CN114007671A - 用于治疗上皮组织的慢性炎性损伤、化生、发育异常和癌症的方法和组合物 - Google Patents

用于治疗上皮组织的慢性炎性损伤、化生、发育异常和癌症的方法和组合物 Download PDF

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esophageal
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inhibitor
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弗兰克·麦基翁
马尔钦·杜莱巴
张盐亭
谢精忠
冼哇
马修·文森特
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University of Texas System
University of Houston System
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Traxter Pharmaceuticals
University of Texas System
University of Houston System
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Abstract

本公开提供了用于治疗患有上皮组织的慢性炎性损伤、化生、发育异常或癌症中的一种或多种的患者的方法和制剂，所述方法包括向所述患者施用相对于其中发现致病性上皮干细胞(PESC)的组织中的正常上皮干细胞选择性地杀死PESC或抑制所述PESC的增殖或分化的药剂。代表性的上皮组织包括肺、泌尿生殖、胃肠/食管、胰腺和肝组织。

Description

用于治疗上皮组织的慢性炎性损伤、化生、发育异常和癌症的 方法和组合物
优先权要求
本申请要求分别于2019年4月26日和2019年10月23日提交的美国临时申请序列号62/839,152和62/924,978的优先权，每个申请的全部内容通过引用并入本文。
联邦资助公开
本发明是在美国国家卫生研究院授予的授权号U24CA228550的政府支持下完成的。政府对本发明具有一定的权利。
背景技术
化生是用通常不存在于特定组织中的另一种成熟分化细胞类型替换一种分化细胞类型。通常，化生是由环境刺激触发的，所述环境刺激可以与微生物和炎症的有害作用协同起作用。化生的标志是细胞身份的变化。普遍地，化生是低级别发育异常的前兆，其可以在高级别发育异常和癌中达到顶点。参见图8。通常，随着炎性疾病或化生进展为发育异常，患者患癌症的风险以显著的方式增加。
图9提供了与巴雷特食管(Barret’s Esophagus；BE)相关的风险的统计概述。BE是慢性胃食管反流病(GERD)的结果并代表这种疾病的自然病程的终末期。据估计，美国20％的人口患有胃食管反流，并且这些患者中大约10％被诊断为BE。通常，在内窥镜检查期间发现BE，以用于评价GERD症状。
据文献记载，食管粘膜长期暴露于胃酸会导致复层鳞状上皮的细胞损伤并产生异常环境，其刺激肠上皮化生形式的修复。结果是，在生理上衬在食管粘膜上的复层鳞状上皮被既不是心脏型也不是胃型的病理性特化柱状上皮替换，但展现出肠型上皮的特征。这种病理类型的上皮通常展现出易患恶性肿瘤的DNA改变。取决于其是否展现出发育异常，BE的改变在组织学上分为三类：(1)无发育异常的BE；(2)伴低级别发育异常的BE；和(3)伴高级别发育异常(HGD)的BE。在伴HGD的BE中，发育异常局限于粘膜而不穿过基底膜。如果发育异常通过进入的淋巴网络延伸超过基底膜进入固有层，那么将其定义为粘膜内(浅表)腺癌，而如果其侵入肌粘膜层，则其变成侵入性腺癌。因此，将伴HGD的BE视为是侵入性腺癌的前体。
百分之六至二十的患有BE和HGD的患者在随访时17个月至35个月范围内的短时间内发展为腺癌的风险最大。来自患有BE和HGD的患者的食管切除术标本揭示30％-40％的病例为侵入性腺癌。最近的荟萃分析显示，在内窥镜监测的前1.5-7年期间，BE和HGD患者发展为食管腺癌，平均每年每100名患者中有6人发生。此外，大多数食管腺癌被认为是从经历过巴雷特化生的细胞进化而来的。
根据胃食管结合部以上肠化生的程度，BE也分为两类：(1)长节段BE，如果肠上皮长度大于3cm；和(2)短节段BE，如果肠上皮长度小于3cm。在因GERD症状而接受内窥镜检查的患者中，长节段BE的发生率为3％-5％，而短节段BE的发生率为10％-15％。长节段和短节段BE是否共享相同的致病改变或相同的恶性肿瘤易感性仍不清楚；然而，目前以相同的方式治疗两种病状。
用于治疗某些巴雷特食管患者的常见和侵入性方法是通过内窥镜消融治疗，诸如食管组织的射频消融、光动力治疗或冷冻消融。然而，尽管治疗后达到缓解的患者百分比相当高，但那些患者中的许多在几年内复发。对于其他患者，无论是由于其对消融治疗难治还是由于严重的共病而不合格，存在甚至更少的治疗选择，并且现有的那些患者仍然明显需要具有更好结果和/或长期缓解持续时间的更有效疗法。
在各种其他上皮组织上观察到类似的化生-至-发育异常-至-癌症转变。化生倾向于在持续暴露于环境因素(environmental agent)的组织中发生，所述环境因素在性质上通常是有害的。例如，肺系统(肺和气管)和胃肠道是化生的常见部位，因为其分别与空气和食物接触。在卵巢中，卵巢表面上皮和下面的卵巢间质之间的动态相互作用似乎是上皮分化、化生和最终恶性转化的起源。
不仅对于对上皮组织的癌症有效的治疗，而且对于针对那些组织的化生和发育异常的治疗，都存在大量未满足的医疗需求。
发明内容
本公开的一个方面提供一种用于治疗患有上皮组织的慢性炎性损伤、化生、发育异常或癌症的患者的方法，所述方法包括向所述患者施用相对于其中发现致病性上皮干细胞(PESC)的组织中的正常上皮干细胞选择性地杀死PESC或抑制所述PESC的增殖或分化的抗PESC剂。代表性上皮组织包括肺、泌尿生殖、胃肠、胰腺和肝组织。
本公开的另一方面提供一种降低有需要的受试者中PESC的增殖、存活、迁移或集落形成能力的方法，其包括使PESC与治疗有效量的相对于其中发现PESC的组织中的正常上皮干细胞选择性地杀死PESC群体或抑制PESC群体的增殖或分化的抗PESC剂接触。
本公开的另一方面提供一种用于治疗上皮组织的慢性炎性损伤、化生、发育异常或癌症中的一种或多种的药物制剂，所述制剂包含相对于正常上皮干细胞选择性地杀死PESC或抑制所述PESC的增殖或分化的抗PESC剂。在某些实施方案中，用于治疗的靶组织是肺。在某些实施方案中，用于治疗的靶组织是肺肿瘤，诸如用于治疗非小细胞肺癌(NSCLC)或小细胞肺癌(SCLC)。在某些实施方案中，用于治疗的靶组织是卵巢、输卵管和/或子宫颈组织，诸如用于治疗子宫颈化生、子宫颈癌、输卵管癌和/或卵巢癌(包括紫杉醇(taxol)和/或顺铂(cisplatin)抗性卵巢癌)。
例如，本公开提供一种用于治疗患有食管炎(包括嗜酸性粒细胞性食管炎或EoE)、巴雷特食管、食管发育异常或食管癌中的一种或多种的患者的方法，所述方法包括向所述患者施用相对于正常食管干细胞选择性地杀死巴雷特食管干细胞(BESC)或抑制所述BESC的增殖或分化的抗PESC剂。在某些实施方案中，患者患有食管炎。在某些实施方案中，患者患有巴雷特食管。在某些实施方案中，患者患有食管发育异常。在某些实施方案中，患者患有食管癌。在某些实施方案中，患者患有食管癌，诸如食管腺癌或食管鳞状细胞癌。
本公开的另一方面提供一种降低有需要的受试者中BESC的增殖、存活、迁移或集落形成能力的方法，其包括使BESC与治疗有效量的相对于正常食管干细胞选择性地杀死BESC或抑制所述BESC的增殖或分化的抗PESC剂接触。
本公开的另一方面提供一种用于治疗食管炎、巴雷特食管、食管发育异常或食管癌中的一种或多种的药物制剂，所述制剂包含相对于正常食管干细胞选择性地杀死BESC或抑制所述BESC的增殖或分化的抗PESC剂。在某些实施方案中，患者患有食管炎。在某些实施方案中，患者患有巴雷特食管。在某些实施方案中，患者患有食管发育异常。在某些实施方案中，患者患有食管癌。在某些实施方案中，患者患有食管癌，诸如食管腺癌或食管鳞状细胞癌。
本公开的又一方面提供一种诸如用于治疗食管炎、巴雷特食管、食管发育异常或食管癌中的一种或多种的药物洗脱装置，所述装置包括药物释放部件，所述药物释放部件包括相对于正常上皮干细胞选择性地杀死PESC或抑制所述PESC的增殖或分化的抗PESC剂，所述装置在部署于患者体内时将所述药物释放部件定位在食管腔表面附近并以足以实现腔表面对所述药剂的治疗有效暴露的量释放所述药剂。在某些实施方案中，患者患有食管炎。在某些实施方案中，患者患有巴雷特食管。在某些实施方案中，患者患有食管发育异常。在某些实施方案中，患者患有食管癌。在某些实施方案中，患者患有食管癌，诸如食管腺癌或食管鳞状细胞癌。药物洗脱装置的实例是药物洗脱支架、药物洗脱套环和药物洗脱球囊。
在其他实施方案中，提供了药物洗脱装置，其可以被植入到食管腔表面的患病部分附近，诸如腔外植入(即，粘膜下或在环形肌或纵向肌内或上)而不是腔内植入。
在某些实施方案中，抗PESC剂选择性地杀死PESC的IC50是杀死其中发现PESC的组织中的正常上皮干细胞的IC50的1/5或更小，更优选是杀死正常上皮干细胞的IC50的1/10、1/20、1/50、1/100、1/250、1/500或甚至1/1000或更小。
在某些实施方案中，抗PESC剂选择性地杀死BESC的IC50是杀死正常食管干细胞的IC50的1/5或更小，更优选是杀死正常食管干细胞的IC50的1/10、1/20、1/50、1/100、1/250、1/500或甚至1/1000或更小。
在某些实施方案中，抗PESC剂选择性抑制PESC的增殖的IC50是抑制其中发现PESC的组织中正常上皮干细胞的IC50的1/5或更小，更优选是抑制正常上皮干细胞的增殖的IC50的1/10、1/20、1/50、1/100、1/250、1/500或甚至1/1000或更小。
在某些实施方案中，抗PESC剂选择性抑制BESC的增殖的IC50是抑制正常食管干细胞的增殖的IC50的1/5或更小，更优选是抑制正常食管干细胞的增殖的IC50的1/10、1/20、1/50、1/100、1/250、1/500或甚至1/1000或更小。
在某些实施方案中，抗PESC剂选择性抑制PESC的分化的IC50是抑制正常上皮干细胞的分化的IC50的1/5或更小，更优选是抑制正常上皮干细胞的分化的IC50的1/10、1/20、1/50、1/100、1/250、1/500或甚至1/1000或更小。
在某些实施方案中，抗PESC剂选择性抑制BESC的分化的IC50是抑制正常食管干细胞的分化的IC50的1/5或更小，更优选是抑制正常食管干细胞的分化的IC50的1/10、1/20、1/50、1/100、1/250、1/500或甚至1/1000或更小。
在某些实施方案中，抗PESC剂对于治疗食管炎、巴雷特食管、食管发育异常和/或食管癌的治疗指数(TI)为至少2，并且更优选对于治疗食管炎、巴雷特食管、食管发育异常和/或食管癌的治疗指数为至少5、10、20、50、100、250、500或1000。
在某些实施方案中，抗PESC剂对于治疗卵巢、输卵管和/或子宫颈化生或发育异常的治疗指数(TI)为至少2，并且更优选治疗指数为至少5、10、20、50、100、250、500或1000。
在某些实施方案中，抗PESC剂对于治疗卵巢癌(诸如紫杉醇和/或顺铂抗性卵巢癌)的治疗指数(TI)为至少2，并且更优选治疗指数为至少5、10、20、50、100、250、500或1000。
在某些实施方案中，抗PESC剂对于治疗肺癌(诸如NSCLC或SCLC)的治疗指数(TI)为至少2，并且更优选治疗指数为至少5、10、20、50、100、250、500或1000。
在某些实施方案中，抗PESC剂对于治疗肺化生或发育异常的治疗指数(TI)为至少2，并且更优选治疗指数为至少5、10、20、50、100、250、500或1000。
在某些实施方案中，抗PESC剂抑制PESC的增殖或分化，或杀死PESC，其IC50为10-6M或更小，更优选为10-7M或更小、10-8M或更小或10-9M或更小。
在某些实施方案中，抗PESC剂抑制BESC的增殖或分化，或杀死BESC，其IC50为10-6M或更小，更优选为10-7M或更小、10-8M或更小或10-9M或更小。
在某些实施方案中，在内窥镜消融治疗期间或之后施用抗PESC剂，所述内窥镜消融治疗诸如食管组织的射频消融、光动力治疗或冷冻消融。
在某些实施方案中，抗PESC剂通过局部施加，诸如施加至食管组织、泌尿生殖组织或肺组织来施用。
在某些实施方案中，抗PESC剂通过粘膜下注射，诸如注射至食管组织、泌尿生殖组织或肺组织来施用。
在某些实施方案中，抗PESC剂被配制用于粘膜下注射，诸如注射至食管组织、泌尿生殖组织或肺组织。
在某些实施方案中，抗PESC剂被配制用于局部施加，诸如施加至食管组织、泌尿生殖组织或肺组织。
在某些实施方案中，抗PESC剂被配制为生物粘附制剂的部分。
在某些实施方案中，抗PESC剂被配制为药物洗脱颗粒、药物洗脱基质或药物洗脱凝胶的部分。
在某些实施方案中，抗PESC剂被配制为生物可侵蚀药物洗脱颗粒、生物可侵蚀药物洗脱基质或生物可侵蚀药物洗脱凝胶的部分。
在某些实施方案中，本公开提供一种用于局部施加至食管腔表面的食管局部滞留制剂，其包含(i)相对于正常食管干细胞选择性地杀死致病性上皮干细胞或抑制致病性上皮干细胞的增殖或分化的抗PESC剂，(ii)生物粘附剂，和(iii)任选地，一种或多种药学上可接受的赋形剂。
例如，所述制剂在食管组织上的粘膜表面滞留半衰期可以为至少30分钟，更优选为至少60分钟、120分钟、180分钟、240分钟或甚至300分钟。
例如，所述制剂可以在其被施加至少30分钟，更优选至少60分钟、120分钟、180分钟、240分钟或甚至300分钟的其所施加的食管组织中产生至少最低有效浓度(MEC)的抗PESC剂。
例如，所述制剂可以在其以至少2小时，更优选至少4小时、6小时、8小时、10小时或甚至12小时的T1/2施加的其所施加的食管组织中产生抗PESC剂浓度。
在某些实施方案中，制剂产生的抗PESC剂的全身浓度小于所述药剂的最大耐受剂量(MTD)的1/3，甚至更优选小于所述药剂的最大耐受剂量(MTD)的1/5、1/10、1/20、1/50或甚至1/100。
在某些实施方案中，局部制剂是用于涂布食管的粘性生物粘附液体。
在某些实施方案中，局部制剂包含抗PESC洗脱多颗粒、微粒、纳米颗粒或微盘。
在另外的实施方案中，提供了具有聚合物表面的生物粘附纳米颗粒，其粘附力等于在人粘膜表面上测量的10N/m2与100,000N/m2之间的粘附力，所述纳米颗粒还包括至少一种抗PESC剂，所述抗PESC剂分散于其中或其上，其中所述纳米颗粒在粘附于粘膜组织时将所述抗PESC剂洗脱至粘膜凝胶层中。
抗PESC剂可以选自例如组蛋白脱甲基酶抑制剂、JmjC脱甲基酶抑制剂、泛JmjC脱甲基酶抑制剂、受体酪氨酸激酶抑制剂、EGFR抑制剂、HER2抑制剂、双重EGFR/HER2抑制剂、蛋白酶体抑制剂、免疫蛋白酶体抑制剂、STAT抑制剂、STAT3抑制剂、FLT3抑制剂、GSK3抑制剂、HSP90抑制剂、HSP70抑制剂和双重HSP90/HSP70抑制剂或其组合，
在某些实施方案中，生物粘附纳米颗粒还包括至少一种分散于其中或其上的ESO再生剂，其中所述纳米颗粒在粘附于粘膜组织时将所述抗PESC剂和ESO再生剂两者洗脱至所述粘膜凝胶层中。
在某些实施方案中，ESO再生剂是ABL激酶抑制剂、优选BCR-ABL激酶抑制剂的泛抑制剂。示例性泛抑制剂包括伊马替尼、尼洛替尼、达沙替尼、博舒替尼和普纳替尼，并且优选是普纳替尼。
在某些实施方案中，ESO再生剂是BACE抑制剂、FAK抑制剂、VEGR抑制剂或AKT抑制剂。
在某些实施方案中，粘膜下滞留制剂产生ESO再生剂，诸如普纳替尼的全身浓度，其小于所述药剂的最大耐受剂量(MTD)的1/3，并且甚至更优选小于所述药剂的最大耐受剂量(MTD)的1/5、1/10、1/20、1/50或甚至1/100。
在其他实施方案中，提供了一种粘膜下滞留制剂，其包含至少一种抗PESC剂和一种或多种药学上可接受的赋形剂，所述制剂是粘膜下可注射的并形成将有效量的抗PESC剂释放至周围组织中的粘膜下贮库。
在某些实施方案中，粘膜下滞留制剂是用于粘膜下注射的可注射热凝胶，其包含至少一种抗PESC剂和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中热凝胶在室温下具有低粘度流体(并且易于注射)，并且在注射后在体温下变成非流动凝胶。
为了说明，在粘膜下滞留制剂中配制的抗PESC剂可以选自例如组蛋白脱甲基酶抑制剂、JmjC脱甲基酶抑制剂、泛JmjC脱甲基酶抑制剂、受体酪氨酸激酶抑制剂、EGFR抑制剂、HER2抑制剂、双重EGFR/HER2抑制剂、蛋白酶体抑制剂、免疫蛋白酶体抑制剂、STAT抑制剂、STAT3抑制剂、FLT3抑制剂、GSK3抑制剂、HSP90抑制剂、HSP70抑制剂和双重HSP90/HSP70抑制剂，或其组合，
在某些实施方案中，粘膜下滞留制剂还包括至少一种分散于其中的ESO再生剂，其中粘膜下滞留制剂将抗PESC剂和ESO再生剂释放至粘膜下注射部位周围的组织中。
在某些实施方案中，ESO再生剂是ABL激酶抑制剂、优选BCR-ABL激酶抑制剂的泛抑制剂。示例性泛抑制剂包括伊马替尼、尼洛替尼、达沙替尼、博舒替尼和普纳替尼，并且优选是普纳替尼。
在某些实施方案中，ESO再生剂是BACE抑制剂、FAK抑制剂、VEGR抑制剂或AKT抑制剂。
例如，粘膜下滞留制剂在食管组织中的粘膜下滞留半衰期可以是至少30分钟，更优选是至少60分钟、120分钟、180分钟、240分钟或甚至300分钟。
例如，粘膜下滞留制剂可以在其被注射至少30分钟，更优选至少60分钟、120分钟、180分钟、240分钟或甚至300分钟的食管组织中产生至少最低有效浓度(MEC)的抗PESC剂。
例如，粘膜下滞留制剂可以在其以至少2小时，更优选至少4小时、6小时、8小时、10小时或甚至12小时的T1/2注射的食管组织中产生抗PESC剂浓度。
本公开还提供了ESO再生剂的粘膜下滞留制剂。例如，制剂可以包括(i)BCR-ABL激酶抑制剂，和(ii)一种或多种药学上可接受的赋形剂，所述制剂是粘膜下可注射的并形成将有效量的BCR-ABL激酶抑制剂释放至周围组织的粘膜下贮库。在某些优选的实施方案中，BCR-ABL激酶抑制剂是普纳替尼。在某些优选的实施方案中，BCR-ABL激酶抑制剂是FLT3抑制剂，诸如奎扎替尼(quizartinib)(AC220)、克拉尼布(crenolanib)(CP-868596)、米哚妥林(midostaurin)(PKC-412)、来他替尼(lestaurtinib)(CEP-701)、4SC-203、TTT-3002、索拉非尼(sorafenib)(Bay-43-0006)、普纳替尼(AP-24534)、舒尼替尼(sunitinib)(SU-11248)和/或坦度替尼(tandutinib)(MLN-0518)或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物。优选地，FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)抑制剂是奎扎替尼(AC220)或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物。
在某些实施方案中，粘膜下滞留制剂在食管组织中的粘膜下滞留半衰期可以是至少30分钟，更优选是至少60分钟、120分钟、180分钟、240分钟或甚至300分钟。
在某些实施方案中，粘膜下滞留制剂可以在其被注射至少30分钟，更优选至少60分钟、120分钟、180分钟、240分钟或甚至300分钟的食管组织中产生至少最低有效浓度(MEC)的ESO再生剂。
在某些实施方案中，粘膜下滞留制剂可以在其以至少2小时，更优选至少4小时、6小时、8小时、10小时或甚至12小时的T1/2注射的食管组织中产生ESO再生剂浓度。
在某些实施方案中，粘膜下滞留制剂产生ESO再生剂，诸如普纳替尼的全身浓度，其小于所述药剂的最大耐受剂量(MTD)的1/3，并且甚至更优选小于所述药剂的最大耐受剂量(MTD)的1/5、1/10、1/20、1/50或甚至1/100。
在上述粘膜下滞留制剂中的每一种中，制剂可形成可流动和/或粘性凝胶。
在某些实施方案中，制剂是可注射的热凝胶。仅为了说明，热凝胶包括聚(乳酸-共聚-乙醇酸)-聚(乙二醇)-聚(乳酸-共聚-乙醇酸)(PLGA-PEG-PLGA)三嵌段共聚物。
在某些实施方案中，制剂为水凝胶。
在某些实施方案中，制剂适用于内窥镜解剖。
在某些实施方案中，制剂还包含抗凝剂。
在某些实施方案中，制剂还包含一种或多种镇咳药、抗组胺药、退热药、镇痛药、抗感染剂和/或化疗剂。
本公开的另一方面提供一种用于粘膜下注射的可注射热凝胶，其包含普纳替尼和(任选地)一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中所述热凝胶在室温下具有低粘度流体(并且易于注射)，并且在注射后在体温下变成非流动凝胶。
在某些实施方案中，本公开提供一种用于局部施加至食管腔表面的食管局部滞留制剂，其包含(i)ESO再生剂，(ii)生物粘附剂，和和(iii)任选地，一种或多种药学上可接受的赋形剂。例如，制剂可以包括(i)BCR-ABL激酶抑制剂，和(ii)一种或多种药学上可接受的赋形剂，所述制剂是粘膜下可注射的并形成将有效量的BCR-ABL激酶抑制剂释放至周围组织的粘膜下贮库。在某些优选的实施方案中，BCR-ABL激酶抑制剂是普纳替尼。在某些优选的实施方案中，BCR-ABL激酶抑制剂是FLT3抑制剂，诸如奎扎替尼(AC220)、克拉尼布(CP-868596)、米哚妥林(PKC-412)、来他替尼(CEP-701)、4SC-203、TTT-3002、索拉非尼(Bay-43-0006)、普纳替尼(AP-24534)、舒尼替尼(SU-11248)和/或坦度替尼(MLN-0518)或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物。优选地，FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)抑制剂是奎扎替尼(AC220)或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物。
例如，局部制剂在食管组织上的粘膜表面滞留半衰期可以是至少30分钟，更优选是至少60分钟、120分钟、180分钟、240分钟或甚至300分钟。
例如，局部制剂可以在其被施加至少30分钟，更优选至少60分钟、120分钟、180分钟、240分钟或甚至300分钟的其所施加的食管组织中产生至少最低有效浓度(MEC)的ESO再生剂。
例如，局部制剂可以在其以至少2小时，更优选至少4小时、6小时、8小时、10小时或甚至12小时的T1/2施加的其所施加的食管组织中产生的ESO再生剂浓度。
在某些实施方案中，粘膜下滞留制剂产生ESO再生剂，诸如普纳替尼的全身浓度，其小于所述药剂的最大耐受剂量(MTD)的1/3，并且甚至更优选小于所述药剂的最大耐受剂量(MTD)的1/5、1/10、1/20、1/50或甚至1/100。
在某些实施方案中，局部制剂是用于涂布食管的粘性生物粘附液体。
在某些实施方案中，局部制剂包含抗PESC洗脱多颗粒、微粒、纳米颗粒或微盘。
在某些实施方案中，局部制剂还包含抗凝剂。
在某些实施方案中，局部制剂还包含一种或多种镇咳药、抗组胺药、退热药、镇痛药、抗感染剂和/或化疗剂。
在另外的实施方案中，提供了具有聚合物表面的生物粘附纳米颗粒，其粘附力等于在人粘膜表面上测量的10N/m2与100,000N/m2之间的粘附力，所述纳米颗粒还包括至少一种ESO再生剂，所述ESO再生剂分散于其中或其上，其中所述纳米颗粒在粘附至粘膜组织时将所述ESO再生剂洗脱至粘膜凝胶层中。例如，制剂可以包括(i)BCR-ABL激酶抑制剂，和(ii)一种或多种药学上可接受的赋形剂，所述制剂是粘膜下可注射的并形成将有效量的BCR-ABL激酶抑制剂释放至周围组织的粘膜下贮库。在某些优选的实施方案中，BCR-ABL激酶抑制剂是普纳替尼。在某些优选的实施方案中，BCR-ABL激酶抑制剂是FLT3抑制剂，诸如奎扎替尼(quizartinib)(AC220)、克拉尼布(crenolanib)(CP-868596)、米哚妥林(midostaurin)(PKC-412)、来他替尼(lestaurtinib)(CEP-701)、4SC-203、TTT-3002、索拉非尼(sorafenib)(Bay-43-0006)、普纳替尼(AP-24534)、舒尼替尼(sunitinib)(SU-11248)和/或坦度替尼(tandutinib)(MLN-0518)或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物。优选地，FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)抑制剂是奎扎替尼(AC220)或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物。
在某些实施方案中，粘膜下滞留制剂产生ESO再生剂，诸如普纳替尼的全身浓度，其小于所述药剂的最大耐受剂量(MTD)的1/3，并且甚至更优选小于所述药剂的最大耐受剂量(MTD)的1/5、1/10、1/20、1/50或甚至1/100。
在某些实施方案中，生物粘附纳米颗粒还包含抗凝剂。
在某些实施方案中，生物粘附纳米颗粒还包含一种或多种镇咳药、抗组胺药、退热药、镇痛药、抗感染剂和/或化疗剂。
在另外的实施方案中，提供了一种药物洗脱装置，所述装置包括药物释放部件，所述药物释放部件包括抗PESC剂，所述装置在部署于患者体内时将药物释放部件定位在靶上皮组织附近，并且以足以实现所述靶上皮组织对所述药剂的治疗有效暴露的量释放所述药剂。
在某些实施方案中，所述靶上皮组织是食管组织。
在某些实施方案中，所述靶上皮组织是上皮来源的肿瘤，诸如卵巢肿瘤、肺肿瘤、胃肿瘤或食管肿瘤或其转移部位。
例如，药物洗脱装置可以在其被施加至少30分钟，更优选至少60分钟、120分钟、180分钟、240分钟或甚至300分钟的其所施加的靶上皮组织中产生至少最低有效浓度(MEC)的抗PESC剂。
例如，药物洗脱装置可以在其以至少2小时，更优选至少4小时、6小时、8小时、10小时或甚至12小时的T1/2的其所施用的食管组织中产生的抗PESC剂浓度。
在某些实施方案中，药物洗脱装置产生的抗PESC剂的全身浓度小于所述药剂的最大耐受剂量(MTD)的1/3，甚至更优选小于所述药剂的最大耐受剂量(MTD)的1/5、1/10、1/20、1/50或甚至1/100。
在某些实施方案中，所述药物洗脱装置用于治疗食管炎、巴雷特食管、食管发育异常或食管癌中的一种或多种，所述装置包括药物释放部件，所述药物释放部件包括相对于正常食管干细胞选择性地杀死巴雷特食管干细胞(BESC)或抑制所述BESC的增殖或分化的抗BESC剂，所述装置当在部署于患者体内时将所述药物释放部件定位在食管腔表面附近，并且以足以实现腔表面对所述药剂的治疗有效暴露的量释放所述药剂。
示例性药物洗脱装置包括可生物降解的支架、可自膨胀的支架(诸如可自膨胀的金属支架(SEMS)或可自膨胀的塑料支架(SEPS))、用于粘膜下植入的芯片和晶片等。
在其他实施方案中，药物洗脱装置是用于腔外放置的装置，诸如微针袖带。
在某些实施方案中，抗PESC剂与止痛剂和/或抗感染剂共同施用。这些可以作为单独的制配剂施用，或任选地，可以将抗PESC剂与止痛剂或抗感染剂或两者共同配制。
在某些实施方案中，抗PESC剂被配制为用于口服递送至食管的液体。
在某些实施方案中，抗PESC剂被配制为单次口服剂量。
在某些实施方案中，通过药物洗脱装置递送抗PESC剂，所述药物洗脱装置是药物洗脱支架。
在某些实施方案中，通过药物洗脱装置递送抗PESC剂，所述药物洗脱装置是具有包括药剂的表面涂层的球囊导管。
在某些实施方案中，抗PESC剂是细胞可渗透的，诸如特征在于渗透系数是10-9或更大，更优选是10-8或更大或10-7或更大。
在某些实施方案中，抗PESC剂是组蛋白脱甲基酶抑制剂。在某些优选的实施方案中，抗PESC剂是JmjC抑制剂。例如，其可以是结合并抑制催化性JmjC结构域的JmjC抑制剂。在其他情况下，其可以是作为植物同源结构域(PHD)抑制剂或蛋白质-蛋白质相互作用抑制剂的JmjC抑制剂。
在某些实施方案中，抗PESC剂是泛JmjC脱甲基酶抑制剂。示例性JmjC抑制剂是JIB04。本文描述了其他示例性JmjC脱甲基酶抑制剂，包括泛JmjC脱甲基酶抑制剂。
在某些实施方案中，抗PESC剂是受体酪氨酸激酶抑制剂。在某些优选的实施方案中，受体酪氨酸激酶抑制剂是EGFR抑制剂、HER2抑制剂或双重EGFR/HER2抑制剂。
在某些实施方案中，抗PESC剂是蛋白酶体抑制剂。
在某些实施方案中，抗PESC剂是STAT抑制剂，并且优选地可以是STAT3抑制剂。
在某些实施方案中，抗PESC剂是FLT3抑制剂。
在某些实施方案中，抗PESC剂是GSK3抑制剂。
在某些实施方案中，抗PESC剂是HSP90抑制剂、HSP70抑制剂或双重HSP90/HSP70抑制剂。
在某些实施方案中，抗PESC剂选自由以下组成的组：
Figure BDA0003416868420000171
在本公开的方法、制剂和装置的某些实施方案中，抗PESC剂与选择性促进正常上皮干细胞的增殖或其他再生和伤口愈合活性的第二药剂(“ESO再生剂”)一起施用，其EC5o的效力是对PESC效力的至少5倍，更优选地其EC5o的效力是对PESC效力的10倍、50倍、100倍或甚至1000倍。
在本公开的方法、制剂和装置的某些实施方案中，抗PESC剂与选择性促进正常食管干细胞的增殖或其他再生和伤口愈合活性的第二药剂(“食管ESO再生剂”)一起施用，其EC50的效力是对BESC的至少5倍，更优选其EC50的效力是对BESC的10倍、50倍、100倍或甚至1000倍。
在本公开的方法、制剂和装置的某些实施方案中，抗PESC剂与选择性促进正常上皮干细胞的增殖的ESO再生剂一起施用，其EC50为10-6M或更小，更优选为10-7M或更小、10-8M或更小或10-9M或更小。
在本公开的方法、制剂和装置的某些实施方案中，抗PESC剂与选择性促进正常食管干细胞的增殖的食管ESO再生剂一起施用，其EC50为10-6M或更小，更优选为10-7M或更小、10-8M或更小或10-9M或更小。
在某些实施方案中，抗PESC剂和ESO再生剂的组合施用对于治疗食管炎、巴雷特食管、食管发育异常和/或食管癌的治疗指数(TI)为至少2，并且更优选对于食管炎、巴雷特食管、食管发育异常和/或食管癌的治疗指数为至少5、10、20、50、100、250、500或1000。
在某些实施方案中，抗PESC剂和ESO再生剂的组合施用对于治疗卵巢、输卵管和/或子宫颈化生或发育异常的治疗指数(TI)为至少2，并且更优选治疗指数为至少5、10、20、50、100、250、500或1000。
在某些实施方案中，抗PESC剂和ESO再生剂的组合施用对于治疗卵巢癌(诸如紫杉醇和/或顺铂抗性卵巢癌)的治疗指数(TI)为至少2，并且更优选治疗指数为至少5、10、20、50、100、250、500或1000。
在某些实施方案中，抗PESC剂和ESO再生剂的组合施用对于治疗肺癌(诸如NSCLC或SCLC)的治疗指数(TI)为至少2，并且更优选治疗指数为至少5、10、20、50、100、250、500或1000。
