CN113679846A - 一种毛发再生剂及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于毛发再生技术领域，具体公开了一种毛发再生剂及其制备方法和应用，毛发再生剂包括钙离子螯合剂和医药上可接受的助剂；毛发再生剂的制备方法，包括以下步骤：将钙离子螯合剂溶解于助剂中，制得毛发再生剂；本发明通过钙离子螯合剂螯合毛囊干细胞细胞膜上的E‑cadherin的胞外钙离子，破坏毛囊干细胞与周围毛囊干细胞E‑cadherin之间的相互作用，从而使E‑cadherin解聚，解除E‑cadherin对毛囊干细胞的抑制，促进毛发再生。本发明促进毛发再生的钙离子螯合剂，显示出优异的促进毛发再生的效果，且性能稳定，不论性别和年龄均可使用，可有效改善脱发问题。
Description
技术领域
本发明属于毛发再生技术领域，具体涉及一种毛发再生剂及其制备方法和应用。
背景技术
近年来，随着生活节奏的加快，脱发率明显上升，并有逐渐年轻化趋势。因此，随着脱发这一亚健康问题越来越明显，对毛发脱落的预防和治疗的需求提高。
目前，针对脱发可供选择的预防和治疗手段极其有限，用于预防或治疗脱发和促进毛发生长的药物主要是米诺地尔(Minoxidil)、非那雄胺(Propecia)、螺内酯等，但该类药物的适应症较窄——主要用于雄性激素源性脱发，以及会出现明显的副作用而且不能适用于众多的脱发人群。此外，目前市场上也有以植物提取物作为原料生产的中药生发产品，该类产品由于提取物成分稳定性差，有效物和含量并不确定，作用机理不明确，药物渗透能力较差，生物利用度低，很难保证稳定疗效。
因此，亟需开发一种能够促进大部分脱发人群的毛发生长，且性能稳定的毛发再生产品。
发明内容
本发明提出一种毛发再生剂及其制备方法和应用，以解决现有技术中存在的一个或多个技术问题，至少提供一种有益的选择或创造条件。
本发明的发明构思：通过用钙离子螯合剂螯合毛囊干细胞细胞膜上的E-cadherin(E-钙黏蛋白)的胞外钙离子，破坏毛囊干细胞与周围毛囊干细胞E-cadherin之间的相互作用，从而使E-cadherin解聚，解除E-cadherin对毛囊干细胞的抑制，促进毛发再生。
为克服上述技术问题，本发明的第一方面提供了一种毛发再生剂。
具体的，一种毛发再生剂，所述毛发再生剂包括钙离子螯合剂和助剂，所述助剂为医药上可接受的助剂。
本发明采用的钙离子螯合剂可促进毛发再生的机理为：E-cadherin是钙依赖的细胞黏附蛋白，主要表达在上皮组织细胞膜上，为单次跨膜蛋白。钙黏蛋白在细胞外的肽链部分折叠形成5个或6个重复结构域(cadherin repeats)，钙离子(Ca2+)则结合在重复结构域之间，它们保证了细胞在组织中彼此结合，发挥它们的功能需要Ca2+。正因为如此，钙离子螯合剂能破坏钙依赖性的细胞黏附。E-cadherin在毛囊中的表达：大量表达在毛囊干细胞膜上，将毛囊干细胞中的E-cadherin敲除后，将促进毛囊干细胞增殖，而已知毛囊干细胞增殖则会促进毛囊进入生长期，进而促进毛发生长。
作为上述方案的进一步改进，所述钙离子螯合剂选自乙二胺四乙酸(EDTA)、乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)、BAPTA、乙二胺四乙酸的盐类、乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸的盐类、BAPTA的盐类中的至少一种，这些螯合剂均能与钙离子结合，通过螯合细胞膜上的E-cadherin的胞外钙离子，破坏细胞E-cadherin之间的相互作用，从而使E-cadherin解聚，促进毛发再生。
作为上述方案的进一步改进，所述钙离子螯合剂的浓度为100-500mmol/L。
作为上述方案的进一步改进，所述助剂包括透皮吸收促进剂和/或氢氧化钠。
具体的，透皮吸收促进剂，是能渗透进入皮肤、降低药物通过皮肤阻力而不损害皮肤的正常生理功能的物质，能促进钙离子螯合剂吸收。氢氧化钠主要用于溶解钙离子螯合剂，以使钙离子螯合剂更好地被皮肤吸收。
优选的，所述透皮吸收促进剂选自乙醇、异丙醇、甲醇、薄荷脑、薄荷酮、红没药醇、正壬烷、氮酮、萜烯、柠檬烯中的至少一种。
优选的，所述氢氧化钠的浓度为0.8-1.2mol/L。
作为上述方案的进一步改进，所述毛发再生剂的pH值为7.0-7.5。具体的，将pH值维持在7.0-7.5范围内，该pH值接近皮肤的pH值，可最大限度减少对皮肤的损伤。
