CN114097525B - 一种袖珍南瓜形无核葡萄果实的培育方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于植物育种与栽培技术领域，具体涉及到一种袖珍南瓜形无核葡萄果实的培育方法。本发明以椭圆形红亚历山大为母本，以扁圆形京蜜为父本进行杂交，得袖珍南瓜形葡萄。本发明对袖珍南瓜形葡萄进行花果处理，进一步得到袖珍南瓜形无核葡萄，并且南瓜形果形棱痕更加明显。本发明在优良品质的基础上增加外观的个性化差异，丰富了葡萄新种质的类型，满足休闲采摘的需要，并且新种质果形能稳定遗传，缩短了葡萄杂交育种周期，提高了目标性状出现频率。

Description

一种袖珍南瓜形无核葡萄果实的培育方法
技术领域
本发明属于植物育种与栽培技术领域，具体涉及一种袖珍南瓜形无核葡萄果实的培育方法。
背景技术
随着人们生活水平的不断提高，各种水果成为日常主要消费对象，并且对水果的品质提出了更高的要求。葡萄是我国果树生产上的重要树种，在果树生产中具有重要地位。葡萄树形姿态优美，果实圆形、椭圆形、扁圆形、倒卵形、鸡心形、指形等形状多样，白、绿、黄、红、紫、黑、蓝等色彩丰富，深受人们喜爱。近年来欧美国家以大粒、无核、抗逆、香味为目标，日本以大粒、无核化、香味、抗性强为目标，品种推出速度快，果形或香味独特等个性化的葡萄品种逐渐增多。结合国内外葡萄育种新趋势，围绕浙江葡萄生产的目标要求和观光休闲农业的兴起，迫切需要培育一种果形特异、优质的葡萄新品种，优化葡萄种植结构，满足浙江葡萄采摘与休闲农旅的消费需求。
发明内容
本发明的目的在于提供一种袖珍南瓜形无核葡萄果实的培育方法，丰富葡萄新种质的类型，增加外观的个性化差异，获得的新种质果形无核，并且能稳定遗传，缩短了葡萄杂交育种周期。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
本发明提供本发明提供了一种袖珍南瓜形葡萄的培育方法，包括以下步骤：以椭圆形红亚历山大为母本，以扁圆形京蜜为父本进行杂交，得袖珍南瓜形葡萄。
优选的，所述杂交的方式包括袋内抖动授粉；具体包括：将所述父本的花粉装入密封袋，轻弹密封袋使父本的花粉落入所述母本的雌蕊柱头。
优选的，所述杂交后，还包括培育，所述培育包括：培养杂交种子，得杂交苗；以所述杂交苗为接穗，嫁接到红亚历山大上，得嫁接苗。
优选的，所述嫁接的方式包括枝接。
优选的，所述红亚历山大包括5年生红亚历山大。
优选的，得嫁接苗后，还包括：在嫁接苗新梢6叶期喷施第一营养液；在嫁接苗开花前10天喷施第二营养液。
优选的，所述第一营养液包括硼砂、硫酸锌、壳聚糖和海水稀释液；
所述硼砂的质量百分含量为0.20.3％；所述硫酸锌的质量百分含量为0.4～0.6％；所述壳聚糖的质量百分含量为0.01～0.02％；所述海水稀释液的稀释倍数为40～60倍。
优选的，所述第二营养液包括赤霉素GA3、噻苯隆、葡萄糖酸钙和麦芽糖；
所述的赤霉素GA3的浓度为7～9mg/L；所述噻苯隆的浓度为0.125～0.25mg/L噻苯隆；所述葡萄糖酸钙的质量百分含量为0.01～0.04％；所述麦芽糖的质量百分含量为0.2～0.8％。
优选的，所述杂交后，还包括7℃冷藏杂交后的完熟葡萄果穗30d，得杂交种子。
本发明还提供了一种袖珍南瓜形无核葡萄的培育方法，包括以下步骤：根据上述的培育方法得到嫁接苗后，对嫁接苗进行花果处理；
所述花果处理包括：在花序80％花蕾开放时，用12.5～15mg/L赤霉素GA3、0.5～0.75mg/L噻苯隆、0.01～0.03wt.％Tween80和0.03～0.05wt.％嘧霉胺的混合溶液喷花序；座果初期，用25～40mg/L赤霉素GA3、2～4mg/L 6-BA、0.1～0.5wt.％壳寡糖和0.04wt.％喹啉铜的混合溶液进行蘸穗。