在某些实施方案中，抗PESC剂和ESO再生剂的组合施用对于治疗肺组织化生或发育异常的治疗指数(TI)为至少2，并且更优选治疗指数为至少5、10、20、50、100、250、500或1000。
在某些实施方案中，ESO再生剂是ABL激酶抑制剂、优选BCR-ABL激酶抑制剂的泛抑制剂。示例性泛抑制剂包括伊马替尼、尼洛替尼、达沙替尼、博舒替尼和普纳替尼，并且优选是普纳替尼。
在某些实施方案中，ESO再生剂是酪氨酸激酶抑制剂，其在其施用途径后的Cmax浓度下抑制FLT3、Bcr-Abl、c-KIT、PDGFR、VEGFR和FGFR中的一种或多种，抑制Ki小于减缓或逆转食管组织化生、发育异常、癌症或其组合的进展的EC50的1/2，并且甚至更优选为1/5、1/10、1/20、1/50或甚至1/100。
在某些实施方案中，抗PESC剂和ESO再生剂作为单独的制剂施用于患者。
在某些实施方案中，抗PESC剂和ESO再生剂共同配制在一起。
本公开的一个方面提供一种单次口服剂量制剂，其包含(i)抗PESC剂，(ii)ESO再生剂，和(iii)和药学上可接受的赋形剂，由成人患者服用的所述单次口服剂量制剂在食管组织中产生一定浓度的抗PESC剂和ESO再生剂，以有效减缓或逆转食管化生、发育异常、癌症或其组合的进展。在某些优选的实施方案中，BCR-ABL激酶抑制剂是普纳替尼。在某些优选的实施方案中，BCR-ABL激酶抑制剂是FLT3抑制剂，诸如奎扎替尼(AC220)、克拉尼布(CP-868596)、米哚妥林(PKC-412)、来他替尼(CEP-701)、4SC-203、TTT-3002、索拉非尼(Bay-43-0006)、普纳替尼(AP-24534)、舒尼替尼(SU-11248)和/或坦度替尼(MLN-0518)或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物。优选地，FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)抑制剂是奎扎替尼(AC220)或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物。
在某些实施方案中，本公开的方法、制剂和装置旨在(并且适合)用于人类患者。
本公开的又一个方面提供一种用于治疗患有食管炎、巴雷特食管、食管发育异常或食管癌中的一种或多种的患者的方法，所述方法包括向患者的食管施用降低JmjC、EGFR、HER2、蛋白酶体亚基、STAT3、FLT3、GSK3、HSP90和/或HSP70中的一种或多种的表达水平以相对于正常食管干细胞选择性地杀死巴雷特食管干细胞(BESC)或抑制所述BESC的增殖或分化的核酸构建体。示例性核酸构建体包括RNAi构建体(通过RNA干扰机制降低表达的核酸)，诸如siRNA、shRNA或miRNA，以及反义核酸。在某些实施方案中，患者患有食管炎。在某些实施方案中，患者患有巴雷特食管。在某些实施方案中，患者患有食管发育异常。在某些实施方案中，患者患有食管癌。在某些实施方案中，患者患有食管癌，诸如食管腺癌或食管鳞状细胞癌。
类似地，本公开的另一个方面提供一种用于治疗患有食管炎、巴雷特食管、食管发育异常或食管癌中的一种或多种的患者的方法，所述方法包括向患者的食管施用降低JmjC、EGFR、HER2、蛋白酶体亚基、STAT3、FLT3、GSK3、HSP90和/或HSP70中的一种或多种的表达水平以相对于正常食管干细胞选择性地杀死BESC或抑制BESC的增殖或分化的CRISPR构建体。在某些实施方案中，患者患有巴雷特食管。在某些实施方案中，患者患有食管发育异常。在某些实施方案中，患者患有食管癌。在某些实施方案中，患者患有食管癌，诸如食管腺癌或食管鳞状细胞癌。
附图说明
图1A-G。BE干细胞上HTS筛选的建立。
图1A。化学筛选管线的示意图。处理BE病变的1mm活检，并且克隆混合的BE干细胞(Krt7+)和ESO干细胞(Krt5+)并在StemECHO细胞培养系统中培养。建立Krt5+ESO干细胞和Krt7+BE干细胞的单细胞衍生谱系，用GFP标记并进行化学筛选。将根除BE干细胞的药物鉴定为命中物。
图1B。用于筛选的化学文库的概述。
图1C。筛选中使用的细胞系的敏感性聚类。BE干细胞和ESO干细胞对筛选中包括的化学物质显示出总体上不同的敏感性。
图1D。左图，比较BE干细胞和ESO干细胞的中值存活率的散点图。右图，普纳替尼促进ESO干细胞的增殖。
图1E。左图，在不存在或存在普纳替尼的情况下ESO和BE干细胞的代表性图像。右图，BE和ESO干细胞对普纳替尼的剂量响应。
图1F。显示化学物质对GFP标记的干细胞的作用的扫描384板的代表性图像。
图1G。将绿色二元覆盖图转换为表示每个单独孔中集落的总面积的热图的实例。
图2A-F。鉴定双功能药物组合的协同HTS筛选。
图2A。协同HTS的HTS结果的散点图显示。所选前八种命中物以红色突出显示。
图2B。所选最高命中物的信息概述。
图2C。前八种命中物的剂量响应曲线验证了其对BE和ESO干细胞的不同作用。
图2D。左图，BE(Krt7+，绿色)/ESO(Krt5+，红色)共培养系统的扫描图像，用于验证针对八名患者的七种所选药物。右图，扫描图像的定量分析。
图2E。用来自HTS的所选命中物梯度处理的GFP标记的BE干细胞的扫描图像。
图2F。命中物的剂量曲线显示所有所选命中物都被验证能根除BE干细胞。从GFP信号阈值图像分析获得的数值用于生成剂量响应曲线。
图3A-E。3D和小鼠模型中所选命中物的验证。
图3A。上图，3D培养验证的示意图。下图，未处理的和处理的3D共培养结构的顶视图和组织切片的代表性图像。BE干细胞(Krt7+，绿色)和ESO干细胞(Krt5+，红色)在不存在所选药物组合的情况下共同存在。治疗后，根除BE干细胞(绿色)，而ESO干细胞(红色)补偿空白区域。图3B。对来自八名患者的顶视图的3D共培养治疗图像的定量分析。
图3C。小鼠模型中药物组合验证的示意图。小鼠皮下共注射有BE(被GFP标记)和ESO干细胞的混合物。连续处理后，GFP+BE干细胞变得不可见。
图3D。来自处理的和未处理的小鼠的BE干细胞(Krt7+，绿色)/ESO干细胞(Krt5+，红色)共移植结构的组织学分析。
图3E。通过处理未处理的和处理的移植物并在StemECHO培养系统中培养进行克隆源性测定的定量分析。
图3F。用一系列剂量的八种所选命中物连同1μM普纳替尼处理的BE干细胞和ESO干细胞的扫描图像。除了在筛选中似乎是假阳性命中物的AZD1080外，其对BE和ESO干细胞的不同作用得到验证。
图4A-E。药物组合根除了患者匹配的BE、发育异常和癌症。
图4A。巴雷特、发育异常、肿瘤和正常食管的干细胞基因表达的PCA图。
图4B。BE、发育异常和癌症干细胞相比于ESO干细胞中重叠基因的维恩图(Venndiagram)。
图4C。BE、发育异常和癌症中富集的常见途径。
图4D。由HTS中鉴定的命中物靶向的途径。
图4E。上图，用七种不同药物组合处理的共培养的BE干细胞(Krt7+，绿色)和ESO干细胞(Krt5+，红色)的扫描图像。下图，扫描图像的定量分析显示可以用相同药物组合根除患者匹配的BE、发育异常和癌症干细胞。
图5A-G。CEP-18770和JIB04与普纳替尼一起在体外和体内根除了BE、发育异常和癌症干细胞。
图5A。关于患者匹配的BE、发育异常和癌症干细胞的3D培养验证的示意图。
图5B。左图，在存在和不存在药物组合的情况下产生ALI结构的BE、发育异常和癌症干细胞(绿色)的顶视图的扫描图像。右图，ALI结构图像的定量分析显示CEP-18770和JIB04与普纳替尼组合根除了BE、发育异常和癌症干细胞。
图5C。药物组合在异种移植有发育异常和癌症干细胞的小鼠中的体内验证的示意图。处理后，处理异种移植物以用于组织学分析或克隆源性测定以检测干细胞的存在。
图5D。CEP-19770/普纳替尼或JIB04/普纳替尼治疗后，发育异常结构(Krt7+，绿色/Ki67+，红色)减少。一致地，如扫描的若丹明染色(rhodamine staining)所示，干细胞不从处理的结构中克隆。
图5E。在药物治疗后，癌症结构(Krt7+、Ki67+)减少。若丹明染色显示癌症干细胞不从处理的结构中克隆。
图5F和5G。将BE干细胞(Krt7+，绿色)和ESO干细胞(Krt5+，红色)共注射至NSG小鼠中并用JIB04或CEP-18770与普纳替尼处理。收集组织并固定以用于组织学分析。在处理的结构中未检测到BE干细胞，而Krt5+ESO结构在处理的样品中明显更稳定。
图6。将患者匹配的BE、发育异常和癌症干细胞(Krt7+，绿色)与Krt5+(红色)ESO细胞混合并共培养五天，然后用七种所选药物连同1μM普纳替尼处理。扫描图像和定量分析显示所有七种药物组合降低了BE的生长、发育异常和癌症干细胞生长，而JIB04和CEP-18770仍然是最有效的药物。
图7A-7D。可用于本公开中的组蛋白脱乙酰酶抑制剂的示例性类别和说明性结构。
图8。是表示某些上皮组织中化生至发育异常至癌症的连续体的图。
图9。是显示随着疾病从巴雷特食管进展至高级别发育异常，患者发展为食管腺癌的风险在统计学上增加的图。
图10A。证明相对于正常食管干细胞，JIB04与普纳替尼的组合在杀死致病性BE干细胞方面的协同作用。预计治疗指数大于200倍。
图10B。证明JIB04与普纳替尼的组合在杀死BE干细胞以及来自分级为发育异常和食管腺癌(EAC)的活检的干细胞方面的协同作用。预计治疗指数大于100倍。
图11A。从未使用药物的患者的高级别卵巢肿瘤活检中分离的致病性干细胞已经包括顺铂抗性干细胞群。来自未使用药物的患者的顺铂抗性干细胞群的PCA分析指示，这些细胞与来自从来自顺铂治疗复发或失败的患者的顺铂抗性肿瘤分离的干细胞的致病性干细胞成簇。
图11B。证明紫杉醇与普纳替尼的组合在体外杀死紫杉醇抗性卵巢干细胞方面的协同作用。
图11C。证明紫杉醇与普纳替尼的组合在异种移植动物模型中减少肿瘤体积紫杉醇抗性卵巢干细胞方面的协同作用。
图12。致病性干细胞可从肺癌(小细胞和非小细胞肺癌)中克隆和培养。这些致病性干细胞连同正常的再生肺干细胞可以用于高通量筛选板。
图13。证明相对于正常肺上皮干细胞，JIB04与普纳替尼的组合在杀死NSCLC和SCLC干细胞方面的协同作用。
某些实施方案的描述
I.综述
巴雷特食管在癌症生物学和患者护理的界面处占据关键的地位。巴雷特氏病首次发现于1950年代，并且在1970年代与腺癌的风险相关。巴雷特氏病已经成为癌前病变的范例，在需要多年支持整体逐步升级模型的过程中，癌前病变逐渐产生更多的晚期病变，由此非癌病变经历随机变化的长期过程，其中一些随机变化产生更险恶和决定性的向低级别发育异常和高级别发育异常的转变，然后快速且几乎不可阻挡地进展为恶性疾病。对靶向这些癌前病变的预防性治疗的重要性的认识是癌症预防的基础。如果是真的，预防食管腺癌发作的临床解决方案将是简单而直接的：在巴雷特氏病可能进展为更具侵袭性的病变之前将其消融。
巴雷特氏病的靶向治疗的发展需要对巴雷特氏病起源的概念性进步和对巴雷特干细胞存在的认识。如果EAC的癌前阶段代表了对这种疾病的唯一易处理的解决方案，那么有必要解决BE起源的谜题并开发特异性靶向其干细胞的新治疗策略。然而，BE的个体发育已经成为具有各种假设的令人感兴趣的难题，所述假设包括食管鳞状干细胞的转移、从下部胃肠部位的迁移、粘膜下腺的修复性出现、骨髓的播散。我们最近显示BE来源于预先存在于胃食管结合部处的残余胚胎细胞的机会性生长(Wang等人，Cell.2011年6月24日；145(7)：1023-1035)。此外，使用能使我们能够克隆正常人胃肠道干细胞的基态干细胞技术，我们证明了BE中存在干细胞(Yamamoto等人，Nat Commun.2016年1月19日；7：10380)并建议其是在设计用于预防这种不可逆的和危险的化生的发展和进展的治疗程序中靶向的关键要素。
为了揭示可以与物理消融方案协同以进一步减少复发性疾病的特异性靶向BE干细胞的药物，本文提供了对已建立的和实验的药物或其组合的多重筛选，以鉴定选择性靶向支配这些BE病变的存活的特定途径的化合物和化合物组合。这些BE干细胞用于与正常上皮鳞状干细胞的杂交模型中，以模拟这些药物组合改变远端食管中这些病变的竞争状态的潜在能力。
本文还提供了显示患者匹配的BE、发育异常和EAC的干细胞的类似选择性脆弱性的筛选方法，其建议广泛使用将增加物理消融或粘膜解剖治疗的药理学组合物。实际上，如本文所呈现的数据所证明，致病性干细胞对单一药剂或组合疗法的不同敏感性是跨多种组织和跨来自那些组织的化生、发育异常或肿瘤样品进行的。
II.定义
除非另有说明，否则说明书和权利要求书中使用的以下术语是出于本申请的目的而定义的并具有以下含义：
“烷基”意指具有一个至六个碳原子的直链饱和单价烃基或具有三个至六个碳原子的支链饱和单价烃基，例加甲基、乙基、丙基、2-丙基、丁基(包括所有异构形式)、戊基(包括所有异构形式)等。如本文所用的术语“烷基”与术语“脂族”同义。
如本文所用的术语“烯基”描述了优选为主链中含有两个至八个碳原子且至多20个碳原子的低级烯基的基团。其可以是直链或支链或环状的，并且包括乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基、异丁烯基、己烯基等。
如本文所用的术语“炔基”描述了优选为主链中含有两个至八个碳原子且至多20个碳原子的低级炔基的基团。其可以是直链或支链的，并且包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、异丁炔基、己炔基等。
“烷基磺酰基”意指-SO2R基团，其中R为如上所定义的烷基，例如甲基磺酰基、乙基磺酰基等。
“烷氧基”意指-OR基团，其中R为如上所定义的烷基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基或2-丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基等。
“氨基烷基”意指被至少一个，优选一个或两个-NRR取代的具有一个至六个碳原子的直链单价烃基或具有三个至六个碳的支链单价烃基，其中R是氢、烷基或-CORa，其中Ra为各自如上所定义的烷基，并且R选自各自如本文所定义的氢、烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基或卤代烷基，例如氨基甲基、甲基氨基乙基、2-乙基氨基-2-甲基乙基、1，3-二氨基丙基、二甲基氨基甲基、二乙基氨基乙基、乙酰氨基丙基等。
“氨基磺酰基”意指-SO2NRR′基团，其中R独立地为各自如本文所定义的氢、烷基、羟基烷基、烷氧基烷基或氨基烷基，并且R′为各自如本文所定义的氢、烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基、杂环基烷基、羟基烷基、烷氧基烷基或氨基烷基，例如-SO2NH2、甲基氨基磺酰基、2-二甲基氨基磺酰基等。
“酰基”意指-COR基团，其中R为各自如本文所定义的烷基、卤代烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基或杂环基烷基，例如乙酰基、丙酰基、苯甲酰基、吡啶基羰基等。当R是烷基时，所述基团在本文中也称为烷基羰基。
“酰氨基”意指-NHCOR基团，其中R为各自如本文所定义的烷基、卤代烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基或杂环基烷基，例如乙酰氨基、丙酰氨基等。
“芳基”意指具有6个至10个环原子的单价单环或双环芳族烃基，例如苯基或萘基。如本文所用，“芳基”和“芳族”可互换使用。
“桥连杂环基”意指具有5个至10个环原子的饱和或不饱和单价双环基团，其中一个或两个环原子为选自N、O或S(0)n的杂原子，其中n为0至2的整数，其余环原子为C，其中一些环由一个或多个桥形成。
“环烷基”意指具有三个至十个碳原子的环状饱和单价烃基，例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基等。环烷基环可以任选地与如本文所定义的苯基或单环杂芳基环稠合。当环烷基环在本文中称为“稠合环烷基”时，其意指环烷基环与苯基或单环杂芳基环稠合。当环烷基环在本文中称为“单环环烷基”时，其意指环烷基环不与苯基或单环杂芳基环稠合。如本文所用，“环烷基”、“碳环”和“碳环基”可互换使用。
“羧基”意指-COOH。
“二取代的氨基”意指-NRR′基团，其中R和R′独立地为各自如本文所定义的烷基、环烷基、环烷基烷基、酰基、磺酰基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基、杂环基烷基、羟基烷基、烷氧基烷基或氨基烷基，例如二甲基氨基、苯基甲基氨基等。当R和R′为烷基时，所述基团在本文中称为二烷基氨基。
“卤基”意指氟、氯、溴或碘，优选为氟或氯。“卤代烷基”意指被一个或多个卤素原子，优选一个至五个卤素原子，优选氟或氯取代的如上所定义的烷基，包括被不同卤素取代的那些烷基，例如-CH2Cl、-CF3、-CHF2、-CH2CF3、-CF2CF3、-CF(CH3)2等。当烷基仅被氟取代时，其在本申请中被称为氟代烷基。
“羟基烷基”意指被一个或两个羟基取代的具有一个至六个碳原子的直链单价烃基或具有三个至六个碳的支链单价烃基，条件是如果存在两个羟基，则其不都在同一碳原子上。代表性实例包括但不限于羟基甲基、2-羟基乙基、2-羟基丙基、3-羟基丙基、I-(羟基甲基)-2-甲基丙基、2-羟基丁基、3-羟基丁基、4-羟基丁基、2，3-二羟基丙基、1-(羟基甲基)-2-羟基乙基、2，3-二羟基丁基、3，4-二羟基丁基和2-(羟基甲基)-3-羟基丙基，优选为2-羟基乙基、2，3-二羟基丙基或1-(羟基甲基)-2-羟基乙基。
“杂环基”意指具有4个至8个环原子的饱和或不饱和单价单环基团，其中一个或两个环原子为选自N、O或S(0)n的杂原子，其中n为0至2的整数，其余环原子为C。杂环基环任选地与如本文所定义的(一个)芳基或杂芳基环稠合，条件是芳基和杂芳基环是单环的。与单环芳基或杂芳基环稠合的杂环基环在本申请中也称为“双环杂环基”环。另外，杂环基环中的一个或两个环碳原子可任选地被-CO-基团替换。更具体地，术语杂环基包括但不限于吡咯烷基、哌啶基、高哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代哌啶基、吗啉基、哌嗪基、四氢吡喃基、硫代吗啉基、四氢异喹啉基等。当杂环基环不饱和时，其可含有一个或两个环双键，条件是所述环不是芳族的。当杂环基含有至少一个氮原子时，其在本文中也称为杂环氨基且为杂环基的子集。当杂环基为饱和环且未如上所述与芳基或杂芳基环稠合时，其在本文中也称为饱和单环杂环基。
“杂芳基”意指具有5个至10个环原子的单价单环或双环芳族基团，其中一个或多个，优选一个、两个或三个环原子是选自N、O或S的杂原子，其余环原子是碳。代表性实例包括但不限于吡咯基、噻吩基、噻唑基、咪唑基、呋喃基、吲哚基、异吲哚基、噁唑基、异噁唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹啉基、异喹啉基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基、四唑基等。
“单取代的氨基”是指-NHR基团，其中R为各自如本文所定义的烷基、环烷基、环烷基烷基、酰基、磺酰基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基、杂环基烷基、羟基烷基、烷氧基烷基或氨基烷基，例加甲基氨基、2-苯基氨基、羟基乙基氨基等。当R是烷基时，所述基团在本文中被称为单烷基氨基。
化合物的“药学上可接受的盐”意指药学上可接受的并且具有母体化合物的所需药理学活性的盐。此类盐包括：与无机酸一起形成的酸加成盐，所述无机酸诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或与有机酸一起形成的酸加成盐，所述有机酸诸如甲酸、乙酸、丙酸、己酸、环戊丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、葡庚糖酸、4，4′-亚甲基双-(3-羟基-2-烯-I-羧酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等；或当母体化合物中存在的酸性质子被金属离子，例如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子替换时形成的盐；或与有机碱，诸如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等配位的盐。应理解药学上可接受的盐是无毒的。关于合适的药学上可接受的盐的其他信息可见于Remington′sPharmaceutical Sciences，第17版，Mack Publishing Company，Easton，PA，1985，其通过引用并入本文。本公开的化合物也可以作为共晶体存在。
本公开的化合物可以具有不对称中心。含有不对称取代的原子的本公开的化合物可以光学活性、外消旋形式或其他异构体混合物分离。如何制备光学活性形式是本领域众所周知的，诸如通过材料的拆分。所有手性、非对映异构、外消旋形式均在本公开的范围内，除非具体指示具体的立体化学或异构形式。
某些化合物可作为互变异构体和/或几何异构体存在。所有可能的互变异构体以及顺式和反式异构体(作为单独形式及其混合物)均在本公开的范围内。另外，如本文所用的术语烷基包括所述烷基的所有可能的异构形式，尽管仅列出了几个实例。
“药学上可接受的载体或赋形剂”是指可用于制备药物组合物的载体或赋形剂，其通常是安全的、无毒的并且既不是生物学上也不是其他方面不合需要的，并且包括对于兽医用途以及人类药物用途可接受的载体或赋形剂。说明书和权利要求书中使用的“药学上可接受的载体/赋形剂”包括一种和超过一种这种赋形剂。
“磺酰基”意指-SO2R基团，其中R为各自如本文所定义的烷基、卤代烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基、杂环基烷基，例如甲基磺酰基、苯基磺酰基、苯甲基磺酰基、吡啶基磺酰基等。当R为烷基时，其在本文中也称为烷基磺酰基。
“取代的烷基”意指具有一个至六个碳原子的直链饱和单价烃基或具有三个至六个碳原子的支链饱和单价烃基，其中烷基链中的一个或两个氢原子独立地被羟基、卤基、烷氧基、氨基、单取代的氨基、二取代的氨基、氰基、磺酰基、氨基羰基、氨基磺酰基、-NHCONH2、羧基、酰基、酰基氨基、苯基或烷氧基羰基替换，各基团如本文所定义。
“取代的炔基”意指含有三键的具有两个至六个碳原子的直链饱和单价烃基或具有三个至六个碳原子的支链单价烃基，其中炔基链中的一个或两个氢原子独立地被苯基、羟基、烷氧基、氨基、单取代的氨基、二取代的氨基、氰基、磺酰基、氨基羰基、氨基磺酰基、-NHCONH2、羧基、酰基、酰氨基或烷氧基羰基替换，各基团如本文所定义。
疾病的“治疗(Treating/treatment)”包括：预防所述疾病，即在可能暴露于或易患所述疾病但尚未经历或显示所述疾病的症状的哺乳动物中引起所述疾病的临床症状不发展；抑制疾病，即阻止或减少所述疾病或其临床症状的发展；或缓解疾病，即引起所述疾病或其临床症状的消退。
III.示例性实施方案
a.组蛋白脱甲基酶抑制剂
组蛋白脱甲基酶的Jumonji家族是过去几年中许多研究的焦点。许多报道已经证明了这些酶在癌症以外的多种生理和病理状况中的相关性，包括早期发育、生殖、代谢和心脏肥大。Jumonji催化结构域的结构显示其是可药用的，能够容纳小分子破坏剂，使其成为用于干预的理想分子靶标。疾病中异常Jumonji脱甲基酶活性的调节应导致转录模式的正常化，诸如我们在癌细胞中用JIB04所看到的。JIB04阻断肿瘤生长并延长癌症存活的能力可能涉及Jumonji酶泛抑制在细胞中和体内的直接和间接聚集效应，并且药物可能随时间推移在癌细胞中累积，从而增加其有效浓度/表观效力。在机理上，JIB04似乎螯合Jumonji酶的催化位点中的铁并破坏组蛋白底物结合，而不是α-酮戊二酸的竞争性抑制剂，α-酮戊二酸是Jumonji抑制剂尚未描述的机制。未来的结构信息对于建立Jumonji酶和其被JIB04破坏的辅因子/底物之间的精确分子相互作用是必要的。一种可能性是抑制剂可以占据活性部位的外部，其中铁和组蛋白底物结合或以改变随后底物结合的方式结合活性部位中的铁。在高游离铁的条件下，溶液中的螯合也可有助于抑制。
在某些实施方案中，抗PESC剂为JIB-004。
Figure BDA0003416868420000331
JIB04(NSC693627，E-异构体)是有效的、选择性的和细胞可渗透的Jumonji组蛋白脱甲基酶抑制剂。与其他已知的抑制剂不同，JIB04不是a-酮戊二酸的竞争性抑制剂。其在体外抑制Jumonji酶的脱甲基酶活性，其IC50对于JARID1A(KDM5A)为约230nM，对于JMJD2A(KDM4A)和JMJD2B(KDM4B)为约440nM，对于JMJD2E(KDM2E)为约340nM，并且对于JMJD3(KDM6B)和JMJD2C(KDM4C)为约1μM。JIB04阻断细胞中的Jumonji脱甲基酶活性并因此抑制细胞生长，而不影响其他a-酮戊二酸依赖性羟化酶或组蛋白修饰酶，尤其是HDAC。JIB04改变癌症中而不是正常细胞中的转录程序，从而引起癌症特异性细胞死亡。重要的是，在体内，JIB04在侵袭性乳腺癌模型中降低肿瘤中的组蛋白脱甲基酶活性，降低肿瘤负荷并延长小鼠的存活。
在一些实施方案中，抑制JmjC多肽的药剂是JIB04、SD-70、ML324、KDM5-C70、PBIT、KDOHP64a、KDOQZ5、IOX1、IOX2、KDOMA83、KDMOBP69、NSC636819、吡啶并[3，4-嘧啶-4(3H)-酮衍生物、3-氨基-4-吡啶羧酸酯衍生物或其类似物。参见PCT WO2017190009A1
ML-324
Figure BDA0003416868420000341
JmjC组蛋白脱甲基酶抑制剂，正辛基-IOX1
Figure BDA0003416868420000342
KDM4A/KDM4B抑制剂，NSC636819
Figure BDA0003416868420000343
JMJD2抑制剂，5-羧基-8HQ-CAS 5852-78-8
Figure BDA0003416868420000344
JMJD组蛋白脱甲基酶抑制剂III-Calbiochem
Figure BDA0003416868420000345
JMJD组蛋白脱甲基酶抑制剂IV，甲基司他(Methylstat)-CAS1310877-95-2-Calbiochem
Figure BDA0003416868420000351
Thinnes等人Biochimica et Biophysica Acta-Gene Regulatory Mechanisms，第1839卷，第12期，2014年12月，第1416-1432页和Epigenetic Drug Discovery编WolfgangSippl，Manfred Jung，Raimund Mannhold，Helmut Buschmann，
Figure BDA0003416868420000353
Holenz，John Wiley&Sons，2019年2月11日ISBN：978-3-527-34314-0(两者均通过引用并入本文)也描述了JIB04以及其他合适的组蛋白脱甲基酶抑制剂。
在一个实施方案中，JMJD3脱甲基酶抑制剂包含3-((6-(4，5-二氢-1H-苯并[d]氮杂
Figure BDA0003416868420000354
-3(2H)-基)-2-(吡啶-2-基)嘧啶-4-基)氨基)丙酸乙酯(GSK-J4)和其活性衍生物，如Kruidenier等人，“A Selective JumonjiH3K27 Demethylase Inhibitor ModulatesProinflammatory Macrophage Response，”Nature 488：404-408(2012)中所公开，其在此全文通过引用并入。GSK-J4具有以下结构：
GSK-J4
Figure BDA0003416868420000352
也是JMJD3脱甲酰基酶抑制剂的示例性GSK4活性衍生物包括GSK-J1和GSK-J3，其具有以下结构：
GSK-J1
Figure BDA0003416868420000361
GSK-J3
Figure BDA0003416868420000362
在另一个实施方案中，JMJD3脱甲基酶抑制剂包含修饰的GSK-J1小分子，如Hu等人，“Design and Discovery of New Pyrimidine Coupled Nitrogen Aromatic Rings asChelating Groups of JMJD3Inhibitors，”Bioorg.Med.Chem.Lett.26(3)：721-725(2016)所描述，其在此全文通过引用并入。
在某些实施方案中，本公开提供了一种具有下式的化合物
Figure BDA0003416868420000363
或其药学上可接受的盐，其中
R1是-R、卤素、-OR、-SR、-N(R′)2、-CN、-NO2、-C(O)R、-CO2R、-C(O)N(R′)2、-C(O)SR、-C(O)C(O)R、-C(O)CH2C(O)R、-C(S)N(R′)2、-C(S)OR、-S(O)R、-SO2R、-SO2N(R′)2、-N(R′)C(O)R、-N(R′)C(O)N(R′)2、-N(R′)SO2R、-N(R′)SO2N(R′)2、-N(R′)N(R′)2、-N(R′)C(＝N(R′))N(R′)2、-C＝NN(R′)2，、-C＝NOR、-C(＝N(R′))N(R′)2、-OC(O)R或-OC(O)N(R′)2，其中R和R′如上文所定义和本文所述。在一些实施方案中，R1是氢。在一些实施方案中，R1是任选取代的C1-6脂族。在某些实施方案中，R1是任选取代的C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基。在某些实施方案中，R1是任选取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R1是甲基。在某些其他实施方案中，R1是乙基或叔丁基。在一些实施方案中，R1是-OR、-SR或-N(R′)2。在某些实施方案中，R1是-SR。在某些实施方案中，R1是-NH2。在某些实施方案中，R1是-CN或-NO2。在一些实施方案中，R1是卤素。在某些实施方案中，R1是氟、氯、溴或碘。在某些实施方案中，R1是氟。在一些实施方案中，R1是-C(O)R、-CO2R、-C(O)SR、-C(O)N(R′)2、-C(O)C(O)R或-C(O)CH2C(O)R。在某些实施方案中，R1是-C(S)OR或-C(S)N(R′)2。在其他实施方案中，R1是-S(O)R、-SO2R或-SO2N(R′)2。在一些实施方案中，R1是-N(R′)C(O)R、-N(R′)C(O)N(R′)2、-N(R′)SO2R、-N(R′)SO2N(R′)2、-N(R′)N(R′)2或-N(R′)C(＝N(R′))N(R′)2。在某些实施方案中，R1是-N(R′)N(R′)2。在一些实施方案中，R1是-C＝NN(R′)2、-C＝NOR、-C(＝N(R′))N(R′)2、-OC(O)R或-OC(O)N(R′)2；
环A是
Figure BDA0003416868420000381
其中X、R2、R2′、R3、R5和R6如上文所定义和本文所述。因此，在某些实施方案中，本公开的化合物是具有下式中的一种：
Figure BDA0003416868420000391
其中R1、R2、R2′、R3、R5、R6和X如上文所定义和本文所述。
