CN113842400A - 一种含有水飞蓟提取物和后生元的组合物及其在护肝中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种组合物，组合物含有水飞蓟提取物和后生元；水飞蓟提取物可以为水飞蓟提取物微胶囊形式，后生元可以选择为灭活的植物乳杆菌L137，后生元可以调节肠道菌群平衡，修复肠道，减少肠漏降低对肝炎的诱因，水飞蓟提取物与后生元的组合具有减少肝损伤的功效。

Description

一种含有水飞蓟提取物和后生元的组合物及其在护肝中的 应用
技术领域
本发明涉及一种组合物，具体涉及减少肝损伤等效果的组合物及其应 用。
背景技术
水飞蓟，又名奶蓟草，原产于地中海地区，其作为药用植物使用已经 有接近两千年的历史，至今仍作为一种非常有效的护肝植物被广泛使用。 它可以帮助肝脏解毒，也可以用于控制慢性肝脏疾病。水飞蓟能激活肝脏 蛋白的再生，恢复被酒精和病毒所破坏的肝细胞的活性，还可清除自由 基、维持肝脏细胞膜的通透性，降低毒素对肝脏的损伤，保护长期饮酒伤 肝和患有急慢性肝炎、脂肪肝、肝硬化和中毒性肝损害的人群。
水飞蓟提取物以水飞蓟Silybummarianum的干燥果实为原料,商品提取 物通常标化为含总水飞蓟素80％。水飞蓟素是多酚类的复杂混合物，包括 七种关系密切的黄酮醇-木质素加成物(水飞蓟宾A、水飞蓟宾B、异水飞 蓟宾A、异水飞蓟宾B、水飞蓟亭、异水飞蓟亭及水飞蓟宁)和一种类黄 酮黄杉素(taxifolin)。水飞蓟宾是水飞蓟素的半纯化部分，主要是两种 非对映异构体(水飞蓟宾A和水飞蓟宾B)的混合物。
当我们处于健康状态时，小肠肠壁只允许营养物质穿过肠壁进入血 液，通过血液循环流到身体所需的其它部位。其它不允许进入的物质一律 被拒之门外。肠壁细胞与细胞之间通过紧密连接结合在一起，然而，这种 紧密连接很容易受到破坏，如肥胖，慢性疲劳，菌群失调等。
对于压力大，肥胖，代谢失调，肠道紊乱等的亚健康人群，肠道细胞 和紧密连接蛋白被破坏，细胞与细胞之间的间隙就会变得更大，使得来源 于微生物或食物的脂多糖穿过肠壁，与脂蛋白绑定进入肝脏循环，从而导 致肝脏炎症。对亚健康人群，单纯补充抗菌抗炎抗氧化的补充剂如水飞蓟 只能减少已经在发生的炎症，对于外部入侵的脂多糖等导致的肝脏炎症无 法起到保护作用。
本发明将水飞蓟与后生元组合在一起，从而起到对肝脏疾病的预防和 治愈的作用。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足之处，提供一种组合物，含有 水飞蓟提取物和后生元。
进一步的，水飞蓟提取物包括水飞蓟宾A、水飞蓟宾B、异水飞蓟宾 A、异水飞蓟宾B、水飞蓟亭、异水飞蓟亭、水飞蓟宁、黄杉素中的一种 或多种；进一步优选的，水飞蓟提取物包括水飞蓟宾A和其他类型水飞蓟 提取物的组合。
进一步的，水飞蓟提取物为水飞蓟提取物微胶囊形式和/或水飞蓟提 取物脂质体形式和/或水飞蓟提取物自微乳化形式，优选为水飞蓟提取物- 磷脂的形式、水飞蓟提取物-磷脂-胆固醇的形式、水飞蓟提取物-环糊精的 形式的一种或多种。
进一步优选为水飞蓟提取物-磷脂-胆固醇的脂质体形式和水飞蓟提取 物-磷脂复合物的形式复配，或为飞蓟提取物-磷脂-胆固醇的脂质体形式和 水飞蓟提取物-环糊精的形式复配。
进一步的，所述后生元为死菌体，或为包含活菌体和死菌体。优选为 至少含有死菌体。死菌体和活菌体的组合中，死菌体与活菌体的比例为 99:1、95:5、90:10、80:20、75:25、60:40、50:50、40:60、30:70、20:80、 10:90、1:99。