本发明提供了一种袖珍南瓜形葡萄的培育方法，包括以下步骤：以椭圆形红亚历山大为母本，以扁圆形京蜜为父本进行杂交，得袖珍南瓜形葡萄。本发明培育得到的袖珍南瓜形葡萄多为3棱，早熟，玫瑰香，含糖量达19.2％，在优良品质的基础上增加外观的个性化差异，丰富了葡萄新种质的类型，满足休闲采摘的需要。
本发明对杂交后的种子进行培育和改接，使得到的果形能稳定遗传，缩短葡萄杂交育种周期，提高了目标性状出现频率。
进一步的，本发明对改接所得的嫁接苗进行花果处理，使袖珍南瓜形葡萄具备无核的优势，并且南瓜形棱痕更加明显。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1-1为实施例1得到的葡萄新种质的花序；
图1-2为实施例1得到的葡萄新种质的幼果；
图1-3为实施例1得到的葡萄新种质的成熟果穗；
图1-4为实施例1得到的葡萄新种质的成熟果粒的剖面图；
图2为对比例1得到的葡萄新种质的成熟果穗；
图3为对比例2得到的葡萄新种质的成熟果穗；
图4为对比例3得到的葡萄新种质的成熟果穗；
图5为对比例4得到的葡萄新种质的成熟果穗；
图6为对比例5得到的葡萄新种质的成熟果穗。
具体实施方式
本发明提供了一种袖珍南瓜形葡萄的培育方法，包括以下步骤：以椭圆形红亚历山大为母本，以扁圆形京蜜为父本进行杂交，得袖珍南瓜形葡萄。
本发明以椭圆形红亚历山大为母本，以扁圆形京蜜为父本进行杂交，得袖珍南瓜形葡萄。本发明所述椭圆形红亚历山大品质优、易成花、玫瑰香浓郁；所述扁圆形京蜜早熟、果肉脆、玫瑰香。本发明以品质优良的葡萄品种为杂交亲本，在优良品质的基础上增加了外观的个性化差异，得到了一种袖珍南瓜型葡萄，丰富了葡萄新种质的类型，满足休闲采摘的需要。本发明优选以嫁接在红亚历山大上的京蜜为父本。本发明以嫁接在多年生红亚历山大上的京蜜为父本，能够提高杂交父本和杂交母本的亲和性，得到更多成熟的种子后代。
在本发明中，所述杂交的方式优选包括袋内抖动授粉，将所述父本的花粉装入密封袋，轻弹密封袋使父本的花粉落入所述母本的雌蕊柱头。本发明所述花粉优选取自见花后1天的父本葡萄花序，具体的，采集花序中上部支穗得花药，放置28℃恒温箱中干燥18小时至花药裂开，研磨获得花粉。本发明优选直接用手轻弹所述密封袋，进一步优选为将装有父本花粉的密封袋套入去雄的母本化学后，用手轻弹。本发明对所述密封袋的材质没有严格要求，能够实现密封即可，优选使用PE自封袋。本发明选择袋内抖动授粉的方式进行杂交，相比常规的杂交毛笔授粉的方式，能够提高授粉效率。
本发明优选在上午10点之前完成授粉，收集授粉180～190d后完熟葡萄果穗，进行后熟处理，得杂交种子。本发明所述后熟处理的方式优选为7℃冷藏所述完熟葡萄果穗30d。本发明优选在收集完熟葡萄果穗前1～2d，喷施杀菌剂。本发明在具体实施过程中，优选根据不同的葡萄果穗生长情况确定喷施杀菌剂的时间，保证每个完熟葡萄果穗收集1～2d喷施即可。所述杀菌剂优选为抑霉唑。本发明在授粉完成到收获完熟果实的期间，按照葡萄种植过程中的需要进行常规操作，比如授粉后进行花序套袋和环割新梢等。
得杂交种子后，本发明优选对杂交种子依次进行搓擦处理和浸泡处理后，将杂交种子播种到基质中，培养得杂交苗。本发明所述搓擦处理优选将杂交种子与粗砂混合搅拌，擦去种子的种壳粘膜，使吸收水分。本发明所述浸泡处理的方式优选为将搓擦处理后的杂交种子依次浸泡于醋酸溶液中18～24h、单氰胺溶液中10～12h、咯菌腈药液中1～2h。本发明所述醋酸溶液中醋酸的质量百分含量优选为2～3％；所述单氰胺溶液中单氰胺的质量百分含量优选为1～1.5％；所述咯菌腈药液中咯菌腈的质量浓度优选为0.8～1.2‰。本发明使用醋酸溶液浸泡杂交种子能够软化种壳，使用单氰胺溶液浸泡杂交种子能够打破种子休眠，使用咯菌腈药液浸泡杂交种子具有灭菌，防治病虫害的作用。本发明在使用咯菌腈药液浸泡时，优选可以将咯菌腈药液替换为甲基托布津药液，所述甲基托布津药液的浸泡时间优选为1～2h，所述甲基托布津药液中甲基托布津的质量百分含量优选为0.7～0.9‰。