如上文一般定义，R2是-R、卤素、-OR、-SR、-N(R′)2、-CN、-NO2、-C(O)R、-CO2R、-C(O)N(R′)2、-C(O)SR、-C(O)C(O)R、-C(O)CH2C(O)R、-C(S)N(R′)2、-C(S)OR、-S(O)R、-SO2R、-SO2N(R′)2、-N(R′)C(O)R、-N(R′)C(O)N(R′)2、-N(R′)SO2R、-N(R′)SO2N(R′)2、-N(R′)N(R′)2、-N(R′)C(＝N(R′))N(R′)2、-C＝NN(R′)2、-C＝NOR、-C(＝N(R′))N(R′)2、-OC(O)R或-OC(O)N(R′)2，其中R和R′如上文所定义和本文所述。在一些实施方案中，R2是氢。在一些实施方案中，R2是任选取代的C1-6脂族。在某些实施方案中，R2是任选取代的C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基。在某些实施方案中，R2是任选取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R2是乙基。在某些其他实施方案中，R2是甲基、丙基、异丙基、丁基或异丁基。在一些实施方案中，R2是被-OH或-OC1-6烷基取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R2是-CH2CH2OH或-CH2CH2OCH3。在一些实施方案中，R2是环烷基。在某些实施方案中，R2是环丙基、环丁基、环戊基或环己基。在一些实施方案中，R2是任选取代的C2-6烯基。在某些实施方案中，R2是烯丙基。在一些实施方案中，R2是任选取代的C2-6炔基。在某些实施方案中，R2是2-丙炔基。在一些实施方案中，R2是任选取代的苯甲基。在某些实施方案中，R2是未取代的苯甲基。在某些其他实施方案中，R2是取代的苯甲基。在一些实施方案中，R2是被酯基取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R2是-CH2CO2C1-6烷基或-CH2CO2芳基。在某些实施方案中，R2是-CH2CO2CH2CH3。在一些实施方案中，R2是-OR、-SR或-N(R′)2。在某些实施方案中，R2是-CN或-NO2。在一些实施方案中，R2是卤素。在某些实施方案中，R2是氟、氯、溴或碘。在一些实施方案中，R2是-C(O)R、-CO2R、-C(O)SR、-C(O)N(R′)2、-C(O)C(O)R或-C(O)CH2C(O)R。在某些实施方案中，R2是-C(S)OR或-C(S)N(R′)2。在其他实施方案中，R2是-S(O)R、-SO2R或-SO2N(R′)2。在一些实施方案中，R2是-N(R′)C(O)R、-N(R′)C(O)N(R′)2、-N(R′)SO2R、-N(R′)SO2N(R′)2、-N(R′)N(R′)2或-N(R′)C(＝N(R′))N(R′)2。在一些实施方案中，R2是-C＝NN(R′)2、-C＝NOR、-C(＝N(R′))N(R′)2、-OC(O)R或-OC(O)N(R′)2。
如上文一般定义，R2′是-R、-OR、-SR、-N(R′)2、-C(O)R、-CO2R、-C(O)N(R′)2、-C(O)SR、-C(O)C(O)R、-C(O)CH2C(O)R、-C(S)N(R′)2、-C(S)OR、-S(O)R、-SO2R、-SO2N(R′)2、-N(R′)C(O)R、-N(R′)C(O)N(R′)2、-N(R′)SO2R、-N(R′)SO2N(R′)2、-N(R′)N(R′)2、-N(R′)C(＝N(R′))N(R′)2、-C＝NN(R′)2、-C＝NOR、-C(＝N(R′))N(R′)2、-OC(O)R或-OC(O)N(R′)2，其中R和R′如上文所定义和本文所述。在一些实施方案中，R2′是氢。在一些实施方案中，R2′是任选取代的C1-6脂族基。在某些实施方案中，R2′是任选取代的C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基。在某些实施方案中，R2′是任选取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R2′是乙基。在某些其他实施方案中，R2′是甲基、丙基、异丙基、丁基或异丁基。在一些实施方案中，R2′是被-OH或-OC1-6烷基取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R2′是-CH2CH2OH或-CH2CH2OCH3。在一些实施方案中，R2′是环烷基。在某些实施方案中，R2′是环丙基、环丁基、环戊基或环己基。在一些实施方案中，R2′是任选取代的C1-6烯基。在某些实施方案中，R2′是烯丙基。在一些实施方案中，R2′是任选取代的C1-6炔基。在某些实施方案中，R2′是2-丙炔基。在一些实施方案中，R2′是任选取代的苯甲基。在某些实施方案中，R2′是未取代的苯甲基。在某些其他实施方案中，R2′是取代的苯甲基。在一些实施方案中，R2′是被酯基取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R2′是-CH2CO2C1-6烷基或-CH2CO2芳基。在某些实施方案中，R2′是-CH2CO2CH2CH3。在一些实施方案中，R2′是-OR、-SR或-N(R′)2。在一些实施方案中，R2′是-C(O)R、-CO2R、-C(O)SR、-C(O)N(R′)2、-C(O)C(O)R或-C(O)CH2C(O)R。在某些实施方案中，R2′是-C(S)OR或-C(S)N(R′)2。在其他实施方案中，R2′是-S(O)R、-SO2R或-SO2N(R′)2。在一些实施方案中，R2′是-N(R′)C(O)R、-N(R′)C(O)N(R′)2、-N(RV′)SO2R、-N(R′)SO2N(R′)2、-N(R′)N(R′)2或-N(R′)C(＝N(R′))N(R′)2。在一些实施方案中，R2′是-C＝NN(R′)2、-C＝NOR、-C(＝N(R′))N(R′)2、-OC(O)R或-OC(O)N(R′)2。
如上文一般定义，R3是-R、卤素、-OR、-SR、-N(R′)2、-CN、-NO2、-C(O)R、-CO2R、-C(O)N(R′)2、-C(O)C(O)R、-C(O)CH2C(O)R、-S(O)R、-SO2R、-SO2N(R′)2、-N(R′)C(O)R、-N(R′)C(O)N(R′)2、-N(R′)SO2R、-N(R′)SO2N(R′)2、-N(R′)N(R′)2、-C＝NN(R′)2、-C＝NOR、-OC(O)R或-OC(O)N(R′)2，其中R和R′如上文定义和本文所述。在一些实施方案中，R3是氢。在一些实施方案中，R3是任选取代的C1-6脂族基。在某些实施方案中，R3是任选取代的C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基。在某些实施方案中，R3是任选取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R3是甲基。在某些其他实施方案中，R3是乙基、丙基、异丙基、丁基或异丁基。在某些实施方案中，R3是-CF3。在一些实施方案中，R3是被-OH或-OC1-6烷基取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R3是-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH2OCH2CH3、-CH2OCH3、-CH2CH2CH2OCH3、-CH(OH)CH3或-CH2CH2OCH3。在一些实施方案中，R3是被-NHCl-6烷基或-N(C1-6烷基)2基团取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R3是-CH2NHC1-6烷基。在某些实施方案中，R3是-CH2NHCH3。在一些实施方案中，R3是被芳基、杂芳基、碳环基或杂环基环取代的C1-6烷基。在一些实施方案中，R3是任选取代的苯甲基。在某些实施方案中，R3是未取代的苯甲基。在某些其他实施方案中，R3是取代的苯甲基。在某些实施方案中，R3是-C(Ro)2Ph。在某些实施方案中，R3是-C(Ro)2Ph，其中Ro是氢或甲基。在某些实施方案中，R3是三氟甲基苯甲基。在某些实施方案中，R3是-C(Ro)2(杂芳基)。在某些实施方案中，R3是-C(Ro)2(杂芳基)，其中所述杂芳基是吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、吡啶酮基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基或噁二唑基。在某些实施方案中，R3是-CH2(杂芳基)，其中所述杂芳基是吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基或噁二唑基。在某些实施方案中，R3是-C(Ro)2(碳环基)。在某些实施方案中，R3是-C(Ro)2(碳环基)，其中所述碳环基是环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基。在某些实施方案中，R3是-CH2(碳环基)，其中所述碳环基是环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基。在某些实施方案中，R3是-C(Ro)2(杂环基)。在某些实施方案中，R3是-C(Ro)2(杂环基)，其中所述杂环基是四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、哌啶基、吡咯啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、噁唑烷基、哌嗪基、二噁烷基、二氧戊环基、二氮杂基、氧杂氮杂基、硫氮杂基、吗啉基和奎宁环基。在某些实施方案中，R3是-CH2(杂环基)，其中所述杂环基是四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、哌啶基、吡咯啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、噁唑烷基、哌嗪基、二噁烷基、二氧戊环基、二氮杂基、氧杂氮杂基、硫氮杂基、吗啉基和奎宁环基。在一些实施方案中，R3是任选取代的C2-6烯基。在某些实施方案中，R3是烯丙基。在一些实施方案中，R3是任选取代的C2-6炔基。在某些实施方案中，R3是炔丙基。在一些实施方案中，R3是任选取代的芳基或杂芳基。在某些实施方案中，R3是苯基。在某些实施方案中，R3是取代的苯基。在某些实施方案中，R3是甲苯酰基。在某些其他实施方案中，R3是具有1个至3个选自氮、氧和硫的杂原子的5元至6元杂芳基环。在某些实施方案中，R3是吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基或噁二唑基。在一些实施方案中，R3是-OR、-SR或-N(R′)2。在一些实施方案中，R3是卤素。在某些实施方案中，R3是氟、氯、溴或碘。在一些实施方案中，R3是-C(O)R、-CO2R、-C(O)N(R′)2、-C(O)SR、-C(O)C(O)R或-C(O)CH2C(O)R。在某些实施方案中，R3是任选取代的-CO2C1-6烷基。在某些实施方案中，R3是-CO2Et或-CO2Bn。在某些实施方案中，R3是-CONHC1-6烷基。在某些实施方案中，R3是-CONHCH3或-CONHCH2CH3。在某些实施方案中，R3是-C(S)OR或-C(S)N(R′)2。在其他实施方案中，R3是-S(O)R、-SO2R或-SO2N(R′)2。在一些实施方案中，R3是-N(R′)C(O)R、-N(R′)C(O)N(R′)2、-N(R′)SO2R、-N(R′)SO2N(R′)2、-N(R′)N(R′)2或-N(R′)C(＝N(R′))N(R′)2。在一些实施方案中，R3是-C＝NN(R′)2、-C＝NOR、-C(＝N(R′))N(R′)2、-OC(O)R或-OC(O)N(R′)2。
在一些实施方案中，R2和R3与其居间的原子一起形成具有0个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选取代的5元至7元部分不饱和或芳族稠环。在某些实施方案中，R2和R3与其居间的原子一起形成5元稠环。在某些实施方案中，R2和R3与其居间的原子一起形成稠合的环戊烯环。在某些实施方案中，R2和R3与其居间的原子一起形成6元稠环。在某些实施方案中，R2和R3与其居间的原子一起形成稠合的环己烯环。在某些实施方案中，R2和R3与其居间的原子一起形成稠合的苯环。在某些实施方案中，R2和R3与其居间的原子一起形成具有1个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5元至7元部分不饱和稠环。在某些实施方案中，R2和R3与其居间的原子一起形成具有1个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5元至7元芳族稠环。
在一些实施方案中，R2′和R3与其居间的原子一起形成具有1个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选经取代的5元至7元部分不饱和或芳香族稠环。在某些实施方案中，R2′和R3与其居间的原子一起形成5元稠环。在某些实施方案中，R2′和R3与其居间的原子一起形成6元稠环。在某些实施方案中，R2′和R3与其居间的原子一起形成稠合的吡啶环。在某些实施方案中，R2′和R3与其居间的原子一起形成具有1个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5元至7元部分不饱和稠环。在某些实施方案中，R2′和R3与其居间的原子一起形成具有1个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5元至7元芳族稠环。
如上文一般定义，X是-N(R4)-、-O-或-S-，其中R4如上文定义和本文所述。在某些实施方案中，X是-O-或-S-。在一些实施方案中，X是-N(R4)-。在某些实施方案中，X是-NH-。在某些实施方案中，X是-N(CH3)-。
如上文一般定义，R4是-R、-C(O)R、-CO2R或-S(O)2R，或R4和R3与其居间的原子一起形成具有1个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选取代的5元至7元饱和、部分不饱和或芳族稠环。在某些实施方案中，R4是氢。在一些实施方案中，R4是任选取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R4是任选取代的C1-3烷基。在某些实施方案中，R4是甲基。在某些实施方案中，R4是取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R4是苯甲基。在某些实施方案中，R4是-CH2CH2N(CH3)2。在一些实施方案中，R4是芳基或杂芳基。在某些实施方案中，R4是苯基。在一些实施方案中，R4是-C(O)R、-CO2R或-S(O)2R。
在一些实施方案中，R4和R3与其居间的原子一起形成具有1个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选取代的5元至7元饱和、部分不饱和或芳族稠环。在某些实施方案中，R4和R3与其居间的原子一起形成5元稠环。在某些实施方案中，R4和R3与其居间的原子一起形成稠合的吡咯烷环。在某些实施方案中，R4和R3与其居间的原子一起形成6元稠环。在某些实施方案中，R4和R3与其居间的原子一起形成稠合的哌啶环。在某些实施方案中，R4和R3与其居间的原子一起形成具有1个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5元至7元部分不饱和稠环。在某些实施方案中，R4和R3与其居间的原子一起形成具有1个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5元至7元芳族稠环。
如上文一般定义，R5是R、-C(O)R、-CO2R、-C(O)N(R′)2、-C(O)C(O)R或-C(O)CH2C(O)R，或R5和R2与其居间的原子一起形成具有1个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选取代的5元至7元部分不饱和或芳族稠环。在一些实施方案中，R5是氢。在一些实施方案中，R5是任选取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R5是甲基。在某些实施方案中，R5是取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R5是被-OH或-OC1-6烷基取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R5是-CH2CH2OCH3。在一些实施方案中，R4是-C(O)R、-CO2R、-C(O)N(R′)2、-C(O)C(O)R或-C(O)CH2C(O)R。
如上文一般定义，R6是-R、卤素、-OR、-SR、-N(R′)2、-CN、-NO2、-C(O)R、-CO2R、-C(O)N(R′)2、-C(O)SR、-C(O)C(O)R、-C(O)CH2C(O)R、-C(S)N(R′)2、-C(S)OR、-S(O)R、-SO2R、-SO2N(R′)2、-N(R′)C(O)R、-N(R′)C(O)N(R′)2、-N(R′)SO2R、 -N(R′)SO2N(R′)2、 -N(R′)N(R′)2、-N(R′)C(＝N(R′))N(R′)2、-C＝NN(R′)2、-C＝NOR、-C(＝N(R′))N(R′)2、-OC(O)R或-OC(O)N(R′)2，其中R和R′如上文所定义和本文所述。在一些实施方案中，R6是氢。在一些实施方案中，R6是任选取代的C1-6脂族。在某些实施方案中，R6是任选取代的C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基。在某些实施方案中，R6是任选取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R6是乙基。在某些其他实施方案中，R6是甲基、丙基、异丙基、丁基或异丁基。在一些实施方案中，R6是被-OH或-OC1-6烷基取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R6是-CH2CH2OH或-CH2CH2OCH3。在一些实施方案中，R6是环烷基。在某些实施方案中，R6是环丙基、环丁基、环戊基或环己基。在一些实施方案中，R6是任选取代的C2-6烯基。在某些实施方案中，R6是烯丙基。在一些实施方案中，R6是任选取代的C2-6炔基。在某些实施方案中，R6是2-丙炔基。在一些实施方案中，R6是任选取代的苯甲基。在某些实施方案中，R6是未取代的苯甲基。在某些其他实施方案中，R6是取代的苯甲基。在一些实施方案中，R6是被酯基取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R6是-CH2CO2C1-6烷基或-CH2CO2芳基。在某些实施方案中，R6是-CH2CO2CH2CH3。在一些实施方案中，R6是-OR、-SR或-N(R′)2。在某些实施方案中，R6是-CN或-NO2。在一些实施方案中，R6是卤素。在某些实施方案中，R6是氟、氯、溴或碘。在一些实施方案中，R6是-C(O)R、-CO2R、-C(O)SR、-C(O)N(R′)2、-C(O)C(O)R或-C(O)CH2C(O)R。在某些实施方案中，R6是-C(S)OR或-C(S)N(R′)2。在其他实施方案中，R6是-S(O)R、-SO2R或-SO2N(R′)2。在一些实施方案中，R6是-N(R′)C(O)R、-N(R′)C(O)N(R′)2、-N(R′)SO2R、-N(R′)SO2N(R′)2、-N(R′)N(R′)2或-N(R′)C(＝N(R′))N(R′)2。在一些实施方案中，R6是-C＝NN(R′)2、-C＝NOR、-C(＝N(R′))N(R′)2、-OC(O)R或-OC(O)N(R′)2。
在一些实施方案中，R6和R3与其居间的原子一起形成具有0个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选取代的5元至7元部分不饱和或芳族稠环。在某些实施方案中，R6和R3与其居间的原子一起形成5元稠环。在某些实施方案中，R6和R3与其居间的原子一起形成稠合的环戊烯环。在某些实施方案中，R6和R3与其居间的原子一起形成6元稠环。在某些实施方案中，R6和R3与其居间的原子一起形成稠合的环己烯环。在某些实施方案中，R6和R3与其居间的原子一起形成稠合的苯环。在某些实施方案中，R6和R3与其居间的原子一起形成具有1个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5元至7元部分不饱和稠环。在某些实施方案中，R6和R3与其居间的原子一起形成具有1个至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5元至7元芳族稠环。
如上文一般定义，每个R独立地是氢或任选取代的选自以下的基团：C1-6脂族基；苯基；3元至7元饱和或部分不饱和碳环；8元至10元双环饱和、部分不饱和或芳基环；具有1个至3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5元至6元单环杂芳基环；具有1个至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的4元至7元饱和或部分不饱和杂环；具有1个至4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的7元至10元双环饱和或部分不饱和杂环；或具有1个至4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至10元双环杂芳基环。在某些实施方案中，R是氢。在一些实施方案中，R是任选取代的C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基。在某些实施方案中，R是任选取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R是未取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R是取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R是甲基、乙基、丙基、丁基、异丙基、异丁基、烯丙基或苯甲基。
在一些实施方案中，R是3元至7元饱和或部分不饱和碳环。在某些实施方案中，R是3元至4元饱和碳环。在其他实施方案中，R是5元至7元饱和或部分不饱和碳环。在某些实施方案中，R是环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基或环庚烯基。
在一些实施方案中，R是具有1个至2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的4元至7元饱和或部分不饱和杂环。在某些实施方案中，R是4元至7元饱和杂环。在其他实施方案中，R是5元至7元部分不饱和杂环。在某些实施方案中，R是四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、哌啶基、吡咯啉基、噁唑烷基、哌嗪基、二噁烷基、二氧戊环基、二氮杂
Figure BDA0003416868420000481
基、氧氮杂
Figure BDA0003416868420000482
基、硫氮杂
Figure BDA0003416868420000483
基或吗啉基。
在一些实施方案中，R是具有1个至4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至10元双环饱和或部分不饱和碳环或7元至10元双环饱和或部分不饱和杂环。在某些实施方案中，R是十氢萘基、四氢萘基或十氢化萘。在某些其他实施方案中，R是四氢喹啉基、四氢异喹啉基或十氢喹啉基。在一些实施方案中，R是与芳基或杂芳基环稠合的杂环基环。在某些实施方案中，R是二氢吲哚基、3H-吲哚基、苯并二氢吡喃基、菲啶基、2-氮杂二环[2.2.1]庚烷基、八氢吲哚基或四氢喹啉基。
在一些实施方案中，R是苯基或具有1个至3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5元至6元杂芳基环。在某些实施方案中，R是苯基。在某些其他实施方案中，R是具有1个至3个选自氮，氧或硫的杂原子的5元杂芳基环。在其他实施方案中，R是具有1个至3个氮的6元杂芳基环。在某些实施方案中，R是苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基或三嗪基。在某些其他实施方案中，R是吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基或噁二唑基。
在一些实施方案中，R是双环芳族环。在某些实施方案中，R是萘基。在其他实施方案中，R是具有1个至4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8元至10元双环杂芳基环。在某些实施方案中，R是喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、吡啶并吡嗪基或吡啶并嘧啶基。在某些其他实施方案中，R是吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、苯并三唑基、苯并噁唑基、苯并噻吩基、吲唑基、咪唑并吡啶基、咪唑并嘧啶基、咪唑并吡嗪基、咪唑并哒嗪基、吡唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基、吡唑并吡嗪基、吡唑并哒嗪基、吡咯并噻唑基、咪唑并噻唑基、噻唑并吡啶基、噻唑并嘧啶基、噻唑并吡嗪基、噻唑并哒嗪基、噁唑并吡啶基、噁唑并嘧啶基、噁唑并吡嗪基或噁唑并哒嗪基。
如上文一般定义，每个R′独立地是-R、-C(O)R、-CO2R，或同一氮上的两个R′与居间的氮一起形成具有1个至2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4元至7元杂环。在某些实施方案中，R′是如以上所定义和描述的R。在某些实施方案中，R′是-C(O)R或-CO2R。在一些实施方案中，同一氮上的两个R′与其居间的原子一起形成具有1个至2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4元至7元杂环。在某些实施方案中，同一氮上的两个R′与其居间的原子一起形成氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、吗啉、哌嗪、高哌啶或高哌嗪环。
根据一个方面，提供的化合物具有下式：
Figure BDA0003416868420000501
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R3和R4如本文所定义和描述。在某些实施方案中，式II化合物具有下式中的一种：
Figure BDA0003416868420000502
根据另一方面，提供的化合物具有式III：
Figure BDA0003416868420000511
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R3和R4如本文所定义和描述。在某些实施方案中，式II化合物具有下式中的一种：
Figure BDA0003416868420000512
根据另一方面，提供的化合物具有下式：
Figure BDA0003416868420000513
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R3和R5如本文所定义和描述。在某些实施方案中，R5是任选取代的C1-6脂族。在某些实施方案中，R5是甲基。在一些实施方案中，R5是任选取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R5是取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R5是被-OH或-OC1-6烷基取代的C1-6烷基。在某些实施方案中，R5是-CH2CH2OMe。
根据另一方面，提供的化合物具有下式：
Figure BDA0003416868420000521
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2′和R3如本文所定义和描述。
可用作抗PESC剂的示例性化合物列于下表1中。
表1
Figure BDA0003416868420000522
表1
Figure BDA0003416868420000531
表1
Figure BDA0003416868420000541
表1
Figure BDA0003416868420000551
表1
Figure BDA0003416868420000561
表1
Figure BDA0003416868420000571
表1
Figure BDA0003416868420000581
表1
Figure BDA0003416868420000591
表1
Figure BDA0003416868420000601
表1
Figure BDA0003416868420000611
表1
Figure BDA0003416868420000621
在某些实施方案中，本公开提供上表1中所描绘的任何化合物或其药学上可接受的盐。
在其他实施方案中，本公开提供了具有下式的化合物：
Figure BDA0003416868420000622
或其盐，其中：
R1是H、C1-6烷基、三氟甲基、3元至6元碳环基、6元芳基、3元至6元杂环基、5元至6元杂芳基、卤基、-ORf、-SRf、-N(Rf)2、-CN或-NO2，其中所述烷基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个独立地选自氧代、卤基、C1-3烷氧基和C1-3烷基的基团取代；
R2和R3各自独立地是H、C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、碳环基、芳基、杂环基、杂芳基、卤基、-ORa、-SRa、-N(Ra)2、-CN、-NO2、-C(O)Ra、-CO2Ra、-C(O)N(Ra)2、-C(O)SRa、-C(O)C(O)Ra、-C(O)CH2C(O)Ra、-C(S)N(Ra)2、-C(S)ORa、-S(O)Ra、-SO2Ra、-SO2N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)C(O)N(Ra)2、-N(Ra)SO2Ra、-N(Ra)SO2N(Ra)2、-N(Ra)N(Ra)2、-N(Ra)C(＝N(Ra))N(Ra)2、-C(＝N)N(Ra)2、-C＝NORa、-C(＝N(Ra))N(Ra)2、-OC(O)Ra或-OC(O)N(Ra)2，其中R2和R3的每个C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基独立地任选地被一个或多个基团Rx取代，并且其中R2和R3各自不是H；或R2和R3与其所连接的原子一起形成4元、5元、6元、7元或8元碳环基或芳基，所述碳环基或芳基任选地被一个或多个基团Rx取代；