进一步的，后生元含有菌体和菌体的代谢产物。
进一步的，后生元为植物乳杆菌制成的后生元。
进一步的，植物乳杆菌为植物乳杆菌L137。
进一步的，植物乳杆菌为L-137的死菌体。
进一步的，组合物中水飞蓟提取物含量为1-99.9％(w/w)，优选为 10-99.5％(w/w)，进一步优选为90-99％(w/w)；植物乳杆菌为0.01- 99％(w/w)，优选为0.05-90％(w/w)，进一步优选为1-10％(w/w)。
进一步的，水飞蓟提取物中的水飞蓟宾(水飞蓟宾A和水飞蓟宾B) 占水飞蓟宾A、水飞蓟宾B、异水飞蓟宾A、异水飞蓟宾B、水飞蓟亭、 异水飞蓟亭、水飞蓟宁、黄杉素总含量的20％以上，具有为30％以上、 40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、95％以 上、96％以上、97％以上、98％以上、99％以上或100％。
水飞蓟提取物的纯度为50％以上，具有60％以上、70％以上、80％以 上、90％以上、95％以上、96％以上、97％以上、98％以上、99％以上或 100％。
进一步所述死菌体，灭活方式可以为加热、紫外辐照、化学处理；优 选为热灭活菌体。所述热灭活菌体可以为在培养结束后，收集菌体后制备 加热死菌体，或者也可以不将菌体从培养液中暂时分离，而是将培养液中 的菌体制成加热死菌体，然后采集该加热死菌体。植物乳杆菌L-137的加 热死菌体加热温度通常约为60～100℃，优选约为70～90℃，作为加热手 段，可以为使用加热器的公知手段。在达到所需温度后，加热时间通常约 为5～40分钟，优选约为10～30分钟。
死菌体可进一步进行研磨、破碎或冻结干燥处理等，从而制成死菌体 处理物。在本发明中，所述死菌体处理物也可适宜地用作死菌体。
本发明中死菌体的形态可以为糊状形态、悬浊液形态、乳状形态、粉 状形态、颗粒形态，优选为粉末形态。
本发明中死菌体的数量为其活菌的数量灭活后的死菌体数量。因死菌 体数量的检测手段的有限性，本发明中，死菌体的菌体数量可由对生产该 死菌体的活菌活菌数、活菌密度进行检测而推算确定。
进一步的，组合物中包含或者不包含填充剂/载体，组合物中的植物 乳杆菌用量为0.5亿/g-500亿/g，进一步1亿/g-100亿/g，进一步10亿/g- 50亿/g，进一步20亿/g-30亿/g。
进一步的，组合物中还含有谷胱甘肽。
本发明还提供了一种产品，包括上述组合物，所述产品剂型为注射 液、口服液、片剂、硬胶囊、软胶囊、糖果、固体饮料、液体饮料、膏滋 中的一种。
进一步的，所述产品还包括辅料；其中辅料包括：水、赋形剂、色 素、甜味剂、pH调节剂、增稠剂、粘合剂、崩解剂、填充剂。
本发明还提供了组合物在肝损伤类药品、保健食品、膳食补充剂和食 品中的应用；
或/和在护肝类药品、保健食品、膳食补充剂和食品中的应用。
术语解释
本文所用的“抗”，在没有特别说明的情况下，包含有预防、抑制、清 除的效果。
本文所用的“肝损伤”，在没有特别说明的情况下，包含有物理、化 学、生物等方式带来的损伤。
本文所用的“死菌体”，在没有特别说明的情况下，为灭活的菌体。
本文所用的“后生元”，为益生菌经加工处理后的益菌成分统称，包 括菌体与代谢产物。
本文所用的“L137”，在没有特别说明的情况下，为灭活的植物乳杆 菌L137。
附图说明：
图1为护肝效果动物试验1的ALT的试验情况；
图2为护肝效果动物试验2的AST的试验情况。