播种前，本发明优选将浸泡处理后的杂交种子置于37℃下暗培养10～15d，得到裂嘴的杂交种子；将裂嘴的杂交种子播种到基质中，培养得杂交苗。本发明对栽培基质和培养的方式没有严格要求，能够满足杂交种子正常生长即可。本发明取后熟的新鲜种子直接发芽，减少了种子低温层积的时间、种子处理促进了萌发，萌发率达90.1％。
得杂交苗后，本发明优选以所述杂交苗为接穗，嫁接到红亚历山大上，得嫁接苗。当以杂交苗为接穗进行嫁接时，本发明优选相比杂交父本扁圆形京蜜叶片裂刻深、叶背主脉直立绒毛密、节间短的杂交苗。本发明所述接穗优选为杂交苗6叶摘心后的接穗；所述红亚历山大优选包括5年红生亚历山大。本发明所述嫁接的方式优选为枝接。本发明将接穗嫁接至5年生亚历山大上，可以缩短杂交苗的童期，提早开花结果，缩短育种周期。本发明在具体实施过程中，将杂交苗与杂交父本的性状进行比较，选择特定性状的杂交苗，能够确保杂交父本DNA片段重组进母本基因组。
得嫁接苗后，本发明优选在嫁接苗新梢6叶期和开花前10天分别喷施一次营养液。本发明优选在嫁接苗新梢6叶期喷施第一营养液，在开花前10天喷施第二营养液。本发明所述第一营养液优选包括硼砂、硫酸锌、壳聚糖和海水稀释液；所述第一营养液中，所述硼砂的质量百分含量优选为0.2～0.3％，进一步优选为0.1％；所述硫酸锌的质量百分含量优选为0.4～0.6％，进一步优选为0.4～0.5％；所述壳聚糖的质量百分含量优选为0.01～0.02％，进一步优选为0.01～0.015％；所述海水稀释液的稀释倍数优选为40～60倍，进一步优选为42～58倍。本发明所述第二营养液优选包括赤霉素GA3、噻苯隆、葡萄糖酸钙和麦芽糖；所述第二营养液中，所述赤霉素GA3的浓度优选为7～9mg/L，进一步优选为7.5～8.5mg/L；所述噻苯隆的浓度优选为0.125～0.25mg/L，进一步优选为0.17～0.20mg/L；所述葡萄糖酸钙的质量优百分含量选为0.01～0.04％，进一步优选为0.02～0.03％；所述麦芽糖的质量百分含量优选为0.2～0.8％，进一步优选为0.4～0.6％。本发明在嫁接苗新梢6叶期和开花前10天喷施营养液能够为嫁接苗提供营养物质，促进花序发育、促进子房细胞分裂，提高穗重和粒重。
本发明优选在喷施第一营养液之前，待嫁接苗发芽并长至4叶后，反复摘心3次，冬季7～8月进行芽修剪。本发明对修剪的方式没有严格要求，进行中梢修剪，保留6～8个芽即可。
本发明优选对嫁接苗进行花果处理。本发明所述花果处理的方式优选包括：在花序80％花蕾开放时，用12.5～15mg/L赤霉素GA3、0.5～0.75mg/L噻苯隆、0.01～0.03wt.％Tween80和0.03～0.05wt.％嘧霉胺的混合溶液喷花序；座果初期，用25～40mg/L赤霉素GA3、2～4mg/L 6-BA、0.1～0.5wt.％壳寡糖和0.04wt.％喹啉铜的混合溶液进行蘸穗。本发明利用植物生长处理剂对嫁接苗进行花果处理，使袖珍南瓜形葡萄具备无核的优势，得到袖珍南瓜形无核葡萄，并且南瓜形果形棱痕更加明显。
本发明培育方法得到的葡萄新种质呈现南瓜型且无核，增加了外观的个性化差异，具有玫瑰香气，含糖量达19.2％，风味甜，果肉质地具有较好的硬度、咀嚼性、凝聚性，果肉爽脆，并且能稳定遗传，杂交后第3年即可开花挂果，相比传统实生苗选种可缩短育种周期2年，缩短了杂交育种周期，属于早熟品种。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
一种袖珍南瓜形无核葡萄的培育方法，由以下步骤组成：
1、亲本选择：以椭圆形品种‘红亚历山大’为母本，以嫁接在‘红亚历山大’上的果形扁圆形品种‘京蜜’为父本；