R4是H、C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基，其中每个C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个独立选自以下的基团取代：氧代、C1-12烷基、C1-12卤代烷基、碳环基、芳基、杂环基、杂芳基、卤基、-CN、-NO2、-NRmRm、-ORm、-C(＝O)ORm和-OC(＝O)Rm；或R4和R3与其所连接的原子一起形成杂环基；
每个Ra独立地选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基，其中每个C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个基团Rx取代；
每个Rf独立地选自H、C1-3烷基、三氟甲基、3元至6元碳环基、6元芳基、3元至6元杂环基和5元至6元杂芳基，或两个Rf基团与其所连接的氮一起形成3元至6元杂环；
每个Rg独立地选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8碳环基、芳基、杂芳基和杂环基，其中每个C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8碳环基、芳基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个基团Rx取代；或两个Rg基团与其所连接的氮一起形成3元至6元杂环或5元至6元杂芳基；
每个Rm独立地选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6卤代烷基、碳环基、C1-6烷酰基、苯基和苯甲基，其中任何C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6卤代烷基、碳环基、C1-6烷酰基、苯基或苯甲基任选地被一个或多个独立地选自卤基、-CN、-NO2、-NRyRz和-ORw的基团取代；或两个Rm基团与其所连接的氮一起形成3元至6元杂环；
每个Rv独立地是氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基，其中每个C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基各自任选地被一个或多个独立地选自氧代、卤基、氨基、羟基、芳基、碳环基和C1-C6烷基取代，所述C1-C6烷基任选地被一个或多个独立地选自氧代和卤基的基团取代；或两个Rv与其所连接的氮一起形成杂环基，所述杂环基任选地被一个或多个独立地选自氧代、卤基和C1-3烷基的基团取代，所述C1-3烷基任选地被一个或多个独立地选自氧代和卤基的基团取代；
每个Rw独立地选自H、C1-4烷基、C1-4烷酰基、苯基、苯甲基和苯乙基；
每个Rx独立地选自氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基、杂环基、-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-O-C(O)-O-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-O-C(O)-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)2-Rv、-N(Rv)-S(O)-N(Rv)2，和
-N(Rv)-S(O)2-N(Rv)2，其中任何C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个独立地选自以下的基团取代：Rxa、氧代、卤基、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-S(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)2-Rv和C1-6烷基，所述C1-6烷基任选地被一个或多个独立地选自氧代和卤基的基团取代；
每个Ry和Rz独立地选自H、C1-4烷基、C1-4烷酰基、C1-4烷氧基羰基、苯基、苯甲基和苯乙基，或Ry和Rz与其所连接的氮一起形成杂环基；
每个Rxa独立地选自芳基、杂芳基、杂环和碳环，其中任何芳基、杂芳基、杂环和碳环任选地被一个或多个独立地选自以下的基团取代：C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-N(Rv)2、-CN、碳环、芳基、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-O-C(O)-O-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-O-C(O)-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)2-Rv和-N(Rv)-S(O)-N(Rv)2，其中任何C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基任选地被一个或多个独立地选自以下的基团取代：氧代、卤基、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)-Rv和-N(Rv)-S(O)2-Rv。
在某些实施方案中，R1是H、C1-6烷基、三氟甲基、3元至6元碳环基、6元芳基、3元至6元杂环基、5元至6元杂芳基、卤基、-ORf、-SRf、-N(Rf)2、-CN或-NO2，其中所述烷基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个独立地选自氧代、卤基、C1-3烷氧基和C1-3烷基的基团取代。
在某些实施方案中，R1是H、甲基或乙基。
在某些实施方案中，R1是H。
在某些实施方案中，R2是H。
在某些实施方案中，R2是C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、碳环基、芳基、杂环基、杂芳基、卤基、-ORa、-SRa、-N(Ra)2、-CN、-NO2、-C(O)Ra、-CO2Ra、-C(O)N(Ra)2、-C(O)SRa、-C(O)C(O)Ra、-C(O)CH2C(O)Ra、-C(S)N(Ra)2、-C(S)ORa、-S(O)Ra、-SO2Ra、-SO2N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)C(O)N(Ra)2、-N(Ra)SO2Ra、-N(Ra)SO2N(Ra)2、-N(Ra)N(Ra)2、-N(Ra)C(＝N(Ra))N(Ra)2、-C(＝N)N(Ra)2、-C＝NORa、-C(＝N(Ra))N(Ra)2、-OC(O)Ra或-OC(O)N(Ra)2，其中R2的每个C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基独立地任选地被一个或多个基团Rx取代。
在某些实施方案中，R2和R3与其所连接的原子一起形成4元、5元、6元、7元或8元碳环基或芳基，所述碳环基或芳基任选地被一个或多个基团Rx取代。
在某些实施方案中，R2是H、C1-6烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、碳环基、芳基、杂芳基、卤基、-CN、-SRa、-N(Rv)2和-CO2Ra，其中任何C1-6烷基、碳环基和芳基任选地被一个或多个独立地选自C1-3烷基、碳环基、卤基、-CN、-N(Rv)-C(O)-Rv和-O-Rv的基团取代。
在某些实施方案中，R2是H、异丙基、乙基、叔丁基、2，2-二氟乙基、环丁基、2-丙炔-1-基、溴、氯、2-呋喃基、乙烯基、苯基、2-氯苯硫基、2-氟乙基、2-丙烯基、1-甲基乙烯基环丙基、4-吡啶基、2-丁烯-1-基、碘、1-甲基-2-丙炔-1-基、1-甲基丙-1-基、1-(环丙基)乙基、甲氧基羰基、2-丁炔基、2-羟基-1-甲基乙基、4-(甲基羰基氨基)丁基、3-(甲基羰基氨基)丙基、4-氨基丁基、1-甲基-2-丙烯基、1-甲基环丁基、丙基、2-甲氧基乙基和2-甲基丙基。
在某些实施方案中，R3是H。
在某些实施方案中，R3是C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、碳环基、芳基、杂环基、杂芳基、卤基、ORa、-SRa、-N(Ra)2、-CN、-NO2、-C(O)Ra、-CO2Ra、-C(O)N(Ra)2、-C(O)SRa、-C(O)C(O)Ra、-C(O)CH2C(O)Ra、-C(S)N(Ra)2、-C(S)ORa、-S(O)Ra、-SO2Ra、-SO2N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)C(O)N(Ra)2、-N(Ra)SO2Ra、-N(Ra)SO2N(Ra)2、-N(Ra)N(Ra)2、-N(Ra)C(＝N(Ra))N(Ra)2、-C(＝N)N(Ra)2、-C＝NORa、-C(＝N(Ra))N(Ra)2、-OC(O)Ra或-OC(O)N(Ra)2，其中R3的每个C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基独立地任选地被一个或多个基团Rx取代。
在某些实施方案中，R3是H、C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、芳基、杂环基、杂芳基、卤基、-ORa、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-CO2Ra、-C(O)N(Ra)2或-N(Ra)C(O)Ra，其中R3的每个C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、芳基、杂芳基和杂环基独立地任选地被一个或多个基团Rx取代。
在某些实施方案中，R3是H、甲基、氯、溴、羧基、甲酰基、氨基羰基、呋喃-3-基、苯基、苯甲基、苯乙基、苯氧基、1H-吡唑-4-基、1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(1-甲基环丙基)-1H-吡唑-4-基、5-氟-1H-吡唑-4-基、1-(2-苯基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基、1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基、1-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基、1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基、1-[1-(N-甲基氨基羰基)-1，1-二甲基乙基]-1H-吡唑-4-基、5-氟-1-异丙基-1H-吡唑-4-基、1-(环丙基-甲基)-1H-吡唑-5-基、1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-3-基、1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基、1-(1，1-二氧化四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基、1-((6-(3-氧代丁-1-烯-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基、3-碘代苯基、甲基-氨基羰基、3-甲基-1，2，4-噁二唑-5-基、5-甲基-1，3，4-噁二唑-2-基、1H-咪唑-2-基、N-(苯甲酰基甲基)氨基羰基、5-苯基噁唑-2-基、1-环己基-吡唑-4-基、1-异丙基吡唑-4-基、二苯基-3-基、3-((4-氟苯基)氨基)苯基、3-(2-氧代吡咯烷-1-基)苯基、3-(甲基羰基氨基)-5-苯基苯基、苯基氨基、哌啶-1-基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、乙氧基羰基、3-甲氧基丙基、苯甲基-氧基羰基、三氟甲基、3-呋喃基、乙基氨基羰基、羟基甲基、3-羟基丙基、2-羟基乙基、甲基氨基甲基、苯并呋喃-3-基、1-苯基-1H-吡唑-3-基、5-环丙基呋喃-2-基、2-甲基呋喃-3-基、1-苯基-1H-吡唑-4-基、1-乙基-1H-吡唑-4-基、1-甲基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-基、呋喃-2-基、5-苯基呋喃-2-基、1-异丙基-1H-吡唑-4-基、嘧啶-5-基、5-甲基吡啶-3-基、1-甲基-1H-吡唑-3-基、4-苯基呋喃-2-基、2-氟苯基、4-氰基苯基、4-甲氧基苯基、4-(三氟甲基)苯基、4-氟苯基、1-苯甲基-1H-吡唑-4-基、5-氯吡啶-3-基、5-氟吡啶-3-基、丙-1-烯-2-基、乙烯基、1-甲基-1H-吡唑-5-基、4-(羟基甲基)-呋喃-2-基、3-氰基苯基、1H-吡唑-5-基、2，5-二氢呋喃-3-基、噻吩-3-基、噻吩-2-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基、5-甲基呋喃-2-基、5-(羟基甲基)呋喃-2-基、3-(三氟甲基)苯基、3-甲氧基苯基、3氟苯基、吡啶-3-基、1-(甲基磺酰基)-1H-吡唑-4-基、1-环戊基-1H-吡唑-4-基、1-(噻吩-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基、4-氯-3-(吗啉-4-羰基)苯基、3-氯-4-(环丙基-氨基羰基)苯基、1-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基、1-(3-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(吡啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-氯-苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(3-苯氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(4-苯氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-环己基-1H-吡唑-4-基、1-(1-苯基乙基)-1H-吡唑-4-基、1-环丁基-1H-吡唑-4-基、1-(仲丁基)-1H-吡唑-4-基、4-氟-3-(吡咯烷-1-羰基)苯基、1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-3-基、1-(环丙烷羰基)-1H-吡唑-3-基、1-(2-环丙基乙基)-1H-吡唑-4-基、1-([1，1′-二苯基]-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-苯乙基-1H-吡唑-4-基、1-(2-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(叔丁基)-1H-吡唑-4-基、3，4-二甲基苯基、3-氯-4-乙氧基苯基、4-甲氧基-3-甲基苯基、2-甲基苯并[d]噻唑-5-基、1-(2-苯氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(苯基磺酰基)-1H-吡唑-4-基、1-苯甲酰基-1H-吡唑-4-基、1-二苯甲基-1H-吡唑-4-基、1-([1，1′-二苯基]-2-基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(环己基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基、苯并-呋喃-2-基、(E)-苯乙烯基、5-乙基呋喃-2-基、1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(萘-1-基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-([1，1′-二苯基]-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基、3-苯氧基苯基、苯基乙烯基、3，4-二氯苯基、3-氯-4-甲氧基苯基、3-甲氧基-4-甲基苯基、1-(噻唑-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基、1H-吲唑-5-基、3，4-二甲氧基苯基、4-甲氧基-3，5-二甲基苯基、1-(氧杂环丁-3-基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(甲氧基-羰基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、3-氰基-4-甲基苯基、苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基、2，3-二氢苯并呋喃-5-基、1-(3-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(噻吩-2-基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(3-氯苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-异丁基-1H-吡唑-4-基、1-(3，3，3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-基、1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-氰基乙基)-1H-吡唑-4-基、4-环丙基呋喃-2-基、1H-吡咯-3-基、2，2-二氟苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基、3-氟-4-(氨基羰基)苯基、3-氟-4-(甲基磺酰基)苯基、3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基、5-氟-3-(氨基羰基)苯基、3-(羟基甲基)-4-甲氧基苯基、1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-基、1-甲基-1H-吡咯-3-基、1H-吲哚-2-基、环丙基羰基氨基、苯甲酰基氨基、3-溴苯基、3-(1-甲基吡唑-4-基)苯基、3-(1-异丙基吡唑-4-基)苯基、4-苯基苯基、4-(4-氟苯胺基)苯基、3-(叔丁氧基羰基氨基)苯基、1-乙酰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基、1-丙酰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基、1-丙烯酰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基、1-甲基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基、1-((2-甲基噻唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-(乙酰基-氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、3，5-二氯苯基、2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基、1-(叔戊基)-1H-吡唑-4-基、3-(2-吗啉代乙基)苯基、3-(2-(二甲基-氨基)乙基)-苯基、1-(1-(噻唑-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基、3-甲氧基-4-(三氟甲基)苯基、3-甲氧基羰基-4-氯苯基、4-(三氟甲氧基)苯基、3-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基、4-环丙基-3-(三氟-甲基)苯基、2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基、3，5-二甲氧基苯基、3，4-二氟苯基、4-二苯基、3-氯-5氟苯基、3，5-双(三氟甲基)苯基、3-氟-5-甲氧基苯基、3-(氨基羰基)苯基、4-(环丙基甲氧基)苯基、2-氟-5-(苯甲基羰基)苯基、3-(1H-吡唑-1-基)苯基、1-(2-羟基环戊基)-1H-吡唑-4-基、3-(N-甲氨基磺酰基)苯基、4-(2-羟基丙-2-基)-苯基、2-(三氟甲基)吡啶-4-基、6-苯氧基吡啶-3-基、2-甲氧基吡啶-4-基、4-甲基-2-苯基噻唑-5-基、3-氨基-5-氰基苯基、1-(四氢呋喃-3-基、3-(N-乙基氨基羰基)苯基、3-(氨基羰基甲基)苯基、6-苯基吡啶-3-基、1-(四氢-2H-吡喃-3-基)-1H-吡唑-4-基、1-(1-甲氧基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-乙氧基乙基)-1H-吡唑-4-基、1-乙酰基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基、1-乙酰基-1，2，5，6-四氢吡啶-3-基、1-丙酰基-1，2，5，6-四氢吡啶-3-基、1-丙酰基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基、1-((1S，3S)-3-羟基环丁基)-1H-吡唑-4-基、2，5-二氢-1H-吡咯-3-基、1，2，5，6-四氢吡啶-3-基、1-甲基-1，2，5，6-四氢吡啶-3-基、1-丙烯酰基-1，2，5，6-四氢吡啶-3-基、1-丙烯酰基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基、4-氯-3，5-二甲基苯基、4-氰基-3-甲基苯基、1-氧代-2，3-二氢-1H-茚-5-基、3，4-双(三氟甲基)苯基、3-甲基-4-(三氟甲基)苯基、1-(苯并[b]噻吩-7-基甲基)-1H-吡唑-4-基、4-氟-3-(N-环己基氨基羰基)苯基、4-吗啉代-苯基、4-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)苯基、3-氯-5-甲基苯基、3-(甲基磺酰基)苯基、4-(甲基磺酰基氨基)苯基、4-(吗啉代甲基)苯基、3-吗啉代苯基、1-(2-(乙烯基羰基氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-氨基乙基)-1H-吡唑-4-基、3-环丙基-4-甲基苯基、3-乙氧基苯基、3-(羟基甲基)苯基、1-(2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、3-苯乙氧基苯基、1，2，3，6-四氢吡啶-4-基、1-(2-(乙烯基磺酰基氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、4-(苯基氨基)-苯基、3-甲基-1H-吡唑-4-基、4-(苯甲基)苯基、3，5-二氟苯基、3-氟-5-三氟甲基苯基、3-(乙基磺酰基)苯基、3-(三氟甲氧基)苯基、1-(噻唑-5-基甲基)-1H-吡唑-4-基、对甲苯基、4-环丙基苯基、4-(乙基磺酰基)苯基、1-(6-乙烯基吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基、6-(苯甲基)吡啶-3-基、1-(叔丁氧基-羰基)-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基、1-(2-羟基-1-苯基乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-氰基-1-苯基乙基)-1H-吡唑-4-基、6-环丙基吡啶-3-基、4-氰基-3-甲氧基-苯基、4-甲氧基-3-(三氟甲基)苯基、4-氯苯基、1-(3，4-二氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基、4-甲基-3-(三氟甲基)苯基、4-(吡咯烷-1-羰基)苯基、4-(异丙基氨基羰基)苯基、4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基、3-氯-5-氰基-苯基、3-(吡咯烷-1-羰基)苯基、3-(甲基磺酰基氨基甲基)苯基、3-(1H-吡唑-5-基)苯基、4-(甲基磺酰基)苯基、4-(环丙基氨基羰基)苯基、1-(2-氟乙基)-1H-吡唑-4-基、3-(环丙基甲氧基)苯基、3-(苯甲基)苯基、3-(吗啉代甲基)苯基、3-(苯氧基甲基)苯基、1-(3-氟苯基)-1H-吡唑-4-基、2-环丙基乙烯基、6-(三氟甲基)吡啶-3-基、1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基、2，4-二甲基噻唑-5-基、1-丙基-1H-吡唑-4-基、1-丁基-1H-吡唑-4-基、1-(2-(苯基氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、4-(氨基羰基)苯基、4-(N-甲基氨基-羰基)苯基、3-氟-4-(N-甲基氨基羰基)苯基、1-(2-(3，3-二氟氮杂环丁-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-((2，2，2-三氟乙基)氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、1-丙烯基、3-(甲基羰基-氨基)苯基、4-(甲基磺酰基氨基)苯基、4-(吗啉-4-羰基)苯基、4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基、1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基、5-异丙基呋喃-2-基、1-(3，3-二氟环戊基)-1H-吡唑-4-基、141S，3R)-3-羟基环戊基)-1H-吡唑-4-基、1-((1S，3S)-3-羟基环戊基)-1H-吡唑-4-基、3-(1H-吡唑-4-基)苯基、5-溴呋喃-2-基、3-(苯基氨基)苯基、2-甲基噻唑-5-基、3-(苯基乙烯基)苯基、3-苯乙基苯基、1-(3-氟环戊基)-1H-吡唑-4-基、1-(1-甲氧基-2-甲基-丙-2-基)-1H-吡唑-4-基、1-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)-1H-吡唑-4-基、1-(1-丙酰基-氮杂环丁-3-基)-1H-吡唑-4-基、6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-基、4-(哌嗪-1-基)苯基、1-(1-氟-2-甲基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基、3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基、3，5-二甲基苯基、4-(吗啉代磺酰基)苯基、3-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基、3-(2-羟基丙-2-基)苯基、1-异丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-基、1-异丙基-5-甲基-1H-吡唑-4-基、3-环丙基-1H-吡唑-5-基、5-甲氧基羰基吡咯-3-基、3-环丙基-1-异丙基-1H-吡唑-5-基、5-环丙基-1-异丙基-1H-吡唑-3-基、1-异丙基-5-(甲氧基羰基)吡咯-3-基、1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基、1-异丙基-1H-吡唑-3-基、1-环戊基-5-环丙基-1H-吡唑-3-基、1-环戊基-3-环丙基-1H-吡唑-5-基、1-环戊基-1H-吡唑-3-基、1-异丙基-1H-吡唑-5-基、1-异丙基-5-(N-甲基氨基羰基)吡咯-3-基、1-异丙基-5-(N，N-二甲基氨基-羰基)吡咯-3-基、1-(2-环丙基乙基)-1H-吡唑-3-基、1-(2-环丙基乙基)-1H-吡唑-5-基、1-乙基-1H-吡唑-3-基、3-(3，3-二甲基-2-氧代吡咯烷-1-基)苯基、3-(2-氧代-3-苯基吡咯烷-1-基)苯基、3-((E)-苯乙烯基)苯基、3-(3-氰基苯基)苯基、3-(3-(甲基磺酰基氨基)苯基)苯基、3-(4-(甲基磺酰基氨基)苯基)苯基或3-(4-(N-甲氨基磺酰基)苯基)苯基。
