61.3% 42.4% 57.6%
種類 15マイクロg/L 30マイクロg/L 45マイクロg/L
卵巣 精巣 卵巣 精巣 卵巣 精巣
VITK2 23.3% 76.7% 43.8% 56.3% 31.3% 68.8%
*なお、本試験ではコントロールと成長差・生存率に認められなかった。
食品の種類と濃度で精巣になる確率が異なるが、ピペリンの1マイクロg/Lは92.3%と非常に高い確率で雄になっている。 又、カプサイシンも同様に雄になる。
元々、魚の雌雄の比率は半々とされており、本結果により生殖腺の雄化誘導が高率で認められた。
性が決定される迄の間にこのような、ストレス性刺激を与える事で簡単に、安全に雄化を誘導できる。
ふぐ以外のたとえば高級魚であるハタ類についても同様のことが期待される。
ハタ類は、成長に長い年月がかかるばかりでなく、先に雌として成熟する(雌性先熟)。すなわち、稚仔魚期から雄にすることで、今後短期間で親魚を育成でき、それらを用いた種苗生産技術が確立される可能性がある。
また、ストレス性刺激は、食品などの化学的刺激だけでなく、光・音・波・振度・電気ショックなどの物理的刺激、さらには天敵や毒性生物との共存などによる生物的刺激により、雄化が誘導される可能性を秘めている。
Claims (7)
- 魚が卵から性決定するまでに、ストレスを与える食品を飼育水に一定の濃度で添加することにより魚にストレスを与え、生殖腺の雄化誘導をする方法。
- 魚が卵から性決定するまでに、ストレスを与える食品を飼料に一定の濃度で添加することにより魚にストレスを与え、生殖腺の雄化誘導をする方法。
- 上記食品がビタミンKであり、このビタミンKを10マイクロg/L前後程の濃度として添加することにより魚にストレスを与え、生殖腺の雄化誘導を特徴とする上記請求項1又は2に記載の魚の雄化誘導方法。
- 上記食品が胡椒など由来のピペリンであり、このピペリンを1〜10マイクロg/L程の濃度として添加することにより魚にストレスを与え、生殖腺の雄化誘導を特徴とする上記請求項1又は2に記載の魚の雄化誘導方法。
- 上記食品が唐辛子など由来するカプサイシンであり、このカプサイシンを10〜100マイクロg/L程の濃度として添加することにより魚にストレスを与え、
生殖腺の雄化誘導を特徴とする上記請求項1又は2に記載の魚の雄化誘導方法。 - 上記食品が野菜など由来のカロテンであり、このカロテンを1マイクロg/L前後程の濃度として添加することにより魚にストレスを与え、生殖腺の雄化誘導を特徴とする上記請求項1又は2に記載の魚の雄化誘導方法。
- 魚が卵から性決定するまでに、魚にストレスを与え、温度刺激受容体Transient Receptor Potentialを介して、生体内のコルチゾルを増加させ、Fox12を抑制、さらにアロマターゼを抑制させることにより、内在性エストロゲンの産生が減少されることによる生殖腺の雄化誘導を特徴とする魚の雄化誘導方法。
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