CN113854558B - 一种具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物及其制备方法和应用 - Google Patents
一种具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物及其制备方法和应用，所述多酚复合物的制备方法包括以下步骤：1）制备脱脂粉末：将谷物粉末与正己烷混合，搅拌后静置，过滤收集沉淀物并干燥，得到脱脂粉末。2）高速剪切萃取：将脱脂粉末置于乙醇中振荡提取，通过高速剪切机剪切，离心并收集上清液，旋转蒸发器、冷冻干燥得到冻干粉末；3）分离纯化：将冻干粉末通过固相萃取仪后过滤，注入制备型高效液相色谱系统，收集3‑10 min的馏分，得到纯化多酚化合物。本发明确定了谷物多酚复合物的具体种类，验证了其具有抗氧化和淀粉酶抑制的功能，可应用于食品添加剂、具有抗氧化活性的食品或者降糖药物中。
Description
技术领域
本发明涉及活性物质提取及应用技术领域，尤其涉及一种具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物及其制备方法和应用。
背景技术
多酚是植物中一组化学物质的总称，因其多元酚结构而得名，可分为酚酸、黄酮类化合物及其衍生物等。酚酸包括羟基苯甲酸和羟基肉桂酸及其衍生物。因此，天然植物中的多酚化合物包括单体和复合物（衍生物）。单体多酚通常含有多个小分子量的羟基，位于180-460Da之间，如槲皮素、儿茶素、姜黄素、白藜芦醇、表没食子儿茶素没食子酸酯等。复合多酚通常是多酚与蛋白质、多糖或脂类组合，形成高分子量的大分子物质。
近年来关于多酚的共同趋势不仅是从植物基质中提取，而且还强调了这些多酚在食品基质和人类健康，特别是从水果和蔬菜的副产品中发挥的生物活性作用。最近的研究也揭示了多酚类化合物的特殊生物活性，包括有助于降低心脑血管疾病的发病率和癌症引起的死亡率。然而，关于谷物中多酚的组成图谱、功能数据和形态特征的研究很少。
谷子是最古老的栽培作物之一，原产于中国，目前在世界各地种植，其功能潜力除了丰富的营养成分，还包括抗氧化活性、抗炎、抗癌、抗菌、抗腹泻、抗溃疡和抗心血管疾病。据报道，小米中的多酚含量为0.5-3.0%，尤其是果皮、种皮和糊粉层。而水稻中约80-90%的酚酸是结合酚酸，主要存在于水稻种皮和胚中，羟基苯甲酸和羟基肉桂酸分别占总酚酸的12-28%和61-89%。小麦中的多酚以游离或结合形式存在，如酚酸包括游离和结合：游离酚酸包括对羟基苯甲酸、芥子酸等，结合酚酸主要包括对羟基苯甲酸、2，4-二羟基苯甲酸、对羟基肉桂酸等衍生物。而黄酮类化合物（如芹菜素和槲皮素）主要以与不同糖结合的形式存在于小麦中。
尽管多酚是谷物中含量最丰富的物质，并且被研究人员认为是谷物中最重要的植物化学物质。然而，迄今为止，主要谷物多酚的典型组成及其功能潜力尚未得到充分研究。本发明的目的是：(1)从小米、大米和小麦等典型北方谷物中提取和鉴定酚类成分，以补充谷物多酚数据库；(2)评估这些多酚复合物发挥的功能特性作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物及其制备方法和应用，以补充谷物多酚数据库，评估这些多酚复合物发挥的功能特性作用。
为达到上述目的，本发明提供的技术方案如下：
本发明提供了一种具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物的制备方法，所述多酚复合物从谷物中提取，所述制备方法包括以下步骤：
1）制备脱脂粉末：将谷物粉末与正己烷混合，搅拌后静置，过滤收集沉淀物并干燥得到脱脂粉末；
2）高速剪切萃取：将所述脱脂粉末置于60%~75%乙醇中，在30~50℃下振荡预提取后，通过高速剪切机剪切，离心并收集上清液，重复上述过程两次并合并上清液，得到溶液A；使用旋转蒸发器在35~55℃下去除所述溶液A中的乙醇，冷冻干燥得到冻干粉末；
3）分离纯化：将所述冻干粉末通过固相萃取仪进行纯化得到洗脱液，将洗脱液浓缩至干燥，用甲醇回收，得到初步纯化溶液；将初步纯化溶液用0.22μm膜过滤后，注入制备型高效液相色谱系统，收集3-10 min的馏分，得到纯化多酚化合物。
进一步的，所述谷物包括小米、大米、小麦。
进一步的，所述谷物在95~110℃下干燥5~8h，用多功能粉碎机粉碎成粉末后，用100目筛进行筛分，得到所述谷物粉末。
进一步的，所述步骤1）中搅拌的温度为20~30℃，转速为450~550 r/min，静置30~90min。
进一步的，所述步骤2）中离心的温度为2~6℃，转速为4000 r/min，时间为20~30min。