在某些实施方案中，R3是1H-吡唑-4-基、1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(1-甲基环丙基)-1H-吡唑-4-基、5-氟-1H-吡唑-4-基、1-(2-苯基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基、1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基、1-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基、1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基、1-[1-(N-甲基氨基羰基)-1，1-二甲基乙基]-1H-吡唑-4-基、5-氟-1-异丙基-1H-吡唑-4-基、1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-5-基、1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-3-基、1-(四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基、1-(1，1-二氧化四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基、1-((6-(3-氧代丁-1-烯-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基、3-碘代苯基、3-甲基-1，2，4-噁二唑-5-基、5-甲基-1，3，4-噁二唑-2-基、1H-咪唑-2-基、5-苯基噁唑-2-基、1-环己基吡唑-4-基、1-异丙基吡唑-4-基、二苯基-3-基、3-((4-氟苯基)氨基)苯基、3-(2-氧代吡咯烷-1-基)苯基、3-(甲基羰基氨基)-5-苯基苯基、3-呋喃基、苯并呋喃-3-基、1-苯基-1H-吡唑-3-基、5-环丙基呋喃-2-基、2-甲基呋喃-3-基、1-苯基-1H-吡唑-4-基、1-乙基-1H-吡唑-4-基、1-甲基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-基、呋喃-2-基、5-苯基呋喃-2-基、1-异丙基-1H-吡唑-4-基、嘧啶-5-基、5-甲基吡啶-3-基、1-甲基-1H-吡唑-3-基、4-苯基呋喃-2-基、2氟苯基、4-氰基苯基、4-甲氧基苯基、4-(三氟甲基)-苯基、4氟苯基、1-苯甲基-1H-吡唑-4-基、5-氯吡啶-3-基、5-氟吡啶-3-基、1-甲基-1H-吡唑-5-基、4-(羟基甲基)呋喃-2-基、3-氰基苯基、2，5-二氢呋喃-3-基、噻吩-3-基、噻吩-2-基、1-甲基-1H-吡唑-4-基、5-甲基呋喃-2-基、5-(羟基甲基)呋喃-2-基、3-(三氟甲基)-苯基、3-甲氧基苯基、3氟苯基、吡啶-3-基、1-(甲基磺酰基)-1H-吡唑-4-基、1-环戊基-1H-吡唑-4-基、1-(噻吩-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基、4-氯-3-(吗啉-4-羰基)苯基、3-氯-4-(环丙基氨基羰基)苯基、1-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基、1-(3-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(吡啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-氯苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(3-苯氧基-苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(4-苯氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-环己基-1H-吡唑-4-基、1-(1-苯基乙基)-1H-吡唑-4-基、1-环丁基-1H-吡唑-4-基、1-(仲丁基)-1H-吡唑-4-基、4-氟-3-(吡咯烷-1-羰基)苯基、1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-3-基、1-(环丙烷羰基)-1H-吡唑-3-基、1-(2-环丙基乙基)-1H-吡唑-4-基、1-([1，1′-二苯基]-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-苯乙基-1H-吡唑-4-基、1-(2-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(4-甲氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(叔丁基)-1H-吡唑-4-基、3，4-二甲基苯基、3-氯-4-乙氧基苯基、4-甲氧基-3-甲基苯基、2-甲基苯并[d]噻唑-5-基、1-(2-苯氧基苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(苯基磺酰基)-1H-吡唑-4-基、1-苯甲酰基-1H-吡唑-4-基、1-二苯甲基-1H-吡唑-4-基、1-([1，1′-二苯基]-2-基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(环己基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基、苯并呋喃-2-基、5-乙基呋喃-2-基、1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(萘-1-基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-([1，1′-二苯基]-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基、3-苯氧基苯基、3，4-二氯苯基、3-氯-4-甲氧基苯基、3-甲氧基-4-甲基苯基、1-(噻唑-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基、1H-吲唑-5-基、3，4-二甲氧基苯基、4-甲氧基-3，5-二甲基苯基、1-(氧杂环丁-3-基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(4-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(甲氧基羰基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-(二甲基氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、3-氰基-4-甲基苯基、苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基、2，3-二氢苯并呋喃-5-基、1-(3-氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(噻吩-2-基甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(3-氯苯甲基)-1H-吡唑-4-基、1-异丁基-1H-吡唑-4-基、1-(3，3，3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-基、1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-氰基乙基)-1H-吡唑-4-基、4-环丙基呋喃-2-基、2，2-二氟苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基、3-氟-4-(氨基羰基)苯基、3-氟-4-(甲基磺酰基)苯基、3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基、5-氟-3-(氨基羰基)苯基、3-(羟基甲基)-4-甲氧基苯基、1-(甲基磺酰基)-1H-吡咯-3-基、1-甲基-1H-吡咯-3-基、3-溴苯基、3-(1-甲基吡唑-4-基)苯基、3-(1-异丙基吡唑-4-基)苯基、4-苯基苯基、4-(4-氟苯胺基)苯基、3-(叔丁氧基羰基氨基)苯基、1-乙酰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基、1-丙酰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基、1-丙烯酰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基、1-甲基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基、1-((2-甲基噻唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-(乙酰基氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、3，5-二氯苯基、2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基、1-(叔戊基)-1H-吡唑-4-基、3-(2-吗啉代乙基)苯基、3-(2-(二甲基氨基)乙基)苯基、1-(1-(噻唑-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基、3-甲氧基-4-(三氟-甲基)苯基、3-甲氧基羰基-4-氯苯基、4-(三氟甲氧基)苯基、3-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基、4-环丙基-3-(三氟甲基)苯基、2，2-二甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-基、3，5-二甲氧基苯基、3，4-二氟苯基、4-二苯基、3-氯-5氟苯基、3，5-双(三氟甲基)苯基、3-氟-5-甲氧基苯基、3-(氨基-羰基)苯基、4-(环丙基甲氧基)苯基、2-氟-5-(苯甲基羰基)苯基、3-(1H-吡唑-1-基)苯基、1-(2-羟基环戊基)-1H-吡唑-4-基、3-(N-甲基氨基-磺酰基)苯基、4-(2-羟基丙-2-基)苯基、2-(三氟甲基)吡啶-4-基、6-苯氧基吡啶-3-基、2-甲氧基吡啶-4-基、4-甲基-2-苯基噻唑-5-基、3-氨基-5-氰基苯基、1-(四氢呋喃-3-基、3-(N-乙基氨基羰基)苯基、3-(氨基羰基甲基)苯基、6-苯基吡啶-3-基、1-(四氢-2H-吡喃-3-基)-1H-吡唑-4-基、1-(1-甲氧基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-乙氧基乙基)-1H-吡唑-4-基、1-乙酰基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基、1-乙酰基-1，2，5，6-四氢吡啶-3-基、1-丙酰基-1，2，5，6-四氢吡啶-3-基、1-丙酰基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基、1-((1S，3S)-3-羟基环丁基)-1H-吡唑-4-基、2，5-二氢-1H-吡咯-3-基、1，2，5，6-四氢吡啶-3-基、1-甲基-1，2，5，6-四氢吡啶-3-基、1-丙烯酰基-1，2，5，6-四氢吡啶-3-基、1-丙烯酰基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基、4-氯-3，5-二甲基苯基、4-氰基-3-甲基苯基、1-氧代-2，3-二氢-1H-茚-5-基、3，4-双(三氟甲基)苯基、3-甲基-4-(三氟甲基)苯基、1-(苯并[b]噻吩-7-基甲基)-1H-吡唑-4-基、4-氟-3-(N-环己基氨基羰基)苯基、4-吗啉代苯基、4-(4-(叔丁氧基-羰基)哌嗪-1-基)苯基、3-氯-5-甲基苯基、3-(甲基磺酰基)苯基、4-(甲基磺酰基氨基)-苯基、4-(吗啉代甲基)苯基、3-吗啉代苯基、1-(2-(乙烯基羰基氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-氨基乙基)-1H-吡唑-4-基、3-环丙基-4-甲基苯基、3-乙氧基苯基、3-(羟基甲基)苯基、1-(2-(叔丁氧基-羰基氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、3-苯乙氧基苯基、1，2，3，6-四氢吡啶-4-基、1-(2-(乙烯基磺酰基氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、4-(苯基氨基)苯基、3-甲基-1H-吡唑-4-基、4-(苯甲基)苯基、3，5-二氟苯基、3-氟-5-三氟甲基苯基、3-(乙基磺酰基)苯基、3-(三氟甲氧基)-苯基、1-(噻唑-5-基甲基)-1H-吡唑-4-基、对甲苯基、4-环丙基苯基、4-(乙基磺酰基)-苯基、1-(6-乙烯基吡啶-2-基)甲基)-1H-吡唑-4-基、6-(苯甲基)吡啶-3-基、1-(叔丁氧基羰基)-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基、1-(2-羟基-1-苯基乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-氰基-1-苯基乙基)-1H-吡唑-4-基、6-环丙基吡啶-3-基、4-氰基-3-甲氧基苯基、4-甲氧基-3-(三氟甲基)-苯基、4-氯苯基、1-(3，4-二氟苯甲基)-1H-吡唑-4-基、4-甲基-3-(三氟甲基)苯基、4-(吡咯烷-1-羰基)苯基、4-(异丙基氨基-羰基)-苯基、4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基、3-氯-5-氰基苯基、3-(吡咯烷-1-羰基)苯基、3-(甲基磺酰基氨基甲基)苯基、3-(1H-吡唑-5-基)苯基、4-(甲基磺酰基)苯基、4-(环丙基氨基羰基)苯基、1-(2-氟乙基)-1H-吡唑-4-基、3-(环丙基甲氧基)苯基、3-(苯甲基)苯基、3-(吗啉代-甲基)苯基、3-(苯氧基甲基)苯基、1-(3-氟苯基)-1H-吡唑-4-基、2-环丙基乙烯基、6-(三氟甲基)吡啶-3-基、1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基、2，4-二甲基噻唑-5-基、1-丙基-1H-吡唑-4-基、1-丁基-1H-吡唑-4-基、1-(2-(苯基氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、4-(氨基羰基)苯基、4-(N-甲基氨基-羰基)苯基、3-氟-4-(N-甲基氨基-羰基)苯基、1-(2-(3，3-二氟氮杂环丁-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)乙基)-1H-吡唑-4-基、1-(2-(2，2，2-三氟乙基)氨基)乙基)-1H-吡唑-4-基、1-丙烯基、3-(甲基羰基-氨基)苯基、4-(甲基磺酰基氨基)苯基、4-(吗啉-4-羰基)苯基、4-(4-乙酰哌嗪-1-基)苯基、1-(2，2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基、5-异丙基呋喃-2-基、1-(3，3-二氟环戊基)-1H-吡唑-4-基、141S，3R)-3-羟基环戊基)-1H-吡唑-4-基、1-((1S，3S)-3-羟基环戊基)-1H-吡唑-4-基、3-(1H-吡唑-4-基)苯基、5-溴呋喃-2-基、3-(苯基氨基)苯基、2-甲基噻唑-5-基、3-(苯基乙烯基)苯基、3-苯乙基苯基、1-(3-氟环戊基)-1H-吡唑-4-基、1-(1-甲氧基-2-甲基-丙-2-基)-1H-吡唑-4-基、1-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)-1H-吡唑-4-基、1-(1-丙酰基-氮杂环丁-3-基)-1H-吡唑-4-基、6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-基、4-(哌嗪-1-基)苯基、1-(1-氟-2-甲基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基、3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基、3，5-二甲基苯基、4-(吗啉代磺酰基)苯基、3-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基、3-(2-羟基丙-2-基)苯基、1-异丙基-3-甲基-1H-吡唑-4-基、1-异丙基-5-甲基-1H-吡唑-4-基、3-环丙基-1H-吡唑-5-基、5-甲氧基羰基吡咯-3-基、3-环丙基-1-异丙基-1H-吡唑-5-基、5-环丙基-1-异丙基-1H-吡唑-3-基、1-异丙基-5-(甲氧基羰基)吡咯-3-基、1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基、1-异丙基-1H-吡唑-3-基、1-环戊基-5-环丙基-1H-吡唑-3-基、1-环戊基-3-环丙基-1H-吡唑-5-基、1-环戊基-1H-吡唑-3-基、1-异丙基-1H-吡唑-5-基、1-异丙基-5-(N-甲基氨基羰基)吡咯-3-基、1-异丙基-5-(N、N-二甲基氨基-羰基)-吡咯-3-基、1-(2-环丙基乙基)-1H-吡唑-3-基、1-(2-环丙基乙基)-1H-吡唑-5-基、1-乙基-1H-吡唑-3-基、3-(3，3-二甲基-2-氧代吡咯烷-1-基)苯基、3-(2-氧代-3-苯基吡咯烷-1-基)苯基、3-((E)-苯乙烯基)苯基、3-(3-氰基苯基)苯基、3-(3-(甲基磺酰基氨基)苯基)苯基、3-(4-(甲基磺酰基氨基)苯基)苯基或3-(4-(N-甲氨基磺酰基)苯基)苯基。
在某些实施方案中，R3是芳基或杂芳基，其中每个芳基和杂芳基任选地被一个或多个基团Rx取代；条件是R3不是苯基、氟苯基、氯苯基、吡啶基、硝基苯基或丙基异噁唑。
在某些实施方案中，R3是任选地被Rx取代的吡唑-4-基。
在某些实施方案中，Rx是被一个或多个独立地选自以下的基团取代的C1-6烷基：Rxa、氧代、卤基、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-S(O)-Rv和-N(Rv)-S(O)2-Rv。
在某些实施方案中，Rx是任选地被Rxa取代的C1-6烷基。
在某些实施方案中，R3是被Rx取代的吡唑-4-基。
在某些实施方案中，R3是被以下的基团取代的苯基：氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基、杂环、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-O-C(O)-O-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-O-C(O)-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)2-Rv、-N(Rv)-S(O)-N(Rv)2或-N(Rv)-S(O)2-N(Rv)2，其中任何C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环任选地被一个或多个独立选自以下的基团取代：Rxa、氧代、卤基、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-S(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)2-Rv或C1-6烷基，所述C1-6烷基任选地被一个或多个独立选自氧代和卤基的基团取代。
在某些实施方案中，Rx是C2-6烯基或C2-6炔基，其中任何C2-6烯基和C2-6炔基任选地被一个或多个独立地选自以下的基团取代：Rxa、氧代、卤基、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-S(O)-Rv和-N(Rv)-S(O)2-Rv。
在某些实施方案中，Rx选自C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基、杂环、-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-O-C(O)-O-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-O-C(O)-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)2-Rv、-N(Rv)-S(O)-N(Rv)2和-N(Rv)-S(O)2-N(Rv)2，其中任何C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环任选地被一个或多个独立选自以下的基团取代：Rxa、氧代、卤基、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-S(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)2-Rv或C1-6烷基，所述C1-6烷基任选地被一个或多个独立选自氧代和卤基的基团取代。
在某些实施方案中，R3是被以下取代的杂芳基：氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基、杂环、-F、-Cl、-Br、-I、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-O-C(O)-O-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-O-C(O)-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)2-Rv、-N(Rv)-S(O)-N(Rv)2或-N(Rv)-S(O)2-N(Rv)2；其中任何C1-6烷基被一个或多个独立地选自以下的基团取代：Rxa、氧代、卤基、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-S(O)-Rv和-N(Rv)-S(O)2-Rv；并且其中任何C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个独立地选自以下的基团取代：Rxa、氧代、卤基、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-S(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)2-Rv和C1-6烷基，所述C1-6烷基任选地被一个或多个独立选自氧代和卤基的基团取代。
在某些实施方案中，R3是被选自以下的基团取代的5元杂芳基：氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基、杂环、-F、-C1、-Br、-I、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-O-C(O)-O-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-O-C(O)-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)2-Rv、-N(Rv)-S(O)-N(Rv)2或-N(Rv)-S(O)2-N(Rv)2；其中任何C1-6烷基被一个或多个独立地选自以下的基团取代：Rxa、氧代、卤基、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-S(O)-Rv和-N(Rv)-S(O)2-Rv；并且其中任何C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个独立地选自以下的基团取代：Rxa、氧代、卤基、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-S(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)2-Rv和C1-6烷基，所述C1-6烷基任选地被一个或多个独立选自氧代和卤基的基团取代。
在某些实施方案中，R3是被以下取代的苯基：氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基、杂环、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-O-C(O)-O-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-O-C(O)-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)2-Rv、-N(Rv)-S(O)-N(Rv)2或-N(Rv)-S(O)2-N(Rv)2；其中任何C1-6烷基被一个或多个独立地选自以下的基团取代：Rxa、氧代、卤基、-NO2、-N(Rv)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-C(O)-OR v、-N(Rv)-S(O)-Rv和-N(Rv)-S(O)2-Rv；并且其中任何C2-6烯基、C2-6炔基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基任选地被一个或多个独立地选自以下的基团取代：Rxa、氧代、卤基、-NO2、-N(R v)2、-CN、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-O-Rv、-S-Rv、-O-C(O)-Rv、-C(O)-Rv、-C(O)-O-Rv、-S(O)-Rv、-S(O)2-Rv、-C(O)-N(Rv)2、-S(O)2-N(Rv)2、-N(Rv)-C(O)-Rv、-N(Rv)-C(O)-ORv、-N(Rv)-S(O)-Rv、-N(Rv)-S(O)2Rv和C1-6烷基，所述C1-6烷基任选地被一个或多个独立选自氧代和卤基的基团取代。
在某些实施方案中，R2和R3与其所连接的原子一起形成环己基环，其任选地被一个或多个基团Rx取代。
在某些实施方案中，R2和R3与其所连接的原子一起形成苯基环，其任选地被一个或多个基团Rx取代。
在某些实施方案中，R4是H、甲基、乙基、丙基、环丙基甲基、2-羟基乙基、2-(二甲基氨基)乙基、苯基、苯甲基或2-甲氧基乙基。
在某些实施方案中，R4和R3与其所连接的原子一起形成杂环基。
在某些实施方案中，所述化合物不是以下中的任一种：
Figure BDA0003416868420000821
在其他实施方案中，所述试剂是富含jumonji的相互作用结构域1a(jaridla)和1b(jaridlb)组蛋白脱甲基酶的(小分子)抑制剂，如PCT公开WO 2014055634A1(通过引用并入本文)中所述。
在另一个实施方案中，JMJD3脱甲基酶抑制剂包含如授予Atkinson等人的WO2012052390中所公开的N-2-(2-吡啶基)-4-嘧啶基-β-丙氨酸衍生物中的任一种，所述文献在此全文通过引用并入。示例性抑制剂包括具有以下结构的那些抑制剂：
Figure BDA0003416868420000831
其中R1是C1-6烷基；C3-7环烷基；C1-6卤代烷基；5元、6元或7元芳基或杂芳基(所述杂芳基含有一个或多个选自N、O和S的杂原子并且其任选地与苯基稠合)，所述5元、6元或7元芳基或杂芳基任选地被一个或多个独立地选自C1-3烷基的取代基取代；O-C1-6烷基(其任选地被苯基或萘基取代，所述苯基或萘基中的每一个可以被一个或多个独立地选自卤基的取代基取代)；-O-环己基(其任选地与苯基稠合)；C(O)NRc 2；或NRaRb，每个Ra和Rb独立地选自：H；C1-3烷基，其任选地被一个或多个独立地选自苯基的取代基取代(所述苯基任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-3烷基、O-C1-3烷基、C(O)NRc 2、卤基和氰基)；C(O)NRc 2；4元、5元、6元或7元杂环或杂芳基(含有一个或多个独立地选自N、O和S的杂原子)；3元、4元、5元、6元或7元环烷基(其任选地与苯基稠合)；卤基；OC1-3烷基；OH；-NHCOC1-3烷基NRc 2和C(O)NHCH2C(O)NRc 2；3元、4元、5元、6元或7元环烷基(其任选地与苯基稠合)，或Ra和Rb一起形成任选地含有一个或多个独立地选自N、O、S或(O)2的另外的杂原子的5元、6元或7元杂环基，所述杂环基任选地与含有一个或多个独立地选自N、O和S的杂原子的5元、6元或7元芳基或杂芳基环稠合；所述杂环和/或其任选地稠合的芳基或杂芳基任选地被一个或多个独立地选自以下的取代基取代：卤基、OH、C1-3烷基、O-C1-3烷基、C(O)C1-3烷基、S(O)2C1-3烷基、NHC(O)C1-3烷基、NHS(O)2C1-3烷基、C(O)NRc2、C(O)NRd2(其中Rd和Rd一起形成5元或6元杂环)、NRC 2C(O)苯基、S(O)2NRc 2、＝0(氧代)和5元、6元或7元芳基或杂芳基(含有一个或多个独立地选自N、O和S的杂原子)；R2和R3各自独立地选自：H、(CH2)1-3NRc(CH2)1-3NRc 2、(CH2)1-6NRc 2；C1-3烷基；O-C1-3烷基；C1-3卤代烷基；(CH2)0-3NRaRb(其中Ra和Rb如上所定义)；(CH2)0-3NHPh；(CH2)0-3OPh；(CH2)0-3Ph；或R2和R3一起形成稠合的苯环，并且每个Rc独立地选自氢和C1-3烷基，或其药学上可接受的盐。这种结构的合适抑制剂包括但不限于N-[6-(1，1-二甲基乙基)-2-(2-吡啶基)-4-嘧啶基]-β-丙氨酸；N-[2-(2-吡啶基)-6-(三氟甲基)-4-嘧啶基]-β-丙氨酸；N-[6-(4-吗啉基)-2-(2-吡啶基)-4-嘧啶基]-β-丙氨酸；N-[6-(甲基氨基)-2-(2-吡啶基)-4-嘧啶基]-β-丙氨酸；N-[2-(2-吡啶基)-6-(1-吡咯烷基)-4-嘧啶基]-β-丙氨酸；N-[6-[(2-羟基乙基)氨基]-2-(2-吡啶基)-4-嘧啶基]-β-丙氨酸；N-[6-[(苯基甲基)氨基]-2-(2-吡啶基)-4-嘧啶基]-β-丙氨酸；N-[6-[(2-羟基乙基)(甲基)氨基]-2-(2-吡啶基)-4-嘧啶基]-β-丙氨酸；N-[6-(二甲基氨基)-2-(2-吡啶基)-4-嘧啶基]-β-丙氨酸；和N-[2-(2-吡啶基)-6-(1，2，4，5-四氢-3/-/-3-苯并氮杂
Figure BDA0003416868420000841
-3-基)-4-嘧啶基]-β-丙氨酸。在授予Atkinson等人的WO2012052390中公开的其他JMJD3脱甲基酶抑制剂也适用于本文所述的方法中，所述文献在此全文通过引用并入。
在另一个实施方案中，JMJD3脱甲基酶抑制剂包括在授予Barker等人的WO2013143597中公开的小分子JMJD3抑制剂中的任一种，所述文献在此全文通过引用并入。示例性抑制剂包括具有以下结构的那些抑制剂：
Figure BDA0003416868420000851
其中X是-(R1)o-i-(R2)o-i-R3或-R1-R4；每个R1独立地是NH、N(CH3)、O；R2是在R1和R3之间具有5个原子的最大长度的连接基团并选自：-CO-C1-6烷基-、-CO-、-CO-C1-6烷基-O-、-CO-C1-6烷基-S-、-CO-C1-6烷基-O-C1-6烷基-、-C1-6烷基-、C1-6烷基-O-、-C1-6烷基-SO2-、-C1-6烷基-NH-CO-、-C1-3烷基-C3-6环烷基-C1-3烷基-O-，其中每个烷基是直链或支链的并且可以任选地被一个或多个独立地选自苯基或-OH的取代基取代；R3选自：C6-12单环或双环芳基(其各自可以任选地被独立地选自以下的取代基取代一次或多次：卤基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、NHCOC1-3烷基、-O-苯基、-CH2-苯基、苯基(任选地被C1-3烷基取代)、OH、NH2、CONH2、CN、-NHCOC1-3烷基NH2、-HCOC1-3烷基、NHCOOC1-3烷基、-NHSO2C1-3烷基、-SO2C1-3烷基或-NHCOC1-3烷基-NHCOC1-4烷基
Figure BDA0003416868420000852