本发明的第二方面提供了一种毛发再生剂的制备方法，包括以下步骤：将钙离子螯合剂溶解于助剂中，制得所述毛发再生剂。
优选的，所述毛发再生剂的制备方法，包括以下步骤：将钙离子螯合剂溶解于透皮吸收促进剂和/或氢氧化钠溶液中，并调节溶液的pH值和浓度，制得所述毛发再生剂。
本发明的第三方面提供了一种毛发再生剂的应用。
具体的，所述毛发再生剂在制备促进毛发再生的药物中的应用。
进一步的，所述药物的剂型选自片剂、胶囊剂、注射剂、乳霜、凝胶、贴片、喷雾剂、软膏剂、硬膏剂、洗剂、搽剂、糊剂、泥敷剂中的任一种。
本发明的上述技术方案相对于现有技术，至少具有如下技术效果或优点：
本发明通过钙离子螯合剂螯合毛囊干细胞细胞膜上的E-cadherin的胞外钙离子，破坏毛囊干细胞与周围毛囊干细胞E-cadherin之间的相互作用，从而使E-cadherin解聚，解除E-cadherin对毛囊干细胞的抑制，促进毛发再生。本发明促进毛发再生的钙离子螯合剂，显示出优异的促进毛发再生的效果，且性能稳定，不论性别和年龄均可使用，可有效改善脱发问题。
附图说明
图1为实施例1涂沫毛发再生剂5天后的结果图；
图2为实施例2皮内注射毛发再生剂16天后剃毛的结果图；
图3为实施例2皮内注射毛发再生剂剃毛后5天的结果图。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明进行具体描述，以便于所属技术领域的人员对本发明的理解，有必要在此特别指出的是，实施例只是用于对本发明做进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，所属领域技术人员，根据上述发明内容对本发明作出的非本质性的改进和调整，应仍属于本发明的保护范围，同时，下述所提及的原料未详细说明的，均为市售产品，未详细提及的工艺步骤或制备方法均为本领域技术人员所知晓的工艺步骤或制备方法。
下述实施例中的实验动物为C57小鼠，可购自于广东省医学实验动物中心；EGTA可购自Sigma-Aldrich公司(货号：E3889)；低生长因子Matrigel可购自Sigma-Aldrich公司(货号：E6909)；水溶性乳霜可选用mannings万宁水溶性身体乳(规格：450g)。
实施例1
本实施例的毛发再生剂，包括浓度钙离子螯合剂EGTA和助剂氢氧化钠溶液，其中：钙离子螯合剂EGTA的浓度为100mmol/L，氢氧化钠溶液的浓度为1mol/L，毛发再生剂的pH值为7.3。
本实施例采用EGTA作为钙离子螯合剂，制备毛发再生剂，并用涂抹的方式促进毛发生长，具体步骤如下：
先配制1mol/L的氢氧化钠溶液，再将浓度为100mmol/L的EGTA溶解于氢氧化钠溶液中，并调节溶液的pH值为7.3，制得毛发再生剂；
取20μL的毛发再生剂，与0.2g的水溶性乳霜混匀，制得水溶性乳霜混合的毛发再生剂，备用；
用0.1％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉7-8周龄的C57小鼠后，用剃毛器将小鼠背部的毛发剃去，然后用薇婷脱毛膏将背部的毛发脱去，并用清水擦干净；
使用湿棉签将水溶性乳霜混合的毛发再生剂涂抹在C57小鼠背部，并按摩30秒至其吸收，每日1次，连续涂抹5天；
对照组使用200μL的生理盐水和0.2g的水溶性乳霜混匀使用，使用方法同实验组；
检测C57小鼠背部毛发的生长情况，结果见图1，由图1可知，实验组显著促进了C57小鼠背部的毛发再生，而对照组则未见明显毛发生长。
实施例2
本实施例的毛发再生剂，包括浓度钙离子螯合剂EGTA和助剂氢氧化钠溶液，其中：钙离子螯合剂EGTA的浓度为100mmol/L，氢氧化钠溶液的浓度为1mol/L，毛发再生剂的pH值为7.3。
本实施例采用EGTA作为钙离子螯合剂，制备毛发再生剂，并用皮内注射的方式促进毛发生长，具体步骤如下：
先配制1mol/L的氢氧化钠溶液，再将浓度为100mmol/L的EGTA溶解于氢氧化钠溶液中，并调节溶液的pH值为7.3，制得毛发再生剂；
取25μL的毛发再生剂，低温下使用25μL低生长因子的Matrigel混匀，制得Matrigel负载的毛发再生剂，备用；
用0.1％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉7-8周龄的C57小鼠后，沿背部正中线，用湿棉签往两边分开毛发，暴露背部皮肤；