进一步的，所述步骤2）中高速剪切机剪切的时间为2~10分钟。
进一步的，所述步骤3）中所述固相萃取仪使用萃取柱HLB，以0.5mL/min的流速，用色谱甲醇活化所述萃取柱后再用70%甲醇平衡，然后装入0.5g/mL样品溶液，用蒸馏水淋洗，然后用80%甲醇洗脱。
进一步的，所述步骤3）中所述制备型高效液相色谱系统的流动相为水、甲醇、冰醋酸，体积比为10~20 : 80~90 : 0.1~1。
进一步的，所述步骤3）中流动相的流速为6~10 mL/min，检测器设置为280 nm，检测时间为30~60 min，收集3~10 min的馏分。
本发明还提供了所述制备方法制得的具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物。
进一步的，本发明提供了所述的具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物在制备食品添加剂、具有抗氧化活性的食品或者降糖药物中的应用。
与现有技术相比，本发明的优点和积极效果是：
1.本发明使用高速剪切的提取方式分别从普通小米（CM）、长江米（LGR）和淮河小麦（HW）中提取了特有的多酚复合物，并对提取纯化方法、成分、功能和形态进行了表征。
2.本发明通过FT-IR分析出多酚复合物中单体或衍生物多酚存在，通过超高效液相色谱-线性离子阱轨道阱串联质谱从CM、LGR和HW的21个峰中鉴定出了13种典型的多酚复合物，首次在CM、HW和LGR中发现了姜烯酮A，首次在CM和HW中发现了(+/-)-姜辣素，在LGR中首次检测到5-磺基水杨酸。
3.本发明在CM中发现了特殊羟基多酚（5-（3,4-二羟苯基）戊酸、芹菜素-8-C-木糖基-6-C-葡萄糖苷）和B-环多酚（反式肉桂酸、姜烯酮A）以及含量最高的含羟基的(+/-)-姜辣素和含B-环的芥子酸，得到CM纯化提取物的α-淀粉酶抑制率比LGR和HW纯化提取物高，为今后CM提取物降血糖药物的开发提供了研究数据。
4.本发明通过对比试验证明了高速剪切提取得到的总酚含量比超声波提取的更高。
5.本发明将粗多酚复合物经过固相萃取和制备型高效液相色谱纯化后得到纯化多酚复合物，其抗氧化性更高。
6.本发明制备的CM、LGR和HW的多酚提取物可作为具有抗氧化活性的功能性食品成分和高血糖管理药物。
附图说明
图1为用60%乙醇高速剪切提取多酚粗提取物的傅里叶红外光谱图，其中A为普通小米；B为长江米；C为淮河小麦。
图2为普通小米通过固相萃取和制备高效液相色谱纯化的多酚提取物的超高效液相色谱图。
图3为长江米通过固相萃取和制备高效液相色谱纯化的多酚提取物的超高效液相色谱图。
图4为淮河小麦通过固相萃取和制备高效液相色谱纯化的多酚提取物的超高效液相色谱图。
图5为用固相萃取和制备高效液相色谱法纯化的普通小米、长江米和淮河小麦提取物中5-磺基水杨酸（峰10）的MSn光谱图和碎片模式图，（峰值编号对应于表1和图3）。
图6为用固相萃取和制备高效液相色谱法纯化的普通小米、长江米和淮河小麦提取物中3-羟基-4-（2-羟基-6-甲基-2-庚基）苯甲酸（峰7、13和20）的MSn光谱图和碎片模式图，（峰值编号对应于表1和图2~4）。
图7为用固相萃取和制备高效液相色谱法纯化的普通小米、长江米和淮河小麦提取物中反式肉桂酸（峰1）的MSn光谱图和碎片模式图, （峰值编号对应于表1和图2）。
图8为用固相萃取和制备高效液相色谱法纯化的普通小米、长江米和淮河小麦提取物中姜烯酮A（峰6、12和19）的MSn光谱图和碎片模式图, （峰值编号对应于表1和图2~4）。
图9为用固相萃取和制备高效液相色谱法纯化的普通小米、长江米和淮河小麦提取物中芹菜素-8-C-木糖基-6-C-葡萄糖苷（峰3）的MSn光谱图和碎片模式图，（峰值编号对应于表1和图2）。
图10为用固相萃取和制备高效液相色谱法纯化的普通小米、长江米和淮河小麦提取物中m/p-香豆酸硫酸盐和麦黄酮（峰17）的MSn光谱图和碎片模式图，（峰值编号对应于表1和图4）。
图11为用固相萃取和制备高效液相色谱法纯化的普通小米、长江米和淮河小麦提取物中对羟基苯甲醛（峰15），的MSn光谱图和碎片模式图，（峰值编号对应于表1和图4）。
图12为用固相萃取和制备高效液相色谱法纯化的普通小米、长江米和淮河小麦提取物中（+/-）-姜辣素（峰值8、14和21）的MSn光谱图和碎片模式图，（峰值编号对应于表1和图2~4）。
图13为普通小米、长江米和淮河小麦的外观图。
图14为通过固相萃取和制备高效液相色谱法纯化多酚（普通小米、长江米和淮河小麦）的粒度实验结果图。