具体实施方式
为了便于本领域技术人员的理解，下面结合实施例对本发明作进一步 的说明，实施方式提及的内容并非对本发明的限定。
实施例1
一种组合物，含有水飞蓟提取物和灭活的植物乳杆菌L137，水飞蓟 提取物中水飞蓟宾(包括水飞蓟宾A和水飞蓟宾B)占水飞蓟提取物的 80％，水飞蓟提取物为水飞蓟-磷脂复合物的形式，水飞蓟提取物为40％ (w/w)，灭活的植物乳杆菌L137为60％(w/w)。
实施例2
一种组合物，含有水飞蓟提取物和灭活的植物乳杆菌L137，水飞蓟 提取物中水飞蓟宾占水飞蓟提取物的70％，水飞蓟提取物为20％ (w/w)，灭活的植物乳杆菌L137为80％(w/w)。
实施例3
一种组合物，含有水飞蓟提取物和灭活的植物乳杆菌L137和活的植 物乳杆菌，水飞蓟提取物中水飞蓟宾占水飞蓟提取物的90％，水飞蓟提取 物为33.3％(w/w)，植物乳杆菌为66.7％(w/w)。
实施例4
一种组合物，含有水飞蓟提取物和灭活的植物乳杆菌L137，水飞蓟 提取物中水飞蓟宾占水飞蓟提取物的80％，水飞蓟提取物为40％ (w/w)，灭活的植物乳杆菌L137为40％(w/w)，谷胱甘肽为20％ (w/w)。
实施例5
一种组合物，含有水飞蓟提取物和灭活的植物乳杆菌L137，水飞蓟 提取物中水飞蓟宾占水飞蓟提取物的80％，水飞蓟提取物为99％ (w/w)，灭活的植物乳杆菌L137为1％(w/w)。
实施例6
一种组合物，含有水飞蓟提取物和灭活的植物乳杆菌L137，水飞蓟 提取物中水飞蓟宾占水飞蓟提取物的80％，水飞蓟提取物为10％ (w/w)，灭活的植物乳杆菌L137为90％(w/w)。
实施例7
一种胶囊，含有水飞蓟提取物和灭活的植物乳杆菌L137，水飞蓟提 取物中水飞蓟宾占水飞蓟提取物的80％，水飞蓟提取物为0.12g，灭活的 植物乳杆菌L137为2.4mg。
实施例8
一种胶囊，含有水飞蓟提取物和灭活的植物乳杆菌L137，水飞蓟提 取物中水飞蓟宾占水飞蓟提取物的80％，水飞蓟提取物为水飞蓟提取物- 磷脂-胆固醇脂质体的形式，水飞蓟提取物为0.06g，灭活的植物乳杆菌 L137为1.2mg。
实施例9
一种胶囊，含有水飞蓟提取物和灭活的植物乳杆菌L137，水飞蓟提 取物中水飞蓟宾占水飞蓟提取物的80％，水飞蓟提取物为0.24g，灭活的 植物乳杆菌L137为4.8mg。
实施例10
一种胶囊，含有水飞蓟提取物和灭活的植物乳杆菌L137，水飞蓟提 取物中水飞蓟宾占水飞蓟提取物的60％，水飞蓟提取物为0.08g，灭活的 植物乳杆菌L137为0.8mg。
实验例1
动物：雄性昆明小鼠(20±2g)：将小鼠置于动物实验室，室温培养。分 笼饲养。
护肝效果动物试验1：
分组：取50只小鼠随机平均分为5组，即为：控制组、脂多糖组 (肝脏损伤组)、脂多糖+水飞蓟组、脂多糖+L137组、脂多糖+水飞蓟 +L137组。
控制组：饲料+生理盐水填喂15天，腹腔注射生理盐水。
脂多糖组(肝脏损伤组)：饲料+生理盐水填喂15天，腹腔注射4mg/kg Escherichiacoli脂多糖。
脂多糖+水飞蓟组：饲料+75mg/kg水飞蓟素+生理盐水填喂15天，腹 腔注射4mg/kgEscherichia coli脂多糖。
脂多糖+L137组：饲料+1.5mg/kg L137+生理盐水填喂15天，腹腔注 射4mg/kgEscherichia coli脂多糖。
脂多糖+水飞蓟+L137组：饲料+75mg/kg+1.5mg/kg L137+生理盐水填喂15 天，腹腔注射4mg/kg Escherichia coli脂多糖。