2、4月28日，选择见花后1天的父本葡萄花序，采集花序中上部支穗，将带花药的花帽一起脱下，过20目筛子去花帽获得花药，放置28℃恒温箱中干燥18小时至花药裂开，置于研钵中研磨获得花粉。选择母本花蕾顶起的花序，除副穗，保留10cm长穗尖，用镊子小心将花帽与雄蕊去掉，去除已经变黄的柱头，套硫酸纸袋隔离，3天后雌蕊柱头上出现分泌物时进行袋内抖动授粉，将父本花粉装入PE自封袋中，套入去雄的葡萄花序，手指轻弹自封袋使得雌蕊柱头上沾上花粉，在上午10点前完成授粉，然后套袋隔离与环割新梢；
3、授粉180～190d后果实完熟，喷抑霉唑杀菌后，第2天采集完熟葡萄果穗置于7℃冷库冷藏后熟30天，取出种子粗砂搅拌搓擦，依次浸泡于2wt.％醋酸溶液中24小时、1.2wt.％单氰胺溶液中12小时、1wt.‰咯菌腈药液中2小时，然后置于37℃暗培养10～15天，将裂嘴种子播种于基质块中，置于玻璃温室中培养，移栽成苗，得杂交苗；
4、杂交苗成活后6叶摘心，选择相比父本叶片裂刻深、叶背主脉直立绒毛密、节间短的杂交苗，6月23日将选好的杂交苗枝接在五年生树龄的‘红亚历山大’上，待嫁接苗发芽并长至4叶后，反复摘心3次，次年1月15日中梢修剪，保留7～8个芽；
5、嫁接苗新梢6叶期，全株喷施花序发育营养液，即含0.2wt.％硼砂、0.5％wt.硫酸锌、0.01wt.％壳聚糖的稀释50倍的海水；开花前10天喷施花蕾子房发育营养液，即含2mg/L赤霉素GA3、0.125mg/L噻苯隆、0.01wt.％葡萄糖酸钙、0.5wt.％麦芽糖混合溶液；
6、花序80％花蕾开放时，下午4点用12.5mg/L赤霉素GA3、0.5mg/L噻苯隆、0.02wt.％Tween80、0.04wt.％嘧霉胺混合溶液均匀喷花序；10～12天后,上午11时前用25～40mg/L赤霉素GA3、3.6mg/L 6-BA、0.3wt.％壳寡糖、0.04wt.％喹啉铜混合溶液蘸果穗，抖落多余液滴。
实施例2
同实施例1，区别在于步骤5开花前10天，喷施花蕾子房发育营养液，含4mg/L赤霉素GA3、0.25mg/L噻苯隆、0.01wt.％葡萄糖酸钙、0.5wt.％麦芽糖混合溶液。
实施例3
同实施例1，区别在于步骤6花序80％花蕾开放时，下午4点用15mg/L赤霉素GA3、0.6mg/L噻苯隆、0.02wt.％Tween80、0.04wt.％嘧霉胺混合溶液均匀喷花序。
对比例1
同实施例1，区别在于步骤1以椭圆形大紫王为母本，椭圆形红亚历山大为父本。
对比例2
同实施例1，区别在于步骤1以椭圆形红亚历山大为母本，圆柱形美人指为父本。
对比例3
同实施例1，区别在于步骤1以椭圆形红亚历山大为母本，椭圆形新郁为父本。
对比例4
同实施例1，区别在于步骤1以扁圆形京蜜为母本，椭圆形黑巴拉多为父本。
对比例5
同实施例1，区别在于步骤1以椭圆形新郁为母本，椭圆形红亚历山大为父本。
测试例1
观察实施例1葡萄栽培过程中葡萄的花序、幼果、成熟果穗的形状，从果实中部切开，进行拍照，结果如图1～1～图1～4；观察对比例1～5成熟果穗的形状，并进行拍照，对比例1观察结果如图2；对比例2观察结果如图3；对比例3观察结果如图4；对比例4观察结果如图5；对比例5观察结果如图6。
根据图1-1～1-4和图2～6可以看出，只有在以椭圆形红亚历山大为母本，以扁圆形京蜜为父本进行杂交后，才能得到南瓜形葡萄，并且具备无核的优势。而其他的杂交亲本的组合方式不能培育得到南瓜形葡萄。
测试例2
实施例1得到的南瓜形无核葡萄记为C10-13-682，比较C10-13-682、夏黑、京蜜、红亚历山大、巨峰和红地球的果实特性和生长特性。结果如下表1～2。
表1不同品种葡萄的生长特性
Figure BDA0003372849540000071
Figure BDA0003372849540000081
表2不同品种葡萄的果实特性