使用胰岛素注射器，将Matrigel负载的毛发再生剂分左右两点、每个点50μL用量，注射到C57小鼠上背部皮内，进针注射后稍微保持15秒，防止药物从皮内漏出；隔4天注射1次，总共注射3次。
检测C57小鼠背部毛发的生长情况，Matrigel负载的毛发再生剂皮内注射开始后的第16天，用剃毛器将C57小鼠背部的毛发剃去，然后用薇婷脱毛膏将背部的毛发脱去，用清水擦干净，C57小鼠的皮内注射部位较其他部位更快进入生长期，毛发再生剂显著促进了小鼠背部的毛发再生，结果见图2，剃毛后的第5天后，毛发生长浓密，结果见图3，而未注射毛发再生剂的皮肤则未见明显毛发生长。
实施例3
本实施例与实施例1相比不同之处在于：本实施例钙离子螯合剂EGTA的浓度为500mmol/L，其他实验步骤与参数与实施例1相同。
实施例4
本实施例与实施例1相比不同之处在于：本实施例钙离子螯合剂EGTA的浓度为300mmol/L，其他实验步骤与参数与实施例1相同。
实施例5
本实施例与实施例1相比不同之处在于：本实施例钙离子螯合剂EGTA的浓度为80mmol/L，其他实验步骤与参数与实施例1相同。
实施例6
本实施例与实施例1相比不同之处在于：本实施例钙离子螯合剂EGTA的浓度为520mmol/L，其他实验步骤与参数与实施例1相同。
对比例1
将实施例1的对照组作为对比例1，即采用生理盐水和0.2g的水溶性乳霜混匀使用，由图1可知，对比例1的生发效果远远不及实施例1。
对比例2
本对比例与实施例1相比不同之处在于：本实施例采用市售的生发剂，其主要生发成分为米诺地尔,其他实验步骤与参数与实施例1相同，对比例2的生发效果介于实施例1和对比例1之间，虽较优于对比例1，但与实施例1的生发效果还是存在较大差距。
实验结果
将实施例1和实施例3-6的不同浓度的EGTA溶液涂抹于小鼠背部，观察并记录不同浓度的钙离子螯合剂EGTA对毛发再生的时间，以可明显看出生长的毛发为准，其实验结果如表1所示。
表1：涂沫不同浓度的EGTA溶液毛发再生时间对比表
| 样品 | EGTA溶液浓度(mmol/L) | 毛发再生时间(天) |
| 实施例1 | 100 | 6 |
| 实施例3 | 300 | 5 |
| 实施例4 | 500 | 6 |
| 实施例5 | 80 | 10 |
| 实施例6 | 520 | 8 |
显然，上述实施例仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之中。
Claims (10)
1.一种毛发再生剂，其特征在于，所述毛发再生剂包括钙离子螯合剂和助剂。
2.根据权利要求1所述的毛发再生剂，其特征在于，所述钙离子螯合剂选自乙二胺四乙酸、乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸、BAPTA、乙二胺四乙酸的盐类、乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸的盐类、BAPTA的盐类中的至少一种。
3.根据权利要求1或2所述的毛发再生剂，其特征在于，所述钙离子螯合剂的浓度为100-500mmol/L。
4.根据权利要求1所述的毛发再生剂，其特征在于，所述助剂包括透皮吸收促进剂和/或氢氧化钠。
5.根据权利要求4所述的毛发再生剂，其特征在于，所述透皮吸收促进剂选自乙醇、异丙醇、甲醇、薄荷脑、薄荷酮、红没药醇、正壬烷、氮酮、萜烯、柠檬烯中的至少一种。
6.根据权利要求4所述的毛发再生剂，其特征在于，所述氢氧化钠的浓度为0.8-1.2mol/L。
7.根据权利要求1所述的毛发再生剂，其特征在于，所述毛发再生剂的pH值为7.0-7.5。
8.权利要求1至7任意一项所述的毛发再生剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将钙离子螯合剂溶解于助剂中，制得所述毛发再生剂。
9.权利要求1至7任意一项所述的毛发再生剂在制备促进毛发再生的药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型选自片剂、胶囊剂、注射剂、乳霜、凝胶、贴片、喷雾剂、软膏剂、硬膏剂、洗剂、搽剂、糊剂、泥敷剂中的任一种。
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