5元至12元单环或双环杂芳基(任选地被一个或多个独立地选自苯基、CH2苯基、-C1-6烷基、-氧代的取代基取代)；含有一个或多个独立地选自N、S、SO、SO2或O的杂部分且任选地与苯基稠合的5元或6元杂环基(任选地被一个或多个独立地选自苯基、CH2苯基、C1-6烷基的取代基取代)；或3元至7元环烷基(包括桥连环烷基)且任选地与苯基稠合(且任选地被一个或多个独立地选自OH、苯基、CH2苯基的取代基取代)，R4选自：C1-6直链或支链烷基(任选地被NH2取代)、COC1-6直链或支链烷基。这种结构的合适抑制剂包括但不限于3-{[(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-4-吡啶甲酸；3-{[(4-甲基苯基)乙酰基]氨基}-4-吡啶甲酸；-[(3-苯基丙酰基)氨基]-4-吡啶甲酸；-[(苯基羰基)氨基]-4-吡啶甲酸；-[(2，2-二甲基丙酰基)氨基]-4-吡啶甲酸；-{[(苯氧基)乙酰基]氨基}-4-吡啶甲酸；-{[4-(4-甲基苯基)丁酰基]氨基}-4-吡啶甲酸；-[(2-萘乙酰基)氨基]-4-吡啶甲酸；-{[4-(2-萘基)丁酰基]氨基}-4-吡啶甲酸；和-{[4-(4-溴苯基)丁酰基]氨基}-4-吡啶甲酸。在授予Barker等人的WO2013143597中公开的另外的小分子JMJD3抑制剂也适用于本文所述的方法，所述文献在此全文通过引用并入。
使用本领域已知的技术可以容易地修饰小分子JMJD3脱甲基酶抑制剂以增加生物利用度(参见Hetal等人，“A Review on Techniques for Oral BioavailabilityEnhancement of Drugs，”Intl.J.Pharm.Sci.Rev.Res.4(3)：203-223(2010)和Huttunen等人，“Prodrugs-from Serendipity to Rational Design，”Pharmacol.Rev.63(3)：750-771(2011)，其在此全文通过引用并入)。例如，增加小分子的溶解度和溶解速率的常见修饰包括粒度减小、晶体习性的修饰、在载体中的分散、包合复合、盐形成和pH变化。还已知使用例如连接的可电离或极性中性基团(例如，磷酸酯，氨基酸，糖部分)将小分子修饰成前药形式以增强溶解度和溶解速率。增加渗透性和吸收的常见修饰包括例如将亲水性羟基、硫醇、羧基、磷酸酯或胺基转化为更亲脂的烷基或芳基酯。
在另一个实施方案中，JMJD3脱甲基酶抑制剂是JMJD3反义RNA、shRNA或siRNA寡核苷酸。
使用反义方法抑制基因的体内翻译和随后的蛋白质表达是本领域熟知的(例如，授予Dobie等人的美国专利第7,425，544号；授予Karras等人的美国专利第7,307,069号；授予Bennett等人的美国专利第7,288,530号；授予Cowsert等人的美国专利第7,179,796号(其在此全文通过引用并入)。反义核酸是与特定核酸分子(诸如mRNA分子)的至少一部分互补或杂交的核酸分子(例如，含有DNA核苷酸、RNA核苷酸或修饰(例加，增加分子稳定性的修饰，如2′-O-烷基(例如，甲基)取代的核苷酸)或其组合)(参见例如，Weintraub，H.M.，“Antisense DNA and RNA，”Scientific Am.262：40-46(1990)，其在此全文通过引用并入)。反义核酸分子与其相应的靶核酸分子(诸如JMJD3)杂交以形成干扰mRNA翻译的双链分子，因为细胞不翻译双链mRNA。用于本公开的方法中的反义核酸通常长度为至少10个至12个核苷酸，例如长度为至少15个、20个、25个、50个、75个或100个核苷酸。反义核酸也可以与靶核酸一样长，与所述靶核酸形成抑制性双链体。可以将反义核酸作为反义寡核苷酸引入细胞中，或者可以在引入了编码反义核酸的核酸的细胞中产生，例如使用基因治疗方法。
siRNA是长度为约20个至25个核苷酸的双链合成RNA分子，在两端具有短的2个至3个核苷酸的3′突出端。双链siRNA分子代表靶mRNA分子的一部分的有义链和反义链，在这种情况下是JMJD3核苷酸序列(SEQ ID NO：1)的一部分。siRNA分子通常被设计成靶向mRNA靶的距起始密码子下游约50个至100个核苷酸的区域。在引入细胞后，siRNA复合物触发内源性RNA干扰(RNAi)途径，从而引起靶mRNA分子的裂解和降解。已经描述了siRNA组合物的各种改进，诸如将修饰的核苷或基序并入siRNA分子的一条链或两条链中以增强稳定性、特异性和功效，并且已经描述并适合根据本公开的这个方面使用(参见例如，授予Giese等人的WO2004/015107；授予McSwiggen等人的WO2003/070918；授予Imanishi等人的WO1998/39352；授予Jesper等人的美国专利申请公开第2002/0068708号；授予Kaneko等人的美国专利申请公开第2002/0147332号；授予Bhat等人的美国专利申请公开第2008/0119427号，其在此全文通过引用并入)。
短或小发夹RNA分子在功能上类似于siRNA分子，但包含较长的RNA序列，其形成紧密的发夹转角。shRNA通过细胞机制裂解成siRNA，并且基因表达通过细胞RNA干扰途径沉默。如本文所述，已经开发了有效干扰JMJD3表达的shRNA分子并且具有以下核酸序列：
Figure BDA0003416868420000881
Figure BDA0003416868420000882
和
Figure BDA0003416868420000883
b.EGFR/HER2抑制剂组蛋白脱甲基酶抑制剂
在某些实施方案中，抗PESC剂是受体酪氨酸激酶抑制剂，并且优选地是EGFR抑制剂、HER2抑制剂或双重EGFR/HER2抑制剂。
示例性EGFR抑制剂/拮抗剂尤其包括小分子EGFR抑制剂/拮抗剂，诸如吉非替尼(gefitinib)、埃罗替尼(erlotinib)、拉帕替尼(lapatinib)、阿法替尼(afatinib)(也称为BIBW2992)、来那替尼(neratinib)、ABT-414、达可替尼(dacomitinib)(也称为PF-00299804)、AV-412、PD 153035、凡德他尼(vandetanib)、PKI-166、帕利替尼(pelitinib)(也称为EKB-569)、卡奈替尼(canertinib)(也称为CI-1033)、埃克替尼(icotinib)、波齐替尼(poziotinib)(也称为NOV120101)、BMS-690514、CUDC-101、AP26113或XL647。
在某些实施方案中，抗PESC药剂为EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)。示例性EGFR-TKI包括阿法替尼、埃罗替尼、吉非替尼、来那替尼、达可替尼和奥希替尼(osimertinib)。
WZ8040是新型突变选择性不可逆EGFRT790M抑制剂，不抑制ERBB2磷酸化(T798I)。
c.蛋白酶体抑制剂
在其他实施方案中，抗PESC剂可以是蛋白酶体抑制剂。
蛋白酶体抑制剂可以是本领域已知的任何蛋白酶体抑制剂。特别地，其是在以下段落中更详细描述的蛋白酶体抑制剂中的一种。
用于本文所述组合中的合适的蛋白酶体抑制剂包括(a)肽硼酸酯，诸如硼替佐米(bortezomib)(也称为VelcadeTM和PS341)、德兰佐米(delanzomib)(也称为CEP-18770)、伊沙佐米(ixazomib)(也称为MLN9708)或柠檬酸伊沙佐米；(b)肽醛，诸如MG132(Z-Leu-Leu-Leu-H)、MG115(Z-Leu-Leu-Nva-H)、IPSI 001、非鲁米特B(fellutamide B)、ALLN(Ac-Leu-Leu-N1e-H，也称为钙蛋白酶抑制剂I)和亮抑酶肽(leupeptin)(Ac-Leu-Leu-Arg-al)；(c)肽乙烯基砜；(d)环氧酮，诸如环氧酶素(epoxomicin)、奥普佐米(oprozomib)(也称为PR-047或ONX 0912)、PR-957(也称为ONX 0914)和卡非佐米(carfilzomib)(也称为PR-171)；和(e)β-内酯，诸如乳胞素(lactacystin)、欧姆拉里德(omuralide)、盐孢酰胺A(salinosporamide A)(也称为NPI-0052和马里佐米(marizomib))、盐孢酰胺B(salinosporamide B)、贝拉克托辛(belactosine)、肉桂酰胺(cinnabaramide)、多酚(polyphenol)、TMC-95和PS-519。
在优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是硼替佐米，也称为VELCADE和PS341。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-3-苯基-2-(吡嗪-2-羰基氨基)丙酰基]氨基]丁基]硼酸，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是式(44)的化合物：
式(44)
Figure BDA0003416868420000901
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。硼替佐米是可商购的。
在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是卡非佐米，也称为PR-171或KYPROLIS。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是(2S)-4-甲基-N-[(2S)-1-[[(2S)-4-甲基-1-[(2R)-2-甲基环氧乙烷-2-基]-1-氧代戊-2-基]氨基]-1-氧代-3-苯基丙-2-基]-2-[[(2S)-2-[(2-吗啉-4-基乙酰基)氨基]-4-苯基丁酰基]氨基]戊酰胺，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是式(45)的化合物：
式(45)
Figure BDA0003416868420000902
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。卡非佐米是可商购的。
在优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是德兰佐米，也称为CEP-18770。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂为[(1R)-1-[[(2S，3R)-3-羟基-2-[(6-苯基吡啶-2-羰基)氨基]丁酰基]氨基]-3-甲基丁基]硼酸，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。在一个优选的实施方案中，所述蛋白酶体抑制剂是式(46)的化合物：
式(46)
Figure BDA0003416868420000911
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。
在优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是伊沙佐米，也称为MLN-9708或柠檬酸伊沙佐米。在优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是4-(羧甲基)-24(R)-1-(2-(2，5-二氯苯甲酰氨基)乙酰氨基)-3-甲基丁基)-6-氧代-1，3，2-二氧杂硼杂环己烷-4-甲酸，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-4，4-二乙酸、2-[(1R)-1-[[2-[(2，5-二氯苯甲酰基)氨基]乙酰基]氨基]-3-甲基丁基]-5-氧代-，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是2，2′-{2-[(1R)-1-{[N-(2，5-二氯苯甲酰基)甘氨酰]氨基}-3-甲基丁基]-5-氧代-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-4，4-二基}二乙酸，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是式(47)的化合物：
式(47)
Figure BDA0003416868420000921
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是1B-{(1R)-1-[2-(2，5-二氯苯甲酰氨基)乙酰氨基]-3-甲基丁基}硼酸，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是式(48)的化合物：
式(48)
Figure BDA0003416868420000922
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。柠檬酸伊沙佐米是可商购的。
在优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是马里佐米，也称为NPI-0052和盐孢酰胺A。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是(4R，5S)-4-(2-氯乙基)-1-((1S)-环己-2-烯基(羟基)甲基)-5-甲基-6-氧杂-2-氮杂双环[3.2.0]庚烷-3，7-二酮，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是式(49)的化合物：
式(49)
Figure BDA0003416868420000931
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。
在优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是奥普佐米(oprozimib)，也称为PR-047或ONX 0912。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂为N-[(2S)-3-甲氧基-1-[[(2S)-3-甲氧基-1-[[(2S)-1-[(2R)-2-甲基环氧乙烷-2-基]-1-氧代-3-苯基丙-2-基]氨基]-1-氧代丙-2-基]氨基]-1-氧代丙-2-基]-2-甲基-1，3-噻唑-5-甲酰胺，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。在一个优选的实施方案中，蛋白酶体抑制剂是式(50)的化合物：
式(50)
Figure BDA0003416868420000932
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、共晶体或前药。
示例性蛋白酶体抑制剂包括硼替佐米、卡非佐米、伊沙佐米、奥普佐米或马里佐米。
CEP-18770、双硫仑(disulfiram)、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯、环氧酶素、乳胞素、MG132、MLN9708、ONX 0912和盐孢酰胺A。
在其他实施方案中，抗PESC剂是德兰佐米(CEP-18770)，其是IC50为3.8nM的蛋白酶体的胰凝乳蛋白酶样活性的口服活性抑制剂，对蛋白酶体的胰蛋白酶和肽基谷氨酰基活性仅有少量抑制。
在其他实施方案中，抗PESC剂是CEP-18770，其是细胞IC50值为3.8nM的蛋白酶体的胰凝乳蛋白酶样活性的新型口服活性抑制剂。
d.STAT3抑制剂
在某些实施方案中，抗PESC剂是STAT3抑制剂，诸如斯他克。斯他克是非肽小分子，其在无细胞测定中以5.1μM的IC50有效抑制STAT3活化和核转位，相对于STAT1具有高度选择性。
STAT3抑制剂的非限制性实例包括BP-1-102、S3I-M2001、STA-21、S3I-201、肉盘菌内酯(Galiellalactone)、具有序列PY*LKTK(其中Y*表示磷酸酪氨酸)的多肽和具有序列Y*LPQTV(其中Y*表示磷酸酪氨酸)的多肽。STAT3抑制剂的其他非限制性实例描述于Yue和Turkson Expert Opin Investig Drugs.2009年1月；18(1)：45-56中，其全部内容通过引用并入本文。
其他STAT3抑制剂包括：E1：4_-溴-苯基-2-N-氨酰基-1 1-二氧化物-苯并[b]噻吩；E2：4_-溴-2-N-(4-氟苯基)丙氨酰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E3：4_-溴-苯并2-N-(4-甲氧基苯基)丙氨酰基-1，1-二氧化物[b]噻吩；E4：4_-溴-2-N-氨酰基-对甲苯基-1，1-氧化苯并[b]噻吩；E5：4_-溴-2-N-(4-氯苯基)丙氨酰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E6：4_-溴-2-N-苯并(3-氯苯基)丙氨酰基-1，1-二氧化物[b]噻吩；E7∶4_-溴-2-N-(2-氯苯基)丙氨酰基-1，1-二氧化物苯并[b]噻吩；E8：4_-溴-2-N-(3-氯-4-氟苯基)丙氨酰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E9：4_-氯-2-N-氨酰基-苯基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E10：5_-溴-苯基-2-N-氨酰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；EII：6_溴-苯基-2-N-氨酰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E12：2-N-氨酰基-苯基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E13：5-硝基-苯基-2-N-酰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E14：5_-溴-正丁基-2-N-氨酰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E15：5_溴-2-N-氨酰基-叔丁基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E16：5_-溴-2-N-异丙基-丙氨酰基-1，1-苯并[b]二氧化物噻吩；E17：5_-溴-2-N-环己基-丙氨酰基-1，1-苯并[b]噻吩二氧化物；E18：5_-溴-2-N-[(3s，5s，7s)-1-金刚烷基]-1，1-氨酰基二氧化物苯并[b]噻吩；E19：4_-溴-苯并-2-N-苯甲基-氨酰基-1，1-二氧化物[b]噻吩：E20：4_-溴-2-N-(4-溴苯乙基)苯并-1，1-二氧化物氨酰基[b]噻吩；E21∶5_-溴-2-N-(4-苯氧基-苯基)氨基-苯并-1，1-二氧化物基团[b]噻吩；E22：5_-溴-2-N-[4-(I-哌啶基-羰基)苯基]-1，1-氨酰基二氧化物苯并[b]噻吩；E23：5_-溴-2-N-[4-(4-吗啉基羰基)苯基]甲酰胺基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E24：5_-溴-2-N-[4-(N-甲基-N-苯基)羰基]苯基-甲酰胺基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E25：4_溴-2-对甲苯基-羧基-1，1-二氧化物[b]噻吩；E26：5_溴-2-N，N-二乙基-1，1-二氧化物氨酰基苯并噻吩基；E27：5_-溴-2-(I-吡咯基)羰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E28∶5_-溴-2-(I-哌啶基)羰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E29：5_-溴-2-(2-甲基-哌啶基)羰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E30：苯并5_-溴-2-(3-甲基-1-哌啶基)羰基-1，1-二氧化物[b]噻吩；E31：5_-溴-2-吗啉基-羰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E32：5_-溴-2-(4-乙基-1-哌啶基)羰基-1，1-二氧化物-苯并[b]噻吩；E33：5-溴-2-(N-甲基-N-苯基)苯并-1，1-二氧化物氨酰基[b]噻吩；E34：4_溴-2-(I-哌啶基)羰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E35：5_三氟甲基-2-(I-哌啶基)羰基-1，1-二氧化物苯并[b]噻吩；E36：4_-溴-2-甲氧基羰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E37：2_甲氧基羰基-1，1-氧化苯并[b]噻吩；E38：苯并5_乙酰氨基-2-N-苯基-1，1-二氧化物氨酰基[b]噻吩；E39：5_苯并基氨基-2-N-氨酰基苯基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E40：5_甲基苯甲酰胺基-2-N-氨酰基-苯基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E41：5_三氟甲基-苯甲酰基-苯基氨基甲酰基-2-N-酰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；E42∶5_对氯苯甲酰基-N-苯基氨基甲酰基酰基-2-1，1-苯并[b]噻吩二氧化物；E43：5_-环己基-甲酰胺基-2-N-苯基-氨酰基-1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩；或E44：5_苯甲酰胺基-2-(1-哌啶基)羰基1，1-二氧化物，苯并[b]噻吩。
e.GSK3抑制剂
在某些实施方案中，抗PESC剂是糖原合酶激酶3(GSK-3)的抑制剂，在此也称为GSK-3抑制剂。在某些实施方案中，GSK-3抑制剂可以是GSK-3α和GSK-3β的抑制物。在某些实施方案中，GSK-3抑制剂是GSK-3α相对于GSK-3β的选择性抑制剂。在某些实施方案中，GSK-3抑制剂是GSK-3β相对于GSK-3α的选择性抑制剂。
GSK3抑制剂诸如AZD1080。AZD1080是选择性的、口服活性的、脑可渗透的GSK3抑制剂，分别以6.9nM和31nM的Ki抑制人GSK3α和GSK3β，对CDK2、CDK5、CDK1和Erk2显示＞14倍的选择性。
GSK-3抑制剂的其他实例包括芦荟苦素(aloisine)(诸如芦荟苦素A和芦荟苦素B)、海美尼地辛(hymenialdisine)(诸如二溴海美尼地辛)、靛玉红(indirubin)(诸如5，5′-二溴-靛玉红)、马来酰亚胺(maleimide)，特别是大环双吲哚基马来酰亚胺(诸如Ro 31-8220、SB-216763、SB-415286或3F8)和毒蕈碱激动剂(muscarinic agonist)(诸如AFI02B和AFI50)。
在某些实施方案中，GSK3抑制剂可以是6-溴靛玉红-3′-肟(BIO)、CHIR-99021、SB216763、CHIR-98014、TWS119、IM-12、1-氮杂肯帕罗酮(1-Azakenpaullone)、AR-A014418、SB415286、AZD1080、AZD2858、靛玉红、A 1070722、TCS 2002、泰德格鲁西布(Tideglusib)或其任何衍生物。
在另一个实施方案中，GSK-3抑制剂包括夫拉平度(flavopirido1)、肯帕罗酮(kenpaullone)、阿斯特帕罗酮(alsterpaullone)、氮杂肯帕罗酮(azakenpaullone)、吡唑并吡啶、CHIR98014、CHIR99021、CHIR-637、CT20026、SU9516、ARA014418和十字孢碱(staurosporine)。
示例性GSK3抑制剂可以选自由以下组成的组：Li+、(2′Z，3′E)-6-溴靛玉红-3′-肟(BIO)、(2Z，3′EJ-6-溴靛玉红-3′-丙酮肟(BlO-丙酮肟)、SB-216763(3-(2，4-二氯苯基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-1H-吡咯-2，5-二酮)、SB-415286(3-[(3-氯-4-羟基苯基)氨基]-4-(2-硝基苯基)-1H-吡咯-2，5-二酮)、恩扎司他林(enzastaurin)(3-(1-甲基吲哚-3-基)-4-[1-[1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基]吲哚-3-基]吡咯-2，5-二酮)、L803-mts(Myr-N-Gly-Lys-Glu-Ala-Pro-Pro-Ala-Pro-Pro-Gln-pSer(P03H)-Pro-NH2)、NP031112(4-苯甲基-2-萘-1-基-1，2，4-噻二唑烷-3，5-二酮)、棕榈酸帕利哌酮(paliperidone palmitate)(3-(2-(4-(6-氟-1，2-苯并异噁唑-3-基)-1-哌啶基)乙基)-6，7，8，9-四氢-2-甲基-4-氧代-4H-吡啶并(1，2-a)嘧啶-9-基酯)、丙戊酸(2-丙戊酸)、TDZD-8(4-苯甲基-2-甲基-1，2，4-噻二唑烷-3，5-二酮)和9-羟基利培酮(6，7，8，9-四氢-3-(2-(4-(6-氟-1，2-苯并异噁唑-3-基)-1-哌啶基)乙基)-9-羟基-2-甲基-4H-吡啶并[2，1-a]嘧啶-4-酮)。
在GSK-3抑制剂中，双吲哚靛玉红的衍生物(统称为靛玉红)表现为一类原始的和有前景的工具和试剂。当用作研究试剂时，其的中等选择性可能是不适宜的，但是其对几种疾病相关靶标(特别是CDK和GSK-3)的组合作用可能构成潜在治疗应用的优势。在许多靛玉红中，6-溴-靛玉红-3′-肟(BIO)已被广泛用于研究GSK-3在各种细胞环境中的生理作用和改变胚胎干细胞的命运。
在一个实施方案中，GSK-3抑制剂是下式的化合物：
Figure BDA0003416868420000971
其中X1和X2彼此独立地是O、S、N-OR3、N(Z1)或独立地选自H、F、Cl、Br、I、N02、苯基和(CrC6)烷基的两个基团，并且其中R3是氢、(C C6)烷基或(C C6)烷基-C(0)-；
每个Y彼此独立地是H、(C C6)烷基、(C C6)烷基-C(0)-、(C C6)烷基-C(0)0-、苯基、N(Z1)(Z2)、磺酰基、膦酰基、F、Cl、Br或I；
Z1和Z2彼此独立地是H、(d-C6)烷基、苯基、苯甲基，或Z1和Z2与其所连接的氮一起表示5元、6元或7元杂环基；
n和m彼此独立地是0、1、2、3或4；
R1和R2彼此独立地是H、(CrC6)烷基、CrC6)烷基-C(0)-、苯基、苯甲基或苯甲酰基；
并且其中烷基是支链或直链烷基，任选地被1个、2个、3个、4个或5个OH、N(Z1)(Z2)、(CrC6)烷基、苯基、苯甲基、F、Cl、Br或I取代；并且其中任何苯基、苯甲基或苯甲酰基任选地被1个、2个、3个、4个或5个OH、N(Z1)(Z2)、(C C6)烷基、F、Cl、Br或I取代；
或其盐。
在一个实施方案中，X1是O并且X2是N-OH，或X1是N-OH并且X2是O。在另一个实施方案中，一个Y是Br。在另一个实施方案中，一个Y在6′位是Br。在另一个实施方案中，n是0且m是1，或n是1且m是0。在另一个实施方案中，R1和R2是H。
在一个实施方案中，GSK-3抑制剂包含下式的6-溴靛玉红-3′-肟
Figure BDA0003416868420000981
或其盐。
在一个实施方案中，GSK-3抑制剂包含下式的6-溴靛玉红-3′-丙酮肟
Figure BDA0003416868420000991
或其盐。
f.HSP90、HSP70和双重HSP90/70抑制剂
在某些实施方案中，抗PESC剂是HSP90抑制剂或HSP70抑制剂或两者。示例性抗PESC剂是南昌霉素
Figure BDA0003416868420000992
Hsp90抑制剂的其他实例包括但不限于格尔德霉素(geldanamycin)、根赤壳菌素(radicicol)、17-N-烯丙基氨基-17-去甲氧基格尔德霉素/丹皮霉素(tanespicmycin)/17AAG(BMS)、除莠霉素A(herbimycin A)、新生霉素(novobiocin)钠(U-6591)、17-GMB-APA-GA、麦克菌素I(macbecin I)、CCT 018159、葛杜宁(gedunin)、PU24FCl、PU-H71、PU-DZ8、PU3、AUY922(Novartis)、HSP990(Novartis)、瑞他霉素(retaspimycin)盐酸盐/IPI-504(Infinity)、BIIB021/CNF2024(Biogen Idec)、STA-9090(Synta)、SNX-5422//甲磺酸盐(Pfizer)、BIIB028(Biogen Idec)、KW-2478(Kyowa Hakko Kirin)、AT13387(Astex)、XL888(Exelixis)、MPC-3100(Myriad)、ABI-010/nab(纳米颗粒、白蛋白结合)-17AAG(Abraxis)、17-氨基脱甲氧基格尔德霉素(IPI-493)、17-二甲氨基乙氨基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-DMAG)、XL888、SNX-2112、SNX-7081、加特司匹(ganetespib)(STA-9090)、AUY922、Debio0932、BIIB028、BIIB021、MPC-3100、MPC-0767、PU3、PU-H58、DS-2248、KW-2478、CCT018159、CCT0129397、BJ-B11、伊来司莫(elesclomol)(STA-4783)、G3130、葛杜宁、除莠霉素、雷德斯特(radester)、KNK437、HSP990或NVP-BEP800。
Figure BDA0003416868420001001
IV.组合疗法-ESO再生剂
在某些实施方案中，抗PESC剂可以与一种或多种选择性促进正常上皮干细胞的增殖或其他再生和伤口愈合活性的药剂联合施用。这些“ESO再生剂”的联合施用可以通过施用单一共同制剂，通过同时施用或通过在分开的时间施用来实现。
在某些实施方案中，抗PESC剂可与一种或多种选择性地促进正常食管干细胞的增殖或其他再生和伤口愈合活性的药剂联合施用。这些“食管ESO再生剂”的联合施用可以通过施用单一共同制剂，通过同时施用或通过在分开的时间施用来实现。
a.ABL激酶抑制剂
在某些实施方案中，ESO再生剂是ABL激酶抑制剂、优选BCR-ABL激酶抑制剂的泛抑制剂。示例性泛抑制剂包括伊马替尼、尼洛替尼、达沙替尼、博舒替尼和普纳替尼，并且优选是普纳替尼。
b.FLT3抑制剂
在某些实施方案中，ESO再生剂是FLT3抑制剂。本文使用的示例性FLT3抑制剂是奎扎替尼(AC220)、克拉尼布(CP-868596)、米哚妥林(PKC-412)、来他替尼(CEP-701)、4SC-203、TTT-3002、索拉非尼(Bay-43-0006)、普纳替尼(AP-24534)、舒尼替尼(SU-11248)和/或坦度替尼(MLN-0518)或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物。优选地，FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)抑制剂是奎扎替尼(AC220)或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物。