图15为60%乙醇高速剪切均质提取的淮河小麦中多酚的透射电镜图，a为粗多酚；b为纯化多酚。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细阐述，但是引用实施例仅用于说明本发明，本发明所保护范围不限于此。
实施例1：多酚化合物的制备
本发明采用三种谷物进行试验，分别是：辽宁省建平市种植的普通小米（CM，Common millet）；长江米（LGR，Long-grain rice）来自黑龙江省牡丹江市；淮河小麦（HW，Huaihe wheat）采自河北省保定市。采自当年（2020年）的三种谷物在100±5℃下干燥6小时，然后用多功能粉碎机（800Y，中国浙江铂欧五金制品有限公司）粉碎成粉末，并通过100目筛进行筛分。
所需试剂有：乙醇（分析级）、色谱级乙腈和甲醇从国药集团化学试剂有限公司（中国上海）购买。福林酚试剂，α-淀粉酶由北京索莱宝科技有限公司（中国北京）提供。1,2,2-叠氮基-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（ABTS）、1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、2,4,6-三吡啶基三嗪（TPTZ）、3,5-二硝基水杨酸（DNS）购自麦克林生物化学有限公司（中国上海）。
1、本发明提供的多酚复合物的制备方法如下：
（1）制备脱脂粉末：为了提取总多酚，将10.00g粉末颗粒（CM、LGR和HW）与200mL正己烷混合，在室温（25℃）下搅拌（500 r/min）1h，并静置1h。过滤后，收集沉淀物并自然干燥（通风柜，25℃）24小时。重复实验三次，得到脱脂粉末颗粒。
（2）高速剪切萃取：将10.00g脱脂粉末（CM、LGR和HW）置于100mL 60%乙醇中，在40℃下振荡预提取60min（DKZ-1，上海一恒科技有限公司，中国上海），然后通过高速剪切机（FJ200-SH，上海标本模型厂，中国上海）剪切5分钟（25℃），随后，在4℃下以4000 r/min的速度离心（TDZ5-WS，长沙湘智离心机仪器有限公司，中国长沙）25分钟，并收集上清液。重复该过程两次并合并上清液。使用旋转蒸发器（N-1300S，日本东京理学株式会社，东京）在40℃下从合并的上清液中去除乙醇，将残留物冷冻干燥并在-20℃下储存，直到将来的研究。
（3）分离纯化：冻干粉末通过固相萃取仪（SPE）进行纯化（SPE80，济南海能仪器有限公司，中国山东）。使用萃取柱HLB（科普诺新材料有限公司，中国山东），该萃取柱以0.5mL/min的流速被5mL色谱甲醇活化并用5mL 70%甲醇平衡，然后装入10mL样品溶液（0.5g/mL），淋洗（5mL蒸馏水）并洗脱（15mL 80%甲醇）。最后，将洗脱液浓缩至干燥，并用10mL甲醇回收，然后获得初步纯化溶液。初步纯化后，用0.22μm膜过滤初步纯化的溶液。制备型高效液相色谱系统（PHPLC）（LC-20AP，岛津株式会社，日本东京）由两个LC-20A泵、一个装有5 mL样品回路的手动注射器、一个SPD-20A紫外可见检测器和C18柱（250 mm*20 mm，5μm）（日本东京岛津株式会社）组成，用于进一步分离多酚提取物。流动相为水/甲醇/冰醋酸（16.9:83:0.1，v/v/v），流速为8 mL/min，检测器设置为280 nm，检测时间为40 min。手动注入3 mL初步纯化的甲醇溶液样品，并收集馏分（3~10 min），得到纯化多酚化合物。
2、为对比高速剪切萃取方法得到的产物质量区别，故设计了超声辅助提取的对比实验。
超声辅助提取：取上述方法步骤（1）中获得的脱脂粉末（CM、LGR和HW）10.00g，置于100mL 60%乙醇中，在40℃下振荡预提取60min（DKZ-1，上海一恒科技有限公司，中国上海），然后在超声浴（KQ-500E，中国江苏昆山超声仪器有限公司，中国江苏）中超声辅助提取40min（25℃）。最后，按照2中的相同程序，从谷物中获得粗多酚提取物。
实施例2：多酚化合物的表征
1、总酚含量（TPC）的测定
本发明采用Folin-Ciocalteu方法检测总酚含量。将1mL样品溶液（0.5g/mL：5.00g冻干样品分散在10mL 60%乙醇中）与1mL福林酚试剂混合，然后添加2mL 12%（w/v）Na2CO3溶液，并在黑暗中培养2小时（25℃）。使用紫外分光光度计（TU-1810，北京普析通用仪器有限公司，中国北京）在765nm处测定溶液的吸光度。使用没食子酸（0.02-1.00 mg/mL）制备标准曲线。结果以干燥样品的mg/g计算。使用以下公式计算TPC：