Figure BDA0003372849540000082
由表1～2可以看出，本发明培育方法的得到的葡萄品种生长周期短，属于早熟品种，并且C10-13-682果肉质地具有较好的硬度、咀嚼性、凝聚性，果肉爽脆。经农业农村部农产品及加工品质量安全监督检验测试中心检测，C10-13-682可溶性固形物达21％，总糖19.2g/100g，维生素C为8.99mg/100g，总酸3.46g/kg，糖酸比达54.9。符合《中国葡萄志》种质资源记载及评价标准，可溶性固形物含量、果实含糖量、糖酸比高，风味甜。
由以上实施例可知本发明提供的培育方法的得到的葡萄新种质呈现南瓜型且无核，增加了外观的个性化差异，具有玫瑰香气，含糖量达19.2％，风味甜，并且能稳定遗传，缩短了葡萄杂交育种周期，属于早熟品种。
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

Claims (8)

1.一种袖珍南瓜形葡萄的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：以椭圆形红亚历山大为母本，以扁圆形京蜜为父本进行杂交，得袖珍南瓜形葡萄；
所述杂交后，还包括培育，所述培育包括：培养杂交种子，得杂交苗；以所述杂交苗为接穗，嫁接到红亚历山大上，得嫁接苗；
得嫁接苗后，还包括：在嫁接苗新梢6叶期喷施第一营养液；在嫁接苗开花前10天喷施第二营养液。
2.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述杂交的方式包括袋内抖动授粉；具体包括：将所述父本的花粉装入密封袋，轻弹密封袋使父本的花粉落入所述母本的雌蕊柱头。
3.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述嫁接的方式包括枝接。
4.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述红亚历山大包括5年生红亚历山大。
5.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述第一营养液包括硼砂、硫酸锌、壳聚糖和海水稀释液；
所述硼砂的质量百分含量为0.2～0.3％；所述硫酸锌的质量百分含量为0.4～0.6％；所述壳聚糖的质量百分含量为0.01～0.02％；所述海水稀释液的稀释倍数为40～60倍。
6.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述第二营养液包括赤霉素GA3、噻苯隆、葡萄糖酸钙和麦芽糖；
所述的赤霉素GA3的浓度为7～9mg/L；所述噻苯隆的浓度为0.125～0.25mg/L噻苯隆；所述葡萄糖酸钙的质量百分含量为0.01～0.04％；所述麦芽糖的质量百分含量为0.2～0.8％。
7.根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述杂交后，还包括7℃冷藏杂交后的完熟葡萄果穗30d，得杂交种子。
8.一种袖珍南瓜形无核葡萄的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：根据权利要求1～7任一项所述的培育方法得到嫁接苗后，对嫁接苗进行花果处理；
所述花果处理包括：在花序80％花蕾开放时，用12.5～15mg/L赤霉素GA3、0.5～0.75mg/L噻苯隆、0.01～0.03wt.％ Tween 80和0.03～0.05wt.％嘧霉胺的混合溶液喷花序；座果初期，用25～40mg/L赤霉素GA3、2～4mg/L 6-BA、0.1～0.5wt.％壳寡糖和0.04wt.％喹啉铜的混合溶液进行蘸穗。
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