结食12小时后，取小鼠血样，在3000X g，4摄氏度的条件下离心分 离15分钟，取上层澄清液测试。丙氨酸转氨酶ALT和天冬氨酸转氨酶 AST用756P紫外-可见光分光光度计测试。
表1护肝效果动物试验1的ALT和AST的试验情况
ALT(IU/L) AST(IU/L)
控制组 48.4±5.1 75.5±8.6
脂多糖组(模型组) 102.3±10.7, 169.7±19.3，
脂多糖+水飞蓟 85.7±9.4,p<0.05 127.7±15.9,p<0.05
脂多糖+L137 95.1±9.8,p<0.05 159.2±13.1,p<0.05
脂多糖+水飞蓟+L137 69.6±7.4,p<0.05 108.8±12.3,p<0.05
由数据可知，相比于脂多糖组，L137组血清ALT，AST有所降低， 水飞蓟，及水飞蓟+L137组的保护作用下的血清ALT，AST均有显著降 低。水飞蓟+L137组合物的降低的数值要好于单独的水飞蓟或L137。
说明日常服用水飞蓟+L137的小鼠，对脂多糖等毒素导致的肝脏发炎 有更强的抵抗力。水飞蓟提取物可以优化线粒体代谢，减少细胞内的活性 氧水平，降低NF-κB表达；而L137通过阻断TLR4 mRNA，从而影响 TLR4-NF-κB通路，抑制肝脏中NF-κB表达，对NF-κB降低起到增强 作用，从而能够增强了水飞蓟的抗炎效果。
实验例2
40只957-992g雄性新西兰白兔，其中10只作为为控制组；
控制组：每日饲料+生理盐水填喂，腹腔注射生理盐水，持续两周。
脂多糖组(模型组)：每日饲料+生理盐水填喂，腹腔注射5mcg/kg Escherichiacoli脂多糖，持续两周。
造模结束后，在3000X g，4摄氏度的条件下离心分离15分钟，取上 层澄清液。丙氨酸转氨酶ALT和天冬氨酸转氨酶AST用756P紫外-可 见光分光光度计测试。
控制组：继续喂食每日饲料+生理盐水填喂，持续六周。
将模型组分为三组，分别作为baseline。
脂多糖+L-137组：每日饲料+0.5mg/kg L137+生理盐水填喂，腹腔注 射0.5mcg/kg脂多糖，持续六周。
脂多糖+水飞蓟组：每日饲料+25mg/kg水飞蓟素+生理盐水填喂，腹 腔注射0.5mcg/kg脂多糖，持续六周。
脂多糖+水飞蓟+L137组：每日饲料+25mg/kg水飞蓟素+0.5mg/kg L137+生理盐水填喂，腹腔注射0.5mcg/kg脂多糖，持续六周。
每周取兔子血样，在3000X g，4摄氏度的条件下离心分离15分钟， 取上层澄清液测试。丙氨酸转氨酶ALT和天冬氨酸转氨酶AST用756P 紫外-可见光分光光度计测试。
表2护肝效果动物试验2的ALT的试验情况
Figure BDA0003259111600000101
表3护肝效果动物试验2的AST的试验情况
Figure BDA0003259111600000102
由表2-3和图2可知，对于脂多糖导致的肝脏发炎且存在外源脂多糖 干扰的情况下，使用水飞蓟+L137的兔子，曲线斜率更高，即能更快的降 低炎症，更快见效。原因一方面，因此L137影响代谢通路进而影响水飞 蓟的抗炎效果，另一方面，L137对肠道菌群的调节作用有利于修复肠 漏，减少外源性脂多糖透过肠道进入循环系统，对肝脏造成损伤。同时水 飞蓟本身对肝脏具有消炎抗菌的作用，组合物起到了内外协同的保护作 用。