其中W为总酚含量（mg/g）；C是从没食子酸标准曲线获得的质量浓度（mg/mL）；m为干燥样品质量（g）。
结果表明，通过高速剪切萃取，CM、LGR和HW粗提物粉末的TPC分别为18.7±0.36、12.9±0.43和22.3±0.33 mg/g，显著高于超声辅助法（分别为11.6±0.37、10.2±0.57和15.6±1.26 mg/g）（P<0.05）。据报道，高速剪切提取可在液体中产生良好的湍流效应，导致物理强度降低和植物细胞组织的爆炸性损伤，这有助于在提取过程中多酚的扩散，本发明的TPC结果有力地证明了这一点。
2、红外光谱分析
将冷冻干燥的样品与溴化钾混合，并压制成透明薄片，将其放入Thermo Nicolet红外光谱仪（IS10，赛默飞世尔尼科莱公司，美国威斯康星州）中进行测定。红外光谱仪测量的温度为25℃，波长扫描范围为4000-400cm-1，分辨率为4cm-1，波长精度为0.01cm-1，扫描次数为64次。
CM、LGR和HW粗多酚提取物的FT-IR光谱如图1所示。由于O-H拉伸振动，在CM、LGR和HW中分别观察到3294 cm-1附近的峰；2926 cm-1处的吸收峰是C-H的不对称拉伸振动；1651cm-1处的特征峰是C=O拉伸振动；1530 cm-1和1448 cm-1之间的吸收带对应于苯环骨架的拉伸振动；1044 cm-1处的吸收峰是由C-O-C键的振动吸收引起的，这表明CM、LGR和HW提取物中存在O-H、C-H、C=O、苯环和C-O-C酯基。
植物中主要含有三种多酚：羟基苯甲酸、羟基肉桂酸、黄酮及其衍生物。众所周知，羟基苯甲酸直接来源于苯甲酸，羟基肉桂酸含有C6-C3结构，黄酮类化合物是基于C6-C3-C6的一系列化合物。FT-IR基团（O-H、C-H、C=O和苯环）或（C-O-C）的结果有力地表明，CM、LGR和HW提取物中存在单体或衍生物多酚，因此，对应粗提取物复合物特征。
3、超高效液相色谱-线性离子阱轨道阱串联质谱分析
超高效液相色谱-线性离子阱轨道阱串联质谱系统由超高效液相色谱（UHPLC）（OrbiTrap Fusion Lumos，赛默飞世尔科技公司，美国马萨诸塞州）和Poroshell C18柱（100mm*2.1mm，1.9μm）组成，连接到四极杆质量过滤器、线性离子阱和OrbiTrap、质量分析仪，ESI分析在负离子模式下进行，监测模式的停留时间为0.02s。流动相梯度由A（蒸馏水-0.1%甲酸）和B（乙腈）组成，流速为0.3mL/min，检测波长为280nm。梯度程序如下：0-2.0min0-20%，B；2.0-5.0min20-80%，B；5.0-20.0min 80-80%，B；20.0-25.0min 80-20%，B。质谱参数包括碰撞能量为120000，射频透镜为60%，柱温为30℃，扫描范围（m/z）为100-1000。
通过固相萃取和制备高效液相色谱纯化的CM、LGR和HW的多酚提取物的超高效液相色谱图如图2、图3、图4所示。紫外检测器在280nm处共出现21个峰，峰1-8为CM，峰9-14为LGR，峰15-21为HW，表明SPE后PHPLC纯化方法是可行的。与LGR和HW相比，CM具有更高的峰高和更多的峰，表明CM中含有更丰富的多酚复合物。
为了揭示这些多酚复合物的组成图谱，采用超高效液相色谱-线性离子阱轨道阱串联质谱方法对这些复合物进行了鉴定。
表1总结了通过超高效液相色谱-线性离子阱轨道阱串联质谱获得的多酚复合物的结果，并在图5~12中部分成像。
表1中提供了13种多酚复合物，它们是5-磺基水杨酸、5-（3,4-二羟基苯基）戊酸、3-羟基-4-（2-羟基-6-甲基-2-庚烷基）苯甲酸、反式肉桂酸、芥子酸、姜烯酮A、芹菜素-8-C-木糖基-6-C-葡萄糖苷、槲皮素-3,7-二葡萄糖苷、一种Melitidin衍生物、m/p-香豆酸硫酸盐、麦黄酮、对羟基苯甲醛和(+/-)-姜辣素。在CM、HW和LGR中首次检测到姜烯酮A，在CM和HW中首次检测到(+/-)-姜辣素，在LGR中首次检测到5-磺基水杨酸。
表1.采用超高效液相色谱-线性离子阱轨道阱串联质谱鉴定普通小米、长江米和淮河小麦中的多酚提取物。
（注：*：提取液用60%乙醇高速剪切提取，采用固相萃取和制备高效液相色谱纯化。）
3.1、羟基苯甲酸及其衍生物
本发明在这些粉末中共检测到三种羟基苯甲酸或其衍生物（表1），它们是5-（3,4-二羟基苯基）戊酸、5-磺基水杨酸和3-羟基-4-（2-羟基-6-甲基-2-庚基）苯甲酸。5-（3,4-二羟基苯基）戊酸仅在CM中检测到，5-磺基水杨酸仅在LGR中特有，并首次在LGR中发现，3-羟基-4-（2-羟基-6-甲基-2-庚基）苯甲酸在三种谷物（CM、LGR或HW）样品中都检测到。分析结果如下：