本文所用的这些和其他示例性抑制剂在下文更详细地描述。
品牌名称：奎扎替尼
结构：
Figure BDA0003416868420001011
亲和力：FLT3(1.6nM)、KIT(4.8nM)、PDGFRB(7.7nM)、RET(9.9nM)、PDGFRA(11nM)、CSF1R(12nM)
品牌名称：克拉尼布
结构：
Figure BDA0003416868420001021
亲和力：FLT3、PDGFRb
品牌名称：米哚妥林
结构：
Figure BDA0003416868420001022
亲和力：PKNI(9.3nM)、TBKI(9.3nM)、FLT3(11nM)、JAK3(12nM)、MLKI(15nM)，和
在15-110nM范围内的30个靶标
品牌名称：来他替尼
Figure BDA0003416868420001031
亲和力：FLT3、TRKA、TRKB、TRKC
品牌名称：4SC-203
结构：
Figure BDA0003416868420001032
亲和力：FLT3、VEGFR
结构：
Figure BDA0003416868420001033
亲和力：FLT3(Wall，Blood(ASH Annual Meeting Abstracts).2012；120：866)；
LRRK2(Yao，Human molecular genetics.2013；22(2)：328-44)。
临床阶段：临床前
开发者：Tautatis(发起者)
品牌名称：索拉非尼
代码名称：Bay-43-0006
结构：
Figure BDA0003416868420001041
IUPAC名称：4-[4-[3-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]脲基]苯氧基]-N-甲基吡啶-2-甲酰胺
亲和力：DDRI(1.5nM)、HIPK4(3nM)、ZAK(6nM)、DDR2(7nM)、FLT3(13nM)和在13-130nM范围内的15个靶标(Zarrinkar，Gunawardane等人2009，在上述引文中)临床阶段：启动(肾癌和肝细胞癌)，I/O期(血癌)开发者：Bayer
品牌名称：普纳替尼
代码名称：AP-24534结构：
Figure BDA0003416868420001051
IUPAC名称：3-[2-(咪唑并[I，2-b]哒嗪-3-基)乙炔基]-4-甲基-N[4-(4-甲基哌嗪-I-基甲基)-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺
亲和力：BCR-ABL、FLT3、KIT、FGFR1、PDGFRa(Gozgit，Mol Cancer Ther.2011；10(6)：1028-35)。
临床阶段：II期(AML)
开发者：Ariad Pharmaceuticals(发起者)
品牌名称：舒尼替尼
代码名称：SU-11248
结构：
Figure BDA0003416868420001052
IUPAC名称：(Z)-N-[2-(二乙基氨基)乙基]-5-(5-氟-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-亚基甲基)-2，4-二甲基-IH-吡咯-3-甲酰胺2(S)～羟基丁二酸(1∶1)N-[2-(二乙基氨基)乙基]-5-[(Z)-(氟-2-氧代-I，2-二氢-3H-吲哚-3-亚基)甲基]-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-甲酰胺L-苹果酸盐
亲和力：PDGFRB(0.075nM)、KIT(0.37nM)、FLT3(0.47nM)、PDGFRA(0.79nM)、
DRAK1(1.0nM)、VEGFR2(1.5nM)、FLT1(1.8nM)、CSF1R(2.0nM)(Zarrinkar，Gunawardane等人2009，在上述引文中)
临床阶段：启动(肾细胞癌、胃肠道间质癌、神经内分泌胰腺)，I期(AML)
开发者：Pfizer(发起者)
品牌名称：坦度替尼
代码名称：MLN-0518
结构：
Figure BDA0003416868420001061
IUPAC名称：N-(4-异丙氧基苯基)-4-[6-甲氧基-7-[3-(I-哌啶基)丙氧基]喹唑啉-4-基]哌嗪-1-甲酰胺
亲和力：PDGFRA(2.4nM)、KIT(2.7nM)、FLT3(3nM)、PDGFRB(4.5nM)、CSF1R(4.9nM)(Zarrinkar，Gunawardane等人2009，在上述引文中)
临床阶段：停药
开发者：Kyowa Hakko Kirin(发起者)、Millennium Pharmaceuticals(发起者)，
代码名称：FF-10101
结构：
Figure BDA0003416868420001071
根据本公开使用的National Cancer Institute，Takeda(发起者)FLT3抑制剂不限于本文所述或其他已知的示例性抑制剂。因此，根据本公开还可以使用其他抑制剂或甚至未知的抑制剂。此类抑制剂可通过本文所述和提供的方法和本领域已知的方法，如使用抑制FLT3的生物化学测定的高通量筛选来鉴定。
用于筛选潜在的FLT3抑制剂，特别是用于鉴定本文所定义的FLT3抑制剂的测定包括例如用于定量测量测试化合物和重组表达的激酶1之间的相互作用的体外竞争结合测定(Fabian等人；Nat Biotechnol.200523(3)：329-36)。因此，执行与固定的捕获化合物和游离测试化合物的竞争。结合激酶活性位点的测试化合物将减少捕获在固体支持物上的激酶的量，而不结合激酶的测试分子对捕获在固体支持物上的激酶的量没有影响。此外，抑制剂选择性还可以在一组重组蛋白激酶的平行酶测定中评估。2，3(Davies等人，Biochem.J.200035(1)：95-105；Bain等人Biochem.J.200337(1)：199-204)。这些测定是基于测量激酶抑制剂的抑制作用并测定50％抑制所关注蛋白激酶所需的化合物浓度。蛋白质组学方法也是鉴定激酶抑制剂的细胞靶标的有效工具。通过固定的捕获化合物从细胞裂解物中富集激酶，因此可以确定激酶抑制剂的天然靶谱。4(Godl等人；Proc NatlAcadSciUSA.2003100(26)：5434-9)。
用于筛选潜在抑制剂并且特别是用于鉴定如本文所定义的抑制剂的测定例如描述于以下论文中：
·Fabian等人，Nat Biotechnol.200523(3)：329-36
·Davies等人，Biochem.J.2000351：95-105。
·Bain等人，Biochem.J.2003371：199-204。
·Godl等人，Proc NatlAcadSci USA.2003100(26)：15434-9。
上述论文通过引用整体并入本文。
V.组合疗法-其他药剂
在某些实施方案中，抗PESC剂可与一种或多种在食管中具有其他有益局部活性的药剂联合施用。活性药物的说明性类别和具体实例包括：(a)镇咳药，诸如右美沙芬(dextromethorphan)、氢溴酸右美沙芬(dextromethorphan hydrobromide)、诺斯卡品(noscapine)、柠檬酸喷托维林(carbetapentane citrate)和盐酸氯苯达诺(chlophedianol hydrochloride)；(b)抗组胺药，诸如马来酸氯苯那敏(chlorpheniraminemaleate)、酒石酸苯茚胺(phenindamine tartrate)、马来酸吡拉敏(pyrilaminemaleate)、琥珀酸多西拉敏(doxylamine succinate)和柠檬酸苯托沙敏(phenyltoloxamine citrate)；(c)退热剂和镇痛剂，诸如对乙酰氨基酚(acetaminophen)、阿司匹林(aspirin)和布洛芬(ibuprofen)；(d)抗酸剂，诸如氢氧化铝和氢氧化镁，(e)抗感染剂，诸如抗真菌剂、抗病毒剂、防腐剂和抗生素，(f)化疗剂。
VI.示例性制剂
在某些实施方案中，抗PESC剂被配制成作为生物粘附制剂的部分用于局部施用。生物粘附聚合物已广泛用于经粘膜药物递送系统中，并且可容易地适用于将主题抗PESC剂递送至食管，特别是病变和肿瘤生长区域。一般而言，聚合物对组织的粘附可通过以下来实现：(i)物理键或机械键，(ii)一级或共价化学键和/或(iii)二级化学键(即离子键)。物理键或机械键可由粘液缝隙或粘膜褶皱中粘附材料的沉积和包含而产生。有助于生物粘附特性的二级化学键由分散的相互作用(即范德华相互作用(Van der Waals interaction))和更强的特异性相互作用(其包括氢键)组成。负责形成氢键的亲水性官能团是羟基(-OH)和羧基(--COOH)。当将这些材料并入药物制剂中时，可以增强粘膜细胞的药物吸收和/或药物可以在所述部位释放延长的时间段。仅为了说明，生物粘附剂可以是亲水性聚合物、水凝胶、共聚物/共聚体复合物或硫醇化聚合物。
·亲水性聚合物：这些是水溶性聚合物，当其与水接触时溶胀并最终经历完全溶解。涂有这些聚合物的系统在干燥状态下显示出对粘膜的高生物粘附性，但是当其开始溶解时生物粘附性变差。因此，其的生物粘附性是短暂的。实例是聚(丙烯酸)。
·水凝胶：这些是通过化学键或物理键交联的亲水性聚合物的三维聚合物网络。这些聚合物在与水接触时溶胀。溶胀程度取决于交联程度。实例是聚卡波非(polycarbophil)、聚羧乙烯和聚氧化乙烯(polyox)。
·共聚物/互聚物复合物：当反应以逐步方式进行时，形成嵌段共聚物，从而产生一种单体的长序列或嵌段与另一种单体的长序列交替的结构。还存在接枝共聚物，其中一种类型(例如，聚苯乙烯)的整个链从另一种类型(例如，聚丁二烯)的链的侧面生长出来，从而产生较不易碎且更耐冲击的产品。氢键是共聚体相互作用的主要驱动力。
·硫醇化聚合物(Thiomers)：这些是在聚合物主链上展现游离硫醇基的亲水性大分子。基于硫醇/二硫化物交换反应和/或简单的氧化过程，在此类聚合物和构建粘液凝胶层的粘液糖蛋白的富含半胱氨酸的亚结构域之间形成二硫键。迄今为止，已经产生了阳离子硫柳汞、壳聚糖-半胱氨酸、壳聚糖-硫代丁基脒以及壳聚糖-巯基乙酸，和阴离子硫柳汞、聚(丙烯酸)-半胱氨酸、聚(丙烯酸)-半胱胺、羧甲基纤维素-半胱氨酸和藻酸盐-半胱氨酸。由于硫醇基团基于粘膜粘附基聚合物的固定，其的粘膜粘附特性提高了2倍至140倍。
在某些实施方案中，生物粘附聚合物可以选自聚(丙烯酸)、黄蓍胶、聚(甲基乙烯基醚马来酸酐)、聚(环氧乙烷)、甲基纤维素、藻酸钠、羟丙基甲基纤维素、刺梧桐树胶(karaya gum)、甲基乙基纤维素(和纤维素衍生物，诸如Metolose)、可溶性淀粉、明胶、果胶、聚(乙烯基吡咯烷酮)、聚(乙二醇)、聚(乙烯醇)、聚(羟乙基甲基丙烯酸酯)、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠或壳聚糖。
其他合适的生物粘附性聚合物描述于授予Mathiowitz等人的美国专利第6,235,313号中，其教导内容通过引用并入本文，并且包括多羟基酸，诸如聚(乳酸)、聚苯乙烯、聚透明质酸、酪蛋白、明胶、明胶蛋白、聚酐、聚丙烯酸、藻酸盐、壳聚糖；聚丙烯酸酯，诸如聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)、聚(甲基丙烯酸异丁酯)、聚(甲基丙烯酸己酯)、聚(甲基丙烯酸异癸酯)、聚(甲基丙烯酸月桂酯)、聚(甲基丙烯酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸异丙酯)、聚(丙烯酸异丁酯)和聚(丙烯酸十八烷酯)；聚丙烯酰胺；聚(富马酸-共聚-癸二酸)、聚(双羧基苯氧基丙烷-共聚-癸二酸酐)、聚原酸酯，以及其共聚物、共混物和混合物。
在某些实施方案中，生物粘附剂是藻酸盐。藻酸及其盐与碳酸氢钠和碳酸氢钾的结合显示，在进入更酸性的环境后，其形成对胃粘膜发挥保护活性的粘性悬浮液(或凝胶)。这些特性容易适用于局部递送至食管，特别是下食管。关于其活性的科学和专利文献是广泛的。因此，例如，为了递送至食管：Mandel K.G.；Daggy B.P.；Brodie D.A；Jacoby，H.L.，2000.Review article：Alginate-raft formulations in the treatment of heartburnand acid reflux.Aliment.PharmacoL.Ther.14669-690，其通过引用整体并入本文；和Bioadhesive esophageal bandages：protection against acid and pepsin injury.ManTang，Peter Dettmar，Hannah Batchelor-International Journal of Pharmaceutics292(2005)-169-177，其通过引用整体并入本文。
在某些实施方案中，生物粘附剂是生物粘附水凝胶。生物粘附水凝胶是本领域熟知的，并且用于递送本公开的抗PESC剂的合适的水凝胶在关于其活性的广泛的科学和专利文献中进行了描述。示例性水凝胶制剂描述于Collaud等人“Clinical evaluation ofbioadhesive hydrogels for topical delivery of hexylaminolevulinate toBarrett′sesophagus”J Control Release.2007年11月20日；123(3)：203-10中。
a.生物粘附微粒制剂
在某些实施方案中，将抗PESC剂(任选地与其他活性剂一起)配制成粘性聚合物微球，所述聚合物微球是基于作为化学组成和物理特征(诸如表面积)的函数而形成的物理和化学键来选择的，如下文所详述。这些微球的特征在于在食管组织上对粘膜的粘附力大于11mN/cm2。这些微球的大小可以从纳米颗粒到直径一毫米不等。粘附力是聚合物组成、生物基材、颗粒形态、颗粒几何形状(例如，直径)和表面改性的函数。
可用于形成生物粘附微球的合适的聚合物包括可溶的和不可溶的、可生物降解的和不可生物降解的聚合物。这些可以是天然或合成的水凝胶或热塑性塑料、均聚物、共聚物或共混物。优选的聚合物是具有受控合成和降解特征的合成聚合物。最优选的聚合物是富马酸和癸二酸的共聚物，当施用于胃肠时，其具有异常良好的生物粘附特性。
过去，两类聚合物显示出有用的生物粘附特性：亲水性聚合物和水凝胶。在一大类亲水性聚合物中，含有羧基的那些(例如，聚[丙烯酸])展现出最佳的生物粘附特性。可以推断，具有最高羧基浓度的聚合物应该是用于软组织上生物粘附的选择材料。在其他研究中，最有希望的聚合物是藻酸钠、羧甲基纤维素、羟甲基纤维素和甲基纤维素。这些材料中的一些是水溶性的，而另一些是水凝胶。
快速生物可侵蚀的聚合物(诸如聚[丙交酯-共聚-乙交酯]、聚酐和聚原酸酯，当其的光滑表面侵蚀时其羧基暴露在外表面上)是生物粘附药物递送系统的优异候选物。此外，含有不稳定键的聚合物(诸如聚酐和聚酯)由于其的水解反应性而众所周知。其的水解降解速率通常可以通过聚合物主链的简单变化来改变。
代表性的天然聚合物包括蛋白质，诸如玉米醇溶蛋白(zein)、改性玉米醇溶蛋白、酪蛋白(casein)、明胶、谷蛋白(gluten)、血清白蛋白或胶原；和多糖，诸如纤维素、葡聚糖、聚透明质酸、丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的聚合物以和藻酸。这些不是优选的，因为最终产品的特征以及施用后的降解具有较高水平的可变性。合成改性的天然聚合物包括烷基纤维素、羟烷基纤维素、纤维素醚、纤维素酯和硝化纤维素。
代表性的合成聚合物包括聚膦嗪(polyphosphazine)、聚(乙烯醇)、聚酰胺、聚碳酸酯、聚亚烷基、聚丙烯酰胺、聚亚烷基二醇、聚环氧烷、聚对苯二甲酸亚烷基酯、聚乙烯醚、聚乙烯酯、聚卤乙烯、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙交酯、聚硅氧烷、聚氨酯及其共聚物。所关注的其他聚合物包括但不限于甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丁基甲基纤维素、乙酸纤维素、丙酸纤维素、乙酸丁酸纤维素、邻苯二甲酸乙酸纤维素、羧甲基纤维素、三乙酸纤维素、硫酸纤维素钠盐、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)、聚(甲基丙烯酸异丁酯)、聚(甲基丙烯酸己酯)、聚(甲基丙烯酸异癸酯)、聚(甲基丙烯酸月桂酯)、聚(甲基丙烯酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸异丙酯)、聚(丙烯酸异丁酯)、聚(丙烯酸十八烷基酯)聚乙烯、聚丙烯、聚(乙二醇)、聚(环氧乙烷)、聚(对苯二甲酸乙二醇酯)、聚(乙酸乙烯酯)、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚乙烯基吡咯烷酮和聚乙烯基苯酚。代表性的生物可侵蚀聚合物包括聚丙交酯、聚乙交酯及其共聚物，聚(对苯二甲酸乙二醇酯)、聚(丁酸)、聚(戊酸)、聚(丙交酯-共聚-己内酯)、聚[丙交酯-共聚-乙交酯]、聚酐、聚原酸酯、其共混物和共聚物。
这些聚合物可以从诸如Sigma Chemical Co.，St.Louis，Mo.、Polysciences，Warrenton，Pa.、Aldrich，Milwaukee，Wis.，Fluka，Ronkonkoma，N.Y.和BioRad，Richmond，Calif.的来源获得，或者使用标准技术由从这些供应商获得的单体合成。
在一些情况下，在制造微球之前或之后对聚合物材料进行改性以改善生物粘附性。例如，可通过增加生物降解期间或聚合物表面上可取得的羧基数量来对聚合物进行改性。还可以通过将氨基与聚合物结合来对聚合物进行改性。还可以使用多种不同的偶联化学中的任一种来对聚合物进行改性，所述偶联化学将具有生物粘附特性的配位体分子共价连接到聚合物微球的表面暴露的分子。
一种有用的方案涉及用试剂羰基二咪唑(CDI)在非质子溶剂(诸如DMSO、丙酮或THF)中“活化”聚合物链上的羟基。CDI与羟基形成氨基甲酸咪唑酯复合物，所述羟基可通过结合诸如蛋白质的配位体的游离氨基而被置换。所述反应是N-亲核取代并且产生配位体与聚合物的稳定的N-烷基氨基甲酸酯键。配位体与“活化的”聚合物基质的“偶联”在9-10的pH范围内最大，并且通常需要至少24小时。所得配位体-聚合物复合物是稳定的，并且长时间抗水解。
另一种偶联方法涉及使用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDAC)或“水溶性CDI”与N-羟基磺基琥珀酰亚胺(磺基NHS)结合，以在7.0的生理pH下的完全含水环境中将聚合物的暴露羧基与配位体的游离氨基偶联。简言之，EDAC和磺基-NHS与聚合物的羧酸基团形成活化酯，其与配位体的胺末端反应形成肽键。所得肽键抗水解。在反应中使用磺基-NHS将EDAC偶联的效率提高十倍，并且提供了确保配位体-聚合物复合物的生存力的格外温和的条件。
通过使用这些方案中的任一种，可以在将不溶解聚合物基质的合适溶剂体系中“活化”几乎所有含有羟基或羧基的聚合物。
将具有游离羟基和羧基的配位体连接至聚合物的有用的偶联程序涉及使用交联剂二乙烯基砜。这个方法可用于将糖或其他具有生物粘附特性的羟基化合物连接至羟基基质。简言之，活化涉及二乙烯基砜与聚合物的羟基的反应，从而形成聚合物的乙烯基磺酰基乙基醚。乙烯基将与醇、酚和甚至胺偶联。活化和偶联在pH 11下进行。所述连接在1-8的pH范围内是稳定的并且适于通过肠运输。
本领域技术人员已知的用于偶联配位体和具有双键的聚合物的任何合适的偶联方法(包括使用UV交联)可以用于将生物粘附配位体连接至本文所述的聚合物微球。可以通过连接凝集素而改性的任何聚合物可以用作用于药物递送或成像目的的生物粘附聚合物。
可连接至微球共价以使其靶向对粘蛋白和粘膜细胞层具有特异性的凝集素可以用作生物粘附剂。有用的凝集素配位体包括自以下分离的凝集素：相思子(Abrusprecatroius)、双孢子蘑燕(Agaricus bisporus)、欧洲鳗鲡(Anguilla anguilla)、花生(Arachis hypogaea)、西非单叶豆(Pandeiraea simplicifolia)、羊蹄甲(Bauhiniapurpurea)、锦鸡儿(Caragan arobrescens)、鹰嘴豆(Cicer arietinum)、刺松藻(Codiurnfragile)、曼陀罗(Datura stramonium)、二花褊豆(Dolichos biflorus)、龙牙花(Erythrina corallodendron)、鸡冠刺桐(Erythrina cristagalli)、欧洲卫矛(Euonymuseuropaeus)、大豆(Glycine max)、陆地大蜗牛(Helix aspersa)、盖罩大蜗牛(Helixpomatia)、香豌豆(Lathyrus odoratus)、兵豆(Lens culinaris)、美洲鲎(Limuluspolyphemus)、野生番茄(Lysopersicon esculentum)、桑橙(Maclura pomifera)、苦瓜(Momordica charantia)、鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum)、莫桑比克眼镜蛇(Naja mocambique)以及外源凝集素伴刀豆球蛋白A(Concanavalin A)、琥珀酰伴刀豆球蛋白(Succinyl-Concanavalin A)、普通小麦(Triticum vulgaris)、欧洲荆豆I、II和III(Ulex europaeus I，II and III)、黑接骨木(Sambucus nigra)、山槐(Maackiaamurensis)、黄鲎(Limax fluvus)、美洲海螯虾(Homarus americanus)、太平洋黄道蟹(Cancer antennarius)和翅荚百脉根(Lotus tetragonolobus)。
任何带正电荷的配位体(诸如聚乙烯亚胺或聚赖氨酸)与任何微球的连接可改善生物粘附性，这是由于涂布珠粒的阳离子基团对粘液的净负电荷的静电吸引。粘蛋白层的粘多糖和粘蛋白(特别是唾液酸残基)负责负电荷涂层。对粘蛋白具有高结合亲和力的任何配位体也可以用合适的化学物质(诸如CDI)与大多数微球共价连接，并且预期影响微球与肠的结合。例如，当与微球共价偶联时，针对粘蛋白或完整粘蛋白组分产生的多克隆抗体将提供增加的生物粘附性。类似地，当使用合适的化学方法与微球偶联时，针对暴露在肠道腔表面上的特异性细胞表面受体的抗体将增加珠粒的停留时间。配位体亲和力不必仅基于静电荷，而是其他有用的物理参数，诸如在粘蛋白中的溶解度或对碳水化合物基团的特异性亲和力。
任何纯的或部分纯化形式的粘蛋白天然组分与微球的共价连接将降低珠粒-肠界面的表面张力并增加珠粒在粘蛋白层中的溶解度。适用配位体的列表将包括但不限于以下：唾液酸、神经氨酸、正乙酰基-神经氨酸、正乙醇酰神经氨酸、4-乙酰基-正乙酰基神经氨酸、二乙酰基-正乙酰基神经氨酸、葡糖醛酸、艾杜糖醛酸、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、岩藻糖，通过化学处理天然存在的粘蛋白制备的部分纯化的级分中的任一种，例如粘蛋白、粘多糖和粘多糖-蛋白质复合物，以及对粘膜表面上的蛋白或糖结构具有免疫反应性的抗体。
含有额外的侧羧酸侧基的聚氨基酸(例如，聚天冬氨酸和聚谷氨酸)的连接也应所述提供增加生物粘附性的有用手段。使用分子量在15,000至50,000kDa范围内的聚氨基酸将产生连接至微球表面的120个至425个氨基酸残基的链。聚氨基链将通过粘蛋白链中的链缠结以及通过增加羧基电荷来增加生物粘附性。
如本文所用，术语“微球”包括微粒和微胶囊(具有与外壁不同材料的芯)，其直径在纳米范围内，最大为5mm。微球可完全由生物粘附聚合物组成或仅具有生物粘附聚合物的外涂层。
如以下实施例中所表征，可以使用不同的方法由不同的聚合物制造微球。使用三种方法制造聚乳酸空白微球：溶剂蒸发，如E.Mathiowitz，等人，J.Scanning Microscopy，4，329(1990)；L.R.Beck，等人，Fertil.Steril.，31，545(1979)；和S.Benita，等人，J.Pharm.Sci.，73，1721(1984)所描述；热熔微囊包封，如E.Mathiowitz，等人，ReactivePolymers，6，275(1987)所描述；和喷雾干燥。由双羧基苯氧基丙烷和癸二酸以20：80P(CPP-SA)(20：80)的摩尔比制成的聚酐(Mw 20,000)通过热熔微囊包封来制备。通过热熔微囊包封来制备聚(富马酸-共聚-癸二酸)(20：80)(Mw 15,000)空白微球。通过溶剂蒸发来制备聚苯乙烯微球。
在某些实施方案中，组合物包括生物粘附基质，其中分散有含有抗PESC剂的颗粒(诸如纳米颗粒)。在这些实施方案中，生物粘附基质促进食管粘膜与纳米颗粒之间的接触。
在某些实施方案中，含药颗粒是基质，诸如生物可侵蚀生物粘附基质。合适的生物可侵蚀生物粘附聚合物包括生物可侵蚀水凝胶，诸如Sawhney，等人，Macromolecules，1993，26：581-587中描述的那些，其教导内容通过引用并入本文。代表性的生物可侵蚀的生物粘附聚合物包括但不限于合成聚合物，诸如聚羟基酸，诸如乳酸和乙醇酸的聚合物、聚酐、聚(原)酯、聚酯、聚氨酯、聚(丁酸)、聚(戊酸)、聚(己内酯)、聚(羟基丁酸酯)、聚(丙交酯-共聚-乙交酯)、聚(丙交酯-共聚-己内酯)、聚(乙烯-共聚-马来酸酐)、聚(乙烯-马来酸酐-共聚-L-多巴胺)、聚(乙烯-马来酸酐-共聚-苯丙氨酸)、聚(乙烯-马来酸酐-共聚-酪氨酸)、聚(丁二烯-共聚-马来酸酐)、聚(丁二烯-马来酸酐-共聚-L-多巴胺)(pBMAD)、聚(丁二烯-马来酸酐-共聚-苯丙氨酸)、聚(丁二烯-马来酸酐-共聚-酪氨酸)、聚(富马酸-共聚-癸二酸)酸酐(P(FA∶SA))、聚(双羧基苯氧基丙烷-共聚-癸二酸酐)(20∶80)(聚(CCP∶SA))，以及包含这些聚合物的共混物；和包含这些聚合物的单体的共聚物，和天然聚合物，诸如藻酸盐和其他多糖、胶原、其化学衍生物(化学基团的取代、加成，例如烷基、亚烷基、羟基化、氧化，和本领域技术人员常规进行的其他改性)、白蛋白和其他亲水蛋白、玉米醇溶蛋白和其他醇溶谷蛋白和疏水蛋白、其共聚物、共混物和混合物。通常，这些材料通过酶水解或体内暴露于水，通过表面或体侵蚀而降解。
平均粒度为10nm至10微米的颗粒可用于本文所述的组合物中。在某些实施方案中，颗粒是纳米颗粒，具有约10nm至1微米，优选约10nm至约0.1微米的尺寸范围。在特别优选的实施方案中，颗粒具有约500nm至约600nm的尺寸范围。颗粒可具有任何形状，但通常为球形。
本文所述的组合物包含单分散的多个纳米颗粒。优选地，用于形成纳米颗粒的方法产生纳米颗粒的单分散分布；然而，可以使用产生多分散纳米颗粒分布的方法。如果所述方法不产生具有单分散尺寸分布的颗粒，那么在颗粒形成后分离颗粒以产生具有所需尺寸范围和分布的多个颗粒。
可用于本文所述组合物中的纳米颗粒可以使用本领域已知的任何合适的方法来制备。常用的微囊包封技术包括但不限于喷雾干燥、界面聚合、热熔包封、相分离包封(自发乳液微囊包封、溶剂蒸发微囊包封和溶剂去除微囊包封)、凝聚、低温微球形成和相转化纳米包封(phase inversion nanoencapsulation；PIN)。下文呈现这些方法的简要概述。
b.喷雾干燥
使用喷雾干燥技术形成微球/纳米球的方法描述于授予Mathiowitz等人的美国专利第6,620,617号中。在这个方法中，将聚合物溶于有机溶剂，诸如二氯甲烷或水中。将已知量的待并入颗粒中的一种或多种活性剂的悬浮(在不溶性活性剂的情况下)或共溶解(在可溶性活性剂的情况下)于聚合物溶液中。将溶液或分散液泵送通过由压缩气流驱动的微粉化喷嘴，并且将所得气溶胶悬浮于加热的空气旋风中，使溶剂从微滴中蒸发，从而形成颗粒。使用这个方法可以获得范围介于0.1-10微米的微球/纳米球。
c.界面聚合
界面聚合也可以用于包封一种或多种活性剂。使用这个方法，将单体和活性剂溶解于溶剂中。将第二单体溶解于与第一单体不混溶的第二溶剂(通常是含水的)中。通过搅拌将第一溶液悬浮于第二溶液中来形成乳液。一旦乳液稳定，将引发剂加入至水相中，在乳液的每个液滴的界面处引起界面聚合。
d.热熔微囊包封
如Mathiowitz等人，Reactive Polymers，6：275(1987)所描述，微球可以使用热熔微囊包封方法由聚合物，诸如聚酯和聚酐来形成。在这个方法中，优选使用分子量介于3-75,000道尔顿的聚合物。在这个方法中，首先将聚合物熔融，然后与已筛分至小于50微米的待并入的一种或多种活性剂的固体颗粒混合。将混合物悬浮于不混溶的溶剂(如硅油)中，并且在连续搅拌下加热至5℃。C.高于聚合物的熔点。一旦乳液稳定，将其冷却直到聚合物颗粒固化。通过倾析用石油醚洗涤所得微球，以得到自由流动的粉末。
e.相分离微囊包封
在相分离微囊包封技术中，任选地在一种或多种待包封的活性剂的存在下搅拌聚合物溶液。在通过搅拌继续均匀悬浮材料时，将聚合物的非溶剂缓慢地添加至溶液中以降低聚合物的溶解度。取决于聚合物在溶剂和非溶剂中的溶解度，聚合物沉淀或相分离成富聚合物相和贫聚合物相。在适当的条件下，富聚合物相中的聚合物将迁移至与连续相的界面，从而用聚合物外壳将活性剂包封在液滴中。
f.自发乳液微囊包封
自发乳化涉及通过改变温度、蒸发溶剂或添加化学交联剂来固化以上形成的乳化液体聚合物液滴。包封剂的物理和化学特性以及任选地并入新生颗粒中的一种或多种活性剂的特性决定了合适的包封方法。诸如疏水性、分子量、化学稳定性和热稳定性的因素影响包封。
g.溶剂蒸发微囊包封
使用溶剂蒸发技术形成微球的方法描述于E.Mathiowitz等人，ScanningMicroscopy，4：329(1990)；L.R.Beck等人，Fertil.Steril.，31：545(1979)；L.R.Beck等人Am J Obstet Gynecol 135(3)(1979)；S.Benita等人，Pharm.Sci.，73：1721(1984)；和授予Morishita等人的美国专利第3,960,757号中。将聚合物溶解于挥发性有机溶剂，诸如二氯甲烷中。任选地将待并入的一种或多种活性剂添加至溶液中，并且将混合物悬浮于含有表面活性剂，诸如聚(乙烯醇)的水溶液中。搅拌所得乳液直到大部分有机溶剂蒸发，从而留下固体微球/纳米球。这个方法可以用于相对稳定的聚合物，诸如聚酯和聚苯乙烯。然而，不稳定的聚合物(诸如聚酐)可能在制造期间由于水的存在而降解。对于这些聚合物，在完全无水的有机溶剂中进行的以下方法中的一些是更有用的。
h.溶剂去除微囊包封
溶剂去除微囊包封技术主要是为聚酐设计的，并且描述于例如授予布朗大学研究基金会(Brown University Research Foundation)的WO 93/21906中。在这个方法中，将待并入的物质分散或溶解于所选聚合物在挥发性有机溶剂(诸如二氯甲烷)中的溶液中。通过搅拌将这种混合物悬浮于有机油(诸如硅油)中，以形成乳液。通过这个程序可以获得范围介于1-300微米的微球。可并入微球中的物质包括药物、杀虫剂、营养物、成像剂和金属化合物。
i.凝聚