本技术领域技术人员可以理解，除非另外定义，这里使用的所有术语 (包括技术术语和科学术语)，具有与本发明所属领域中的普通技术人员的 一般理解相同的意义。还应该理解的是，诸如通用字典中定义的那些术 语，应该被理解为具有与现有技术的上下文中的意义一致的意义，并且除 非像这里一样被特定定义，否则不会用理想化或过于正式的含义来解释。
应当理解，以上借助优选实施例对本发明的技术方案进行的详细说明 是示意性的而非限制性的。本领域的普通技术人员在阅读本发明说明书的 基础上可以对各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术 特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱 离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (9)

1.一种组合物，其特征在于：含有水飞蓟提取物和后生元。
2.根据权利要求1所述组合物，其特征在于：水飞蓟提取物包括水飞蓟宾A、水飞蓟宾B、异水飞蓟宾A、异水飞蓟宾B、水飞蓟亭、异水飞蓟亭、水飞蓟宁、黄杉素中的一种或多种；
和/或
水飞蓟宾A、水飞蓟宾B、异水飞蓟宾A、异水飞蓟宾B、水飞蓟亭、异水飞蓟亭、水飞蓟宁、黄杉素的衍生物的一种或多种；优选为硫代烷基脂类衍生物。
3.根据权利要求1所述组合物，其特征在于：水飞蓟提取物为水飞蓟提取物微胶囊形式和/或水飞蓟提取物脂质体形式和/或水飞蓟提取物自微乳化形式，优选为水飞蓟提取物-磷脂的形式、水飞蓟提取物-磷脂-胆固醇的形式、水飞蓟提取物-环糊精的形式的一种或多种；进一步优选为水飞蓟提取物-磷脂-胆固醇的脂质体形式和水飞蓟提取物-磷脂复合物的形式复配，或为飞蓟提取物-磷脂-胆固醇的脂质体形式和水飞蓟提取物-环糊精的形式复配。
4.根据权利要求1的所述组合物，其特征在于：后生元为植物乳杆菌制成的后生元；进一步的，为植物乳杆菌L137。
5.根据权利要求1的所述组合物，其特征在于：组合物中水飞蓟提取物含量为1-99.9％(w/w)，优选为10-99.5％(w/w)，进一步优选为90-99％(w/w)；植物乳杆菌为0.01-99％(w/w)，优选为0.05-90％(w/w)，进一步优选为1-10％(w/w)；
和/或，组合物中包含或者不包含填充剂/载体，组合物中的植物乳杆菌用量为0.5亿/g-500亿/g，进一步1亿/g-100亿/g，进一步10亿/g-50亿/g，进一步20亿/g-30亿/g。
6.根据权利要求1的所述组合物，其特征在于：水飞蓟提取物中的水飞蓟宾占水飞蓟提取物的量为20％以上，优选为30％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、95％以上、96％以上、97％以上、98％以上、99％以上或100％。
7.一种产品，包括权利要求1-6之一的所述组合物，所述产品剂型为注射液、口服液、片剂、硬胶囊、软胶囊、糖果、固体饮料、液体饮料、膏滋中的一种。
8.根据权利要求7所述的产品，其特征在于，还包括辅料；其中辅料包括：水、赋形剂、色素、甜味剂、pH调节剂、增稠剂、粘合剂、崩解剂、填充剂。
9.权利要求1-6之一的所述组合物、权利要求7、8所述的产品，在护肝类药品、保健食品、膳食补充剂和/或食品中的应用；
或/和在抗疲劳类的药品、保健食品、膳食补充剂和/或食品中的应用；
或/和在抗抑郁和抗焦虑的药品、保健食品、膳食补充剂和/或食品中的应用。
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