峰10（保留时间：8.48 min，m/z 216.9812）通过化合物发现者3.0软件鉴定为5-磺基水杨酸（表1）。5-磺基水杨酸的裂解模式如图5所示。在m/z 198.91806[M－H－H2O]－和136.99207[M－H－HO3S]－处出现碎片。
峰7、13和20（保留时间：16.75 min）在m/z 265.14825处显示相同的[M－H]－和碎片离子m/z 181.98106[M－H－C6H13]－与碎片模式图6相对应；根据化合物发现者3.0软件鉴定为3-羟基-4-（2-羟基-6-甲基-2-庚基）苯甲酸。
峰4（保留时间：9.12 min）在m/z 209.08533处有一个前体离子[M－H]－和碎片离子m/z 188.93501[M－H－H2O]－，被鉴定为5-（3,4-二羟基苯基）戊酸。
3.2、羟基肉桂酸及其衍生物
在三种谷物（CM、LGR和HW）样品中鉴定出三种化合物为羟基肉桂酸或其衍生物。它们是反式肉桂酸、芥子酸和姜烯酮A。反式肉桂酸仅存在于CM中，而芥子酸和姜烯酮A在这三种谷物样品中检测到，姜烯酮A首先在CM、LGR和HW中发现。详细的分析结果见表1，图7和图8部分显示了反式肉桂酸和姜烯酮A的裂解模式。
3.3、黄酮类化合物及其衍生物
在CM、LGR和HW中检测到五种黄酮类化合物或其衍生物，它们是芹菜素-8-C-木糖基-6-C-葡萄糖苷、槲皮素-3,7-二葡萄糖苷、m/p-香豆酸硫酸盐、麦黄酮和Melitidin的衍生物。芹菜素-8-C-木糖基-6-C-葡萄糖苷仅在CM中发现，槲皮素-3,7-二葡萄糖苷、m/p-香豆酸硫酸盐和麦黄酮仅在HW中检测到，并且在三种谷物（CM、LGR和HW）样品中发现了Melitidin的衍生物。麦黄酮存在于许多植物物种中，但是，全谷物（如小麦）是主要的食物来源，这与我们的发明相一致。峰2、9和16（保留时间：6.60 min）在m/z 723.50342处有一个前体离子[M－H]－，在m/z 677.72302有一个碎片离子，被确定为Melitidin的衍生物。
黄酮类化合物或衍生物的分析结果详见表1，芹菜素-8-C-木糖基-6-C-葡萄糖苷、m/p-香豆酸硫酸盐和麦黄酮的碎片裂解模式如图9和图10所示。
3.4、其他酚类化合物
在谷物（CM、LGR或HW）样品中发现了另外两种酚类化合物（表1）。它们是对羟基苯甲醛和（+/-）-姜辣素。
对羟基苯甲醛（峰15；保留时间：6.14分钟；m/z 121.02936）是一种酚醛化合物，我们的研究中在HW中检测到（表1），并且也存在于粳稻和籼稻中。（+/-）-姜辣素（峰8、14和21；保留时间：17.63分钟；m/z 293.17957）本研究首次发现存在于CM和HW中，而在大米中已检测到姜辣素的存在。
对羟基苯甲醛与（+/-）-姜辣素的碎片裂解模式如图11和12所示。
实施例3：多酚复合物的特性
1、抗氧化性能
测定样品的DPPH、ABTS自由基清除和铁还原抗氧化能力（FRAP）反应。
对于DPPH分析，将1mL提取样品溶液（0.02-0.1 mg/mL，60%乙醇）与2mL DPPH（40mg/L）乙醇溶液混合，摇匀并在黑暗中培养30 min（25°C）。在517nm处测定溶液的吸光度。
对于ABTS，将1mL提取样品溶液（0.02-0.1mg/mL，60%乙醇）与3mL ABTS储备溶液（5mL 7mmol/L ABTS溶液和5mL 2.45mmol/L过硫酸钾混合，在734nm处将吸光度稀释至0.700±0.025）混合，反应时间为6min（25℃）。
计算公式如下：
；
式中A 1 为样品混合溶液的吸光度；A 0 为60%乙醇与DPPH或ABTS混合溶液的吸光度值。
对于FRAP反应，将0.1mL提取样品溶液（0.02-0.1 mg/mL，60%乙醇）与3.9mL FRAP工作溶液（300 mmol/L醋酸盐缓冲溶液；10mmol/L TPTZ盐酸溶液；20mmol/L三氯化铁溶液；将它们以10:1:1的比例混合）混合，并在黑暗中培养30分钟（25℃），然后在水浴中反应10分钟（37℃），在593 nm处读取吸光度。
表2.普通小米、长江米和淮河小麦多酚提取物的抗氧化能力（DPPH、ABTS和FRAP）和α-淀粉酶抑制活性。
（注：*：粗提物：用60%乙醇高速剪切提取的粗提物。纯化物：通过固相萃取和制备高效液相色谱法进行纯化。每列中的不同字母（a-f）代表显著差异（P<0.05）；每个结果表示三次测量的平均值和标准偏差。）