使用凝聚技术的各种物质的包封程序是本领域中，例如GB-B-929 406；GB-B-92940 1和美国专利第3,266,987号、第4,794,000号和第4,460,563号中已知的。凝聚涉及将大分子溶液分离成两种不混溶的液相。一个相是致密凝聚层相，其含有高浓度的聚合物包封剂(和任选的一种或多种活性剂)，而第二相含有低浓度的聚合物。在致密凝聚层相内，聚合物包封剂形成纳米级或微米级液滴。可通过温度变化、添加非溶剂或添加微盐(简单凝聚)，或通过添加另一种聚合物从而形成互聚物复合物(复合凝聚)来诱导凝聚。
j.微球体的低温铸造
在授予Gombotz等人的美国专利第5,019,400号中描述了用于控制释放微球的超低温浇铸的方法。在这个方法中，将聚合物溶解于任选地具有一种或多种溶解或分散的活性剂的溶剂中。然后在低于聚合物-物质溶液的凝固点的温度下将混合物雾化到含有液体非溶剂的容器中，所述聚合物-物质溶液使聚合物液滴凝固。当加热液滴和聚合物的非溶剂时，液滴中的溶剂融化并被萃取到非溶剂中，从而引起微球硬化。
k.相转化纳米包封(PIN)
纳米颗粒也可以使用相转化纳米包封(PIN)方法形成，其中将聚合物溶解于“良”溶剂中，将待并入的物质(诸如药物)的细颗粒混合或溶解于聚合物溶液中，并且将混合物倒入聚合物的强非溶剂中，以在有利条件下自发产生聚合物微球，其中聚合物被颗粒涂布或颗粒分散于聚合物中。参见例如，授予Mathiowitz等人的美国专利第6,143,211号。所述方法可以用于制备宽尺寸范围的纳米颗粒和微米颗粒的单分散群体，包括例如约100纳米至约10微米。
有利地，不需要在沉淀之前形成乳液。所述方法可以用于由热塑性聚合物形成微球。
1.连续相转化纳米包封(sPIN)
多壁纳米颗粒也可以通过本文称为“连续相转化纳米包封”(sPIN)的方法形成。这个方法在下面的章节IV中详细描述。sPIN特别适于形成纳米颗粒的单分散群体，从而避免了需要额外的分离步骤来获得纳米颗粒的单分散群体。
m.溶解片剂
在某些实施方案中，在溶解片剂中提供抗PESC剂。例如，片剂可以含有治疗有效量的抗PESC剂以及聚乙烯吡咯烷酮(PVP：聚维酮)，其中所述片剂被配制成快速溶解于特定体积的液体中，以便产生适于将抗PESC递送至食管腔表面的局部食管疗法。
例如，片剂溶解于其中的液体的体积可以是5mL至50mL、5mL至25mL或甚至5mL至15mL。优选地，液体是水。
溶解片剂还可以进一步包括使溶解片剂可口的赋形剂，特别是至少一种增加局部食管疗法的粘度的赋形剂。示例性增粘赋形剂是甘露醇。
n.局部制剂
在某些实施方案中，抗PESC剂以局部、非全身、口服、缓释、固体、软锭剂药物组合物形式提供，其包含：(a)约1质量％至约5质量％的一种或多种释放改性剂，所述释放改性剂包含分子量为约900,000至约8,000,000的聚环氧乙烷聚合物；(b)约10质量％至约60质量％的一种或多种成膜聚合物，所述成膜聚合物包含明胶；(c)约5质量％至约20质量％的一种或多种增塑剂，所述增塑剂包括甘油、山梨醇或其的组合；和(d)小于1质量％的一种或多种抗PESC剂。示例性增塑剂包括甘油、山梨醇、甘露醇、麦芽糖醇、木糖醇或其组合。锭剂还可包括一种或多种甜味剂，诸如麦芽糖醇、木糖醇、甘露醇、三氯蔗糖、阿斯巴甜(aspartame)、甜叶菊(stevia)或其组合。锭剂还可包括一种或多种pH调节剂，所述pH调节剂包含一种或多种有机酸。
VII.实施例
巴雷特食管(BE)是一种不可逆的疾病，被认为是食管腺癌(EAC)的癌前病变。BE来源于预先存在于胃食管结合部的独特细胞群并具有其自身的干细胞。使用新的基态干细胞克隆技术，我们从BE和食管上皮得到患者匹配的干细胞谱系。开发了基于图像的高通量化学筛选，并且用于揭示可特异性根除BE干细胞，同时保护和促进食管干细胞的化学物质的独特组合。在共培养3D模型和小鼠异种移植模型中通过体内共移植BE和食管干细胞证实了这些作用。有趣的是，所述药物组合也能够根除患者匹配的发育异常和癌症中的干细胞。首次将来自患者匹配的BE、发育异常、癌症和正常组织的基态干细胞克隆并在体外扩增，并且用于鉴定不仅用于BE的优先疗法而且用于靶向晚期癌症的疗法的靶向疗法。预期这个平台可以用于提供开发用于化学预防和治疗各种类型的致死性癌症的新策略的前景。
克隆巴雷特食管干细胞和化学筛选
从巴雷特氏病患者的远端食管获得的内窥镜粘膜活检可以包括食管鳞状上皮和巴雷特食管(图1A；Yamamoto等人)。在已知支持未成熟上皮干细胞的生长培养基中，将这些1mm活检的单细胞悬浮液涂覆到辐照的3T3细胞的菌苔上一周后，产生集落(Wang等人，2015；Yamamoto等人，2016；Duleba等人，2018)(图1A；StemECHO，MCT)。如先前所报道(Yamamoto等人，2016)，从巴雷特产生的集落产生典型食管鳞状基底细胞的Krt5阳性克隆和表达柱状上皮标记Krt7的克隆的混合物(图1A)。为了分离来自巴雷特活检的这两个克隆群体，取样多个单集落并扩增为独立谱系(Yamamoto等人，2016)(图1A)。用相同抗体再探测这些谱系显示原始巴雷特活检含有两种不同的克隆发生细胞，其通过Krt5或Krt7的定向表达来标记(图1A)。
为了探索揭示可以选择性根除巴雷特干细胞的试剂的可能性，建立了对一组食管鳞状干细胞和巴雷特干细胞的高通量化学筛选。在总共2276种不重叠的化学物质中，使用了三个文库进行筛选，包括定制临床(Custom Clinical)、普勒斯威克(Prestwick)和塞莱克(Selleck)(图1B)。虽然约70％的化学物质对任何一种细胞系都没有影响，约10％的化学物质根除两种细胞类型，但另外20％的化学物质对这两种细胞类型显示出不同的效力(图1C、1F和1G)。以剂量-响应方式验证所选的命中物，从而表明筛选方法的可靠性(图1F和1G)。在这些20％的化学物质中，我们没有观察到一种可以起双重作用的单一试剂，包括根除巴雷特干细胞和保护食管干细胞。有趣的是，鉴定出普纳替尼显著增加食管干细胞的增殖，同时稍微降低巴雷特干细胞的存活率(图1D和E)。
用于双重作用方案的合成化学筛选
接下来假设我们文库中的一种化学物质可以协同方式与普纳替尼起作用以特异性根除巴雷特干细胞，同时保护和促进食管干细胞。在1μM普纳替尼的背景中筛选相同的文库。有趣的是，在普纳替尼的存在下，八种化合物显示对巴雷特干细胞的致死性，而不影响食管干细胞(图2A)。其中，阿德福韦酯是FDA批准的药物，CEP-18770和奎扎替尼正在临床试验中。JIB04、WZ8040、斯他克、南昌霉素和AZD1080未进行任何临床试验(图2B)。这些化学物质都没有被报道靶向BE，并且有趣的是，其靶向各种不同的途径并具有不同的化学结构。以剂量依赖性方式验证了其对巴雷特干细胞和食管干细胞的不同作用(图2C；图3F)。此外，来自具有突变图谱的患者的九个巴雷特干细胞系(Yamamoto等人，2016)和食管干细胞的共培养证明在普纳替尼的存在下，CEP-18770、JIB04对我们测试的所有巴雷特干细胞显示均匀的致死率，同时促进食管鳞状干细胞(图2D)。这个结果表明，这两种化学物质可以与普纳替尼协同作用以特异性地靶向巴雷特干细胞，而不依赖于这些巴雷特干细胞的基因组学和阶段。由于在治疗期间3T3-J2饲养细胞的高致死率，因此不追求南昌霉素和普纳替尼的组合，这表明对体内其他类型体细胞的潜在毒性。
在3D培养和小鼠异种移植模型中验证双重作用方案
生成3D培养模型以模拟体外巴雷特食管。在跨孔插入物中共培养食管鳞状干细胞和巴雷特干细胞。在建立气-液界面后，观察到BE岛位于分化良好的鳞状上皮中，这很好地再现了患者中人类BE的组织学。考虑到这种人工模型与人类病理学的相似性，在这个系统中测试命中物以进一步对其进行验证。在ALI系统中将八个巴雷特干细胞系与食管干细胞共培养，并且在产生ALI后将CEP-18770或JIB04与普纳替尼一起添加至培养基中。食管鳞状细胞干细胞用红色荧光蛋白(RFP)标记，而巴雷特干细胞用绿色荧光蛋白(GFP)标记。在没有处理的情况下，观察到GFP和RFP的混合物标记了培养物中的细胞。然而，在普纳替尼的存在下处理CEP-18770或JIB04后，观察到GFP标记的巴雷特干细胞的消失。ALI结构的横截面显示完整的食管鳞状上皮，无任何巴雷特上皮存在(图2A和B)。
进一步检查在异种移植模型中这些化学物质对BE的作用。将食管鳞状细胞干细胞和GFP标记的巴雷特干细胞混合并共注射至免疫缺陷小鼠中。在异种移植五天后，将普纳替尼与CEP-18770组合或普纳替尼与JIB04组合以替代方式腹膜内注射至小鼠中(图3C)。治疗后两周，收集异种移植物并通过组织学分析和克隆发生分析进行检查。发现治疗动物中巴雷特结构的完全丧失，这与体外克隆发生的巴雷特干细胞的缺乏一致(图3D和3E；图4E；图5F和5G)。
可以类似地靶向巴雷特食管、发育异常和癌症的干细胞
已知BE是EAC的发育异常和癌性病变的前体。患者匹配的巴雷特、发育异常和EAC干细胞的转录组分析揭示了与源自食管鳞状上皮的干细胞相比显著重叠的基因和途径。此外，来自12名患者的巴雷特干细胞以及发育异常、癌症和食管鳞状干细胞的PCA分析证实发育异常和癌症的干细胞与巴雷特干细胞共享极相似的基因表达(图4A和B)。这种数据表明，开发用于根除BE的策略也可用于靶向从传统化疗常规复发的发育异常和EAC。在共接种食管干细胞和巴雷特、发育异常或EAC干细胞的细胞培养物中测试了八种药物命中物与普纳替尼组合的作用。这些组合中的大多数可以消除所有三种实体而不影响两个独立患者的食管鳞状干细胞(图4C)。重要的是，JIB04和CEP-18770可以与普纳替尼以协同方式起作用，以在3D培养系统和小鼠异种移植模型中根除EAC的癌前、发育异常和癌性干细胞(图5)。鉴于这三种实体始终共存于EAC患者中，我们的根除所有实体的策略有助于彻底消除EAC患者复发的可能性。
结果讨论
尽管巴雷特氏病在癌症预防中具有影响力，并且旨在先发制人地根除其的消融方法取得了根本性进展，但其仍然是一个巨大且日益严重的问题，仅在美国就有大约300万例病例。通过消融治疗治疗的晚期BE病变以惊人的速度复发(参考文献)，表明这些患者对有效和靶向治疗选择的医疗需求未得到满足。从匹配的患者样品中克隆和扩增BE、发育异常、EAC和正常食管鳞状上皮的基态干细胞的能力为高通量化学筛选提供了非常有前景的平台，所述高通量化学筛选致力于开发在癌症发作前根除BE和更晚期病变的高选择性手段。这些干细胞克隆中的每一个可以通过在所谓的“气-液界面”培养物中极化而单独分化，以产生与原位正常、病变或癌性上皮明显相似的3-D上皮。将这些相同的干细胞克隆用于与正常上皮干细胞的高级共培养模型中，以研究所选药物组合改变远端食管中此类病变的竞争状态的潜在能力。此外，通过在NSG小鼠中皮下移植患者来源的BE、发育异常、EAC和食管鳞状细胞干细胞建立了用于体内测试药物组合的新小鼠模型。
化学筛选的第一个方向集中在单一药剂上，所述药剂显示出比患者匹配的食管干细胞更大的抗BE干细胞的作用，因为这是这项工作的关键目标。然而，在这些单一药剂“命中物”的详细剂量-响应研究中，最佳给药的标准差异在浓度上至多为10倍。这种对BE干细胞的致死效应与对正常食管的致死效应之间的10倍浓度差异令人失望，因为这表明治疗窗口相对较窄。
研究了选择性促进正常食管干细胞生长的小分子的潜力。BE的肠化生被认为在其近端扩散期间与周围食管粘膜竞争(Wang等人，2011)。因此，在任何治疗策略中，有可能从改善食管的竞争边缘的观点来利用这种竞争性相互作用。因此，假设发现促进食管干细胞生长的分子(诸如普纳替尼)可以与限制BE干细胞的分子组合使用。本文建立在普纳替尼的背景下使用小分子文库对抗BE干细胞的“合成致死”筛选(McCormick，2015；Thompson等人，2017；Aguirre和Hahn，2018)。有趣的是，这种合成致死筛选鉴定了一组不同的小分子，其在普纳替尼的情形下有效杀死BE干细胞，同时增加正常食管干细胞的生长。其中，JIB04和CEP-18770以与普纳替尼协同的方式最有效地根除广泛范围患者的BE干细胞。从潜在疗法的观点来看，最重要的是，在固定浓度的普纳替尼的背景中，这个组合的这些抗BE干细胞组分的剂量-响应曲线显示出接近1,000倍的显著差异。
通过体外共培养的产生，已经在模拟BE和食管干细胞之间的竞争性相互作用方面取得了显著进展。因此，可以产生散布有由巴雷特食管占主导的区域的食管上皮的“鳞状岛”(Sharma等人，1998)。这些稳态共培养物已经用于测试在小分子筛选中鉴定的合成致死药物组合的影响。值得注意的是，已证明这些药物组合在消除巴雷特食管和允许食管干细胞扩增以填充由于BE上皮丧失而空出的区域方面显著有效。还进行了类似的工作来模拟异种移植物中体内巴雷特氏病和食管上皮之间的竞争性相互作用。值得注意的是，这两种药物组合显示对发育异常和EAC干细胞的作用，具有与对巴雷特干细胞相似的选择性和剂量。与正常食管干细胞相比，消除BE、发育异常和EAC干细胞的这两种有效组合的剂量之间的大差异表明此类药物组合可能产生比我们观察到的仅针对巴雷特氏病的单一药剂更大的“治疗窗”。
因此，除了鉴定对BE有效的合成致死药物组合外，这些化合物还显示对靶向发育异常和EAC的祖细胞有效，所述祖细胞不是初始筛选的部分。这个发现提出了关于这些化合物是否靶向科雷亚序列(Correa sequence)“谱系”的一些特征而不是靶向DNA合成或快速分裂细胞的共同活性的传统化疗剂的问题。
总之，癌前病变和癌变病变是再生的，并且像正常再生上皮一样依赖于不成熟干细胞的离散群体用于这种再生生长，并且针对这些干细胞群的疗法可以是消除这些病变以获得治疗益处的高度特异性和有效的方法。因此，这个平台和类似方法可以应用于其他癌症类型中的药物发现工作。
方法
所选细胞系的高通量筛选和成像
将GFP标记的细胞系接种在具有辐照的3T3-J2成纤维细胞饲养层的多个384孔板(Griener Bio-One，USA)上(根据文库中化合物的数量而变化)。允许干细胞生长直到其在集落中分裂成4-5个细胞。然后将其转运至位于Texas A&M University的生物科学与技术研究所(Institute of Biosciences and Technology)(Houston，Texas)的高通量研究和筛选中心，用所选化学文库(1μM)进行处理。在每个板内分配阳性和阴性对照泳道。高效药物将用作阳性对照，而阴性对照仅使用DMSO，因为大多数药物溶解于DMSO中。处理后，使细胞在37℃、7.5％CO2孵育箱处生长6天。在对照泳道中的细胞处于良好汇合后，将制备细胞以用于成像。将每个多孔板用磷酸盐缓冲盐水(Gibco，USA)洗涤，并且用4％多聚甲醛在室温下固定25分钟。将多聚甲醛替换为磷酸盐缓冲盐水(PBS)，并且使用具有Lumencor SOLA光引擎的Inverted Eclipse Ti-Series(Nikon，Japan)，搭配高含量显微镜系统(Nikon，Japan)、Andor Technology Clara Interline CCD相机、NIS-Elements AdvancedResearch v.4.13软件(Nikon，Japan)和NIS-Elements HC软件(Nikon，Japan)进行成像。在用自动化孔板采集和多孔板作业运行简化的NIS-Elements平台上构建的高含量分析(HighContent Analysis；HCA)系统将用于相衬以及FITC通道的高通量成像。
高含量图像分析、药物选择和剂量-响应分析
NIS-Elements高含量分析(HCA)系统将用于多孔板作业运行的图像数据管理。在多孔板的每个孔中用绿色荧光蛋白(GFP)标记的细胞将用每个干细胞集落的特征成像。将使用自动图像分析基于荧光信号阈值测量与对照泳道相比细胞表型的变化。将从自动分析中导出如面积、集落数的特征。基于GFP信号面积和干细胞集落数，将处理的孔与未处理的孔进行比较。基于以存活率表示的面积(对照1的百分比)，将处理孔与未处理孔标准化，并在对照和致病细胞群之间进行比较。Z′-因子2，3将基于阳性和阴性对照之间的差异计算，并且将用作评估运行质量的标准。将仅使用Z’-因子>0.6的板。板副本之间变异系数大于20％的化合物将被忽略。将通过R包platetools v0.0.2(github.com/swarchal/platetools)计算B-评分1，以控制边缘和位置偏差，以帮助推断抑制剂的潜在命中物。只有B-评分的截止值＜-2的化合物将被视为潜在的抑制剂。药物的选择将基于患者匹配细胞系(截止值设定为20％)之间的存活率的最大差异、其的靶标、结构谱、与其相关的途径和与巴瑞特食管相关的可能关系进行。如果没有患者匹配的谱系，那么包含组中存活率的中值将用作所述谱系组的代表值。通过使用R包drc4 v3.0.1将三参数对数逻辑剂量响应模型与存活率数据拟合来计算某一化合物的存活率的剂量-响应曲线。存在用于获得稳健的标准误差以解决存在一些方差异质性的事实的R包lmtest5v0.9-36和夹层6v2.4-0。ED50值由R包drc中的模块ED来估计。
VIII.参考文献
1.Malo，N.，Hanley，J.A.，Cerquozzi，S.，Pelletier，J.&Nadon，R.Statisticalpractice in high-throughput screening data analysis.NatBiotechnol 24，167-75(2006).
2.Zhang，J.H.，Chung，T.D.&Oldenburg，K.R.A Simple Statistieal Parameterfor Use in Evaluation and Validation of High Throughput Screening Assays.JBiomol Screen4，67-73(1999).
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6.Zeileis，A.Econometric Computing with HC and HAC Covariance MatrixEstimators.Journal of Statistical Software 1，1-17(2004).
序列表
<110> 休斯顿大学系统(UNIVERSITY OF HOUSTON SYSTEM)
德克萨斯大学系统董事会(THE BOARD OF REGENTS OF THE UNIVERSITY OFTEXAS SYSTEM)
TRACT制药公司(TRACT PHARMACEUTICALS, INC.)
<120> 用于治疗上皮组织的慢性炎性损伤、化生、发育异常和癌症的方法和组合物
<130> UHOU.P0039WO
<150> US 62/839.152
<151> 2019-04-26
<150> US 62/924.978
<151> 2019-10-23
<160> 2
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 63
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成核酸
<400> 1
cagggaagtt tcgagaagtc ctatagtgaa gccacagatg tataggactc tcgaacttcc 60
ctt 63
<210> 2
<211> 63
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成核酸
<400> 2
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tgg 63

Claims (58)

1.一种用于治疗患有上皮组织的慢性炎性损伤、化生、发育异常或癌症中的一种或多种的患者的方法，所述方法包括向所述患者施用相对于所述上皮组织的正常干细胞选选择性地杀死所述上皮组织中的致病性上皮干细胞(PESC)或抑制所述PESC的增殖或分化的药剂。
2.一种降低有需要的受试者中致病性上皮干细胞(PESC)的增殖、存活、迁移或集落形成能力的方法，其包括使所述细胞与治疗有效量的相对于正常上皮干细胞选择性地杀死PESC或抑制所述PESC的增殖或分化的药剂接触。
3.一种用于治疗上皮组织的慢性炎性损伤、化生、发育异常或癌症中的一种或多种的药物制剂，所述制剂包含相对于所述上皮组织的正常干细胞选选择性地杀死所述上皮组织中的致病性上皮干细胞(PESC)或抑制所述PESC的增殖或分化的药剂。
4.一种用于治疗上皮组织的慢性炎性损伤、化生、发育异常或癌症中的一种或多种的药物洗脱装置，所述装置包括药物释放部件，所述药物释放部件包括相对于所述上皮组织的正常干细胞选选择性地杀死所述上皮组织中的致病性上皮干细胞(PESC)或抑制所述PESC的增殖或分化的药剂，所述装置在部署于患者体内时将所述药物释放部件定位在患病组织表面附近并以足以实现所述患病组织对所述药剂的治疗有效暴露的量释放所述药剂。
5.一种用于治疗患有食管炎、巴雷特食管、食管发育异常或食管癌中的一种或多种的患者的方法，所述方法包括向所述患者施用相对于正常食管干细胞选择性地杀死巴雷特食管干细胞(BESC)或抑制所述BESC的增殖或分化的药剂。
6.一种降低有需要的受试者中巴雷特食管干细胞(BESC)的增殖、存活、迁移或集落形成能力的方法，其包括使所述细胞与治疗有效量的相对于正常食管干细胞选择性地杀死BESC或抑制所述BESC的增殖或分化的药剂。
7.一种用于治疗食管炎、巴雷特食管、食管发育异常或食管癌中的一种或多种的药物制剂，所述制剂包含相对于正常食管干细胞选择性地杀死巴雷特食管干细胞(BESC)或抑制所述BESC的增殖或分化的药剂。
8.一种用于治疗食管炎、巴雷特食管、食管发育异常或食管癌中的一种或多种的药物洗脱装置，所述装置包括药物释放部件，所述药物释放部件包括相对于正常食管干细胞选择性地杀死巴雷特食管干细胞(BESC)或抑制所述BESC的增殖或分化的药剂，所述装置在部署于患者体内时将所述药物释放部件定位在食管腔表面附近并以足以实现所述腔表面对所述药剂的治疗有效暴露的量释放所述药剂。
9.如权利要求5-8中任一项所述的方法、制剂或装置，其用于治疗巴雷特食管。
10.如权利要求5-8中任一项所述的方法、制剂或装置，其用于治疗食管腺癌。
11.如权利要求5或6所述的方法，其中所述药剂在内窥镜消融治疗期间或之后施用，所述内窥镜消融治疗诸如食管组织的射频消融、光动力治疗或冷冻消融。
12.如权利要求5或6所述的方法，其中所述药剂通过食管组织的粘膜下注射施用。
13.如权利要求7所述的制剂，其中所述药剂被配制用于食管组织的粘膜下注射。
14.如权利要求1至3、5至7或9至13中任一项所述的方法或制剂，其中所述药剂被配制为生物粘附制剂的部分。
15.如前述权利要求中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂被配制为药物洗脱颗粒、药物洗脱基质或药物洗脱凝胶的部分。
16.如权利要求1、2、5或6中任一项所述的方法，其中所述药剂通过局部施加至所述上皮组织来施用。
17.如权利要求3所述的制剂，其中所述药剂被配制用于局部施加至上皮组织。
18.如权利要求16所述的方法或如权利要求17所述的制剂，其中所述药剂被配制为生物粘附制剂的部分。
19.如权利要求16所述的方法或如权利要求17所述的制剂，其中所述药剂被配制为药物洗脱颗粒、药物洗脱基质或药物洗脱凝胶的部分。
20.如权利要求1、2、5或6所述的方法，其中所述药剂与止痛剂、抗感染剂或两者共同施用。
21.如权利要求3或7所述的制剂，其中所述药剂与止痛剂、抗感染剂或两者共同配制。
22.如权利要求3、7、13、14、15、17、18或19所述的制剂，其中所述药剂被配制为用于口服递送至所述上皮组织，诸如食管的液体。
23.如权利要求3、7、13、14、15、17、18、19或22所述的制剂，其中所述药剂被配制为单次口服剂量。
24.如权利要求4或8所述的装置，其中所述药物洗脱装置是药物洗脱支架。
25.如权利要求4或8所述的装置，其中所述药物洗脱装置是具有包括所述药剂的表面涂层的球囊导管。
26.如前述权利要求中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂选择性抑制PESC的增殖或分化，或选择性地杀死PESC，其IC50是相同组织中正常上皮干细胞的IC50的1/5或更小，更优选是1/10、1/20、1/50、1/100、1/250、1/500或甚至1/1000。
27.如前述权利要求中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂抑制PESC的增殖或分化，或杀死PESC，其IC50为10-6M或更小，更优选为10-7M或更小、10-8M或更小或10-9M或更小。
28.如前述权利要求中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂是细胞可渗透的，诸如特征在于渗透系数是10-9或更小，更优选是10-8或更小或10-7或更小。
29.如权利要求1-28中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂是组蛋白脱甲基酶抑制剂。
30.如权利要求1-29中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂是JmjC抑制剂。
31.如权利要求30所述的方法、制剂或装置，其中所述JmjC抑制剂结合至并抑制催化性JmjC结构域。
32.如权利要求30所述的方法、制剂或装置，其中所述JmjC抑制剂是植物同源结构域(PHD)抑制剂或蛋白质-蛋白质相互作用抑制剂。
33.如权利要求30所述的方法、制剂或装置，其中所述JmjC抑制剂是泛JmjC脱甲基酶抑制剂。
34.如权利要求30所述的方法、制剂或装置，其中所述JmjC抑制剂是JIB04。
35.如权利要求1-28中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂是受体酪氨酸激酶抑制剂。
36.如权利要求35所述的方法、制剂或装置，其中所述受体酪氨酸激酶抑制剂是EGFR抑制剂、HER2抑制剂或双重EGFR/HER2抑制剂。
37.如权利要求1-28中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂是蛋白酶体抑制剂。
38.如权利要求1-28中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂是STAT抑制剂，优选是STAT3抑制剂。
39.如权利要求1-28中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂是FLT3抑制剂。
40.如权利要求1-28中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂是GSK3抑制剂。
41.如权利要求1-28中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂是HSP90抑制剂、HSP70抑制剂或双重HSP90/HSP70抑制剂。
42.如权利要求1-28中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂选自由以下组成的组：
Figure FDA0003416868410000051
Figure FDA0003416868410000061
43.如权利要求1-42中任一项所述的方法、制剂或装置，其还包括将所述药剂与选择性促进靶标中正常上皮干细胞的增殖的第二药剂组合，其EC50的效力是对靶组织中PESC效力的至少5倍，更优选地其EC50的效力是对PESC效力的10倍、50倍、100倍或甚至1000倍。
44.如权利要求1-43中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述第二药剂以10-6M或更低、更优选10-7M或更低、10-8M或更低或10-9M或更低的EC50促进正常食管干细胞的增殖。
45.如权利要求1-44中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述第二药剂是ABL激酶抑制剂、优选BCR-ABL激酶抑制剂的泛抑制剂。
46.如权利要求45所述的方法、制剂或装置，其中所述第二药剂是选自由以下组成的组的泛抑制剂：伊马替尼、尼洛替尼、达沙替尼、博舒替尼和普纳替尼或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物，并且优选是普纳替尼或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物。
47.如权利要求1-44中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述第二药剂是FLT激酶抑制剂，优选为FLT3激酶抑制剂。
48.如权利要求47所述的方法、制剂或装置，其中所述第二药剂是选自由以下组成的组的FLT3抑制剂：奎扎替尼(AC220)、克拉尼布(CP-868596)、米哚妥林(PKC-412)、来他替尼(CEP-701)、4SC-203、TTT-3002、索拉非尼(Bay-43-0006)、普纳替尼(AP-24534)、舒尼替尼(SU-11248)和/或坦度替尼(MLN-0518)或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物，并且优选是奎扎替尼或其一种或多种药学上可接受的盐、一种或多种溶剂化物和/或一种或多种水合物。
49.如权利要求1-48中任一项所述的方法、制剂或装置，其还包括将所述药剂与一种或多种镇咳药、抗组胺药、退热药、镇痛药、抗感染剂和/或化疗剂组合。
50.如权利要求43-48中任一项所述的方法，其中所述药剂和所述第二药剂作为单独的制剂施用于所述患者。
51.如权利要求43-48中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂和所述第二药剂共同配制在一起。
52.如权利要求49所述的方法、制剂或装置，其中所述药剂与所述一种或多种镇咳药、抗组胺药、退热药、镇痛药、抗感染剂和/或化疗剂共同配制在一起。
53.如前述权利要求中任一项所述的方法、制剂或装置，其中所述患者是人类患者。
54.一种生物粘附纳米颗粒，其具有聚合物表面，其粘附力等于在人粘膜表面上测量的10N/m2与100,000N/m2之间的粘附力，所述纳米颗粒还包含分散于其中或其上的抗PESC剂，其中所述纳米颗粒在粘附于粘膜组织时将所述抗PESC剂洗脱至粘膜凝胶层中。
55.一种粘膜下滞留制剂，其包含抗PESC剂和一种或多种药学上可接受的赋形剂，所述制剂是粘膜下可注射的并形成将有效量的所述抗PESC剂释放至组织注射部位的粘膜下贮库。
56.一种用于粘膜下注射的可注射热凝胶，其包含抗PESC剂和任选的一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中所述热凝胶在室温下具有低粘度流体(并且易于注射)，并且在注射后在体温下变成非流动凝胶。
57.一种药物洗脱装置，所述药物洗脱装置包括包含抗PESC剂的药物释放部件，所述装置当在部署于患者体内时将所述药物释放部件定位在待治疗的靶上皮组织附近，并且以足以实现所述靶组织对所述抗PESC剂的治疗有效暴露的量释放所述抗PESC剂。
58.单次口服剂量制剂，其包含抗PESC药剂、ESO再生剂和药学上可接受的赋形剂，由成人患者服用的所述单次口服剂量制剂在食管组织中产生一定浓度的抗PESC剂和所述ESO再生剂，以有效减缓或逆转食管化生、发育异常、癌症或其组合的进展。
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