表2给出了三种谷物（CM、LGR和HW）样品的自由基清除能力（DPPH和ABTS）和FRAP还原力。结果表明，纯化多酚提取物（CM，LGR和HW）的值（P<0.05）显著高于粗多酚（1.5-2.5倍），表明纯化多酚复合物比粗多酚具有更好的抗氧化性能。纯化多酚复合物的DPPH自由基清除率在HW中的最高，为89.2%，在CM中为87.3%，在LGR中为80.0%；ABTS清除率分别为78.5%（CM）、81.6%（LGR）和81.1%（HW）；在FRAP分析中，纯化多酚复合物的吸光度值HW为0.83，CM为0.80，LGR为0.73。
天然小米和发芽小米提取物的DPPH值分别为48.3%和59.6%，这大大低于本发明得到的结果（CM为87.3%）。蓝色青稞品种提取物的ABTS值为79.9%，也略低于本发明从HW获得的数据（81.1%）。用一定浓度的甲醇水溶液从小米中提取的FRAP值分别为0.77和0.68，本发明的结果CM为0.80高于该研究。这些结果可以证明本发明的CM、LGR和HW提取物具有良好的抗氧化能力，有可能成为某些食品基质中的抗氧化添加剂，并且证明了本研究所采用的提取和纯化方法是有效的。
2、α-淀粉酶抑制试验
配制DNS溶液：将18.20g酒石酸钾钠溶解在50mL蒸馏水中，向上述混合溶液中添加2.10g氢氧化钠、0.63gDNS和0.50g苯酚，加热并搅拌直至溶解。冷却后，用蒸馏水将溶液稀释至100mL，并储存在棕色瓶中（25℃）。
将0.5mLα-淀粉酶（0.436mg/mL）和1mL提取样品溶液（1mg/mL，60%乙醇）在水浴中混合20min（37℃）。培养后，添加0.5mL 1%淀粉溶液，并培养3分钟（37℃）。然后，通过添加0.5mL DNS溶液并煮沸5分钟终止反应。将溶液冷却并定容至10mL，在540nm处测量溶液的吸光度。计算公式如下：
其中A 1 为样品组（提取物、α-淀粉酶和1%淀粉）的吸光度；A 2 为样品对照组（提取物和1%淀粉）的吸光度；A 3 为空白组（α-淀粉酶和1%淀粉）的吸光度；A 4 为空白对照组（1%淀粉）的吸光度。
谷物多酚对α-淀粉酶的抑制能力表明，谷物多酚可能对血糖控制具有潜在的积极作用。表2显示了CM、LGR和HW纯化提取物中多酚复合物的α-淀粉酶抑制活性。CM中α-淀粉酶抑制率最高为80.5%，HW和LGR中分别为75.9%和75.7%。本发明中的α-淀粉酶抑制活性略高于碾磨高粱谷物的提取物（CM:80.5% vs 56.9%）。这些结果表明，CM、LGR和HW提取物对α-淀粉酶有较好的抑制作用。
小米自古以来就有药用先例，本发明中CM对α-淀粉酶的抑制能力最高。带有B环的酚类和黄酮类化合物的羟基数量与α-淀粉酶的抑制活性密切相关，这是由于螯合α-淀粉酶的能力增强所致。本发明在三种谷物（CM、LGR和HW）的粗多酚中检测到酚羟基（见图1，O-H峰3294cm-1），并且CM含有羟基的特殊多酚复合物，例如5-（3,4-二羟基苯基）戊酸和芹菜素-8-C-木糖基-6-C-葡萄糖苷（见图2和表1），以及含量最高的多酚羟基复合物（+/-）-姜辣素（见图2和表1），其使CM具有图1中最尖锐的O-H峰3294 cm-1。就B环组分而言，CM含有特殊的多酚B环复合物，如反式肉桂酸和姜烯酮A，并含有最高含量的芥子酸（多酚B环复合物）（见图2和表1）。因此，CM中α-淀粉酶的抑制率（80.5%）高于LGR（75.7%）和HW（75.9%）（见表2）。这一结果为今后CM提取物类降糖药物的开发提供了研究背景。
3、形态特征
在样品浓度为1 mg/mL（60%乙醇）的条件下，通过透射电子显微镜（TEM）（HT7700，日立株式会社）在80kV下分析提取物粉末的微观形态。通过测定0.1 mg/mL（60%乙醇）样品纳米悬浮液，在25℃下使用纳米颗粒分析仪（Nano ZS 90，Malvern instruments Ltd.，英国Malvern）分析提取粉末的粒径。
如图13所示的CM、LGR和HW冻干粉从这三种谷物中纯化前后的外观图，粗多酚提取物分别为淡黄色（CM）、白色（LGR）和黄色（HW）粉末，这是CM、LGR和HW本身颜色外观的来源。纯化后，得到的纯化多酚粉末在CM、LGR和HW方面均为白色，这表明本发明中采用的分离纯化工艺是有效的，并且CM、LGR和HW纯化多酚提取物的粒径具有纳米级分布（200-500 nm），这进一步表明，纯化处理可以从谷物中获得某些具有独特多酚成分特征的纳米颗粒，如抗氧化性（HW中DPPH为89.2%，LGR中ABTS为81.6%，HW中FRAP为0.83）和α-淀粉酶抑制率（CM中为80.5%）。为了进一步研究这些多酚纳米粒子的微观结构，利用透射电镜观察了多酚提取物的形态。
如图15（b）所示，纯化多酚的粒径更为均匀，显示出大量小而粗糙的球形结构颗粒，这与某些糖苷（如芹菜素-8-C-木糖基-6-C-葡萄糖苷和槲皮素-3,7-二葡萄糖苷等化合物）的存在有关，这是多酚与一些多糖结合的形式。与纯化提取物相比，粗多酚显示出多种杂质特征，如图15（a）所示的更多黑色和致密结构、更大的粒径、更不规则的形态等，这源于更多与蛋白质或淀粉的结合。
本发明分别从CM、LGR和HW中提取多酚纳米粒，其复合物图谱、抗氧化性（DPPH、ABTS、FRAP）、α-淀粉酶抑制率和形态特征。高速剪切萃取的总酚含量高于超声波萃取（18.7vs.11.6 CM，12.9 vs.10.2 LGR，22.3vs.15.6 mg/g HW），经固相萃取和制备型高效液相色谱纯化后，HW提取物的DPPH（89.2%）高于LGR（80.0%）和CM（87.3%），FRAP（0.83）高于LGR（0.73）和CM（0.80）。FT-IR官能团O-H、C-H、C=O、苯环或C-O-C表明存在单体或衍生物多酚，通过超高效液相色谱-线性离子阱轨道阱串联质谱从CM、LGR和HW纯化粉末的21个峰中鉴定出13个典型的多酚复合物，在CM和HW中首次检测到姜烯酮A和（+/-）-姜辣素，首次在LGR中检测到姜烯酮A和5-磺基水杨酸。CM含有特殊的羟基多酚（5-（3,4-二羟苯基）戊酸、芹菜素-8-C-木糖基-6-C-葡萄糖苷）和B环多酚（反式肉桂酸、姜烯酮A），以及含量最高的含羟基多酚的（+/-）-姜辣素和含B环多酚的芥子酸，使α-淀粉酶在CM中的抑制率（80.5%）高于LGR（75.7%）和HW（75.9%）；HW中特有的甲氧基化成分麦黄酮和糖基化成分槲皮素-3,7-二葡萄糖苷导致α-淀粉酶的抑制率与LGR相似（HW:75.9% vs.LGR:75.7%），尽管TPC较高（22.3vs.12.9 mg/g）。通过透射电镜观察，纯化后的多酚提取物粉末具有纳米级颗粒分布（200-500nm）和粗糙的球形结构。通过本发明的结果可表明，CM、LGR和HW的多酚提取物可作为具有抗氧化活性的功能性食品成分和高血糖管理手段。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对上述实施例的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。
Claims (6)
1.一种具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物的制备方法，其特征在于：所述多酚复合物从谷物中提取，所述制备方法包括以下步骤：
1）制备脱脂粉末：将谷物粉末与正己烷混合，搅拌后静置，过滤收集沉淀物并干燥得到脱脂粉末；所述谷物包括小米、大米、小麦；所述谷物在95 ~ 110℃下干燥5 ~ 8h，用多功能粉碎机粉碎成粉末后，用100目筛进行筛分，得到所述谷物粉末；
2）高速剪切萃取：将所述脱脂粉末置于60% ~ 75%乙醇中，在30 ~ 50℃下振荡预提取后，通过高速剪切机于25℃剪切5min，离心并收集上清液，重复上述过程两次并合并上清液，得到溶液A；使用旋转蒸发器在35 ~ 55℃下去除所述溶液A中的乙醇，冷冻干燥得到冻干粉末；
3）分离纯化：将所述冻干粉末通过固相萃取仪进行纯化得到洗脱液，将洗脱液浓缩至干燥，用甲醇回收，得到初步纯化溶液；将初步纯化溶液用0.22μm膜过滤后，注入制备型高效液相色谱系统，收集馏分，得到纯化的所述多酚复合物；所述制备型高效液相色谱系统的流动相为水、甲醇、冰醋酸，体积比为10 ~ 20 : 80 ~ 90 : 0 .1 ~ 1；所述流动相的流速为6 ~ 10 mL/min，检测器设置为280 nm，检测时间为30 ~ 60 min，收集3 ~ 10 min的馏分。
2.根据权利要求1所述的具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物的制备方法，其特征在于：所述步骤1）中搅拌的温度为20 ~ 30℃，转速为450 ~ 550 r/min，静置30 ~90min。
3.根据权利要求1所述的具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物的制备方法，其特征在于：所述步骤2）中离心的温度为2 ~ 6℃，转速为4000 r/min，时间为20 ~ 30min。
4.根据权利要求3所述的具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物的制备方法，其特征在于：所述步骤3）中所述固相萃取仪使用萃取柱HLB，以0 .5mL/min的流速，用色谱甲醇活化所述萃取柱后再用70%甲醇平衡，然后装入0 .5g/mL样品溶液，用蒸馏水淋洗，然后用80%甲醇洗脱。
5.权利要求1-4任一项所述制备方法制得的具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物。
6.权利要求5所述的具有抗氧化和淀粉酶抑制功能的多酚复合物在制备食品添加剂、具有抗氧化活性的食品或者降糖药物中的应用。
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Citations (5)
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|---|---|---|---|---|
| KR20020076980A (ko) * | 2001-03-29 | 2002-10-11 | 박근형 | 천연항산화제를 포함하는 헛개나무 줄기와 잎의물추출물을 이용한 노화억제제 |
| WO2003024468A1 (en) * | 2001-09-19 | 2003-03-27 | Bioneer Corporation | Substances extracted from corn which can inhibit the activities of amylase, pharmaceutical compositions and food additives containing the same extracts for treatment or prevention of obesity and diabetes mellitus, and processes for their preparations |
| CN104738403A (zh) * | 2015-04-14 | 2015-07-01 | 江南大学 | 一种提高谷物在挤压糊化过程中多酚保留率及抗氧化活性的方法 |
| CN105732250A (zh) * | 2016-02-06 | 2016-07-06 | 福建农林大学 | 一种高纯度灰树花多酚组分的制备方法 |
| CN105902584A (zh) * | 2016-05-31 | 2016-08-31 | 华南理工大学 | 具有抗补体和降血糖活性的辣木叶黄酮及其制备方法与应用 |
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20020076980A (ko) * | 2001-03-29 | 2002-10-11 | 박근형 | 천연항산화제를 포함하는 헛개나무 줄기와 잎의물추출물을 이용한 노화억제제 |
| WO2003024468A1 (en) * | 2001-09-19 | 2003-03-27 | Bioneer Corporation | Substances extracted from corn which can inhibit the activities of amylase, pharmaceutical compositions and food additives containing the same extracts for treatment or prevention of obesity and diabetes mellitus, and processes for their preparations |
| CN104738403A (zh) * | 2015-04-14 | 2015-07-01 | 江南大学 | 一种提高谷物在挤压糊化过程中多酚保留率及抗氧化活性的方法 |
| CN105732250A (zh) * | 2016-02-06 | 2016-07-06 | 福建农林大学 | 一种高纯度灰树花多酚组分的制备方法 |
| CN105902584A (zh) * | 2016-05-31 | 2016-08-31 | 华南理工大学 | 具有抗补体和降血糖活性的辣木叶黄酮及其制备方法与应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 超高效液相色谱-串联质谱法鉴定和分析稻米中酚酸类化合物的组成及分布;赵珊等;《中国农业科学》;第53卷(第3期);第612-631页 * |
| 高速剪切提取金银花11种活性成分及其抗氧化活性;付元真;王新新;王晓;杜金华;耿岩玲;刘峰;李圣波;;食品与发酵工业;第42卷(第05期);第239-245页 * |
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